專利名稱：海紫雜交扇貝新品種的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于貝類水產(chǎn)養(yǎng)殖的育種技術(shù)，尤其是涉及一種海紫雜交扇貝新品種的培育方法。
背景技術(shù)：
海灣扇貝(Argopecten irradians irradians)原產(chǎn)于美國(guó)大西洋沿岸，于1982 年引入我國(guó)。海灣扇貝生長(zhǎng)速度快，溫度適應(yīng)范圍廣，抗逆性強(qiáng)，非常適合我國(guó)北方海域的養(yǎng)殖，目前產(chǎn)量和養(yǎng)殖面積占我國(guó)扇貝養(yǎng)殖的50%以上。由于引進(jìn)后長(zhǎng)期近交，海灣扇貝在養(yǎng)殖過(guò)程中種質(zhì)退化嚴(yán)重，表現(xiàn)為商品貝規(guī)格越來(lái)越小，育苗養(yǎng)殖過(guò)程中死亡率較高，例如2007年海灣扇貝親貝死亡率高達(dá)約70%，因此扇貝養(yǎng)殖業(yè)迫切需要對(duì)海灣扇貝進(jìn)行遺傳改良，其中雜交育種是最有效的方法之一。發(fā)明人自2007年首次從秘魯引進(jìn)了紫扇貝(Argopecten purpuratus)。紫扇貝是原產(chǎn)于南太平洋的一種速生型中型扇貝，與海灣扇貝都屬于Argopecten屬，染色體數(shù)相同，且都是雌雄同體，但二者在個(gè)體大小、生長(zhǎng)和溫度適應(yīng)性等方面性狀互補(bǔ)，因此發(fā)明人又通過(guò)將海灣扇貝卵子和紫扇貝精子進(jìn)行種間雜交，培育出海紫雜交扇貝子一代。海紫雜交扇貝子一代生長(zhǎng)較快，個(gè)體較大(王春德等，2009.紫扇貝與海灣扇貝種間雜交的研究。海洋科學(xué)，33(10) 84-87 ； Chunde Wang 等，2011. htroduction of the Peruvian scallop and its hybridization with the bay scallop in China, Aquaculture,2011, 310 :380-387)。大部分個(gè)體不產(chǎn)生可育的卵子和精子，但少部分為可育的雌雄同體個(gè)體。進(jìn)一步研究表明，海紫雜交子一代雖然具有較大的雜種優(yōu)勢(shì)，但在生產(chǎn)推廣上仍然存在以下缺點(diǎn)和障礙。1)由于雜交子一代遺傳不穩(wěn)定，后代生長(zhǎng)性狀出現(xiàn)分離，因而需要每年用紫扇貝和海灣扇貝制種，較為繁瑣；2)由于引進(jìn)的紫扇貝的溫度適應(yīng)范圍較窄，難以在同一海域度夏和越冬，且在我國(guó)海域生長(zhǎng)緩慢，因此獲得用于培育雜交子一代的紫扇貝親貝較為相當(dāng)困難。3)由于海灣扇貝和紫扇貝都是雌雄同體的扇貝，同時(shí)排放精子和卵子，精或卵容易受到同種的卵或精的污染，不易進(jìn)行種間雜交，而導(dǎo)致所獲得的商品苗種中真正的雜交后代的比例大大降低，使產(chǎn)量的提高幅度大大受限。顯然，由于需要同時(shí)培育兩種親貝且不易實(shí)現(xiàn)兩種雌雄同體扇貝間的雜交，因而推廣存在著較大的困難。產(chǎn)業(yè)上迫切需要培育一種能夠穩(wěn)定遺傳、易于培育且性狀優(yōu)良的新品種。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種海紫雜交扇貝新品種的培育方法，以彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足。本發(fā)明基于以下構(gòu)思1)首先在親貝促熟方面摒棄了傳統(tǒng)的海灣扇貝從4°C開(kāi)始培育，而且產(chǎn)卵前需要提高到19°C的常規(guī)方法，通過(guò)研究雜交子一代扇貝的溫度適應(yīng)特性， 專門(mén)選擇了從10°C開(kāi)始培育雜交子一代親貝，到產(chǎn)卵前逐漸提高到17°C ；2)海紫雜交扇貝子一代中有少量個(gè)體為雌雄同體且自交可育；幻海紫雜交扇貝子一代的自交后代中約 25%的個(gè)體外型與雜交子一代親本相似，且其體重比同期的海灣扇貝提高77. 5% ；最后4) 選擇雜交后代中的雌雄同體個(gè)體進(jìn)行連續(xù)自交，可迅速純化種系，即獲得穩(wěn)定遺傳的新品種。本發(fā)明可采用家系培育的技術(shù)方案首先利用海灣扇貝卵子和紫扇貝精子受精建立多個(gè)海紫雜交子一代家系，根據(jù)各雜交家系的表現(xiàn)型選擇優(yōu)良雜交家系，然后從優(yōu)良雜交家系中選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體，促熟后分別自體受精建立多個(gè)自交家系；第二年從上述自交家系中再選擇優(yōu)良家系，然后從優(yōu)良家系中進(jìn)一步選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體繼續(xù)進(jìn)行自交、選擇；這樣按同樣的方法連續(xù)自交三代以上，即獲得穩(wěn)定遺傳且生長(zhǎng)快、個(gè)體大、溫度耐受范圍廣的海紫雜交扇貝新品種。同樣，本發(fā)明也可采用群體培育的技術(shù)方案首先利用海灣扇貝卵子和紫扇貝精子受精建立海紫雜交子一代群體，然后從雜交群體中選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體，促熟后單獨(dú)產(chǎn)卵排精并自體受精，受精卵孵化后將幼蟲(chóng)合在一起構(gòu)成自交群體；第二年從上述自交群體中再選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體繼續(xù)進(jìn)行自交、選擇；這樣按同樣的方法連續(xù)自交三代以上，即獲得穩(wěn)定遺傳且生長(zhǎng)快、個(gè)體大、溫度耐受范圍廣的海紫雜交扇貝新品種。本發(fā)明具有以下有益效果所獲得海紫雜交新品種同時(shí)具有海灣扇貝和紫扇貝的特點(diǎn)，生長(zhǎng)快、個(gè)體大、溫度耐受范圍廣。本發(fā)明的海紫雜交扇貝新品種可以在青島和大連等北方海域養(yǎng)殖，產(chǎn)量比海灣扇貝提高30%以上。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明可采用家系培育方法，具體操作步驟如下1.海紫雜交一代家系的培育選擇殼高5厘米以上的紫扇貝和海灣扇貝各50個(gè)， 在1月初納入育苗室水體內(nèi)，蓄養(yǎng)密度為100個(gè)/m3，選擇從10°C開(kāi)始培育親貝。每天分6 次投喂?jié)舛葹?00-300萬(wàn)細(xì)胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等單胞藻類，每次投喂15升/m3， 每天換水三分之一，每6天倒一次池，用空氣壓縮機(jī)連續(xù)充氣。在10°C培育10天性腺開(kāi)始膨大后開(kāi)始升溫，每天提高0.5°C，待升到17°C時(shí)性腺接近成熟，逐漸增加餌料的投喂量直到扇貝達(dá)到性成熟。挑選性腺發(fā)育成熟的紫扇貝和海灣扇貝陰干刺激30分鐘，并且將單個(gè)扇貝置于預(yù)先加入23°C海水的2升塑料燒杯中，分別收集海灣扇貝的卵子和紫扇貝的精子。收集的精液在顯微鏡下立即觀察，若混有卵子則棄掉。收集的卵子放置20分鐘以后在顯微鏡下觀察，若已受精發(fā)育則棄掉。將獲得的海灣扇貝卵子和紫扇貝的精子授精，將受精卵置于黑暗環(huán)境下孵化，然后按照常規(guī)方法進(jìn)行幼蟲(chóng)培育、苗種中間培育和養(yǎng)成，即獲得海紫雜交子一代家系。2.海紫雜交子一代親貝的選擇和促熟從上述培育的若干海紫雜交子一代家系中根據(jù)家系的平均表型選擇優(yōu)良家系，然后從優(yōu)良家系中選擇個(gè)體大且雌雄同體的扇貝在 1月份納入育苗室，按照上述步驟進(jìn)行性腺促熟，成熟后即可進(jìn)行自交純化。3.自交純化選取成熟的雌雄同體的海紫雜交子一代親貝，陰干刺激30分鐘，將單個(gè)扇貝置于預(yù)先加入23°C海水的2升塑料燒杯中使其產(chǎn)卵排精。攪拌使來(lái)自同一個(gè)扇貝的精卵混合均勻，再按照常規(guī)方法進(jìn)行幼蟲(chóng)培育、苗種中間培育和養(yǎng)成，即獲得多個(gè)海紫雜交子一代扇貝的自交家系；收獲時(shí)測(cè)量每個(gè)家系的平均殼高、殼長(zhǎng)、殼寬和總體重，根據(jù)各家系所有個(gè)體的表現(xiàn)選擇優(yōu)良家系。從選擇的優(yōu)良家系中選擇多個(gè)個(gè)體大且雌雄同體的扇貝作為下一年自交選育的親貝，用于品種培育。4.品種培育將以上選擇的個(gè)體大且雌雄同體的扇貝作為親貝按照以上方法連續(xù)自交三代以上，直到大部分個(gè)體表現(xiàn)均優(yōu)良且一致，即獲得遺傳穩(wěn)定的海紫雜交新品種。本發(fā)明也可采用群體培育的方法，具體操作步驟如下1.海紫雜交一代群體的培育選擇殼高5厘米以上的紫扇貝和海灣扇貝各50個(gè)， 在1月初納入育苗室水體內(nèi)，蓄養(yǎng)密度為100個(gè)/m3，選擇從10°C開(kāi)始培育親貝。每天分6 次投喂?jié)舛葹?00-300萬(wàn)細(xì)胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等單胞藻類，每次投喂15升/m3， 每天換水三分之一，每6天倒一次池，用空氣壓縮機(jī)連續(xù)充氣。在10°C培育10天性腺開(kāi)始膨大后開(kāi)始升溫，每天提高0.5°C，待升到17°C時(shí)性腺接近成熟，逐漸增加餌料的投喂量直到扇貝達(dá)到性成熟。挑選性腺發(fā)育成熟的紫扇貝和海灣扇貝陰干刺激30分鐘，并且將單個(gè)扇貝置于預(yù)先加入23°C海水的2升塑料燒杯中，分別收集海灣扇貝的卵子和紫扇貝的精子。收集的精液在顯微鏡下立即觀察，若混有卵子則棄掉。收集的卵子放置20分鐘以后在顯微鏡下觀察，若已受精發(fā)育則棄掉。將獲得的來(lái)自多個(gè)海灣扇貝的卵子和多個(gè)來(lái)自紫扇貝的精子授精，將受精卵置于黑暗環(huán)境下孵化，然后按照常規(guī)方法進(jìn)行幼蟲(chóng)培育、苗種中間培育和養(yǎng)成，即獲得海紫雜交群體。2.海紫雜交子一代親貝的選擇和促熟從上述培育的海紫雜交子一代群體中選擇個(gè)體大且雌雄同體的扇貝在1月份納入育苗室，按照上述步驟進(jìn)行性腺促熟，成熟后即可進(jìn)行自交純化。3.自交純化選取成熟的雌雄同體的海紫雜交子一代親貝，陰干刺激30分鐘，將單個(gè)扇貝置于預(yù)先加入23°C海水的2升塑料燒杯中使其產(chǎn)卵排精。攪拌使來(lái)自同一個(gè)扇貝的精卵混合均勻，受精卵孵化后將幼蟲(chóng)合在一起構(gòu)成自交群體，按照常規(guī)方法進(jìn)行幼蟲(chóng)培育、苗種中間培育和養(yǎng)成，即獲得海紫雜交子一代扇貝的自交群體；收獲時(shí)選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體作為下一年自交選育的親貝，用于品種培育。4.品種培育將以上選擇的個(gè)體大且雌雄同體的扇貝作為親貝按照以上方法連續(xù)自交三代以上，直到大部分個(gè)體表現(xiàn)均優(yōu)良且一致，即獲得遺傳穩(wěn)定的海紫雜交扇貝新品種。實(shí)施例1從2009年培育的海紫雜交子一代家系中選擇優(yōu)良家系，從中選擇個(gè)體較大且雌雄同體的個(gè)體，在2010年1月份納入育苗室中，用以上方法對(duì)親貝促熟，用自交家系的方法培育后代，到十一月上旬所獲得的自交子二代中有約25%的個(gè)體(類Fl子二代)殼色與其親本相同，但個(gè)體比同期培育的海灣扇貝群體殼高大約21.5%，體重大77. 5%;所獲得的自交子二代中有約75%的個(gè)體(類海灣子二代)殼色與海灣扇貝相似，但個(gè)體比同期培育的海灣扇貝群體殼高大約9.3%，體重大沈.7%。結(jié)果如表1所示。表1海紫雜交子二代與同期海灣扇貝大小的比較(n = 30)
類Fl子二代類海灣子二代海灣扇貝殼局54. 53 ±5. 8949. 05±2. 3244. 88±5. 05總重31. 06±9. 3822. 17±3. 1617. 50±5. 84本發(fā)明已經(jīng)于2011年，從2010年培育的海紫雜交子二代中選擇個(gè)體較大且雌雄同體的個(gè)體，用自交的方法培育后代家系，受精率和孵化率分別為86. 5%和83. 4%，并培育出大量的自交子三代。實(shí)施例2同樣，也可以從海紫雜交子一代群體中選擇個(gè)體較大且雌雄同體的個(gè)體，按上述操作步驟獲得海紫自交群體，然后從海紫自交群體選擇雌雄同體的個(gè)體連續(xù)進(jìn)行自交三代以上，就可以獲得穩(wěn)定遺傳的、個(gè)體大、溫度耐受范圍廣的本發(fā)明的海紫雜交扇貝新品種。
權(quán)利要求
1.一種海紫雜交扇貝新品種的家系培育方法，其特征在于首先利用海灣扇貝卵子和紫扇貝精子受精建立多個(gè)海紫雜交子一代家系，根據(jù)各雜交家系的表現(xiàn)型選擇優(yōu)良雜交家系，然后從優(yōu)良雜交家系中選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體，促熟后分別自體受精建立多個(gè)自交家系；第二年從上述自交家系中再選擇優(yōu)良家系，然后從優(yōu)良家系中進(jìn)一步選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體繼續(xù)進(jìn)行自交、選擇；這樣按同樣的方法連續(xù)自交三代以上，即獲得穩(wěn)定遺傳且生長(zhǎng)快、個(gè)體大、溫度耐受范圍廣的海紫雜交扇貝新品種。
2.一種海紫雜交扇貝新品種的家系培育方法，其特征在于采用家系培育方法的具體操作步驟如下1)海紫雜交一代家系的培育選擇殼高5厘米以上的紫扇貝和海灣扇貝各50個(gè)，在1 月初納入育苗室水體內(nèi)，蓄養(yǎng)密度為100個(gè)/ m3，選擇從10°C開(kāi)始培育親貝；每天分6次投喂?jié)舛葹?00-300萬(wàn)細(xì)胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等單胞藻類，每次投喂15升/ m3，每天換水三分之一，每6天倒一次池，用空氣壓縮機(jī)連續(xù)充氣；在10°C培育10天性腺開(kāi)始膨大后開(kāi)始升溫，每天提高0. 5°C，待升到17°C時(shí)性腺接近成熟，逐漸增加餌料的投喂量直到扇貝達(dá)到性成熟；挑選性腺發(fā)育成熟的紫扇貝和海灣扇貝陰干刺激30分鐘，并且將單個(gè)扇貝置于預(yù)先加入23°C海水的2升塑料燒杯中，分別收集海灣扇貝的卵子和紫扇貝的精子； 收集的精液在顯微鏡下立即觀察，若混有卵子則棄掉；收集的卵子放置20分鐘以后在顯微鏡下觀察，若已受精發(fā)育則棄掉；將獲得的海灣扇貝卵子和紫扇貝的精子授精，將受精卵置于黑暗環(huán)境下孵化，然后按照常規(guī)方法進(jìn)行幼蟲(chóng)培育、苗種中間培育和養(yǎng)成，即獲得海紫雜交子一代家系；2)海紫雜交子一代親貝的選擇和促熟從上述培育的若干海紫雜交子一代家系中根據(jù)家系的平均表型選擇優(yōu)良家系，然后從優(yōu)良家系中選擇個(gè)體大且雌雄同體的扇貝在1月份納入育苗室，按照上述步驟進(jìn)行性腺促熟，成熟后即可進(jìn)行自交純化；3)自交純化選取成熟的雌雄同體的海紫雜交子一代親貝，陰干刺激30分鐘，將單個(gè)扇貝置于預(yù)先加入23°C海水的2升塑料燒杯中使其產(chǎn)卵排精；攪拌使來(lái)自同一個(gè)扇貝的精卵混合均勻，再按照常規(guī)方法進(jìn)行幼蟲(chóng)培育、苗種中間培育和養(yǎng)成，即獲得多個(gè)海紫雜交子一代扇貝的自交家系；收獲時(shí)測(cè)量每個(gè)家系的平均殼高、殼長(zhǎng)、殼寬和總體重，根據(jù)各家系所有個(gè)體的表現(xiàn)選擇優(yōu)良家系；從選擇的優(yōu)良家系中選擇多個(gè)個(gè)體大且雌雄同體的扇貝作為下一年自交選育的親貝，用于品種培育；4)品種培育將以上選擇的個(gè)體大且雌雄同體的扇貝作為親貝按照以上方法連續(xù)自交三代以上，直到大部分個(gè)體表現(xiàn)均優(yōu)良且一致，即獲得遺傳穩(wěn)定的海紫雜交新品種。
3.一種海紫雜交扇貝新品種的群體培育方法，其特征在于首先利用海灣扇貝卵子和紫扇貝精子受精建立海紫雜交子一代群體，然后從雜交群體中選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體，促熟后單獨(dú)產(chǎn)卵排精并自體受精，受精卵孵化后將幼蟲(chóng)合在一起構(gòu)成自交群體；第二年從上述自交群體中再選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體繼續(xù)進(jìn)行自交、選擇；這樣按同樣的方法連續(xù)自交三代以上，即獲得穩(wěn)定遺傳且生長(zhǎng)快、個(gè)體大、溫度耐受范圍廣的海紫雜交扇貝新品種。
4.一種海紫雜交扇貝新品種的群體培育方法，其特征在于采用群體培育的方法的具體操作步驟如下1)海紫雜交一代群體的培育選擇殼高5厘米以上的紫扇貝和海灣扇貝各50個(gè)，在1 月初納入育苗室水體內(nèi)，蓄養(yǎng)密度為100個(gè)/ m3，選擇從10°C開(kāi)始培育親貝；每天分6次投喂?jié)舛葹?00-300萬(wàn)細(xì)胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等單胞藻類，每次投喂15升/ m3，每天換水三分之一，每6天倒一次池，用空氣壓縮機(jī)連續(xù)充氣；在10°C培育10天性腺開(kāi)始膨大后開(kāi)始升溫，每天提高0. 5°C，待升到17°C時(shí)性腺接近成熟，逐漸增加餌料的投喂量直到扇貝達(dá)到性成熟；挑選性腺發(fā)育成熟的紫扇貝和海灣扇貝陰干刺激30分鐘，并且將單個(gè)扇貝置于預(yù)先加入23°C海水的2升塑料燒杯中，分別收集海灣扇貝的卵子和紫扇貝的精子； 收集的精液在顯微鏡下立即觀察，若混有卵子則棄掉；收集的卵子放置20分鐘以后在顯微鏡下觀察，若已受精發(fā)育則棄掉；將獲得的來(lái)自多個(gè)海灣扇貝的卵子和多個(gè)來(lái)自紫扇貝的精子授精，將受精卵置于黑暗環(huán)境下孵化，然后按照常規(guī)方法進(jìn)行幼蟲(chóng)培育、苗種中間培育和養(yǎng)成，即獲得海紫雜交群體；2)海紫雜交子一代親貝的選擇和促熟從上述培育的海紫雜交子一代群體中選擇個(gè)體大且雌雄同體的扇貝在1月份納入育苗室，按照上述步驟進(jìn)行性腺促熟，成熟后即可進(jìn)行自交純化；3)自交純化選取成熟的雌雄同體的海紫雜交子一代親貝，陰干刺激30分鐘，將單個(gè)扇貝置于預(yù)先加入23°C海水的2升塑料燒杯中使其產(chǎn)卵排精；攪拌使來(lái)自同一個(gè)扇貝的精卵混合均勻，受精卵孵化后將幼蟲(chóng)合在一起構(gòu)成自交群體，按照常規(guī)方法進(jìn)行幼蟲(chóng)培育、 苗種中間培育和養(yǎng)成，即獲得海紫雜交子一代扇貝的自交群體；收獲時(shí)選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體作為下一年自交選育的親貝，用于品種培育；4)品種培育將以上選擇的個(gè)體大且雌雄同體的扇貝作為親貝按照以上方法連續(xù)自交三代以上，直到大部分個(gè)體表現(xiàn)均優(yōu)良且一致，即獲得遺傳穩(wěn)定的海紫雜交新品種。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種海紫雜交扇貝新品種的培育方法。首先利用海灣扇貝卵子和紫扇貝精子受精建立多個(gè)海紫雜交子一代家系，根據(jù)各雜交家系的表現(xiàn)型選擇優(yōu)良雜交家系，然后從優(yōu)良雜交家系中選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體，促熟后分別自體受精建立多個(gè)自交家系；然后從上述自交家系中再選擇優(yōu)良家系，從優(yōu)良家系中進(jìn)一步選擇雌雄同體的優(yōu)良個(gè)體繼續(xù)進(jìn)行自交、選擇；這樣按同樣的方法連續(xù)自交三代以上，即獲得穩(wěn)定遺傳且生長(zhǎng)快、個(gè)體大、溫度耐受范圍廣的海紫雜交扇貝新品種。本發(fā)明同樣也可采用群體培育的方法實(shí)現(xiàn)。鑒于本發(fā)明的海紫雜交新品種同時(shí)具有海灣扇貝和紫扇貝的優(yōu)良特點(diǎn)，因此實(shí)現(xiàn)了在青島和大連等北方海域養(yǎng)殖，產(chǎn)量比海灣扇貝提高30％以上。
文檔編號(hào)A01K61/00GK102318571SQ201110223338
公開(kāi)日2012年1月18日 申請(qǐng)日期2011年8月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月5日
發(fā)明者劉保忠, 李建立, 李繼強(qiáng), 杜厚寬, 王文琪, 王春德 申請(qǐng)人:青島農(nóng)業(yè)大學(xué)