專利名稱：活性微生物的偵測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用包封在多孔溶膠—凝膠的玻璃中的有機或無機物質(zhì)來快速偵測及計算低濃度活性微生物的方法及其混合物。
背景技術(shù)：
微生物偵測研究的主要目的在于發(fā)展便宜、快捷、可靠和靈敏的偵測器?，F(xiàn)時已有可偵測微生物的標(biāo)準(zhǔn)實驗室程序，大部份程序基于利用瓊脂媒體，在一段時間內(nèi)讓指定微生物在其中生長。正常培養(yǎng)期為24至48小時，微生物繁殖后便可進行識別和量化。
現(xiàn)有測試的主要弊端在于得到結(jié)果所需的時間。水源染菌令水源和系統(tǒng)關(guān)閉，因此需使用其它更昂貴的水源供應(yīng)，需要快速的微生物偵測以容許較短的關(guān)閉期。在醫(yī)學(xué)界，任何需要使用抗生素藥物的醫(yī)療情況都需要進行細(xì)菌識別和抗生素敏感測試，但測試結(jié)果需要72至96小時才能得到，縮短這段時間可達(dá)至更佳結(jié)果，并能令病人更早康復(fù)。在飲食業(yè)，原料和制成品都會進行常規(guī)染菌測試，測試所需的培養(yǎng)時間令實時處理過程無法進行，以致延遲貨品的生產(chǎn)和供應(yīng)，縮短測試所需時間可節(jié)省結(jié)構(gòu)和人手。
過去幾年發(fā)展出幾種能在1.5至11.0小時內(nèi)識別和計算細(xì)菌的方法。較為簡單的方法需要大量細(xì)菌(在一毫升樣本內(nèi)多于104)，而可以偵測小量細(xì)菌的方法則昂貴、又不能應(yīng)用于大型系統(tǒng)。
US 5,811,251公開了一種以電荷藕合組件(CCD)系統(tǒng)為基礎(chǔ)的活性微生物計算系統(tǒng)，但這個系統(tǒng)只能提供細(xì)菌的總數(shù)，而不能分辨不同的細(xì)菌種類。US5,972,641和US 5,518,894公開一種用統(tǒng)計方法來確定細(xì)菌數(shù)量的快速大腸桿菌測試系統(tǒng)，該等方法用于低數(shù)量細(xì)菌時需要多達(dá)11小時才能得到結(jié)果。其它專利公開用熒光和激光光源來偵測微生物的方法(US 5,891,394、US 5,858,697、US5,763,203、US 5,751,839和US 5,663,057)，該等方法的缺點是需用昂貴的激光光源，而且直接在不平滑的過濾器上偵測微生物在分析時引起問題。另外，這些系統(tǒng)不可輕易攜帶，價錢亦較昂貴。
免疫測定法亦用于偵測某類微生物(Lee et al.，App.Environ.Microbiol.，Vol.56，pp.1541-1546)。這些方法利用以熒光或放射性染料標(biāo)示的指定抗體來偵測微生物。不過，免疫測定法的限制在于其需要為每種欲偵測微生物生產(chǎn)抗體，以致需時甚久，而且價錢昂貴。
「溶膠—凝膠」指在室溫以金屬氧化物為基礎(chǔ)所生產(chǎn)的無機玻璃，其工序涉及一些陶瓷性物料，令溶膠(液態(tài))經(jīng)過水解、凝聚及聚合過程轉(zhuǎn)變?yōu)槟z。一般溶膠—凝膠的起始物料為有機改性硅鹽(ormosils)或金屬氧化物。近年溶膠—凝膠已應(yīng)用到有機硅烷中來創(chuàng)造「室溫玻璃」。溶膠—凝膠性物料以數(shù)十埃至數(shù)十納米的小孔所組成，并具有大的面積質(zhì)量比例，例如每克數(shù)百平方米。溶膠—凝膠物料即使在紫外線波長下都是透明的，并可簡易地造成不同形狀，如粉末、單塊、薄片、纖維等。
利用溶膠—凝膠物料在矩陣媒體中包封有機分子的方法曾在現(xiàn)有文獻中提及(Avnir et al.，Supramolecular architecture in two and three dimensions Bein T.(ed.)American Chemical Society Symposium Series XXX，1992)。應(yīng)用上述技術(shù)，有機分子在室溫下會被包封在溶膠—凝膠矩陣之中，并且不會損害較敏感的有機分子結(jié)構(gòu)。加上，被包封的分子保留了接近全部的原本物理和化學(xué)特征，而溶膠—凝膠的大量小孔系統(tǒng)亦令外界的反應(yīng)物可與之接觸。
US專利號6,022,748公開一種利用分析物選擇性粘結(jié)至某平面而產(chǎn)生的顏色變化以直接偵測分析物的方法。所述偵測方法在固定化生物聚合物料中進行，該物料以溶膠—凝膠方法包封在金屬氧化玻璃之中，這種方法的缺點在于只可偵測或計算大量細(xì)菌，因為只有大量細(xì)菌才能在溶膠—凝膠中引起可看見的顏色改變。再者，所述方法不能分辨活性微生物及非活性微生物，因為該方法只是基于微生物粘結(jié)在溶膠—凝膠表面的情況，與所述微生物為活性或非活性沒有關(guān)系。
Armon et al.(J.of Biotechnology 51，279-285)公開了一種偵測大量大腸桿菌(E.coli)的方法，該方法把細(xì)菌散布在涂上指定混合物的溶膠—凝膠上，所述混合物會被細(xì)菌吸收，令細(xì)菌發(fā)出特定波長的光。不過，這種方法不能提供一種適合計算指定樣本中細(xì)菌數(shù)量的方法，而且亦不能偵測低數(shù)量微生物。
現(xiàn)有技術(shù)未能提供一種既快速、又有足夠靈敏度在低微生物濃度的情況下可靠計算微生物數(shù)量的方法。
本發(fā)明的目的在于提供一種快速及靈敏的偵測活性微生物的方法。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種用于計算低濃度樣本中微生物數(shù)量的方法及其混合物。
本發(fā)明的其它目的及長處會在以下說明中顯示。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是在2小時內(nèi)以包封在多孔溶膠—凝膠的玻璃中的有機或無機物質(zhì)(以下簡稱為標(biāo)記)來偵測及計算濃度低于103ml-1的活性微生物。
本發(fā)明涉及利用包封在多孔溶膠—凝膠的玻璃中的有機或無機物質(zhì)(標(biāo)記)來偵測及計算活性微生物的方法及其混合物。微生物使所述標(biāo)記新陳代謝，從而發(fā)出可偵測到的輻射、電磁或熒光，因此，活性微生物可快速地在溶膠—凝膠玻璃上呈現(xiàn)。溶膠—凝膠玻璃的表面極度平滑和透明，能提供接近統(tǒng)一的焦點作高解像的顯微掃描。
根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施例，會進行以下步驟a)提供一種液態(tài)混合物，其包含一種或以上包封在液態(tài)溶膠—凝膠前體中的標(biāo)記；b)在透明薄片上，例如玻璃片上，加上一層薄而均勻、為所述液態(tài)溶膠—凝膠前體混合物的涂層；c)將被分析的液態(tài)樣本倒進過濾器以分出微生物，然后把所述過濾器緊貼涂上溶膠—凝膠的薄片；d)把上述過濾器和上述涂上溶膠—凝膠的薄片放置在適合助長微生物吸收標(biāo)記的溫度，如攝氏35至44度，一起培養(yǎng)一段時間，如0.5至6小時；e)以外界能源照射上述涂上溶膠—凝膠的薄片，以產(chǎn)生從微生物使標(biāo)記新陳代謝過程中發(fā)放可偵測的訊號；及f)取得上述從微生物發(fā)出可偵測訊號的圖象，并以電子計算機系統(tǒng)分析所述圖象，從而識別和計算所述微生物。
本發(fā)明亦關(guān)于一種含有機或無機物質(zhì)的液態(tài)溶膠—凝膠混合物(標(biāo)記)的制備方法。所述標(biāo)記會為要識別的微生物新陳代謝。
本發(fā)明可偵測的大腸桿菌為一大組別的細(xì)菌，包括大腸桿菌(E.coli)、腸肝菌屬(Enterobacter spp.)、克雷白氏桿菌屬(Klebsiella spp.)和檸檬酸細(xì)菌屬(Citrobacter spp.)。識別大腸桿菌，可利用呈熒光或顯色物質(zhì)，即3-羰基傘形酮β-D-半乳糖嘧喃糖(3-carboxyumbelliferylβ-D-galactopyranoside/CUG)或4-氯甲基-6，8-二氟傘形酮β-D-半乳糖嘧喃糖(4-chloromethyl-6，8-difluoroumbelliferylβ-D-galactopyranoside/CMDiFUG)，來偵測酵素，即β-半乳糖酵素(β-Galactosidase/E.C.3.2.1.23)的活動。
根據(jù)本發(fā)明，識別大腸桿菌(E.coli)，可利用下列呈熒光或顯色物質(zhì)4-甲基傘形酮β-D-半乳糖嘧喃糖(4-methylumbelliferylβ-D-galactopyranoside/MUG)、二β-D-半乳糖嘧喃糖熒光素(fluorescein diβ-D-galactopyranoside/FDG)、6，8-二氟-4-甲基傘形酮β-D-葡萄糖-酸鋰鹽(6，8-difluoro-4-methylumbelliferylβ-D-glucuronide，lithium salt/DiFMUGGIcU)、2-十二烷基resorufin(2-dodecylresorufin)、Elf-97、二β-葡萄糖-酸熒光素(fluorescein di-β-glucoronide/FDGIcU)、5-(五氟苯氨基)二β-D-葡萄糖-酸熒光素(5-(pentafluorobenzoylamino)fluorescein di-β-D-glucoronide/PFB-FDGIcU)和β-三氟甲基傘形酮β-D-葡萄糖-酸(β-trifluoromethylumbelliferylβ-D-glucoronide)，來偵測大腸桿菌指定酵素(E.coli-specific-enzyme)，即β-葡萄糖酸酵素(β-Glucuronidase/GUS/EC 3.2.1.31)的活動。
根據(jù)本發(fā)明另一項優(yōu)選實施例，把一種抗生素物料與溶膠—凝膠混合物結(jié)合，以識別細(xì)菌對抗生素的抵抗力。細(xì)菌在某特定抗生素存在的環(huán)境下仍能發(fā)出熒光，表示所述細(xì)菌可抵抗抗生素。當(dāng)某特定抗生素的存在令部份發(fā)出熒光的細(xì)菌數(shù)量減低，便表示細(xì)菌有部份抵抗力。下列抗生素會加入溶膠—凝膠混合物氯霉素、紅霉素、四環(huán)素、鏈霉素、多粘菌素、萘啶酸、新生霉素、三甲基芐二氨嘧啶、Rifanapicin和青霉素。
根據(jù)本發(fā)明，標(biāo)記可為以下列形式脂質(zhì)體、薄膜、多層物、辮子狀、片晶體、螺旋狀、管狀、及纖維狀、溶劑化桿、溶劑化卷、以及其組合。根據(jù)本發(fā)明，把丙酮酸鹽或硫酸鉀結(jié)合溶膠—凝膠，有可能偵測受損或受壓的微生物?，F(xiàn)有技術(shù)指出丙酮酸鹽或硫酸鉀可用作恢復(fù)或改善氯化受損大腸菌(＂enumeration anddifferentiation of chlorine-stressed total coliform bacteria＂Robert A Duncanson-Ph.D.dissertation-University of Rhode Island 1993)。
根據(jù)本發(fā)明，在溶膠—凝膠溶液加入濃度介乎每百萬10至100份的聚賴氨酸或相似物質(zhì)，有可能增進細(xì)菌吸收力。
以下優(yōu)選實施例更具體地說明本發(fā)明的上述及其它特征及其優(yōu)點，但本發(fā)明不受這些實施例所限制。


圖一顯示根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選實施例的識別和計算微生物系統(tǒng)；圖二為一幅在溶膠—凝膠表面的大腸桿菌(E.coli bacteria)放大四百倍的熒光照片；圖三為本發(fā)明優(yōu)選實施例的過程流程表。
具體實施例方式
根據(jù)一優(yōu)選實施例，計算細(xì)菌的系統(tǒng)包括圖一所示的下列部件配合電子計算機的標(biāo)準(zhǔn)影象擷取器、處理及控制軟件、以及馬達(dá)和光源控制儀器—全部以(1)標(biāo)示，配以影象播放速率為30fps及影幅大小為640×480的標(biāo)準(zhǔn)電荷藕合組件數(shù)組(CCDarray)照相機(2)，以及配以放大400倍及/或1000倍功能及自動對焦系統(tǒng)的外熒光或熒光顯微鏡(3)，光源(4)，光線分散器(5)，機動x-y桌(6)，以及放在桌上的過濾器(7)。
根據(jù)本發(fā)明的另一優(yōu)選實施例，標(biāo)準(zhǔn)電荷藕合組件(CCD)系統(tǒng)被電荷藕合組件連線方法(CCD Line Approach)取替，其包括一個電荷藕合組件連線(CCD line)相機，其線大小為512像素，線速率為70kHz，相等于每秒135格512×512像素、特制訊號同步化硬件、特制數(shù)碼或模擬訊號處理硬件。
為求清楚，并協(xié)助理解本發(fā)明，以下將采用下列簡稱CFU菌落形成單位MUG4-甲基傘形酮β-D-半乳糖嘧喃糖(4-methylumbelliferylβ-D-galactopyranoside)FDG二β-D-半乳糖嘧喃糖熒光素(fluorescein di-β-D-galactopyranoside)CUG3-羰基傘形酮β-D-半乳糖嘧喃糖(3-carboxyumbelliferylβ-D-galactopyranoside)例1預(yù)備涂上溶膠—凝膠玻璃薄片把標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡用的薄片在肥皂水中溫和地?fù)u晃三十分鐘，以作清洗。然后先以水喉水沖洗薄片，再以三重蒸餾水沖洗。把薄片放在培養(yǎng)器內(nèi)以攝氏36度隔夜風(fēng)干。把潔凈過的薄片存放在軟的紙中備用。
預(yù)備溶膠—凝膠薄片的標(biāo)準(zhǔn)起始溶液如下把0.9毫升純吡啶、0.2毫升CUG溶液(100mM)和0.1毫升水以一塊小磁鐵攪拌一分鐘。如果基質(zhì)未能完全溶解，便只使用混合物的上面部份。把0.8毫升上述溶液和0.4毫升甲基三甲氧基硅烷(methyltrimethoxysilane/MTMS，F(xiàn)luka)混和。再以磁鐵攪拌器把所述溶液攪拌2分鐘。要開始化學(xué)反應(yīng)，在所述溶液中加入30μl 0.1摩爾的鹽酸，再以磁鐵攪拌五分鐘。
利用精細(xì)吸移管把40μl的上述溶液涂在薄片上。溶液以旋轉(zhuǎn)涂復(fù)法均勻地涂在薄片上。然后把已涂溶液的玻璃薄片置在黑暗、干燥的室溫環(huán)境中風(fēng)干24小時。在初部風(fēng)干程序后，以錫紙包好有涂上溶膠—凝膠的薄片，并儲存于清涼的地方。
例二使用0.1毫升濃度為0.016mg/ml的4′-6-二氨基-2-苯基-吲哚(4′-6-diamino-2-phenylindole)溶液重復(fù)例一。所得結(jié)果與例一相若。
例三大腸桿菌(E.coli)識別及計算在攝氏36度的營養(yǎng)發(fā)酵液中，在24小時內(nèi)，大腸桿菌(E.coli)細(xì)菌生長。用滅菌蒸餾水準(zhǔn)備約每毫升108細(xì)菌濃度的種菌溶液。以下列預(yù)計細(xì)菌濃度，準(zhǔn)備一系列不同的溶液(每份溶液為350毫升)每100毫升109細(xì)菌，每100毫升108細(xì)菌，每100毫升107細(xì)菌，每100毫升106細(xì)菌，每100毫升105細(xì)菌。
所有細(xì)菌溶液在水樣下進行平行膜濾(MF)測試查證，在滅菌塑料瓶中以滅菌蒸餾水稀釋溶液，以準(zhǔn)確達(dá)到1∶108的稀釋度。
為了在某一樣本中計算細(xì)菌數(shù)目，水樣先以微孔過濾器(0.47μm，13mm)過濾。然后把微孔過濾器倒轉(zhuǎn)放在溶膠—凝膠表面。為了要令過濾器和溶膠—凝膠彼此完全接觸，過濾器表面會加上小量滅菌水(10μl)和壓力(達(dá)每平方厘米0.5公斤)。
然后，細(xì)菌和溶膠—凝膠會在攝氏36度的濕潤容器(由一個大皮氏培養(yǎng)皿和濕潤的Wattman墊組成，以防止過濾器干燥而與溶膠—凝膠分離)一起培養(yǎng)兩小時。之后，拿走微孔過濾器，薄片則在攝氏44.5度擺放10至15分鐘風(fēng)干。
為計算細(xì)菌，溶膠—凝膠薄片會在顯微鏡系統(tǒng)(配以外熒光照明系統(tǒng)和50瓦水銀燈的Zeiss Axiolab)下以LP420過濾器放大400倍。為淘汰可能造成錯誤陽性結(jié)果的自然熒光藻類，會使用指定光波長(例如LP420過濾器)。
熒光點的照片會在涂上溶膠—凝膠薄片的5個不同的隨機位置拍攝。圖二為溶膠—凝膠表面上的大腸桿菌(E.coli)細(xì)菌放大400倍的圖片。熒光點的數(shù)目會以圖像處理軟件(Image-Pro Plus，Media Cybernetics)計算。表一顯示分析得出的數(shù)目。
表一


由于已知顯微鏡的視象范圍，每塊薄片的熒光點數(shù)目能準(zhǔn)確估計原本溶液中的細(xì)菌最初數(shù)量。
例四以Image-Pro Plus計算熒光點數(shù)目的算法說明此例說明偵測及計算溶膠—凝膠圖像上的細(xì)菌的算法。本算法的目的在于偵測預(yù)期大小的明亮斑點采用低通行的過濾以減少高頻率噪音，利用圖像分割得出黑色背景上白色細(xì)菌斑點的二元圖像，此圖像分割以簡單的界限應(yīng)用程序，并利用固定的預(yù)早設(shè)定界限進行。
分析包括以下步驟A)把二元圖像標(biāo)記，以造成一列小塊物體，亦即是可能被標(biāo)為細(xì)菌的候選物。
B)計算該列小塊組件的幾何特性(面積、對比等)。
C)淘汰大小及對比不在預(yù)期范圍內(nèi)的候選物。
D)計算幾何過濾后余下的候選物。
圖三表示上述算法的流程例子，其中包括以下階段第一階段低通行的過濾以減少高頻率噪聲。
第二階段利用圖像分割以得出黑色背景上白色細(xì)菌斑點的二元圖像，此圖像分割以簡單的界限應(yīng)用程序，并利用固定的預(yù)早設(shè)定界限進行。如有需要，可采用自動和/或動態(tài)的界限計算。
第三階段把二元圖像標(biāo)記，以造成一列小塊物體，亦即是可能被標(biāo)為細(xì)菌的候選物。
第四階段計算該列小塊組件的幾何特性(面積、對比等)。
第五階段淘汰大小及對比不在預(yù)期范圍內(nèi)的候選物。
第六階段計算幾何過濾后余下的候選物。
為說明本發(fā)明，上述皆為指定的實施例，但實際上本發(fā)明可為有經(jīng)驗的技術(shù)人員所應(yīng)用，而得出不離開本發(fā)明精神及不超越本發(fā)明權(quán)利范圍的多種改進、變動和改編。
權(quán)利要求
1.一種偵測及計算活性微生物的方法，包括a)提供一種液態(tài)混合物，其包含一種或以上包封在液態(tài)溶膠—凝膠前體中的標(biāo)記；b)在透明薄片上，例如玻璃片上，加上一層薄而均勻、為所述液態(tài)溶膠—凝膠前體混合物的涂層；c)將被分析的液態(tài)樣本倒進過濾器以分出微生物，然后把所述過濾器緊貼涂上溶膠—凝膠的薄片；d)把上述過濾器和上述涂上溶膠—凝膠的薄片放置在適合助長微生物吸收標(biāo)記的溫度，一起培養(yǎng)一段時間；e)以外界能源照射上述涂上溶膠—凝膠的薄片，以產(chǎn)生為微生物所吸收的標(biāo)記所發(fā)放可偵測的訊號；及f)取得上述從微生物發(fā)出可偵測訊號的圖象，并以電子計算機系統(tǒng)分析所述圖象，從而識別和計算所述微生物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于所述微生物為細(xì)菌。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于所述能源為可見的光、熒光、紫外光、紅外線、電磁場、聲納、超聲波、無線電波、或輻射短波。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于所述微生物與水、奶、食物、唾液、尿液、喉嚨分泌物測試、創(chuàng)傷、痰、胃物及排泄物分隔。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的混合物，其特征在于所述標(biāo)記由3-羰基傘形酮β-D-半乳糖嘧喃糖(3-carboxyumbelliferylβ-D-galactopyranoside)、4-氯甲基-6，8-二氟傘形酮β-D-半乳糖嘧喃糖(4-chloromethyl-6，8-difluoroumbelliferylβ-D-galactopyranoside)、4-甲基傘形酮β-D-半乳糖嘧喃糖(4-methylumbelliferylβ-D-galactopyranoside)、二β-D-半乳糖嘧喃糖熒光素(fluorescein diβ-D-galactopyranoside)、6，8-二氟-4-甲基傘形酮β-D-葡萄糖-酸鋰鹽(6，8-difluoro-4-methylumbelliferylβ-D-glucuronide lithium salt)、2-dodecylresorufin、Elf-97、二β-葡萄糖酸熒光素(fluorescein di-β-glucuronide)、5-(五氟苯氨基)二β-D-葡萄糖-酸熒光素(5-(pentafluorobenzoylamino)fluorescein di-β-D-glucuronide)和β-三氟甲基傘形酮β-D-葡萄糖-酸(β-trifluoromethylumbelliferylβ-D-glucuronide)中選擇。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的混合物，其特征在于所述標(biāo)記由所依附或連結(jié)的抗生素物質(zhì)組成。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的混合物，其特征在于所述抗生素在氯霉素、紅霉素、四環(huán)素、鏈霉素、多粘菌素、萘啶酸、新生霉素、三甲基芐二氨嘧啶、Rifanapicin和青霉素中選擇。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的混合物，其特征在于所述標(biāo)記可為以下列形式脂質(zhì)體、薄膜、多層物、辮子狀、片晶體、螺旋狀、管狀、及纖維狀、溶劑化桿、溶劑化卷、以及其組合。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的混合物，其特征在于其包含吡啶或硫酸鉀。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于其計算的微生物數(shù)目少于103ml-1。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于所述薄片和過濾器會一起在介乎攝氏35至44度的溫度下培養(yǎng)0.5至6小時。
12.用以識別和計算微生物的系統(tǒng)，包括一個標(biāo)準(zhǔn)影像擷取器、一個電荷藕合組件數(shù)組(CCD array)照相機、一個顯微鏡、一個機動x-y桌、一個自動對焦系統(tǒng)和一個熒光光源。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的系統(tǒng)，其特征在于所述影像擷取器播放速率為每秒30幀，而影像的大小為640×480像素。
14.利用包含一種或多種標(biāo)記的多孔溶膠—凝膠玻璃以識別和計算活性微生物，即本說明書所說明的。
全文摘要
偵測及計算活性微生物的方法。提供一種液態(tài)混合物，其包含一種或以上包封在液態(tài)溶膠－凝膠前體中的標(biāo)記。在透明薄片涂上一層薄而均勻的液態(tài)溶膠－凝膠前體混合物，將樣本通過過濾器，把微生物從液態(tài)樣本分開，以作分析，然后把過濾器緊貼涂上溶膠－凝膠的薄片，將過濾器和涂上溶膠－凝膠的薄片放置在適合助長微生物吸收標(biāo)記的溫度，一起培養(yǎng)一段時間，以外界能源照射涂上溶膠－凝膠的薄片，以產(chǎn)生為微生物所吸收的標(biāo)記所發(fā)放可偵測的訊號，取得從微生物發(fā)出可偵測訊號的圖象，并以電子計算機系統(tǒng)分析圖象，從而識別和計算微生物。
文檔編號C12Q1/06GK1481440SQ01818622
公開日2004年3月10日 申請日期2001年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2000年11月9日
發(fā)明者艾域殊桑, 珍雅迪羅賓, 羅賓 申請人:拜可彰光學(xué)有限公司