一種提高紫甘藍(lán)花青素含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)作物培育，具體地說，涉及一種提高紫甘藍(lán)花青素含量的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]花青素是一種水溶性植物色素，屬于類黃酮類化合物，是植物的二級次生代謝產(chǎn)物?；ㄇ嗨鼐哂休^高的營養(yǎng)價(jià)值，經(jīng)常食用含有花青素的蔬菜水果對身體很有益處，可以保護(hù)身體免受自由基的損傷，能夠增強(qiáng)免疫力，抵抗衰老。植物積累花青素能夠幫助植物抵抗逆境，花青素是一種高效的抗氧化劑，能夠保護(hù)植物不受自由基傷害。目前對于提高植物花青素積累的方法有一些報(bào)道，如利用L-谷氨酸處理著色期的蘋果，能夠提高蘋果果皮的花青素合成及積累(汪良駒等，L-谷氨酸促進(jìn)富士蘋果花青素積累的效應(yīng)[J]，果樹學(xué)報(bào)，2006，23:157-160);以及利用轉(zhuǎn)基因的方法促進(jìn)花青素合成結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)，從而提高作物的花青素含量(梁毅等，洋蔥花青素合成相關(guān)基因(AcPALl)的克隆和表達(dá)分析[J]，生物技術(shù)學(xué)報(bào)，2014，22 ;47-54)。然而轉(zhuǎn)基因技術(shù)由于其操作及產(chǎn)品安全鑒定的復(fù)雜性，并不適合在紫甘藍(lán)栽培上進(jìn)行推廣。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的是提供一種快速有效、易于推廣應(yīng)用的提高紫甘藍(lán)花青素含量的方法。
[0004]為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明首先提供一種能夠有效提高紫甘藍(lán)花青素含量的方法，所述方法為:將紫甘藍(lán)種子用清水漂洗干凈，然后在20-30°C下浸泡于褪黑素溶液中12_24h，沖洗干凈后進(jìn)行播種。
[0005]進(jìn)一步地，所述褪黑素溶液的濃度為10 μ mol/L?1000 μ mol/Lo
[0006]作為優(yōu)選，所述褪黑素溶液的濃度為100 μ mol/L。
[0007]作為優(yōu)選，將紫甘藍(lán)種子在25°C下浸泡于褪黑素溶液中。
[0008]本發(fā)明還提供了褪黑素在提高紫甘藍(lán)花青素含量中的應(yīng)用。
[0009]具體為，利用濃度為10 μ mol/L?1000 μ mol/L的褪黑素溶液浸泡紫甘藍(lán)種子，將種子沖洗干凈后進(jìn)行播種。
[0010]作為優(yōu)選，所述褪黑素溶液的濃度為lOOymol/L。
[0011]甘藍(lán)長成幼苗后，取樣進(jìn)行花青素含量測定，相對于未被褪黑素提前浸泡過的幼苗，褪黑素處理提高了紫甘藍(lán)幼苗的花青素含量。
[0012]本發(fā)明的有益效果在于:
[0013]本發(fā)明提供了一種新的促進(jìn)紫甘藍(lán)花青素積累的方法，利用Ιθμπιο?/L?1000 μ mol/L的褪黑素溶液浸泡紫甘藍(lán)種子，可顯著提高紫甘藍(lán)幼苗的花青素含量。
【附圖說明】
[0014]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1中褪黑素處理對出苗后的紫甘藍(lán)幼苗胚根及子葉顏色的影響。
[0015]圖2為本發(fā)明實(shí)施例1中出苗后的紫甘藍(lán)幼苗的花青素含量。
[0016]圖3為本發(fā)明實(shí)施例1中褪黑素對紫甘藍(lán)幼苗成株的影響；
[0017]其中:左邊植株為未被褪黑素處理過的紫甘藍(lán)幼苗；右邊植株為經(jīng)過100 ymol/L褪黑素前處理的甘藍(lán)幼苗。
[0018]圖4為本發(fā)明實(shí)施例1中褪黑素對紫甘藍(lán)幼苗生長發(fā)育各階段花青素含量的影響；
[0019]其中:CK植株為未被褪黑素處理過的紫甘藍(lán)幼苗；M100植株為經(jīng)過lOOymol/L褪黑素前處理的甘藍(lán)幼苗。
【具體實(shí)施方式】
[0020]以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0021]實(shí)施例1
[0022]播種前將紫甘藍(lán)種子用清水漂洗干凈，然后于室溫條件下(25°C )在褪黑素溶液中浸泡24h ；
[0023]褪黑素溶液配制方法:稱取0.232g褪黑素粉末(購自sigma公司，純度為98% )，在1mL無水乙醇中徹底溶解，加水至1L，此時(shí)褪黑素溶液濃度為lOOOymol/L。根據(jù)需要的褪黑素溶液濃度進(jìn)行稀釋，有效的褪黑素溶液濃度為10 ymol/L?1000 ymol/L。
[0024]本實(shí)施例設(shè)置4個(gè)濃度處理，分別為10ymol/L、100ymol/L、500 ymol/L、1000 μmol/Lo
[0025]將浸泡好的種子用清水沖洗干凈，播種。每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)。以清水浸泡的甘藍(lán)種子未對照。幼苗出土后，觀察幼苗的顏色，取樣測定紫甘藍(lán)幼苗的花青素含量。
[0026]花青素測定米用pH差不法:
[0027]①稱取樣品0.lg，置于研缽中，加液氮研磨至粉末狀，置于2mL的離心管中備用。
[0028]②每種樣品準(zhǔn)備六份，分為兩個(gè)小組，每個(gè)小組3次重復(fù)，分別加入2mL pH = 1.0的緩沖液(50mM KCl+150mM HCl)和 2mL pH = 4.5 的緩沖液(400mM 醋酸鈉 +240mM HCl)
[0029]③將混合物于4°C條件下，12，OOOg離心15min，吸取上清液并稀釋兩倍后，測定其在510nm處的OD值；
[0030]④按照下列公式計(jì)算樣品中的總花青素含量:
[0031]花青素含量(mg/g)= (Α510ρΗ1.0-Α510ρΗ4.5) X 484.8/24，825 X 稀釋倍數(shù)
[0032]其中常數(shù)484.8為花青素_3_葡萄糖苷氯化物的分子量，24，825為其在510nm處的摩爾吸光系數(shù)(ε )每個(gè)樣品總花青素含量取3次重復(fù)測量結(jié)果的平均值。
[0033]結(jié)果表明，褪黑素處理過的甘藍(lán)幼苗花青素含量得到了顯著提高。如圖1所示，經(jīng)過褪黑素溶液浸種的紫甘藍(lán)幼苗明顯比未被褪黑素處理過的幼苗顏色深，且測定幼苗中的花青素濃度也反映了相同的實(shí)驗(yàn)規(guī)律，結(jié)果如圖2所示。其中促進(jìn)效果最明顯的為100 μ mo I/L的褪黑素溶液濃度，將CK組的幼苗和M100處理的幼苗繼續(xù)進(jìn)行栽培，分別在幼苗期、蓮座期和結(jié)球期取樣進(jìn)行花青素含量的測定，發(fā)現(xiàn)在紫甘藍(lán)的生長發(fā)育過程中，100 ymol/L處理過的紫甘藍(lán)花青素含量抑制高于未被褪黑素處理過的植株如圖3和圖4所示。以上結(jié)果均說明褪黑素對種子的處理能夠提高紫甘藍(lán)的花青素合成。而花青素是目前公認(rèn)的營養(yǎng)保健物質(zhì)，它是一種強(qiáng)氧化劑，能夠抵抗自由基傷害，延緩衰老。
[0034]雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實(shí)施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對之作一些修改或改進(jìn)，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種提高紫甘藍(lán)花青素含量的方法，其特征在于，所述方法為將紫甘藍(lán)種子用清水漂洗干凈，然后在20-30°C下浸泡于褪黑素溶液中12-24h，沖洗干凈后進(jìn)行播種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述褪黑素溶液的濃度為10ymol/L?1000 μmol/Lo
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述褪黑素溶液的濃度為100ymol/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，將紫甘藍(lán)種子在25°C下浸泡于褪黑素溶液中。
5.褪黑素在提高紫甘藍(lán)花青素含量中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，利用濃度為10μ mo I/L?1000 μ mol/L的褪黑素溶液浸泡紫甘藍(lán)種子，將種子沖洗干凈后進(jìn)行播種。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述褪黑素溶液的濃度為100ymol/L。
【專利摘要】本發(fā)明涉及農(nóng)作物培育，具體提供一種提高紫甘藍(lán)花青素含量的方法，將紫甘藍(lán)種子用清水漂洗干凈，然后在20-30℃下浸泡于褪黑素溶液中12-24h，沖洗干凈后進(jìn)行播種。本發(fā)明提供了一種新的促進(jìn)紫甘藍(lán)花青素積累的方法，利用10μmol/L～1000μmol/L的褪黑素溶液浸泡紫甘藍(lán)種子，可顯著提高紫甘藍(lán)幼苗的花青素含量。
【IPC分類】A01C1-00, A01N43-38, A01P21-00
【公開號】CN104686005
【申請?zhí)枴緾N201510058832
【發(fā)明人】郭仰東, 張娜, 齊艷, 曹蕓運(yùn), 張海軍, 李雙桃, 李虹霏, 孫倩倩, 張磊
【申請人】中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年6月10日
【申請日】2015年2月4日