專利名稱：化學(xué)試劑和細(xì)菌植物病原菌組合的生物除草劑的制作方法
本申請(qǐng)是1989年9月11日申請(qǐng)的序號(hào)為07/405138美國(guó)專利申請(qǐng)的接續(xù)。
本發(fā)明涉及一種通過(guò)用化學(xué)試劑如除草劑和細(xì)菌植物病原菌一起處理來(lái)控制有害植物生長(zhǎng)的生物方法。
化學(xué)除草劑的廣泛使用已使人們對(duì)正在介入環(huán)境中的大量化學(xué)試劑所產(chǎn)生的對(duì)生態(tài)學(xué)可能的有害影響引起注意。令人擔(dān)憂的是這些化學(xué)品可能危及人類和動(dòng)物的健康。特別要關(guān)注的是對(duì)農(nóng)業(yè)工人健康的影響，他們可能面臨影響其健康的高濃度的化學(xué)除草劑。事實(shí)上，在知曉了某些化學(xué)除草劑對(duì)環(huán)境和健康具有有害影響后，有必要從市場(chǎng)上取消或嚴(yán)格限制它們的使用。空的化學(xué)除草劑容器的處理受到嚴(yán)格管理，但對(duì)農(nóng)民來(lái)說(shuō)正確處理這些容器是不方便的并且是昂貴的。這些容器的處理地點(diǎn)受到限制，但不合法的容器處理成為越來(lái)越大的擔(dān)憂。因此，需要導(dǎo)找一種減少用于控制雜草和其它有害植物的化學(xué)品用量的方法。
一種減少介入環(huán)境的化學(xué)除草劑量的策略是使用生物學(xué)上的微生物作為生物除草劑殺死雜草或抑制其生長(zhǎng)。由于大量的已知植物病原菌是真菌，因此涉及生物除草劑的研究和商業(yè)利用都集中于使用可真菌除草的真菌。如Templeton的US3999973報(bào)道了使用Colletot richum malvarum作為真菌除草劑控制多刺的黃花稔屬(Sida spinosaL.)。Van Dyke等人在US4606751中描述了使用Bipolaris sorghicola作為真菌除草劑控制約翰遜草(Johnsongrass，Sorghum haepense)的生長(zhǎng)。Anderson等人的US4636386則公開(kāi)了使用Alternaria zinniae控制意大利薊(Carduus pycnocephalus)的生長(zhǎng)。羅森鐮孢霉屬(Fusarium roseum)Culmorum可用作真菌除草劑控制黑藻(Hydrilla verticillata)的生長(zhǎng)(Charudattan的US4263036)。為了進(jìn)一步討論真菌除草劑的使用，參見(jiàn)R.Charudattan的“使用天然和遺傳學(xué)上變異的病原菌種屬控制雜草”，載于M.A.Hoy和D.C.Herzog(eds)，農(nóng)業(yè)IPM系統(tǒng)的生物學(xué)控制(Biological Control in Agricultural IPM Systems)，N.Y學(xué)術(shù)出版社，1985，PP.347～372，以及G.E.Templeton，“雜草的生物控制”，Amer.J.Alternative Agr.369-72(1989)。
已發(fā)展成真菌除草劑的真菌植物病原菌是主要的僅感染單一種屬或窄范圍的植物寄主種屬的病原菌。真菌植物病原菌已被用作真菌除草劑來(lái)控制某種特定的植物。真菌不能發(fā)展成為大范圍的真菌除草劑來(lái)控制多種雜草。使用真菌植物病原菌作真菌除草劑的另一缺點(diǎn)是，和植物病原細(xì)菌比較，它們相對(duì)較貴，并很難大規(guī)模地生長(zhǎng)和在商業(yè)上應(yīng)用。
某些情況下，化學(xué)除草劑可以和真菌除草劑組合使用以提高對(duì)那些對(duì)化學(xué)除草劑或真菌除草劑有耐藥性的雜草的控制。E.g.，R.A.Klerk等人，微生物除草劑對(duì)稻谷(Oryza sativa)中的雜草和害蟲(chóng)的綜合控制方法，雜草科學(xué)，3395-99(1985);Riley和Walker的US4755208。真菌除草劑和化學(xué)除草劑都對(duì)同種雜草起作用時(shí)也已將它們組合使用。參見(jiàn)，如US4776873(Caulder等)，然而尚未見(jiàn)報(bào)道用化學(xué)試劑來(lái)增加用作真菌除草劑的真菌的寄主范圍。
盡管在正常條件下細(xì)菌植物病原菌通常感染窄范圍的寄主的物種，但如果植物處于受迫狀態(tài)時(shí)，它們時(shí)常能隨機(jī)感染和傷害大范圍的植物寄主。例如Pseudomonas Syringae pathovar(pv.)tabaci主要感染煙草植物(Nicotiana tabacum L.)，引起煙草迅速蔓延的病害。然而Pseudomonas syringae pv.tabaci能隨機(jī)感染包含23個(gè)植物種屬的大范圍植物。G.B.Lucas，煙草病害，第三版，Raleigh，N.C.Biological Consulting Associates，1975，pp.397-409。當(dāng)寄主植物受到環(huán)境脅迫時(shí)，那些能被Pseudomonas syringae pv.tabaci隨機(jī)感染的植物種類的范圍會(huì)增加，同上作者。其它種屬的植物病原細(xì)菌也能隨機(jī)感染和傷害受迫植物。D.F.Schoenweiss，“趨向、受迫和植物病害”(“Predisposition Stress and Plant Disease”)。Ann.Rev.Phytopathol.13193-211(1975)。但是，對(duì)于能感染大范圍寄主的植物病原細(xì)菌的性能還未找到任何實(shí)際應(yīng)用，因?yàn)檫€未得到發(fā)起可控制的，能再生的感染的方法，并且研究工作都集中在對(duì)不適于化學(xué)除草劑控制的單一雜草種類的控制上。因此，隨機(jī)的植物病原細(xì)菌還沒(méi)有被用作生物除草劑。
這樣，在該技術(shù)領(lǐng)域中需要有能控制大范圍的雜草種類，同時(shí)能降低為此目的所使用的化學(xué)除草劑量的組合物和方法。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)化學(xué)試劑如化學(xué)除草劑可被用來(lái)協(xié)迫植物以某種方式引發(fā)細(xì)菌植物病原菌的隨機(jī)感染。此發(fā)現(xiàn)使得將化學(xué)試劑和細(xì)菌植物病原菌組合使用以提供控制大范圍雜草種類的方法成為可能。
尤其是，本發(fā)明通過(guò)提供一種能控制廣譜雜草生長(zhǎng)而同時(shí)減少達(dá)到此目的而使用的化學(xué)除草劑量的方法克服了現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題和缺陷。由于細(xì)菌植物病原菌和化學(xué)試劑如除草劑共同施用于雜草，所以雜草的控制程度將大于單獨(dú)使用化學(xué)品或植物病原細(xì)菌可能得到的結(jié)果。
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種控制雜草生長(zhǎng)的方法，即使化學(xué)試劑如除草劑與感染植物的細(xì)菌組合使用。這樣對(duì)雜草的控制要比單獨(dú)使用同量的化學(xué)品得到的結(jié)果大的多。另一個(gè)目的是控制雜草的生長(zhǎng)同時(shí)減少介入環(huán)境的化學(xué)品量，這樣就減少了使用化學(xué)除草劑所帶來(lái)的對(duì)工人的輻射量，環(huán)境負(fù)擔(dān)以及容器處理等問(wèn)題。再一個(gè)目的是提供一種比現(xiàn)行方法安全、便宜和有效的生物除草控制雜草生長(zhǎng)的一般方法。提供一種一般方法以擴(kuò)大被某種特殊化學(xué)除草劑控制的雜草范圍是另一目的。本發(fā)明的其它目的和優(yōu)點(diǎn)將在下面的說(shuō)明書(shū)中部分地陳述，并且部分可從說(shuō)明書(shū)中顯而易見(jiàn)或可從本發(fā)明的實(shí)施中知曉。本發(fā)明的目的和優(yōu)點(diǎn)將通過(guò)附加的權(quán)利要求書(shū)中特指的方法和組合物來(lái)實(shí)現(xiàn)和完成。
為達(dá)到本發(fā)明的目的，如本文中具體和概括地描述的，本發(fā)明的一個(gè)具體方案包括一種控制雜草的方法，即將一種化學(xué)試劑施用于雜草，并同時(shí)或相繼將一種細(xì)菌植物病原菌施用于雜草，其中雜草生長(zhǎng)的抑制或雜草的致死大于單獨(dú)使用同量化學(xué)品或細(xì)菌可能得到的結(jié)果。本發(fā)明的另一個(gè)具體方案包括一種用于雜草控制的組合物，其中含有能感染受迫植物的細(xì)菌和一種能引起植物受迫并因此便于感染的化學(xué)試劑。
下面的一般描述是對(duì)發(fā)明的解釋和說(shuō)明，而不是限制。


圖1表示單獨(dú)使用麥草畏(0.61b/A)(虛線)或麥草畏加上Pseud omonas syringae pv.tabaci(實(shí)線)對(duì)三種雜草(白麻，金花狗尾草，稗)的作用效果。
圖2表示單獨(dú)使用草甘磷(0.25 1b/A)(虛線)或草甘磷加上Pseudomonas syringae pv.tabaci(實(shí)線)對(duì)牽?；ǖ淖饔眯Ч?。
對(duì)本申請(qǐng)來(lái)說(shuō)，雜草指“任何討厭的或妨礙人類活動(dòng)或福利的植物”，除草劑(這里稱之為化學(xué)除草劑)是指“用來(lái)控制，抑制，或殺死植物，或嚴(yán)重?cái)_亂其正常生長(zhǎng)過(guò)程的化學(xué)品”。美國(guó)雜草領(lǐng)域除草劑手冊(cè)，第5版(1983)，xxi-xxiv。本文中使用的，術(shù)語(yǔ)“生物除草劑”意指用作控制、抑制、或殺死植物，或嚴(yán)重?cái)_亂其正常生長(zhǎng)過(guò)程的生物微生物。術(shù)語(yǔ)“真菌除草劑”指任何用來(lái)控制、抑制或殺死植物，或嚴(yán)重?cái)_亂其正常生長(zhǎng)過(guò)程的真菌微生物。
為實(shí)施本發(fā)明，將易使細(xì)菌感染的化學(xué)試劑和能隨機(jī)感染的細(xì)菌植物病原菌都局部地施于雜草。用熟知的施藥方法如噴霧或土壤浸漬將化學(xué)試劑和細(xì)菌植物病原菌施于雜草。
施藥可以在芽前、芽后進(jìn)行，或作為非選擇性接觸除草劑。在下述的優(yōu)選具體方案中，化學(xué)試劑和細(xì)菌植物病原菌被施藥于雜草。本發(fā)明可用于控制農(nóng)業(yè)環(huán)境的雜草，也可用于非農(nóng)業(yè)使用。例如，本發(fā)明可用以控制草地雜草和作為接觸性除草劑來(lái)管理路旁植物。
化學(xué)品和植物病原細(xì)菌可同時(shí)使用。在其它情況下，較好的是先施用化學(xué)試劑，在其作用于植物一段時(shí)間后，再施用植物病原菌。同時(shí)施藥或相繼施藥，哪個(gè)最好將取決于所選擇的化學(xué)試劑和植物病原細(xì)菌的特殊組合。如果化學(xué)品和細(xì)菌同時(shí)施用，可以以同樣的配方混合，并從同一容器中噴灑于雜草。為實(shí)施本發(fā)明組合物可以配制成多種方式，包括流動(dòng)劑，干流動(dòng)劑，水分散顆粒或乳化濃縮液。細(xì)菌植物病原菌的不同菌株或pathovars的混合物可用于實(shí)施本發(fā)明。實(shí)施本發(fā)明也可將不同的化學(xué)試劑的混合物與細(xì)菌植物病原菌連同使用。
本發(fā)明的配方中也可含有如表面活性劑和懸浮劑等助劑。通過(guò)施用懸浮在能維持或促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)的介質(zhì)中的細(xì)菌可以促進(jìn)和提高植物病原細(xì)菌的有效感染。這有助于雜草施藥后這段時(shí)間里細(xì)菌的存活和生長(zhǎng)，增加植物病原細(xì)菌成功地感染雜草的可能性。
可用各種化學(xué)試劑實(shí)施本發(fā)明。適宜的化學(xué)試劑需具備①對(duì)雜草具有傷害、脅迫或其它方式的作用，便于隨機(jī)的致植物病害的細(xì)菌的感染;②不抑制植物病原細(xì)菌或不以其它方式干擾其隨機(jī)感染植物的能力。不同類型的化學(xué)除草劑可用作化學(xué)試劑。起植物荷爾蒙的模仿物或光合作用抑制劑作用的除草劑可使植物易受細(xì)菌感染，但預(yù)期它們不會(huì)破壞或干擾細(xì)菌的活動(dòng)。起新陳代謝抑制劑作用的除草劑可對(duì)某些細(xì)菌產(chǎn)生傷害，但使用那些抵抗或耐受或適應(yīng)于新陳代謝抑制劑的致植物病害的細(xì)菌菌種仍可實(shí)施本發(fā)明。如果除草化學(xué)品與致植物病害的細(xì)菌分開(kāi)使用，則可使用對(duì)細(xì)菌具有潛在傷害的試劑。下述的最佳實(shí)施方案中使用草甘磷，Sulfosate和麥草畏作為化學(xué)試劑。實(shí)施本發(fā)明也可使用阿特拉津和2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)?？捎脕?lái)實(shí)施本發(fā)明的其它化學(xué)除草劑見(jiàn)美國(guó)雜草學(xué)會(huì)除草劑手冊(cè)，(Herbicide Handbook of the weed Society of America)，第5版(1983)，以及H.J.Lorenzini和L.S.Jeffrey的美國(guó)雜草及其控制(Weeds of the United States and their Control)，NYVan Nostrand，1987，表1.9。
除上述化學(xué)除草劑可用于本發(fā)明外，不適合用常規(guī)除草劑定義的化學(xué)品也可使用于本發(fā)明。盡管一種化學(xué)試劑單獨(dú)使用不能殺死植物或嚴(yán)重?cái)_亂其正常生長(zhǎng)過(guò)程，但它可以脅迫植物使之受到隨機(jī)細(xì)菌感染。例如，單獨(dú)不能用作除草劑的植物荷爾蒙類似物仍然易于細(xì)菌的感染。實(shí)施在此描述的發(fā)明可以使用天然存在的細(xì)菌植物病原菌，它們很容易從公共保藏處獲得或使用已知技術(shù)從土壤、植物、空氣、水、昆蟲(chóng)等中分離。已發(fā)現(xiàn)Pseudomonas syringae pv.tabaci可用于此目的，但也可使用其它種屬的植物病原細(xì)菌。例如，Pseudomonas solanacearum已成功地用于本發(fā)明。其它的植物病原細(xì)菌可選自幾種原核生長(zhǎng)細(xì)胞的genera，包括但并不限制于此假單胞菌屬(Pseudomonas)，黃甲胞菌屬(Xanthomonas)，土壤桿菌屬(Agrobacterium)，歐文氏菌屬(Erwinia)，棒狀桿菌屬(Corynebacterium)，鏈霉菌屬(Streptomyces)和諾卡氏菌屬(Nocardia)，見(jiàn)M.S.Mount和G.H.Lacy(eds.)的植物病原原核生物細(xì)胞(Phytopathogenic Prokaryotes)，Vol.1，N.Y.學(xué)術(shù)出版社，1982，PP19-29中N.W.Schaad的植物病原細(xì)菌的分類。此外，可以使用已知的分離或選擇天然存的或誘發(fā)的突變株的技術(shù)得到具有其它所需特性的細(xì)菌。也可使用遺傳工程和重組DNA的技術(shù)生產(chǎn)具有所需特性的細(xì)菌。
由于植物病原細(xì)菌普遍存在于自然界中，散布這些細(xì)菌菌種于田野里預(yù)期不會(huì)引起生態(tài)問(wèn)題。然而如果希望降低細(xì)菌的持久性，可以施用幾種方案。例如可以選擇或用熟知技術(shù)由遺傳工程生產(chǎn)那些當(dāng)環(huán)境溫度變化時(shí)將不能生存的對(duì)溫度敏感的細(xì)菌作為突變株。因此，對(duì)冷敏感的細(xì)菌病原體可以在春天或夏天用作生物除草劑，在寒冷的冬天將致死。類似的，對(duì)高溫敏感的細(xì)菌可在春天用作生物除草劑，在夏天比較高的溫度下將死亡。
另一途徑是選擇植物病原細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)突變株，它需要從被感染的植物上獲得必需的而在環(huán)境中沒(méi)有足夠存在量的營(yíng)養(yǎng)物。這些營(yíng)養(yǎng)物可以包括氨基酸，核酸堿或維他命。這樣的植物病原細(xì)菌將作用于活的雜草上，但如果未能感染雜草或在受感染的雜草死亡后，它們將不能生存。另一種限制細(xì)菌永久性存在的方法是運(yùn)用重組DNA技術(shù)，產(chǎn)生含有“自殺基因”的細(xì)菌，該基因會(huì)限制細(xì)菌的持久性生存或使用后僅允許受限制的細(xì)菌繁殖。見(jiàn)R.Curtiss Ⅲ，工程微生物安全什么是必要的？M.Sussman等(eds.)，The Release of Genetically-engineered Microorganisms，N.Y.學(xué)術(shù)出版社，1988，pp.10-11。
本方法的優(yōu)點(diǎn)是，與作為真菌除草劑的植物病原真菌不同，可用熟知的發(fā)酵技術(shù)使細(xì)菌植物病原菌更容易和更經(jīng)濟(jì)地大量繁殖。
應(yīng)該認(rèn)識(shí)到，在實(shí)施這個(gè)概括的方法控制雜草時(shí)，每種特定的化學(xué)試劑和特定的細(xì)菌病原菌以特定劑量將不一定有效，這和其它的廣譜化學(xué)除草劑的行為是一致的，很難有效地控制所有類型的雜草，而通常是無(wú)力控制某些雜草種類。除草劑和細(xì)菌的一種特定組合是否將對(duì)某種應(yīng)用有效，以及特殊組合的最佳條件可由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過(guò)溫室或田間的簡(jiǎn)單試驗(yàn)可容易地確定，不需過(guò)分的試驗(yàn)工作。一些原則可作為參數(shù)的選擇指南。第一，當(dāng)以單獨(dú)使用除草劑對(duì)雜草產(chǎn)生微弱的或臨界作用的量施用除草劑時(shí)，植物病原細(xì)菌的效果是最明顯的。在一定劑量的除草劑已對(duì)雜草產(chǎn)生了很大程度的控制時(shí)，添加植物病原細(xì)菌的額外效用可能顯示不出來(lái)。當(dāng)雜草對(duì)所施的化學(xué)除草劑有部分反應(yīng)時(shí)，生物除草劑的控制比較明顯。草甘磷，麥草畏和Sulfosate這三種除草劑的最佳施藥量在下面的實(shí)施例3到6中進(jìn)行說(shuō)明，改變化學(xué)除草劑濃度的影響見(jiàn)實(shí)施例7。第二，使用較大量的細(xì)菌可見(jiàn)較好的效果。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，植物病原細(xì)菌以至少5×105CFU/ml的濃度與化學(xué)品混合，優(yōu)選的是106CFU/ml或更大的濃度。較優(yōu)選的實(shí)施方案中細(xì)菌濃度為108CFU/ml。
第三，本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員都清楚，盡管化學(xué)品的使用比例可以大大低于通常的田間使用比例(如實(shí)施例3和4中是25～50%;實(shí)施例5和6中是12.5%)，但化學(xué)品的某些含量太低將不會(huì)起有效的作用。因此在普遍優(yōu)選的實(shí)施方案中(見(jiàn)實(shí)施例3和4)，麥草畏和草甘磷的施用量約是通常田間用量的1/2到1/4，而Sulfosate的用量在普遍優(yōu)選的實(shí)施方案中(見(jiàn)實(shí)施例5到7)，約是田間需要量的1/8。在特殊的應(yīng)用中，用量可以進(jìn)一步的減少。
由于施用的植物病原細(xì)菌感染被化學(xué)試劑脅迫的植物，所以被植物病原細(xì)菌感染的植物寄主范圍一般可擴(kuò)大到化學(xué)除草劑活性的類似范圍。然而，有時(shí)受化學(xué)除草劑控制的植物范圍可能被擴(kuò)大。由于田間施用率太低，某些種類的雜草不能被一特殊的除草劑控制，但除草劑的其它不明顯的作用可足以便于隨機(jī)感染。因此，一種廣譜化學(xué)除草劑和一種細(xì)菌植物病原菌組合，不僅可以以較低劑量的化學(xué)除草劑控制同樣范圍的雜草種類，也可以控制通常不能被化學(xué)除草劑控制的雜草種類(如用麥草畏控制禾木科植物，見(jiàn)實(shí)施例3)。
本發(fā)明的實(shí)施有可能使化學(xué)除草劑的使用量進(jìn)一步減少，使用者可以選擇用更有效的芽后施藥取代傳統(tǒng)的除草劑芽前預(yù)防施藥。根據(jù)需要可以僅選擇性地使用與細(xì)菌植物病原菌連同的芽后化學(xué)除草劑，這對(duì)大量的預(yù)防性除草劑芽前使用提供了一種選擇方案。由于成本和大多數(shù)芽后除草劑的受限范圍此方法在過(guò)去一般是不可行的。
實(shí)施本發(fā)明可能還有額外的優(yōu)點(diǎn)，即降低了與化學(xué)除草劑容器的處理有關(guān)的費(fèi)用，它可通過(guò)減少使用化學(xué)除草劑的總量來(lái)實(shí)現(xiàn)。并且，細(xì)菌及某些細(xì)菌和化學(xué)品組合物的容器是可生物降解的。
下面的實(shí)施例是對(duì)優(yōu)選的實(shí)施方案的說(shuō)明而不是對(duì)其限制，本發(fā)明的真正范圍在下面的權(quán)利要求書(shū)中給出。
實(shí)施例1說(shuō)明了一種獲得和培養(yǎng)優(yōu)選的可用來(lái)實(shí)施本發(fā)明的植物病原細(xì)菌的方法。
實(shí)施例 1從美國(guó)典型培養(yǎng)基保藏處(American Type Culture Collection 12301 Parklawn Drive，Rockville，Maryland 20852)(ATCC分離號(hào)＃11527)獲得Pseudomonas syringae pv.tabaci。這種菌株被用于實(shí)施例1至4中，細(xì)菌在改性的King′s B培養(yǎng)基介質(zhì)(表1)中生長(zhǎng)。培養(yǎng)基中補(bǔ)充有鋅，這可促進(jìn)這些細(xì)菌毒素的生產(chǎn)。R.D.Durbin和T.F.Uchytil，鋅在調(diào)節(jié)Tabtoxin生產(chǎn)過(guò)程中的作用，Experientia 41136-37(1985)。用橡皮淀帚將細(xì)菌從培養(yǎng)皿中刮出，并懸浮于水中，與化學(xué)除草劑混合。將系列稀釋液分散到King′s B培養(yǎng)基的表面上，為鑒定生存能力和沒(méi)有沾染物而進(jìn)行試驗(yàn)。用Pseudomonas syringae pv.tabaci噴灑過(guò)的煙草葉上產(chǎn)生了黃色疾患，枯萎的、卷曲的葉子表明分離的菌種保持著毒力。
表1用鋅改性的King′s B培養(yǎng)基(每升)胨No.3(Difco＊) 20g甘油 15mlK2HPO4·3H2O 1.5gMgSO4·7H2O 1.5g瓊脂(Difco＊) 20gZnSO4·7H2O 0.0075gPH7.2King，E.O.，Ward，M.K.，和Raney，D.E.兩個(gè)用來(lái)證明Pyocyanin和Fluorescin的簡(jiǎn)單介質(zhì)。J.Lab.Clin.Med.44301-307(1954)。
＊Difco Laboratories，Inc.，Detroit，Michigan 48232。
實(shí)施例2說(shuō)明了細(xì)菌和不同的化學(xué)試劑可混性的試驗(yàn)。并描述了實(shí)施本發(fā)明的方法。
實(shí)施例 2被試驗(yàn)的除草劑是麥草畏(3，6-二氯-O-茴香酸)，用量為0.25和0.5 1b/A(磅/英畝)，和草甘磷(N-(膦酰基甲基)甘氨酸)，用量為0.06和0.125 1b/A。選擇的這些施藥比例約是適宜的田間用量的25%和50%。每組試驗(yàn)都進(jìn)行單獨(dú)使用除草劑和除草劑與Pseudomonas syringae pv.tabaci混合使用的效果比較。不同試驗(yàn)中的Pseudomonas syringae pv.tabaci的濃度分布在105～106CFU/ml(菌落形成單位/ml)之間，但在每組特定試驗(yàn)中所有植物都得到相同濃度的細(xì)菌。在一些實(shí)驗(yàn)中，混合物中也含有CIDEKICKR的(4.75ml/quart)，一種表面活性劑，或ATTAGEL 40R(0.5%)，一種分散劑等作為助劑。CIDEKICKR由JLB International Chemical，Inc.(P.O.Box 6006，Vero Beach，F(xiàn)lorida 32961-6006)制備，ATTAGEL 40R由Englehard Corporation(Specialty Chemicals Division，33 Wood Avenue South，Menlo Park CN 28，Edison，New Jersey 08818)制備。
初步實(shí)驗(yàn)表明，在混合容器中以使用濃度Pseudomonas syringae pv.tabaci在麥草畏和草甘磷中至少可存活120分鐘。在CIDEKICKR(4.75ml/quart)或ATTAGEL 40R(0.5%)中其存活能力至少在120分鐘內(nèi)也沒(méi)有明顯傷害。而當(dāng)Pseudomonas syringae pv.tabaci被懸浮于0.006 1b/gal的百草枯(二氯化1，1′-二甲基-4，4′-聯(lián)陽(yáng)離子吡啶)中時(shí)，則在1小時(shí)內(nèi)被殺死。因此，百草枯不能用來(lái)和Pseudomonas syringae pv.tabaci混合。
下面的雜草被用來(lái)做試驗(yàn)曼陀羅(Datura stramonium)，白麻(Abutilon theophrasti)，牽牛花(Ipomea purpurea)，稗(Echino chloa crusgalli)，和金花狗尾草(Setaria glauca)。這些被選為中耕作物中具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的雜草，并作為整個(gè)植物屬的代表。煙草植物(Nicotiana tabacum L.)被用來(lái)試驗(yàn)Pseudomonas syringae pv.tabaci的毒性。在溫室中，在一般溫室條件下，秧苗在4英寸的容器中生長(zhǎng)。植物在一個(gè)密閉的有機(jī)玻璃房間里按指定設(shè)計(jì)方式處理，即用一個(gè)接有水流噴嘴的CO2壓力噴霧器噴灑藥物，水流噴嘴裝在房間的頂端。噴嘴以15磅/平方英寸(psi)壓力噴量約為25加侖/英畝(gpa)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)為隨機(jī)的完整區(qū)段設(shè)計(jì)，每次處理重復(fù)2次，每次重復(fù)試驗(yàn)使用2種植物。施藥后用塑料袋罩住所有用Pseudomonas syringae pv.tabaci處理過(guò)的植物約1小時(shí)。
每周對(duì)傷害進(jìn)行評(píng)價(jià)，以0～100計(jì)，0表示無(wú)傷害，100表示植物死亡。這種評(píng)價(jià)方式廣泛應(yīng)用于對(duì)除草劑效果的估價(jià)(如Eberlein等，雜草科學(xué)36792-799(1988))。
為了證實(shí)雜草已被同除草劑一起噴灑到植物上的致植物病害病菌所感染，將Pseudomonas syringae pv.tabaci培養(yǎng)成對(duì)抗菌素、利福平具有抵抗作用的突變株。使Pseudomonas syringaepv.tabaci(ATCC菌株11527和15373)培養(yǎng)物在含有100微克/毫升的利福平的介質(zhì)中生長(zhǎng)，繁殖具有抗藥力的菌落供進(jìn)一步研究。將選擇的菌種移植到煙草植物上驗(yàn)證其毒力。然后從煙草植物的損傷處將Pseudomonas syringaepv.tabaci菌種再分離出來(lái)，進(jìn)一步在含有100微升/毫升利福平的培養(yǎng)基中繁殖。選擇一個(gè)菌株和化學(xué)除草劑組合在雜草上進(jìn)一步試驗(yàn)，由Pseudomonas syringaepv.tabaci突變株和化學(xué)除草劑的組合可觀察到對(duì)雜草的控制有所增強(qiáng)，不過(guò)細(xì)菌突變株在增強(qiáng)雜草控制的作用上效果低于原始菌種抗利福平的Pseudomonas syringaepv.tabaci是從被感染的雜草中分離的，這說(shuō)明與化學(xué)除草劑一同施用的細(xì)菌是感染源。
實(shí)施例3和4說(shuō)明了使用兩種不同的化學(xué)試劑實(shí)施本發(fā)明的結(jié)果。
實(shí)施例 3五種雜草(曼陀羅、白麻、牽?；ā藓徒鸹ü肺膊?用0.061b/A的麥草畏處理，含或不含Pseudomonas syringaepv.tabaci。Pseudomonas syringae pv.tabaci的用量約是5×105CFU/ml，包括CIDEKICKR，4.75ml/quart，作為助劑。施藥時(shí)的溫度為82°F，在第7，14，20，28天時(shí)估價(jià)傷害程度。白麻，金花狗尾草和稗的結(jié)果見(jiàn)
圖1，這三種雜草的結(jié)果表明，當(dāng)細(xì)菌和麥草畏共同施用于雜草時(shí)，其傷害程度明顯大于單獨(dú)施用麥草畏。曼陀羅和牽?；?未表示)僅單獨(dú)使用麥草畏其控制程度已相當(dāng)高(60～100%)，因而當(dāng)含有Pseudomonas syringae pv.tabaci時(shí)造成的傷害沒(méi)有明顯的增加。
特別有趣的是對(duì)稗和金花狗尾草控制的顯著加強(qiáng)，因?yàn)辂湶菸吠ǔＷ钣行в陂熑~雜草，而對(duì)禾木科植物則相對(duì)無(wú)效。因而，細(xì)菌病原菌同麥草畏組合增加了可被化學(xué)除草劑控制的雜草種類范圍，甚至除草劑的用量也低于田間適宜量。麥草畏適宜的田間用量范圍為0.25～8.0 1b/A。
實(shí)施例 4五種雜草(曼陀羅、白麻、牽牛花、稗和金花狗尾草)用0.251b/A的草甘磷噴灑，含或不含Pseudomonas syringae pv.tabaci，含有4.75ml/quart的CIDEKICKR作為助劑。Pseudomonas syringae pv.tabaci的施藥量約為5×105CFU/ml，施藥時(shí)的溫度為82°F。在第7，14，20和28天時(shí)評(píng)價(jià)其傷害程度。
單獨(dú)使用草甘磷已給曼陀羅，白麻，稗和金花狗尾草以相當(dāng)高程度的控制(57.5～100%)，所以加進(jìn)Pseudomonas syringae pv.tabaci時(shí)，控制無(wú)顯著變化。然而，牽牛花對(duì)單獨(dú)使用0.25 1b/A的草甘磷具有較大的抗藥性，當(dāng)Pseudomonas syringae pv.tabaci和草甘磷組合使用時(shí)，增加了對(duì)牽牛花的傷害(圖2)。因此草甘磷和細(xì)菌病原菌組合使用增加了受除草劑控制的雜草種類范圍，甚至除草劑的量也低于適宜的田間使用量。草甘磷田間適宜的用量范圍在0.5～4.0 1b/A。
實(shí)施例 5在溫室條件下，試驗(yàn)Pseudomonas syringae pv.tabaci與從ICI Agricultural Products，wilmington，Delaware獲得的除草劑Sulfosate(三甲基锍羧基甲基氨基甲基膦酸鹽，公開(kāi)于US4315765)的組合效果。在實(shí)施例5至7中，使用的Pseudomonas syringae pv.tabaci菌株(ATCC＃55090)是在馬里蘭由Arvydas Grybauskas博士(the Department of Botany，University of Maryland，College Park，Maryland)從煙草植物中分離的。對(duì)九種雜草進(jìn)行效果評(píng)價(jià)，其中包括闊葉雜草(牽?；ǎ茁?，蒼耳屬植物[Xanthium strumarium]，反枝莧[Amaranthus retroflexus]和曼陀羅)以及禾木科植物(稗，金花狗尾草，約翰遜草和秋稷[Panicum dichotomiflorum])。比較四種處理結(jié)果單獨(dú)使用水，單獨(dú)使用Sulfosate，單獨(dú)使用Pseudomonas syringae pv.tabaci，或Sulfosate加上Pseudomonas syringae pv.tabaci。Sulfosate的用量為0.6 1b/A，是適宜田間用量的1/8。細(xì)菌的用量大約是108CFU/ml。所有的溶液(包括水控制處理)包含0.25%(v/v)的ORTHO X-77R作為助劑。X-77R是從Chevron化學(xué)公司購(gòu)得的分散劑。據(jù)制造商說(shuō)X-77R中的活性試劑是烷基芳基聚氧乙烯乙二醇、游離脂肪酸和異丙醇。如前面的實(shí)施例，測(cè)定其傷害百分?jǐn)?shù)。傷害百分?jǐn)?shù)的測(cè)定方法見(jiàn)雜草科學(xué)中的研究方法(Research Methods in Weed Science)，第3版，Southern Weed Science Society，1986，P37。
為使處理標(biāo)準(zhǔn)化。所有溶液都使用Devries Manufacturing(Hollandale，Minnesota)制造的從R & D Sprayers，Inc.(Opelousas，Louisiana)購(gòu)買的Model SB8 Spray Booth噴灑到雜草上。這種裝置有利于試驗(yàn)溶液能高度再生噴霧。噴霧器裝有壓力為23～25psi的噴嘴，噴出量為25gpa。噴嘴的噴速為3.0英里/小時(shí)。植物在室內(nèi)個(gè)別噴霧。與實(shí)施例3和4不同的是植物在噴霧后不置于塑料袋中。
進(jìn)行兩個(gè)試驗(yàn)。第一個(gè)試驗(yàn)中處理后第3，9和17天評(píng)價(jià)傷害程度，第二個(gè)試驗(yàn)中處理后第4，9和17天評(píng)價(jià)傷害程度。試驗(yàn)設(shè)計(jì)為隨機(jī)的完整區(qū)段設(shè)計(jì)，每次處理進(jìn)行2次重復(fù)試驗(yàn)，每次重復(fù)試驗(yàn)至少用2種植物。傷害值(表2)用重復(fù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的平均值表示。約翰遜草僅用于第二個(gè)試驗(yàn)中。第二個(gè)試驗(yàn)在春末進(jìn)行。在此期間雜草經(jīng)受較高的平均環(huán)境溫度。
試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2，正如所希望的，以僅含X-77R助劑的水噴灑雜草，基本上不產(chǎn)生傷害。雜草對(duì)使用的低劑量Sulfosate的敏感性是不同的，闊葉雜草顯示某些傷害(尤其在第二個(gè)試驗(yàn)中)，而對(duì)禾木科植物幾乎沒(méi)有或根本沒(méi)有傷害。單獨(dú)使用細(xì)菌(表2A)在第一個(gè)試驗(yàn)早期時(shí)對(duì)闊葉雜草產(chǎn)生一些傷害，之后，植物即恢復(fù)，而對(duì)禾木科植物則無(wú)傷害。
用Sulfosate和Pseudomonas syringae pv.tabaci的組合物(表2A)處理雜草顯示的傷害程度一般要比單獨(dú)使用它們處理雜草所產(chǎn)生的結(jié)果大。在兩個(gè)試驗(yàn)中，闊葉雜草顯示了很大程度的傷害。禾木科植物用組合物處理，在第一個(gè)試驗(yàn)中顯示了很大程度的傷害，而在第二個(gè)試驗(yàn)中產(chǎn)生了較小的效果。第一、二個(gè)試驗(yàn)的詳細(xì)差別要聯(lián)系于環(huán)境因素如季節(jié)、溫度和光線量。
實(shí)施例6說(shuō)明了在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的細(xì)菌的使用。
實(shí)施例 6替代在瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)皿上生長(zhǎng)，令Pseudomonas syringae pv.tabaci在省去了瓊脂的King′s B介質(zhì)的液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。在28℃下，在一轉(zhuǎn)速為180-190r.p.m的旋轉(zhuǎn)震蕩器(New Brunswick G10 gyroshaker)上，令細(xì)胞在2升的愛(ài)倫美(Erlenmeyer)燒瓶中培養(yǎng)64小時(shí)，直到細(xì)胞達(dá)到大約109CFU/ml的濃度。含有細(xì)菌細(xì)胞的介質(zhì)用新鮮培養(yǎng)基介質(zhì)稀釋到濃度為108CFU/ml。加入X-77R后，所得的懸浮液在實(shí)施例5中描述的實(shí)驗(yàn)中作為另外的處理組(單獨(dú)使用Pseudomonas syringae pv.tabaci或與Sulfosate組合使用)。
結(jié)果見(jiàn)表2中的B部分。某些闊葉雜草，尤其是牽牛花易于被單獨(dú)使用的Pseudomonas syringae pv.tabaci所傷害，但是禾木科植物基本上無(wú)傷害。然而，所有植物在用Sulfosate和Pseudomonassyringae pv.tabaci的組合物處理后都顯示了很大的傷害，其程度一般大于單獨(dú)使用Sulfosate或細(xì)菌所產(chǎn)生的傷害。值得注意的是，盡管Sulfosate和細(xì)菌單獨(dú)使用時(shí)，禾木科植物都對(duì)其有抗藥力，但當(dāng)Sulfosate和細(xì)菌組合使用時(shí)，則都產(chǎn)生了很大傷害。
實(shí)施例7說(shuō)明了改變Sulfosate使用量帶來(lái)的影響。
實(shí)施例7試驗(yàn)基本上和實(shí)施例6的方案相同，但是改變了Sulfosate的使用量。Sulfosate的使用量分別是適宜田間應(yīng)用量0.48 1b/A的1/2，1/4，1/12(即分別為0.24，0.12和0.04 1b/A)。Pseudomonas syringae pv.tabaci生長(zhǎng)在液體培養(yǎng)基中，用量約為108CFU/ml。
Sulfosate用量為適宜田間量的1/2，1/4時(shí)都產(chǎn)生了顯著的傷害。單獨(dú)使用Sulfosate產(chǎn)生的傷害程度對(duì)于闊葉雜草超過(guò)40%，對(duì)于禾木科植物是25%或更多。這些結(jié)果和通常的觀察結(jié)果是一致的，即在溫室條件下，與田間相比植物對(duì)同量的除草劑常常具有更大的敏感性。
施用Pseudomonas syringae pv.tabaci與1/4的Sulfosate的組合物一般可增大傷害程度。對(duì)于Sulfosate施用量為適宜田間用量的1/4時(shí)的增加程度注意較小，而觀察的多是Sulfosate施用量為適宜田間量的1/8時(shí)的增加程度(見(jiàn)表2B)。例如單獨(dú)使用0.12 1b/A的Sulfosate，牽?；?天時(shí)顯示42.5%的傷害，17天時(shí)則為47.5%的傷害。加上Pseudomonas syringae pv.tabaci后，傷害程度分別是50.0%和65.0%。單獨(dú)施用1/4適宜田間用量的Sulfosate于稗草，在上述兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)都顯示了27.5%的傷害。加入細(xì)菌后，4天時(shí)的傷害程度是30%，17天時(shí)是47.5%。單獨(dú)使用Sulfosate其它雜草顯示了較高程度的傷害。并且在某些情況下，當(dāng)把Pseudomonas syringae pv.tabaci加入Sulfosate時(shí)傷害程度不再增加。
表3表示了Sulfosate的用量為適宜田間量的1/12時(shí)的結(jié)果，在此應(yīng)用劑量，只有反枝莧對(duì)單獨(dú)使用的Sulfosate較敏感。Sulfosate和Pseudomonas syringae pv.tabaci的組合物對(duì)所有的闊葉雜草和金花狗尾草都顯示了增大了的傷害。
當(dāng)與實(shí)施例5的結(jié)果相比較時(shí)，這些結(jié)果表明將植物病原細(xì)菌加到化學(xué)除草劑中能增大一系列除草劑濃度對(duì)雜草的傷害能力。然而當(dāng)單獨(dú)使用除草劑，且選擇的量產(chǎn)生了可測(cè)的但低程度的傷害時(shí)，如實(shí)施例6中的情況，此時(shí)化學(xué)除草劑和植物病原細(xì)菌組合尤其有效。
在不違背本發(fā)明范圍或精神的情況下，實(shí)施本發(fā)明時(shí)可作種種改進(jìn)和變更，這對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的。例如可用被遺傳工程賦予了另外的所需特性的細(xì)菌實(shí)施本發(fā)明。對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員來(lái)說(shuō)根據(jù)說(shuō)明書(shū)的描述和文中公開(kāi)的本發(fā)明的實(shí)施例，本發(fā)明其它的實(shí)施方案將是顯而易見(jiàn)的。這樣，本發(fā)明還包括其改進(jìn)和變更，只要它們落入附加的權(quán)利要求書(shū)或其等同物的范圍內(nèi)。
表2Sulfosate和Pseudomonas syringae pv.tabaci單獨(dú)使用和組合使用的效果植物傷害程度百分?jǐn)?shù)1處理 DAT2牽?；ò茁樯n耳屬植物反枝莧第1 第2 第1 第2 第1 第2第1 第2水3－4 0.0 5.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.090.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.017 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0Sulfosatae30.0 22.5 22.5 32.5 40.0 47.5 20.0 7.53-4 0.0 30.0 5.0 25.0 0.0 40.0 0.0 45.09 0.0 27.5 0.0 0.0 0.0 52.5 0.0 20.017 0.0 27.5 0.0 0.0 0.0 52.5 0.0 20.0A.器皿培養(yǎng)細(xì)菌43－4 20.0 20.0 12.5 0.0 30.0 0.0 45.0 45.0925.0 30.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 25.01712.5 17.5 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 55.0Sulfosate33-4 40.0 30.0 42.5 30.0 52.5 27.5 87.5 60.0加上紅菌49 70.0 47.5 45.0 22.5 47.5 30.0 100.0 60.017 60.0 27.5 40.0 20.0 40.0 35.0 100.0 97.5B.液體培養(yǎng)細(xì)菌43-4 20.0 5.0 22.5 0.0 25.0 0.0 17.5 0.09 25.0 20.0 0.0 0.0 27.5 0.0 0.0 12.51732.5 12.5 0.0 0.0 37.3 37.5 0.0 40.0Sulfosate33-4 40.0 25.0 50.0 37.5 62.3 27.5 75.0 55.0加上紅菌49 60.0 27.5 45.0 30.0 55.0 25.0 97.5 67.517 40.0 40.0 40.0 62.5 50.0 42.5 100.0 57.51、根據(jù)試驗(yàn)中描述的方法測(cè)定植物傷害程度百分?jǐn)?shù)。
0%＝無(wú)效，100%＝植物死亡2、DAT＝處理后天數(shù)3、Sulfosate施用量為0.06 1b/A＝1/8田間適宜用量。
4、Pseudomonas syringae pv.tabaci施用量為108CFU/ml.懸浮于King′s B介質(zhì)中。
表2(續(xù))Sulfosate和Pseudomonas syringae pv.tabaci單獨(dú)使用和組合使用的效果植物傷害程度百分?jǐn)?shù)1
1、根據(jù)試驗(yàn)中描述的方法測(cè)定植物傷害程度百分?jǐn)?shù)。
0%＝無(wú)效，100%＝植物死亡2、DAT＝處理后天數(shù)3、Sulfosate施用量為0.06 1b/A＝1/8田間適宜用量。
4、Pseudomonas syringae pv.tabaci施用量為108CFU/ml，懸浮于King′s B介質(zhì)中。
權(quán)利要求
1.一種控制雜草，抑制其生長(zhǎng)或?qū)⑵錃⑺赖姆椒?，包括用能促進(jìn)細(xì)菌感染所述雜草的化學(xué)試劑接觸所述雜草，和用所述化學(xué)試劑接觸后，用能感染所述雜草的細(xì)菌植物病原菌接觸所述雜草，其中，所述化學(xué)試劑的施用量足以促進(jìn)所述細(xì)菌植物病原菌對(duì)所述雜草的感染，和其中，所述細(xì)菌植物病原菌的施用量足以感染所述的用所述化學(xué)試劑處理過(guò)的雜草，和其中，對(duì)雜草生長(zhǎng)的抑制或殺死所述雜草的效果大于單獨(dú)使用同量的所述化學(xué)試劑或細(xì)菌植物病原菌。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的化學(xué)試劑和所述的細(xì)菌植物病原菌同時(shí)施用于所述雜草。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的化學(xué)試劑先于所述的細(xì)菌植物病原菌施用于所述雜草。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的化學(xué)試劑是一種除草劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌在能維持或促進(jìn)所述細(xì)菌生長(zhǎng)的介質(zhì)中施用于雜草。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas屬的一種菌株。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas syringae種的一個(gè)pathovar。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas syringae pv.tabaci。
9.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas solanacearum種的一個(gè)Pathovar。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的化學(xué)試劑是麥草畏。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的化學(xué)試劑是草甘磷。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的化學(xué)試劑是阿特拉津。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的化學(xué)試劑是2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)。
14.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的化學(xué)試劑是Sulfosate。
15.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌含有重組的DNA。
16.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是一種對(duì)溫度敏感的細(xì)菌，在冬天溫度下不能存活。
17.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是一種對(duì)溫度敏感的細(xì)菌，在夏天溫度下不能存活。
18.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是一種營(yíng)養(yǎng)缺陷體，作為死物寄生菌不能存活。
19.一種用于雜草控制的組合物，包括一種能感染植物的細(xì)菌接種體和一種能使所述細(xì)菌易于感染的化學(xué)試劑的混合物。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的組合物，其中所述的化學(xué)試劑是一種除草劑。
21.根據(jù)權(quán)利要求19的組合物，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas屬的一種菌株。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的組合物，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas syringae種的一個(gè)pathovar。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的組合物，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas syringae pv.tabaci。
24.根據(jù)權(quán)利要求22的組合物，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas solanacearum。
25.根據(jù)權(quán)利要求19的組合物，其中所述的化學(xué)試劑是麥草畏。
26.根據(jù)權(quán)利要求19的組合物，其中所述的化學(xué)試劑是草甘磷。
27.根據(jù)權(quán)利要求19的組合物，其中所述的化學(xué)試劑是阿特拉津。
28.根據(jù)權(quán)利要求19的組合物，其中所述的化學(xué)試劑是2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)。
29.根據(jù)權(quán)利要求19的組合物，其中所述的化學(xué)試劑是Sulfosate。
30.一種控制雜草，抑制其生長(zhǎng)或?qū)⑵錃⑺赖姆椒?，包括用能促進(jìn)細(xì)菌感染所述雜草的化學(xué)試劑接觸所述雜草，和用所述化學(xué)試劑接觸后，用能感染所述雜草的細(xì)菌植物病原菌接觸所述雜草，其中，所述化學(xué)試劑施用量足以促進(jìn)所述細(xì)菌植物病原菌對(duì)所述雜草的感染，和其中，所述細(xì)菌植物病原菌施用量足以感染用所述化學(xué)試劑處理過(guò)的所述雜草，和其中，被所述細(xì)菌植物病原菌感染的寄生物種范圍大于單獨(dú)使用所述細(xì)菌植物病原菌所感染的寄生物范圍。
31.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的化學(xué)試劑和所述的細(xì)菌植物病原菌同時(shí)施用于所述雜草。
32.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的化學(xué)試劑先于所述的細(xì)菌植物病原菌施用于所述雜草。
33.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的化學(xué)試劑是一種除草劑。
34.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是在能維持或促進(jìn)所述細(xì)菌生長(zhǎng)的介質(zhì)中施用于雜草。
35.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas屬一種菌株。
36.根據(jù)權(quán)利要求35的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas syringae種的一個(gè)pathovar。
37.根據(jù)權(quán)利要求36的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas syringae pv.tabaci。
38.根據(jù)權(quán)利要求35的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是Pseudomonas solanacearum種的一個(gè)pathovar。
39.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的化學(xué)試劑是麥草畏。
40.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的化學(xué)試劑是草甘磷。
41.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的化學(xué)試劑是阿特拉津。
42.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的化學(xué)試劑是2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)。
43.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的化學(xué)試劑是Sulfosate。
44.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌含有重組的DNA。
45.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是一種對(duì)溫度敏感的細(xì)菌，在冬天的氣溫下不能存活。
46.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是一種對(duì)溫度敏感的細(xì)菌，在夏天的氣溫下不能存活。
47.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述的細(xì)菌植物病原菌是一種營(yíng)養(yǎng)缺陷體，作為死物寄生菌不能存活。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種控制雜草的方法，其包括向雜草施用一種化學(xué)品如除草劑和一種細(xì)菌植物病原菌?；瘜W(xué)品的作用是促使植物病原細(xì)菌對(duì)雜草的隨機(jī)感染。這就可能實(shí)現(xiàn)用低于單獨(dú)使用除草劑時(shí)所需要的除草劑量控制大范圍的雜草種類。受控制的雜草種類范圍大于單獨(dú)使用除草劑的控制范圍。
文檔編號(hào)A01N63/02GK1050666SQ9010837
公開(kāi)日1991年4月17日 申請(qǐng)日期1990年9月10日 優(yōu)先權(quán)日1989年9月11日
發(fā)明者彼得·S·卡爾遜 申請(qǐng)人:谷物遺傳學(xué)國(guó)際公司