利用甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌nkg-1實(shí)施的植物抑菌方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及一種利用甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1實(shí)施的植物抑菌方法，具體涉及 一種利用甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌(Bacillus methylotrophicus strain NKG-1)實(shí)施的植物 抑菌方法，能夠有效抑制病原菌的侵染。
【背景技術(shù)】
[0002] 植物病害會給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，目前通常會對植物各個生長階段施 加農(nóng)藥防治病蟲害，其中施加的主要是化學(xué)農(nóng)藥，具有施肥方便、見效快等特點(diǎn)。但是長期 大量施用化學(xué)農(nóng)藥導(dǎo)致農(nóng)藥殘留及環(huán)境污染，最終危害人類健康并破壞生態(tài)平衡，同時(shí)也 使病原菌對各種化學(xué)殺菌劑產(chǎn)生了嚴(yán)重的抗藥性。利用活體微生物進(jìn)行生物防治因其對環(huán) 境、生態(tài)及人類健康安全、無毒等優(yōu)點(diǎn)得到了世界各國的廣泛重視并發(fā)揮著越來越重要的 作用。
[0003] 芽孢桿菌是一種廣泛分布于各種不同生活環(huán)境中的腐生細(xì)菌，是一群好氧兼厭氧 的產(chǎn)芽孢革蘭氏陽性桿菌的總稱。芽孢桿菌屬的細(xì)菌具有生長速度快、營養(yǎng)需求簡單、有較 強(qiáng)的耐熱性及抗逆性;利于生防菌劑的生產(chǎn)和劑型加工，也利于其在環(huán)境中的存活、定殖與 繁殖。此外，還具有在植物表面易于存活與繁殖、對人畜無害、不污染環(huán)境、制劑穩(wěn)定、施用 方便等優(yōu)勢而備受矚目。不僅符合人們對綠色食品的需求，而且為農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供 了保障。芽孢桿菌作為一種理想的生防微生物，逐漸成為近年來研究的熱點(diǎn)并越來越引起 人們重視。目前，用于防治植物病害的芽孢桿菌主要有枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis)、側(cè)抱芽抱桿菌(Bacillus laterosporus)、錯樣芽抱桿菌(Bacillus cereus)、 地衣芽抱桿菌（Bacillus licheniformis)、蘇云金芽抱桿菌（Bacillus thuringiensis)、 多粘類芽抱桿菌(Bacillus polymyxa)、短小芽抱桿菌(Bacillus pumilus)等。
[0004] 由于芽孢桿菌既具有廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景，開發(fā)新篩選的未定種的芽孢桿菌及對 新菌株的拮抗功能和抑菌作用進(jìn)行鑒定是具有非常重要的意義的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的需求，本發(fā)明的目的在于提供一種利用甲基營養(yǎng)型芽孢桿 菌(Bacillus methylotrophicus strain NKG-1)實(shí)施的植物抑菌方法，能夠抑制多種病原 真菌和細(xì)菌的侵染，具有很好的防治效果，因此具有良好的應(yīng)用前景。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
[0007] 本發(fā)明所利用的甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌（Bacillus methylotrophicus strain NKG-1)，所述甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生 物中心，保藏號碼是CGMCC12055,保藏日期是2016年1月15日。
[0008] 利用甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌(Bacillus methylotrophicus strain NKG-1)實(shí)施的 植物抑菌方法，使用所述甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1的菌液制備成生物殺菌劑，使用制得的 甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1生物殺菌劑在植物生長期進(jìn)行施藥處理，抑制病原菌的侵染。
[0009] 進(jìn)一步，所述病原菌引起的植物病害為番茄灰霉病、蘋果輪紋病、蘋果腐爛病、葡 萄黑腐病、稻瘟病、辣椒炭疽病、黃瓜炭疽病、桃根霉軟腐病、小麥赤霉病、小麥紋枯病、棉花 枯萎病、番茄葉霉病、蘆筍莖腐病、玉米小斑病、煙草赤星病、棉苗疫病、花生青枯病或棉花 角斑病。
[0010] 進(jìn)一步，所述病原菌為灰葡萄孢菌、葡萄座腔菌、黑腐皮殼菌、葡萄球座菌、稻巨座 殼菌、辣椒炭疽菌、萌蘆科刺盤孢菌、匍枝根霉菌、禾谷鐮孢菌、禾谷絲核菌、尖鐮孢菌、褐孢 霉菌、天門冬擬莖點(diǎn)霉菌、玉蜀黍平臍蠕孢菌、鏈格孢菌、卵菌門疫霉菌、青枯假單胞桿菌或 地毯草單胞菌錦葵變種。
[0011] 進(jìn)一步，所述植物為葡萄，所述病原菌為葡萄球座菌，在葡萄樹新芽長出6-10英 寸、開花前3-5d、開花后、開花后10-14d施藥1次，之后每隔15d施藥1次，共計(jì)9-10次。
[0012] 進(jìn)一步，所述植物為蘆筍，所述病原菌為天門冬擬莖點(diǎn)霉菌，在蘆筍抽芽前期、蘆 筍抽生期、正常生長期內(nèi)間隔5-10d施藥1次，共計(jì)施藥8次;對初發(fā)少量輕病株，采用幼莖涂 藥漿的方法。
[0013] 進(jìn)一步，所述甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1生物殺菌劑是將菌液稀釋制得的液劑，或 將菌液制備成可濕性粉劑再稀釋制得的液劑，或?qū)⒕褐苽涑傻乃帩{。
[0014] 進(jìn)一步，所述甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1的菌液稀釋倍數(shù)為400、500、600或800倍， 稀釋倍數(shù)為稀釋劑與甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1菌液的體積比；
[0015] 所述甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1的可濕性粉劑稀釋倍數(shù)為400、500、600或800倍， 稀釋倍數(shù)為稀釋劑與甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1可濕性粉劑的質(zhì)量比；
[0016] 所述藥漿為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1的菌液100-200倍液混合面粉制得，稀釋倍 數(shù)為稀釋劑與甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1菌液的體積比，所述面粉與菌液100-200倍液的混 合比例為質(zhì)量比1:3-4。
[0017] 進(jìn)一步，所述甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1的菌液濃度為1 X (106-109)cfu/mL。
[0018] 進(jìn)一步，所述甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1的菌液濃度為IX 107cfu/mL。
[0019] 本發(fā)明利用甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌（Bacillus methylotrophicus strain NKG-1) 實(shí)施的植物抑菌方法具有以下優(yōu)點(diǎn)：
[0020] 利用甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1的菌液制得的生物殺菌劑對灰葡萄孢菌、葡萄座 腔菌、黑腐皮殼菌、葡萄球座菌、稻巨座殼菌、辣椒炭疽菌、萌蘆科刺盤孢菌、匍枝根霉菌、禾 谷鐮孢菌、禾谷絲核菌、尖鐮孢菌、褐孢霉菌、天門冬擬莖點(diǎn)霉菌、玉蜀黍平臍蠕孢菌、鏈格 孢菌、卵菌門疫霉菌、青枯假單胞桿菌、地毯草單胞菌錦葵變種等都有明顯的抑制作用，能 夠有效治療這些病原菌引起的相應(yīng)病害。
[0021 ]本發(fā)明屬于生物防治，對環(huán)境無污染，沒有農(nóng)藥殘留，不會破壞生態(tài)平衡。
【附圖說明】
[0022]圖1為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1的電子顯微鏡掃描圖片（ΙΟμπι級別）；
[0023]圖2為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1的電子顯微鏡掃描圖片(2μπι級別）；
[0024]圖3為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1的電子顯微鏡掃描圖片（Ιμπι級別）；
[0025]圖4為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對禾谷絲核菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0026]圖5為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對辣椒炭疽菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0027] 圖6為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對黑腐皮殼菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0028] 圖7為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對尖鐮孢菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0029] 圖8為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對稻巨座殼菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0030] 圖9為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對禾谷鐮孢菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0031] 圖10為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對葡萄球座菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0032] 圖11為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對萌蘆科刺盤孢菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0033]圖12為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對卵菌門疫霉菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0034] 圖13為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對葡萄座腔菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0035] 圖14為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對鏈格孢菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0036] 圖15為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對灰葡萄孢菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
[0037]圖16為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1對玉蜀黍平臍蠕孢菌的抑菌實(shí)驗(yàn)效果照片；
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