專(zhuān)利名稱(chēng)：一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種動(dòng)物飼料的制備方法，具體的說(shuō)，是一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，屬于飼料技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
我國(guó)是一個(gè)產(chǎn)棉大國(guó)，每年的棉籽粕產(chǎn)量達(dá)600萬(wàn)噸以上，總量占全球第一。棉籽粕，作為棉籽壓榨副產(chǎn)品，是棉籽經(jīng)過(guò)壓榨后得出的面餅，再經(jīng)過(guò)浸出工藝將里面的大部分殘油分離出來(lái)，得到的一種微紅或黃色的顆粒狀物品。。棉籽餅粕是豐富的蛋白來(lái)源，含粗蛋白30% 45%，粗纖維11% 15%，此外B族維生素、硫胺素和有機(jī)磷也較多。國(guó)內(nèi)外用棉籽餅養(yǎng)殖畜禽及水生動(dòng)物已取得了明顯的經(jīng)濟(jì)效益。但是，由于棉粕中含有對(duì)家畜產(chǎn)生毒副作用的棉酚，通常，表現(xiàn)胃腸炎等消化系統(tǒng)病癥及生殖系統(tǒng)病癥，在很大程度上制約了其在飼料中的應(yīng)用。傳統(tǒng)的物理和化學(xué)脫毒方式對(duì)棉籽粕的脫毒有一定的效果，但是這些方法或者對(duì)產(chǎn)品本身營(yíng)養(yǎng)有一定的影響，或?qū)υO(shè)備、工藝有特定的要求，實(shí)用性有所欠缺，難以普及。 如棉酚具有易溶于極性溶劑的特點(diǎn)，采用二氯甲烷浸出法對(duì)棉粕中棉酚有極好萃取作用， 但由于二氯甲烷對(duì)金屬，特別是鋼制設(shè)備腐蝕性嚴(yán)重，故使這種溶劑的使用受到限制。又如堿處理法脫毒。因?yàn)槊薹语@酸性，能與堿反應(yīng)，生成鹽，因此，可以在棉粕中添加燒堿、純堿或石灰水等進(jìn)行脫毒。經(jīng)過(guò)堿液處理后，游離棉酚含量已極其微小，但需要用酸、堿進(jìn)行處理，對(duì)設(shè)備的抗腐蝕性要求高，投資大。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明公開(kāi)一種既可以解決棉粕脫毒問(wèn)題，又可以提高棉粕中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，包括下述步驟1) 一級(jí)菌種的制備a、將熱帶假絲酵母菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌、啤酒酵母菌分別接種至酵母菌培養(yǎng)基中， 于30 37°C，振蕩培養(yǎng)M 36h，制得假絲酵母菌一級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌一級(jí)菌種、啤酒酵母菌一級(jí)菌種；b、將枯草芽孢桿菌接種至枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基中，在30 37°C，振蕩培養(yǎng)M 36h，制得枯草芽孢桿菌一級(jí)菌種；C、將乳桿菌接種乳桿菌培養(yǎng)基中，在30 37°C，靜置培養(yǎng)48 60h，制得乳桿菌一級(jí)菌種；2) 二級(jí)菌種的制備a、將步驟1)中制備的假絲酵母菌一級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌一級(jí)菌種、啤酒酵母菌一級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌一級(jí)菌種以2 2. 5%的接種量，分別接種至固體培養(yǎng)基中，于30 37°C，培養(yǎng)48 72h，制得假絲酵母菌二級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌二級(jí)菌種、啤酒酵母菌二級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌二級(jí)菌種；b、將步驟1)中制備的乳桿菌一級(jí)菌種接種乳桿菌培養(yǎng)基中，在30 37°C，靜置培養(yǎng)48 60h，制得的乳桿菌二級(jí)菌種。3)發(fā)酵底物的制備稱(chēng)取下述質(zhì)量百分比的原料棉粕75 80 %、豆粕10 15 %、玉米粉4 5 %、糖蜜3 4%、磷酸二氫鉀0. 35 0. 45%、碳酸鈣0. 4 0. 5%、酸性木聚糖酶0. 08 0. 1%、 酸性蛋白酶0. 04 0. 05%混合制得發(fā)酵底物；4)發(fā)酵底物接種將步驟2、中的制備的假絲酵母菌二級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌二級(jí)菌種、啤酒酵母菌二級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌二級(jí)菌種以重量比為3 :1:1: 2混合均勻后，以2 2. 5% 的接種量接種至步驟幻所得的發(fā)酵底物中；乳桿菌二級(jí)菌種以0. 4 0. 5%的接種量接種至步驟幻所得的發(fā)酵底物中，調(diào)節(jié)含水量至45 50 %，混合均勻，發(fā)酵3 6天后，干燥即得。進(jìn)一步的，上述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，所述的酵母菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨4. 5 5. 5g/L，酵母膏14 16g/L，氯化鈉3. 5 4. 5g/L，葡萄糖 9 llg/L。進(jìn)一步的，上述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，所述的酵母菌種子培養(yǎng)基 pH 為 6. 5 7. 5。進(jìn)一步的，上述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法所述的枯草芽孢桿菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨9 1^/1，牛肉膏4.5 5. 5g/L，葡萄糖9 llg/L，氯化鈉 4. 5 5. 5g/L。進(jìn)一步的，上述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，所述的乳桿菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨3. 5 4. 5g/L，葡萄糖3. 5 4. 5g/L，氯化鈉2. 5 3. 5g/L，磷酸二氫鉀2. 5 3. 5g/L，磷酸氫二鉀2. 5 3. 5g/L，淀粉1. 8 2. 2g/L，氯化鎂0. 2g/L，硫酸鈣 0. 05g/L。進(jìn)一步的，上述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，所述的固體培養(yǎng)基干料由下述重量分的原料組成豆粕60 65 %，棉粕25 30 %，玉米粉4 5 %，糖蜜4 5 %， 硫酸鎂0. 03 0. 05% ；含水量為40 45%。進(jìn)一步的，上述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，所述的酸性木聚糖酶的酶活力為80，0001 U/g ；所述的酸性蛋白酶酶活力為100，000IU/g。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有下述有益效果1、本發(fā)明結(jié)合了微生物發(fā)酵和酶制劑的使用，有效地解決了棉粕脫毒和提高棉粕中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題；2、在棉粕脫毒的整個(gè)過(guò)程中，既沒(méi)有添加過(guò)多的化學(xué)試劑，又保持了原料本身的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而達(dá)到理想的脫毒效果，脫毒后，棉酚含量降低至0. 018 0. 025%，遠(yuǎn)低于至國(guó)家規(guī)定的飼用安全標(biāo)準(zhǔn)0. 04% ；3、利用產(chǎn)朊假絲酵母，增加了飼料中的菌體蛋白；利用啤酒酵母和乳酸菌增加了發(fā)酵的酸香味，改善飼料的適口性，提高了動(dòng)物的采食量；乳酸菌等有益菌對(duì)畜禽的腸道起到一定的調(diào)節(jié)作用；同時(shí)，食物中的營(yíng)養(yǎng)被充分吸收后，殘留物中的養(yǎng)分少了，利用這些養(yǎng)分生長(zhǎng)和繁殖的有害微生物也相應(yīng)減少了，這樣，有利于改善動(dòng)物的生長(zhǎng)環(huán)境；微生物在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生了一些酶類(lèi)、多糖、酚類(lèi)物質(zhì)，消除了的飼料抗?fàn)I養(yǎng)因子，發(fā)酵產(chǎn)物中的營(yíng)養(yǎng)豐富，其中，氨基酸總含量及小肽含量均在12 18% ；4、添加了酸性蛋白酶和酸性木聚糖酶，加快了發(fā)酵的速度，提高了發(fā)酵效率；通過(guò)酶制劑與游離棉酚之間的相互作用，更有效降低了棉酚含量，使得棉粕成為安全的蛋白源。5、所得的成品用途廣，可作為畜禽及水產(chǎn)動(dòng)物的飼料。6、該制備方法操作簡(jiǎn)單，對(duì)設(shè)備的要求不高，便于推廣。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制。實(shí)施例1一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，包括下述步驟1) 一級(jí)菌種的制備a、用接種環(huán)，各取一環(huán)熱帶假絲酵母菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌、啤酒酵母菌菌體分別接種至盛有IOOmL液體酵母菌培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，于30°C，振蕩培養(yǎng)36h，直至各種菌液濃度為IO8 109cfu/mL，制得假絲酵母菌一級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌一級(jí)菌種、啤酒酵母菌一級(jí)菌種；其中酵母菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨4.55g/L，酵母膏14g/L，氯化鈉 3. 5g/L，葡萄糖 9g/L，pH 值為 7. 0?？莶菅挎邨U菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨9g/L，牛肉膏5.5g/L，葡萄糖 llg/L，氯化鈉 4. 5g/L，Ph 為 6. 5。乳桿菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白4. 5g/L，葡萄糖3. 5g/L，氯化鈉2. 5g/ L，磷酸二氫鉀2. 5g/L，磷酸氫二鉀2. 5g/L，淀粉1. 8g/L，氯化鎂0. 2g/L，硫酸鈣0. 05g/L。b、用接種環(huán)，挑取一環(huán)枯草芽孢桿菌菌體接種至盛有IOOmL液體枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，在30°C，振蕩培養(yǎng)36h，至菌液濃度為IO8 109cfu/mL，制得枯草芽孢桿菌一級(jí)菌種；C、用移液器吸取100 μ L液體乳桿菌菌體至盛有200mL液體乳桿菌培養(yǎng)基的250mL 三角瓶中，三角瓶用硅膠塞密封，，在30°C，靜置培養(yǎng)60h，至菌液濃度為IO8 109cfu/mL， 制得乳桿菌一級(jí)菌種。2) 二級(jí)菌種的制備a、將步驟1)中制備的假絲酵母菌一級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌一級(jí)菌種、啤酒酵母菌一級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌一級(jí)菌種以質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的接種量，分別接種至盛有^g固體培養(yǎng)基的塑料盆(塑料盆須使用前經(jīng)過(guò)酒精消毒)中，于30°C，培養(yǎng)72h，制得假絲酵母菌二級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌二級(jí)菌種、啤酒酵母菌二級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌二級(jí)菌種；b、將步驟1)中制備的IOOmL乳桿菌一級(jí)菌種以體積分?jǐn)?shù)接種至盛有乳桿菌培養(yǎng)基中，在30°C，靜置培養(yǎng)60h，制得的乳桿菌二級(jí)菌種。
其中，稱(chēng)取下述重量分?jǐn)?shù)的原料豆粕60%，棉粕30%，玉米粉5%，糖蜜4. 95%， 硫酸鎂0. 05%，混合均勻后，再調(diào)節(jié)水分質(zhì)量至固體培養(yǎng)基總質(zhì)量的42%。3)發(fā)酵底物的制備稱(chēng)取下述質(zhì)量百分比的原料棉粕75%、豆粕15. 5%、玉米粉5%、糖蜜4%、磷酸二氫鉀0. 38%,80, 000U/g酸性木聚糖酶0. 08%、100，000U/g酸性蛋白酶0. 04%作為發(fā)酵底物；4)發(fā)酵底物接種將步驟2、中的制備的假絲酵母菌二級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌二級(jí)菌種、啤酒酵母菌二級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌二級(jí)菌種以重量比為3 :1:1: 2混合均勻后，取固體混合菌 20kg和液體乳酸桿菌二級(jí)種4. 5kg接種至0. 55T步驟幻所得的發(fā)酵底物中，再加入0. 45T 的水，使發(fā)酵底物含水量至45%，混合均勻，最后堆成垛高度在0. 6 0. 8米，在30°C左右發(fā)酵4天后，在45°C風(fēng)干后即得成品飼料。隨機(jī)取樣，測(cè)定其理化指標(biāo)蛋白45. 22% (與發(fā)酵前相比，提高了 15.50%)，小肽含量13. 18%，氨基酸含量15. 47%，游離酚含量0.019%，脫毒效率在93%。實(shí)施例2一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，包括下述步驟1) 一級(jí)菌種的制備a、用接種環(huán)，各挑取一環(huán)熱帶假絲酵母菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌、啤酒酵母菌菌體分別接種至盛有IOOmL液體酵母菌培養(yǎng)基的250mL三角瓶酵母菌培養(yǎng)基中，于30°C，振蕩培養(yǎng) 36h，直至各種菌液濃度為IO8 109cfu/mL，制得假絲酵母菌一級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌一級(jí)菌種、啤酒酵母菌一級(jí)菌種；其中酵母菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨4.55g/L，酵母膏14g/L，氯化鈉 3. 5g/L，葡萄糖 9g/L，pH 值為 6. 5?？莶菅挎邨U菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，葡萄糖 llg/L，氯化鈉 5. 5g/L，Ph 為 7. 5。乳桿菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白4. 5g/L，葡萄糖2. 5g/L，氯化鈉3. 5g/ L,磷酸二氫鉀2. 5g/L，磷酸氫二鉀3. 0g/L,淀粉1. 8g/L，氯化鎂0. 2g/L，硫酸鈣0. 05g/Lb、用接種環(huán)，挑取一環(huán)枯草芽孢桿菌菌體接種至盛有IOOmL液體枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，在30°C，振蕩培養(yǎng)36h，至菌液濃度為IO8 109cfu/mL，制得枯草芽孢桿菌一級(jí)菌種；C、用移液器吸取100 μ L液體乳桿菌菌體至盛有200mL液體乳桿菌培養(yǎng)基的250mL 三角瓶中(三角瓶用硅膠塞密封)，在30°C，靜置培養(yǎng)60h，至菌液濃度為IO8 109cfu/mL， 制得乳桿菌一級(jí)菌種。2) 二級(jí)菌種的制備a、將步驟1)中制備的假絲酵母菌一級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌一級(jí)菌種、啤酒酵母菌一級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌一級(jí)菌種以質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的接種量，分別接種至盛有^g固體培養(yǎng)基的塑料盆(塑料盆使用前須經(jīng)過(guò)酒精消毒)中，于30°C，培養(yǎng)72h，制得假絲酵母菌二級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌二級(jí)菌種、啤酒酵母菌二級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌二級(jí)菌種；
b、將步驟1)中制備的IOOmL乳桿菌一級(jí)菌種以體積分?jǐn)?shù)接種至盛有乳桿菌培養(yǎng)基中，在30°C，靜置培養(yǎng)60h，制得的乳桿菌二級(jí)菌種。其中，稱(chēng)取下述重量分的原料豆粕63%，棉粕37 %，玉米粉5%，糖蜜4. 97%，硫酸鎂0. 03%，再調(diào)節(jié)水分質(zhì)量至固體培養(yǎng)基總質(zhì)量的40%。3)發(fā)酵底物的制備稱(chēng)取下述質(zhì)量百分比的原料棉粕75%、豆粕15. 5%、玉米粉5%、糖蜜4%、磷酸二氫鉀0.35%、80，000U/g酸性木聚糖酶0. 1 %、100，000U/g酸性蛋白酶0. 05 %作為發(fā)酵底物；4)發(fā)酵底物接種將步驟2、中的制備的假絲酵母菌二級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌二級(jí)菌種、啤酒酵母菌二級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌二級(jí)菌種以重量比為3 :1:1: 2混合均勻后，取固體混合菌25kg和液體乳酸桿菌二級(jí)種4. 5kg接種至0. 58t (噸)步驟幻所得的發(fā)酵底物中，再加入0. 42t的水，使發(fā)酵底物含水量至42%，混合均勻，最后堆成垛高度在0. 6 0. 8米，在 30°C左右發(fā)酵4天后，在45°C風(fēng)干后即得成品飼料。隨機(jī)取樣，測(cè)定其理化指標(biāo)蛋白47. M %，與發(fā)酵前相比，提高18. 66 %，小肽含量16. 18%，氨基酸含量16. 47%，游離酚含量0.018%，脫毒效率在95%。實(shí)施例3一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，包括下述步驟1) 一級(jí)菌種的制備a、用接種環(huán)，各挑取一環(huán)熱帶假絲酵母菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌、啤酒酵母菌菌體分別接種至盛有IOOmL液體酵母菌培養(yǎng)基的250mL三角瓶酵母菌培養(yǎng)基中，于30°C，振蕩培養(yǎng) 36h，直至各種菌液濃度為IO8 109cfu/mL，制得假絲酵母菌一級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌一級(jí)菌種、啤酒酵母菌一級(jí)菌種；其中酵母菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨4.55g/L，酵母膏14g/L，氯化鈉 3. 5g/L，葡萄糖 9g/L，pH 值為 7. 5?？莶菅挎邨U菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨9g/L，牛肉膏4.5g/L，葡萄糖 9g/L,氯化鈉 4. 5g/L，Ph 為 6. 5。乳桿菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白4. 5g/L，葡萄糖3. 0g/L，氯化鈉3. Og/ L,磷酸二氫鉀3. 5g/L，磷酸氫二鉀2. 5g/L，淀粉2. 2g/L，氯化鎂0. 2g/L，硫酸鈣0. 05g/L。b、用接種環(huán)，挑取一環(huán)枯草芽孢桿菌菌體接種至盛有IOOmL液體枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，在30°C，振蕩培養(yǎng)36h，至菌液濃度為IO8 109cfu/mL，制得枯草芽孢桿菌一級(jí)菌種；C、用移液器吸取100 μ L液體乳桿菌菌體至盛有200mL液體乳桿菌培養(yǎng)基的250mL 三角瓶中(三角瓶用硅膠塞密封)，在30°C，靜置培養(yǎng)60h，至菌液濃度為IO8 109cfu/mL， 制得乳桿菌一級(jí)菌種。2) 二級(jí)菌種的制備a、將步驟1)中制備的假絲酵母菌一級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌一級(jí)菌種、啤酒酵母菌一級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌一級(jí)菌種以質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的接種量，分別接種至盛有^g固體培養(yǎng)基的塑料盆(塑料盆使用前須經(jīng)過(guò)酒精消毒)中，于30°C，培養(yǎng)72h，制得假絲酵母菌二級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌二級(jí)菌種、啤酒酵母菌二級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌二級(jí)菌種；b、將步驟1)中制備的IOOmL乳桿菌一級(jí)菌種以體積分?jǐn)?shù)接種至盛有乳桿菌培養(yǎng)基中，在30°C，靜置培養(yǎng)60h，制得的乳桿菌二級(jí)菌種。其中，稱(chēng)取下述重量分的原料豆粕65%，棉粕25 %，玉米粉4. 95%，糖蜜5%，硫酸鎂0. 05%，混合均勻后，再調(diào)節(jié)水分質(zhì)量至固體培養(yǎng)基總質(zhì)量的45%。3)發(fā)酵底物的制備稱(chēng)取下述質(zhì)量百分比的原料棉粕75%、豆粕15. 5%、玉米粉5%、糖蜜4%、磷酸二氫鉀0. 37%,80, 000U/g酸性木聚糖酶0. 08%、100，000U/g酸性蛋白酶0. 05%作為發(fā)酵底物；4)發(fā)酵底物接種將步驟2、中的制備的假絲酵母菌二級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌二級(jí)菌種、啤酒酵母菌二級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌二級(jí)菌種以重量比為3 :1:1: 2混合均勻后，取固體混合菌 25kg和液體乳酸桿菌二級(jí)種4. 5kg接種至0. 58t步驟幻所得的發(fā)酵底物中，再加入0. 42t 的水，使發(fā)酵底物含水量至42%，混合均勻，最后堆成垛高度在0. 6 0. 8米，在30°C左右發(fā)酵4天后，在45°C風(fēng)干后即得成品飼料。隨機(jī)取樣，測(cè)定其理化指標(biāo)蛋白46. 22 %，與發(fā)酵前相比，提高16. 90 %，小肽含量14. 32%，氨基酸含量15. 47%，游離酚含量0. 021%，脫毒效率在96%以上。
權(quán)利要求
1.一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，其特征在于，包括下述步驟1)一級(jí)菌種的制備a、將熱帶假絲酵母菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌、啤酒酵母菌分別接種至酵母菌培養(yǎng)基中，于 30 37°C，振蕩培養(yǎng)24 36h，制得假絲酵母菌一級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌一級(jí)菌種、啤酒酵母菌一級(jí)菌種；b、將枯草芽孢桿菌接種至枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基中，在30 37°C，振蕩培養(yǎng)M 36h， 制得枯草芽孢桿菌一級(jí)菌種；C、將乳桿菌接種乳桿菌培養(yǎng)基中，在30 37°C，靜置培養(yǎng)48 60h，制得乳桿菌一級(jí)菌種；2)二級(jí)菌種的制備a、將步驟1)中制備的假絲酵母菌一級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌一級(jí)菌種、啤酒酵母菌一級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌一級(jí)菌種以2 2. 5wt%的接種量，分別接種至固體培養(yǎng)基中，于 30 37°C，培養(yǎng)48 72h，制得假絲酵母菌二級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌二級(jí)菌種、啤酒酵母菌二級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌二級(jí)菌種；b、將步驟1)中制備的乳桿菌一級(jí)菌種接種乳桿菌培養(yǎng)基中，在30 37°C，靜置培養(yǎng) 48 60h，制得的乳桿菌二級(jí)菌種。3)發(fā)酵底物的制備稱(chēng)取下述質(zhì)量百分比的原料棉粕75 80%、豆粕10 15%、玉米粉4 5%、糖蜜 3 4 %、磷酸二氫鉀0. 35 0. 45 %、碳酸鈣0. 4 0. 5 %、酸性木聚糖酶0. 08 0. 1 %、酸性蛋白酶0. 04 0. 05%混合制得發(fā)酵底物；4)發(fā)酵底物接種將步驟2)中的制備的假絲酵母菌二級(jí)菌種、產(chǎn)朊假絲酵母菌二級(jí)菌種、啤酒酵母菌二級(jí)菌種和枯草芽孢桿菌二級(jí)菌種以重量比為3 :1:1: 2混合均勻后，以2 2. 5%的接種量接種至步驟幻所得的發(fā)酵底物中；乳桿菌二級(jí)菌種以0. 4 0. 5%的接種量接種至步驟3)所得的發(fā)酵底物中，再調(diào)節(jié)含水量至45 50%，混合均勻，發(fā)酵3 6天后，干燥即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，其特征在于，所述的酵母菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨4. 5 5. 5g/L，酵母膏14 16g/L，氯化鈉 3. 5 4. 5g/L，葡萄糖 9 1 lg/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，其特征在于，所述的酵母菌種子培養(yǎng)基和枯草芽孢桿菌種子培養(yǎng)基的PH均為6. 5 7. 5。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，其特征在于，所述的枯草芽孢桿菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨9 llg/L，牛肉膏4. 5 5. 5g/L，葡萄糖9 llg/L，氯化鈉4. 5 5. 5g/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，其特征在于，所述的乳桿菌種子培養(yǎng)基中各成分的濃度為蛋白胨3. 5 4. 5g/L，葡萄糖3. 5 4. 5g/L，氯化鈉 2. 5 3. 5g/L，磷酸二氫鉀2. 5 3. 5g/L，磷酸氫二鉀2. 5 3. 5g/L，淀粉1. 8 2. 2g/L， 氯化鎂0. 2g/L，硫酸鈣0. 05g/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，其特征在于，所述的固體培養(yǎng)基干料由下述重量分的原料組成豆粕60 65 %，棉粕25 30 %，玉米粉4 5 %， 糖蜜4 5%，硫酸鎂0. 03 0. 05%。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，其特征在于，所述的固體培養(yǎng)基的含水量為40 45%。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，其特征在于，所述的酸性木聚糖酶的酶活力為80，000IU/g。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，其特征在于，所述的酸性蛋白酶的酶活力為100，000IU/g。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法，旨在提供一種既可以解決棉粕脫毒問(wèn)題，又可以提高棉粕中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的無(wú)毒棉粕動(dòng)物飼料的制備方法；其技術(shù)要點(diǎn)是1)一級(jí)菌種的制備；2)二級(jí)菌種的制備；3)發(fā)酵底物的制備；4)發(fā)酵底物接種，再調(diào)節(jié)含水量至45～50％，混合均勻，發(fā)酵3～6天后，干燥即得；可作為畜禽及水產(chǎn)動(dòng)物的飼料；屬于飼料制備技術(shù)領(lǐng)域。
文檔編號(hào)A23K1/14GK102318737SQ20111030761
公開(kāi)日2012年1月18日 申請(qǐng)日期2011年10月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月11日
發(fā)明者余忠麗, 惲輝, 王華榮, 趙大偉 申請(qǐng)人:廣東希普生物科技股份有限公司