次提取液，合并濾液，得到救必應(yīng)提取液。
[0030] 加熱濃縮乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，得浸膏，加入藥材一倍量的水（1L)和乙 酸乙酯（1L)，攪拌混勻，于室溫靜置過夜（12h)，有白色片狀沉淀于水層析出，過濾，得到白 色濾渣。
[0031] 常壓下烘干濾渣，即得到35.7g長梗冬青苷產(chǎn)品，產(chǎn)率為3.6%。
[0032]以長梗冬青苷對照品（中檢所，批號11868-201001)為外標(biāo)，使用HPLC法檢測得到 的長梗冬青苷產(chǎn)品，色譜條件為使用C18色譜柱(柱長:250mm，粒徑:5μπι)，以乙腈為流動(dòng)相 Α，水為流動(dòng)相Β，梯度洗脫：0-10min，A: 10% ; 10-20min，A: 10-40%，20-60min，A:40%。 得到的長梗冬青苷產(chǎn)品扣除水分與殘留溶劑后純度為95.7%，面積歸一化純度大于98%， 整個(gè)工藝方法長梗冬青苷轉(zhuǎn)移率達(dá)到50.4%。
[0033] 實(shí)施例4
[0034]取救必應(yīng)藥材lkg，加16倍量（16L)體積分?jǐn)?shù)為70 %的乙醇水溶液回流提取3次，提 取時(shí)間為120min，過濾，收集三次提取液，合并濾液，得到救必應(yīng)提取液。
[0035]加熱濃縮乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，得浸膏，加入藥材兩倍量的水(2L)和三 倍量的乙酸乙酯（3L)，攪拌混勻，于室溫靜置過夜（12h)，有白色片狀沉淀于水層析出，過 濾，得到白色濾渣。
[0036]減壓干燥濾渣，即得到39.2g長梗冬青苷產(chǎn)品，產(chǎn)率為3.9%。
[0037]以長梗冬青苷對照品（中檢所，批號11868-201001)為外標(biāo)，使用HPLC法檢測得到 的長梗冬青苷產(chǎn)品，色譜條件為使用C18色譜柱(柱長:250mm，粒徑:5μπι)，以乙腈為流動(dòng)相 Α，水為流動(dòng)相Β，梯度洗脫：0-10min，A: 10% ; 10-20min，A: 10-40%，20-60min，A:40%。 得到的長梗冬青苷產(chǎn)品扣除水分與殘留溶劑后純度為95.1%，面積歸一化純度大于98%， 整個(gè)工藝方法長梗冬青苷轉(zhuǎn)移率達(dá)到55.1 %。
[0038] 實(shí)施例5
[0039]取救必應(yīng)藥材lkg，加14倍量（14L)體積分?jǐn)?shù)為30 %的乙醇水溶液回流提取3次，提 取時(shí)間為120min，過濾，收集兩次提取液，合并濾液，得到救必應(yīng)提取液。
[0040] 加熱濃縮乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，得浸膏，加入藥材兩倍量的水(2L)和乙 酸乙酯（2L)，攪拌混勻，于室溫靜置過夜（12h)，有白色片狀沉淀于水層析出，過濾，得到白 色濾渣。
[0041] 減壓干燥濾渣，即得到34.3g長梗冬青苷產(chǎn)品，產(chǎn)率為3.4%。以長梗冬青苷對照品 (中檢所，批號11868-201001)為外標(biāo)，使用HPLC法檢測得到的長梗冬青苷產(chǎn)品，色譜條件為 使用C18色譜柱（柱長:25〇111111，粒徑 ：5以111)，以乙腈為流動(dòng)相4，水為流動(dòng)相8，梯度洗脫:〇4 10min，A: 10% ; 10-20min，A: 10-40%，20-60min，A:40%。得到的長梗冬青苷產(chǎn)品扣除水 分與殘留溶劑后純度為98.2%，面積歸一化純度大于98%，整個(gè)工藝方法長梗冬青苷轉(zhuǎn)移 率達(dá)到49.7%。
[0042] 實(shí)施例6
[0043]取救必應(yīng)藥材lkg，加8倍量(8L)體積分?jǐn)?shù)為30 %的乙醇水溶液回流提取2次，提取 時(shí)間為90min，過濾，收集兩次提取液，合并濾液，得到救必應(yīng)提取液。
[0044]加熱濃縮乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，得浸膏，加入藥材兩倍量的水(2L)和一 倍量的乙酸乙酯（1L)，攪拌混勻，于室溫靜置過夜（12h)，有白色片狀沉淀于水層析出，過 濾，得到白色濾渣。
[0045]常壓下烘干濾渣，即得到26.0g長梗冬青苷產(chǎn)品，產(chǎn)率為2.6%。
[0046]以長梗冬青苷對照品（中檢所，批號11868-201001)為外標(biāo)，使用HPLC法檢測得到 的長梗冬青苷產(chǎn)品，色譜條件為使用C18色譜柱(柱長:250mm，粒徑:5μπι)，以乙腈為流動(dòng)相 Α，水為流動(dòng)相Β，梯度洗脫：0-10min，A: 10% ; 10-20min，A: 10-40%，20-60min，A:40%。 得到的長梗冬青苷產(chǎn)品扣除水分與殘留溶劑后純度為96.0%，面積歸一化純度大于98%， 整個(gè)工藝方法長梗冬青苷轉(zhuǎn)移率達(dá)到36.6%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種長梗冬青苷的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 取救必應(yīng)藥材，乙醇水溶液加熱回流提取，過濾，集濾液； (2) 將濾液濃縮至無醇味，得浸膏； (3) 向浸膏加乙酸乙酯水溶液，混勻，靜置過夜，過濾得濾渣； (4) 將濾渣干燥，直接制得長梗冬青苷產(chǎn)品。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟（1)所述的乙醇水溶液的濃度按體積比 為20%-70%，料液比為lg:8~16ml，提取次數(shù)為2~3次，每次60~120min。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于步驟（1)所述的乙醇水溶液的濃度按體積比 為40%-70%，料液比為lg:14~16ml。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的方法，其特征在于步驟(3)所述的乙酸乙酯水溶液的濃 度是按體積比為30%_70%，料液比為lg:2~5ml，靜置12~24h。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于步驟(3)所述的乙酸乙酯水溶液的濃度是按 體積比為50 %-60 %。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于步驟（1)所述的乙醇水溶液的濃度按體積比 為70 %，料液比為1 g: 16ml，提取次數(shù)為3次，每次120min;步驟(3)所述的乙酸乙酯水溶液的 濃度是按體積比為60 %，料液比為1 g: 5ml，靜置12h。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種長梗冬青苷的制備方法。該方法包括以下步驟：以救必應(yīng)中藥材為原料，用20％-70％乙醇水溶液加熱回流提??；提取濾液濃縮至無醇味，得浸膏；浸膏用30％-70％乙酸乙酯水溶液溶解混勻，靜置過夜，過濾，得濾渣；濾渣干燥，得長梗冬青苷。相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有工藝簡單，周期短，成本低，產(chǎn)品產(chǎn)率純度高，適用大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。
【IPC分類】C07H1/08, C07J63/00, C07H15/256
【公開號】CN105646638
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】王永剛, 嚴(yán)曾豪, 蘇敏敏, 潘文俊, 彭維
【申請人】中山大學(xué)
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年1月20日