專(zhuān)利名稱(chēng):金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法。
背景技術(shù):
金線蓮(Anoectochilusroxburghii (wall. ) lindl)為蘭科開(kāi)唇蘭屬多年生草 本,別名金蠶、金線蘭、金線虎頭蕉等,是一種瀕危珍稀藥用植物,素有“金草”、“神藥”、“烏 人參”等美稱(chēng),在民間應(yīng)用范圍較廣,廣泛應(yīng)用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、高血壓病、糖尿病、腎病等 疑難雜癥的治療和強(qiáng)身健體、病后體虛恢復(fù)等方面,在浙江、福建、臺(tái)灣等省和東南亞地區(qū) 被視為珍稀名貴藥材,特別在臺(tái)灣省更是備受青睞,被稱(chēng)為“藥中之王”。金線蓮種子微小,由未成熟的胚及數(shù)層種皮細(xì)胞構(gòu)成,自然條件下,金線蓮種子難 以萌發(fā)(萌發(fā)率低于5%),近年來(lái),隨著對(duì)其藥效學(xué)和臨床應(yīng)用研究的深入,對(duì)金線蓮藥用價(jià) 值的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步提高,其市場(chǎng)貨源緊缺的狀況更為嚴(yán)峻,野生資源也不斷遭到破壞性采挖, 以致于金線蓮處于瀕臨滅絕之地。因此,只有解決金線蓮種苗來(lái)源,加快人工栽培,才能保 護(hù)金線蓮野生資源、穩(wěn)定市場(chǎng)供應(yīng),提高金線蓮規(guī)?;M培種植經(jīng)濟(jì)效益,使金線蓮這一珍 稀植物種苗的生產(chǎn)實(shí)現(xiàn)集約化、規(guī)模化和專(zhuān)業(yè)化,促進(jìn)地方特色資源向產(chǎn)業(yè)化發(fā)展,加快山 區(qū)農(nóng)民脫貧致富。常規(guī)的金線蓮組織培養(yǎng)技術(shù)主要包含叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)和壯苗植株兩個(gè)步驟,存在 以下不足之處
(1)傳統(tǒng)的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)和壯苗植株的培養(yǎng)方式既靠培養(yǎng)基中的糖又靠人工光照, 使植株同時(shí)進(jìn)行異養(yǎng)和自養(yǎng)生長(zhǎng)(兼養(yǎng))。在異養(yǎng)和兼養(yǎng)的條件下,小植株主要依靠培養(yǎng)基 中的糖作為碳源,極易引起微生物的污染;
(2)由于培養(yǎng)基中糖的存在,會(huì)導(dǎo)致葉片表層結(jié)構(gòu)發(fā)育差,氣孔開(kāi)閉功能不強(qiáng),葉片小, 葉綠素含量降低,最終抑制和降低了小植株的光合作用能力;
(3)傳統(tǒng)組培育苗成本高,組培時(shí)間最少達(dá)4個(gè)月以上,才能長(zhǎng)成7公分高的壯苗,植株 成活率低。(4)傳統(tǒng)人工組培金線蓮主要成分含量均低于野生金線蓮指標(biāo)。(5)傳統(tǒng)金線蓮組織培養(yǎng)技術(shù)成本高,糖的成本占培養(yǎng)基成本的12%_15% (按每瓶 培養(yǎng)基加30g糖計(jì))。
發(fā)明內(nèi)容
為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述問(wèn)題,本發(fā)明提供了一種金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方 法,它不僅可提高金線蓮植株的生根率和成苗率,而且可降低生產(chǎn)組培成本。本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣構(gòu)成的,一種金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法,其特征在于,它 包括以下步驟
①植物體的選擇和無(wú)菌處理選擇6-8月份生長(zhǎng)的金線蓮為種源,除去根和葉并進(jìn)行 清洗和無(wú)菌處理后,剪成帶莖節(jié)的金線蓮小段組織;
3②叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)將經(jīng)過(guò)步驟①處理的金線蓮小段組織接種至無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基內(nèi), 置于上開(kāi)口敞開(kāi)的培養(yǎng)箱中進(jìn)行組織誘導(dǎo)培養(yǎng)叢生芽;培養(yǎng)周期為20-60天,培養(yǎng)溫度為 20-30°C,光照時(shí)間為8-20小時(shí)/天,光照強(qiáng)度為50-100 μ mol/m2-s ;所述無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基 包含以下成分MS培養(yǎng)基、多孔無(wú)機(jī)材料、α -萘乙酸和6-芐氨基嘌呤;所述多孔無(wú)機(jī)材料 由蛭石或珍珠巖或砂中的一種或一種以上構(gòu)成,多孔無(wú)機(jī)材料的含量為4-10g/L,α-萘乙 酸的含量為0. 1-3. 0mg/L,6-芐氨基嘌呤的含量為2-%ig/L,pH值為5-6 ;
③壯苗培養(yǎng)將步驟②誘導(dǎo)出的叢生芽植入無(wú)糖壯苗培養(yǎng)基中,置于上開(kāi)口敞開(kāi)的培 養(yǎng)箱中進(jìn)行壯苗培養(yǎng);培養(yǎng)周期為20-60天,培養(yǎng)溫度為20-35°C,光照時(shí)間為8_20小時(shí)/ 天,光照強(qiáng)度為50-100 μ mol/m2-s ;所述無(wú)糖壯苗培養(yǎng)基包含以下成分B5培養(yǎng)基、多孔無(wú) 機(jī)材料、蛋白胨、花寶1號(hào)、香蕉泥和活性炭,所述多孔無(wú)機(jī)材料由蛭石或珍珠巖或砂中的 一種或一種以上構(gòu)成,多孔無(wú)機(jī)材料的含量為2-10g/L,蛋白胨的含量為l_5g/L、花寶1號(hào) 的含量為0.1-3. Og/L、香蕉泥的含量為20-150 g/L,活性炭的含量為0. 1-3 g/L,pH值為 5. 5-6. O0本發(fā)明金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法的一個(gè)重要特征(同時(shí)也是本發(fā)明與常規(guī)植物組 培技術(shù)最大的差異之處)是改變了培養(yǎng)基的成分,使培養(yǎng)基中不再含有糖,另一個(gè)重要特征 是將培養(yǎng)容器由以往的在小玻璃瓶?jī)?nèi)幾乎封閉式養(yǎng)殖改為在上開(kāi)口敞開(kāi)的培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行 敞開(kāi)式培養(yǎng),使植株與空氣中(X)2的接觸面積有效擴(kuò)大,從而改變碳源的供給途徑,使(X)2代 替糖作為植物體的碳源,這樣只要適當(dāng)控制培養(yǎng)環(huán)境因子,即可促進(jìn)植株光合作用速率,使 金線蓮組培苗由異養(yǎng)型轉(zhuǎn)變?yōu)樽责B(yǎng)型。由于培養(yǎng)基中不含糖,因此不僅可大幅度減少植物 組培快繁生產(chǎn)過(guò)程中的微生物污染,提高植株的生根率、成苗率和種苗質(zhì)量;而且可大大降 低組培生產(chǎn)成本。此外,本發(fā)明還有一個(gè)重要特征就是采用蛭石作為培養(yǎng)基的主要成分。在植物組 織培養(yǎng)中,培養(yǎng)基質(zhì)的種類(lèi)是十分重要的,它直接影響植株根區(qū)的環(huán)境及植株的生根率。疑 膠狀的特質(zhì)如瓊脂、卡那膠通常被用作組培苗的培養(yǎng)基質(zhì)。但植株的根系在瓊脂中的發(fā)育 一般瘦小且脆弱,當(dāng)移植到過(guò)渡培養(yǎng)的土壤時(shí)容易被損壞。事實(shí)上,多孔的無(wú)機(jī)材料,例如 塑料泡沫、蛭石、珍珠巖、巖棉、陶粒、纖維素等也能用作培養(yǎng)基質(zhì)。通過(guò)試驗(yàn)表明,多孔的 無(wú)機(jī)材料比凝膠狀的物質(zhì)的培養(yǎng)效果好,多孔的無(wú)機(jī)材料與價(jià)格昂貴的瓊脂及其他凝膠狀 的物質(zhì)相比,不僅生長(zhǎng)量增加,而且生產(chǎn)成本降低。這主要是由于多孔(測(cè)量體積空氣百分 率),空氣擴(kuò)散系數(shù)高、植株的根區(qū)環(huán)境中有較高的氧濃度,從而有利于促進(jìn)小植物的生長(zhǎng)。 在供試的無(wú)機(jī)材料基質(zhì)中,蛭石比珍珠巖和砂好。較之現(xiàn)有技術(shù)而言,本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于不僅可大幅度減少植物組培快繁生產(chǎn)過(guò) 程中的微生物污染,提高植株的生根率、成苗率和種苗質(zhì)量;而且可使組培生產(chǎn)成本大大降 低。通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明通過(guò)本發(fā)明方法培育的金線蓮植株不僅長(zhǎng)勢(shì)良好,產(chǎn)量高,品質(zhì)好,不污 染環(huán)境,3個(gè)月后植株成活率達(dá)100%,大大縮短金線蓮組培成苗時(shí)間,顯著提高培養(yǎng)效率, 而且生物量較有糖培養(yǎng)得到顯著增加,改變了人工培育植物有效成功普遍低于野生植物性 能指標(biāo)的現(xiàn)狀;因此本發(fā)明有利于金線蓮快速繁殖,可實(shí)現(xiàn)規(guī)?;a(chǎn),其推廣應(yīng)用有利 于緩解野生金線蓮的自然資源匱乏與市場(chǎng)需求緊缺的現(xiàn)狀。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式
和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明 具體實(shí)施例方式
本發(fā)明提供了一種金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法的具體實(shí)施方式
,它包括以下步驟
①植物體的選擇和無(wú)菌處理選擇6-8月份生長(zhǎng)的金線蓮為種源(所述的金線蓮優(yōu)選 福建永安當(dāng)?shù)匾吧鹁€蓮,當(dāng)然也可選擇在其它產(chǎn)地生長(zhǎng)的金線蓮作為種源),除去根和葉 并進(jìn)行清洗和無(wú)菌處理后,剪成帶莖節(jié)的金線蓮小段組織(約0. 5-1. 5cm長(zhǎng));
②叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)將經(jīng)過(guò)步驟①處理的金線蓮小段組織接種至無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基內(nèi), 置于上開(kāi)口敞開(kāi)的培養(yǎng)箱中進(jìn)行組織誘導(dǎo)培養(yǎng)叢生芽;培養(yǎng)周期為20-60天,培養(yǎng)溫度為 20-30°C,光照時(shí)間為8-20小時(shí)/天,光照強(qiáng)度為50-100 μ mol/m2-s ;所述無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基 包含以下成分MS培養(yǎng)基、多孔無(wú)機(jī)材料、α -萘乙酸和6-芐氨基嘌呤;所述多孔無(wú)機(jī)材料 由蛭石或珍珠巖或砂中的一種或一種以上構(gòu)成,多孔無(wú)機(jī)材料的含量為4-10g/L,α-萘乙 酸的含量為0. 1-3. 0mg/L,6-芐氨基嘌呤的含量為2-%ig/L,pH值為5-6 ;
③壯苗培養(yǎng)將步驟②誘導(dǎo)出的叢生芽植入無(wú)糖壯苗培養(yǎng)基中,置于上開(kāi)口敞開(kāi)的培 養(yǎng)箱中進(jìn)行壯苗培養(yǎng);培養(yǎng)周期為20-60天,培養(yǎng)溫度為20-35°C,光照時(shí)間為8_20小時(shí)/ 天,光照強(qiáng)度為50-100 μ mol/m2-s ;所述無(wú)糖壯苗培養(yǎng)基包含以下成分B5培養(yǎng)基、多孔無(wú) 機(jī)材料、蛋白胨、花寶1號(hào)、香蕉泥和活性炭,所述多孔無(wú)機(jī)材料由蛭石或珍珠巖或砂中的一 種或一種以上構(gòu)成,多孔無(wú)機(jī)材料的含量為2-10g/L,蛋白胨的含量為l_5g/L、花寶1號(hào)的含 量為0. 1-3. Og/L、香蕉泥的含量為20-150 g/L,活性炭的含量為0. 1-3 g/L,pH值為5. 5-6. 0。在步驟②所述的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)中,多孔無(wú)機(jī)材料最好由蛭石構(gòu)成。在所述無(wú)糖 誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,蛭石的優(yōu)選含量為6-8g/L,α -萘乙酸的優(yōu)選含量為0. 1-0. aiig/L,6-芐氨 基嘌呤的優(yōu)選含量為2-;3mg/L。在所述無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,蛭石的最佳含量為8g/L,α -萘 乙酸的最佳含量為0. 2mg/L,6-芐氨基嘌呤的最佳含量為ang/L。此外,在步驟②所述的叢 生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)中,一種較優(yōu)的培養(yǎng)條件如下培養(yǎng)周期為30-45天,培養(yǎng)溫度為25-28°C,光 照時(shí)間為8-14小時(shí)/天,光照強(qiáng)度為50-80 μ mol/m2 · s。在步驟③所述的壯苗培養(yǎng)中,多孔無(wú)機(jī)材料最好由蛭石構(gòu)成。在所述無(wú)糖壯苗培 養(yǎng)基中,蛭石的含量?jī)?yōu)選為4-8g/L,蛋白胨的含量?jī)?yōu)選為2-3g/L,花寶1號(hào)的含量?jī)?yōu)選為 2_3g/L,香蕉泥的含量?jī)?yōu)選為80-120g/L,活性炭的含量?jī)?yōu)選為2_3g/L。在所述無(wú)糖壯苗 培養(yǎng)基中,蛭石的最佳含量為8g/L,蛋白胨的最佳含量為2g/L,花寶1號(hào)的最佳含量為3g/ L,香蕉泥的最佳含量為100g/L,活性炭的最佳含量為2g/L。此外,在步驟③所述的壯苗培 養(yǎng)中,一種較優(yōu)的培養(yǎng)條件如下培養(yǎng)周期為40-50天,培養(yǎng)溫度為2548°C,光照時(shí)間為 10-16小時(shí)/天,光照強(qiáng)度為50-80 μ mol/m2 · s。為了進(jìn)一步提高對(duì)植株的光照效果,從而促進(jìn)植株的光合作用,所述培養(yǎng)箱的箱 壁最好由透光材料制成。(二)實(shí)施例
選擇6-8月份福建永安當(dāng)?shù)厣L(zhǎng)的野生金線蓮為種源,除去根和葉并進(jìn)行清洗和無(wú)菌 處理后,剪成約0. 5-1. 5cm長(zhǎng)的帶莖節(jié)的金線蓮小段組織后按以下步驟培養(yǎng)
首先進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)將經(jīng)過(guò)步驟①處理的金線蓮小段組織接種至無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng) 基內(nèi),置于上開(kāi)口敞開(kāi)的培養(yǎng)箱中進(jìn)行組織誘導(dǎo)培養(yǎng)叢生芽,培養(yǎng)過(guò)程中,按表1所示采用不同的無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基配比和培養(yǎng)條件分成6組進(jìn)行培養(yǎng) 表1
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接著進(jìn)行壯苗培養(yǎng)將通過(guò)上述6組培養(yǎng)誘導(dǎo)出的叢生芽分別按表2所示的壯苗培養(yǎng) 基配比和培養(yǎng)條件繼續(xù)分成6組植入無(wú)糖壯苗培養(yǎng)基中,置于上開(kāi)口敞開(kāi)的培養(yǎng)箱中進(jìn)行 壯苗培養(yǎng); 表2
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通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示本發(fā)明6組實(shí)施例組培獲得的金線蓮基本上都能夠在3個(gè)月 左右的時(shí)間快速長(zhǎng)成8公分高度的壯苗,每株苗重量平均1. 4g,苗株直徑達(dá)到3mm以上,每 個(gè)外植體平均成苗數(shù)5. 8株,每株平均葉凈增3. 8張、平均發(fā)根數(shù)3. 5條。組培苗移栽至基 質(zhì)中生長(zhǎng)良好,3個(gè)月后植株成活率達(dá)100%,不僅大大縮短了金線蓮組培成苗時(shí)間,而且 顯著提高了培養(yǎng)效率。此外,經(jīng)檢測(cè)6組實(shí)施例組培獲得的金線蓮各項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于野生金 線蓮指標(biāo),其中金線蓮主要有效成分粗多糖的平均檢測(cè)含量為2. 09mg/g (優(yōu)于野生金線蓮 粗多糖含量),總黃酮(以蘆丁計(jì))的平均檢測(cè)含量為0. 025g/100g,改變了人工培育植物有 效成功普遍低于野生植物性能指標(biāo)的現(xiàn)狀。
權(quán)利要求
1.一種金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法,其特征在于,它包括以下步驟①植物體的選擇和無(wú)菌處理選擇6-8月份生長(zhǎng)的金線蓮為種源,除去根和葉并進(jìn)行 清洗和無(wú)菌處理后,剪成帶莖節(jié)的金線蓮小段組織;②叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)將經(jīng)過(guò)步驟①處理的金線蓮小段組織接種至無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基內(nèi), 置于上開(kāi)口敞開(kāi)的培養(yǎng)箱中進(jìn)行組織誘導(dǎo)培養(yǎng)叢生芽;培養(yǎng)周期為20-60天,培養(yǎng)溫度為 20-30°C,光照時(shí)間為8-20小時(shí)/天,光照強(qiáng)度為50-100 μ mol/m2-s ;所述無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基 包含以下成分MS培養(yǎng)基、多孔無(wú)機(jī)材料、α -萘乙酸和6-芐氨基嘌呤;所述多孔無(wú)機(jī)材料 由蛭石或珍珠巖或砂中的一種或一種以上構(gòu)成,多孔無(wú)機(jī)材料的含量為4-10g/L,α-萘乙 酸的含量為0. 1-3. 0mg/L,6-芐氨基嘌呤的含量為2-%ig/L,pH值為5-6 ;③壯苗培養(yǎng)將步驟②誘導(dǎo)出的叢生芽植入無(wú)糖壯苗培養(yǎng)基中,置于上開(kāi)口敞開(kāi)的培 養(yǎng)箱中進(jìn)行壯苗培養(yǎng);培養(yǎng)周期為20-60天,培養(yǎng)溫度為20-35°C,光照時(shí)間為8_20小時(shí)/ 天,光照強(qiáng)度為50-100 μ mol/m2-s ;所述無(wú)糖壯苗培養(yǎng)基包含以下成分B5培養(yǎng)基、多孔無(wú) 機(jī)材料、蛋白胨、花寶1號(hào)、香蕉泥和活性炭,所述多孔無(wú)機(jī)材料由蛭石或珍珠巖或砂中的 一種或一種以上構(gòu)成,多孔無(wú)機(jī)材料的含量為2-10g/L,蛋白胨的含量為l_5g/L、花寶1號(hào) 的含量為0.1-3. Og/L、香蕉泥的含量為20-150 g/L,活性炭的含量為0. 1-3 g/L,pH值為 5. 5-6. O0
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法,其特征在于所述無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng) 基中,多孔無(wú)機(jī)材料由蛭石構(gòu)成,蛭石的含量為6-8g/L,α-萘乙酸的含量為0. 1-0. 2mg/L, 6-芐氨基嘌呤的含量為2-;3mg/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法,其特征在于所述無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng) 基中,蛭石的含量為8g/L,α -萘乙酸的含量為0. aiig/L、6-芐氨基嘌呤的含量為^iig/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法,其特征在于在步驟②所述的叢 生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)中,培養(yǎng)周期為30-45天,培養(yǎng)溫度為25-28°C,光照時(shí)間為8-14小時(shí)/天,光 照強(qiáng)度為 50-80 μ mol/m2 · s。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法,其特征在于所述無(wú)糖壯苗培養(yǎng) 基中,多孔無(wú)機(jī)材料由蛭石構(gòu)成,蛭石的含量為4-8g/L,蛋白胨的含量為2-3g/L,花寶1號(hào) 的含量為2-3g/L,香蕉泥的含量為80-120g/L,活性炭的含量為2_3g/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法,其特征在于所述無(wú)糖壯苗培養(yǎng) 基中,蛭石的含量為8g/L,蛋白胨的含量為2g/L,花寶1號(hào)的含量為3g/L,香蕉泥的含量為 100g/L,活性炭的含量為2g/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法,其特征在于在步驟③所述的壯 苗培養(yǎng)中,培養(yǎng)周期為40-50天,培養(yǎng)溫度為2548°C,光照時(shí)間為10-16小時(shí)/天,光照強(qiáng) 度為 50-80 μ mol/m2 · s。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法,其特征在于所述培 養(yǎng)箱的箱壁由透光材料制成。
全文摘要
本發(fā)明涉及金線蓮無(wú)糖組織培養(yǎng)方法,它是先將無(wú)菌處理過(guò)的金線蓮小段組織接種至無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基內(nèi),置于上開(kāi)口敞開(kāi)的培養(yǎng)箱中進(jìn)行組織誘導(dǎo)培養(yǎng)叢生芽,無(wú)糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基包含MS培養(yǎng)基、多孔無(wú)機(jī)材料4-10g/L、α-萘乙酸0.1-3.0mg/L和6-芐氨基嘌呤2-4mg/L,pH值為5-6;再將誘導(dǎo)出的叢生芽植入無(wú)糖壯苗培養(yǎng)基中,置于上開(kāi)口敞開(kāi)的培養(yǎng)箱中進(jìn)行壯苗培養(yǎng);無(wú)糖壯苗培養(yǎng)基包含B5培養(yǎng)基、多孔無(wú)機(jī)材料2-10g/L、蛋白胨1-5g/L、花寶1號(hào)0.1-3.0g/L、香蕉泥20-150g/L和活性炭0.1-3g/L,pH值為5.5-6.0。本發(fā)明可提高金線蓮植株的生根率和成苗率,降低生產(chǎn)組培成本。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102084813SQ201010603159
公開(kāi)日2011年6月8日 申請(qǐng)日期2010年12月23日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月23日
發(fā)明者林添發(fā), 潘健康 申請(qǐng)人:福建永安天奇健金線蓮生態(tài)實(shí)業(yè)有限公司