一種基于汞單克隆抗體檢測(cè)汞的間接競(jìng)爭(zhēng)elisa試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬于生物檢測(cè)領(lǐng)域，更具體地說(shuō)，涉及一種基于汞單克隆抗體檢測(cè)汞的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002]重金屬一般以天然濃度廣泛存在于自然界中，天然水體中含汞量極少，一般不超過(guò)0.lyg/L。但由于人類對(duì)重金屬的開采、冶煉、加工及商業(yè)制造活動(dòng)日益增多，造成不少重金屬如鎘、汞等進(jìn)入大氣、水、土壤環(huán)境，引起嚴(yán)重的環(huán)境污染。植物具有吸收、積累汞的能力，尤其是當(dāng)土壤中含汞量增加時(shí)植物會(huì)吸收積累更多的汞。紡織品以植物作為原料，并且在生產(chǎn)工藝過(guò)程中，某些環(huán)節(jié)也會(huì)引入重金屬汞，汞及汞化合物對(duì)人體的損害程度與進(jìn)入體內(nèi)的汞量有關(guān)。汞對(duì)人體的危害主要累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)及腎臟，此外對(duì)呼吸系統(tǒng)、皮膚、血液及眼睛也有一定的影響。因此，建立紡織品中汞的準(zhǔn)確、快速、便捷、高通量的檢測(cè)方法，對(duì)紡織品品質(zhì)控制、減少其質(zhì)量問(wèn)題對(duì)人們生命安全與健康具有十分重要的意義。
[0003]當(dāng)前，汞的傳統(tǒng)檢測(cè)方法包括原子吸收光譜法、原子熒光光譜法和電感耦合等離子體-質(zhì)譜法等，這些方法普遍需要依靠大型或?qū)ｉT儀器才能完成，且前處理過(guò)程復(fù)雜，耗時(shí)較多，難以滿足高通量快速和在線檢測(cè)的需要。因此，發(fā)展用于快速檢測(cè)重金屬汞的新方法和新技術(shù)極具現(xiàn)實(shí)意義。但是，目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于這方面的研究進(jìn)展緩慢，尚未形成行之有效的成熟技術(shù)?；诳乖?、抗體特異性結(jié)合作用的間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定方法具有檢測(cè)速度快、費(fèi)用低廉、儀器簡(jiǎn)單易攜、靈敏度高和選擇性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，且能同時(shí)分析大量的環(huán)境樣本，已廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)以及環(huán)境中有機(jī)有毒物質(zhì)的檢測(cè)。ELISA試劑盒的種類有很多，分別適用于不同物質(zhì)的檢測(cè)，如中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)枮?01320026197.7，授權(quán)公告日為2013年09月04日的專利申請(qǐng)文件公開了一種微囊藻毒素酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，包括盒體和盒內(nèi)的一塊96孔的酶標(biāo)板、9瓶試劑和放試劑的下凹瓶位，酶標(biāo)板是采用96孔試劑板作為固相載體，在試劑盒微孔條上預(yù)包被鼠抗微囊藻毒素單抗的檢測(cè)板，所述的9瓶試劑分別為6瓶標(biāo)準(zhǔn)品溶液、I瓶微囊藻毒素酶標(biāo)記物、I瓶顯色液、I瓶停止液，所述試劑瓶都設(shè)有相應(yīng)下凹瓶位。中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)枮?01420625733.X，授權(quán)公告日為2015年03月18日的專利申請(qǐng)文件公開了一種兩用ELISA試劑盒，包括盒體，以及盒體內(nèi)的酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品管、抗體管、稀釋液瓶和底物瓶，所述底物瓶包括單組分TMB底物瓶以及兩個(gè)化學(xué)發(fā)光底物瓶；所述酶標(biāo)板包括板體及多個(gè)板孔，所述板孔具有非透明的側(cè)壁以及透明的底面，每個(gè)板孔的透明底面的外壁上均對(duì)應(yīng)覆蓋有一片非透明的不干膠層。由于檢測(cè)的物質(zhì)不同，所需的試劑種類及體積也均不相同，因此，ELISA試劑盒的使用對(duì)象具有專一性。目前，該方法用于紡織樣品中重金屬汞的檢測(cè)報(bào)道則較少，且現(xiàn)有的試劑盒檢測(cè)容量普遍偏低，不適合于批量實(shí)驗(yàn)操作。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]1、要解決的問(wèn)題
[0005]針對(duì)目前市場(chǎng)上沒(méi)有用于紡織樣品中重金屬汞的酶聯(lián)免疫反應(yīng)試劑盒及現(xiàn)有試劑盒檢測(cè)容量低等問(wèn)題，本實(shí)用新型提供一種基于汞單克隆抗體檢測(cè)汞的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA試劑盒，包括盒蓋、盒體、酶標(biāo)板、蓋板膜、試劑瓶固定板和試劑瓶，盒蓋上設(shè)有盒蓋卡頭，與盒體上設(shè)置的盒體卡槽相匹配，盒體被隔板分為三層，隔板與盒體之間通過(guò)卡條和卡槽結(jié)合，使用方便，試劑盒檢測(cè)容量擴(kuò)大了 2-3倍，使試劑盒的包裝成本大大降低，適用于批量進(jìn)行重金屬汞的酶聯(lián)免疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。
[0006]2、技術(shù)方案
[0007]為解決上述問(wèn)題，本實(shí)用新型采用如下的技術(shù)方案。
[0008]一種基于汞單克隆抗體檢測(cè)汞的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA試劑盒，包括盒蓋、盒體、酶標(biāo)板、蓋板膜、試劑瓶固定板和試劑瓶，所述的盒蓋上設(shè)有盒蓋卡頭，所述的盒體上設(shè)有盒體卡槽，所述的盒蓋卡頭與盒體卡槽相匹配；所述的盒體中設(shè)有第一隔板和第二隔板，將盒體分成第一層盒體、第二層盒體和第三層盒體；所述的蓋板膜為平板結(jié)構(gòu)，其尺寸與酶標(biāo)板尺寸相匹配；所述的試劑瓶固定板上設(shè)有凹槽；所述的試劑瓶放置在試劑瓶固定板上的凹槽中。
[0009]優(yōu)選地，所述的盒蓋卡頭與盒蓋在連接處的夾角為90°，盒蓋卡頭的另一側(cè)設(shè)有凸起，凸起的縱截面為直角三角形；所述的盒體卡槽的縱截面為長(zhǎng)條形。
[0010]優(yōu)選地，所述的第一隔板相對(duì)的兩側(cè)邊設(shè)有隔板卡條，隔板卡條為長(zhǎng)方形結(jié)構(gòu)，第一隔板上還設(shè)有兩個(gè)隔板凹槽；盒體上相對(duì)的兩側(cè)面上分別設(shè)有兩個(gè)隔板卡槽，隔板卡槽為長(zhǎng)方形凹槽結(jié)構(gòu)，所述的隔板卡條與隔板卡槽相匹配；所述的第二隔板結(jié)構(gòu)與第一隔板相同；所述的第一隔板和第二隔板上的隔板卡條插入盒體上的隔板卡槽中將盒體分為第一層盒體、第二層盒體和第三層盒體。
[0011]優(yōu)選地，所述的酶標(biāo)板為96孔試劑板，是酶聯(lián)免疫反應(yīng)的固相載體，包括酶標(biāo)板外框支架和12條酶標(biāo)反應(yīng)微孔條，酶標(biāo)板外框支架上設(shè)有8 X 12個(gè)孔，每條酶標(biāo)反應(yīng)微孔條上串聯(lián)有8個(gè)酶標(biāo)反應(yīng)微孔，所述的酶標(biāo)反應(yīng)微孔中設(shè)有預(yù)包被汞單克隆抗體，酶標(biāo)反應(yīng)微孔條安裝在酶標(biāo)板外框支架上，酶標(biāo)反應(yīng)微孔條上的酶標(biāo)反應(yīng)微孔相應(yīng)的置于酶標(biāo)板外框支架的孔內(nèi)，所述的酶標(biāo)板真空密封于鋁箔袋內(nèi)。
[0012]優(yōu)選地，還包括24?36條散裝酶標(biāo)反應(yīng)微孔條，所述的散裝酶標(biāo)反應(yīng)微孔條真空密封于鋁箔袋內(nèi)放置在第三層盒體中；所述的酶標(biāo)板和蓋板膜分別有兩個(gè)，放置在第一層盒體中；試劑瓶固定板及其凹槽中的試劑瓶放置在第二層盒體中。
[0013]優(yōu)選地，所述的第一隔板和第二隔板在盒體中為水平設(shè)置，第一層盒體、第二層盒體、第三層盒體的體積比為1: (2?3):1。
[0014]優(yōu)選地，所述的試劑瓶有15個(gè)，其中有8個(gè)試劑瓶的容積為2.0mL,分別盛有汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、汞的梯度濃度的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液、汞單克隆抗體溶液和酶標(biāo)二抗；有5個(gè)試劑瓶的容積為7.0mL,分別盛有含EDTA的抗體稀釋液、底物緩沖液、雙氧水溶液、TMB顯色液和終止液；有2個(gè)試劑瓶的容積為30.0mL,分別盛有抗體稀釋液和30倍濃縮洗滌液。
[0015]優(yōu)選地，所述的試劑瓶的制作材料為PE塑料；試劑瓶固定板的制作材料為泡沫塑料。
[0016]3、有益效果
[0017]相比于現(xiàn)有技術(shù)，本實(shí)用新型的有益效果為:
[0018](I)本實(shí)用新型的盒體上設(shè)有第一隔板和第二隔板，第一隔板和第二隔板相對(duì)的兩側(cè)邊設(shè)有隔板卡條，盒體上相對(duì)的兩側(cè)邊上分別設(shè)有兩個(gè)隔板卡槽，隔板卡條和隔板卡槽相匹配，隔板中設(shè)有兩個(gè)隔板凹槽，在使用時(shí)，可以利用隔板凹槽將隔板從盒體上取出，使用方便；
[0019](2)本實(shí)用新型的試劑盒設(shè)有三層結(jié)構(gòu)，分別放置酶標(biāo)板和蓋板膜、試劑瓶、散裝酶標(biāo)反應(yīng)微孔條，酶標(biāo)板上設(shè)置的酶標(biāo)反應(yīng)微孔條可拆卸下來(lái)，散裝酶標(biāo)反應(yīng)微孔條可以替換酶標(biāo)板上的酶標(biāo)反應(yīng)微孔條，使基于汞單克隆抗體檢測(cè)汞的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA試劑盒檢測(cè)容量擴(kuò)大2-3倍，非常適合用于批量進(jìn)行紡織品中重金屬汞的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，節(jié)省了包裝盒的成本；
[0020](3)本實(shí)用新型的盒蓋上設(shè)有盒蓋卡頭，盒體上設(shè)有盒體卡槽，盒蓋卡頭與盒體卡槽相匹配，使盒蓋與盒體的開合更方便，且盒蓋卡頭與盒體卡槽結(jié)合牢固，方便運(yùn)輸；
[0021](4)本實(shí)用新型的試劑盒可連續(xù)進(jìn)行多個(gè)紡織樣品中重金屬汞含量的測(cè)定，減少了檢測(cè)樣本所需要的時(shí)間，檢測(cè)成本低廉，易于廣泛推廣應(yīng)用與臨床檢測(cè)，在兒童輕紡品的安全檢測(cè)中具有潛在價(jià)值。
【附圖說(shuō)明】
[0022]圖1為本實(shí)用新型的立體結(jié)構(gòu)示意圖；
[0023]圖2為本實(shí)用新型酶標(biāo)板的俯視圖；
[0024]圖3為本實(shí)用新型蓋板膜的俯視圖；
[0025]圖4為本實(shí)用新型試劑瓶固定板的俯視圖；
[0026]圖5為本實(shí)用新型試劑瓶的正視圖；
[0027]圖6為本實(shí)用新型第一隔板和第二隔板的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0028]圖7為本實(shí)用新型盒體側(cè)邊的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0029]圖8為本實(shí)用新型盒蓋卡頭與盒體卡槽卡合狀態(tài)的側(cè)視圖。
[0030]圖中:1、盒蓋；2、盒體；3、酶標(biāo)板；4、蓋板膜；5、試劑瓶固定板；6、試劑瓶；101、盒蓋卡頭；201、盒體卡槽；202第一層盒體；203、第二層盒體；204、第三層盒體；205、第一隔板；206、第二隔板；301、酶標(biāo)板外框支架；302、酶標(biāo)反應(yīng)微孔條；303、酶標(biāo)反應(yīng)微孔；2051、隔板卡條；2052、隔板卡槽；2053、隔板凹槽；501_508、凹槽。
【具體實(shí)施方式】
[0031]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)一步進(jìn)行描述。
[0032]實(shí)施例1
[0033]如圖1?7所示，一種基于汞單克隆抗體檢測(cè)汞的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA試劑盒，包括盒蓋1、盒體2、酶標(biāo)板3、蓋板膜4、試劑瓶固定板5和試劑瓶6，盒體2的尺寸為14cmX9.5cmX8cm(長(zhǎng)X寬X高)，盒蓋I上設(shè)有盒蓋卡頭101，盒蓋卡頭101與盒蓋在連接處的夾角為90°，盒蓋卡頭101的另一側(cè)設(shè)有凸起，凸起的縱截面為直角三角形；盒體2上設(shè)有盒體卡槽201，其縱截面為長(zhǎng)條形，其長(zhǎng)為1.5cm,寬為0.2cm ;盒蓋卡頭101與盒體卡槽201相匹配，如附圖8所示；盒體2中設(shè)有第一隔板205和第二隔板206，第一隔板205相對(duì)的兩側(cè)邊設(shè)有隔板卡條2051，其為長(zhǎng)方形結(jié)構(gòu)，長(zhǎng)度與第一隔板205的側(cè)邊長(zhǎng)相同，寬為5mm ;第一隔板205上設(shè)有兩個(gè)隔板凹槽2053，其形狀為半圓形；盒體2上相對(duì)的兩側(cè)邊上分別設(shè)有兩個(gè)隔板卡槽2052，其為長(zhǎng)方形凹槽結(jié)構(gòu)，凹槽的深度為4mm ;隔板卡條2051與隔板卡槽2052相匹配；第二隔板206結(jié)構(gòu)與第一隔板205相同；第一隔板205和第二隔板206上的隔板卡條2051插入盒體2上的隔板卡槽2052中將盒體2分成第一層盒體202、第二層盒體203和第三層盒體204，第一隔板205和第二隔板206在盒體2中為水平設(shè)置，第一層盒體20