本發(fā)明涉及食用菌栽培技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種產(chǎn)量高的草菇栽培方法。
背景技術(shù):
隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,食用菌產(chǎn)業(yè)迅猛發(fā)展,食用菌的栽培兩在不斷增長(zhǎng),因而對(duì)栽培原料的需求日趨增大。在食用菌代料栽培技術(shù)中,傳統(tǒng)栽培原料主要有棉籽、甘蔗渣、雜木屑、作物秸稈等。隨著人們對(duì)這些原材料綜合利用的技術(shù)日益成熟,這些原料的用途也更為廣泛,如木屑用于加工合成板材,甘蔗渣用于造紙等,這就提高了食用菌生產(chǎn)成本,無(wú)形中增加了食用菌生產(chǎn)企業(yè)的壓力,因此研究與開發(fā)食用菌新型栽培原料,降低成產(chǎn)成本,提高經(jīng)濟(jì)效益,具有重要的意義。我國(guó)是板栗種植的大國(guó),在板栗種植區(qū),每年采收板栗之后都會(huì)產(chǎn)生大量的下腳料—板栗苞殼。當(dāng)前人們對(duì)板栗苞殼的綜合利用研究與開發(fā),大多都集中在固型炭生產(chǎn)、栲膠以及天然色素提取等方面,由于板栗苞殼含有碳、氮和礦物質(zhì)等成分,可提供食用菌生長(zhǎng)發(fā)育必需的基本營(yíng)養(yǎng)。
覃寶山在《板栗苞殼栽培杏鮑菇的試驗(yàn)》一文中以板栗苞殼為主要碳源物質(zhì),以稻草、雜樹葉、板栗葉和桑枝屑等為輔助碳源物質(zhì),以米糠為氮源物質(zhì),設(shè)置10個(gè)處理進(jìn)行杏鮑菇栽培試驗(yàn),從菌絲生長(zhǎng)狀況、生長(zhǎng)周期、子實(shí)體性狀特征、生物學(xué)效率和菇的商品性狀等方面進(jìn)行對(duì)比分析,結(jié)果表明:利用板栗苞殼與板栗葉栽培杏鮑菇是可行的,單獨(dú)以板栗苞殼為碳源物質(zhì)或者在板栗苞殼中添加適量的稻草、雜樹葉、板栗葉和桑枝屑等物質(zhì),均可獲得較好的栽培效果。但是板栗苞殼中的丹寧較多,再進(jìn)行對(duì)平菇和秀珍菇進(jìn)行栽培時(shí),培養(yǎng)產(chǎn)量不高,而且苞殼大小必需適宜,太小培養(yǎng)基的通透性不夠,易滋生細(xì)菌,太大容易戳破塑料膜,導(dǎo)致溫濕度不夠,影響食用菌的產(chǎn)量,并且上文中的試驗(yàn)用量較少,而且僅是作為杏鮑菇的培養(yǎng)料,所以必須將板栗苞殼做進(jìn)一步的加工滿足多重食用菌的培養(yǎng)需求,讓板栗苞殼得到合理的利用,杜絕資源浪費(fèi),降低生產(chǎn)成本,提高經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明目的就是為了彌補(bǔ)已有技術(shù)的缺陷,提供一種產(chǎn)量高的草菇栽培方法。
本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
一種產(chǎn)量高的草菇栽培方法,包括以下具體步驟:
(1)食用菌母種的分離和培養(yǎng):
將馬鈴薯去皮切片、爛香蕉去皮切片放入鍋中,按照質(zhì)量體積比1g:5ml加入去離子水將馬鈴薯煮至熟而不爛,濾去殘?jiān)瑸V液放回鍋中,加入瓊脂、蔗糖、活性炭和蛋白胨,充分?jǐn)嚢枞芙夂蠹尤脒m量的去離子水,趁熱分裝于試管中,置于高壓滅菌鍋中于121℃滅菌30min,冷卻后取出擺成斜面,然后在無(wú)菌操作臺(tái)中將食用菌組織接種在培養(yǎng)基上,在20-30℃的溫度下培養(yǎng),直到菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)基斜面,即獲得食用菌母種,再經(jīng)擴(kuò)繁到所要的數(shù)量即為一級(jí)種;
所述母種培養(yǎng)基配方為:馬鈴薯混合汁200-220g/L、瓊脂12-15g/L、蔗糖20-25g/L、蛋白胨5-7g/L、活性炭0.3-0.5g/L,加水至1000mL;
(2)液體種培養(yǎng)基的配制和培養(yǎng):
將板栗苞殼用粉碎機(jī)粉碎過(guò)60目篩,然后與去離子水按照質(zhì)量比1:15混合在水浴溫度100℃下熬煮2h,濾去殘?jiān)?,將玉米粉和麥麩按照質(zhì)量比3:2加到去離子水中煮沸30-40min,濾去殘?jiān)?,合并濾液并加入酵母粉、葡萄糖、硫酸鎂、磷酸二氫鉀和維生素B1片兩片,充分?jǐn)嚢枞芙夂蠹尤脒m量的去離子水,趁熱分裝于容器中,然后置于高壓滅菌鍋中于121℃滅菌40min,冷卻至室溫后備用;用一級(jí)菌種按照0.2mm?0.2mm大小在無(wú)菌操作臺(tái)上接種到液體培養(yǎng)基中,置于25℃的搖床中以180r/min進(jìn)行培養(yǎng),直到菌絲球長(zhǎng)滿80%的培養(yǎng)基時(shí),即可對(duì)固體培養(yǎng)料進(jìn)行接種;
所述液體培養(yǎng)基配方為:玉米粉混合汁160-200g/L、板栗苞殼40-50g/L、酵母粉5-8g/L、葡萄糖20-25g/L、硫酸鎂0.5-0.8g/L、磷酸二氫鉀1-1.4g/L、維生素B1片兩片/L,加水至1000mL;
(3)栽培出菇:
a、將板栗苞殼粉碎過(guò)60目篩,按照重量比一分為二,其中一份加到去離子水中煎煮2h,固液分離,將濾渣烘干后備用,將蘆筍老莖切成20cm大小,和濾渣、剩余的板栗苞殼分別浸泡于3%的石灰水中24h,取出瀝干后和板栗苞殼提取液、豆餅、啤酒酵母、醋酸鈣和檸檬酸渣按照二次發(fā)酵法處理,前發(fā)酵18天,共翻堆4次,然后覆膜發(fā)酵,60℃下保持10h,50℃下保持4天,發(fā)酵結(jié)束后使培養(yǎng)料的含水量在60-65%之間,pH值為7-7.5;
所述培養(yǎng)料的配方按照質(zhì)量百分比配比為:板栗苞殼55-70%、蘆筍老莖20-30%、豆餅22-26%、啤酒酵母1.7-3%、醋酸鈣1-1.5%、檸檬酸渣0.7-2%、去離子水適量;
b、將海藻酸鈉按照質(zhì)量體積比1:10溶于去離子水中,高碘酸鈉用去離子水溶解后將兩者混合,在室溫下避光攪拌24h,再加入與高碘酸鈉等摩爾的乙二醇終止反應(yīng)15-20min,透析3天去掉未反應(yīng)的物質(zhì),每天換水2-3次,透析結(jié)束后將透析液冷凍干燥備用;再將明膠溶于40%的醋酸溶液中,攪拌均勻后加入上述備用的透析液得到混合溶液,攪拌均勻后加到電紡機(jī)中進(jìn)行紡絲,然后將其浸泡在pH為9的90%的乙醇溶液中12h,取出后干燥備用;
c、將步驟a和步驟b制備的物質(zhì)按照質(zhì)量比20:1混合攪拌均勻,然后采用適宜規(guī)格的聚丙烯塑料袋裝混合培養(yǎng)料,邊裝邊壓,松緊度適宜,扎緊袋口后置于高壓滅菌鍋中滅菌,126℃2-2.5h,自然冷卻后取出培養(yǎng)袋,然后在無(wú)菌操作條件下配置營(yíng)養(yǎng)液,將營(yíng)養(yǎng)液噴灑到培養(yǎng)料中,再按照無(wú)菌操作接種,接種量以菌種覆蓋料面為宜;
所述的營(yíng)養(yǎng)液配方為:亞硒酸鈉4-5ppm、鉬酸銨6-8ppm、硫酸鋅6-8ppm、磷酸二氫鈣4-6ppm、硫酸亞鐵7-9ppm、碘化鉀4-5ppm,加水至1000mL;
d、將接種后的培養(yǎng)袋放置到干燥、清潔、通風(fēng)的培養(yǎng)室進(jìn)行暗光培養(yǎng),溫度控制在18-28℃,空氣相對(duì)濕度為65-75%,每隔7-10天翻一次培養(yǎng)袋,菌絲長(zhǎng)滿袋后轉(zhuǎn)出菇房;
e、選擇水質(zhì)好、質(zhì)地松、無(wú)雜蟲卵的泥土,加入2-3%的火山巖、3-5%的凹凸棒土和5-8%的鹿沼土混合攪拌均勻,然后再加入0.1%的尿素、0.1%磷肥、1.5%的石灰和0.1%的多菌靈,混合攪拌成營(yíng)養(yǎng)土,并且覆膜悶蓋2-3天,保持營(yíng)養(yǎng)土的濕度為45-55%,然后將步驟d中的菌包進(jìn)行壘墻覆土,然后根據(jù)食用菌出菇時(shí)需要的條件控制適宜的溫濕度和通風(fēng)條件即可。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:板栗苞殼是板栗堅(jiān)果外面球形的、密被針刺的總苞,由于食用菌通過(guò)分解、轉(zhuǎn)化被廢棄的有機(jī)物變成人來(lái)可食用的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì),而板栗苞殼含有碳、氮和礦物質(zhì)等成分,可以作為食用菌生長(zhǎng)發(fā)育必需的基本營(yíng)養(yǎng),所以本發(fā)明將板栗苞殼和煮汁后的板栗苞殼渣作為主要炭源物質(zhì),板栗苞殼的汁液作為發(fā)酵液,再輔以蘆筍老莖、豆餅、啤酒酵母、醋酸鈣和檸檬酸渣作為食用菌的培養(yǎng)料,滿足草菇生長(zhǎng)對(duì)碳源、氮源及其他營(yíng)養(yǎng)的需求,并且通過(guò)化學(xué)反應(yīng)制備出明膠/氧化海藻酸鈉交聯(lián)纖維,具有良好的吸水、保水和緩釋性能,可以將營(yíng)養(yǎng)液及時(shí)供給給食用菌,抗旱保肥,保證其營(yíng)養(yǎng)的供需,使其發(fā)菌快,出絲多,并且減少后期培養(yǎng)草菇的人力操作,省時(shí)省力,最后將出現(xiàn)原基的菌菇進(jìn)行壘墻種植,覆蓋自制的營(yíng)養(yǎng)土,能夠在后期多茬采摘菌菇為其提供營(yíng)養(yǎng),使其出菇潮數(shù)多、產(chǎn)量高,并且為板栗苞殼的資源重利用找到新的途徑,減少對(duì)環(huán)境的污染,本發(fā)明提供的草菇培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單易行,操作簡(jiǎn)單,培養(yǎng)的草菇營(yíng)養(yǎng)豐富含有鐵、鋅、鈣等多種礦質(zhì)元素,產(chǎn)量高,開發(fā)前景廣闊。
具體實(shí)施方式
一種產(chǎn)量高的草菇栽培方法,包括以下具體步驟:
(1)食用菌母種的分離和培養(yǎng):
將馬鈴薯去皮切片、爛香蕉去皮切片放入鍋中,按照質(zhì)量體積比1g:5ml加入去離子水將馬鈴薯煮至熟而不爛,濾去殘?jiān)?,濾液放回鍋中,加入瓊脂、蔗糖、活性炭和蛋白胨,充分?jǐn)嚢枞芙夂蠹尤脒m量的去離子水,趁熱分裝于試管中,置于高壓滅菌鍋中于121℃滅菌30min,冷卻后取出擺成斜面,然后在無(wú)菌操作臺(tái)中將食用菌組織接種在培養(yǎng)基上,在20℃的溫度下培養(yǎng),直到菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)基斜面,即獲得食用菌母種,再經(jīng)擴(kuò)繁到所要的數(shù)量即為一級(jí)種;
所述母種培養(yǎng)基配方為:馬鈴薯混合汁200g/L、瓊脂12g/L、蔗糖20g/L、蛋白胨5g/L、活性炭0.3g/L,加水至1000mL;
(2)液體種培養(yǎng)基的配制和培養(yǎng):
將板栗苞殼用粉碎機(jī)粉碎過(guò)60目篩,然后與去離子水按照質(zhì)量比1:15混合在水浴溫度100℃下熬煮2h,濾去殘?jiān)?,將玉米粉和麥麩按照質(zhì)量比3:2加到去離子水中煮沸30min,濾去殘?jiān)?,合并濾液并加入酵母粉、葡萄糖、硫酸鎂、磷酸二氫鉀和維生素B1片兩片,充分?jǐn)嚢枞芙夂蠹尤脒m量的去離子水,趁熱分裝于容器中,然后置于高壓滅菌鍋中于121℃滅菌40min,冷卻至室溫后備用;用一級(jí)菌種按照0.2mm?0.2mm大小在無(wú)菌操作臺(tái)上接種到液體培養(yǎng)基中,置于25℃的搖床中以180r/min進(jìn)行培養(yǎng),直到菌絲球長(zhǎng)滿80%的培養(yǎng)基時(shí),即可對(duì)固體培養(yǎng)料進(jìn)行接種;
所述液體培養(yǎng)基配方為:玉米粉混合汁160g/L、板栗苞殼40g/L、酵母粉5g/L、葡萄糖20g/L、硫酸鎂0.5g/L、磷酸二氫鉀1g/L、維生素B1片兩片/L,加水至1000mL;
(3)栽培出菇:
a、將板栗苞殼粉碎過(guò)60目篩,按照重量比一分為二,其中一份加到去離子水中煎煮2h,固液分離,將濾渣烘干后備用,將蘆筍老莖切成20cm大小,和濾渣、剩余的板栗苞殼分別浸泡于3%的石灰水中24h,取出瀝干后和板栗苞殼提取液、豆餅、啤酒酵母、醋酸鈣和檸檬酸渣按照二次發(fā)酵法處理,前發(fā)酵18天,共翻堆4次,然后覆膜發(fā)酵,60℃下保持10h,50℃下保持4天,發(fā)酵結(jié)束后使培養(yǎng)料的含水量在60%之間,pH值為7;
所述培養(yǎng)料的配方按照質(zhì)量百分比配比為:板栗苞殼55%、蘆筍老莖20%、豆餅22%、啤酒酵母1.7%、醋酸鈣1%、檸檬酸渣0.7%、去離子水適量;
b、將海藻酸鈉按照質(zhì)量體積比1:10溶于去離子水中,高碘酸鈉用去離子水溶解后將兩者混合,在室溫下避光攪拌24h,再加入與高碘酸鈉等摩爾的乙二醇終止反應(yīng)15min,透析3天去掉未反應(yīng)的物質(zhì),每天換水2次,透析結(jié)束后將透析液冷凍干燥備用;再將明膠溶于40%的醋酸溶液中,攪拌均勻后加入上述備用的透析液得到混合溶液,攪拌均勻后加到電紡機(jī)中進(jìn)行紡絲,然后將其浸泡在pH為9的90%的乙醇溶液中12h,取出后干燥備用;
c、將步驟a和步驟b制備的物質(zhì)按照質(zhì)量比20:1混合攪拌均勻,然后采用適宜規(guī)格的聚丙烯塑料袋裝混合培養(yǎng)料,邊裝邊壓,松緊度適宜,扎緊袋口后置于高壓滅菌鍋中滅菌,126℃2h,自然冷卻后取出培養(yǎng)袋,然后在無(wú)菌操作條件下配置營(yíng)養(yǎng)液,將營(yíng)養(yǎng)液噴灑到培養(yǎng)料中,再按照無(wú)菌操作接種,接種量以菌種覆蓋料面為宜;
所述的營(yíng)養(yǎng)液配方為:亞硒酸鈉4ppm、鉬酸銨6ppm、硫酸鋅6ppm、磷酸二氫鈣4ppm、硫酸亞鐵7ppm、碘化鉀4ppm,加水至1000mL;
d、將接種后的培養(yǎng)袋放置到干燥、清潔、通風(fēng)的培養(yǎng)室進(jìn)行暗光培養(yǎng),溫度控制在18℃,空氣相對(duì)濕度為65%,每隔7天翻一次培養(yǎng)袋,菌絲長(zhǎng)滿袋后轉(zhuǎn)出菇房;
e、選擇水質(zhì)好、質(zhì)地松、無(wú)雜蟲卵的泥土,加入2%的火山巖、3%的凹凸棒土和5%的鹿沼土混合攪拌均勻,然后再加入0.1%的尿素、0.1%磷肥、1.5%的石灰和0.1%的多菌靈,混合攪拌成營(yíng)養(yǎng)土,并且覆膜悶蓋2天,保持營(yíng)養(yǎng)土的濕度為45%,然后將步驟d中的菌包進(jìn)行壘墻覆土,然后根據(jù)食用菌出菇時(shí)需要的條件控制適宜的溫濕度和通風(fēng)條件即可。
為了體現(xiàn)板栗苞殼對(duì)食用菌菌絲的生長(zhǎng)狀況比較,按照下列配方制備不同的培養(yǎng)料對(duì)草菇進(jìn)行培養(yǎng),對(duì)生長(zhǎng)過(guò)程的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行觀察比較
A板栗苞殼55%、蘆筍老莖20%、豆餅22%、啤酒酵母1.7%、醋酸鈣1%、檸檬酸渣0.7%
B 葡萄糖55%、蘆筍老莖20%、豆餅22%、啤酒酵母1.7%、醋酸鈣1%、檸檬酸渣0.7%
C板栗苞殼75%、豆餅22%、啤酒酵母1.7%、醋酸鈣1%、檸檬酸渣0.7%
D葡萄糖75%、豆餅22%、啤酒酵母1.7%、醋酸鈣1%、檸檬酸渣0.7%
對(duì)照的菌絲生長(zhǎng)狀況
長(zhǎng)速(mm/d) 菌絲密度 菌絲粗細(xì) 菌絲色澤
A 3.57 +++++ 較粗 濃白
B 3.03 ++++ 細(xì) 濃白
C 3.24 ++++ 粗 濃白
D 2.95 +++ 較細(xì) 白
“+”號(hào)表示菌絲密度,“+”越多表示密度越大
生長(zhǎng)周期比較
出現(xiàn)原基(d) 子實(shí)體長(zhǎng)成(d) 生長(zhǎng)周期(d)
A 7 7 82
B 8 8.5 87
C 7 7.5 85
D 9 9 92
各個(gè)配方子實(shí)體的性狀特征
菌柄直徑/cm 菌柄長(zhǎng)度/cm 單菇重/g 生物學(xué)轉(zhuǎn)化率/%
A 1.5 7.7 29.12 31.8
B 1.1 6.3 24.54 23.7
C 1.3 7.2 26.41 26.8
D 0.9 5.7 22.34 21.5