專利名稱：豬源植物乳桿菌微膠囊及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及畜牧業(yè)微生物制劑，特別涉及一種豬源植物乳桿菌微膠囊及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
近年來，隨著人們對抗生素諸多弊端的逐步認(rèn)識(shí)，以及世界各國相繼禁止抗生素 在飼料中的使用，益生菌制劑作為一種新型的綠色飼料添加劑正在越來越多地受到人們的 重視，也有著良好的發(fā)展前景，其中，尤以乳酸菌應(yīng)用最多、最為廣泛。眾所周知，乳酸菌是 人和動(dòng)物腸道內(nèi)的正常菌群，與動(dòng)物的健康息息相關(guān)。目前已有大量研究認(rèn)為乳酸菌制劑 具有良好的生物學(xué)功能，并被證實(shí)在臨床上能夠治療和預(yù)防動(dòng)物的某些腸道疾病或者起保 健作用，也已在飼料業(yè)中被廣泛應(yīng)用。然而，乳酸菌制劑的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法是將保存菌種活化后進(jìn)行液體發(fā)酵擴(kuò)大培養(yǎng)， 而后應(yīng)用于生產(chǎn)中。此方法制備的乳酸菌產(chǎn)品穩(wěn)定性稍差、有效活菌含量稍低。這是由于 一方面，乳酸菌在生長過程中，不能形成芽孢，抗性較差，加之在其生命活動(dòng)過程中還會(huì)產(chǎn) 生一些危及自身正常生長繁殖的乳酸和乙酸等代謝產(chǎn)物，故在液體條件下難以長期保存； 另一方面，乳酸菌在進(jìn)入動(dòng)物消化道后，低PH的胃液以及腸液中的膽鹽對它也會(huì)造成損 傷，使其難以有足夠的活菌數(shù)量到達(dá)并定居于腸道來更好地發(fā)揮益生作用。微膠囊包被技術(shù)是保護(hù)其菌體活力的一種有效方法，該技術(shù)采用安全特殊的壁 材，將核心菌體物質(zhì)包覆，起到保護(hù)菌體的作用。相對于傳統(tǒng)的乳酸菌制備方法，乳酸菌微 膠囊包被技術(shù)的主要優(yōu)點(diǎn)有(1)可增加菌體對不良環(huán)境(胃液、膽鹽等)的抵抗力，有利 于其順利到達(dá)腸道以發(fā)揮益生作用；(2)采用安全的胃不溶、腸溶性壁材，使菌體不會(huì)受胃 液的破壞，菌體到達(dá)腸道后釋放出來，真正起到保健和治療的作用；(3)利于儲(chǔ)存、加工和 運(yùn)輸，可延長貯存期，提高穩(wěn)定性。目前，乳酸菌微膠囊包被的方法有多種，所適用的壁材也各不相同，并且大多都是 應(yīng)用在酸奶、乳酪等人類食品的生產(chǎn)中。而作為動(dòng)物飼用的乳酸菌微膠囊產(chǎn)品還很少，這主 要是由于其生產(chǎn)過程所要求的技術(shù)較復(fù)雜、生產(chǎn)設(shè)備要求較嚴(yán)格，這些因素限制了它的發(fā) 展。因此，根據(jù)畜牧生產(chǎn)的需要，通過嚴(yán)格的科學(xué)試驗(yàn)，找到一種高效、實(shí)用的飼用乳酸菌微 膠囊制備方法，是目前亟待解決的科技問題，有著廣闊的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明根據(jù)上述領(lǐng)域的空白和需求，提供一種豬源植物乳桿菌微膠囊，該微膠囊 能夠提高保育豬抗氧化能力和免疫力，具有提高保育豬日增重、降低料肉比、降低腹瀉率的 作用。豬源植物乳桿菌微膠囊，其制備步驟如下(1)將豬源植物乳桿菌的菌泥與保護(hù)劑均勻混合制成菌懸液，然后與海藻酸鈉溶 液混合均勻得到微膠囊基質(zhì)；(2)制備微膠囊前體；
(3)將步驟⑵制得的微膠囊前體置于2 5% (W/W)的氯化鈣溶液中固定；(4)步驟(3)固定得到的微膠囊顆粒真空凍干24h得到微膠囊產(chǎn)品。在微膠囊基質(zhì)中海藻酸鈉的終濃度為1. 5% (W/W)。所述氯化鈣溶液的濃度為2% (W/W)。所述保護(hù)劑的材料及其重量百分比為蔴糖3 10%、乳糖2 5%、脫脂乳2 5%、葡萄糖0 2%、甘油0 2%、糊精0 10%、滑石粉0 10%，其余為水。所述保護(hù)劑的材料及其重量百分比為蔗糖3%、乳糖5%、脫脂乳5%、糊精5%、滑 石粉10%，其余為水。所述微膠囊產(chǎn)品中活菌數(shù)濃度達(dá)到2. 5X 101(lCfU/g。所述制粒采用油相分離法或擠壓法。所述制粒采用擠壓法。上述豬源植物乳桿菌微膠囊在飼養(yǎng)家畜中的應(yīng)用。所述家畜指豬。本發(fā)明提供的豬源植物乳桿菌微膠囊，在主要制備步驟上與現(xiàn)有微膠囊機(jī)制步驟 沒有明顯差別，主要包括先與保護(hù)劑混合，然后與囊壁材料混合得到微膠囊基質(zhì)，微膠囊基 質(zhì)轉(zhuǎn)入到制粒設(shè)備中制粒，最后將得到的微粒進(jìn)行固定等步驟。其特點(diǎn)在于，本發(fā)明制備的 微膠囊主要用于家畜，制備的微膠囊適合家畜的腸胃特點(diǎn)及生長特性。本發(fā)明從微膠囊的 相對硬度、韌性、菌存活時(shí)間以及對菌體的釋放性能方面評(píng)價(jià)，通過對菌泥與保護(hù)劑的比例 的篩選，囊壁材料的比例篩選以及固定劑濃度的篩選獲得了專適于制備豬源植物乳桿菌的 微膠囊制劑。如囊壁材料選擇1. 5 2. 5%的海藻酸鈉，1. 5 2%海藻酸鈉形成的微膠 囊顆粒硬度合適，彈性好，不易破裂，低于其濃度(如1%)所形成的微膠囊較軟，容易破裂， 而高于其濃度(如2. 5%)所形成的微膠囊顆粒硬，彈性好，但成粒慢，不利于微膠囊的制作 (見表2)。固定劑采用2 5% (W/W)的氯化鈣溶液，氯化鈣2%時(shí)，植物乳桿菌微膠囊釋 放性最佳，釋放率為59.8%，其中活菌數(shù)沒有顯著區(qū)別(見表3)。菌泥與保護(hù)劑混合均勻， 制成菌懸液，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)應(yīng)用需要調(diào)整菌泥與保護(hù)劑的比例以便于獲得所需 的活菌濃度。本發(fā)明的實(shí)施方式中公開了囊壁材料海藻酸鈉的最佳比例、固定劑的最佳濃度、 保護(hù)劑的最適成分以及最優(yōu)選的制粒方法，各個(gè)因素產(chǎn)生的積極技術(shù)效果見具體實(shí)施中。本發(fā)明的具體實(shí)施方式
還記錄了本發(fā)明的豬源植物乳桿菌微膠囊在飼喂家畜中 的應(yīng)用及其所能夠產(chǎn)生的積極效果，說明本發(fā)明的豬源植物乳桿菌微膠囊可作為一種優(yōu)良 的飼料添加劑。


圖1植物乳桿菌兩種劑型在人工胃液中存活率比較圖2植物乳桿菌兩種劑型在豬膽鹽中存活率比較圖3室溫下貯存對微膠囊化乳酸菌活菌數(shù)的影響圖4植物乳桿菌微膠囊制劑對保育豬抗氧化能力的影響圖5植物乳桿菌微膠囊制劑對保育豬免疫力的影響具體實(shí)施方法
實(shí)施例1植物乳桿菌微膠囊制劑的制備1.1 材料植物乳桿菌，由北京市農(nóng)林科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所動(dòng)物營養(yǎng)與繁育研究室保存， 從60日齡斷奶仔豬盲腸黏膜分離得到，由中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心鑒定為植物 乳桿菌(Lactobacillus plantarum)。海藻酸鈉作為微膠囊囊壁材料，氯化鈣作為微膠囊固定材料，蔗糖、脫脂乳、糊精、 滑石粉等作為保護(hù)劑，研究室自制微膠囊生成器進(jìn)行制粒。1. 2 方法微膠囊的制備方法菌種活化后進(jìn)行發(fā)酵擴(kuò)大培養(yǎng)，而后經(jīng)6000rpm離心lOmin， 將菌泥與保護(hù)劑充分混合均勻，制成菌懸液再與海藻酸鈉溶液混合后得到微膠囊基質(zhì)，菌 泥與保護(hù)劑按比例混合使獲得的微膠囊基質(zhì)中活菌濃度達(dá)到109cfu/mL，海藻酸鈉占微膠 囊基質(zhì)的比例見表2，制備微膠囊前體，獲得的微膠囊前體在氯化鈣溶液(濃度見表3)中固 定，過濾，真空冷凍干燥24h獲得微膠囊產(chǎn)品，微膠囊產(chǎn)品中活菌濃度達(dá)到101(lCfU/g。1. 2. 1植物乳桿菌微膠囊最佳方法的確定將菌株活化后，接種于MRS液體培養(yǎng)基中37°C下培養(yǎng)20h，6000rpm離心IOmin取 菌泥，將菌泥重新懸浮在保護(hù)劑中，使最終活菌濃度達(dá)到109cfu/mL，制成細(xì)菌懸浮液，備 用。分別采用油相分離法、水相分離法和擠壓法制備微膠囊，觀察微膠囊形狀、粒徑、包埋產(chǎn) 率、包埋效率，根據(jù)結(jié)果確定最佳制備方法。油相分離法具體步驟為將細(xì)菌懸浮液與海藻酸鈉溶液混合均勻后，加入0.5% 大豆色拉油中，用磁力攪拌器攪拌形成無明顯水相的W/0均勻渾濁乳狀液，然后快速加入 2%氯化鈣水溶液，直至WO乳狀液被破壞，形成海藻酸鈣膠粒。膠粒通過低速離心收集，洗 滌三次，得到微膠囊產(chǎn)品。水相分離法具體步驟將5%的明膠溶液和5%阿拉伯膠溶液等體積混合，在可加 熱磁力攪拌器上攪拌，加入細(xì)菌懸浮液，再加入2倍體積的30 40°C的溫水，用10%的醋 酸水溶液將混合液PH調(diào)至4. 0左右，繼續(xù)攪拌5min后停止加熱。按原膠液的1 %緩慢加入 福爾馬林，攪拌0. 5h，用lmol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7. 0 7. 5，再攪拌2h，最后離心 取沉淀物即為微膠囊產(chǎn)品。擠壓法具體步驟將細(xì)菌懸浮液與海藻酸鈉溶液混合均勻后，用注射器擠入2% 氯化鈣溶液中，固化20min，過濾取得微膠囊產(chǎn)品。由結(jié)果可知，擠壓法得到的微膠囊顆粒較好，因此，確定擠壓法為最佳微膠囊制備 方法。表1幾種乳酸菌微膠囊制備方法的比較 1. 2. 2不同濃度海藻酸鈉對植物乳桿菌微膠囊硬度的影響分別采用1%、1. 5%,2%,2. 5%濃度的海藻酸鈉制備微膠囊顆粒，將所得顆粒低 于2%氯化鈣內(nèi)固化20min，用小勺擠壓微膠囊判斷微膠囊硬度。由表2可知，1. 5%和2% 海藻酸鈉形成的微膠囊顆粒均相對較硬，彈性好，不易破裂，低于其濃度(如)所形成的 微膠囊較軟，容易破裂，而高于其濃度(如2. 5% )所形成的微膠囊顆粒硬，彈性好，但成粒 慢，不利于微膠囊的制作，另外，從成本出發(fā)，選擇1. 5%為最佳海藻酸鈉濃度。表2不同濃度海藻酸鈉對微膠囊硬度的影響 1. 2. 3不同氯化鈣濃度對植物乳桿菌微膠囊釋放性的影響分別采用2%、3%、4%、5%濃度的氯化鈣，固定20min后，進(jìn)行真空冷凍干燥。凍 干后準(zhǔn)確稱取Ig微膠囊，溶于人工腸液中，37°C保溫2h后測定活菌數(shù)，對照組將微膠囊粉 碎后測定活菌數(shù)，計(jì)算微膠囊釋放性，確定最佳氯化鈣濃度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，氯化鈣2%時(shí)，植物 乳桿菌微膠囊釋放性最佳，釋放率為59. 8%。表3不同濃度氯化鈣對微膠囊釋放性的影響
氯化鈣濃度2%3%4%5%
液體活菌數(shù)(cfu/ml)2. 74X10'° 1.80X1010 3. 85X IO10 2. IXlO10 1. 2. 4不同保護(hù)劑濃度對植物乳桿菌微膠囊成粒性、制備速率及產(chǎn)品性狀的影響將菌株活化后，離心取菌泥，加入不同的保護(hù)劑，測定活菌數(shù)，并觀察微膠囊成粒 性、制備速率及凍干后性狀。由結(jié)果可知，1、2、4組不添加糊精或添加5%糊精后，植物乳桿 菌微膠囊顆粒均較空，不利用保存，而3組添加10%糊精后，雖然微膠囊顆粒較實(shí)，但微膠 囊化速度慢，不利用批量生產(chǎn)，5、6組在前幾組基礎(chǔ)上添加了不同比例的滑石粉，結(jié)果較好， 從提高產(chǎn)量考慮，選擇6組為最佳保護(hù)劑。表4不同保護(hù)劑對微膠囊工藝和特性的影響 1. 2. 5植物乳桿菌微膠囊制劑中活菌數(shù)測定將擠壓的微膠囊顆粒真空冷凍干燥后，取Ig產(chǎn)品置于人工腸液中，待其完全釋放 后，測定活菌數(shù)。測得活菌數(shù)為2. 5X101(lCfU/g。1. 2. 6植物乳桿菌微膠囊制劑的抗逆性試驗(yàn)1. 2. 6. 1植物乳桿菌微膠囊制劑的耐酸性試驗(yàn)取Ig微膠囊，置于？!1 = 2.0的人工胃液中371保溫0、1、2、311，計(jì)算存活率；同時(shí)， 將活化菌株按5%接種量接種于人工胃液中處理相同時(shí)間，測定液體制劑存活率，比較植物 乳桿菌兩種劑型在人工胃液中的存活情況，見圖1。由表5可知，與未經(jīng)微膠囊包被的植物 乳桿菌相比，微膠囊包被后能夠提高該菌在PH = 2.0的人工胃液中的存活率，在人工胃液 中放置3h，其存活率仍可達(dá)62. 37%。表5植物乳桿菌兩種劑型在人工胃液中存活率比較 1. 2. 6. 2植物乳桿菌微膠囊制劑的耐膽鹽試驗(yàn)準(zhǔn)確稱取Ig微膠囊，置于含有0. 3%豬膽鹽的液體MRS培養(yǎng)基中，37°C保溫0、1、 3、6h，計(jì)算存活率。同時(shí)，將活化菌株按5%接種量接種于含有0. 3%豬膽鹽的液體MRS培 養(yǎng)基中處理相同時(shí)間，測定液體制劑存活率，比較植物乳桿菌兩種劑型在豬膽鹽中的存活 情況，如圖2。由表6可知，經(jīng)過微膠囊包被能夠提高植物乳桿菌在豬膽鹽中的存活率，在 0. 3%濃度的豬膽鹽放置6h，仍有84. 36%的存活率。表6植物乳桿菌兩種劑型在豬膽鹽中存活率比較 1.2. 6.3植物乳桿菌微膠囊穩(wěn)定性試驗(yàn)將植物乳桿菌微膠囊產(chǎn)品置于自封袋中常溫保存，分別在0、7、15、23、30、45、60d 取適量測定活菌數(shù)，計(jì)算存活率。由圖3可知，植物乳桿菌經(jīng)過微膠囊包被后，常溫狀態(tài)貯 存60d，活菌數(shù)仍可達(dá)1. 88 X 101QCfu/g。表7室溫下貯存對微膠囊化乳酸菌活菌數(shù)的影響 實(shí)施例2植物乳桿菌微膠囊制劑對保育豬生產(chǎn)性能、抗氧化能力以及免疫力的影 響2. 1試驗(yàn)動(dòng)物與分組選取健康的35日齡斷奶的保育豬64頭(杜X長X大三元雜交豬)，根據(jù)“日齡 相近、體重相當(dāng)”的原則，隨機(jī)分成兩組，分別為對照組和試驗(yàn)組，每組設(shè)兩個(gè)重復(fù)，每個(gè)重 復(fù)16頭斷奶仔豬。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧+抗生素(每IOOkg全價(jià)料添加粘桿菌素0. 98g、 桿菌肽鋅4g、洛克沙胂5g)；試驗(yàn)組飼喂基礎(chǔ)日糧+0.1%植物乳桿菌微膠囊。預(yù)飼期5d，正 式試驗(yàn)期為30d。試驗(yàn)在封閉式豬舍內(nèi)進(jìn)行，水泥地面，網(wǎng)床圈養(yǎng)，自由采食，以鴨嘴式飲水 器提供充足清潔飲水。免疫、驅(qū)蟲和消毒按豬場規(guī)程進(jìn)行。2. 2試驗(yàn)飼糧設(shè)計(jì)供飼日糧參照我國《豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》配制，日糧配方及營養(yǎng)水平見表8。表8基礎(chǔ)日糧配方和營養(yǎng)水平 注每千克日糧提供維生素Al3500IU ；維生素D32850IU ；維生素E64mg ；維生 素Κ32· 4mg ；維生素B^. 4mg ；維生素B26. 6mg ；維生素B63mg ；維生素B12O. 045mg ；煙酰胺 25. 5mg ；泛酸 13. 5mg ；生物素 0. 12mg ；銅 12mg ；鐵 150mg ；鋅 155mg ；錳 55mg ；碘.5mg ；硒 0. 3mg。2. 3 方法試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)，早飼前個(gè)體空腹稱重，計(jì)算平均日增重、采食量和料肉比； 每日清晨觀察和記錄保育豬腹瀉情況；試驗(yàn)結(jié)束后，從每個(gè)組隨機(jī)挑選8頭保育豬，前腔 靜脈采血5mL，獲取血清測定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽過氧化物酶 (GSH-Px)、白介素-2 (IL-2)和結(jié)合珠蛋白(Hp)。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SAS9. 0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因 素方差分析，結(jié)果以平均值士標(biāo)準(zhǔn)差表示。2. 4結(jié)果與分析2. 4. 1植物乳桿菌微膠囊制劑對保育豬生產(chǎn)性能的影響由表9可知，飼喂植物乳桿菌微膠囊制劑后保育豬平均日增重達(dá)578. 74g/d，比對 照組提高了 12. 04%，飼料轉(zhuǎn)化率1. 87 1，比對照組提高了 13. 02%。由此可見，植物乳桿 菌微膠囊制劑能夠促進(jìn)保育豬生長，提高其飼料利用率。表9植物乳桿菌微膠囊對保育豬生產(chǎn)性能的影響

注同肩標(biāo)注不同代表差異顯著，大寫字母不同表示差異極顯著(P <0.01)，小寫 字母不同表示差異顯著(P < 0. 05)。2. 4. 2植物乳桿菌微膠囊制劑對保育豬腹瀉情況的影響整個(gè)試驗(yàn)期間，對照組和對照組全期腹瀉頭次、腹瀉頻率見表10。腹瀉頻率=腹瀉 頭數(shù)/ (供試豬頭數(shù)X試驗(yàn)天數(shù))。由表10可知，在整個(gè)試驗(yàn)期間，對照組腹瀉豬達(dá)59頭次，由腹瀉造成的死亡數(shù) 為3頭，而試驗(yàn)組添加植物乳桿菌微膠囊后，腹瀉豬為24頭次，腹瀉頻率比對照組降低了 7.29%。由此可見，飼喂植物乳桿菌微膠囊制劑能夠降低保育豬腹瀉率和死亡率。這主要 是由于植物乳桿菌到達(dá)動(dòng)物腸道后能夠增加有益菌的數(shù)量，減少有害菌的生長和繁殖，起 到調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡的作用，從而減少豬體腹瀉。表10植物乳桿菌微膠囊對保育豬腹瀉情況的影響

2. 4. 3植物乳桿菌微膠囊制劑對保育豬抗氧化能力的影響丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)均為機(jī) 體重要的抗氧化指標(biāo)，其中，降低MDA含量可減輕機(jī)體組織細(xì)胞的脂質(zhì)過氧化程度，而提高SOD和GSH-Px的活性則可以增強(qiáng)機(jī)體清除氧自由基的能力，從而起到保護(hù)機(jī)體細(xì)胞結(jié)構(gòu)和 功能完整性的作用，以提高機(jī)體的抗氧化能力。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)組保育豬血清中MDA含量比 對照組降低了 34. 1 %，而SOD和GSH-Px含量則分別比對照組提高了 4%和13. 8%。因此證 明了植物乳桿菌微膠囊制劑具有提高豬體抗氧化能力的作用，見圖4。表11植物乳桿菌微膠囊制劑對保育豬抗氧化能力的影響 注1.同肩標(biāo)注不同代表差異顯著，大寫字母不同表示差異極顯著(P<0.01)，小 寫字母不同表示差異顯著(P < 0. 05)。2.酶活力規(guī)定每0. Iml血清在37。C反應(yīng)5分鐘，扣除非酶促反應(yīng)作用，使反應(yīng)體 系中GSH濃度降低1 μ mol/L為一個(gè)酶活力單位。2. 4. 4植物乳桿菌微膠囊制劑對保育豬免疫力的影響植物乳桿菌微膠囊制劑對保育豬血清中白介素2 (IL-2)結(jié)合珠蛋白(Hp)的影響 見表12、。由結(jié)果可知，試驗(yàn)組保育豬血清中IL-2含量比對照組提高了 1. 6倍，而Hp含量 比對照組降低了 19. 3%，見圖5。IL-2和Hp是機(jī)體非特異性免疫的兩個(gè)重要指標(biāo)。其中，IL-2是體內(nèi)重要的免疫 增強(qiáng)因子，可誘導(dǎo)多種殺傷細(xì)胞和B細(xì)胞的分化以及效應(yīng)功能，并能誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞產(chǎn)生多 種細(xì)胞因子。Hp是一種存在于血清中的急性期蛋白，其含量會(huì)隨著機(jī)體感染、炎癥和損傷而 增加。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，日糧中添加植物乳桿菌微膠囊制劑能夠增加保育豬血清中IL-2含 量，降低Hp含量，因此，從本試驗(yàn)結(jié)果可知，該膠囊制劑對于增強(qiáng)保育豬機(jī)體的非特異性免 疫力具有積極的作用。表12植物乳桿菌微膠囊制劑對保育豬抗氧化能力的影響

權(quán)利要求
豬源植物乳桿菌微膠囊，其制備步驟如下(1)將豬源植物乳桿菌的菌泥與保護(hù)劑均勻混合制成菌懸液，然后與海藻酸鈉溶液混合均勻得到微膠囊基質(zhì)；(2)制備微膠囊前體；(3)將步驟(2)制得的微膠囊前體置于2～5％(W/W)的氯化鈣溶液中固定；(4).步驟(3)固定得到的微膠囊顆粒真空凍干24h得到微膠囊產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬源植物乳桿菌微膠囊，在微膠囊基質(zhì)中海藻酸鈉的終濃度 為 1. 5% (W/W)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬源植物乳桿菌微膠囊，所述氯化鈣溶液的濃度為2%(W/W)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬源植物乳桿菌微膠囊，所述保護(hù)劑的材料及其重量百分比 為蔗糖3 10%、乳糖2 5%、脫脂乳2 5%、葡萄糖0 2%、甘油0 2%、糊精0 10 %、滑石粉0 10%，其余為水。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的豬源植物乳桿菌微膠囊，所述保護(hù)劑的材料及其重量百分比 為蔗糖3%、乳糖5%、脫脂乳5%、糊精5%、滑石粉10%，其余為水。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬源植物乳桿菌微膠囊，所述微膠囊產(chǎn)品中活菌數(shù)濃度達(dá)到 2. 5X10lclcfu/g。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬源植物乳桿菌微膠囊，所述制粒采用油相分離法或擠壓法。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的豬源植物乳桿菌微膠囊，所述制粒采用擠壓法。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬源植物乳桿菌微膠囊，上述豬源植物乳桿菌微膠囊在飼養(yǎng) 家畜中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的豬源植物乳桿菌微膠囊，所述家畜指豬。
全文摘要
本發(fā)明“豬源植物乳桿菌微膠囊及其應(yīng)用”，屬于畜牧業(yè)微生物制劑。豬源植物乳桿菌微膠囊，其制備方法如下(1)將豬源植物乳桿菌的菌泥與保護(hù)劑均勻混合制成菌懸液，然后與海藻酸鈉溶液混合均勻得到微膠囊基質(zhì)；(2)制備微膠囊前體；(3)將步驟(2)制得的微膠囊前體置于2～5％(W/W)的氯化鈣溶液中固定；(4)步驟(3)固定得到的微膠囊顆粒真空凍干24h得到微膠囊產(chǎn)品。該微膠囊制劑具有良好的耐酸、耐膽鹽及耐貯存能力，微膠囊制劑中的活菌數(shù)≥2.0×1010cfu/g，將本發(fā)明的微膠囊制劑添加到保育豬飼料中，結(jié)果證明該制劑能夠提高保育豬抗氧化能力和免疫力，具有提高保育豬日增重和飼料轉(zhuǎn)化率、降低腹瀉率的作用。
文檔編號(hào)A23K1/18GK101912046SQ20101027043
公開日2010年12月15日 申請日期2010年9月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月1日
發(fā)明者劉輝, 單達(dá)聰, 季海峰, 張董燕, 王四新, 王雅民 申請人:北京市農(nóng)林科學(xué)院