一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及有機(jī)合成領(lǐng)域,公開了一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,包括以下步驟:制備培養(yǎng)基、制備懸浮液、培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)增殖數(shù)代。本發(fā)明培養(yǎng)可在任何時(shí)間進(jìn)行繁殖,不受季節(jié)、環(huán)境等外部因素影響,且成本較低,占用空間資源較少;為泥炭蘚原絲體的生長(zhǎng)提供必要的生長(zhǎng)元素和環(huán)境。同時(shí),能夠快速繁殖泥炭蘚原絲體,解決了生長(zhǎng)速度慢、受環(huán)境影響大的技術(shù)問(wèn)題。本發(fā)明選出的pH值與泥炭蘚自然生境偏酸土壤吻合。本發(fā)明加入的蔗糖提供了碳源,極大提高了泥炭蘚原絲體產(chǎn)量。本發(fā)明選用6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)作為細(xì)胞分裂素,對(duì)泥炭蘚原絲體的作用大于其他生長(zhǎng)素。本發(fā)明篩選出激素6-BA的最佳濃度為0.05-0.2μmol/L,大于或小于此濃度反而抑制生長(zhǎng)。
【專利說(shuō)明】
一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及園藝栽培技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]泥炭富含有機(jī)質(zhì)和腐殖酸,可直接作為栽培介質(zhì),也可用作改良土壤的肥料,近年來(lái),園藝產(chǎn)業(yè)的高速發(fā)展帶動(dòng)了泥炭產(chǎn)業(yè)的形成。然而,泥炭的市場(chǎng)需求量不斷增多,泥炭濕地被過(guò)度開采,面積也不斷縮小,我國(guó)已經(jīng)從泥炭出口國(guó)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)檫M(jìn)口國(guó)。泥炭濕地的破壞不僅對(duì)植被分布、生態(tài)多樣性造成嚴(yán)重威脅,還會(huì)導(dǎo)致自然碳匯功能降低、人類居住環(huán)境惡化等一系列后果。為實(shí)現(xiàn)泥炭資源的可持續(xù)利用,同時(shí)不影響農(nóng)業(yè)和園藝產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,找到泥炭的替代品是亟待解決的問(wèn)題。
[0003]泥炭蘚(Sphagnum, sp.)又稱水笞,是泥炭蘚屬植物的統(tǒng)稱,也是泥炭形成的主要來(lái)源。德國(guó)等歐美園藝發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)研究將泥炭蘚替代泥炭作為生長(zhǎng)基質(zhì),并成功應(yīng)用于杜鵑、歐石楠等植物的栽培。因此,泥炭蘚的開發(fā)與應(yīng)用能夠促進(jìn)園藝產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有中的缺點(diǎn),公開了一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法。
[0005]為了解決上述技術(shù)問(wèn)題,本發(fā)明通過(guò)下述技術(shù)方案得以解決。
[0006]一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,包括以下步驟,
A.每I升水中加入0.1-0.3g的硝酸銨、0.05-0.15g的氯化鈣、0.05-0.15g的磷酸二氫鉀、0.05-0.15g的硫酸鎂、0.02-0.035g的氯化鐵;將pH值調(diào)節(jié)到5_6,再添加5_10g的蔗糖和0.05-0.2 μ mo I的6-芐氨基腺嘌呤,得到培養(yǎng)基;高壓滅菌處理培養(yǎng)基;
B.粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾,將粉碎好的泥炭蘚原絲體移入無(wú)菌水中,制成懸浮液;
C.向步驟A制備的培養(yǎng)基中加入步驟B制備的懸浮液,其中每1ml培養(yǎng)基中加入0.5-1.5ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速130-150r/min,光照為2800_35001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h;該培養(yǎng)條件解決了泥炭蘚原絲體生長(zhǎng)速度慢、易受環(huán)境影響的技術(shù)問(wèn)題。
[0007]D.培養(yǎng)20天后,再次粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾后分裝至步驟A制備的培養(yǎng)基中,其中每1ml培養(yǎng)基中加入0.5-1.5ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速130_150r/min,光照為2800-35001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h ;培養(yǎng)20天后,原瓶中培養(yǎng)基養(yǎng)分耗盡,將增殖的原絲體再次粉碎。該培養(yǎng)條件解決了泥炭蘚原絲體生長(zhǎng)速度慢的技術(shù)問(wèn)題,達(dá)到快速增殖的目的。
[0008]E.重復(fù)步驟D,連續(xù)培養(yǎng)增殖數(shù)代。
[0009]本發(fā)明采用的培養(yǎng)基為Beneck培養(yǎng)基。培養(yǎng)基為泥炭蘚原絲體的生長(zhǎng)提供必要的生長(zhǎng)元素和環(huán)境,所以培養(yǎng)基的篩選在整個(gè)快速繁殖過(guò)程中占有重要地位。研究過(guò)程中,進(jìn)行了基本培養(yǎng)基的篩選,試驗(yàn)培養(yǎng)基分別為:Beneck、Knop、BCD、MS、l/2MS、水。通過(guò)不同培養(yǎng)基的培養(yǎng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),低鹽度的Beneck和Knop培養(yǎng)基較適合泥炭蘚的生長(zhǎng);而同樣是笞蘚常用培養(yǎng)基的BCD培養(yǎng)基則不適合泥炭蘚生長(zhǎng);高鹽度的不同濃度MS更不利于泥炭蘚的生長(zhǎng),甚至隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),原絲體會(huì)逐漸變黃。
[0010]研究過(guò)程中,進(jìn)行了 pH值的篩選,試驗(yàn)pH梯度分別為4、5、6、7、8。研究結(jié)果顯示,泥炭蘚原絲體也在pH較低的培養(yǎng)基上增殖較快,pH5.0-6.0是其最適宜的生長(zhǎng)酸堿度,隨著PH的升高,泥炭蘚原絲體生長(zhǎng)量減少,甚至停止生長(zhǎng)。這與泥炭蘚自然生境偏酸土壤吻入口 ο
[0011]加入的蔗糖提供了碳源,極大提高了泥炭蘚原絲體產(chǎn)量。研究過(guò)程中,進(jìn)行了碳源及其濃度的篩選,試驗(yàn)碳源分別為蔗糖和葡萄糖,濃度分別為5 g/L、10 g/L、20 g/L、40g/Lo研究結(jié)果顯示,碳源的添加極大提高了泥炭蘚原絲體產(chǎn)量:蔗糖和葡萄糖均對(duì)其有顯著效果,但對(duì)蔗糖的利用效率較高,低濃度的蔗糖(5-1Og/L )更有利于泥炭蘚的增殖,增殖效率比高濃度處理多2.7-4.3倍。
[0012]本發(fā)明選用6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)作為細(xì)胞分裂素,對(duì)泥炭蘚原絲體的作用大于其他生長(zhǎng)素,比如6-BA對(duì)泥炭蘚原絲體的作用大于生長(zhǎng)素吲哚丁酸(IBA),IBA對(duì)原絲體增殖無(wú)顯著作用。本發(fā)明篩選出激素6-BA的最佳濃度為0.05-0.2 ymol/L,大于或小于此濃度反而抑制生長(zhǎng)。研究過(guò)程中,進(jìn)行了激素及其濃度的篩選,試驗(yàn)激素分別為IBA和6-BA,濃度分別為0.1 μ mol/L, I μ mol/L, 10 μ mol/L0研究結(jié)果顯示,細(xì)胞分裂素6-BA對(duì)泥炭蘚原絲體的作用大于生長(zhǎng)素IBA。IBA對(duì)泥炭蘚原絲體增殖作用較小,高濃度(10 μ mol/L)還會(huì)抑制其生長(zhǎng)。低濃度(0.05-0.2 μ mol/L) 6-BA顯著提高泥炭蘚產(chǎn)量,隨著濃度升高促進(jìn)作用減弱。
[0013]作為優(yōu)選,步驟A中,每I升水中加入0.2g的硝酸銨、0.1g的氯化鈣、0.1g的磷酸二氫鉀、0.1g的硫酸鎂、0.028g的氯化鐵;將pH值調(diào)節(jié)到5-6,再添加1g的蔗糖和0.1ymol的6-芐氨基腺嘌呤,得到培養(yǎng)基。本發(fā)明篩選出的最佳培養(yǎng)基的配方??每I升水中加入0.2g的硝酸銨、0.1g的氯化鈣、0.1g的磷酸二氫鉀、0.1g的硫酸鎂、0.028g的氯化鐵。培養(yǎng)基為泥炭蘚原絲體的生長(zhǎng)提供必要的生長(zhǎng)元素和環(huán)境,該配比的培養(yǎng)基能夠快速繁殖泥炭蘚原絲體。
[0014]作為優(yōu)選,步驟A中,硫酸鎂為MgSO4.7H20o
[0015]作為優(yōu)選,步驟A中,氯化鐵為FeCl3.6 H2O0
[0016]作為優(yōu)選,步驟A中,將培養(yǎng)基裝入500ml三角瓶中,每瓶裝約200ml,高壓滅菌待用。
[0017]作為優(yōu)選,步驟B中,泥炭蘚原絲體在超凈工作臺(tái)粉碎lmin,粉碎速率為18000r/min, 200目細(xì)胞篩過(guò)濾;將粉碎好的泥炭蘚原絲體移入無(wú)菌水中,制成懸浮液。
[0018]作為優(yōu)選,步驟C中,每1ml培養(yǎng)基中加入Iml懸浮液。
[0019]作為優(yōu)選,步驟C中,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為30001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 ho
[0020]作為優(yōu)選,步驟D中,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為30001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 ho
[0021]作為優(yōu)選,步驟D中,每1ml培養(yǎng)基中加入Iml懸浮液。
[0022]與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果為:
本發(fā)明培養(yǎng)可在任何時(shí)間進(jìn)行繁殖,不受季節(jié)、環(huán)境等外部因素影響,且成本較低,占用空間資源較少;為泥炭蘚原絲體的生長(zhǎng)提供必要的生長(zhǎng)元素和環(huán)境。同時(shí),能夠快速繁殖泥炭蘚原絲體,解決了生長(zhǎng)速度慢、受環(huán)境影響大的技術(shù)問(wèn)題。
[0023]本發(fā)明選出的最佳pH值為5-6,與泥炭蘚自然生境偏酸土壤吻合。本發(fā)明加入的蔗糖提供了碳源,極大提高了泥炭蘚原絲體產(chǎn)量。本發(fā)明選出的最佳碳源為蔗糖,利用效率最高,且泥炭蘚原絲體的產(chǎn)量達(dá)到最高。本發(fā)明選用6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)作為細(xì)胞分裂素,對(duì)泥炭蘚原絲體的作用大于其他生長(zhǎng)素,比如6-BA對(duì)泥炭蘚原絲體的作用大于生長(zhǎng)素吲哚丁酸(IBA),IBA對(duì)原絲體增殖無(wú)顯著作用。本發(fā)明篩選出激素6-BA的最佳濃度為
0.05-0.2 μ mol/L,大于或小于此濃度反而抑制生長(zhǎng)。
【具體實(shí)施方式】
[0024]實(shí)施例1
一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,包括以下步驟,
A.每I升水中加入0.2g的硝酸銨、0.1g的氯化鈣、0.1g的磷酸二氫鉀、0.1g的硫酸鎂、0.028g的氯化鐵;將pH值調(diào)節(jié)到5,再添加1g的蔗糖和0.1 μ mol的6-芐氨基腺嘌呤,得到培養(yǎng)基;高壓滅菌處理培養(yǎng)基;
B.粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾,將粉碎好的泥炭蘚原絲體移入無(wú)菌水中,制成懸浮液;
C.向步驟A制備的培養(yǎng)基中加入步驟B制備的懸浮液,其中每1ml培養(yǎng)基中加入Iml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為30001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h ;
D.培養(yǎng)20天后,再次粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾后分裝至步驟A制備的培養(yǎng)基中,其中每1ml培養(yǎng)基中加入Iml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為30001ux,光周期為晝/ 夜 10 h/ 14 h ;
E.重復(fù)步驟D,連續(xù)培養(yǎng)增殖數(shù)代。
[0025]實(shí)施例2
一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,包括以下步驟,
A.每I升水中加入0.1g的硝酸銨、0.05g的氯化鈣、0.05g的磷酸二氫鉀、0.05g的硫酸鎂、0.02g的氯化鐵;將pH值調(diào)節(jié)到5,再添加5g的蔗糖和0.05 μ mol的6-芐氨基腺嘌呤,得到培養(yǎng)基;高壓滅菌處理培養(yǎng)基;
B.泥炭蘚原絲體在超凈工作臺(tái)粉碎lmin,粉碎速率為18000r/min,200目細(xì)胞篩過(guò)濾;將粉碎好的泥炭蘚原絲體移入無(wú)菌水中,制成懸浮液;
C.向步驟A制備的培養(yǎng)基中加入步驟B制備的懸浮液,其中每1ml培養(yǎng)基中加入
0.5ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速130r/min,光照為28001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h ;
D.培養(yǎng)20天后,再次粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾后分裝至步驟A制備的培養(yǎng)基中,其中每1ml培養(yǎng)基中加入0.5ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速130r/min,光照為28001ux,光周期為晝 / 夜 10 h/ 14 h ;
E.重復(fù)步驟D,連續(xù)培養(yǎng)增殖數(shù)代。
[0026]實(shí)施例3
一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,包括以下步驟,
A.每I升水中加入0.3g的硝酸銨、0.15g的氯化鈣、0.15g的磷酸二氫鉀、0.15g的硫酸鎂、0.035g的氯化鐵;將pH值調(diào)節(jié)到6,再添加1g的蔗糖和0.2 μ mol的6-芐氨基腺嘌呤,得到培養(yǎng)基;將培養(yǎng)基裝入500ml三角瓶中,每瓶裝約200ml,高壓滅菌待用。
[0027]B.粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾,將粉碎好的泥炭蘚原絲體移入無(wú)菌水中,制成懸浮液;
C.向步驟A制備的培養(yǎng)基中加入步驟B制備的懸浮液,其中每1ml培養(yǎng)基中加入
1.5ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速150r/min,光照為35001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h ;
D.培養(yǎng)20天后,再次粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾后分裝至步驟A制備的培養(yǎng)基中,其中每1ml培養(yǎng)基中加入1.5ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速150r/min,光照為35001ux,光周期為晝 / 夜 10 h/ 14 h ;
E.重復(fù)步驟D,連續(xù)培養(yǎng)增殖數(shù)代。
[0028]實(shí)施例4
一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,包括以下步驟,
A.每I升水中加入0.15g的硝酸銨、0.08g的氯化鈣、0.08g的磷酸二氫鉀、0.08g的MgSO4.7Η20、0.025g 的 FeCl3.6 H2O ;將 pH 值調(diào)節(jié)到 5.5,再添加 6g 的蔗糖和 0.08 μ mol的6-芐氨基腺嘌呤,得到培養(yǎng)基;高壓滅菌處理培養(yǎng)基;
B.粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾,將粉碎好的泥炭蘚原絲體移入無(wú)菌水中,制成懸浮液;
C.向步驟A制備的培養(yǎng)基中加入步驟B制備的懸浮液,其中每1ml培養(yǎng)基中加入
0.8ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速135r/min,光照為29001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h ;
D.培養(yǎng)20天后,再次粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾后分裝至步驟A制備的培養(yǎng)基中,其中每1ml培養(yǎng)基中加入0.8ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速135r/min,光照為29001ux,光周期為晝 / 夜 10 h/ 14 h ;
E.重復(fù)步驟D,連續(xù)培養(yǎng)增殖數(shù)代。
[0029]實(shí)施例5
一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,包括以下步驟,
A.每I升水中加入0.28g的硝酸銨、0.12g的氯化鈣、0.12g的磷酸二氫鉀、0.14g的硫酸鎂、0.032g的氯化鐵;將pH值調(diào)節(jié)到6,再添加9g的蔗糖和0.18 μ mol的6-芐氨基腺嘌呤,得到培養(yǎng)基;高壓滅菌處理培養(yǎng)基;
B.粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾,將粉碎好的泥炭蘚原絲體移入無(wú)菌水中,制成懸浮液;
C.向步驟A制備的培養(yǎng)基中加入步驟B制備的懸浮液,其中每1ml培養(yǎng)基中加入
1.2ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為34001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h ;
D.培養(yǎng)20天后,再次粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾后分裝至步驟A制備的培養(yǎng)基中,其中每1ml培養(yǎng)基中加入1.2ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為34001ux,光周期為晝 / 夜 10 h/ 14 h ;
E.重復(fù)步驟D,連續(xù)培養(yǎng)增殖數(shù)代。
[0030]實(shí)施例6
一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,包括以下步驟,
A.每I升水中加入0.2g的硝酸銨、0.1g的氯化鈣、0.1g的磷酸二氫鉀、0.1g的硫酸鎂、0.028g的氯化鐵;將pH值調(diào)節(jié)到5,再添加1g的蔗糖和0.1 μ mol的6-芐氨基腺嘌呤,得到培養(yǎng)基;高壓滅菌處理培養(yǎng)基;
B.泥炭蘚原絲體在超凈工作臺(tái)粉碎lmin,粉碎速率為18000r/min,200目細(xì)胞篩過(guò)濾;將粉碎好的泥炭蘚原絲體移入無(wú)菌水中,制成懸浮液; C.向步驟A制備的培養(yǎng)基中加入步驟B制備的懸浮液,其中每1ml培養(yǎng)基中加入Iml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為30001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h ;
D.培養(yǎng)20天后,再次粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾后分裝至步驟A制備的培養(yǎng)基中,其中每1ml培養(yǎng)基中加入Iml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為30001ux,光周期為晝/ 夜 10 h/ 14 h ;
E.重復(fù)步驟D,連續(xù)培養(yǎng)增殖數(shù)代。
[0031]實(shí)施例7
一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,包括以下步驟,
A.每I升水中加入0.2g的硝酸銨、0.1g的氯化鈣、0.1g的磷酸二氫鉀、0.1g的MgSO4.7Η20、0.028g的FeCl3.6 H2O ;將pH值調(diào)節(jié)到5,再添加1g的蔗糖和0.1 μ mo I的
6-芐氨基腺嘌呤,得到培養(yǎng)基;高壓滅菌處理培養(yǎng)基;
B.粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾,將粉碎好的泥炭蘚原絲體移入無(wú)菌水中,制成懸浮液;
C.向步驟A制備的培養(yǎng)基中加入步驟B制備的懸浮液,其中每1ml培養(yǎng)基中加入Iml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為30001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h ;
D.培養(yǎng)20天后,再次粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾后分裝至步驟A制備的培養(yǎng)基中,其中每1ml培養(yǎng)基中加入Iml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為30001ux,光周期為晝/ 夜 10 h/ 14 h ;
E.重復(fù)步驟D,連續(xù)培養(yǎng)增殖數(shù)代。
[0032]總之,以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例,凡依本發(fā)明申請(qǐng)專利范圍所作的均等變化與修飾,皆應(yīng)屬本發(fā)明專利的涵蓋范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,其特征在于:包括以下步驟, A.每I升水中加入0.1-0.3g的硝酸銨、0.05-0.15g的氯化鈣、0.05-0.15g的磷酸二氫鉀、0.05-0.15g的硫酸鎂、0.02-0.035g的氯化鐵;將pH值調(diào)節(jié)到5_6,再添加5_10g的蔗糖和0.05-0.2 μ mo I的6-芐氨基腺嘌呤,得到培養(yǎng)基;高壓滅菌處理培養(yǎng)基; B.粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾,將粉碎好的泥炭蘚原絲體移入無(wú)菌水中,制成懸浮液; C.向步驟A制備的培養(yǎng)基中加入步驟B制備的懸浮液,其中每1ml培養(yǎng)基中加入0.5-1.5ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速130-150r/min,光照為2800_35001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h ; D.培養(yǎng)20天后,再次粉碎泥炭蘚原絲體,過(guò)濾后分裝至步驟A制備的培養(yǎng)基中,其中每1ml培養(yǎng)基中加入0.5-1.5ml懸浮液,放入搖床,轉(zhuǎn)速130_150r/min,光照為2800-35001ux,光周期為晝 / 夜 10 h/ 14 h ; E.重復(fù)步驟D,連續(xù)培養(yǎng)增殖數(shù)代。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,其特征在于:步驟A中,每I升水中加入0.2g的硝酸銨、0.1g的氯化鈣、0.1g的磷酸二氫鉀、0.1g的硫酸鎂、0.028g的氯化鐵;將PH值調(diào)節(jié)到5-6,再添加1g的蔗糖和0.1ymol的6-芐氨基腺嘌呤,得到培養(yǎng)基。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,其特征在于:步驟A中,硫酸鎂為 MgSO4.7H20o4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,其特征在于:步驟A中,氯化鐵為 FeCl3.6 H2O05.根據(jù)權(quán)利要求1所述的泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,其特征在于:步驟A中,將培養(yǎng)基裝入500ml三角瓶中,每瓶裝約200ml,高壓滅菌待用。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,其特征在于:步驟B中,泥炭蘚原絲體在超凈工作臺(tái)粉碎lmin,粉碎速率為18000r/min,200目細(xì)胞篩過(guò)濾;將粉碎好的泥炭蘚原絲體移入無(wú)菌水中,制成懸浮液。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,其特征在于:步驟C中,每1ml培養(yǎng)基中加入Iml懸浮液。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,其特征在于:步驟C中,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為30001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,其特征在于:步驟D中,放入搖床,轉(zhuǎn)速140r/min,光照為30001ux,光周期為晝/夜10 h/ 14 h。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的泥炭蘚原絲體快速繁殖的方法,其特征在于:步驟D中,每1ml培養(yǎng)基中加入Iml懸浮液。
【文檔編號(hào)】A01G31/00GK105981636SQ201510070439
【公開日】2016年10月5日
【申請(qǐng)日】2015年2月11日
【發(fā)明人】尹麗娟, 王鋮, 沈烈英
【申請(qǐng)人】上海市園林科學(xué)研究所