一種分散固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)水基食品模擬物中鄰苯二甲酸酯的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種分散固相萃取?氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)水基食品模擬物中鄰苯二甲酸酯的方法，利用分散固相萃取?反萃取過(guò)程進(jìn)行前處理，用石墨烯作為吸附劑來(lái)吸附待測(cè)鄰苯二甲酸酯，再利用反萃取劑進(jìn)行洗脫，結(jié)合氣相色譜–質(zhì)譜聯(lián)用的檢測(cè)手段，來(lái)定性定量分析水基食品模擬物中鄰苯二甲酸二甲酯，制備的氧化石墨烯經(jīng)過(guò)CO2活化后，得到了比表面和孔體積分別為2752m2g?1和2.06cm3g?1，提高了富集效率，再利用反萃取劑進(jìn)行洗脫，不需要多次萃取，樣品用量少，溶劑消耗量少，穩(wěn)定可靠，采用氣相色譜–質(zhì)譜聯(lián)用的檢測(cè)手段，操作簡(jiǎn)便、靈敏度高，回收率在98.2％到105.7％之間，樣品測(cè)試結(jié)果的平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.2％到4.7％之間。
【專利說(shuō)明】
一種分散固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)水基食品模擬物中鄰苯二 甲酸酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種富集和檢測(cè)鄰苯二甲酸酯的方法，更具體的說(shuō)是涉及一種利用活 化石墨烯作為吸附劑來(lái)吸附待測(cè)鄰苯二甲酸酯，再利用反萃取劑進(jìn)行洗脫，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的檢測(cè)手段來(lái)定性定量分析水基食品模擬物中鄰苯二甲酸酯的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 鄰苯二甲酸酯是一類重要的環(huán)境激素類物質(zhì)，可以影響人類的內(nèi)分泌系統(tǒng)，導(dǎo)致 生殖、發(fā)育和行為異常。鄰苯二甲酸酯添加在聚合物中后，與聚合鏈的二級(jí)分子間產(chǎn)生相互 作用，進(jìn)而提高聚合物材料的彈性，并增加聚合物材料的延展性和柔軟度，是一種比較理想 的增塑劑，因而被廣泛地應(yīng)用于塑料制品生產(chǎn)中。大多數(shù)食品均采用塑料制品進(jìn)行內(nèi)包裝 或內(nèi)襯，由于鄰苯二甲酸酯與聚合鏈的相互作用是物理鍵而不是化合鍵，鄰苯二甲酸酯類 化合物可能從塑料包裝袋中向食品中迀移，食品在塑料包裝材料中儲(chǔ)存的時(shí)間越長(zhǎng)，或用 于包裝食品的塑料材料中增塑劑含量越高，都會(huì)加大增塑劑向食品中迀移的量，即對(duì)食品 的污染程度越大。國(guó)際上對(duì)鄰苯二甲酸酯的禁用呼聲越來(lái)越高，因此能夠?qū)λ芰习b的產(chǎn) 品中含有的增塑劑進(jìn)行準(zhǔn)確的定性和定量分析顯得至關(guān)重要。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)水基食品模擬物中鄰苯二甲酸酯的測(cè)定的樣品前處理過(guò)程要用到 大量的有機(jī)溶劑，在使用有機(jī)溶劑過(guò)程中會(huì)伴隨著溶劑揮發(fā)、交叉污染等問(wèn)題，且處理過(guò)程 復(fù)雜耗時(shí)長(zhǎng)，在長(zhǎng)時(shí)間的前處理過(guò)程中很容易引入空氣、溶劑和周圍環(huán)境中的雜質(zhì)，對(duì)樣品 造成污染，影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
[0004] 石墨烯是由碳原子以sP2雜化組成的單層原子厚度的二維材料，厚度只有 0.335nm，具有長(zhǎng)程π鍵共輒結(jié)構(gòu)，理論比表面積高達(dá)2600m 2/g，這使得它們具有較強(qiáng)的吸附 能力，是較理想的富集材料。通過(guò)C02活化得到的石墨烯材料，能夠在材料中引入微孔，使石 墨烯具有多級(jí)的孔道結(jié)構(gòu)，可降低石墨烯的團(tuán)聚，保持高的比表面積，確保石墨烯與待吸附 物質(zhì)的充分接觸，改善其對(duì)很多化學(xué)物質(zhì)的富集能力。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種富集和檢測(cè)水基食品模擬 物中鄰苯二甲酸酯的方法，利用石墨烯作為吸附劑來(lái)吸附待測(cè)鄰苯二甲酸酯，再利用反萃 取劑進(jìn)行洗脫，結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的檢測(cè)手段，來(lái)定性定量分析制品中鄰苯二甲酸 酯，簡(jiǎn)便高效、選擇性好、靈敏度高、溶劑消耗量少。
[0006] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案:一種分散固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè) 水基食品模擬物中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征在于:包括如下步驟：
[0007] 1)氧化石墨烯的制備：以氧化石墨作為原料，濃硫酸作為溶劑，氧化石墨和濃硫酸 的質(zhì)量比：1:40-1:50，在0-10°C下，攪拌速度80-200r/min，攪拌10-20min后，分批加入高錳 酸鉀，氧化石墨和高錳酸鉀的質(zhì)量比：1:3-1:4，在0-10°C下，反應(yīng)1.5-3h，然后升溫至20-35 。(：，反應(yīng)1.5-3h，緩慢加入去離子水，氧化石墨和去離子水質(zhì)量比1:40-1:60，反應(yīng)1-2h，加 熱到60-80 °C，反應(yīng)l_2h，冷卻至低于60°C，緩慢加入30%的雙氧水，氧化石墨和雙氧水質(zhì)量 比1:8-1:12，靜置24-32h，除去上層清液，用5 % -10 %鹽酸和去離子水依次洗滌，直至PH為 7，最后將產(chǎn)物在干燥箱中干燥；
[0008] 2)氧化石墨烯的活化:稱取干燥好的氧化石墨烯，加入過(guò)氧化氫，混勻后置于管式 爐中，通入60-80mL min-1的N2 30-60min;將爐子以5-20°Cmin-1的升溫速率升到750-950 °C ;然后將氣體換成C02,流量10-60mL min-S保溫2-5h;將氣體換成N2,流量60-80mL min-1，將管式爐冷卻至室溫；
[0009] 采用物理吸附儀測(cè)定，在77K下對(duì)得到的石墨烯材料進(jìn)行N2吸脫附測(cè)試，計(jì)算得到 比表面和孔體積分別為l〇85m 2g<和3.2cm3g4，通過(guò)C02活化得到的石墨烯材料，能夠在材料 中引入微孔，使石墨烯具有多級(jí)的孔道結(jié)構(gòu)，可降低石墨烯的團(tuán)聚，保持高的比表面積，確 保石墨烯與待吸附物質(zhì)的充分接觸，改善其對(duì)鄰苯二甲酸酯的富集能力。層片間過(guò)氧化氫 分解產(chǎn)生的氣體膨脹作用使得氧化石墨烯孔道增多，孔徑增大。
[0010] 3)待測(cè)樣品提取:將10-20mL乙酸-乙酸鈉緩沖液加到離心管中，加入20-50mg石墨 烯，放入超聲儀中，在50°C超聲l_5min，量取10-50mL樣品至離心管中，加入0.01-0.05mL甲 醇，在40-60°C超聲30-60min，然后在7000-9000rpm條件下離心5-10min，棄去上層液體，向 下層沉積相中加入500-900yL反萃劑，再次放置40-60°C超聲水浴中超聲30-60min，在7000-9000rpm條件下離心5-10min后，用微型注射器將上層富集相溶液取出，得到待測(cè)樣品；
[0011] 4)標(biāo)準(zhǔn)溶液制備:取鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)品，經(jīng)逐級(jí)稀釋后，配制成多個(gè)濃度梯度的 鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，每種濃度鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入等量苯甲酸芐酯內(nèi)標(biāo)物；
[0012] 5)氣相色譜-質(zhì)譜分析:利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液和含待測(cè)樣品的殘 留物進(jìn)行檢測(cè)分析，氣相色譜條件:色譜柱:采用DB-5MS色譜柱;規(guī)格:30m X 0.25mm X 0.25μ m;載氣：高純氦，純度彡99.999% ;進(jìn)樣口溫度:250°C ;進(jìn)樣量：lyL;分流進(jìn)樣，分流比：20: 1;恒流模式，流速:1. OmL/min;
[0013]質(zhì)譜條件：電離方式：電子轟擊源(EI);電離能量:70eV;傳輸線溫度:280°C ;離子 源溫度:230°C ;四極桿溫度：150°C ;采集類型：選擇離子掃描+全掃描（SIM+Scan);溶劑延 遲：lOmin;升溫程序:初始溫度80 °C，保持lmin，以20°C/min的速率至180 °C，保持6min，再以 5°(：/11^11的速率至300°(：，保持51^11;
[0014] 6)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果計(jì)算。
[0015] 作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述步驟1中分10-20批加入高錳酸鉀。
[0016] 作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述步驟2中氧化石墨烯:過(guò)氧化氫質(zhì)量比為10:1-6: 1〇
[0017] 作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述步驟3中乙酸-乙酸鈉緩沖溶液的PH=3.6-4.6。
[0018] 作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述步驟3中反萃劑是乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷中 的一種。
[0019] 作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)品包括鄰苯二甲酸二（2-乙基 己基酯）（DEHP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸丁基卞基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二異 壬酯(DINP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DN0P)以及鄰苯二甲酸二異癸酯(DIDP)。
[0020] 作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度梯度具體為:5yg/ mL、1 Olig/mL、20iig/mL、30iig/mL、40iig/mL、50iig/mL、60iig/mL。
[0021]作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述步驟4中質(zhì)譜條件還包括選用如下的定性離子和 定量離子：
[0024]本發(fā)明利用分散固相萃取-反萃取過(guò)程對(duì)食品包裝材料中的鄰苯二甲酸酯進(jìn)行前 處理，用石墨烯作為吸附劑來(lái)吸附待測(cè)鄰苯二甲酸酯，制備的氧化石墨烯烴過(guò)C02活化后， 得到了比表面和孔體積分別為l〇85m 2g<和3.2cm3g4的碳材料，具有多孔性、高親油性、高比 表面積等優(yōu)點(diǎn)，提高了富集效率，再利用反萃取劑進(jìn)行洗脫，不需要多次萃取，樣品用量少， 溶劑消耗量少，穩(wěn)定可靠，對(duì)鄰苯二甲酸酯的選擇性好，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的檢測(cè)手 段，操作簡(jiǎn)便、靈敏度高，使用的色譜條件使鄰苯二甲酸二（2-乙基己基酯）（DEHP)、鄰苯二 甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸丁基卞基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)、鄰苯二甲酸 二正辛酯(DN0P)和鄰苯二甲酸二異癸酯(DIDP)的色譜峰與雜質(zhì)色譜峰分離效果較好，回收 率在98.2 %到105.7 %之間，樣品測(cè)試結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.2 %到4.7 %之間。
【附圖說(shuō)明】
[0025] 圖1為石墨烯A的SEM圖；
[0026] 圖2為石墨烯B的SEM圖；
[0027] 圖3為石墨烯A和B的Raman光譜圖；
[0028]圖4為混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0029]下面給出以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳述。
[0030] 1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
[0031] 分別準(zhǔn)確稱取鄰苯二甲酸二（2-乙基己基酯）（DEHP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰 苯二甲酸丁基卞基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DN0P)、鄰 苯二甲酸二異癸酯（DIDP)各500mg，用正己燒稀釋定容到100ml容量瓶中，配成5mg/ml的混 合標(biāo)準(zhǔn)溶液；分別量取0 · 0lmL、0 · 02mL、0 · 04mL、0 · 06mL、0 · 08mL、0 · lmL、0 · 12mL的混合標(biāo)準(zhǔn) 溶液到lOmL的容量瓶中，分別加入10yL lOOmg/mL的苯甲酸芐酯溶液，用正己烷定容，得到5 yg/mL、10yg/mL、20yg/mL、30yg/mL、40yg/mL、50yg/mL、60yg/mL 濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
[0032] 2)氣相色譜-質(zhì)譜分析條件:氣相色譜條件:色譜柱:采用DB-5MS色譜柱;規(guī)格:30m 父0.25!11111\0.25以111;載氣：高純氦，純度彡99.999%;進(jìn)樣口溫度 ：250°(：;進(jìn)樣量：14^分流 進(jìn)樣，惰性分流襯管，分流比：20:1;恒流模式，流速：1 .OmL/min;質(zhì)譜條件：電離方式：電子 轟擊源(EI);電離能量:70eV;傳輸線溫度:280°C ;離子源溫度:230°C ;四極桿溫度：150 °C ; 采集類型:選擇離子掃描+全掃描(S頂+Scan);掃描范圍100-500m/z;溶劑延遲：lOmin;升溫 程序:初始溫度80 °C，保持0.5min，以30 °C/min的速率至160 °C，保持3min，再以5 °C /min的速 率至300°C，保持5min。
[0033]表1選用的定性離子和定量離子
[0035] 3)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：取濃度分別為 5yg/mL、1 Oyg/mL、20yg/mL、30yg/mL、40yg/mL、50μ g/mL、60yg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液在上述氣相色譜-質(zhì)譜分析條件下進(jìn)樣檢測(cè)并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 [0036] 表2標(biāo)準(zhǔn)曲線檢出限和定量限
[0038] 4)按照GB/T23296.1-2009制備水基食品模擬物作為待測(cè)樣品。
[0039] 5)活化石墨烯的制備
[0040] a)氧化石墨烯A的制備：
[00411 將50mL濃硫酸加入250mL三頸燒瓶，將三頸燒瓶置于冰水浴中，在溫度達(dá)到5°C后， 將2g氧化石墨緩慢加入到濃硫酸中，在200r/min下，攪拌20min;然后將6g高錳酸鉀分10批 加入，在10 °C下，反應(yīng)3h;將三頸燒瓶轉(zhuǎn)移到35 °C油浴中反應(yīng)3h;緩慢向燒瓶中加入1 OOmL去 離子水，繼續(xù)攪拌2h;然后加熱到80°C，攪拌反應(yīng)2h，待冷卻至40°C，緩慢加入20mL30 %的雙 氧水;將其靜置24h，除去上層清液，用5 %鹽酸和去離子水依次洗滌，直至無(wú)PH為7,最后將 產(chǎn)物在60°C干燥箱中干燥，得到干燥氧化石墨烯A。
[0042]氧化石墨烯A的活化:稱取0.2g干燥好的氧化石墨烯，0.02g過(guò)氧化氫，混合均勻后 置于管式爐中，通入70mL mirT1的N2 40min;將爐子以KTCmirT1的升溫速率升到800°C ;然后 將氣體換成C02，流量30mL mirT1，保溫3h;將氣體換成N2，流量70mL min-1，將管式爐冷卻至 室溫，得到活化石墨烯A。
[0043] b)氧化石墨烯B的制備：
[0044] 將25mL濃硫酸加入250mL三頸燒瓶，將三頸燒瓶置于冰水浴中，在溫度達(dá)到1°C后， 將lg氧化石墨緩慢加入到濃硫酸中，在l〇〇r/min下，攪拌lOmin;然后將3.5g高猛酸鉀分15 批加入，在1°C下，反應(yīng)2h;將三頸燒瓶轉(zhuǎn)移到35 °C油浴中反應(yīng)1.5h ;緩慢向燒瓶中加入 45mL去離子水，繼續(xù)攪拌1.5h ;然后加熱到60°C，攪拌反應(yīng)lh，待冷卻至30°C，緩慢加入 10mL30 %的雙氧水;將其靜置28h，除去上層清液，用8 %鹽酸和去離子水依次洗滌，直至無(wú) PH為7，最后將產(chǎn)物在60°C干燥箱中干燥，得到干燥氧化石墨烯B。
[0045] 氧化石墨烯B的活化:稱取0.5g干燥好的氧化石墨烯，，0.06g過(guò)氧化氫，混合均勻 后置于管式爐中，通入60mL mirT1的N2 30min;將爐子以δΓπ?ιΓ1的升溫速率升到750°C;然 后將氣體換成C02，流量10mL mirT1，保溫5h;將氣體換成N2，流量60mL min-1，將管式爐冷卻 至室溫，得到活化石墨烯B。
[0046] 實(shí)施例1
[0047] 分別量取10mL PH = 3.6乙酸-乙酸鈉緩沖液加到離心管中，加入20mg石墨烯A，放 入超聲儀中，在50 °C超聲lmin，量取30mL樣品至離心管中，分別添加20、40、60yL 5mg/ml的 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液至離心管中，加入〇. 〇2mL甲醇，在40°C超聲30min，然后在7000rpm條件下離心 5min，棄去上層液體，向下層沉積相中加入500yL正己烷，再次放置40°C超聲水浴中超聲 30min，在7000rpm條件下離心5min后，用微型注射器將上層富集相溶液取出，得到待測(cè)樣 品，上氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行檢測(cè)。
[0048] 實(shí)施例2
[0049] 分別量取15mL PH = 3.6乙酸-乙酸鈉緩沖液加到離心管中，加入30mg石墨烯B，放 入超聲儀中，在50 °C超聲2min，量取30mL樣品至離心管中，分別添加20、40、60yL 5mg/ml的 混標(biāo)儲(chǔ)備液至離心管中，加入0.03mL甲醇，在45°C超聲35min，然后在7000rpm條件下離心 6min，棄去上層液體，向下層沉積相中加入700yL正己烷，再次放置40°C超聲水浴中超聲 50min，在7000rpm條件下離心5min后，用微型注射器將上層富集相溶液取出，得到待測(cè)樣 品，上氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行檢測(cè)。
[0050] 表3三種加標(biāo)樣品的回收率和RSD
[0052] 實(shí)施例3
[0053] 將10mL PH = 3.6乙酸-乙酸鈉緩沖液加到離心管中，加入20mg石墨烯A，放入超聲 儀中，在50°C超聲lmin，量取樣品a 10mL樣品至離心管中，加入0.02mL甲醇，在40°C超聲 30min，然后在7000rpm條件下離心5min，棄去上層液體，向下層沉積相中加入500yL乙酸乙 酯，再次放置40°C超聲水浴中超聲30min，在7000rpm條件下離心5min后，用微型注射器將上 層富集相溶液取出，得到待測(cè)樣品。
[0054] 實(shí)施例4
[0055]將15mL PH = 3.6乙酸-乙酸鈉緩沖液加到離心管中，加入30mg石墨烯A，放入超聲 儀中，在50°C超聲3min，稱取樣品b 20mL至離心管中，加入0.03mL甲醇，在50°C超聲45min， 然后在8000rpm條件下離心7min，棄去上層液體，向下層沉積相中加入600yL乙酸乙酯，再次 放置45°C超聲水浴中超聲50min，在7500rpm條件下離心7min后，用微型注射器將上層富集 相溶液取出，得到待測(cè)樣品。
[0056] 實(shí)施例5
[0057]將20mL PH=4.6乙酸-乙酸鈉緩沖液加到離心管中，加入50mg石墨烯A，放入超聲 儀中，在50°C超聲4min，稱取樣品c 30mL至離心管中，加入O.OlmL甲醇，在60°C超聲60min， 然后在9000rpm條件下離心10min，棄去上層液體，向下層沉積相中加入800yL乙酸乙酯，再 次放置50°C超聲水浴中超聲50min，在9000rpm條件下離心10min后，用微型注射器將上層富 集相溶液取出，得到待測(cè)樣品。
[0058] 實(shí)施例6
[0059]將12mL PH = 4.6乙酸-乙酸鈉緩沖液加到離心管中，加入25mg石墨烯B，放入超聲 儀中，在50°C超聲2min，稱取樣品d 40mL至離心管中，加入0.05mL甲醇，在40°C超聲35min， 然后在7000rpm條件下離心5min，棄去上層液體，向下層沉積相中加入600yL二氯甲燒，再次 放置40°C超聲水浴中超聲40min，在7000rpm條件下離心6min后，用微型注射器將上層富集 相溶液取出，得到待測(cè)樣品。
[0060] 實(shí)施例7
[00611將18mL PH = 4.6乙酸-乙酸鈉緩沖液加到離心管中，加入42mg石墨烯B，放入超聲 儀中，在50°C超聲4min，稱取樣品e 45mL至離心管中，加入0.04mL甲醇，在55°C超聲50min， 然后在8000rpm條件下離心9min，棄去上層液體，向下層沉積相中加入600yL二氯甲燒，再次 放置50°C超聲水浴中超聲45min，在9000rpm條件下離心10min后，用微型注射器將上層富集 相溶液取出，得到待測(cè)樣品。
[0062] 實(shí)施例8
[0063]將13mL PH = 4.6乙酸-乙酸鈉緩沖液加到離心管中，加入24mg石墨烯B，放入超聲 儀中，在50°C超聲2min，稱取樣品f 50mL至離心管中，加入0.04mL甲醇，在40°C超聲30min， 然后在7000rpm條件下離心5min，棄去上層液體，向下層沉積相中加入800yL二氯甲燒，再 次放置60°C超聲水浴中超聲50min，在9000rpm條件下離心10min后，用微型注射器將上層富 集相溶液取出，得到待測(cè)樣品。
[0064]表4不同實(shí)施例的檢測(cè)結(jié)果
[0065]
[0066] 注:ND為未檢出相應(yīng)鄰苯二甲酸酯類化合物的含義。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種分散固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)水基食品模擬物中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征 在于:包括如下步驟： 1) 氧化石墨烯的制備：以氧化石墨作為原料，濃硫酸作為溶劑，氧化石墨和濃硫酸的質(zhì) 量比：1:40-1: 50，在0-10 °C下，攪拌速度80-200r/min，攪拌10-20min后，分批加入高錳酸 鉀，氧化石墨和高錳酸鉀的質(zhì)量比：1: 3-1:4，在0-10°C下，反應(yīng)1.5-3h，然后升溫至20-35 。(：，反應(yīng)1.5-3h，加入去離子水，氧化石墨和去離子水質(zhì)量比1:40-1:60，反應(yīng)1-2h，加熱到 60-80°C，反應(yīng)l_2h，冷卻至低于60°C，加入30 %的雙氧水，氧化石墨和雙氧水質(zhì)量比1:8-1: 12，靜置24-36h，除去上層清液，用5 % -10 %鹽酸和去離子水依次洗滌，直至PH為7，最后將 產(chǎn)物在干燥箱中干燥； 2) 氧化石墨烯的活化：稱取干燥好的氧化石墨烯，加入過(guò)氧化氫，混勻后置于管式爐 中，通入60-801^11^11-1的吣30-601^11 ;將管式爐以5-20°(：1^11-1的升溫速率升到750-950°(：; 然后將氣體換成⑶2，流量10_60mL mirr1，保溫2-5h;將氣體換成N2，流量60-80mL mirr1，將 管式爐冷卻至室溫； 3) 待測(cè)樣品提取:將10_20mL乙酸-乙酸鈉緩沖液加到離心管中，加入20-50mg石墨烯， 放入超聲儀中，在50°C超聲l_5min，量取10-50mL樣品至離心管中，加入0.01-0.05mL甲醇， 在40-60°〇超聲30-60111；[11，然后在7000-9000印1]1條件下離心5-10111；[11，棄去上層液體，向下層 沉積相中加入500-900yL反萃劑，再次放置40-60°C超聲水浴中超聲30-60min，在7000-9000rpm條件下離心5-10min后，用微型注射器將上層富集相溶液取出，得到待測(cè)樣品； 4) 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備:取鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)品，經(jīng)逐級(jí)稀釋后，配制成多個(gè)濃度梯度的鄰苯 二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，每種濃度鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入等量苯甲酸芐酯內(nèi)標(biāo)物； 5) 氣相色譜-質(zhì)譜分析:利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液和含待測(cè)樣品的殘留物 進(jìn)行檢測(cè)分析，氣相色譜條件:色譜柱:采用DB-5MS色譜柱;規(guī)格:30m X 0.25mm X 0.25μπι;載 氣：高純氦，純度彡99.999% ;進(jìn)樣口溫度:250°C ;進(jìn)樣量：IyL;分流進(jìn)樣，分流比：20:1;恒 流模式，流速:I .OmL/min;質(zhì)譜條件:電離方式：電子轟擊源(EI);電離能量:70eV;傳輸線溫 度：280°C ;離子源溫度:230°C ;四極桿溫度：150°C ;采集類型：選擇離子掃描+全掃描（SM+ Scan);溶劑延遲：IOmin;升溫程序：初始溫度80°C，保持Imin，以20°C/min的速率至180°C， 保持6min，再以5°C/min的速率至300°C，保持5min; 6) 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果計(jì)算。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分散固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)水基食品模擬物中鄰苯二 甲酸酯的方法，其特征在于:所述步驟1中分10-20批加入高錳酸鉀。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種分散固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)水基食品模擬物中鄰苯二 甲酸酯的方法，其特征在于:所述步驟2中氧化石墨烯:過(guò)氧化氫質(zhì)量比為10:1-6:1。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種分散固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)水基食品模擬物中鄰苯二 甲酸酯的方法，其特征在于:所述步驟3中所述乙酸-乙酸鈉緩沖溶液的PH=3.6-4.6。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種分散固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)水基食品模擬物中鄰苯二 甲酸酯的方法，其特征在于:所述步驟3中反萃劑是乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷中的至少一 種。6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的一種分散固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)水基食品模擬物 中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征在于:所述鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)品包括鄰苯二甲酸二(2-乙基 己基酯）（DEHP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸丁基卞基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二異 壬酯(DINP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DNOP)以及鄰苯二甲酸二異癸酯(DIDP)。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種分散固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)水基食品模擬物中鄰苯二 甲酸酯的方法，其特征在于:所述鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度梯度具體為:5yg/mL、IOyg/ mL、20iig/mL、30iig/mL、40iig/mL、50iig/mL、60iig/mL。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種分散固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)水基食品模擬物中鄰苯二 甲酸酯的方法，其特征在于:所述步驟4中質(zhì)譜條件還包括選用如下的定性離子和定量離 子：
【文檔編號(hào)】G01N30/88GK106018641SQ201610439058
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年6月17日
【發(fā)明人】曹丹, 黃煒, 吳麗燕, 胡剛翔, 鄭慧丹, 曾永蘭, 應(yīng)慧, 陳珊
【申請(qǐng)人】中華人民共和國(guó)金華出入境檢驗(yàn)檢疫局