專利名稱：西藏靈菇快速增殖的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及西藏靈菇快速增殖的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
藏靈菇又名“西藏雪蓮”，是源自西藏雪原的特有珍稀菌種。從形態(tài)上看，藏靈菇是一種乳白色、膠質(zhì)狀的塊狀物，外型酷似米粒，在牛乳培養(yǎng)基中培養(yǎng)后體積會增大，而且在室溫下也可以培養(yǎng)，不易染菌。藏靈菇作為一種天然的乳品發(fā)酵劑，具有良好的發(fā)酵特性， 用它制作的酸奶與傳統(tǒng)自然發(fā)酵的酸奶或用其它純種乳酸菌發(fā)酵劑制成的酸奶有很大的不同，最顯著的特征是除常規(guī)乳酸發(fā)酵外，還伴有輕微的由酵母菌引起的酒精發(fā)酵。所以藏靈菇酸奶是一種集酸味、醇味于一體的新型發(fā)酵乳制品，具有很好的市場前景。由于西藏靈菇上棲息的微生物的某些特性及益生菌的種類不同于普通酸牛奶，因此與一般的酸奶相比，西藏靈菇酸奶具有特殊的營養(yǎng)功能和保健作用。靈菇酸奶分解出來的乳酸、碳酸氣有獨特味道能提高食欲，還能促進唾液分泌和腸道蠕動，平衡腸道細菌，對體內(nèi)促進作用比酸奶高；乳酸、醋酸及抗菌物質(zhì)可以抑制小腸腐敗菌的繁殖，防止腸道感染；微量的乙醇可以促進新陳代謝，使循環(huán)系統(tǒng)及神經(jīng)系統(tǒng)的活動正?；?，對于胃腸病、代謝異常病有較好的治療與預防作用；此外，據(jù)有關(guān)研究報道，西藏靈菇酸奶還具有明顯的降膽固醇和治療高血脂的作用，即可以改善動脈硬化，對平衡血壓(高壓降低、低壓升高)良好的作用，有效防止高血壓、冠心病等心血管疾??；其活性物質(zhì)成分以及微生物所產(chǎn)生的抑制致病菌的抗菌性物質(zhì)能抑制癌癥的發(fā)生及抑制癌細胞增殖；此外，西藏靈菇酸奶還具有增強機體非特異性免疫功能，從而增強機體的抵抗力，抗腫瘤作用顯著；另外，有研究報道西藏靈菇奶有明顯的消炎作用，并能消除疲勞，調(diào)整面部菌群失調(diào)，達到對異常性痤瘡的治療作用。正是藏靈菇的特殊功效，引起了國內(nèi)外科研人員的重視，紛紛對藏靈菇展開了研究。但是由于藏靈菇中微生物菌相組成復雜，如用傳統(tǒng)發(fā)酵劑擴大培養(yǎng)的方法培養(yǎng)，極易發(fā)生菌相失衡，使發(fā)酵乳制品的風味和品質(zhì)發(fā)生變化，限制了其工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種能夠促進西藏靈菇快速增殖的培養(yǎng)基。本發(fā)明的另一個目的是提供一種西藏靈菇快速增殖的培養(yǎng)方法。本發(fā)明培養(yǎng)基的組成為番茄汁5 20 mL、胡蘿卜汁5 20 mL、豆粉2 IOg和牛乳 60 90 mL。培養(yǎng)基配方中所用蕃茄汁的制法為稱取150 g西紅柿，于組織搗碎機中粉碎，用 80目濾布過濾，取濾液。培養(yǎng)基配方中所用胡蘿卜汁的制法為稱取胡蘿卜150 g，加150 mL的無菌水于組織搗碎機中粉碎，用80目濾布過濾。培養(yǎng)基配方中所用豆粉的制法為將一定量的干黃豆，置于組織搗碎機中粉碎后得到豆粉。本發(fā)明 西藏靈菇快速增殖的培養(yǎng)方法，其特征在于包含下列步驟 A、培養(yǎng)基制作
在250 mL三角瓶中加入番茄汁5 20 mL，胡蘿卜汁5 20 mL，豆粉2 10g，牛乳60 90 mL，放入高壓蒸汽滅菌鍋在115°C下滅菌15 min。B、接種
將西藏靈菇菌體用無菌水洗滌藏靈菇菌體3次，吸去菌體表面殘水，然后將菌體1 5g 接種于上述培養(yǎng)基中，在18°C 35°C溫度下培養(yǎng)，每隔24h更換新鮮培養(yǎng)基，進行連續(xù)培養(yǎng)增殖。增殖率計算公式如下
增殖率(％)=[(培養(yǎng)后的質(zhì)量-培養(yǎng)前的質(zhì)量)/培養(yǎng)前的質(zhì)量]X 100% 本發(fā)明優(yōu)選方案是所述步驟A培養(yǎng)基配好后滅菌前調(diào)PH值為6. 0 6. 5。本發(fā)明所述步驟B西藏靈菇菌體的培養(yǎng)時間優(yōu)選為5天。本發(fā)明培養(yǎng)基的原料來源廣泛、成本低廉、便于儲藏和運輸。利用該培養(yǎng)基及本發(fā)明的培養(yǎng)方法對發(fā)酵生產(chǎn)西藏靈菇菌體具有生長速度快、周期短、增殖率高、工藝簡單、成本低等優(yōu)點，適于西藏靈菇的工業(yè)化擴大生產(chǎn)。用本發(fā)明方法培養(yǎng)所得的西藏靈菇菌體可更大地滿足市場對西藏靈菇的需求，緩解了市場需求對自然資源的壓力?；谏鲜鰞?yōu)點，本發(fā)明可產(chǎn)生較好的社會及經(jīng)濟效益，市場前景廣闊。
具體實施例方式下面的實施例可以進一步說明本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。實施例1
培養(yǎng)基配方為番茄汁5 mL、胡蘿卜汁5mL、豆粉2g、牛乳90 mL。一、培養(yǎng)基配制
培養(yǎng)基的制法為在250 mL三角瓶中加入番茄汁5 mL、胡蘿卜汁5mL、豆粉2g、牛乳 90 mL，調(diào)整起始pH值為6. 2，放入高壓蒸汽滅菌鍋在115°C下滅菌15 min。所用蕃茄汁的制法為稱取150 g西紅柿，于組織搗碎機中粉碎，用80目濾布過濾，取濾液。所用胡蘿卜汁的制法為稱取胡蘿卜150 g，加150 mL的無菌水于組織搗碎機中粉碎，用80目濾布過濾。所用豆粉的制法為將一定量的干黃豆，置于組織搗碎機中粉碎后得到豆粉。二、菌體的增殖
用無菌水洗滌藏靈菇菌體3次，吸去菌體表面殘水，然后將菌體Ig接種于上述培養(yǎng)基， 在18°C下培養(yǎng)，每隔24h更換新鮮培養(yǎng)基，連續(xù)培養(yǎng)5天后稱重，其增殖率可達160%。對照例1
對照組培養(yǎng)基配方為牛乳100mL。一、培養(yǎng)基配制
對照組培養(yǎng)基的制法為在250 mL三角瓶中加入牛乳IOOmL,放入高壓蒸汽滅菌鍋在 115°C下滅菌 15 min。
二、菌體的增殖
將菌體Ig接種于上述對照組培養(yǎng)基中，在18°C下培養(yǎng)，每隔24h更換新鮮培養(yǎng)基，連續(xù)培養(yǎng)5天后稱重，其增殖率可達90%，不如本實施例效果好。實施例2
培養(yǎng)基配方為番茄汁10 mL、胡蘿卜汁10 mL、豆粉5g、牛乳80 mL。一、培養(yǎng)基配制
培養(yǎng)基的制法為在250 mL三角瓶中加入番茄汁10 mL、胡蘿卜汁10 mL、豆粉5g、牛乳80 mL，調(diào)整起始pH值為6. 5，放入高壓蒸汽滅菌鍋在115°C下滅菌15 min。所用蕃茄汁的制法為稱取150 g西紅柿，于組織搗碎機中粉碎，用80目濾布過濾，取濾液。所用胡蘿卜汁的制法為稱取胡蘿卜150 g，加150 mL的無菌水于組織搗碎機中粉碎，用80目濾布過濾。所用豆粉的制法為將一定量的黃豆，置于組織搗碎機中粉碎后得到豆粉。二、菌體的增殖
用無菌水洗滌藏靈菇菌體3次，吸去菌體表面殘水，然后將菌體2g接種于上述培養(yǎng)基中，在25°C下培養(yǎng)，每隔24h更換新鮮培養(yǎng)基，連續(xù)培養(yǎng)5天后稱重，其增殖率可達196%。對照例2
對照組培養(yǎng)基配方為牛乳100mL。一、培養(yǎng)基配制
對照組培養(yǎng)基的制法為在250 mL三角瓶中加入牛乳IOOmL,放入高壓蒸汽滅菌鍋在 115°C下滅菌 15 min。二、菌體的增殖
用無菌水洗滌藏靈菇菌體3次，吸去菌體表面殘水，將菌體2g接種于上述對照組培養(yǎng)基中，在25°C下培養(yǎng)，每隔24h更換新鮮培養(yǎng)基，連續(xù)培養(yǎng)5天后稱重，其增殖率可達86%， 不如本實施例效果好。實施例3
培養(yǎng)基配方為番茄汁20 mL、胡蘿卜汁20 mL、豆粉10g、牛乳60mL。一、培養(yǎng)基配制
培養(yǎng)基的制法為在250 mL三角瓶中加入番茄汁20 mL、胡蘿卜汁20 mL、豆粉10g、 牛乳60mL，調(diào)整起始pH值為6. 2，放入高壓蒸汽滅菌鍋在115°C下滅菌15min。所用蕃茄汁的制法為稱取150 g西紅柿，于組織搗碎機中粉碎，用80目濾布過濾，取濾液。所用胡蘿卜汁的制法為稱取胡蘿卜150 g，加150 mL的無菌水于組織搗碎機中粉碎，用80目濾布過濾。所用豆粉的制法為將一定量的干黃豆，置于組織搗碎機中粉碎后得到豆粉。二、菌體的增殖
用無菌水洗滌藏靈菇菌體3次，吸去菌體表面殘水，然后將菌體5g接種于上述培養(yǎng)基中，在30°C下培養(yǎng)，每隔24h更換新鮮培養(yǎng)基，連續(xù)培養(yǎng)5天后稱重，其增殖率可達165%。對照例3對照組培養(yǎng)基配方為牛乳lOOmL。一、培養(yǎng)基配制
對照組培養(yǎng)基的制法為在250 mL三角瓶中加入牛乳IOOmL,放入高壓蒸汽滅菌鍋在 115°C 下滅菌 15min。二、菌體的增殖
用無菌水洗滌藏靈菇菌體3次，吸去菌體表面殘水，將菌體5g接種于上述對照組培養(yǎng)基中，在30°C下培養(yǎng)，每隔24h更換新鮮培養(yǎng)基，連續(xù)培養(yǎng)5天后稱重，其增殖率可達85%。 不如本實施例效果好。實施例4
培養(yǎng)基配方為番茄汁15 mL、胡蘿卜汁15 mL、豆粉10g、牛乳70mL。一、培養(yǎng)基配制
培養(yǎng)基的制法為在250 mL三角瓶中加入番茄汁15 mL、胡蘿卜汁15 mL、豆粉10g、 牛乳70mL，調(diào)整起始pH值為6. 5，放入高壓蒸汽滅菌鍋在115°C下滅菌15min。所用蕃茄汁的制法為稱取150 g西紅柿，于組織搗碎機中粉碎，用80目濾布過濾，取濾液。所用胡蘿卜汁的制法為稱取胡蘿卜150 g，加150 mL的無菌水于組織搗碎機中粉碎，用80目濾布過濾。所用豆粉的制法為將一定量的干黃豆，置于組織搗碎機中粉碎后得到豆粉。二、菌體的增殖
用無菌水洗滌藏靈菇菌體3次，吸去菌體表面殘水，然后將菌體Ig接種于上述培養(yǎng)基中，在35°C下培養(yǎng)，每隔24h更換新鮮培養(yǎng)基，連續(xù)培養(yǎng)5天后稱重，其增殖率可達170%。對照例4
對照組培養(yǎng)基配方為牛乳100mL。一、培養(yǎng)基配制
對照組培養(yǎng)基的制法為在250 mL三角瓶中加入牛乳IOOmL,放入高壓蒸汽滅菌鍋在 115°C 下滅菌 15min。二、菌體的增殖
將菌體Ig接種于上述對照組培養(yǎng)基中，在35°C下培養(yǎng)，每隔24h更換新鮮培養(yǎng)基，連續(xù)培養(yǎng)5天后稱重，其增殖率可達75%。不如本實施例效果好。
權(quán)利要求
1.一種西藏靈菇快速增殖的培養(yǎng)基，其特征在于其組成為番茄汁5 20 mL、胡蘿卜汁5 20 mL、豆粉2 IOg和牛乳60 90 mL。
2.一種西藏靈菇快速增殖的培養(yǎng)方法，其特征在于包含下列步驟A、培養(yǎng)基制作在250 mL三角瓶中加入番茄汁5 20 mL，胡蘿卜汁5 20 mL，豆粉2 10g，牛乳60 90 mL，放入高壓蒸汽滅菌鍋在115°C下滅菌15min ；B、接種將西藏靈菇菌體用無菌水洗滌3次，吸去菌體表面殘水，然后將菌體1 5g接種于A 步驟的培養(yǎng)基中，在18°C 35°C溫度下培養(yǎng)，每隔24h更換新鮮培養(yǎng)基，進行連續(xù)培養(yǎng)，使西藏靈菇菌體快速增殖。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的培養(yǎng)方法，其特征在于所述步驟A培養(yǎng)基配好后滅菌前調(diào) PH值為6. 0 6. 5。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的培養(yǎng)方法，其特征在于所述步驟B西藏靈菇菌體的培養(yǎng)時間為5天。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種西藏靈菇快速增殖的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，培養(yǎng)基組成為番茄汁5~20mL、胡蘿卜汁5~20mL、豆粉2～10g和牛乳60~90mL。本發(fā)明培養(yǎng)方法為用無菌水洗滌藏靈菇菌體3次，吸去菌體表面殘水，然后將菌體1～5g接種于上述培養(yǎng)基中，在18～35℃下培養(yǎng)，每隔24h更換新鮮培養(yǎng)基，進行培養(yǎng)增殖。該培養(yǎng)基的原料來源廣泛、成本低廉、便于儲藏和運輸。利用本發(fā)明的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法增殖西藏靈菇菌體具有生長速度快、周期短、增殖率高、工藝簡單、成本低等優(yōu)點，適于西藏靈菇的工業(yè)化擴大生產(chǎn)。用本發(fā)明方法培養(yǎng)所得的西藏靈菇菌體可更大程度地滿足市場對西藏靈菇的需求，緩解市場需求壓力。
文檔編號A01G1/04GK102225875SQ201110112688
公開日2011年10月26日 申請日期2011年5月3日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月3日
發(fā)明者何林, 張衛(wèi)兵, 甘伯中, 米蘭, 陶生儉 申請人:蘭州莊園乳業(yè)有限責任公司, 甘肅農(nóng)業(yè)大學