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      一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法

      文檔序號(hào):376784閱讀:576來源:國知局
      專利名稱:一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及一種植物的組培技術(shù),尤其是涉及一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉‘紅星’的方法。
      背景技術(shù)
      澳洲朱蕉‘紅星’,為龍舌蘭科灌木植物,地下部分具發(fā)達(dá)根莖,其主莖挺拔,莖高 0. 5-1米,不分枝或少分枝。葉紅色輪生于莖稈上,株型很獨(dú)特,原產(chǎn)地為我國南部熱帶地區(qū),本品種為人工選育的園藝品種。多于庭園栽培或花境配置,為優(yōu)秀的觀葉植物。澳洲朱蕉‘紅星’株形美觀,色彩華麗高雅,具有較好的觀賞性。朱蕉還是藥用植物,其花、葉、根均可入藥,我國廣西民間曾用來治咯血、尿血、菌痢等癥。但是,現(xiàn)今市場(chǎng)上流行的品種大多為國外引進(jìn)的品種,種苗供應(yīng)受限制,而且繁殖慢,從而限制了市場(chǎng)需求。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種保持原有的母本性狀、繁殖率、整齊度等有益效果明顯的組織培養(yǎng)澳洲朱蕉‘紅星’的方法。本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,其特征在于,該方法通過材料無菌處理、芽分化增殖、不定芽壯苗培養(yǎng)、植株生根培養(yǎng)、植株煉苗移栽5個(gè)步驟得到澳洲朱蕉‘紅星’植株,具體步驟如下(1)材料無菌處理取澳洲朱蕉‘紅星’植株基部的小芽用自來水沖洗池后于超凈工作臺(tái)上,用 75wt%的乙醇浸泡30s,lwt%。升汞浸泡15min,再用無菌水沖洗5_6次并吸干表面水分,將小芽基部切成Icm長后接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上;(2)芽分化增殖接種于小芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上3周后,小芽的基部開始膨大并出現(xiàn)黃綠色突起,再過1 周后可見愈傷組織,繼續(xù)培養(yǎng)1個(gè)月,切下帶芽愈傷組織放入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行芽分化增殖;(3)不定芽壯苗培養(yǎng)增殖培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的叢生芽,每叢有2-3棵不定芽植株,將其分成小叢或單芽后, 放入壯苗培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽壯苗培養(yǎng),20天后不定芽植株可以長到2-3cm ;(4)植株生根培養(yǎng)取高度為2_3cm的不定芽植株接種于生根培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根,10天后幼苗基部分化出許多白色的根原基,繼續(xù)生根培養(yǎng)30天,根系可長至4-6cm并出現(xiàn)須根;(5)植株煉苗移栽繼續(xù)生根培養(yǎng)20-25天,選擇根系發(fā)達(dá)生長健壯的無菌苗在室內(nèi)開瓶煉苗3天,然后取出后并洗凈根部瓊脂,繼續(xù)在溫室中馴化40天后移栽室外并給予肥水管理即可。
      所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為 MS+6-BA1. 0mg/L+NAA0. lmg/L、MS+6-BA3. Omg/L+NAAO. 3mg/L 或 MS+6-BA5. Omg/ L+NAAO. 5mg/L。所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA 5. Omg/L+NAAO. 5mg/L。所述的增殖培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為 MS+6-BA1. Omg/L+NAAO. lmg/L、MS+6-BA2. Omg/L+NAAO. 2mg/L 或 MS+6-BA3. Omg/ L+NAAO. 3mg/L。所述的增殖培養(yǎng)基營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA2. Omg/L+NAAO. 2mg/L0所述的壯苗培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0. lmg/L、MS+6-BA1.Omg/L+NAAO. lmg/L 或 MS+6-BA2. Omg/ L+NAAO. 2mg/L。 所述的壯苗培養(yǎng)基營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA0. 5mg/L+NAA0. lmg/L。所述的生根培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為 MS+NAAO. 05mg/L、MS+NAA0. lmg/L 或 MS+NAAO. 2mg/L。所述的生根培養(yǎng)基營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+NAAO. lmg/L。所述的培養(yǎng)基的pH值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為M_26°C,光照條件控制為 70-90ymol/ms。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明可以更好地保持原有的母本性狀,另外,相對(duì)于普通的扦插或嫁接,通過本發(fā)明的組培技術(shù)可以提高植株的繁殖速度和整齊度,有益效果明顯。
      具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
      實(shí)施例1一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉‘紅星’的方法,該方法通過材料無菌處理、芽分化增殖、不定芽壯苗培養(yǎng)、植株生根培養(yǎng)、植株煉苗移栽5個(gè)步驟得到澳洲朱蕉‘紅星’植株,具體步驟如下(1)材料無菌處理取澳洲朱蕉‘紅星’植株基部的小芽用自來水沖洗池后于超凈工作臺(tái)上,用 75wt%的乙醇浸泡30s,lwt%。升汞浸泡15min,再用無菌水沖洗5次并吸干表面水分,將小芽基部切成Icm長后接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為M°C,光照條件控制為70 μ mol/ms,該芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖 30g/L、瓊脂 6g/L,營養(yǎng)成分為 MS+6-BA1. Omg/L+NAAO. lmg/L ;(2)芽分化增殖接種于小芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上3周后,小芽的基部開始膨大并出現(xiàn)黃綠色突起,再過1 周后可見愈傷組織,基部愈傷組織比較多,但不影響不定芽的增殖,不定芽生長迅速并無玻璃化等不良現(xiàn)象,繼續(xù)培養(yǎng)1個(gè)月,切下帶芽愈傷組織放入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行芽分化增殖, 增殖培養(yǎng)基的PH值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為M°C,光照條件控制為70μπιΟ1/ ms,增殖培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為MS+6-BA1. Omg/ L+NAAO. lmg/L ;
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      (3)不定芽壯苗培養(yǎng)增殖培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的叢生芽,每叢有2棵不定芽植株,將其分成小叢或單芽后,放入壯苗培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽壯苗培養(yǎng),壯苗培養(yǎng)基的PH值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為M°C,光照條件控制為70ymol/mS,壯苗培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂 6g/L,營養(yǎng)成分為MS+6-BA1. 0mg/L+NAA0. lmg/L,不定芽迅速伸長,20天后不定芽植株可以長到2cm ;(4)植株生根培養(yǎng)取高度為2cm的不定芽植株接種于生根培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根,生根培養(yǎng)基的pH 值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為M°C,光照條件控制為70ymol/mS,生根培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為MS+NAAO. 05mg/L, 10天后幼苗基部分化出許多白色的根原基,繼續(xù)生根培養(yǎng)30天,根系可長至4cm并出現(xiàn)須根;(5)植株煉苗移栽繼續(xù)生根培養(yǎng)25天,選擇根系發(fā)達(dá)生長健壯的無菌苗在室內(nèi)開瓶煉苗3天,然后取出后并洗凈根部瓊脂,繼續(xù)在溫室中馴化40天后移栽室外并給予肥水管理即完成對(duì)澳洲朱蕉‘紅星’植株的組織培養(yǎng)。實(shí)施例2一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,該方法通過材料無菌處理、芽分化增殖、不定芽壯苗培養(yǎng)、植株生根培養(yǎng)、植株煉苗移栽5個(gè)步驟得到澳洲朱蕉‘紅星’植株,具體步驟如下(1)材料無菌處理取澳洲朱蕉‘紅星’植株基部的小芽用自來水沖洗池后于超凈工作臺(tái)上,用 75wt%的乙醇浸泡30s,lwt%。升汞浸泡15min,再用無菌水沖洗6次并吸干表面水分,將小芽基部切成Icm長后接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為25°C,光照條件控制為80 μ mol/ms,該芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖 30g/L、瓊脂 6g/L,營養(yǎng)成分為 MS+6-BA5. 0mg/L+NAA0. 5mg/L ;(2)芽分化增殖接種于小芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上3周后,小芽的基部開始膨大并出現(xiàn)黃綠色突起,再過1 周后可見愈傷組織,基部愈傷組織比較多,但不影響不定芽的增殖,不定芽生長迅速并無玻璃化等不良現(xiàn)象,繼續(xù)培養(yǎng)1個(gè)月,切下帶芽愈傷組織放入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行芽分化增殖, 增殖培養(yǎng)基的PH值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為25°C,光照條件控制為80 μ mol/ ms,增殖培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為MS+6-BA2. Omg/ L+NAA0. 2mg/L ;(3)不定芽壯苗培養(yǎng)增殖培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的叢生芽,每叢有3棵不定芽植株,將其分成小叢或單芽后,放入壯苗培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽壯苗培養(yǎng),壯苗培養(yǎng)基的PH值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為25°C,光照條件控制為SOymol/ms,壯苗培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂 6g/L,營養(yǎng)成分為MS+6-BA0. 5mg/L+NAA0. lmg/L,不定芽迅速伸長,20天后不定芽植株可以長到3cm ;(4)植株生根培養(yǎng)
      取高度為3cm的不定芽植株接種于生根培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根,生根培養(yǎng)基的pH 值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為25°C,光照條件控制為SOymol/ms,生根培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為MS+NAAO. lmg/L, 10天后幼苗基部分化出許多白色的根原基,繼續(xù)生根培養(yǎng)30天,根系可長至km并出現(xiàn)須根;(5)植株煉苗移栽繼續(xù)生根培養(yǎng)20天,選擇根系發(fā)達(dá)生長健壯的無菌苗在室內(nèi)開瓶煉苗3天,然后取出后并洗凈根部瓊脂,繼續(xù)在溫室中馴化40天后移栽室外并給予肥水管理即完成對(duì)澳洲朱蕉‘紅星’植株的組織培養(yǎng)。實(shí)施例3一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,該方法通過材料無菌處理、芽分化增殖、不定芽壯苗培養(yǎng)、植株生根培養(yǎng)、植株煉苗移栽5個(gè)步驟得到澳洲朱蕉‘紅星’植株,具體步驟如下(1)材料無菌處理取澳洲朱蕉‘紅星’植株基部的小芽用自來水沖洗池后于超凈工作臺(tái)上,用 75wt%的乙醇浸泡30s,lwt%。升汞浸泡15min,再用無菌水沖洗6次并吸干表面水分,將小芽基部切成Icm長后接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為^TC,光照條件控制為90 μ mol/ms,該芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖 30g/L、瓊脂 6g/L,營養(yǎng)成分為 MS+6-BA3. 0mg/L+NAA0. 3mg/L ;(2)芽分化增殖接種于小芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上3周后,小芽的基部開始膨大并出現(xiàn)黃綠色突起,再過1 周后可見愈傷組織,基部愈傷組織比較多,但不影響不定芽的增殖,不定芽生長迅速并無玻璃化等不良現(xiàn)象,繼續(xù)培養(yǎng)1個(gè)月,切下帶芽愈傷組織放入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行芽分化增殖, 增殖培養(yǎng)基的PH值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為,光照條件控制為90 μ mol/ ms,增殖培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為MS+6-BA 3. Omg/ L+NAA0. 3mg/L ;(3)不定芽壯苗培養(yǎng)增殖培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的叢生芽,每叢有3棵不定芽植株,將其分成小叢或單芽后,放入壯苗培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽壯苗培養(yǎng),壯苗培養(yǎng)基的PH值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為26°C,光照條件控制為90 μ mol/ms,壯苗培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為MS+6-BA 2. Omg/L+NMO. 2mg/L,不定芽迅速伸長,20天后不定芽植株可以長到3cm ;(4)植株生根培養(yǎng)取高度為3cm的不定芽植株接種于生根培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根,生根培養(yǎng)基的PH 值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為^TC,光照條件控制為90ymol/mS,生根培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為MS+NAAO. 2mg/L, 10天后幼苗基部分化出許多白色的根原基,繼續(xù)生根培養(yǎng)30天,根系可長至km并出現(xiàn)須根;(5)植株煉苗移栽繼續(xù)生根培養(yǎng)20天,選擇根系發(fā)達(dá)生長健壯的無菌苗在室內(nèi)開瓶煉苗3天,然后取出后并洗凈根部瓊脂,繼續(xù)在溫室中馴化40天后移栽室外并給予肥水管理即完成對(duì)澳洲朱蕉‘紅星’植株的組織培養(yǎng)。
      權(quán)利要求
      1.一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,其特征在于,該方法通過材料無菌處理、芽分化增殖、不定芽壯苗培養(yǎng)、植株生根培養(yǎng)、植株煉苗移栽5個(gè)步驟得到澳洲朱蕉‘紅星’植株, 具體步驟如下(1)材料無菌處理取澳洲朱蕉‘紅星’植株基部的小芽,用自來水沖洗池后于超凈工作臺(tái)上,用75wt%的乙醇浸泡30s,lwt%。升汞浸泡15min,再用無菌水沖洗5_6次并吸干表面水分,將小芽基部切成Icm長后接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上;(2)芽分化增殖接種于小芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上3周后,小芽的基部開始膨大并出現(xiàn)黃綠色突起,再過1周后可見愈傷組織,繼續(xù)培養(yǎng)1個(gè)月,切下帶芽愈傷組織放入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行芽分化增殖;(3)不定芽壯苗培養(yǎng)增殖培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的叢生芽,每叢有2-3棵不定芽植株,將其分成小叢或單芽后,放入壯苗培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽壯苗培養(yǎng),20天后不定芽植株可以長到2-3cm ;(4)植株生根培養(yǎng)取高度為2-3cm的不定芽植株接種于生根培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根,10天后幼苗基部分化出許多白色的根原基,繼續(xù)生根培養(yǎng)30天,根系可長至4-6cm并出現(xiàn)須根;(5)植株煉苗移栽繼續(xù)生根培養(yǎng)20-25天,選擇根系發(fā)達(dá)生長健壯的無菌苗在室內(nèi)開瓶煉苗3天,然后取出后并洗凈根部瓊脂,繼續(xù)在溫室中馴化40天后移栽室外并給予肥水管理即可。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,其特征在于,所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為MS+6-BA1. Omg/ L+NAAO. lmg/L、MS+6-BA3. 0mg/L+NAA0. !3mg/L 或 MS+6-BA5. 0mg/L+NAA0. 5mg/L。
      3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,其特征在于,所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA 5. 0mg/L+NAA0. 5mg/L。
      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,其特征在于,所述的增殖培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為MS+6-BA1. 0mg/L+NAA0. Img/ L、MS+6-BA2. 0mg/L+NAA0. ang/L 或 MS+6-BA3. 0mg/L+NAA0. 3mg/L。
      5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,其特征在于,所述的增殖培養(yǎng)基營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA2. 0mg/L+NAA0. 2mg/L0
      6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,其特征在于,所述的壯苗培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為MS+6-BA0. 5mg/L+NAA0. Img/ L、MS+6-BA1. 0mg/L+NAA0. lmg/L 或 MS+6-BA2. 0mg/L+NAA0. 2mg/L。
      7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,其特征在于,所述的壯苗培養(yǎng)基營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA0. 5mg/L+NAA0. lmg/L。
      8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,其特征在于,所述的生根培養(yǎng)基的基準(zhǔn)成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養(yǎng)成分為MS+NAA0. 05mg/L、 MS+NAA0. lmg/L 或 MS+NAA0. 2mg/L。
      9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,其特征在于,所述的生根培養(yǎng)基營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+NAA0. lmg/L。
      10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,其特征在于,所述的培養(yǎng)基的PH值為5. 8,使用培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)溫度控制為24-26°C,光照條件控制為70-90 μ mol/ms。
      全文摘要
      本發(fā)明涉及一種組織培養(yǎng)澳洲朱蕉紅星的方法,該方法以澳洲朱蕉‘紅星’小芽為原料,通過材料無菌處理、芽分化增殖、不定芽壯苗培養(yǎng)、植株生根培養(yǎng)、植株煉苗移栽5個(gè)步驟,分別通過芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、壯苗培養(yǎng)基及生根培養(yǎng)基進(jìn)行組織培養(yǎng),得到澳洲朱蕉‘紅星’植株。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明可以更好地保持原有的母本性狀,另外,相對(duì)于普通的扦插或嫁接,通過組培技術(shù)可以提高植株的繁殖速度和整齊度,有益效果明顯。
      文檔編號(hào)A01H4/00GK102265786SQ201010191200
      公開日2011年12月7日 申請(qǐng)日期2010年6月3日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月3日
      發(fā)明者沈勤, 陳建華, 黃建榮 申請(qǐng)人:上海上房園藝有限公司
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