本發(fā)明屬于中藥材種植技術領域，尤其涉及一種促進秦艽種子萌發(fā)的方法。
背景技術：
秦艽為龍膽科龍膽屬多年生草本植物，生長于海拔2000～4950m的亞高山草旬及灌叢。其以根入藥，性微寒，味辛、苦；歸胃經(jīng)、肝經(jīng)、膽經(jīng)；有袪風濕、舒筋絡、清虛熱等功效，主治風濕痹痛、筋脈拘攣、骨節(jié)酸痛、日晡潮熱、小兒疳積發(fā)熱等癥，在我國已有兩千多年的藥用歷史。由于長期以來過多強調(diào)秦艽的開發(fā)利用，使市場需求量快速增加，導致過度采挖，致使野生資源日趨減少，被列為國家三級重點保護植物。為了緩解其瀕危程度，保護秦艽野生資源，人工種植逐漸受到人們關注。秦艽繁殖方法有種子繁殖和分株繁殖，種子繁殖的植株生長繁茂，根莖粗大，是目前最常用方法；但其種子小、壽命短、產(chǎn)量低，且有后熟作用。此外，不論采用春播還是秋播，在播種過程中都存在發(fā)芽率低、發(fā)芽不整齊等情況，嚴重制約著秦艽的規(guī)范化種植和生產(chǎn)。組培技術已被廣泛應用于作物種植技術領域中，但秦艽在組織培養(yǎng)中，由于種子種皮厚且堅硬，按照常規(guī)的方法培養(yǎng)無菌苗，萌發(fā)率及其低下，限制了利用基因工程手段對秦艽進行改良育種等方面的研究。因此，為了秦艽的大規(guī)模栽培和規(guī)范化生產(chǎn)以及利用秦艽種子進行組織培養(yǎng)及遺傳操作，研究如何縮短秦艽種子發(fā)芽時間、提高種子發(fā)芽率及種子抗性成為了本領域亟待解決的技術問題。
近年為解決發(fā)芽問題，生產(chǎn)上通常采用藥劑處理、溫差處理、物理處理等方法。試驗表明，藥劑方法中用赤霉素(劉麗莎、姬可平，秦艽種子發(fā)芽特性的研究[J].中草藥，2002，3(33)：269～271)、NaCl、KNO3(滕紅梅、曹曉燕，王喆之，不同培養(yǎng)條件及預處理對秦艽種子萌發(fā)的影響[J].種子，2008，11：87～91)等處理、物理方法中用頻率為40kHz超聲處理15分鐘(滕紅梅、曹曉燕，王喆之.不同培養(yǎng)條件及預處理對秦艽種子萌發(fā)的影響[J].種子，2008，11：87～91)、溫差方法中用20℃的熱水浸泡處理(張西玲、王嵐，劉麗莎，麻花秦艽種子發(fā)芽特性的研究[J].中藥材，2004，3(27)：160～161)等具有促進秦艽種子萌發(fā)的作用。但是這些方法仍不能解決縮短種子發(fā)芽時間及提高抗性方面的問題。為此，專利CN 103250488 A公開了一種促進秦艽種子萌發(fā)的方法，披露了“先將植物種子浸泡在含有赤霉素和硫酸亞鐵的水溶液中，得到處理后植物種子；再將所述處理后的植物種子播種，實現(xiàn)促進植物種子萌發(fā)和/或提高植物種子萌發(fā)耐受性；所述含有赤霉素和硫酸亞鐵的水溶液中赤霉素和硫酸亞鐵的質(zhì)量比為1：5～200”。其通過赤霉素處理種子可有效的打破種子的休眠，促進萌發(fā)，幫助種子通過萌發(fā)的初始階段，誘發(fā)種子活力；同時利用一定濃度的微量元素浸種處理以活化種子體內(nèi)的酶系統(tǒng)，促進種子儲藏物質(zhì)的分解，加速種子萌發(fā)的過程。該方法能使種子萌發(fā)在發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)有顯著提高，且在5和35℃萌發(fā)條件下與常規(guī)種子在發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)上存在差異；體現(xiàn)在種子發(fā)芽快，出苗整齊，對低溫和高溫的抗性顯著增強，具有良好的市場應用前景。眾所周知，種子發(fā)芽率與諸多因素相關，并非只與種皮堅硬有關，因此，通過上述方法能夠潛在提升發(fā)芽率，促進發(fā)芽，但仍然難以滿足需求。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于：提供一種促進秦艽種子萌發(fā)的方法，采用“低溫-沼液-酒精”聯(lián)合處理手段，解決秦艽種子萌發(fā)率低、耐候性差、萌發(fā)緩慢的問題。
為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案：
一種促進秦艽種子萌發(fā)的方法，其特征在于：包括如下步驟：
1)種子選?。?月20至25日，采集半成熟秦艽種子，置于通風透氣處，在25～30℃條件下，干燥至含水量低于15％，其中，種子要求籽粒飽滿、無蟲，表皮光滑、無蟲蛀；
2)低溫處理：在育苗室內(nèi)，將干燥的種子與濕沙土按照1:8～10的比例混合后，攤放在預制的苗床上，再用木屑與馬糞的混合物覆蓋，覆蓋厚度10～20cm，控制育苗室溫度12～18℃，進行低溫處理，時間為3～7天；
3)沼液處理：低溫處理結(jié)束后，取出并分離秦艽種子，放入無菌沼液中，常溫處理18～36小時；
4)經(jīng)沼液處理后，采用75％酒精溶液進行消毒，然后自來水沖洗2～3次。
進一步，所述的無菌沼液中還加入赤霉素，并充分攪拌混合，赤霉素加入量為0.01mg/L沼液。
進一步，所述的無菌沼液中還加入FeSO4溶液，加入量為0.1ml/L沼液。
進一步，所述的無菌沼液pH值控制為6.4～7.2。
進一步，所述的木屑與馬糞的混合物中，木屑重量比例為65～78％。
與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果在于：
1)本發(fā)明在播種前對種子進行“低溫處理-沼液浸泡-酒精消毒”綜合處理，尤其是在低溫處理時，將種子與濕沙土混合后，攤放在預制的苗床上，再用木屑與馬糞的混合物覆蓋，控制育苗室溫度12～18℃，進行低溫處理，相比傳統(tǒng)低溫處理技術，該方法采用木屑與馬糞的混合物覆蓋，透氣性更好，不會產(chǎn)生堆積熱，確保種子內(nèi)外溫度穩(wěn)定，且更接近環(huán)境溫度；然后采用常溫沼液浸泡處理，易形成穩(wěn)定的溫差，進而達到促進秦艽種子萌發(fā)的目的。此外，本發(fā)明選用半成熟種子，種皮硬度相對較低且水分流動性大，營養(yǎng)分布不均衡，采用低溫處理時，可降低水分的流動性，進而使營養(yǎng)組分緩慢移動至均衡，進而提高種子的質(zhì)量，對提高萌發(fā)率有利。
2)本發(fā)明在利用沼液浸泡處理時，加入赤霉素與FeSO4溶液，霉素是植物界廣泛存在的植物激素，用其處理種子可有效的打破種子的休眠，促進萌發(fā)，幫助種子通過萌發(fā)的初始階段，誘發(fā)種子活力；對于大多數(shù)需光種子來說，外源赤霉素可以代替紅外誘導種子的暗萌發(fā)；硫酸亞鐵常用作微肥對種子進行施加，鐵作為微量元素的一種在植物體內(nèi)含量很少，但卻是植物生長不可缺少的。一定濃度的微量元素浸種處理，可以活化種子體內(nèi)的酶系統(tǒng)，促進種子儲藏物質(zhì)的分解，加速種子萌發(fā)的過程。因此，采用本發(fā)明的方法，使種子萌發(fā)在發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)有顯著提高。
3)本發(fā)明采用赤霉素-FeSO4沼液溶液處理種子，相比傳統(tǒng)技術中的赤霉素-FeSO4水溶液，其含有豐富的營養(yǎng)成分，且渾濁有相應黏度，不僅為種子萌發(fā)提供養(yǎng)分，更易將赤霉素-FeSO4“束縛”于種子表面，形成一層促萌發(fā)營養(yǎng)膜，提高種子對赤霉素和Fe2+的吸收，提高赤霉素與Fe2+的利用率，促進秦艽種子萌發(fā)效果更好。
4)本發(fā)明操作簡單，成本低廉，可以廣泛使用。經(jīng)過本方法處理后的種子發(fā)芽快，出苗整齊，對低溫和高溫的抗性顯著增強，具有良好的市場應用前景。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的技術方案作進一步說明，以便于同領域技術人員的理解。
實施例1
一種促進秦艽種子萌發(fā)的方法，包括如下步驟：
1)種子選?。?月20至25日，采集半成熟秦艽種子，置于通風透氣處，在25～30℃條件下，干燥至含水量低于15％，其中，種子要求籽粒飽滿、無蟲，表皮光滑、無蟲蛀；
2)低溫處理：在育苗室內(nèi)，將干燥的種子與濕沙土按照1:8～10的比例混合后，攤放在預制的苗床上，再用木屑與馬糞的混合物覆蓋，覆蓋厚度10～20cm，控制育苗室溫度12～18℃，進行低溫處理，時間為3～7天，所述的木屑與馬糞的混合物中，木屑重量比例為65～78％；
3)沼液處理：低溫處理結(jié)束后，取出并分離秦艽種子，放入無菌沼液中，常溫處理18～36小時，其中，沼液pH值控制為6.4～7.2；
4)經(jīng)沼液處理后，采用75％酒精溶液進行消毒，然后自來水沖洗2～3次。
實施例2
一種促進秦艽種子萌發(fā)的方法，包括如下步驟：
1)種子選?。?月20至25日，采集半成熟秦艽種子，置于通風透氣處，在25～30℃條件下，干燥至含水量低于15％，其中，種子要求籽粒飽滿、無蟲，表皮光滑、無蟲蛀；
2)低溫處理：在育苗室內(nèi)，將干燥的種子與濕沙土按照1:8～10的比例混合后，攤放在預制的苗床上，再用木屑與馬糞的混合物覆蓋，覆蓋厚度10～20cm，控制育苗室溫度12～18℃，進行低溫處理，時間為3～7天，所述的木屑與馬糞的混合物中，木屑重量比例為65～78％；
3)沼液處理：低溫處理結(jié)束后，取出并分離秦艽種子，放入無菌沼液中，常溫處理18～36小時，其中，沼液pH值控制為6.4～7.2；
4)經(jīng)沼液處理后，采用75％酒精溶液進行消毒，然后自來水沖洗2～3次，然后采用常規(guī)方法下播，并記錄萌發(fā)率。
實施例2
一種促進秦艽種子萌發(fā)的方法，包括如下步驟：
1)種子選取：8月20至25日，采集半成熟秦艽種子，置于通風透氣處，在25～30℃條件下，干燥至含水量低于15％，其中，種子要求籽粒飽滿、無蟲，表皮光滑、無蟲蛀；
2)低溫處理：在育苗室內(nèi)，將干燥的種子與濕沙土按照1:8～10的比例混合后，攤放在預制的苗床上，再用木屑與馬糞的混合物覆蓋，覆蓋厚度10～20cm，控制育苗室溫度12～18℃，進行低溫處理，時間為3～7天，所述的木屑與馬糞的混合物中，木屑重量比例為65～78％；
3)沼液處理：低溫處理結(jié)束后，取出并分離秦艽種子，放入無菌沼液中，向無菌沼液中加入赤霉素，充分攪拌混合后，赤霉素加入量為0.01mg/L沼液，在常溫下，浸泡處理18～36小時，其中，沼液pH值控制為6.4～7.2；
4)經(jīng)沼液處理后，采用75％酒精溶液進行消毒，然后自來水沖洗2～3次，然后采用常規(guī)方法下播，并記錄萌發(fā)率。
實施例3
一種促進秦艽種子萌發(fā)的方法，包括如下步驟：
1)種子選?。?月20至25日，采集半成熟秦艽種子，置于通風透氣處，在25～30℃條件下，干燥至含水量低于15％，其中，種子要求籽粒飽滿、無蟲，表皮光滑、無蟲蛀；
2)低溫處理：在育苗室內(nèi)，將干燥的種子與濕沙土按照1:8～10的比例混合后，攤放在預制的苗床上，再用木屑與馬糞的混合物覆蓋，覆蓋厚度10～20cm，控制育苗室溫度12～18℃，進行低溫處理，時間為3～7天，所述的木屑與馬糞的混合物中，木屑重量比例為65～78％；
3)沼液處理：低溫處理結(jié)束后，取出并分離秦艽種子，放入無菌沼液中，向無菌沼液中加入FeSO4溶液，加入量為0.1ml/L沼液，在常溫下，浸泡處理18～36小時，其中，沼液pH值控制為6.4～7.2；
4)經(jīng)沼液處理后，采用75％酒精溶液進行消毒，然后自來水沖洗2～3次，然后采用常規(guī)方法下播，并記錄萌發(fā)率。
實施例4
一種促進秦艽種子萌發(fā)的方法，包括如下步驟：
1)種子選取：8月20至25日，采集半成熟秦艽種子，置于通風透氣處，在25～30℃條件下，干燥至含水量低于15％，其中，種子要求籽粒飽滿、無蟲，表皮光滑、無蟲蛀；
2)低溫處理：在育苗室內(nèi)，將干燥的種子與濕沙土按照1:8～10的比例混合后，攤放在預制的苗床上，再用木屑與馬糞的混合物覆蓋，覆蓋厚度10～20cm，控制育苗室溫度12～18℃，進行低溫處理，時間為3～7天，所述的木屑與馬糞的混合物中，木屑重量比例為65～78％；
3)沼液處理：低溫處理結(jié)束后，取出并分離秦艽種子，放入無菌沼液中，向無菌沼液中加入赤霉素，充分攪拌混合后，赤霉素加入量為0.01mg/L沼液；然后加入FeSO4溶液，加入量為0.1ml/L沼液，在常溫下，浸泡處理18～36小時，其中，沼液pH值控制為6.4～7.2；
4)經(jīng)沼液處理后，采用75％酒精溶液進行消毒，然后自來水沖洗2～3次，然后采用常規(guī)方法下播，并記錄萌發(fā)率。
在上述實施例中，種子下播后10天左右即可開始發(fā)芽，具體見下表1。
表1-不同處理對萌發(fā)率的影響
從上表1可知，通過本發(fā)明技術方案處理秦艽種子，萌發(fā)時間均控制在11天左右，尤其是加入赤霉素及FeSO4溶液后，其萌發(fā)時間提前至9天，相比現(xiàn)有10天的萌發(fā)時間提早1天；此外，通過本發(fā)明處理后，其萌發(fā)率從60％左右提高至81％以上，尤其在加入赤霉素及FeSO4溶液后，萌發(fā)率高達89.5％。