一種防治植物線蟲的藥劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及植物保護(hù)技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種防治植物線蟲的藥劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 植物寄生線蟲是植物侵染病原之一，它們廣泛寄生在各種植物的枝干、根、莖、葉、 花、芽和種子上，使植物發(fā)生各種線蟲病，給農(nóng)、林業(yè)的發(fā)展帶來了嚴(yán)重的危害。線蟲對(duì)植物 的致病作用，除了直接造成損傷和掠奪營(yíng)養(yǎng)外，主要是線蟲在穿刺寄生時(shí)分泌的唾液中含 有許多酶或毒素，誘發(fā)寄主組織發(fā)生各種病理變化，引起各種病變。例如可使植物組織細(xì)胞 發(fā)育過度、形成巨型細(xì)胞或使細(xì)胞中膠層溶解引起細(xì)胞分解、細(xì)胞壁被破壞等，進(jìn)而使植物 根部和表皮層形成空桐甚至細(xì)胞死亡。
[0003] 植物線蟲分布非常廣泛，每一種植物幾乎至少有一種寄生線蟲。據(jù)報(bào)道，嚴(yán)重危害 我國農(nóng)、林、經(jīng)濟(jì)作物等的線蟲達(dá)100多種。植物線蟲對(duì)某些作物的危害甚至超過了其他 病、蟲、草的危害程度。例如我國松材線蟲對(duì)松林的危害被稱為"無煙的森林火災(zāi)"，感病性 強(qiáng)的松樹感染松材線蟲病后，通常2~3個(gè)月即萎黨死亡。
[0004] 松材線蟲病又稱松樹萎黨病，是松材線蟲（化zrsa如eiencAi/s xjiwAWi/s)通過松 褐天牛等媒介昆蟲在松樹體內(nèi)傳播，從而引發(fā)的松樹病害。被松材線蟲感染后的松樹，針葉 呈黃褐色或紅褐色，萎黨下垂，樹脂分泌停止，樹干可觀察到天牛侵入孔或產(chǎn)卵痕跡，病樹 整株干枯死亡，最終腐爛。最快1個(gè)月即萎黨死亡。
[0005] 松材線蟲病具有致病力強(qiáng)、寄主死亡速度快、傳播快等特點(diǎn)，一旦發(fā)生，治理難度 大，不僅會(huì)給國民經(jīng)濟(jì)造成巨大損失，也破壞了自然景觀及生態(tài)環(huán)境，對(duì)松樹資源構(gòu)成嚴(yán)重 威脅。松材線蟲病遍布70種針葉樹，其中松屬樹種57種，非松屬植物13種。由于該病害 具有傳播蔓延迅速、寄主植物分布廣、發(fā)病速度快、致死率高、防治難等特點(diǎn)，通常被人們稱 為"松樹的癌癥"。防治松材線蟲病的現(xiàn)有技術(shù)存在W下問題： (1)保樹藥劑不僅需要大量的勞動(dòng)力，而且價(jià)格昂貴。
[0006] (2)人工砍伐會(huì)導(dǎo)致樹木直接死亡，造成經(jīng)濟(jì)損失。
[0007] (3)殺蟲劑的有效性近年來已降低。
[0008] (4)由于每年松褐天牛解化和逃逸時(shí)間不同，很難決定施用殺蟲劑的適當(dāng)時(shí)機(jī)。
[0009] (5)藥物很難進(jìn)入樹體內(nèi)，藥物滯留時(shí)間較短。
[0010] (6)所采用藥劑多為大濃度的化學(xué)藥劑，會(huì)在±壤和水系統(tǒng)中殘留，對(duì)動(dòng)物和植物 生態(tài)系統(tǒng)會(huì)產(chǎn)生影響。
[0011] (7)不能形成有效的長(zhǎng)期治理手段。
[0012] 化學(xué)防治部分藥劑因成本太高無法推廣，而廣泛應(yīng)用的一些藥劑也因環(huán)境問題被 禁用或停止開發(fā)?，F(xiàn)有的大多數(shù)化學(xué)藥劑品種面臨著成本太高、防治不理想甚至產(chǎn)生藥害 和抗病性等諸多問題。
[0013] 有鑒于此，特提出本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0014] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新的防治植物線蟲 的藥劑。
[0015] 該防治植物線蟲的藥劑，有效成分包括天然皂巧，所述天然皂巧為無患子皂巧、皂 芙皂巧、茶皂巧、柴胡皂巧、商陸皂巧、熊果酸、夏枯草皂巧和山海棠皂巧中的一種或多種。
[0016] 皂巧廣泛存在于植物中，是一種比較復(fù)雜的化合物，由皂巧元和與皂巧元連接的 糖組成，它的水溶液振搖后能產(chǎn)生大量持久性的泡沫，有降低液體表面張力的作用，可W用 作乳化劑，也可W作為去垢劑使用。
[0017] 本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，上述天然皂巧單獨(dú)或者幾種結(jié)合使用，可W有效殺滅植物線蟲。 本發(fā)明所述的天然皂巧均可W直接購買市售商品，也可W按照現(xiàn)有常規(guī)手段從相應(yīng)植物部 分中提取。
[0018] 作為優(yōu)選方案，上述防治植物線蟲的藥劑，天然皂巧為無患子皂巧、皂芙皂巧或茶 皂巧。運(yùn)=種皂巧對(duì)于線蟲的抑制和殺滅效果優(yōu)于其他皂巧，其中又W無患子皂巧最佳。
[0019] 作為優(yōu)選方案，上述防治植物線蟲的藥劑為水分散劑，天然皂巧的濃度為 10~200g/L〇
[0020] 作為優(yōu)選方案，上述防治植物線蟲的藥劑，有效成分還包括抗生素溶桿菌 iLysobacter antibioticus)〇
[0021] 抗生素溶桿菌（ZjwAacter 被發(fā)現(xiàn)具有殺滅植物線蟲和天牛卵 W及幼蟲的功效，還可W防治果樹流膠病。線蟲體壁主要由幾下質(zhì)、蛋白質(zhì)和脂、碳水化合 物組成，卵殼主要是由一層膠原質(zhì)狀的蛋白圍繞一層脂蛋白組成?？股厝軛U菌可W分泌 幾下質(zhì)酶，W幾下質(zhì)或蛋白質(zhì)為食物來源，能夠與線蟲屬的卵建立關(guān)系，降解卵殼的幾下質(zhì) 層。實(shí)驗(yàn)證明，W幾下質(zhì)培養(yǎng)出的菌液具有殺滅線蟲和天牛卵W及幼蟲的功效。線蟲的體 壁由幾下質(zhì)構(gòu)成，因此抗生素溶桿菌可W分解線蟲體壁，造成線蟲死亡。抗生素溶桿菌的菌 液具有一定時(shí)間的繁殖期和存活期，對(duì)于未感染線蟲的樹木，可在植物表皮形成一層覆蓋 菌膜，且不受陰雨天氣的影響，在一定時(shí)間內(nèi)具備有效的預(yù)防作用。
[0022] 通常天然皂巧都具有一定的殺菌作用，能夠抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，但是上述天然皂巧 在與抗生素溶桿菌（如5〇如cter 共存時(shí)，并不會(huì)抑制該細(xì)菌的正常生理活 動(dòng)，同時(shí)兩類成分協(xié)同作用，殺滅線蟲的效果更佳突出。
[0023] 天然皂巧與抗生素溶桿菌共同抑制或殺滅線蟲時(shí)，能夠增強(qiáng)彼此的功能，考慮可 能是天然皂巧除了其本身具有的殺蟲活性外，其作為表面活性劑所具有的潤(rùn)濕性和潤(rùn)孔 性，也能夠幫助藥劑浸潤(rùn)到植物表皮里面的組織，殺滅內(nèi)部組織寄生的線蟲，使藥劑更有效 的發(fā)揮作用。
[0024]作為優(yōu)選方案，上述防治植物線蟲的藥劑為水分散劑，其中抗生素溶桿菌濃度為 1X1〇6~1X1〇9個(gè)/mL。該濃度下細(xì)菌能夠維持良好的生長(zhǎng)性能，活力最佳。
[00巧]作為優(yōu)選方案，上述防治植物線蟲的藥劑中，還包括幾下質(zhì)、復(fù)合氨基酸、薦糖和 復(fù)合肥。上述物質(zhì)均可W為抗生素溶桿菌提供營(yíng)養(yǎng)，維持其生物活性，加入上述物質(zhì)后，能 夠延長(zhǎng)藥劑作用時(shí)間，增強(qiáng)作用效果。另外其還有一個(gè)優(yōu)點(diǎn)就是生產(chǎn)成本非常低廉，完全能 夠滿足抗生素溶桿菌的生長(zhǎng)要求。
[0026] 其中復(fù)合氨基酸可W為飼料用復(fù)合氨基酸，主要成分包括賴氨酸、色氨酸、蘇氨 酸、亮氨酸、組氨酸、鄉(xiāng)氨酸、脫氨酸、酪氨酸和粗氨酸。復(fù)合肥也可選用常規(guī)農(nóng)用復(fù)合肥，其 主要成分為氮、憐、鐘。兩種添加劑均有市售商品。
[0027] 作為優(yōu)選方案，上述防治植物線蟲的藥劑為水分散劑，抗生素溶桿菌 1X106~1X109個(gè)/血，天然皂巧1~200g/l，幾下質(zhì)0. 2~2g/l，復(fù)合維生素0. 2~2g/l，薦糖 1~6g/l，復(fù)合肥2~lOg/L。
[0028] 天然皂巧可W直接購買市售商品，也可W按照現(xiàn)有常規(guī)手段提取，例如無患子皂 巧可W從無患子果皮中提取，水提取和醇提取均可。其中優(yōu)選使用無患子皂巧。
[0029]無患子皂巧（SoapnutSaponin)是野生落葉喬木無患子（Sapindusmukorossi Gareth.)果皮的提取物，主要表面活性成分為S祗皂巧類（I)、倍半祗糖巧類（II)、脂肪油 和蛋白質(zhì)，是一種天然的非離子型表面活性劑，純天然洗涂劑、香精、色素和防腐劑。具有 很強(qiáng)的降低表面張力的作用，用于皮膚清潔(沐浴、洗臉、洗手、洗發(fā)）和衣物洗涂，洗潔性能 好，有效清除污垢，無異味，抗菌美容，增白、桂斑、桂痘、防治皮膚病。100%降解，溫和無刺 激，不會(huì)產(chǎn)生有害人體健康和有害環(huán)境的殘留物。是一種易使用的天然綠色的表面活性劑。 另外無患子皂巧由于其表面活性劑性能優(yōu)越，也是很好的農(nóng)藥乳化劑。
[0030] 本發(fā)明經(jīng)過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，無患子皂巧與抗生素溶桿菌配合在殺滅線蟲方面的性能優(yōu) 于其他種類的皂巧，尤其是松材線蟲，具有很好的殺滅作用。另外由于其本身具有特殊氣 味，可W遮蔽松木的味道，影響天牛進(jìn)食，對(duì)于松材線蟲病害的防御也有一定作用，因此可 W用于防治松材線蟲。
[0031] 本發(fā)明還提供一種上述防治植物線蟲的藥劑的制備方法，步驟包括：水中加入幾 下質(zhì)和抗生素溶桿菌保存液混勻，30°C通入空氣的條件下培養(yǎng)=天，再加入復(fù)合維生素、薦 糖和復(fù)合肥，混勻后繼續(xù)在30°C通入空氣的條件下培養(yǎng)=天，所得培養(yǎng)液加入適量天然皂 巧。
[0032]其中所述的抗生素溶桿菌保存液即抗生素溶桿菌種子培養(yǎng)液，可W直接購買市售 的菌種放大培養(yǎng)，也可W自行分離培養(yǎng)，培養(yǎng)基與菌種匹配，適用于培養(yǎng)該菌種。
[0033] 本發(fā)明的防治植物線蟲的藥劑，所述植物線蟲為松材線蟲、根結(jié)線蟲、大豆胞囊線 蟲、小麥粒線蟲、甘馨莖線蟲、水稻干尖線蟲、粟線蟲和/或相橘半穿刺線蟲。
[0034] 本發(fā)明還提供W上任一所述的防治植物線蟲的藥劑在防治害蟲天牛方面的應(yīng)用。
[0035] 本發(fā)明還提供W上任一所述的防治植物線蟲的藥劑在殺滅天牛卵、殺滅天牛幼蟲 和/或防治果樹流膠病方面的應(yīng)用，所述果樹為樓桃樹、桃樹、李子樹、杏樹或核桃樹。該藥 劑有效成分包括天然皂巧和抗生素溶桿菌。
[0036] 本發(fā)明還提供一種無患子皂巧的提取方法，是將無患子果皮干燥并粉碎，W果皮 重量的4倍加水，在60~100°C提取3小時(shí)；提取2~5次，合并濾液，減壓蒸發(fā)濃縮成含無患 子皂巧的無患子提取液。運(yùn)種方法工藝簡(jiǎn)單，成本低，同時(shí)也適合大規(guī)模生產(chǎn)，是具有廣泛 實(shí)用性的獲得無患子皂巧的方法。
[0037]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有W下有益效果： 本發(fā)明開發(fā)的環(huán)境友好型微生物藥劑，既增加了防控效果，又避免大量使用劇毒農(nóng)藥 對(duì)環(huán)境造成的危害，對(duì)保護(hù)我國農(nóng)業(yè)資源、森林資源和生態(tài)環(huán)境，W及挽回經(jīng)濟(jì)損失方面具 有重大現(xiàn)實(shí)意義。
【附圖說明】
[0038] 圖1為僅添加無患子提取液的線蟲培養(yǎng)情況。
[0039] 圖2為僅添加抗生素溶桿菌液的線蟲培養(yǎng)情況。
[0040] 圖3為同時(shí)添加無患子提取液和抗生素溶桿菌液的線蟲培養(yǎng)情況。
[0041] 圖4為陰性對(duì)照組的線蟲培養(yǎng)情況。
【具體實(shí)施方式】
[0042] 下面結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，W助于理解本發(fā)明的內(nèi)容。
[0043] 實(shí)施例1防治線蟲的藥劑配制 菌液配制：在50L水中，加入幾下質(zhì)50g，抗生素溶桿菌保存液50g，用功率為800W的加 熱棒保持30°C恒溫加熱，用功率為100W的氧氣累持續(xù)通入空氣，培養(yǎng)3天，加入配套維生素 液50g，白糖300g，復(fù)合肥500g，繼續(xù)用功率為800W的加熱棒保持30°C恒溫加熱，用功率為 100W的氧氣累持續(xù)通入空氣，培養(yǎng)3天，得到菌液。
[0044] 所使用的抗生素溶桿菌菌株為抗生素溶桿菌菌株服124,購買于美國典型微生物 菌種保藏中屯、（