本發(fā)明涉及一種花椰菜再生植株的方法，具體涉及一種花椰菜叢生芽再生植株的方法及應(yīng)用，屬于植物組培技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

花椰菜為十字花科蕓薹屬甘藍(lán)種中以花球?yàn)楫a(chǎn)品的一個(gè)變種，一二年生草本植物。由甘藍(lán)演化而來，演化中心在地中海東部沿岸。19世紀(jì)中葉傳入中國。由于其營養(yǎng)豐富、質(zhì)地柔嫩、味道鮮美深受廣大消費(fèi)者的喜愛，在我國蔬菜栽培和周年供應(yīng)中占有重要地位。

叢生芽繁殖的方法是植物無性繁殖的重要技術(shù)手段之一，具有變異性小、生根較容易、成活率高、來源豐富等優(yōu)點(diǎn)。但在花椰菜生產(chǎn)中叢生芽作為不利性狀，消耗植株?duì)I養(yǎng)，影響花球的生長，需要及時(shí)去除，是不作為材料利用的。

叢生芽是指從花椰菜根基部發(fā)育出來的群體叢生芽苗，大多是多細(xì)胞形成，雙極性，結(jié)構(gòu)完整，可直接形成小植株。目前有關(guān)花椰菜的叢生芽再生植株的研究未見報(bào)道，然而在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)采用組織培養(yǎng)的方法進(jìn)行保存和快繁的報(bào)道較多。萬瓊蓮等（云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，31（1）：49-53）、胡立敏等（農(nóng)業(yè)科技通訊，2015，（6）：284-286）、吳麗芳等（北方園藝，2009，（6）：57-58）均成功建立了花椰菜組織培養(yǎng)技術(shù)體系并進(jìn)行應(yīng)用。然而，組織培養(yǎng)周期長、限制條件多、投入大、技術(shù)要求高，當(dāng)植株感病后花球腐爛沒有可以利用的組培材料，植株再生難以實(shí)現(xiàn)，花椰菜的叢生芽再生植株的方法，是一種簡便易行的方法，材料來源豐富、成活率高、變異性小等優(yōu)點(diǎn)，能有效解決生產(chǎn)中遇到的問題，是花椰菜再生植株的重要手段。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為解決目前存在的花椰菜選育過程中，親本材料在繁殖中遇到的花球感染菌核病、軟腐病等，花球腐爛無法留種，造成親本材料丟失的問題。

本發(fā)明公開了一種花椰菜叢生芽再生植株的方法，其特征在于按如下的步驟進(jìn)行：

（1）采用蛭石和過篩細(xì)土作為基質(zhì)，按體積比1：3混合均勻，盛入口徑35cm的花盆內(nèi)，基質(zhì)厚度為花盆高度的2/3；

（2）采用溫室為培養(yǎng)環(huán)境，溫室外遮60目的遮陽網(wǎng)；

93選取花椰菜健壯的根部叢生芽，高度5～15cm，消毒殺菌后于配好的促進(jìn)生根液體培養(yǎng)基弱光培養(yǎng)16h；所述的促進(jìn)生根液體培養(yǎng)基指的是20mg/lnaa+600mg/liba；

（3）水培后定植在花盆內(nèi)，每盆定植4株，深度為2cm，均勻?yàn)⑺疂餐?，在溫室上搭蓋遮陽網(wǎng)；

（4）定植后管理期，對(duì)花盆進(jìn)行殺菌消毒、施肥，溫室內(nèi)溫度控制在20～25℃，濕度不低于70%～80%；定植生根期，溫室內(nèi)溫度控制在15～25℃，濕度不低于80%～90%；

（5）定植后3～10天，逐漸降低拱棚內(nèi)濕度至60～80%，在光照強(qiáng)度大于4500lx時(shí)，在溫室外加蓋遮陽網(wǎng)，在光照強(qiáng)度低于1500lx時(shí)掀開溫室的遮陽網(wǎng)，使植株逐步適應(yīng)自然環(huán)境。

本發(fā)明所述花椰菜叢生芽為當(dāng)年生的高度5-10cm的花椰菜根部叢生芽。所述消毒劑為75%酒精，噴淋消毒5分鐘。

本發(fā)明用到的naa是萘酸(1-naphthylaceticacid)的簡稱，是一種有機(jī)化合物，是一種易溶于有機(jī)溶劑的無色固體。它是植物生長調(diào)節(jié)劑中的生長素類似物，常用于商用的發(fā)根粉或發(fā)根劑中。iba是吲哚丁酸indole-3-butytricacid的簡稱，是一種有機(jī)化合物，能促進(jìn)植物主根生長，提高發(fā)芽率，成活率。兩種原料均有市售。

本發(fā)明進(jìn)一步公開了花椰菜叢生芽再生植株方法在提高幼苗成活率方面的應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：通過本發(fā)明的方法獲得的花椰菜叢生芽成活率高達(dá)85%，植株在田間的生長情況與種子實(shí)生苗無明顯差別，有效地解決了叢生芽不作為材料利用的問題，提高了花椰菜叢生芽利用效率。

本發(fā)明在針對(duì)花椰菜叢生芽再生植株的實(shí)驗(yàn)中遇到的成活率低、不生根、土下莖易腐爛、植株脫水死亡等問題，先后進(jìn)行了不同培養(yǎng)基配比對(duì)成活率的研究、不同激素濃度配比對(duì)叢生芽生根的影響、環(huán)境對(duì)定植后幼苗成活率的影響等實(shí)驗(yàn)，重點(diǎn)解決了在定植后生根困難，植株脫水死亡，成苗率低的問題。

本發(fā)明的方法成功的關(guān)鍵在于所用基質(zhì)具有保濕、通氣的優(yōu)點(diǎn)，簡單易行，操作方便，經(jīng)濟(jì)實(shí)用；所用激素液體培養(yǎng)基能有效促進(jìn)生根，在定植時(shí)已經(jīng)有微量毛細(xì)根生成，有效的提高了叢生芽定植后的成活率；叢生芽定植后的管理，保證了幼苗緩苗所需自然環(huán)境。

本發(fā)明公開的花椰菜叢生芽再生植株的方法所具有的積極效果在于：

（1）采用蛭石+過篩細(xì)土為基質(zhì)，具有保濕、通氣的優(yōu)點(diǎn)，簡單易行，操作方便，經(jīng)濟(jì)實(shí)用。

（2）一般生產(chǎn)上，叢生芽作為不利性狀，消耗植株?duì)I養(yǎng)，需要及時(shí)去除，是不作為材料利用的，本發(fā)明采用叢生芽生根繁殖的方法，把叢生芽轉(zhuǎn)換成生產(chǎn)上應(yīng)用的植株，變廢為寶，提高了利用效率，解決了花椰菜親本在繁育過程中病害發(fā)生后絕收的問題，花椰菜在繁種過程中感染菌核病、軟腐病等病害時(shí)造成花球腐爛，抽枝困難，不能開花留種，使親本材料丟失，損失慘重。

（3）獲得的幼苗與實(shí)生苗和組培苗無明顯差異，植株長勢(shì)好，易于成活，操作方法簡單易行，成本低廉，具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

具體實(shí)施方式

下面通過具體的實(shí)施方案敘述本發(fā)明。除非特別說明，本發(fā)明中所用的技術(shù)手段均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方法。另外，實(shí)施方案應(yīng)理解為說明性的，而非限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍僅由權(quán)利要求書所限定。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明實(shí)質(zhì)和范圍的前提下，對(duì)這些實(shí)施方案中的物料成分和用量進(jìn)行的各種改變或改動(dòng)也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明所用原料及試劑均有市售。

實(shí)施例1

（1）選擇土壤肥沃上茬作物非十字花科作物的地塊過篩細(xì)土與蛭石按體積比：3；1配比，混合均勻，于陽光充足的天氣均勻鋪開15cm晾曬3天，兩者所配制的基質(zhì)具有良好的透氣性和保水性，將配好的基質(zhì)盛在口徑為35cm的花盆中，厚度為花盆高度的2/3；

（2）溫室采用鋼筋制成，其高度為4m，寬9m，長60m。溫室上面覆蓋聚乙烯無滴膜，膜上覆60目遮陽網(wǎng)；

（3）在12月初，選取當(dāng)年的花椰菜根部叢生芽，高度5cm。應(yīng)隨用隨取，盡量避免失水。先用質(zhì)量百分濃度為75%的酒精噴淋殺菌消毒5分鐘，撈出后浸入20mg/lnaa+600mg/liba液體培養(yǎng)基中16h，然后把處理好側(cè)枝定植在做好的花盆里，插入深度2-3cm，每盆均勻定植4株；

（4）應(yīng)隨定植隨均勻?yàn)⑺顾纸富|(zhì)，在陽光充足氣溫較高時(shí)要在其上覆蓋60目遮陽網(wǎng)；

（5）定植后管理期，對(duì)花盆進(jìn)行殺菌消毒、施肥，溫室內(nèi)溫度控制在20℃，濕度不低于70%；定植生根期，溫室內(nèi)溫度控制在15℃，濕度不低于80%；

（6）定植生根后3天，逐漸降低溫室內(nèi)濕度至60%，在光照強(qiáng)度大于4500lx時(shí)，在溫室外加蓋遮陽網(wǎng)，在光照強(qiáng)度低于1500lx時(shí)掀開溫室的遮陽網(wǎng)，使植株逐步適應(yīng)自然環(huán)境；

（7）定植成活苗由于根系少、根層淺，抗旱能力差，所以要根據(jù)土壤濕度情況經(jīng)常澆水，隨植株逐漸長旺，澆水次數(shù)相應(yīng)減少；

（8）在1-2月份，定植后30天，植株生長有5～6片葉子、根系逐漸健壯；

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，通過本方法獲得的花椰菜叢生芽成活率達(dá)85%，植株在田間的生長情況與種子實(shí)生苗無明顯差別。

實(shí)施例2

（1）選擇土壤肥沃上茬作物非十字花科作物的地塊過篩細(xì)土與蛭石按體積比：3；1配比，混合均勻，于陽光充足的天氣均勻鋪開15cm晾曬3天，兩者所配制的基質(zhì)具有良好的透氣性和保水性，將配好的基質(zhì)盛在口徑為35cm的花盆中，厚度為花盆高度的2/3；

（2）溫室采用鋼筋制成，其高度為4m，寬9m，長60m。溫室上面覆蓋聚乙烯無滴膜，膜上覆60目遮陽網(wǎng)；

（3）在12月初，選取當(dāng)年的花椰菜根部叢生芽，高度15cm。應(yīng)隨用隨取，盡量避免失水。先用質(zhì)量百分濃度為75%的酒精噴淋殺菌消毒5分鐘，撈出后浸入20mg/lnaa+600mg/liba液體培養(yǎng)基中16h，然后把處理好側(cè)枝定植在做好的花盆里，插入深度2-3cm，每盆均勻定植4株；

（4）應(yīng)隨定植隨均勻?yàn)⑺?，要使水分浸透基質(zhì)，在陽光充足氣溫較高時(shí)要在其上覆蓋60目遮陽網(wǎng)；

（8）定植后管理期，對(duì)花盆進(jìn)行殺菌消毒、施肥，溫室內(nèi)溫度控制在25℃，濕度不低于70%；定植生根期，溫室內(nèi)溫度控制在25℃，濕度不低于80%；

（9）定植生根后10天，逐漸降低溫室內(nèi)濕度至80%，在光照強(qiáng)度大于4500lx時(shí)，在溫室外加蓋遮陽網(wǎng)，在光照強(qiáng)度低于1500lx時(shí)掀開溫室的遮陽網(wǎng)，使植株逐步適應(yīng)自然環(huán)境；

（10）定植成活苗由于根系少、根層淺，抗旱能力差，所以要根據(jù)土壤濕度情況經(jīng)常澆水，隨植株逐漸長旺，澆水次數(shù)相應(yīng)減少；

（8）在1-2月份，定植后30天，植株生長有5～6片葉子、根系逐漸健壯；

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，通過本方法獲得的花椰菜叢生芽成活率達(dá)85%，植株在田間的生長情況與種子實(shí)生苗無明顯差別。

實(shí)施例3

定植時(shí)間選擇在4月下旬到5月上旬，此時(shí)的定植時(shí)間比實(shí)施例1偏晚，再生過程的其余操作和實(shí)施例1相同。移栽時(shí)間晚，則植株長的較健壯，可以不用定植在溫室，可以直接定植到露地。