一種測定脂蛋白磷脂酶a2的試劑盒及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒及其制備方法，包括彼此獨(dú)立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，試劑R1：緩沖液、無機(jī)鹽離子、加速劑、螯合劑、防腐劑，試劑R2：緩沖液、穩(wěn)定劑、防腐劑、乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體，制備方法為：按照組分含量配制好試劑；將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合，使其充分反應(yīng)；用全自動生化分析儀測定反應(yīng)后的吸光度差值；根據(jù)吸光度變化值計算出樣本中的脂蛋白磷脂酶A2的濃度。本發(fā)明具有測定準(zhǔn)確度高等優(yōu)點。
【專利說明】
一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)及生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體來說是一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試 劑盒及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 脂蛋白磷脂酶A2(Lp_PLA2)是磷脂酶超家族中的亞型之一，也被稱為是血小板活 化因子乙酰水解酶，由血管內(nèi)膜中的巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞和肥大細(xì)胞分泌，動脈粥樣硬化斑塊 中Lp-PLA2表達(dá)上調(diào)，并且在易損斑塊纖維帽的巨噬細(xì)胞中強(qiáng)表達(dá)，Lp-PLA2可水解氧化低 密度脂蛋白o(hù)x-LDL中的氧化磷脂，生成脂類促炎物質(zhì)，如溶血卵磷脂和氧化游離脂肪酸，進(jìn) 而產(chǎn)生多種致動脈粥樣硬化作用，包括內(nèi)皮細(xì)胞死亡和內(nèi)皮功能異常，刺激粘附因子和細(xì) 胞因子的產(chǎn)生，這些物質(zhì)可通過趨化炎癥細(xì)胞進(jìn)一步產(chǎn)生自我強(qiáng)化的循環(huán)，生成更多促炎 物質(zhì)。 釋放到血液循環(huán)中的脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)主要與富含載脂蛋白（Apo)B的脂蛋白 結(jié)合，低密度脂蛋白（LDL)占80%，其余與高密度脂蛋白（HDL)、脂蛋白a[Lp(a)]和極低密度 脂蛋白（VLDL)結(jié)合，在動脈粥樣硬化性疾病患者中，脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平與LDL 亞組分水平呈正相關(guān)。
[0003] 目前，檢測脂蛋白磷脂酶A2(Lp_PLA2)主要采取酶聯(lián)免疫吸附法，但其操作復(fù)雜， 耗時長，且對操作人員有較高專業(yè)技術(shù)要求，且該檢測法無法定量，受外界影響的因素較 多，而且測定準(zhǔn)確度低，需要作出進(jìn)一步的改進(jìn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是為了克服現(xiàn)有技術(shù)操作復(fù)雜、測定準(zhǔn)確度低的缺 陷，而提供一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒及其制備方法。
[0005] 本發(fā)明解決上述技術(shù)問題提供的技術(shù)方案是:本發(fā)明公開了一種測定脂蛋白磷脂 酶A2的試劑盒，包括彼此獨(dú)立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 20~180 mmol/L 無機(jī)鹽離子 20CK400 mmol/L 加速劑 5~25 g/L 整合劑 15~45 mmol/L 防腐劑 0.2~0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 50~150 mmol/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體 1~9 g/L 其溶劑為純化水。
[0006] 作為優(yōu)選，本發(fā)明公開了一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒，包括彼此獨(dú)立的試 劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 100mmol/L 無機(jī)鹽離子 300 mmol/L 加速劑 10 g/L 整合劑 25 mmol/L 防腐劑 0.6 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 100 mmol/L 穩(wěn)定劑 11 g/L 防腐劑 0.7 g/L 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體 5 g/L 其溶劑為純化水。
[0007] 作為優(yōu)選，所述的試劑R1中，所述的緩沖液采用Tris緩沖液、MES緩沖液、磷酸鹽緩 沖液、M0PS0緩沖液中的一種或多種的組合，所述的無機(jī)鹽離子采用氯化鉀、硫酸鉀、氯化鈉 中的一種或多種的組合，所述的加速劑采用聚乙二醇-2000、聚乙二醇-8000、聚乙烯吡咯烷 酮中的一種或多種的組合，所述的螯合劑采用EDTA ? 2Na、二乙基三胺五乙酸、乙二醇雙四 乙酸中的一種或多種的組合，所述的防腐劑采用山梨酸鈉、苯甲酸鈉、疊氮鈉、硫柳汞、苯酚 中的一種或多種的組合。
[0008] 作為優(yōu)選，所述的試劑R2中，所述的緩沖液采用Tris緩沖液、MES緩沖液、磷酸鹽緩 沖液、M0PS0緩沖液中的一種或多種的組合，所述的穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白，所述的防腐劑 采用山梨酸鈉、苯甲酸鈉、疊氮鈉、硫柳汞、苯酚中的一種或多種的組合。
[0009] 作為優(yōu)選，所述的試劑R2中，所述的乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體的制備方法 為:先用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為80-500nm的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙 烯微球的質(zhì)量濃度為1%_5%的溶液，然后每毫升溶液中加入1.0 mg的1-乙基-3-(3-二甲基 胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，在20°C_37°C的條件下反應(yīng)1小時，然后使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去上清，將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀釋，然后使 用超聲分散儀進(jìn)行超聲分散，然后使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去 上清，再將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀釋，直至聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1%-4%，使用超聲分散儀進(jìn)行分散，然后邊分散邊加入抗脂蛋白磷脂酶A2抗體，直至聚苯乙烯微 球的質(zhì)量濃度為〇 . 5%-2.0%時為止，最后加入牛血清白蛋白，直至牛血清白蛋白的濃度為 20g/L時為止，4°C封閉16-24小時，即可制備得到乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體。
[0010] 作為優(yōu)選，本發(fā)明還公開了上述測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒的制備方法和使用 方法，包括以下步驟： (a)按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: 緩沖液 20~180 mmol/L 無機(jī)鹽離子 200~400 mmol/L 加速劑 5~25 g/L 整合劑 15~45 mmol/L 防腐劑 0.2~0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 50~150 mmol/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體 1~9 g/L 其溶劑為純化水； (b) 將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合，使其充分反應(yīng)； (c) 用全自動生化分析儀測定反應(yīng)后的吸光度差值； (d) 根據(jù)吸光度變化值計算出樣本中的脂蛋白磷脂酶A2的濃度。
[0011]作為優(yōu)選，步驟(b)中，所述的試劑R1和試劑R2的體積比為4:1; 作為優(yōu)選，步驟(b)中，所述的待測樣本與試劑R1和試劑R2的總體積的體積比在1:10到 1:150之間。
[0012]本發(fā)明的檢測原理是:本發(fā)明利用的是抗原抗體反應(yīng)的原理，脂蛋白磷脂酶A2與 超敏化的抗脂蛋白磷脂酶A2抗體膠乳顆粒試劑反應(yīng)，出現(xiàn)凝集反應(yīng)，在特定的波長下檢測 其吸光度，其變化程度與樣本中的Lp-PLA2含量成正比。
式中：A At以空白管吸光度作對照的樣品管吸光度值 A As以空白管吸光度作對照的校準(zhǔn)管吸光度值 Cs校準(zhǔn)液中Lp-PLA2的濃度。
[0014] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益優(yōu)點：本發(fā)明在試劑R1中添加了金屬離子 螯合劑，在樣本和試劑R1反應(yīng)的過程中，去除了樣本中金屬離子的干擾，因此測定準(zhǔn)確度得 到大大的提高，且在加速劑聚乙二醇作用下，可快速發(fā)生反應(yīng)，檢測比較方便，靈敏度比較 高，而且無放射性污染。
【具體實施方式】
[0015] 以下結(jié)合具體實施例進(jìn)一步說明，但本發(fā)明并不僅限于這些實施例。
[0016] 實施例1 本發(fā)明的試劑盒包括彼此獨(dú)立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，其中 試劑R1: MES 緩沖液 100mmol/L 氯化鉀 300 mmol/L 聚乙二醇-2000 10 g/L EDTA ? 2Na 25 mmol/L 山梨酸鈉 0.6 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: MES緩沖液 100 mmol/L 牛血清白蛋白 11 g/L 疊氮鈉 0.7 g/L 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體 5 g/L 其溶劑為純化水。
[0017] 實施例2 本發(fā)明的試劑盒包括彼此獨(dú)立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，其中 試劑R1: Tris緩沖液 20 mmol/L 硫酸鉀 200 mmol/L 聚乙烯吡咯烷酮 25 g/L 二乙基三胺五乙酸 45 mmol/L 山梨酸鈉 0.2 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: Tris緩沖液 150 mmol/L 牛血清白蛋白 18 g/L 山梨酸鈉 0. 9 g/L 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體 1 g/L 其溶劑為純化水。 實施例3 試劑盒的制備和使用方法 1、 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體的制備：先用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為 120nm的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為5%的溶液，然后每毫升 溶液中加入1.0 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，在26°C的條件下反 應(yīng)1小時，然后使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去上清，將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀釋，然后使用超聲分散儀進(jìn)行超聲分散，然后使用離心機(jī)，在 25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去上清，再將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀 釋，直至聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為4%，使用超聲分散儀進(jìn)行分散，然后邊分散邊加入抗脂 蛋白磷脂酶A2抗體，直至聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1.0%時為止，最后加入牛血清白蛋白， 直至牛血清白蛋白的濃度為20g/L時為止，4°C封閉18小時，即可制備得到乳膠包被抗脂蛋 白磷脂酶A2抗體； 2、 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: MES 緩沖液 lOOmmol/L 氯化鉀 300 mmol/L 聚乙二醇-2000 10 g/L EDTA ? 2Na 25 mmol/L 山梨酸鈉 0.6 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: MES緩沖液 100 mmol/L 牛血清白蛋白 11 g/L 疊氮鈉 0.7 g/L 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體 5 g/L 其溶劑為純化水； 3、 全自動生化分析儀參數(shù)設(shè)置 (a) 檢測溫度:37°C; (b) 檢測波長:主波長600nm; (c) 反應(yīng)時間：10min，其中，孵育時間5min，加入試劑R2后立即測定讀取吸光度 Al，5min后讀取吸光度A2,計算吸光度變化AA = A2-A1 ; (d) 反應(yīng)方向：正反應(yīng)； 4、 檢測步驟 (a) 取200yl試劑R1與2.5yl待測樣本混勻； (b) 將混勻后的溶液在37°C的條件下孵育5min; (c) 加入50yl試劑R2，立即測定讀取吸光度Al，5min后讀取吸光度A2，計算吸光度變化 AA = A2-A1; (d) 根據(jù)樣本中的脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)的活性
算出樣本中的脂蛋白磷脂酶A2的濃度。
[0018] 實施例4 試劑盒的制備和使用方法 1、 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體的制備：先用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為 120nm的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為5%的溶液，然后每毫升 溶液中加入1.0 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，在26°C的條件下反 應(yīng)1小時，然后使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去上清，將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀釋，然后使用超聲分散儀進(jìn)行超聲分散，然后使用離心機(jī)，在 25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去上清，再將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀 釋，直至聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為4%，使用超聲分散儀進(jìn)行分散，然后邊分散邊加入抗脂 蛋白磷脂酶A2抗體，直至聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1.0%時為止，最后加入牛血清白蛋白， 直至牛血清白蛋白的濃度為20g/L時為止，4°C封閉18小時，即可制備得到乳膠包被抗脂蛋 白磷脂酶A2抗體； 2、 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: Tris緩沖液 20 mmol/L 硫酸鉀 200 mmol/L 聚乙烯吡咯烷酮 25 g/L 二乙基三胺五乙酸 45 mmol/L 山梨酸鈉 0.2 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: Tris緩沖液 150 mmol/L 牛血清白蛋白 18 g/L 山梨酸鈉 0. 9 g/L 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體 1 g/L 其溶劑為純化水； 3、 全自動生化分析儀參數(shù)設(shè)置 (a) 檢測溫度:37°C; (b) 檢測波長:主波長600nm; (c) 反應(yīng)時間：10min，其中，孵育時間5min，加入試劑R2后立即測定讀取吸光度 Al，5min后讀取吸光度A2,計算吸光度變化AA = A2-A1 ; (d) 反應(yīng)方向：正反應(yīng)； 4、 檢測步驟 (a) 取200yl試劑R1與2.5yl待測樣本混勻； (b) 將混勻后的溶液在37°C的條件下孵育5min; (c) 加入50yl試劑R2,立即測定讀取吸光度Al，5min后讀取吸光度A2,計算吸光度變化 A A = A2-A1； (d) 根據(jù)樣本中的脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)的活性
算出樣本中的脂蛋白磷脂酶A2的濃度。
[0019] 表1為實施例1所制得的測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒以及實施例2所制得的測定 脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒分別對質(zhì)控品1進(jìn)行測定的結(jié)果，其中質(zhì)控品1中的脂蛋白磷脂酶 A2的濃度為114 ng/mL，測定結(jié)果見表1: 表1
由表1可知，本發(fā)明所制得的測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒對質(zhì)控品1的測定結(jié)果偏差 較小，因此測定準(zhǔn)確度高，而且實施例1為最優(yōu)的選擇。
[0020] 表2為實施例1所制得的測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒以及實施例2所制得的測定脂蛋 白磷脂酶A2的試劑盒分別對質(zhì)控品2進(jìn)行測定的結(jié)果，其中質(zhì)控品2中的脂蛋白磷脂酶A2的 濃度為373 ng/mL，測定結(jié)果見表2:
由表2可知，本發(fā)明所制得的測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒對質(zhì)控品2的測定結(jié)果偏差 較小，因此測定準(zhǔn)確度高，而且實施例1為最優(yōu)的選擇。
[0021]表3為實施例3所制得的測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒對同一待測樣本進(jìn)行的多 次反復(fù)測定以及實施例4所制得的測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒對同一待測樣本進(jìn)行的多 次反復(fù)測定，對所得的結(jié)果進(jìn)行SD和CV的計算，結(jié)果如下： 表3
由表3可知本發(fā)明所制得的測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒的精密度比較好，而且由表3 可知，實施例3為最優(yōu)的選擇。
[0022]上述實施例僅例示性說明本發(fā)明的原理及其功效，而非用于限制本發(fā)明。任何熟 悉此技術(shù)的人士皆可在不違背本發(fā)明的精神及范疇下，對上述實施例進(jìn)行修飾或改變。因 此，舉凡所屬技術(shù)領(lǐng)域中具有通常知識者在未脫離本發(fā)明所揭示的精神與技術(shù)思想下所完 成的一切等效修飾或改變，仍應(yīng)由本發(fā)明的權(quán)利要求所涵蓋。
【主權(quán)項】
1. 一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒，其特征在于:包括彼此獨(dú)立的試劑R1和試劑R2 雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 20~180 mmol/L 無機(jī)鹽離子 200~400 mmol/L 加速劑 5~25 g/L 整合劑 15~45 mmol/L 防腐劑 0.2~0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 50~150 mmol/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體 1~9 g/L 其溶劑為純化水。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒，其特征在于:包括彼此獨(dú) 立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 100mmol/L 無機(jī)鹽離子 300 mmol/L 加速劑 10 g/L 整合劑 25 mmol/L 防腐劑 0.6 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 100 mmol/L 穩(wěn)定劑 11 g/L 防腐劑 0.7 g/L 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體 5 g/L 其溶劑為純化水。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒，其特征在于:所述的 試劑R1中，所述的緩沖液采用Tris緩沖液、MES緩沖液、磷酸鹽緩沖液、M0PS0緩沖液中的一 種或多種的組合，所述的無機(jī)鹽離子采用氯化鉀、硫酸鉀、氯化鈉中的一種或多種的組合， 所述的加速劑采用聚乙二醇-2000、聚乙二醇-8000、聚乙烯吡咯烷酮中的一種或多種的組 合，所述的螯合劑采用EDTA · 2Na、二乙基三胺五乙酸、乙二醇雙四乙酸中的一種或多種的 組合，所述的防腐劑采用山梨酸鈉、苯甲酸鈉、疊氮鈉、硫柳汞、苯酚中的一種或多種的組 合。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒，其特征在于:所述的 試劑R2中，所述的緩沖液采用Tris緩沖液、MES緩沖液、磷酸鹽緩沖液、M0PS0緩沖液中的一 種或多種的組合，所述的穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白，所述的防腐劑采用山梨酸鈉、苯甲酸鈉、 疊氮鈉、硫柳汞、苯酚中的一種或多種的組合。5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒，其特征在于:所述的 試劑R2中，所述的乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體的制備方法為:先用50 mmol/L的MES緩 沖液將粒徑為80_500nm的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1%-5% 的溶液，然后每毫升溶液中加入1.0 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸 鹽，在20°C_37°C的條件下反應(yīng)1小時，然后使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30 分鐘，去上清，將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀釋，然后使用超聲分散儀進(jìn)行超聲分 散，然后使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去上清，再將沉淀用50 mmol/ L的MES緩沖液進(jìn)行稀釋，直至聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1%-4%，使用超聲分散儀進(jìn)行分 散，然后邊分散邊加入抗脂蛋白磷脂酶A2抗體，直至聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為0.5%-2.0% 時為止，最后加入牛血清白蛋白，直至牛血清白蛋白的濃度為20gAJ寸為止，4°C封閉16~24 小時，即可制備得到乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體。6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒的制備方法和使用方 法，其特征在于:包括以下步驟： (a) 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: 緩沖液 20~180 mmol/L 無機(jī)鹽離子 200~400 mmol/L 加速劑 5~25 g/L 整合劑 15~45 mmol/L 防腐劑 0.2~0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 50~150 mmol/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 乳膠包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗體 1~9 g/L 其溶劑為純化水； (b) 將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合，使其充分反應(yīng)； (c) 用全自動生化分析儀測定反應(yīng)后的吸光度差值； (d) 根據(jù)吸光度變化值計算出樣本中的脂蛋白磷脂酶A2的濃度。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒的制備方法和使用方法， 其特征在于:步驟(b)中，所述的試劑R1和試劑R2的體積比為4:1。8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種測定脂蛋白磷脂酶A2的試劑盒的制備方法和使用方法， 其特征在于:步驟(b)中，所述的待測樣本與試劑R1和試劑R2的總體積的體積比在1:10到1: 150之間。
【文檔編號】G01N33/573GK106053808SQ201610358103
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年5月26日
【發(fā)明人】蔡曉輝, 莊慶華, 吳錚, 徐運(yùn)
【申請人】安徽伊普諾康生物技術(shù)股份有限公司