一種黃檀組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種黃檀組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括黃檀外植體的無菌處理、腋芽的誘導(dǎo)、叢生芽的增殖、生根培養(yǎng)、煉苗移栽等步驟，本發(fā)明方法通過對(duì)黃檀的離體培養(yǎng)，建立起黃檀的快速繁殖體系，為黃檀的規(guī)?；缣峁┮粭l有效途徑，使得這一優(yōu)良的藥用植物更快的應(yīng)用到生產(chǎn)中。
【專利說明】
一種黃檀組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及黃檀組織培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物栽培技術(shù)領(lǐng)域?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]黃檀，feMergia At/jOeafla /feflce，豆科，別名:不知春、望水檀、檀樹等，喬木，高 10-20米，樹皮暗灰色，呈薄片狀剝落，產(chǎn)山東、江蘇、安徽、浙江、江西、福建、湖北、湖南、廣東、廣西、四川、貴州、云南，海拔600-1400米，平原及山區(qū)均可生長，喜光，耐干旱瘠薄，不擇土壤，但以在深厚濕潤排水良好的土壤生長較好，忌鹽堿地;深根性，萌芽力強(qiáng)，生于山地林中或灌叢中，山溝溪旁及有小樹林的坡地常見，其根皮，夏、秋季采挖，味辛、苦，行平，小毒， 具有清熱解毒、止血消腫之功效，主治瘡疥療毒、毒蛇咬傷、細(xì)菌性痢疾、跌打損傷等，民間用于治療急慢性肝炎、肝硬化腹水。目前主要采用種子育苗栽培，傳統(tǒng)繁殖方法繁殖率低， 成本高，組織培養(yǎng)方法可以縮短培養(yǎng)周期，且不受季節(jié)性影響，目前尚未見報(bào)道。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種黃檀的快速繁殖方法，本發(fā)明方法通過對(duì)黃檀的離體培養(yǎng)，建立起黃檀的快速繁殖體系，為黃檀的規(guī)?；缣峁┮粭l有效途徑，使得這一優(yōu)良的藥用植物更快的應(yīng)用到生產(chǎn)中。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實(shí)現(xiàn)的:取黃檀的帶芽莖段，保留一腋芽，流水沖洗15min，超凈工作臺(tái)上70%的酒精處理15s， 0.2%的氯化汞處理5min，3%過氧化氫處理6min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的黃檀帶芽莖段接入MS+TDZ0 ? 2mg/L+NAA0 ? 5mg/L+ZT0 ? lmg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L， 卡拉膠6.5g/L，pH5.8，光照1200lx，溫度27°C，濕度80%，誘導(dǎo)出來的腋芽接入培養(yǎng)基1/2MS+ IBA0 ? 2mg/L+TDZ0 ? 2mg/L+NAA0 ? 5mg/L+IAA0 ? lmg/L 進(jìn)行增殖培養(yǎng)，附加蔗糖 30g/L，卡拉膠 6 ? 5g/L，pH5 ? 8，光照3300lx，溫度27°C，增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基MS+NAA0 ? 01-0 ? 03mg/L+環(huán)烷酸鈉l_2g/L中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖45g/L，卡拉膠5g/L，pH5.95,光照150001X，溫度28 °C，黃檀試管苗煉苗移栽前兩周，在MS培養(yǎng)基中加入2mg/L多效唑壯苗培養(yǎng)，黃檀試管苗煉苗移栽之前把培養(yǎng)瓶的封口膜打開，在培養(yǎng)條件下煉苗兩天，取出生根苗，小心洗凈根上沾有的培養(yǎng)基，用35mg/L的IBA和稀釋600倍的甲基托布津浸泡30min，然后將待移栽的生根苗的根部浸泡在清水中1.5h讓其吸收水分，移栽時(shí)先在花盆底部鋪一層基質(zhì)，然后將生根苗置于基質(zhì)上，把根展開放好，盡量減少根的損傷，每5天澆水一次，澆水不宜直接從基質(zhì)上方澆水，而是將容器放入水中，使水從容器底部的孔隙中反滲進(jìn)入基質(zhì)，保證基質(zhì)無積水。
[0005]采用本發(fā)明制備的黃檀成活率高，培養(yǎng)過程簡(jiǎn)單易控，無污染，利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式?！揪唧w實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例1
取黃檀的帶芽莖段，保留一腋芽，流水沖洗15min，超凈工作臺(tái)上70%的酒精處理15s，0.2%的氯化汞處理5min，3%過氧化氫處理6min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的黃檀帶芽莖段接入MS+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+ZT0.lmg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，卡拉膠6.5g/L，pH5.8，光照1200Ix，溫度27°C，濕度80%，誘導(dǎo)出來的腋芽接入培養(yǎng)基I/2MS+IBA0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+IAA0.lmg/1 進(jìn)行增殖培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，卡拉膠6.5g/L，pH5.8，光照33001x，溫度27°C，增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基MS+NAA0.01mg/L+環(huán)烷酸鈉lg/L中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖45g/L，卡拉膠5g/L，pH5.95，光照150001X，溫度28°C，黃檀試管苗煉苗移栽前兩周，在MS培養(yǎng)基中加入2mg/L多效唑壯苗培養(yǎng)，黃檀試管苗煉苗移栽之前把培養(yǎng)瓶的封口膜打開，在培養(yǎng)條件下煉苗兩天，取出生根苗，小心洗凈根上沾有的培養(yǎng)基，用35mg/L的IBA和稀釋600倍的甲基托布津浸泡30min，然后將待移栽的生根苗的根部浸泡在清水中I.5h讓其吸收水分，移栽時(shí)先在花盆底部鋪一層基質(zhì)，然后將生根苗置于基質(zhì)上，把根展開放好，盡量減少根的損傷，每5天澆水一次，澆水不宜直接從基質(zhì)上方澆水，而是將容器放入水中，使水從容器底部的孔隙中反滲進(jìn)入基質(zhì)，保證基質(zhì)無積水，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)，成活率89%。
[0008]實(shí)施例2
取黃檀的帶芽莖段，保留一腋芽，流水沖洗15min，超凈工作臺(tái)上70%的酒精處理15s，
0.2%的氯化汞處理5min，3%過氧化氫處理6min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的黃檀帶芽莖段接入MS+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+ZT0.lmg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，卡拉膠6.5g/L，pH5.8，光照1200Ix，溫度27°C，濕度80%，誘導(dǎo)出來的腋芽接入培養(yǎng)基I/2MS+IBA0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+IAA0.lmg/1 進(jìn)行增殖培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，卡拉膠6.5g/L，pH5.8，光照33001x，溫度27°C，增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基MS+NAA0.03mg/L+環(huán)烷酸鈉2g/L中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖45g/L，卡拉膠5g/L，pH5.95，光照150001X，溫度28°C，黃檀試管苗煉苗移栽前兩周，在MS培養(yǎng)基中加入2mg/L多效唑壯苗培養(yǎng)，黃檀試管苗煉苗移栽之前把培養(yǎng)瓶的封口膜打開，在培養(yǎng)條件下煉苗兩天，取出生根苗，小心洗凈根上沾有的培養(yǎng)基，用35mg/L的IBA和稀釋600倍的甲基托布津浸泡30min，然后將待移栽的生根苗的根部浸泡在清水中I.5h讓其吸收水分，移栽時(shí)先在花盆底部鋪一層基質(zhì)，然后將生根苗置于基質(zhì)上，把根展開放好，盡量減少根的損傷，每5天澆水一次，澆水不宜直接從基質(zhì)上方澆水，而是將容器放入水中，使水從容器底部的孔隙中反滲進(jìn)入基質(zhì)，保證基質(zhì)無積水，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)，成活率90%。
[0009]實(shí)施例3
取黃檀的帶芽莖段，保留一腋芽，流水沖洗15min，超凈工作臺(tái)上70%的酒精處理15s，
0.2%的氯化汞處理5min，3%過氧化氫處理6min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的黃檀帶芽莖段接入MS+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+ZT0.lmg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，卡拉膠6.5g/L，pH5.8，光照1200Ix，溫度27°C，濕度80%，誘導(dǎo)出來的腋芽接入培養(yǎng)基I/2MS+IBA0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+IAA0.lmg/1 進(jìn)行增殖培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，卡拉膠6.5g/L，pH5.8，光照33001x，溫度27°C，增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基MS+NAA0.02mg/L+環(huán)烷酸鈉2g/L中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖45g/L，卡拉膠5g/L，pH5.95，光照150001x，溫度28°C，黃檀試管苗煉苗移栽前兩周，在MS培養(yǎng)基中加入2mg/L多效唑壯苗培養(yǎng)，黃檀試管苗煉苗移栽之前把培養(yǎng)瓶的封口膜打開，在培養(yǎng)條件下煉苗兩天，取出生根苗，小心洗凈根上沾有的培養(yǎng)基，用35mg/L的IBA和稀釋600倍的甲基托布津浸泡30min，然后將待移栽的生根苗的根部浸泡在清水中1.5h讓其吸收水分，移栽時(shí)先在花盆底部鋪一層基質(zhì)，然后將生根苗置于基質(zhì)上，把根展開放好，盡量減少根的損傷，每5天澆水一次，澆水不宜直接從基質(zhì)上方澆水， 而是將容器放入水中，使水從容器底部的孔隙中反滲進(jìn)入基質(zhì)，保證基質(zhì)無積水，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)，成活率92%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種黃檀組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括黃檀外植體的無菌處理、腋芽的誘導(dǎo)、叢生芽的增殖、生根培養(yǎng)、煉苗移栽，其主要步驟如下: (1)取黃檀的帶芽莖段，對(duì)其進(jìn)行消毒處理； (2)取步驟(I)消毒處理過的黃檀帶芽莖段接入MS+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+ZT0.1mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，卡拉膠6.5g/L，pH5.8，光照1200Ix，溫度27°C，濕度80% ； (3)取步驟(2)誘導(dǎo)出來的腋芽接入培養(yǎng)基1/2MS+IBA0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+IAA0.lmg/1進(jìn)行增殖培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，卡拉膠6.5g/L，pH5.8，光照33001x，溫度27°C； (4)取步驟(3)增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基MS+NAA0.01-0.03mg/L+環(huán)烷酸鈉l-2g/L中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖45g/L，卡拉膠5g/L，pH5.95，光照15000Ix，溫度28°C ; (5)取步驟(4)生根后的試管苗放入加2mg/L多效唑的MS培養(yǎng)基中進(jìn)行壯苗培養(yǎng) (6)取步驟(5)壯苗后的黃檀試管苗進(jìn)行煉苗移栽。2.按照權(quán)利要求1所述的一種黃檀組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述黃檀無菌外植體獲得為:取黃檀的帶芽莖段，保留一腋芽，流水沖洗15min，超凈工作臺(tái)上70%的酒精處理15s，0.2%的氯化萊處理5min，3%過氧化氫處理6min，無菌水沖洗5次。3.按照權(quán)利要求1所述的一種黃檀組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(4)中黃檀煉苗移栽之前把培養(yǎng)瓶的封口膜打開，在培養(yǎng)條件下煉苗兩天，取出生根苗，小心洗凈根上沾有的培養(yǎng)基，用35mg/L的IBA和稀釋600倍的甲基托布津浸泡30min，然后將待移栽的生根苗的根部浸泡在清水中I.5h讓其吸收水分。4.按照權(quán)利要求1所述的一種黃檀組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(6)中黃檀試管苗移栽時(shí)先在花盆底部鋪一層基質(zhì)，然后將生根苗置于基質(zhì)上，把根展開放好，盡量減少根的損傷，每5天澆水一次，澆水不宜直接從基質(zhì)上方澆水，而是將容器放入水中，使水從容器底部的孔隙中反滲進(jìn)入基質(zhì)，保證基質(zhì)無積水。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK106069761SQ201610455913
【公開日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月22日
【發(fā)明人】楊成東
【申請(qǐng)人】南京澤朗生物科技有限公司