一種富鈣蟬花的培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種富鈣蟬花的培養(yǎng)方法，該方法包括如下步驟：步驟1，蟬花菌種在液體培養(yǎng)基中進行擴大培養(yǎng)；步驟2，將步驟1擴增后的菌種接種到固體培養(yǎng)基中進行固體培養(yǎng)；步驟3，對孢梗束進行采收；其特征在于，在步驟1液體培養(yǎng)基和/或步驟2固體培養(yǎng)基中加入鈣鹽；所述鈣鹽為檸檬酸鈣、檸檬酸-蘋果酸鈣、醋酸鈣、葡萄糖酸鈣、乳酸鈣中的任意一種或幾種。
【專利說明】
一種富鈣蟬花的培養(yǎng)方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及一種蟬花的培養(yǎng)方法，具體涉及一種富鈣蟬花的培養(yǎng)方法。
【背景技術】
[0002] 蝴花（Isaria cicadae Miquel)屬于真菌界（FUNGI)的子囊菌門（Ascomycot)、 盤菌亞門（Pezizomycotina)、奠殼菌綱（Sordariomycetes)、肉座菌目（Hypocreales)、蟲 草科（Cordycipitaceae)、棒束孢屬（Isaria)，是我國名貴的中藥材，是寄生在蝴（俗稱"知 了"）上的一種蟲草菌。其藥用已有1000多年歷史，是我國傳統的名貴藥材之一，具有多方 面的藥用價值。主要成分有腺苷、蟲草多糖、蟲草酸（甘露醇）、蟲草素、尿嘧啶、留醇、生物 堿、維生素、無機鹽、礦物質元素等。蟬花具有獨特而廣泛的功效，如改善腎功能，抗腫瘤，調 節(jié)免疫系統，滋補強壯，提高細胞能力、抗疲勞，降血壓、血糖，解熱、鎮(zhèn)痛、改善睡眠，改善脂 質代謝，促進造血，抗真菌，抗衰老等。
[0003] 鈣是人體必需的基本元素，鈣在人體內主要以骨骼、牙齒的形式存在，人體中99% 的鈣質存在骨骼牙齒中，支持人體的運動和咀嚼能力。另外1%存在于血液和組織器官中， 稱為血鈣。缺鈣易導致少年兒童厭食、偏食，不易入睡、易驚醒、易感冒，頭發(fā)稀疏，智力發(fā)育 遲緩，學步晚、出牙晚或出牙不整齊，陣發(fā)性腹痛腹瀉，X或〇型腿，雞胸；缺鈣還導致青少年 精力不集中、易疲勞、腰酸背痛、免疫力低、蛀牙或牙齒發(fā)育不良；孕婦及哺乳期婦女抽筋乏 力、關節(jié)痛、頭暈、貧血及產前高血壓綜合癥、水腫及乳汁分泌不足；缺鈣導致老年人老年性 皮膚病癢，腳后跟疼，腰椎頸椎疼痛，牙齒松動、脫落，明顯駝背，身高降低，食欲減退，消化 道潰瘍，多夢、失眠、煩躁、易怒等。根據2002年"中國居民營養(yǎng)與健康"調查報告顯示，中 國人鈣缺乏狀況仍然很嚴重，居民鈣的日攝入量為391毫克，僅相當于推薦攝入量的41 %。 因此通過食物補鈣是很必要的。
[0004] 現有技術培養(yǎng)富鈣微生物多以鈣的無機酸鹽為鈣原添加在培養(yǎng)基中，如《3種食 用菌菌絲體富鈣的研究》（卜慶梅等，食品科學，2009年）、《茯苓菌絲體富集鈣的研究》（王 偉霞等，食用菌，2007年）、《靈芝深層發(fā)酵生物富集鈣的工藝及其檢測》（苗敬芝，徐州工程 學院學報，2005年10月）分別公開了以CaCl 2、Ca (NO3) 2、CaC03、CaO為鈣源對微生物進行 富鈣培養(yǎng)?，F有技術未公開在蟬花培養(yǎng)基中加入鈣鹽培養(yǎng)富鈣蟬花的技術。

【發(fā)明內容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種富鈣蟬花的培養(yǎng)方法。
[0006] 本發(fā)明的另一個目的在于提供一種用于培養(yǎng)蟬花的培養(yǎng)基。
[0007] 本發(fā)明的目的是通過如下方案實現的：
[0008] -種富鈣蟬花的培養(yǎng)方法，該方法包括如下步驟：
[0009] 步驟1，蟬花菌種在液體培養(yǎng)基中進行擴大培養(yǎng)；
[0010] 步驟2,將步驟1擴增后的菌種接種到固體培養(yǎng)基中進行固體培養(yǎng)；
[0011] 步驟3,對抱梗束進彳丁米收；
[0012] 其特征在于，在步驟1液體培養(yǎng)基和/或步驟2固體培養(yǎng)基中加入鈣鹽。
[0013] 進一步，所述鈣鹽為鈣的有機酸鹽；更進一步，所述鈣鹽為檸檬酸鈣、檸檬酸-蘋 果酸鈣、醋酸鈣、葡萄糖酸鈣、乳酸鈣中的任意一種或幾種；更進一步，所述鈣鹽為檸檬酸鈣 或檸檬酸-蘋果酸鈣；更進一步，所述檸檬酸鈣為難溶晶型檸檬酸鈣、三水檸檬酸鈣或高溶 晶型檸檬酸鈣中的任意一種或幾種；
[0014] 進一步，鈣鹽的加入方式為在固體培養(yǎng)基中加入鈣鹽或在固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng) 基中均加入鈣鹽；
[0015] 進一步，所述步驟1和/或2加入鈣鹽后進行超聲處理；更進一步，超聲處理時間 為 10-30min。
[0016] 進一步，步驟2固體培養(yǎng)過程中，在菌絲體生長階段采用遮光培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度 22-24Γ ;從孢梗束始發(fā)至采收階段采用光照培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為20-22Γ ;培養(yǎng)過程中相對濕 度為60-70% ;更進一步，孢梗束始發(fā)時保證光照強度為100-200LX。
[0017] 本發(fā)明步驟1所述液體培養(yǎng)過程以菌種擴增為目的，可采用常規(guī)的菌種擴培方 法，包括斜面培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵罐培養(yǎng)中的任意一種或幾種方法的組合；所 用培養(yǎng)基為本領域常規(guī)的液體培養(yǎng)基，如PSA培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基、PDY培養(yǎng)基、PSB培養(yǎng)基、 酵母浸出粉-復合氨基酸-蔗糖培養(yǎng)基，酵母浸出粉-白砂糖-大豆水解蛋白培養(yǎng)基，麩皮 煮汁-白砂糖培養(yǎng)基等；進一步優(yōu)選為PSB培養(yǎng)基。
[0018] 本發(fā)明步驟2中所述固體培養(yǎng)基為本領域常規(guī)固體培養(yǎng)基，如谷物培養(yǎng)基，可選 自小麥、玉米、大米、小米、黃豆粉、蕎麥、大麥、燕麥、糙米、粳米中的任意一種或幾種；農作 物秸桿培養(yǎng)基，如麥桿、玉米桿、棉桿、豆桿、芝麻桿中的任意一種或幾種；農作物皮殼培養(yǎng) 基，如麩皮、大豆皮、棉籽殼等；經濟林木樹枝培養(yǎng)基等；其中優(yōu)選谷物培養(yǎng)基。
[0019] 一種用于培養(yǎng)蟬花的培養(yǎng)基，其特征在于在培養(yǎng)基中加入鈣鹽。
[0020] 進一步，所述鈣鹽為鈣的有機酸鹽；更進一步，所述鈣鹽為檸檬酸鈣、檸檬酸-蘋 果酸鈣、醋酸鈣、葡萄糖酸鈣、乳酸鈣中的任意一種或幾種；更進一步，所述鈣鹽為檸檬酸鈣 或檸檬酸-蘋果酸鈣；更進一步，所述檸檬酸鈣為難溶晶型檸檬酸鈣、三水檸檬酸鈣或高溶 晶型檸檬酸鈣中的任意一種或幾種。
[0021] 進一步，培養(yǎng)基中加入鈣鹽后進行超聲處理；更進一步，超聲處理時間為 10-30min〇
[0022] 本發(fā)明中所用蟲單花（Isaria cicadae Miquel)是廣布種，廣泛分布在我國秦 嶺-淮河以南的18個省、市、區(qū)。在我國長江以南的亞熱帶和熱帶地區(qū)，且多在低洼地帶 及滇藏高原的金沙江、怒江、瀾滄江和雅魯藏布江等河谷地帶。只要在其生長季節(jié)，每年的 6-8月，按照一般中藥材的采集方法都可采到，是現有技術中已知菌種，并可以從商業(yè)途徑 購買獲得。本發(fā)明優(yōu)選CN102851353A公開的蝴擬青霉菌株[Paecilomyces cicadae(Miq.) Samson]，已于2009年11月18日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（簡 稱CGMCC)注冊保藏，保藏號為CGMCC No. 3453。
[0023] 本發(fā)明研究表明，在固體培養(yǎng)基和/或液體培養(yǎng)基中加入有機鈣鹽不僅能夠促進 蟬花的生長，而且能夠明顯提高其孢梗束的鈣含量。
[0024] 實驗例1有機鈣對蟬花生長的影響
[0025] 1、對蟬花干重的影響
[0026] 有機鈣：梓檬酸鈣（難溶晶型）和檸檬酸-蘋果酸鈣
[0027] 實驗方法：按實施例1方法對蟬花菌種進行培養(yǎng)，斜面和液體培養(yǎng)基為PSB培養(yǎng) 基，固體培養(yǎng)基為小麥培養(yǎng)基，并按表1分別加入不同量的檸檬酸鈣（難溶晶型）和檸檬 酸-果酸鈣，對照組固體培養(yǎng)基中不加鈣。對照組設置6組重復，各實驗組設置8組重復。 培養(yǎng)結束后，分別測定孢梗束和菌絲體總干重，結果見表1。
[0028] 表1有機鈣對蟬花干重的影響
[0030] 上述實驗結果表明，在培養(yǎng)基中加入有機鈣能明顯提高蟬花的干重。
[0031] 2、對蟬花出草率的影響
[0032] 有機鈣：三水檸檬酸鈣和檸檬酸鈣（高溶晶型）
[0033] 實驗方法：按實施例1方法對蟬花菌種進行培養(yǎng)，斜面和液體培養(yǎng)基為PSB培養(yǎng) 基，固體培養(yǎng)基為小麥培養(yǎng)基，并按表2分別加入不同量的三水檸檬酸鈣和高溶晶型檸檬 酸鈣，對照組固體培養(yǎng)基中不加鈣。對照組設置6組重復，各實驗組設置8組重復。培養(yǎng)結 束后，分別出草率，結果見表2。
[0034] 表2有機鈣對蟬花生長的影響
[0036] 上述實驗結果表明，在培養(yǎng)基中加入有機鈣能明顯促進蟬花的出草率。
[0037] 綜上，本實驗結果表明，在培養(yǎng)基中加入有機鈣對蟬花的生長具有明顯的促進作 用。
[0038] 實驗例2有機鈣對蟬花含鈣量的影響
[0039] 有機鈣：三水檸檬酸鈣和檸檬酸鈣（高溶晶型）
[0040] 實驗方法：按實施例1方法對蟬花菌種進行培養(yǎng)，斜面和液體培養(yǎng)基為PSB培養(yǎng) 基，固體培養(yǎng)基為小麥培養(yǎng)基，并按表3加入不同量的有機鈣，對照組固體培養(yǎng)基中不加 鈣。對照組設置6組重復，各實驗組設置8組重復。培養(yǎng)結束后，分別測定孢梗束的含鈣量， 結果見表3。
[0041] 含鈣量的測定：參見國家標準GB/T 5009. 92-2003食品中鈣的測定，采用原子吸 收分光光度法。
[0042] 表3三水檸檬酸鈣和高溶晶型檸檬酸鈣對蟬花含鈣量的影響
[0044] 實驗結果表明，在蟬花人工培養(yǎng)中，加入三水檸檬酸鈣和高溶晶型檸檬酸鈣，均 可不同程度提高孢梗束中的鈣的含量，從而提高了原產品品質。特別是在培養(yǎng)基中添加 1. 25%高溶晶型檸檬酸鈣，可使孢梗束中的含鈣量增加5. 4倍。
[0045] 實驗例3有機鈣加入方式對蟬花含鈣量的影響
[0046] 1、以高溶晶型檸檬酸鈣為鈣鹽，考察其在培養(yǎng)基中不同的加入方式對蟬花含鈣量 的影響。培養(yǎng)方法同實施例2。
[0047] 方式一：在固體培養(yǎng)基中加入高溶晶型梓檬酸f丐，液體培養(yǎng)基中不加入f丐鹽；
[0048] 方式二：在液體培養(yǎng)基中加入高溶晶型檸檬酸鈣，固體培養(yǎng)基中不加入鈣鹽；
[0049] 方式三：在液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基中均加入高溶晶型檸檬酸鈣；
[0050] 對照組：在液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基中均不加入高溶晶型檸檬酸鈣。
[0051] 實驗結果見表4。
[0052] 表4有機鈣加入方式對蟬花含鈣量的影響
[0053]
[0054] 上述實驗結果表明，三種加入方式，即分別在固體培養(yǎng)基或液體培養(yǎng)基中加入鈣 鹽以及同時在液體和固體培養(yǎng)基中加入鈣鹽，均能夠使孢梗束中的鈣含量顯著增加；而三 種方式相比，方式一和方式三效果更佳。
[0055] 2、以高溶晶型檸檬酸鈣作為鈣鹽，選擇在液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基中同時加入鈣 鹽的處理方式，考察在固體培養(yǎng)基中加入鈣鹽后進行超聲處理對蟬花含鈣量的影響。培養(yǎng) 方法同實施例1。
[0056] 方式一：固體培養(yǎng)基中加入鈣鹽后直接對蟬花菌種進行培養(yǎng)
[0057] 方式二：固體培養(yǎng)基中加入鈣鹽后超聲處理15min再對蟬花菌種進行培養(yǎng)
[0058] 實驗結果見表5。
[0059] 表5超聲處理對蟬花中鈣含量的影響
[0061] 上述實驗結果顯示，在同樣的培養(yǎng)基條件下，經過超聲處理后，能顯著提高孢梗束 中的鈣含量，其含鈣量是未經超聲處理的3倍左右。
【具體實施方式】：
[0062] 實施例1蟬花菌種培養(yǎng)方法
[0063] 斜面培養(yǎng)：將蟬花菌種（實施例10)接種于斜面試管中，再將接種菌種的斜面試管 放入22°C培養(yǎng)箱，培養(yǎng)時間為7天，待菌絲長滿試管；
[0064] 液體培養(yǎng)：在500ml三角瓶中裝入200ml液體培養(yǎng)基，在0· IlMpa壓力下高壓滅菌 30分鐘，待冷卻至室溫，將1支斜面試管的菌種接種到500ml三角瓶培養(yǎng)基上，并置于恒溫 振蕩培養(yǎng)箱，溫度22±1°C，150轉/分鐘條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為3天；
[0065] 固體培養(yǎng)：按25%的接種量接種種子培養(yǎng)得到的菌種，接種后的容器放入培養(yǎng)室 培養(yǎng)，培養(yǎng)室溫度為22-24°C，空氣相對濕度65 % -70 % ;首先要將培養(yǎng)室遮光，使發(fā)菌室基 本黑暗。待菌絲體長滿料面時（室內培養(yǎng)3~5天），轉入光照培養(yǎng)。接種后定期檢查，及 時剔除生長勢差、感染雜菌的培養(yǎng)容器。此后為誘導形成孢梗束時期，保持培養(yǎng)室溫度為 20-22°C，相對空氣濕度65%~70%，保證有散射光（IOOLx~200Lx)誘導孢梗束形成。培 養(yǎng)室要適時通風換氣，保持發(fā)菌室空氣新鮮；
[0066] 采收及處理：采收孢梗束和菌絲體；
[0067] 液體培養(yǎng)基：PSB培養(yǎng)基（馬鈴薯200克，葡萄糖20克，水1000ml);加入1 %的高 溶晶型檸檬酸鈣；
[0068] 固體培養(yǎng)基：小麥培養(yǎng)基，高溶劑型梓檬酸鈣加入量6. 25%，適量水混勾后超聲 處理15min。
[0069] 實施例2
[0070] 斜面培養(yǎng)：將蝴花菌種（蝴擬青霉菌株[Paecilomyces cicadae (Miq. ) Samson]保 藏號為CGMCC No. 3453)接種于斜面試管中，再將接種菌種的斜面試管放入22°C培養(yǎng)箱，培 養(yǎng)時間為7天，待菌絲長滿試管；
[0071] 液體培養(yǎng)：在500ml三角瓶中裝入200ml液體培養(yǎng)基，在0· IlMpa壓力下高壓滅菌 30分鐘，待冷卻至室溫，將1支斜面試管的菌種接種到500ml三角瓶培養(yǎng)基上，并置于恒溫 振蕩培養(yǎng)箱，溫度22±1°C，150轉/分鐘條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為3天；
[0072] 固體培養(yǎng)：按25%的接種量接種種子培養(yǎng)得到的菌種，接種后的容器放入培養(yǎng)室 培養(yǎng)，培養(yǎng)室溫度為22-24°C，空氣相對濕度65 % -70 % ;首先要將培養(yǎng)室遮光，使發(fā)菌室基 本黑暗。待菌絲體長滿料面時（室內培養(yǎng)3~5天），轉入光照培養(yǎng)。接種后定期檢查，及 時剔除生長勢差、感染雜菌的培養(yǎng)容器。此后為誘導形成孢梗束時期，保持培養(yǎng)室溫度為 20-22°C，相對空氣濕度65%~70%，保證有散射光（IOOLx~200Lx)誘導孢梗束形成。培 養(yǎng)室要適時通風換氣，保持發(fā)菌室空氣新鮮；
[0073] 采收及處理：采收孢梗束和菌絲體；
[0074] 液體培養(yǎng)基：PSB培養(yǎng)基（馬鈴薯200克，葡萄糖20克，水1000ml);加入1 %的高 溶晶型檸檬酸鈣；
[0075] 固體培養(yǎng)基：小麥培養(yǎng)基，高溶劑型梓檬酸鈣加入量6. 25%，適量水混勾后超聲 處理15min。
[0076] 實施例3
[0077] 通實施例1方法，固體培養(yǎng)基：玉米培養(yǎng)基，朽1檬酸-蘋果酸|丐加入量0. 25%，適 量水混勻。方法同實施例1，結果如下：
[0078] 表6檸檬酸-蘋果酸鈣在玉米培養(yǎng)基上的富鈣效果
[0080] 實施例4
[0081] 固體培養(yǎng)基：大麥培養(yǎng)基，三水檸檬酸鈣加入量0. 5%，適量水混勻。方法同實施 例1，結果如下：
[0082] 表7三水檸檬酸鈣在大麥培養(yǎng)基上的富鈣效果
[0084] 實施例5
[0085] 固體培養(yǎng)基：黃豆粉培養(yǎng)基，高溶晶型檸檬酸鈣加入量1 %，適量水混勻。方法同 實施例一，結果如下：
[0086] 表8高溶晶型檸檬酸鈣在黃豆粉培養(yǎng)基上的富鈣效果
[0088] 實施例6
[0089] 固體培養(yǎng)基：大米培養(yǎng)基，梓檬酸鈣加入量3%，適量水混勾。方法同實施例一，結 果如下：
[0090] 表9檸檬酸鈣在大米培養(yǎng)基上的富鈣效果
[0091]
[0092] 實施例7
[0093] 固體培養(yǎng)基：蕎麥培養(yǎng)基，尚溶晶型梓檬酸鈣加入量2. 5%，適量水混勾。方法同 實施例一，結果如下：
[0094] 表10高溶晶型檸檬酸鈣在蕎麥培養(yǎng)基上的富鈣效果
[0096] 實施例8
[0097] 固體培養(yǎng)基：粳米培養(yǎng)基，三水檸檬酸鈣加入量1. 25%，適量水混勻。方法同實施 例一，結果如下：
[0098] 表11三水檸檬酸鈣在粳米培養(yǎng)基上的富鈣效果
[0100] 實施例9
[0101] 固體培養(yǎng)基：小麥培養(yǎng)基，高溶晶型梓檬酸鈣加入量6. 25%，適量水混勾。方法同 實施例一，結果如下：
[0102] 表12高溶晶型檸檬酸鈣在小麥培養(yǎng)基上的富鈣效果
[0104] 實施例10
[0105] 在我國長江以南的亞熱帶和熱帶地區(qū)低洼地帶，7月，按照一般中藥材的方法采 集。在超鏡工作臺上，在無菌條件下，將采來的新鮮蟲草用無菌水沖洗干凈，置于已滅菌的 直徑為15cm的培養(yǎng)皿中，蟲草的內菌核部分（蟲體）用打濕的脫脂棉包裹，以保濕。蟲草 的子實體下方放置一滅菌的載玻片，蟲草菌核部分用小玻片墊起，以使可孕部分不要直接 接觸載玻片，其距離約〇.5cm左右。然后將培養(yǎng)皿放置于20°C ±0.5°C的光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)， 待蟬花孢子彈射于載玻片上時，在孢子周圍滴加剛溶化的PDA培養(yǎng)基少許，移出玻片，置于 另一滅菌的培養(yǎng)皿中保濕培養(yǎng)，待長出菌絲后用接種針挑取少量菌絲轉另一平皿（SDAY培 養(yǎng)基）培養(yǎng)（同上），直至長出單一的純化的菌落為止。并經形態(tài)學或分子生物學方法驗 證，該菌株為蝴花蟲草（Isaria cicadae Miquel)無性型。
【主權項】
1. 一種富鈣蟬花的培養(yǎng)方法，該方法包括如下步驟： 步驟1，蟬花菌種在液體培養(yǎng)基中進行擴大培養(yǎng)； 步驟2,將步驟1擴增后的菌種接種到固體培養(yǎng)基中進行固體培養(yǎng)； 步驟3,對孢梗束進行采收； 其特征在于，在步驟1液體培養(yǎng)基和/或步驟2固體培養(yǎng)基中加入鈣鹽。2. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述鈣鹽為鈣的有機酸鹽。3. 如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述鈣鹽為檸檬酸鈣、檸檬酸-蘋果酸鈣、醋 酸鈣、葡萄糖酸鈣、乳酸鈣中的任意一種或幾種。4. 如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述檸檬酸鈣為難溶晶型檸檬酸鈣、三水檸 檬酸鈣或高溶晶型檸檬酸鈣中的任意一種或幾種。5. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟1和/或2加入鈣鹽后進行超聲處 理。6. 如權利要求1-5任一所述的方法，其特征在于，步驟2所述固體培養(yǎng)基為谷物培養(yǎng) 基，所述谷物培養(yǎng)基選自小麥、玉米、大米、小米、黃豆粉、蕎麥、大麥、燕麥、糙米、粳米中的 任意一種或幾種。7. -種用于培養(yǎng)蟬花的培養(yǎng)基，其特征在于，在培養(yǎng)基中加入鈣鹽； 所述固體培養(yǎng)基為谷物培養(yǎng)基，所述谷物培養(yǎng)基選自小麥、玉米、大米、小米、黃豆粉、 蕎麥、大麥、燕麥、糙米、粳米中的任意一種或幾種。8. 如權利要求7所述的培養(yǎng)基，其特征在于，所述鈣鹽為鈣的有機酸鹽。9. 如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述鈣鹽為檸檬酸鈣、檸檬酸-蘋果酸鈣、醋 酸鈣、葡萄糖酸鈣、乳酸鈣中的任意一種或幾種。10. 如權利要求7所述的方法，其特征在于，培養(yǎng)基加入鈣鹽后進行超聲處理。
【文檔編號】A01G1/04GK105981584SQ201510081836
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年2月15日
【發(fā)明人】紀偉, 董瓊, 陸小芳, 陳奇超, 彭國杰, 胡建峰, 張忠亮, 徐煜, 施偉勤, 陸文遙, 孫長勝
【申請人】浙江泛亞生物醫(yī)藥股份有限公司