本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)害蟲的生物防治技術領域,涉及赤眼蜂的繁育生產(chǎn)方法,特別涉及一種稻螟赤眼蜂的人工繁育生產(chǎn)方法。
背景技術:
赤眼蜂是全世界害蟲生物防治中研究最多、應用最廣的一類昆蟲,目前至少有12種被人工大量繁殖,用以防治一些重要的農(nóng)林害蟲。赤眼蜂種群的大量繁育主要是利用中間寄主卵進行的,赤眼蜂的中間寄主卵利用比較成功的有柞蠶卵、蓖麻蠶卵、麥蛾卵和米蛾卵。大卵(柞蠶卵、蓖麻蠶卵)由于獲取容易,成本相對較低,所以利用柞蠶卵等繁育的大卵蜂比如松毛蟲赤眼蜂能大規(guī)模應用。利用松毛蟲赤眼蜂防治玉米螟等害蟲是我國運用最成功的生防技術,目前在我國東北、華北防治總面積超過4500萬畝,且生產(chǎn)技術成熟,生產(chǎn)廠(站)10余家,投入產(chǎn)出比高達1∶20以上,在玉米螟防治工作上初步實現(xiàn)了“公共植保、綠色植?!钡哪繕?。
稻螟赤眼蜂是水稻二化螟、三化螟和稻縱卷葉螟等水稻害蟲重要的寄生性天敵,稻螟赤眼蜂的寄主范圍比較窄,用二化螟和稻縱卷葉螟這些原生寄主大量飼養(yǎng)仍有困難,通常是利用米蛾卵作為替代寄主繁育稻螟赤眼蜂,但是該生產(chǎn)模式也存在規(guī)?;a(chǎn)困難、寄主繁育周期較長等缺陷,我國利用米蛾卵生產(chǎn)稻螟赤眼蜂已有多年,但是很難形成規(guī)?;⑸唐坊?,限制了有機水稻的生產(chǎn)。稻螟赤眼蜂能寄生玉米螟卵和粘蟲卵,但是這兩種昆蟲的卵成塊狀,不易從產(chǎn)卵介質上取下制成卵卡,限制了應用;小菜蛾生活周期短,繁殖力高,短期內(nèi)可以迅速擴大種群,得到大量卵,但是其卵粒小,造成繁育的稻螟赤眼蜂品質下降,同樣,小菜蛾卵也不易制成卵卡,形成標準化;斜紋夜蛾的產(chǎn)卵量大,也容易能制成標準的卵卡,但是稻螟赤眼蜂寄生后不能完成發(fā)育。
因此,基于現(xiàn)有技術的不足,當前對能夠規(guī)?;a(chǎn)稻螟赤眼蜂的方法存在需求。
技術實現(xiàn)要素:
基于以上目的,本發(fā)明提供了一種稻螟赤眼蜂的人工繁育生產(chǎn)方法。本發(fā)明提供了一種利用粘蟲卵繁育稻螟赤眼蜂的方法,本發(fā)明人發(fā)現(xiàn),粘蟲卵經(jīng)酶處理,可以容易地將其從產(chǎn)卵介質上溶解下來,并分散成單粒,最后制成卵卡,從而用于稻螟赤眼蜂的人工繁育。本發(fā)明提供的方法生產(chǎn)效率較高,繁殖周期短,有利于規(guī)?;a(chǎn)稻螟赤眼蜂。
一方面,本發(fā)明提供了一種稻螟赤眼蜂的人工繁育生產(chǎn)方法,其中,所述方法包括以下步驟:
1)生產(chǎn)粘蟲卵;
2)使用濃度為0.5%-0.2%(克/毫升)的中性蛋白酶溶液將粘蟲卵從產(chǎn)卵介質中溶解為單粒;
3)使用經(jīng)步驟2)處理的粘蟲卵繁育稻螟赤眼蜂。
優(yōu)選地,所述步驟1)中包括粘蟲幼蟲的飼養(yǎng),蛹的收集,成蟲飼養(yǎng),卵的收集;
更優(yōu)選地,所述步驟1)包括以下步驟:
1.1選擇即將孵化的粘蟲卵放入孵化室中,孵化3齡末期;
優(yōu)選地,在所述幼蟲孵化室中添加飼料;
優(yōu)選地,所述孵化室的溫度為24-30℃,濕度為60%-70%;更優(yōu)選地,溫度為26±1℃,濕度為65%;
1.2將3齡末期幼蟲轉移至幼蟲飼養(yǎng)室飼養(yǎng),并添加飼料,幼蟲飼養(yǎng)期為16-19天,優(yōu)選地為18天;
優(yōu)選地,在化蛹前,保持所述幼蟲飼養(yǎng)室干燥,優(yōu)選地,保持所述幼蟲飼養(yǎng)室濕度為40-60%;
優(yōu)選地,所述飼料為適于鱗翅目昆蟲幼蟲的人工飼料,在一個優(yōu)選的實施方案中,本申請使用的飼料根據(jù)申請?zhí)枮?00410039466.9的中國專利申請中提供的材料和方法制備;
1.3化蛹完成至少一天后,將粘蟲的蛹,使用4%甲醛溶液消毒20-40分鐘,晾干;其中粘蟲蛹期為7-9天;
1.4在蛹羽化前,將蛹放入產(chǎn)卵室的產(chǎn)卵介質上,其中,成蟲產(chǎn)卵前期1-3天,產(chǎn)卵期4-6天;
優(yōu)選地,所述產(chǎn)卵室的溫度為24-30℃,濕度為60%-70%;更優(yōu)選地,溫度為27±1℃,濕度為65%;
優(yōu)選地,在所述蛹羽化后,飼喂體積濃度為8-12%,優(yōu)選地為10%的蜂蜜水;
優(yōu)選地,所述產(chǎn)卵介質為親水性的、易浸潤的介質;更優(yōu)選地,所述產(chǎn)卵介質具備褶皺;進一步優(yōu)選地,所述產(chǎn)卵介質選自由天然纖維棉、絲、麻或毛制備的織物;改性的親水性合成纖維滌綸、腈綸、棉綸、丙綸制備的織物;或者天然纖維與改性的親水性合成纖維混紡的織物;更進一步優(yōu)選地,所述產(chǎn)卵介質為棉布;
1.5收集產(chǎn)卵介質及其上的粘蟲卵。
優(yōu)選地,所述步驟2)中包括以下步驟:
2.1制備濃度為0.5%-0.2%(克/毫升)的中性蛋白酶溶液,其中酶活力60000個單位/克以上;
優(yōu)選地,將所述中性蛋白酶溶液過80目篩網(wǎng)過濾;
更優(yōu)選地,所述中性蛋白酶溶液含有濃度為0.01-0.02%(克/毫升)的羅紅霉素;
2.2將產(chǎn)卵介質及其上的粘蟲卵浸入步驟2.1制備的中性蛋白酶溶液中,浸泡25-40分鐘,優(yōu)選地30分鐘;
優(yōu)選地,在浸泡過程中不停地攪拌溶液;更優(yōu)選地,所述攪拌的頻率為1-3轉/秒。
2.3取出產(chǎn)卵介質,將所述中性蛋白酶溶液過60目篩,單粒粘蟲卵留在60目篩上;
優(yōu)選地,可以將30目篩和60目篩摞在一起過篩;
優(yōu)選地,所述酶液可以反復使用;
優(yōu)選地,使用清水沖洗產(chǎn)卵介質,并將得到的溶液重復上述過篩步驟;
2.4將得到的單粒粘蟲卵用純酒精浸泡脫水并平鋪晾干;
2.5將晾干的粘蟲卵分散成單粒并制成卵卡。
優(yōu)選地,所述卵卡的每平方厘米有粘蟲卵240±20粒卵;
優(yōu)選地,使用30目篩將步驟2.5的粘蟲卵分成單粒;
優(yōu)選地,所述卵卡使用紫外線下滅活;
更優(yōu)選地,所述滅活時間為20-40分鐘;
優(yōu)選地,所述步驟3)為:
3.1在繁蜂室中,保持溫度24-30℃,濕度70%-90%,按照稻螟赤眼蜂的種蜂和粘蟲卵比1:5~15繁育,1天后取出;
優(yōu)選地,所述繁蜂室溫度保持在27±1℃,濕度約80%;
優(yōu)選地,所述繁蜂室保持黑暗狀態(tài)。
3.2將完成產(chǎn)卵過程的寄生卵放入培養(yǎng)室中,培養(yǎng)至稻螟赤眼蜂發(fā)育到蛹前,然后儲存。
優(yōu)選地,所述培養(yǎng)室的溫度保持在24-30℃,濕度70%-90%;更優(yōu)選地,所述培養(yǎng)室溫度保持在27±1℃,濕度約80%;
優(yōu)選地,所述儲存為置于5-7℃的冷藏箱內(nèi)儲存。
優(yōu)選地,在所述步驟2)中使用粘蟲卵卡繁育,然后儲存卵卡;
優(yōu)選地,將步驟2)中完成產(chǎn)卵過程的稻螟赤眼蜂寄生卵制備為卵卡;
優(yōu)選地,所述卵卡的每平方厘米有稻螟赤眼蜂寄生卵380±20粒;
優(yōu)選地,所述卵卡使用紫外線下滅活;更優(yōu)選地,所述滅活時間為20-40分鐘;
優(yōu)選地,所述卵卡在田間釋放前,在溫度27±1℃,濕度70%-90%加溫發(fā)育;
其中,所述加溫的時間根據(jù)各田間所防治的害蟲發(fā)育進度,當?shù)貧庀箢A報等條件綜合考慮后確定。
另一方面,本發(fā)明還提供了一種防止農(nóng)業(yè)害蟲的方法,其中所述方法使用人工繁育的稻螟赤眼蜂防治農(nóng)業(yè)害蟲,所述農(nóng)業(yè)害蟲主要為水稻二化螟、三化螟、稻縱卷葉螟。
與現(xiàn)有技術相比,本發(fā)明具有以下優(yōu)點:
1)本發(fā)明方法中使用的粘蟲來源容易、飼養(yǎng)簡便、更容易大規(guī)模地繁殖;
2)本發(fā)明提供的方法生產(chǎn)效率較高,繁殖周期短,便于大規(guī)模繁育,有利于規(guī)?;a(chǎn)稻螟赤眼蜂。
附圖說明
以下,結合附圖來詳細說明本發(fā)明的實施方案,其中:
圖1為本發(fā)明的一個具體實施方式的流程圖;
具體實施方式
除非特別指明,以下實施例中所用的粘蟲卵可購自中科院動物所。
除非特別指明,以下實施例中所用的組合物均為分析純級別的組合物,且可從正常商購渠道獲得。
實施例1繁育稻螟赤眼蜂
1)生產(chǎn)粘蟲卵
1.1粘蟲的飼養(yǎng),溫度控制在26±1℃,濕度65%左右。
1.1幼蟲的飼養(yǎng);將快要孵化的粘蟲卵條放置在養(yǎng)蟲罐一側,并在另一側加入適量人工飼料,蓋上帶有衛(wèi)生紙的蓋子,以免幼蟲逃逸。每罐約100頭幼蟲;
1.2當幼蟲長到3齡末后,轉移至大方盒飼養(yǎng),并添加人工飼料;可根據(jù)實際情況調(diào)整每個大方盒幼蟲數(shù)量,化蛹前每大方盒約有100頭左右幼蟲,粘蟲幼蟲期約18天。
化蛹前,清理多余飼料,保持盒內(nèi)干燥,使其順利化蛹。
1.3收蛹;化蛹完成約2天后,清理糞便,抖落粘蟲的蛹,將未化蛹的幼蟲丟棄,清撿雜物,用4%甲醛溶液消毒蛹30分鐘,晾干。粘蟲蛹期約8天。
1.4蛹羽化前,將蛹放入產(chǎn)卵籠內(nèi),羽化后,飼喂10%蜂蜜水,放入產(chǎn)卵用布條,粘蟲產(chǎn)卵在褶皺的布條上,成蟲產(chǎn)卵前期約2天,產(chǎn)卵期約5天左右。
1.5粘蟲卵的分散和卵卡的制作,粘蟲產(chǎn)卵用皺褶的棉布條;
2)粘蟲卵卡制備
2.1洗卵溶液配制,配置0.1%(克/毫升)中性蛋白酶溶液,用80目篩網(wǎng)過濾掉殘渣,加0.01%(克/毫升)的羅紅霉素,攪拌均勻,防止酶液腐敗。
2.2將帶卵的布條浸入中性蛋白酶液中浸泡約30分鐘,中間要不停攪拌,加快粘蟲卵分散。
2.3將布條撈出,將酶液用30目和60目篩摞在一起過篩,酶液留待下次使用;不停的用清水沖洗卵布,攪拌,過篩多次,單粒粘蟲卵留在60目篩網(wǎng)中。
將單粒卵用純酒精浸泡脫水,粘蟲卵沉底,可以將棉絮等雜質漂洗去除。
2.4將卵平鋪在塑料布或者100目沙網(wǎng)上晾干。
2.5將晾干的卵抖落在托盤中,用30目篩過篩,分散成單粒。
將卵倒在涂有膠水或者用粘有雙面膠的紙片上,制成卵卡,晾干(每平方厘米約有粘蟲240粒卵),在15瓦紫外線下滅活30分鐘。
3)稻螟赤眼蜂的繁育
3.1繁蜂室溫度保持在27±1℃,濕度約80%,由于稻螟赤眼蜂具有趨光性,一般在接蜂時繁蜂室黑暗。
將制作好的卵卡按照蜂卵比1:10放入接蜂盒內(nèi),1天后取出。每天放入種蜂和新卵卡。
3.2將接完蜂的卵卡在27±1℃下放置3天,待稻螟赤眼蜂發(fā)育到蛹前。儲存在5-7℃的冷藏箱內(nèi)。
放蜂前將蜂卡在合適溫濕條件下(溫度27±1℃,濕度約80%)加溫發(fā)育,加溫的時間根據(jù)各田間所防治的害蟲發(fā)育進度,當?shù)貧庀箢A報等條件綜合考慮后確定。
實施例2與現(xiàn)有技術的比較以及成本測算
稻螟赤眼蜂能寄生玉米螟卵和粘蟲卵,但是這兩種昆蟲的卵成塊狀,不易從產(chǎn)卵器具上取下制成卵卡,限制了應用;小菜蛾生活周期短,繁殖力高,短期內(nèi)可以迅速擴大種群,得到大量卵,但是其卵粒小,造成繁育的稻螟赤眼蜂品質下降,同樣,小菜蛾卵也不易制成卵卡,形成標準化;斜紋夜蛾的產(chǎn)卵量大,也容易能制成標準的卵卡,但是稻螟赤眼蜂寄生后不能完成發(fā)育。因此篩選一種生產(chǎn)效率高的替代寄主是利用赤眼蜂作為水稻田生物防治的一項重要基礎。通常米蛾在26-28℃下的世代歷期約為60天,繁殖倍數(shù)約50倍,粘蟲在同樣的溫度下的世代歷期約35天,繁殖倍數(shù)約為100;遠遠高于米蛾的繁殖效率。經(jīng)規(guī)?;曫B(yǎng)粘蟲測算,粘蟲蛹每頭成本約5分錢,每頭蛹產(chǎn)卵500多粒,每萬粒卵成本約1.5元。我們經(jīng)多代繁育稻螟赤眼蜂,種群不退化,R0保持在10倍以上,并且粘蟲卵粒大,所生產(chǎn)的稻螟赤眼蜂質量高于米蛾卵所生產(chǎn)的赤眼蜂。
以上對本發(fā)明具體實施方式的描述并不限制本發(fā)明,本領域技術人員可以根據(jù)本發(fā)明作出各種改變或變形,只要不脫離本發(fā)明的精神,均應屬于本發(fā)明所附權利要求的范圍。