一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基及其配制方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及何首烏組織培養(yǎng)技術領域，特別是涉及一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基，還 涉及一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基配制方法。
【背景技術】
[0002] 何首烏，是寥科何首烏屬多年生纏繞藤本植物，塊根肥厚，長橢圓形，黑褐色，其塊 根入藥，可安神、養(yǎng)血、活絡、消癰，是常見的中藥材。
[0003] 目前組織培養(yǎng)是何首烏人工快速繁殖的常用手段之一，然而現有的組織培養(yǎng)技術 中何首烏芽增殖系數不高、增殖時間長，越來越難以滿足市場的需求。

【發(fā)明內容】

[0004] 基于現有技術存在上述問題，本發(fā)明提供一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基，其以MS培養(yǎng) 基為基礎培養(yǎng)基，并添加有6-BA(6_芐氨基腺嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含釤可溶性化合物、瓊 脂粉和白砂糖。本發(fā)明中的培養(yǎng)基添加了釤元素，能極大地提高何首烏芽增殖系數，縮短增 殖時間。
[0005] -種何首烏芽增殖培養(yǎng)基，以MS培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基，并添加有6-BA(6_芐氨基腺 嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含釤可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖。
[0006] 6-BA(6-芐氨基腺嘌呤）的濃度為0·5-1 ·5mg/L，IBA(吲哚丁酸）的濃度為0· 1-0·5 mg/L，含釤可溶性化合物的濃度為0.1-0.2mM，瓊脂粉的濃度為8~1 lg/L，蔗糖的濃度為25 ~35g/L〇
[0007] 6-84(6-芐氨基腺嘌呤）的濃度為0.8-1.211^/1，184(吲哚丁酸）的濃度為0.2-0.4mg/L，含釤可溶性化合物的濃度為0.12-0.16mM，瓊脂粉的濃度為9~10g/L，蔗糖的濃度 為28~33g/L。
[0008] 所述的何首烏葉片誘導培養(yǎng)基的pH值為6.3~6.9。
[0009] 所述的何首烏葉片誘導培養(yǎng)基的pH值為6.7,中性的環(huán)境適合何首烏芽增殖，可提 高增殖系數。
[0010] 含釤可溶性化合物是硝酸釤，還可以是氧化釤或者氯化釤，釤元素是一種稀土元 素，具有植物生長調節(jié)劑的作用，可刺激促進植物生長，常用于提高農作物的質量和產量。
[0011] -種何首烏芽增殖培養(yǎng)基的配制方法，其包括以下步驟： 步驟S10溶解配制培養(yǎng)基：用蒸餾水溶解MS基礎培養(yǎng)基各成分，并添加6-BA(6-芐氨基 腺嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含釤可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖； 步驟S20高溫滅菌:將步驟S10配制好的培養(yǎng)基放于高壓滅菌鍋中，于120~121°C高溫滅 菌20~21分鐘，冷卻凝固。
[0012] 步驟S10還包括步驟SI 1調節(jié)pH值:使用HCL和Κ0Η滴定調節(jié)培養(yǎng)基pH值至6.7。
【具體實施方式】
[0013]實施例一:配制何首烏芽增殖培養(yǎng)基。
[0014]根據表1所示的MS培養(yǎng)基配方以及表2所示的何首烏芽增殖培養(yǎng)基配方，配制本發(fā) 明所述的何首烏芽增殖培養(yǎng)基。
[0015] 用天平稱取MS培養(yǎng)基中的各成分以及6-BA(6-芐氨基腺嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含 釤可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖，置于三角瓶中，加入適量蒸餾水，攪拌溶解，并調節(jié)pH值 至6.7，定容至100〇111匕將三角瓶封口，置于高壓滅菌鍋中，于121°(3滅菌2〇1]1；[11，然后置于超 凈工作臺中自然冷卻，備用。
[0016] 將冷卻到50_60°C時將培養(yǎng)基分裝至組織培養(yǎng)瓶中，晾涼，待其凝固后將組織培養(yǎng) 瓶封口，備用。
[0017] 表1 MS培養(yǎng)基的成分及其用量。
[0018] 表2何首烏芽增殖培養(yǎng)基的成分及其用量。
[0019] 實施例二:本發(fā)明所述的何首烏芽增殖培養(yǎng)基的測試 根據表1所示的MS培養(yǎng)基配方以及表3所示的何首烏芽增殖培養(yǎng)基配方，參照實施例一 所述的培養(yǎng)基制備方法，分別配制各試驗組、對照組的何首烏芽增殖培養(yǎng)基。
[0020] 表3何首烏芽增殖培養(yǎng)基。
[0021] 在超凈工作臺中選取生長正常、無褐化的何首烏叢生芽，將叢生芽取出，用無菌手 術刀將叢生芽分割成單芽，將單芽接種于表3所示各試驗組、對照組的培養(yǎng)基中，然后于光 暗周期為12h光照/12h黑暗、光照強度為20001UX、溫度為25±2°C的條件下進行培養(yǎng)。培養(yǎng) 30天后統計增殖何首烏芽增值系數、褐化率。
[0022] 表4何首烏芽增殖培養(yǎng)基測試結果。
[0023] 注:增值系數=(增值后芽數-褐化死亡芽數)/接種芽數。
[0024] 由表4的試驗結果可知，采用本發(fā)明提供的何首烏芽增殖培養(yǎng)基可將增殖系數提 高到5以上，同時從對照組3與試驗組比較可以看出釤元素雖然能起到一定調節(jié)植物生長的 作用，但效果不明顯，釤元素更多的作用在于調節(jié)植物生長狀態(tài)，促進生長素和細胞分裂素 的互作，從而促進何首烏芽增殖。另外由于組織培養(yǎng)繼代增殖越多，變異概率越大，在保證 不變異的前提下，提高增殖效率可以大大縮短了增值時間。
【主權項】
1. 一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基，其特征在于，以MS培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基，并添加有6-BA (6-芐氨基腺嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含釤可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖。2. 根據權利要求1所述的一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基，其特征在于，6-BA(6-芐氨基腺嘌 呤）的濃度為〇. 5-1.5mg/L，IBA(吲哚丁酸）的濃度為0.1-0.5 mg/L，含釤可溶性化合物的 濃度為〇.1-〇.211^，瓊脂粉的濃度為8~118/1，蔗糖的濃度為25~358/1。3. 根據權利要求2所述的一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基，其特征在于，6-BA( 6-芐氨基腺嘌 呤）的濃度為〇. 8-1.2mg/L，IBA(B引噪丁酸）的濃度為0.2-0.4mg/L，含釤可溶性化合物的濃 度為0.12-0.1611^，瓊脂粉的濃度為9~1(^/1，蔗糖的濃度為28~338/1。4. 根據權利要求1至3的其中之一所述的一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基，其特征在于，所述 的何首烏葉片誘導培養(yǎng)基的pH值為6.3~6.9。5. 根據權利要求4的所述的一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基，其特征在于，所述的何首烏葉片 誘導培養(yǎng)基的pH值為6.7。6. 根據權利要求1至3的其中之一所述的一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基，其特征在于，所述 的含釤可溶性化合物是硝酸釤，還可以是氧化釤或者氯化釤。7. -種何首烏芽增殖培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于，其包括以下步驟： 步驟S10溶解配制培養(yǎng)基，用蒸餾水溶解MS基礎培養(yǎng)基各成分，并添加6-BA(6-芐氨基 腺嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含釤可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖； 步驟S20高溫滅菌，將步驟S10配制好的培養(yǎng)基放于高壓滅菌鍋中，于120~121°C高溫滅 菌20~21分鐘，冷卻凝固。8. 根據權利要求7所述的一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于，所述的步 驟S10還包括步驟SI 1調節(jié)pH值，使用HCL和KOH滴定調節(jié)培養(yǎng)基pH值至6.7。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種何首烏芽增殖培養(yǎng)基，屬于何首烏組織培養(yǎng)技術領域，該培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基，并添加有6-BA（6-芐氨基腺嘌呤）、IBA（吲哚丁酸）、含釤可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖。本發(fā)明中的培養(yǎng)基添加了釤元素，能極大地提高何首烏芽增殖系數，縮短增殖時間。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105532462
【申請?zhí)枴緾N201610011321
【發(fā)明人】何志鏗
【申請人】佛山市金藍領教育科技有限公司
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2016年1月9日