專利名稱：鹽析法提取赤霉素的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明描述了農(nóng)用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的提取方法，具體的講是用鹽 析法從發(fā)酵濾液中提取赤霉素。
背景技術(shù)：
赤霉素是一種公知的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。生產(chǎn)中使用的赤霉素 是利用赤霉菌進(jìn)行液體發(fā)酵產(chǎn)生的。提取工藝是發(fā)酵結(jié)束，發(fā)酵液 經(jīng)板框過濾得含赤霉素的發(fā)酵濾液和菌絲體濾餅；從發(fā)酵濾液中進(jìn)一 步將赤霉素提取出來的方法有兩種 一是用乙酸乙酯直接萃取赤霉 素；二是先將發(fā)酵濾液減壓濃縮到l/5體積后，在用乙酸乙酯將濃縮 液中的赤霉素萃取出來。用第一種方法萃取赤霉素，萃取率高但有機(jī) 溶劑消耗較大；用第二種方法從發(fā)酵濾液中提取赤霉素的不足之處是 在加熱減壓濃縮過程中，PH值略有偏移或溫度過高或濃縮時(shí)間過長(zhǎng) 都會(huì)造成赤霉素降解，使收率下降。
為了克服以上兩種方法之不足，本發(fā)明采用鹽析法從發(fā)酵濾液中 提取赤霉素。方法要點(diǎn)是發(fā)酵濾液中加入足夠量的氯化鈉或硫酸鈉 使赤霉素從發(fā)酵濾液中析出，然后采用過濾或離心的方法將含有赤霉 素的粗提取物分離出來。再用少量的乙酸乙酯和其他溶劑進(jìn)行純化， 即可獲得純度較高的赤霉素。也可以在加入鹽的同時(shí)加入少量的乙酸 乙酯來提高赤霉素在乙酸乙酯中的分配系數(shù)，同樣可以減少溶劑用量 降低生產(chǎn)成本。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明技術(shù)是關(guān)于赤霉素提取方法，其特征在于向含有赤霉素的 發(fā)酵濾液中加入足夠量的氯化鈉或硫酸鈉，從而使赤霉素從濾液中析 出，然后用離心或過濾的方法將析出的赤霉素分離出來。 一般而言，
在發(fā)酵濾液中加入25~35%氯化鈉(重量/體積比)或加入10~25%硫 酸鈉(重量/體積比)即可使赤霉素的析出率達(dá)80~99%，隨著鹽的加 入量越多赤霉素析出率越高，當(dāng)鹽在發(fā)酵濾液中達(dá)到飽和時(shí)，赤霉素 析出率為最大。
還可以在發(fā)酵濾液中加入少量的氯化鈉或硫酸鈉(大約在 5~10%)，同時(shí)加入乙酸乙酯或4-甲基-2-戊酮等疏水性溶劑，進(jìn)行萃 取，由于鹽的加入可提高赤霉素在有機(jī)相中的分配系數(shù)。同樣可以減 少溶劑用量，降低提取成本。
具體實(shí)施方式
實(shí)例l、
發(fā)酵結(jié)束，發(fā)酵液用高壓板框壓濾，得含赤霉素的發(fā)酵濾液。向 濾液中加入重量/體積比為35%的氯化鈉，充分?jǐn)嚢枋孤然c全部溶 解，然后過濾或離心，即得含赤霉素的粗提取物。經(jīng)HPLC分析，赤 霉素的收率達(dá)99%。 實(shí)例2、
發(fā)酵結(jié)束，發(fā)酵液用高壓板框壓濾，得含赤霉素的發(fā)酵濾液。向 濾液中加入重量/體積比為22%的硫酸鈉，充分?jǐn)嚢枋孤然c全部溶 解，然后過濾或離心，即得含赤霉素的粗提取物。經(jīng)HPLC分析，赤霉素的收率達(dá)99%。 實(shí)例3、
發(fā)酵結(jié)束，發(fā)酵液用高壓板框壓濾，得含赤霉素的發(fā)酵濾液。向 濾液中加入重量/體積比為20%的氯化鈉，充分?jǐn)嚢枋孤然c全部溶 解，然后過濾或離心，即得含赤霉素的粗提取物。經(jīng)HPLC分析，赤 霉素的收率達(dá)82~88%。 實(shí)例4、
發(fā)酵結(jié)束，發(fā)酵液用高壓板框壓濾，得含赤霉素的發(fā)酵濾液。向 濾液中加入重量/體積比為15%的硫酸鈉，充分?jǐn)嚢枋孤然c全部溶 解，然后過濾或離心，即得含赤霉素的粗提取物。經(jīng)HPLC分析，赤 霉素的收率達(dá)84~88%。 實(shí)例5、
發(fā)酵結(jié)束，發(fā)酵液用高壓板框壓濾，得含赤霉素的發(fā)酵濾液。向 濾液中加入相當(dāng)于濾液10°/。的乙酸乙酯和15%的硫酸鈉，充分?jǐn)嚢?萃取，然后靜置或離心分相，得含赤霉素的有機(jī)相，萃取率達(dá)97% 以上，不加入鹽的對(duì)照組，其萃取率為88%。 實(shí)例6、
發(fā)酵結(jié)束，發(fā)酵液用高壓板框壓濾，得含赤霉素的發(fā)酵濾液。向 濾液中加入相當(dāng)于濾液6%的乙酸乙酯和24%的硫酸鈉，充分?jǐn)嚢栎?取，然后靜置或離心分相，得含赤霉素的有機(jī)相，萃取率達(dá)99%以上， 不加入鹽的對(duì)照組，其萃取率為8權(quán)利要求
1、一種赤霉素的提取方法，其特征在于向含有赤霉素的發(fā)酵濾液中加入重量/體積比為10～40％氯化鈉或硫酸鈉，充分混合，待赤霉素析出完成，進(jìn)行固液分離，即得含赤霉素的粗提物。
2、 一種赤霉素的提取方法，其特征在于向含有赤霉素的發(fā)酵濾 液中加入重量/體積比為5~30%氯化鈉或硫酸鈉，同時(shí)加入相當(dāng)于發(fā) 酵濾液體積的5~100%的乙酸乙酯，充分混合，然后靜置或離心分相， 即可獲得含赤霉素的有機(jī)相。
全文摘要
本發(fā)明技術(shù)是用鹽析法從發(fā)酵濾液中提取赤霉素，方法要點(diǎn)是向含有赤霉素的發(fā)酵濾液中加入足夠量的氯化鈉或硫酸鈉，赤霉素即從濾液中析出，經(jīng)固液分離，得含赤霉素的粗提物，粗提物收率大于98％。
文檔編號(hào)C12P27/00GK101531646SQ200810084610
公開日2009年9月16日 申請(qǐng)日期2008年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月13日
發(fā)明者孫玉勝, 戴曉曦, 潘貞德, 王玉萬(wàn), 蘭 馬 申請(qǐng)人:邁德金生物技術(shù)(北京)有限公司