專利名稱：：低乳糖部分水解的嬰兒食品配方的制作方法低乳糖部分水解的嬰兒食品配方發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及低乳糖部分水解的嬰兒食品配方。背景食物過敏是食品攝入后產(chǎn)生的免疫介導(dǎo)的臨床綜合征。伴隨食物過敏的不良反應(yīng)通常是速發(fā)型免疫球蛋白E(IgE)介導(dǎo)的反應(yīng)，也稱為食物蛋白過l文。Host,A.等，DietaryProductsUsedinInfantsforTreatmentandPreventionofFoodAllergy(用于治療和預(yù)防嬰兒食物過壽文的食品)，Arch,Dis.Child81:80-84(1999)。食物蛋白過壽丈的癥狀包括血管性水腫、蕁麻疹、濕疹、哮喘、鼻炎、結(jié)膜炎、嘔吐或過敏癥。牛奶過敏是幼兒中最常見的食物蛋白過敏并在全部嬰兒的大約2%至3%中發(fā)生。Sampson,H.A.，F(xiàn)oodAllergy.Part1:ImmunopathogenesisandClinicalDisorders(食物過敏。第一部分免疫發(fā)病才幾理和臨床疾病)，JAllergryClinImmunol.103:717—728(1999)。對(duì)于嬰兒中牛奶過敏發(fā)病率的一種可能的解釋是在大部分常規(guī)嬰兒食品配方中找到的完整牛奶蛋白是嬰兒遇到的最早和最常見的食物過敏原。此外，嬰兒特別易于對(duì)牛奶過敏，因?yàn)樗麄兊哪c粘膜對(duì)不完全消化的大分子比成人具有更大的通透性。MoranR.,EffectsofProlongedExposuretoPartiallyHydrolyzedMilkProtein,J.Pediatr.121:S90-S4(1992)。盡管不存在可以完全治愈牛奶過敏的已知治療，但可以通過食用水解蛋白質(zhì)的食品配方來預(yù)防或降低嬰兒中的牛奶和其他過敏。已經(jīng)表明食用含有部分和大量水解蛋白質(zhì)的嬰兒食品配方替代只含有完整蛋白質(zhì)的常規(guī)食品配方可以降低嬰兒將來過敏的風(fēng)險(xiǎn)。同前。因此，如果嬰兒具有過敏家族史，食用水解蛋白質(zhì)食品配方可以降低兒童在將來產(chǎn)生過敏的風(fēng)險(xiǎn)。水解蛋白質(zhì)食品配方的特征在于大量水解或部分水解。含有大量水解蛋白質(zhì)的嬰兒食品配方(EHF)基于牛奶，但是蛋白質(zhì)已經(jīng)用酶處理來分解大部分引起過敏相關(guān)癥狀的蛋白質(zhì)?？少彽腅HF的一個(gè)實(shí)例是EnfamilNutramigen。這是一種基于酪蛋白的低變應(yīng)原嬰兒配方奶粉，用于對(duì)牛奶和大豆食品配方中的完整蛋白敏感的足月嬰兒。另一方面，含有部分水解蛋白質(zhì)的嬰兒食品配方(PHF),已經(jīng)用酶處理，以1"又4又分解一些牛奶蛋白。理想地，任何嬰兒食品配方，包括PHF，應(yīng)當(dāng)盡可能接近地模擬人乳。在人乳中，存在兩種主要的蛋白質(zhì)，乳清蛋白和酪蛋白。乳清蛋白通常構(gòu)成人乳中約60%的蛋白，而酪蛋白通常構(gòu)成約40%。Lonnerdal，B.,BiochemistryandPhysiologicalFunctionsofHumanMilkProteins,Am.J.Clin.Nutr.42:1299—1317(1985)。除了模擬人乳的蛋白含量，PHF應(yīng)當(dāng)不會(huì)引起或加重碳水化合物吸收的困難。基于牛奶的嬰兒食品配方中的主要碳水化合物是乳糖。乳糖是葡萄糖和半乳糖的二糖，且對(duì)于身體需要乳糖酶來消化乳糖。如果位于腸上皮細(xì)胞表面膜上的乳糖酶沒有存在足夠的含量，身體可能不會(huì)完全消化乳糖。這種情況，通常稱為乳糖不耐受性，可以導(dǎo)致如腹脹、產(chǎn)氣、腹絞痛和腹瀉的癥狀。避免嬰兒中乳糖不耐受性的不利副作用的一種方式是提供低乳糖嬰兒食品配方，用于補(bǔ)充營養(yǎng)或替代人乳。低乳糖嬰兒食品配方通常含有少量百分比的包括乳糖的碳水化合物。剩余的碳水化合物內(nèi)含物源自另一種來源，如玉米糖漿固體。已經(jīng)公開了各種嬰兒配方奶粉，但是沒有一種提供本發(fā)明的綜合益處。例如，Martinez等的U.S.專利No.5,405,637涉及乳蛋白部分水解產(chǎn)物和含有其的嬰兒食品配方。然而，該專利沒有公開含有約0%至60%的乳糖含量的嬰兒食品配方。此外，盡管該參考文獻(xiàn)公開了約6至9%的水解程度，Martinez參考文獻(xiàn)的蛋白水解產(chǎn)物沒有公開具有本發(fā)明中所用蛋白水解產(chǎn)物的分子量。Kratky等的U.S.專利No.6,777，931涉及具有低蘇氨酸含量的嬰兒食品配方組合物。盡管該參考文獻(xiàn)討論了使用乳清蛋白和酪蛋白，但所用的乳清蛋白是被修飾過的，使得已經(jīng)除去了caseino-glyo-巨肽(cGMP)。此外，該參考文獻(xiàn)沒有公開包括具有和本發(fā)明中一樣的特定分子量譜的部分水解產(chǎn)物的嬰兒食品配方。Griffin等的U.S.專利No.6,162,472涉及包括酪蛋白和乳清蛋白并含有低于20%的乳糖含量的嬰兒食品配方，但是沒有公開部分水解產(chǎn)物食品配方。Braun等的U.S.專利No.6,171,621,Bindels等的U.S.專利No.6,863,918和Kamarel的U.S.專利No.6,194,009,全部涉及各種基于蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的嬰兒食品配方和營養(yǎng)產(chǎn)品。然而，這些專利沒有公開含有約50:50至70:30乳清蛋白酪蛋白比例的補(bǔ)充劑或食品配方。此外，各種專利的部分水解產(chǎn)物沒有公開具有本申請(qǐng)中所用分子量的水解產(chǎn)物。發(fā)明概述簡而言之，本發(fā)明涉及新的嬰兒食品配方，其含有包括約0%至60%的乳糖的碳水化合物成分，其中所述百分比基于配方中存在的碳水化合物的總重；和部分水解的乳清蛋白和酪蛋白的蛋白質(zhì)成分，其中乳清蛋白與酪蛋白的比例約50:50至70:30且其中蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物具有的肽覆蓋如表1中所示的作為它們摩爾質(zhì)量的函數(shù)的分子量分布范圍。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>在發(fā)現(xiàn)的通過本發(fā)明獲得的幾種優(yōu)勢中，乳蛋白部分水解產(chǎn)物具有與人乳相似的蛋白質(zhì)組成、改善的口味和提高的乳化特性。此外，本發(fā)明誘導(dǎo)的IgG抗體應(yīng)答的引發(fā)效應(yīng)低于完整牛奶所誘導(dǎo)的。因此，本發(fā)明可具有降低的免疫原性可能性。優(yōu)選實(shí)施方案的詳迷現(xiàn)在詳細(xì)地參照本發(fā)明的實(shí)施方案，以下列出了其中的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施例。通過本發(fā)明的解釋提供了每個(gè)實(shí)施例，但不是限制本發(fā)明。實(shí)際上，本領(lǐng)域技術(shù)人員清楚可以在本發(fā)明中形成各種改進(jìn)和改變而沒有脫離本發(fā)明的范圍和精神。例如，作為一個(gè)實(shí)施方案的一部分說明或描述的特征可以用于另一個(gè)實(shí)施方案來產(chǎn)生再一個(gè)的實(shí)施方案。因此，確定本發(fā)明涵蓋這樣的改進(jìn)和改變，如在所附權(quán)利要求及其等價(jià)物的范圍內(nèi)一樣。本發(fā)明的其他目的、特征和方面公開于以下的詳述中或從以下的詳述看是顯而易見的。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解本發(fā)明的討論只是示例實(shí)施方案的描述，不是作為本發(fā)明更寬方面的限制。定義如在此所用的，術(shù)語"低乳糖"意思是低于100%的乳糖含量，包括0%的乳糖。術(shù)語"水解程度"意思是肽鍵通過酶水解反應(yīng)破壞的程度。測量顯示出水解中破壞的特異性肽鍵的數(shù)量，作為完整蛋白中存在的特異性肽鍵總數(shù)的百分?jǐn)?shù)。術(shù)語"益生菌(probiotic)，，意思是對(duì)宿主的健康呈現(xiàn)出有益效果的微生物。如在此所用的，術(shù)語"益生元(prebiotic)"意思是通過選4奪性刺激結(jié)腸中可以提高宿主健康的一種或有限數(shù)量的細(xì)菌的生長和/或活性而有益地影響宿主的不可消化的食品成分。術(shù)語"受試者"意思是任何哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人。如在此所用的，術(shù)語"嬰兒"是小于約一歲大的人。如在此所用的，術(shù)語"嬰兒食品配方"意思是作為人乳替代品滿足嬰兒營養(yǎng)需求的組合物。在美國，嬰兒食品配方的內(nèi)含物通過21C.F.R.部分100、106和107列出的聯(lián)邦法規(guī)來規(guī)定。這些法規(guī)限定了努力刺激人乳營養(yǎng)和其他特性的大量營養(yǎng)元素、維生素、礦物質(zhì)和其他配料含量。發(fā)明根據(jù)本發(fā)明，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了新的嬰兒食品配方。該嬰兒食品配方具有低乳糖含量并包括部分水解酪氨酸和乳清蛋白的混合物。嬰兒食品配方的蛋白質(zhì)部分水解產(chǎn)物具有形成不同于現(xiàn)有技術(shù)產(chǎn)品的特定和獨(dú)特的分子量分布。本發(fā)明提供了與人乳中發(fā)現(xiàn)的相似的乳清蛋白酪蛋白比例。在特定的實(shí)施方案中，乳清蛋白酪蛋白的比例為約50:50至70:30。在另一個(gè)實(shí)施方案中，酪蛋白乳清蛋白的比例為約60:40。本發(fā)明中所用的乳清蛋白可以源自本領(lǐng)域已知的任何來源。在一個(gè)實(shí)施方案中，乳清蛋白可以來源于獲自甜干酪制造的未加工乳清、來自通過超濾(UF乳清)、離子交換和/或電泳(ED乳清)獲得的乳清蛋白濃縮物(WPC),或從已經(jīng)處理降低乳清的乳糖含量的乳清分離物獲得。本發(fā)明中所用的酪蛋白還可以源自本領(lǐng)域已知的任何來源。例如，酪蛋白可以是酸酪蛋白或無脂乳固體(NFM)?？梢詫⑷榍宓鞍缀屠业鞍紫♂尰蛑亟ǔ珊屑s20%至25%總固體和以干基計(jì)約40%至50%蛋白質(zhì)的溶液。在本發(fā)明中，碳水化合物成分包括約0%至60%的乳糖。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，碳水化合物成分包括約15%至55%的乳糖。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，碳水化合物成分包括約20%至30%的乳糖。在本發(fā)明的特定實(shí)施方案中，碳水化合物成分包括約1%至25%的乳糖。在這些實(shí)施方案中，碳水化合物的剩余來源可以是本領(lǐng)域已知的任何碳水化合物來源，如乳糖、葡萄糖、玉米糖漿固體、麥芽糖糊精、蔗糖、淀粉、大米糖漿固體等。在特定的實(shí)施方案中，碳水化合物成分包括約25%的乳糖和約75%玉米糖漿固體?？梢詫⑷樘羌尤雼雰菏称放浞街谢蚩梢蕴烊淮嬖趮雰菏称放浞降某煞种?。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，乳糖天然存在于干的水解產(chǎn)物中。在這個(gè)實(shí)施方案中，干燥水解產(chǎn)物的約30%至70%可構(gòu)成碳水化合物。在特定的實(shí)施方案中，約50%的干燥水解產(chǎn)物構(gòu)成碳水化合物。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，乳糖含量可以為0%。在這個(gè)實(shí)施方案中，可以使用本領(lǐng)域已知的任何方法處理水解產(chǎn)物來除去乳糖內(nèi)含物?；蛘?，可以使用無乳糖的乳蛋白成分來制備嬰兒食品配方。在本發(fā)明中，使用蛋白水解酶，蛋白酶N來水解蛋白質(zhì)。蛋白酶N"Amano"從AmanoEnzymeU.S.A.Co.，Ltd.,Elgin,IL.可購得。蛋白酶N是源自細(xì)菌種枯草芽胞桿菌(Bacilllussubtilis)的蛋白水解酶制劑。規(guī)定蛋白酶粉末為"不低于150,000單位/g",意思是一單位的蛋白酶N是在7.0的pH持續(xù)60分鐘產(chǎn)生等于IOO微克酪氨酸的氨基酸的酶含量。為了生產(chǎn)本發(fā)明的嬰兒食品配方，可以使用待水解總蛋白重量的約0.5%至約1.0M的蛋白酶N。通過蛋白酶N的蛋白水解通常在約5(TC至約60。C的溫度進(jìn)行。將水解進(jìn)行一定的時(shí)間段，使得獲得約4%至約10%的水解程度。在特定的實(shí)施方案中，將水解進(jìn)行一定的時(shí)間段，使得獲得約6%至9%的水解程度。在另一個(gè)實(shí)施方案中，將水解進(jìn)行一定時(shí)間段，使得獲得約7.5%的水解程度。這種水解水平需要花費(fèi)約半小時(shí)至約3小時(shí)。在水解過程中應(yīng)當(dāng)維持恒定的pH。在本發(fā)明的方法中，將pH調(diào)節(jié)并維持于約6.5至8。在特定的實(shí)施方案中，將pH維持于約7.0。為了維持乳清蛋白、酪蛋白、水和蛋白酶N溶液的最佳pH,可以使用氫氧化鈉和/或氫氧化鉀的苛性堿溶液來調(diào)節(jié)水解過程中的pH。如果用氬氧化鈉來調(diào)節(jié)pH,那么加入溶液中的氫氧化鈉的含量應(yīng)當(dāng)控制至構(gòu)成低于最終蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物中約0.3%總固體的水平。也可以使用10%氫氧化鉀溶液來調(diào)節(jié)溶液的pH至所需的值，在加入酶之前或在水解過程中，以便維持最佳pH。通過pH-stat或通過連續(xù)和按比例加入苛性;咸溶液來控制蛋白水解過程中加入溶液中的苛性石咸溶液含量。通過標(biāo)準(zhǔn)分批方法或通過連續(xù)方法來制造水解產(chǎn)物。為了更好確保蛋白質(zhì)部分水解產(chǎn)物的恒定質(zhì)量，使水解產(chǎn)物接受酶滅活來終止水解過程。酶滅活步驟可以包括在約82。C的溫度至少處理約10分鐘?；蛘?，可以通過將溶液加熱至約92。C的溫度約5秒鐘來滅活酶。完成酶滅活后，可以將水解產(chǎn)物以液體狀態(tài)存儲(chǔ)于低于10。C的溫度。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，根據(jù)在此所述的方法制得的液體部分蛋白水解產(chǎn)物可以按原樣使用并和其他配料混合來制備嬰兒食品配方?；蛘撸梢酝ㄟ^噴霧干燥液體水解產(chǎn)物產(chǎn)生粉末形式的部分水解產(chǎn)物。然后可以將噴霧干燥的水解產(chǎn)物摻入嬰兒食品配方中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，可以通過蒸發(fā)來濃縮液體部分水解產(chǎn)物，然后噴霧干燥。再次，可以將噴霧干燥的水解產(chǎn)物摻入嬰兒食品配方中?？梢允褂帽绢I(lǐng)域已知的任一種嬰兒食品配方配制方法來配制含有所述部分水解蛋白質(zhì)的嬰兒食品配方。本發(fā)明的嬰兒食品配方可以在營養(yǎng)上是完全的并通常含有合適類型和含量的脂質(zhì)、碳水化合物、蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)。脂質(zhì)或脂肪的含量通常為約3至約7g/100千卡。脂質(zhì)來源可以是本領(lǐng)域任何已知的，包括植物油，如棕櫚油、大豆油、棕櫚精(palmolein)、椰子油、中鏈甘油三酯油、高油酸向日葵油、高油酸紅花油等。蛋白質(zhì)的含量通?？蔀榧s1至約5g/100千卡。碳水化合物的含量通常可為約8至約12g/100千卡。嬰兒食品配方可以包括益生菌。本領(lǐng)域已知的任何益生菌在這個(gè)實(shí)施方案中是可接受的。在特定的實(shí)施方案中，益生菌選自乳桿菌(Lactobacillus)和雙歧桿菌(Bifidobacterium)。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，嬰兒食品配方可以含有一種或多種益生元。本領(lǐng)域已知的任何益生元在這個(gè)實(shí)施方案中是可接受的。本發(fā)明的益生元可以包括乳果糖、低聚半乳糖、低聚果糖、低聚異麥芽糖、低聚大豆糖、乳蔗糖、低聚木糖和低聚龍膽糖。在本發(fā)明的其他實(shí)施方案中，嬰兒食品配方可以含有其他成分，如長鏈多不飽和脂肪酸(LCPUFA)。合適的LCPUFA包括，但不限于，a-亞油酸、y-亞油酸、亞油酸、亞麻酸、二十碳五烯酸(EPA)、花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA)。在一個(gè)實(shí)施方案中，嬰兒食品配方含有DHA。另一個(gè)實(shí)施方案中，嬰兒食品配方含有ARA。再一實(shí)施方案中，本發(fā)明的嬰兒食品配方含有DHA和ARA。在一個(gè)實(shí)施方案中，將DHA和ARA摻入本發(fā)明的嬰兒食品配方中。在該實(shí)施方案中，ARA:DHA的重量比通常為約1:3至約9:1。或者，該比例可以為約1:2至約4:1。在另一個(gè)可替換的實(shí)施方案中，比例為約2:3至約2:1。在一個(gè)特定的實(shí)施方案中，比例為約2:1。本發(fā)明實(shí)施方案中的DHA有效量通常為約3mg/kg體重/天至約150mg/kg體重/天。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，DHA的含量為約6mg/kg體重/天至約100mg/kg體重/天。在另一個(gè)實(shí)施方案中，含量為約10mg/kg體重/天至約60mg/kg體重/天。再一實(shí)施方案中，含量為約15mg/kg體重/天至約30mg/kg體重/天。供本發(fā)明使用的嬰兒食品配方中的DHA含量通常為約5mg/100千卡至約80mg/100千卡。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，DHA的含量為約10mg/100千卡至約50mg/100千卡；在另一個(gè)實(shí)施方案中，為約15mg/100千卡至約20mg/100千卡。在本發(fā)明的特定實(shí)施方案中，DHA的含量為約17mg/100千卡。本發(fā)明實(shí)施方案中的ARA有效量通常為約5mg/kg體重/天至約150mg/kg體重/天。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，ARA的含量為約10mg/kg體重/天至約120mg/kg體重/天。在另一個(gè)實(shí)施方案中，含量為約15mg/kg體重/天至約90mg/kg體重/天。再一實(shí)施方案中，含量為約20mg/kg體重/天至約60mg/體重/天。本發(fā)明中所用嬰兒食品配方中的ARA含量通常為約10mg/100千卡至約100mg/100千卡。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，ARA的含量為約15mg/100千卡至約70mg/100千卡。在另一個(gè)實(shí)施方案中，ARA的含量為約20mg/100千卡至約40mg/100千卡。在本發(fā)明的特定實(shí)施方案中，ARA的含量為約34mg/100千卡?？梢允褂帽绢I(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)才支術(shù)將DHA和ARA補(bǔ)充至本發(fā)明中。例如，可以通過替換等量的通常存在于食品配方中的油如高油酸向日葵油，將DHA和ARA加入補(bǔ)充劑或食品配方中。作為另一個(gè)實(shí)施例，可以通過替換等量的通常存在于沒有DHA和ARA的食品配方中的剩余的全部脂肪混合物，將含有DHA和ARA的油加入補(bǔ)充劑或食品配方中。DHA和ARA的來源可以是本領(lǐng)域已知的任何來源。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，DHA和ARA的來源是單細(xì)胞油，如U.S.專利No.5,374,567;5，550,156;和5，397,591中所教導(dǎo)的，在此將其公開內(nèi)容全部引入作為參考。然而，本發(fā)明不僅限于這樣的油。DHA和ARA可以是天然或精制形式的。在一個(gè)實(shí)施方案中，DHA和ARA的來源基本上沒有二十碳五烯酸(EPA)D例如，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，嬰兒食品配方含有低于約16mgEPA/100千卡；在另一個(gè)實(shí)施方案中，低于約10mgEPA/100千卡；再一實(shí)施方案中，低于約5mgEPA/100千卡。一個(gè)特定實(shí)施方案基本上不含有EPA。另一個(gè)實(shí)施方案是無EPA，因?yàn)樯踔梁哿縀PA也不存在于配方中。本發(fā)明的嬰兒食品配方具有特定的分子量分布。與現(xiàn)有技術(shù)中發(fā)現(xiàn)的其他部分水解產(chǎn)物相比較，分子量分布具有證實(shí)的可接受乳化和口味特性。此外，已經(jīng)表明特定的分子量分布誘導(dǎo)比完整的乳蛋白少的血清IgG抗體效應(yīng)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)在此公開的方法制得的部分蛋白水解產(chǎn)物可以摻入營養(yǎng)補(bǔ)充劑中?？梢砸砸后w形式使用部分蛋白水解產(chǎn)物并和其他配料混合來制得液體營養(yǎng)補(bǔ)充劑?；蛘撸梢詫⒉糠值鞍姿猱a(chǎn)物噴霧干燥并摻入粉末狀營養(yǎng)補(bǔ)充劑中?？梢允褂帽绢I(lǐng)域已知的任一種營養(yǎng)補(bǔ)充劑配制方法來配制含有所述部分水解蛋白的營#^卜_￡劑。使用大小排阻色譜(SEC)來測定通過之前所述的水解方法形成的水解產(chǎn)物肽的分子量分布。具體地，稱出足夠量的粉末狀嬰兒食品配方來提供0.5克蛋白質(zhì)至50ml圓錐形離心管中。加入水使試管至45ml的體積。將混合物置于SarstedtD-5223混合機(jī)中并混合一小時(shí)?；旌虾?，將另外5ml水加入試管中來形成1%的蛋白質(zhì)溶液。制備儲(chǔ)液標(biāo)準(zhǔn)物，并且也混合一小時(shí)。分開地，將14.91克氯化鉀(KC1)加入1000ml燒杯中。將700ml水加入燒杯中來溶解KC1。然后將250ml乙腈和l.Oml三氟乙酸加入KC1溶液中(洗脫液)。使用0.2MK2HP04溶液將pH調(diào)節(jié)至3.0。將HPLC試劑瓶裝滿并用洗脫液洗滌瓶子，留出約50ml用于樣品和標(biāo)準(zhǔn)的稀釋。用洗脫液清洗HitachiL-6200AIntelligentPumplines,并用洗脫液將柱子平tf一小時(shí)。將樣品混合一小時(shí)后，將5.0ml每種樣品移至玻璃螺帽管中。還將5.0ml二氯曱烷移至每個(gè)管中。將管蓋上塞子并通過倒置四次來混合。然后將樣品在200Xg離心五分鐘。在樣品離心的時(shí)候，用洗脫液(800|il+320(Vl)稀釋儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)品1-5?；蛘?，將大約1ml每種標(biāo)準(zhǔn)品移至兩個(gè)自動(dòng)取樣器小瓶中的每一個(gè)并蓋上塞子。用洗脫液(100|il+90(Vl)稀釋離心樣品1-10的上層(含水)。如下將小瓶裝入自動(dòng)取樣器盤中空白、標(biāo)準(zhǔn)、樣品和第二標(biāo)準(zhǔn)。將盤置于Hitachi自動(dòng)取樣器中。使用自動(dòng)取樣器前面的鍵(key)將全部待運(yùn)行的小瓶送入自動(dòng)取樣器程序中，樣品得到運(yùn)行。結(jié)果表明了蛋白質(zhì)的分子量譜。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的部分水解產(chǎn)物具有2000的平均分子量，具有以上表1中所示的分子量分布范圍。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的部分水解產(chǎn)物具有表2中所示的分子量分布。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>以下實(shí)施例描述了本發(fā)明的各種實(shí)施方案。在此權(quán)利要求范圍內(nèi)明或?qū)嵤┖蠖詫⑹秋@而易見的。說明書，和實(shí)施例一起，一皮^人為只是示例性的，本發(fā)明的范圍和精神通過實(shí)施例后的權(quán)利要求來確定。在實(shí)施例中，以重量基給出所有百分比，除非另外指出。實(shí)施例1該實(shí)施例說明了生產(chǎn)蛋白質(zhì)部分水解產(chǎn)物的方法。最初，將60.3kg非乳固體(奶粉)和34kg乳清蛋白濃縮物(60%)在含有54。C水的罐中混合。漿液具有20%至23%的總固體含量。然后測量漿液的pH。將氫氧化鈉和氬氧化鉀加入漿液中，將漿液的pH調(diào)節(jié)至7.0。調(diào)節(jié)pH后，將0.5kgAmanoN酶加入漿液中。在AmanoN力口入漿液中之后，使用氫氧化鈉和氫氧化鉀繼續(xù)將pH調(diào)節(jié)至7.0。加入漿液中的氬氧化鈉總量為0.3kg。加入漿液中的氫氧化鉀總量為1.5kg。^吏水解進(jìn)行90分鐘，時(shí)間從AmanoN酶加入漿液中開始。90分鐘結(jié)束時(shí)，將漿液熱處理使酶滅活。熱處理由將漿液的溫度升高至82。C持續(xù)IO分鐘組成。該實(shí)施例中獲得的水解程度為6%至9%。然后將漿液冷卻并噴霧干燥來獲得粉末狀水解產(chǎn)物。實(shí)施例2該實(shí)施例說明了可以用于制備本發(fā)明嬰兒食品配方的配料的一個(gè)實(shí)施方案。表3:水解產(chǎn)物的一個(gè)實(shí)施方案的配制方案<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>可以將維生素加入表3的配津+中?？梢约尤胧称放浞街械木S生素實(shí)例包括維生素A、維生素D;、維生素E、維生素K,、硫胺素、核黃素、鹽酸維生素B6、維生素B12、煙酰胺、葉酸、泛酸鈣、生物素和抗壞血酸。還可以將礦物質(zhì)加入表3的配料中?？梢约尤胧称放浞街械牡V物質(zhì)實(shí)例包括磷酸鈣、甘油磷酸鈣、葡糖酸鈣、擰檬酸鈉、氯化鉀、檸檬酸鉀、磷酸鉀、磷酸鎂、硫酸亞鐵、疏酸鋅和Ai酸銅。實(shí)施例3該實(shí)施例說明了實(shí)施例1中獲得的蛋白質(zhì)部分水解產(chǎn)物的IgG抗體應(yīng)答的引發(fā)效應(yīng)。在位于整個(gè)美國的七個(gè)小兒科實(shí)踐中研究了三百二十三名嬰兒。受試者是出生后不久登記的健康足月嬰兒。將其母親表示愿意母乳喂養(yǎng)的嬰兒分為A組。以雙盲的方式將其母親選擇不母乳喂養(yǎng)的那些嬰兒隨機(jī)分成B組或C組。B組中的嬰兒接受含有實(shí)施例1中獲得的蛋白質(zhì)部分水解產(chǎn)物的嬰兒食品配方。C組中的嬰兒接受可購得的基于乳清蛋白為主要物的奶的食品配方(Enfamil,乂人MeadJohnsonCo.，Evansville,IN獲^f)。兩種酉己方含有相同含量的蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂肪。在所有地點(diǎn)以月為間隔評(píng)價(jià)直至4個(gè)月的嬰兒，在七個(gè)地點(diǎn)中的三個(gè)評(píng)價(jià)6個(gè)月和8個(gè)月齡的嬰兒。接受時(shí)和3、6和8個(gè)月大時(shí)進(jìn)行抽血，用于檢測對(duì)奶的血清抗體。通過生物素-抗生物素蛋白酶聯(lián)免疫吸附測定定量IgE抗乳蛋白抗體；使用Burks等，Burks,A.W.,等，AntibodyResponsetoMilkProteininPatientswithMilkProteinIntoleranceDocumentedbyChallenge,J.AllergyClin.Immunol.85:921-927(1990)中所述的酶聯(lián)免疫吸附測量來測定IgG抗-乳蛋白抗體。抽取另外的血來測量鐵蛋白和血紅蛋白的血清水平并測定在8個(gè)月大;f全測的嬰兒的血細(xì)胞比容。在允許進(jìn)入研究時(shí)所有組中對(duì)奶的IgG抗體的平均血清濃度是相當(dāng)?shù)?。然而，喂養(yǎng)食品配方C的嬰兒組中對(duì)奶的血清IgG抗體的提高顯著大于喂養(yǎng)母乳(組A)或食品配方B的那些。B組中這種對(duì)奶的IgG抗體的較低濃度表明了完整的牛奶蛋白對(duì)IgG抗體應(yīng)答(組C)具有較大的引發(fā)效應(yīng)。因此，B組的部分水解奶蛋白具有降低的免疫原可能性。在登記時(shí)，三個(gè)組中對(duì)奶的IgE抗體的平均血清濃度沒有發(fā)現(xiàn)顯著差異。此外，在整個(gè)研究中的喂養(yǎng)方案中，IgE水平不存在顯著差異。8個(gè)月大時(shí)的平均血清鐵蛋白、血細(xì)胞比容和血紅蛋白值在正常范圍內(nèi)，在三個(gè)組中沒有發(fā)現(xiàn)顯著差異。實(shí)施例4該實(shí)施例說明了補(bǔ)充根據(jù)本發(fā)明的方法制得的蛋白質(zhì)部分水解產(chǎn)物的嬰兒食品配方的特定實(shí)施方案。在該實(shí)施例中，乳糖構(gòu)成約23.5%的碳水化合物成分。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>在該實(shí)施例中，乳糖是天然存在于部分水解的NFM和WPC固體中。更特別地，約50%的部分水解NFM和WPC固體構(gòu)成乳糖。因此，那些NFM和WPC固體中存在的乳糖含量大約為13.433kg。組合物中另外存在138.017g乳糖。嬰兒食品配方中總計(jì)大約13.571kg乳糖。嬰兒食品配方中存在44.256kg的玉米糖漿固體?？偟奶妓衔锖繛?7.827kg,乳糖只構(gòu)成總的13.571kg。因此，乳糖構(gòu)成嬰兒食品配方中總碳水化合物含量的大約23.5%。本說明書中引用的所有參考文獻(xiàn)，包括但不限于，所有論文、出版物、專利、專利申請(qǐng)、講座、教科書、報(bào)告、手稿、小冊子、書本、互聯(lián)網(wǎng)登入、雜志文章、期刊等，在此以其整體引入本說明書中作為參考。確定在此的參考文獻(xiàn)的討論只是概括其作者形成的主張而沒有承認(rèn)形成任何參考文獻(xiàn)構(gòu)成現(xiàn)有技術(shù)。申請(qǐng)人保留置疑所引用參考文獻(xiàn)的準(zhǔn)確性和相關(guān)性的權(quán)利。盡管已經(jīng)使用特定的術(shù)語、裝置和方法描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，這樣的描述只是用于說明的目的。所用的詞語是描述性詞語而不是限制。理解本領(lǐng)域技術(shù)人員可以形成改變和變化而沒有脫離列于以下權(quán)利要求中的本發(fā)明的精神或范圍。此外，應(yīng)當(dāng)理解各種實(shí)施方案的各方面可以全部或部分相互交換。例如，盡管已經(jīng)舉例il明了才艮據(jù)那些方法形成的無菌液體嬰兒食品配方的生產(chǎn)方法，但包括其他用途。因此，所附的權(quán)利要求的精神和范圍不限于其中所含的優(yōu)選形式的描述。權(quán)利要求1.一種嬰兒食品配方，包括碳水化合物成分，其包括約0％至60％的乳糖，基于嬰兒食品配方中存在的碳水化合物的總重；和蛋白質(zhì)成分，其包括部分水解的乳清蛋白和酪蛋白，其中乳清蛋白與酪蛋白的比例為約50∶50至70∶30，且其中蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物具有的肽覆蓋以下作為其摩爾質(zhì)量的函數(shù)的分子量分布范圍<table-cwuid="table1"><tablewidth="841"><tgroupcols="2"><thead></column></row><row><column><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>摩爾質(zhì)量(以道爾頓計(jì))</p></entry><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>％分子量分布</p></entry></column></row></thead><tbody></column></row><row><column><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>＜500</p></entry><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>11-20</p></entry></column></row></column></row><row><column><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>500-1000</p></entry><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>25-38</p></entry></column></row></column></row><row><column><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>1000-2000</p></entry><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>27-30</p></entry></column></row></column></row><row><column><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>2000-3000</p></entry><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>8-16</p></entry></column></row></column></row><row><column><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>3000-5000</p></entry><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>3-10</p></entry></column></row></column></row><row><column><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>＞5000</p></entry><entrycolwidth="50%"morerows="1"morelines="1"><p>2-11</p></entry></column></row></tbody></tgroup></column></row><table></table-cwu>2.根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方，其中蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物具有的肽覆蓋以下作為其摩爾質(zhì)量的函數(shù)的分子量分布<table><row><column>摩爾質(zhì)量(以道爾頓計(jì))</column><column>%分子量分布</column></row><row><column><500</column><column>17</column></row><row><column>500-1000</column><column>35.1</column></row><row><column>1000-2000</column><column>30.9</column></row><row><column>2000-3000</column><column>9.6</column></row><row><column>3000_5000</column><column>4.2</column></row><row><column>>5000</column><column>2.8</column></row><table>3.根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方，其中乳清蛋白酪蛋白的比例為約60:40。4.根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方，其中碳水化合物成分包括約15%至55%的乳糖。5.根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方，其中碳水化合物成分包括約20%至30%的乳糖。6.根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方，其中碳水化合物成分包括約25%重量百分比的乳糖和約75%重量百分比的玉米糖漿固體。7.根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方，其中蛋白質(zhì)成分的水解程度為約4%至10%。8.根據(jù)權(quán)利要求6的嬰兒食品配方，其中蛋白質(zhì)成分的水解程度為約6%至9%。9.根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方，其中嬰兒食品配方另外包括至少一種益生菌。10.根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方，其中嬰兒食品配方另外包括至少一種益生元。11.根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方，其中嬰兒食品配方另外包括LCPUFA。12.根據(jù)權(quán)利要求11的嬰兒食品配方，其中LCPUFA包括DHA或ARA。13.根據(jù)權(quán)利要求11的嬰兒食品配方，其中LCPUFA包括約3mg/kg體重/天至約150mg/kg體重/天含量的DHA。14.根據(jù)權(quán)利要求11的嬰兒食品配方，其中LCPUFA包括約5mg/kg體重/天至約150mg/kg體重/天含量的ARA。15.根據(jù)權(quán)利要求10的嬰兒食品配方，其中LCPUFA包括DHA和ARA。16.根據(jù)權(quán)利要求14的嬰兒食品配方，其中ARA:DHA的比例為約1:3至約9:1。17.根據(jù)權(quán)利要求14的嬰兒食品配方，其中ARA:DHA的比例為約1:2至約4:1。18.根據(jù)權(quán)利要求14的嬰兒食品配方，其中ARA:DHA的比例為約2:3至約2:1。19.根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方，其中嬰兒食品配方是粉末狀形式。20.根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方，其中嬰兒食品配方是液體形式。21.預(yù)防受試者過敏癥發(fā)作的方法，該方法包括給予受試者根據(jù)權(quán)利要求1的嬰兒食品配方。全文摘要本發(fā)明涉及低乳糖，部分水解的嬰兒食品配方。嬰兒食品配方的碳水化合物成分包括0％至60％的乳糖且嬰兒食品配方的蛋白質(zhì)成分包括部分水解的乳清蛋白和酪蛋白，該蛋白質(zhì)成分具有特定的分子量。文檔編號(hào)A23L1/29GK101203144SQ200680018765公開日2008年6月18日申請(qǐng)日期2006年3月17日優(yōu)先權(quán)日2005年6月1日發(fā)明者D·A·懷恩森,K·哈蒂布,N·蘭加瓦拉,W·-C·張,喬恩·范德胡夫,加博爾·普斯基,羅伯特·A·伯恩斯申請(qǐng)人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司