專利名稱:一種核酸分子雜交方法及所用的裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種核酸分子雜交方法及所用的裝置。
核酸包括核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)。核酸的基本單位是含堿基的核苷酸。DNA分子內(nèi)的堿基有四種,分別以英文字母A、C、G、T代表,在RNA中U取代T,其余仍為A、C、G。在核酸中堿基A與T或U配對(duì)(互補(bǔ)),G與C配對(duì)?;瘜W(xué)合成的堿基及它們的衍生物也具有與自然堿基相同或相近的特性。當(dāng)二個(gè)核酸分子鏈具有連續(xù)的互補(bǔ)堿基排列時(shí),在適當(dāng)?shù)臈l件下,它們會(huì)通過(guò)多個(gè)堿基配對(duì)形成穩(wěn)定的雙鏈分子,這一過(guò)程叫做分子雜交。在高溫或低鹽度或極高和極低的酸堿度(PH)條件下,雙鏈核酸也會(huì)分裂成單鏈結(jié)構(gòu),這一過(guò)程叫變性。當(dāng)一已知的單鏈核酸分子與一生物樣品中的核酸分子雜交成雙鏈分子時(shí),可推斷這一生物樣品具有與已知分子相互補(bǔ)的核酸分子或片段,并可由已知分子的堿基序列推斷被雜交分子的結(jié)構(gòu)或堿基序列。利用這一分子雜交原理可以進(jìn)行遺傳檢測(cè)。在診斷檢測(cè)中,液相中的核酸與固相的核酸進(jìn)行常規(guī)分子雜交時(shí),液相溫度要求均恒,液相的分子靠擴(kuò)散或隨液體流動(dòng)以達(dá)到與固相分子接觸的目的。在這種隨機(jī)和均恒的溫度下雜交時(shí),雜交的反應(yīng)速度慢,此外液相中的互補(bǔ)核酸分子形成雜交分子后難以分離,因而會(huì)減少固相雜交分子的形成。這種現(xiàn)象的發(fā)生會(huì)減少遺傳診斷的靈敏度。
本發(fā)明的目的是提供一種核酸分子雜交的方法,它能克服現(xiàn)有技術(shù)上的上述不足。
一種核酸分子雜交的方法,包括液相中的核酸分子與固定于固體表面的核酸分子接觸,其特征是在分子雜交過(guò)程中雜交容器的上方和下方保持不同的溫度,以熱交換導(dǎo)致液相樣品形成對(duì)流的方式進(jìn)行分子雜交。
實(shí)施核酸分子雜交方法的裝置,包括一基因芯片,內(nèi)側(cè)面上固定核酸樣品,其特征是該基因芯片的核酸樣品處于雜交容器中,該容器的上方和下方各有一自動(dòng)溫度控制器。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是在雜交過(guò)程中,使液相核酸樣品在雜交容器中形成對(duì)流,可加快分子雜交速度;另一優(yōu)點(diǎn)是使液相雜交分子減少,從而增加固相雜交分子的形成。
下面通過(guò)實(shí)施例和
本發(fā)明。
附圖為本發(fā)明的裝置結(jié)構(gòu)示意圖。
本發(fā)明的雜交裝置有基因芯片2,其內(nèi)側(cè)面上固定著核酸分子,基因芯片2處于雜交容器4中,雜交容器4中裝有液相核酸樣品。本雜交裝置的上部和下部各有自動(dòng)溫度控制器1、3。在進(jìn)行分子雜交前,將液相樣品注入容器4中,讓自動(dòng)溫度控制器3加熱至95℃,5分鐘以后自動(dòng)溫度控制器1的溫度為45℃(±1℃),同時(shí)自動(dòng)溫度控制器3的溫度降為55℃(±1℃)。在雜交過(guò)程中自動(dòng)溫度控制器1、3各自保持著不同的溫度。30分鐘后,核酸分子雜交完成。液相樣品被換成緩沖液,用以清洗基因芯片2,然后對(duì)基因芯片2進(jìn)行信號(hào)檢測(cè),并分析雜交結(jié)果。
本發(fā)明所用的自動(dòng)溫度控制器1、3均為1厘米厚10平方厘米大小,有加溫,降溫和感溫功能,使用時(shí)與電腦連接以達(dá)到自動(dòng)控制溫度的作用。
做為本實(shí)施例的變更,自動(dòng)溫度控制器1、3也可以設(shè)置在雜交容器4的左右或前后。
權(quán)利要求
1.一種核酸分子雜交的方法,包括液相中的核酸分子與固定于固體表面的核酸分子接觸,其特征是在分子雜交過(guò)程中雜交容器的上方和下方保持不同的溫度,以熱交換導(dǎo)致液相樣品形成對(duì)流的方式進(jìn)行分子雜交。
2.如權(quán)利要求1所述的實(shí)施核酸分子雜交方法的裝置,包括一基因芯片(2),內(nèi)側(cè)面上固定核酸樣品,其特征是該基因芯片(2)的核酸樣品處于雜交容器(4)中,該容器(4)的上方和下方各有一自動(dòng)溫度控制器(1)、(3)。
全文摘要
一種核酸分子雜交的方法,包括液相中的核酸分子與固定于固體表面的核酸分子接觸,其特征是在分子雜交過(guò)程中雜交容器的上方和下方保持不同的溫度,以熱交換導(dǎo)致液相樣品形成對(duì)流的方式進(jìn)行分子雜交。所用的裝置有一基因芯片,內(nèi)側(cè)面上固定核酸樣品,該基因芯片的核酸樣品處于雜交容器中,該容器的上方和下方各有一自動(dòng)溫度控制器。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是可加快分子雜交速度;使液相雜交分子減少,從而增加固相雜交分子的形成。
文檔編號(hào)C12Q1/68GK1356392SQ0012937
公開(kāi)日2002年7月3日 申請(qǐng)日期2000年12月1日 優(yōu)先權(quán)日2000年12月1日
發(fā)明者吳昌, 吳明 申請(qǐng)人:吳昌, 吳明