專利名稱:一種益生菌凍干工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種微生物凍干技術(shù),具體地說是一種益生菌的凍干工藝。
背景技術(shù):
微生物在自然界起著極其重要的作用,微生物的生命活動(dòng)能力其世代時(shí)期較短,在傳代過程中易發(fā)生變異甚至死亡,可能會(huì)造成優(yōu)良菌種的丟失,,所以說菌種保存是進(jìn)行微生物育種的重要組成部分,菌種的保存往往通過人工創(chuàng)造條件減少菌體生長(zhǎng)代謝活動(dòng)量,減少變異,一般通過保持培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分在最低水平,缺氧狀態(tài)、干燥和低溫,是菌種處于“休眠狀態(tài)”。其中凍干工藝在微生物保存中占有極其重要的地位,但由于要求嚴(yán)格,需要一定設(shè)備,步驟復(fù)雜不易掌握。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種益生菌的凍干方法,適宜較短期的保存要求,方法簡(jiǎn)便,便于操作,效果理想。
本發(fā)明是通過如下方案實(shí)現(xiàn)的一種益生菌的保存方法包括如下步驟A接種活化將酵母菌按8-10%的接種量接種,所述的培養(yǎng)基為TY(YeastTryptone Agar)培養(yǎng)基;
將糞鏈球菌按8-10%的接種量接種,所述的培養(yǎng)基為(MRS培養(yǎng)基);將乳酸桿菌按8-10%的接種量接種,所述的培養(yǎng)基為MRS培養(yǎng)基;B、發(fā)酵將接種后的菌種分別至于發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,發(fā)酵溫度為37-39℃;罐內(nèi)壓為0.3`~0.6公斤/平方厘米,其中酵母菌為需氧發(fā)酵,糞鏈球菌和乳酸桿菌為無菌空氣發(fā)酵;C、離心將發(fā)酵后的制劑通過離心2000-2500fpm獲得菌泥;D、加保護(hù)劑將獲得菌泥加保護(hù)劑,用保護(hù)劑包埋菌種,所述的保護(hù)劑為重量百分比為3.5-4.0%的脫脂奶粉和重量百分比為1.0-1.5%的葡萄糖;E、冷凍干燥,將菌種至于冷凍干燥機(jī)分別制成凍干粉;F、將上述步驟獲取的凍干粉混合。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例說明該發(fā)明的具體實(shí)施方式
,但不作為對(duì)發(fā)明內(nèi)容的限制。
實(shí)施例一一種益生菌的保存方法通過如下步驟實(shí)現(xiàn)將酵母菌按8%的接種量接入TY(Yeast Tryptone Agar)培養(yǎng)基。將糞鏈球菌按8%的接種量接入MRS培養(yǎng)基,將乳酸桿菌按8%的接種量接入MRS培養(yǎng)基。
將接種后的菌種分別至于發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,發(fā)酵溫度為37℃;罐內(nèi)壓為0.3`公斤/平方厘米,其中酵母菌為需氧發(fā)酵,糞鏈球菌和乳酸桿菌為無菌空氣發(fā)酵。
將發(fā)酵后的制劑通過離心機(jī)2000fpm條件下離心獲得菌泥,將獲得的菌泥分別按重量百分比加入3.5%脫脂奶粉、1.0%葡萄糖混合包埋菌種。
將獲取的菌種分別至于冷凍干燥機(jī)制成凍干粉。
將上述步驟獲取的凍干粉混合。
實(shí)施例二一種益生菌的保存方法通過如下步驟實(shí)現(xiàn)將酵母菌按10%的接種量接入TY(Yeast Tryptone Agar)培養(yǎng)基。將糞鏈球菌按10%的接種量接入MRS培養(yǎng)基,將乳酸桿菌按10%的接種量接入MRS培養(yǎng)基。
將接種后的菌種分別至于發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,發(fā)酵溫度為37℃;罐內(nèi)壓為0.6`公斤/平方厘米,其中酵母菌為需氧發(fā)酵,糞鏈球菌和乳酸桿菌為無菌空氣發(fā)酵,將發(fā)酵后的制劑通過離心機(jī)2500fpm條件離心獲得菌泥,將獲得的菌泥分別按重量百分比加入4.0%脫脂奶粉、1.5%葡萄糖混合包埋菌種。
將獲取的菌種分別至于冷凍干燥機(jī)制成凍干粉。
將上述步驟獲取的凍干粉混合。
實(shí)施例三一種益生菌的保存方法通過如下步驟實(shí)現(xiàn)將酵母菌按9%的接種量接入TY(Yeast Tryptone Agar)培養(yǎng)基。將糞鏈球菌按9%的接種量接入MRS培養(yǎng)基,將乳酸桿菌按9%的接種量接入MRS培養(yǎng)基。
將接種后的菌種分別至于發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,發(fā)酵溫度為36℃;罐內(nèi)壓為0.5`公斤/平方厘米,其中酵母菌為需氧發(fā)酵,糞鏈球菌和乳酸桿菌為無菌空氣發(fā)酵,將發(fā)酵后的制劑通過離心機(jī)2500fpm條件下離心獲得菌泥,將獲得的菌泥分別按重量百分比加入4.0%脫脂奶粉、1.5%葡萄糖混合包埋菌種。
將獲取的菌種分別至于冷凍干燥機(jī)制成凍干粉。
將上述步驟獲取的凍干粉混合。
權(quán)利要求
1.一種益生菌凍干工藝,包括如下步驟A、接種活化將酵母菌、糞鏈球菌、乳酸桿菌分別按8-10%的接種量接種,接入培養(yǎng)基分別為TY(Yeast Tryptone Agar)培養(yǎng)基、MRS培養(yǎng)基、MRS培養(yǎng)基;B、發(fā)酵將接種后的菌種分別在罐內(nèi)發(fā)酵,發(fā)酵溫度為37-39℃,罐內(nèi)壓為0.3`~0.6公斤/平方厘米。所述的酵母菌為需氧發(fā)酵,糞鏈球菌和乳酸桿菌為無菌空氣發(fā)酵;C、離心將發(fā)酵后的制劑分別置入離心機(jī)在2000-2500fpm條件下通過離心獲得菌泥;D、包埋將獲得的菌泥分別加入保護(hù)劑包埋菌種;E、冷凍干燥,將菌種至于冷凍干燥機(jī)分別制成凍干粉;F、將上述步驟獲取的凍干粉混合。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的益生菌凍干工藝,其特征在于酵母菌、糞鏈球菌、乳酸桿菌的接種量分別為9-10%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的益生菌凍干工藝,其特征在于所述保護(hù)劑為重量百分比為3.5-4.0%的脫脂奶粉和重量百分比為1.0-1.5%的葡萄糖。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種微生物保存技術(shù),具體地說是一種益生菌凍干工藝,將酵母菌、糞鏈球菌、乳酸桿菌分別按8-10%的接種量接種,將接種后的菌種分別在溫度為37-39℃,罐內(nèi)壓為0.3`~0.6公斤/平方厘米條件下罐內(nèi)發(fā)酵,將發(fā)酵后的制劑在2000-2500fpm條件下通過離心獲得菌泥;將獲得的菌泥分別加入保護(hù)劑包埋菌種;將菌種至于冷凍干燥機(jī)分別制成凍干粉后混合。該保存方法適宜較短期的保存要求,方法簡(jiǎn)便,便于操作。
文檔編號(hào)C12R1/225GK101045903SQ20061006607
公開日2007年10月3日 申請(qǐng)日期2006年3月29日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月29日
發(fā)明者邵峰, 溫建新 申請(qǐng)人:邵峰