專利名稱：：診斷幽門螺桿菌感染的尿素試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)用化學(xué)試劑，更具體地說，涉及使用"C-UBT(UreaBreathTest，尿素呼氣試驗(yàn))來診斷幽門螺桿菌(Helicobacterpylori,Hp)感染的試劑
背景技術(shù)：
用于檢測幽門螺桿菌(Hp)感染的UBT以其無痛苦、無創(chuàng)傷、準(zhǔn)確、快速、安全的特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于臨床。目前臨床使用的UBT分為"C-UBT和BC-UBT兩種。其中，"C-UBT有放射性，不適用于到孕婦和兒童等受檢者。BC-UBT中采用的是穩(wěn)定的同位素13C，沒有放射性，加上尿素也是人體的正常成分，所以適用于所有年齡和類型的受檢者。但是，實(shí)施13C-UBT的成本較高，限制了^C-UBT的廣泛應(yīng)用。尿素["C]試劑成本高是BC-UBT的成本高的主要原因之一。現(xiàn)在臨床使用的尿素["C]試劑中，。C豐度高(一般是99^。)，使用的劑量大(一般為75mg)，3致藥劑成本較高，從而影響了13C-UBT的廣泛使用。另外，上消化道出血、近期使用制酸劑、抗Hp藥物病人，這部分病人錯(cuò)判率比較高。如何提高這部份病人的準(zhǔn)確性率是進(jìn)一步提高總體準(zhǔn)確性的關(guān)鍵。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于，在確保檢測效果的前提下，降低13C-UBT的成本同時(shí)降低對BC-UBT對特定受檢者如近期使用制酸劑、抗Hp藥物的病人的錯(cuò)判率。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)發(fā)明目的的提供一種診斷幽門螺桿菌感染的尿素試劑盒，包括一定劑型的尿素pC]試劑，吹氣用的導(dǎo)管，其特征在于，C02收集袋，還包括增敏劑。在本發(fā)明診斷幽門螺桿菌感染的尿素試劑盒，所述增敏劑包括檸檬酸、蘋果酸、抗壞血酸、酒石酸中的任意一種或任意組合。在本發(fā)明診斷幽門螺桿菌感染的尿素試劑盒，每劑所述增敏劑含檸檬酸15克。在本發(fā)明診斷幽門螺桿菌感染的尿素試劑盒，每劑尿素["C]試劑中含1525毫克尿素["C]。在本發(fā)明診斷幽門螺桿菌感染的尿素試劑盒，每劑尿素^C]試劑中。C豐度為40%90%，其中所含的尿素「C]的量相當(dāng)于1525毫克13C豐度為99%的尿素["C]。本發(fā)明診斷幽門螺桿菌感染的尿素試劑盒中包括增敏劑，能提高通過。C-UBT診斷幽門螺桿菌感染的準(zhǔn)確性和敏感性，降低錯(cuò)判率，確保了使用小劑量尿素^C]試劑或者使用較低的13C豐度的尿素門C]試劑也能保證檢測結(jié)果。從而有效地降低了試劑的成本。具體實(shí)施方式實(shí)施例11、實(shí)驗(yàn)對象志愿者30人，這30名志愿者均大于18歲。其中男性15名，年齡為1965歲，平均37歲；女性15名，年齡2053歲，平均33歲。2、實(shí)驗(yàn)方法(1)、首先對志愿者進(jìn)行胃鏡，然后提取活檢標(biāo)本，對活檢標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)素酶測試。(2)、將一劑的增敏劑配成100ml的溶液，用所配成的溶液服用一劑的尿素[13C]膠囊，觀察病理、尿素酶以及。C-UBT的結(jié)果。所述增敏劑主要成分為檸檬酸，每劑增敏劑含檸檬酸5克。每劑尿素^C]膠囊中"C豐度為99呢，其中含尿素[13(:]17毫克，低于常規(guī)的含量。(3)、用C02收集袋來收集志愿者呼出的氣體。方法是先深吸氣，之后長呼氣，呼氣過程大致分為兩部分，在本實(shí)施例中不收集前部分呼出的氣體，僅僅收集后部分呼出的氣體，這是為了保證收集的氣體是肺泡里的氣體。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>何中心；f、對所得圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行逐步排除不是細(xì)菌的區(qū)域，如果目標(biāo)區(qū)域中心點(diǎn)不為亮點(diǎn)，則首先排除，如果目標(biāo)區(qū)域之面積不屬于細(xì)菌常規(guī)大小的范圍則排除之，在步驟c的基礎(chǔ)上利用兩個(gè)梯度不等的高次導(dǎo)數(shù)模板對目標(biāo)連通區(qū)域的鄰域分別進(jìn)行操作，只要其中之一的結(jié)果可被排除，則排除之，未被排除的目標(biāo)區(qū)域即為細(xì)菌。圖l:液體含菌量非染色自動(dòng)計(jì)數(shù)方法處理流程圖。具體實(shí)施方式根據(jù)說明書附圖1對液體含菌量非染色自動(dòng)計(jì)數(shù)方法作詳細(xì)說明如下-1.待檢測液體采樣。使用離心機(jī)對液體樣本離心5到10分鐘后，取樣，制成玻片。2.使用CCD相機(jī)對載玻片的顯微圖像進(jìn)行拍照。使用普通的模擬CCD攝像機(jī)即可，使用視頻采集卡采集圖像。3.對采集來的圖像進(jìn)行中值濾波慮除噪聲。使用如下公式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>4.對具體實(shí)施方法3中所得圖像進(jìn)行分塊，對圖像使用分塊求閾值的方法，對分塊圖像直方圖的函數(shù)進(jìn)行47次多項(xiàng)式擬合，并在所得曲線的基礎(chǔ)上求得各個(gè)分塊的閾值；對于常見的模擬輸入視頻采集卡的分辯率720X576—般平均分成4塊或16塊即可。這樣可以避免在同一副是，每劑尿素[BC]膠囊所含的尿素[13C]量，最好相當(dāng)于1575毫克"C豐度為99%的尿素[130]。實(shí)施例三本實(shí)施例選擇上消化道出血、近期使用制酸劑、抗Hp藥物的志愿者。首先對志愿者進(jìn)行胃鏡，然后提取活檢標(biāo)本，對活檢標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)的病理測試和尿素酶測試。接著，對志愿者進(jìn)行常規(guī)的13C-UBT試驗(yàn)(下面稱為第一次l3C-UBT試驗(yàn))。這次試驗(yàn)沒有服用增敏劑。常規(guī)的"C-UBT試驗(yàn)之后，志愿者禁食6小時(shí)。然后對志愿者進(jìn)行第二次"C-UBT試驗(yàn)。這次試驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)步驟、尿素[13C]試劑、尿素[13C]試劑的使用量與上述第一次"C-UBT試驗(yàn)相同；不同的地方在于，這次試驗(yàn)中讓受試者服用增敏劑。結(jié)果表明，第一次"C-UBT中出現(xiàn)了一定的誤判率。而第二次"C-UBT沒有出現(xiàn)誤判率。實(shí)驗(yàn)表明，采用本發(fā)明的試劑盒，每劑尿素[BC]試劑中含1525毫克尿素["C]就能滿足臨床試驗(yàn)的要求；或者，采用13C豐度為40%90%的尿素[13(:]試劑，適當(dāng)增加每劑試劑中的尿素量，使每劑尿素["C]試劑中尿素["C]含量在15至75毫克之間，也能滿足臨床試驗(yàn)的要求。此外，本發(fā)明的試劑盒還具有較低的誤判率。權(quán)利要求1.一種診斷幽門螺桿菌感染的尿素試劑盒，包括一定劑型的尿素[13C]試劑，吹氣用的導(dǎo)管，CO2收集袋，其特征在于，還包括增敏劑。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿素試劑盒，其特征在于，所述增敏劑包括檸檬酸、蘋果酸、抗壞血酸、酒石酸中的任意一種或任意組合。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿素試劑盒，其特征在于，每劑所述增敏劑含檸檬酸15克。4、根據(jù)權(quán)利要求1至3中任意一項(xiàng)所述的尿素試劑盒，其特征在于，每劑尿素^C]試劑中含1525毫克尿素^C]。5、根據(jù)權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的尿素試劑盒，其特征在于，每劑尿素[BC]試劑中"C豐度為40%90%，其中所含的尿素[13(:]的量相當(dāng)于1525毫克BC豐度為99%的尿素[13(:]。全文摘要本發(fā)明涉及醫(yī)用化學(xué)試劑，具體涉及一種使用¹³C-UBT(UreaBreathTest，尿素呼氣試驗(yàn))來診斷幽門螺桿菌(Hp)感染的尿素試劑盒，包括一定劑型的尿素[¹³C]試劑，吹氣用的導(dǎo)管，CO₂收集袋，還包括增敏劑。其中，每劑尿素[¹³C]試劑中含15～25毫克尿素[¹³C]，或者，每劑尿素[¹³C]試劑中¹³C豐度為40％～90％，所含的尿素[¹³C]的量相當(dāng)于15～25毫克¹³C豐度為99％的尿素[¹³C]。本發(fā)明的尿素試劑盒中包括增敏劑，降低了錯(cuò)判率，確保了使用小劑量尿素[¹³C]試劑或者使用較低的¹³C豐度的尿素[¹³C]試劑也能保證檢測結(jié)果。從而有效地降低了試劑的成本。文檔編號C12Q1/16GK101231284SQ20071007301公開日2008年7月30日申請日期2007年1月23日優(yōu)先權(quán)日2007年1月23日發(fā)明者張厚德,金桂花,黃晉杰申請人:張厚德