專利名稱：一種甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體制備方法，屬于微量元素鋅強化食品技
術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
鋅是人體必須的微量元素，在人體生長發(fā)育過程中起著及其重要的作用，常被人 們譽為"生命之花"和"智力之源"。缺鋅為導(dǎo)致兒童厭食、偏食，生長發(fā)育不良；孕婦妊娠 反應(yīng)加重，胎兒發(fā)育遲緩等問題。鋅添加劑的發(fā)展經(jīng)歷了三個階段，第一代產(chǎn)品為無機鋅鹽 類，代表產(chǎn)品為硫酸鋅，第二代產(chǎn)品為一些簡單的有機酸鋅鹽，如葡萄糖酸鋅、甘草鋅等，但 以上兩類產(chǎn)品均存在其應(yīng)用弊端，使用有明顯的副作用。無機鹽不僅吸收利用率差，而且容 易造成環(huán)境污染，資源浪費，影響食品組分中其他營養(yǎng)物質(zhì)。而簡單的有機酸鋅鹽也仍然難 以克服吸收利用率低的缺陷，且對腸道功能發(fā)育不全的兒童不適宜。第三代產(chǎn)品為氨基酸 螯合鋅，不少研究報道證明氨基酸螯合鋅有更高的生物利用率、顯效快、無剌激、無毒副作 用、更易于吸收以及體內(nèi)含量的自我調(diào)節(jié)。因此，鋅的氨基酸螯合物在最近十幾年來被廣泛 應(yīng)用在食物的鋅強化和缺鋅的治療中，其中甘氨酸螯合鋅的研究和應(yīng)用最為普遍。
大量研究表明，甘氨酸螯合鋅具有較高的生物學(xué)效價，是接近于人體內(nèi)天然形態(tài) 的微量元素補充劑，可以完全被人體吸收和利用，且具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性，既避免了礦物 質(zhì)之間的相互拮抗作用，又消除了無機鹽對維生素和脂類物質(zhì)氧化的弊端，同時甘氨酸螯 合鋅具有溶解性好、吸收率高、抗干擾、無剌激、無毒害等優(yōu)點，在飼料、食品工業(yè)中得到了 廣泛的應(yīng)用，但是甘氨酸螯合鋅作為一種金屬絡(luò)合物，在強酸環(huán)境中易于解離。甘氨酸螯合 鋅在人體消化系統(tǒng)中經(jīng)過胃環(huán)境時，胃液的強酸性會使甘氨酸螯合鋅嚴(yán)重解離，降低了它 的生物利用率，使甘氨酸螯合鋅的生物利用率遠(yuǎn)低于所預(yù)期的水平。 迄今為止，國內(nèi)外未見有關(guān)于甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體制備的報道。脂質(zhì)體制劑 是以卵磷脂等兩性物質(zhì)為基礎(chǔ)的制劑，是將待包封的活性物質(zhì)包封于類脂質(zhì)雙分子層的薄 膜中間或者是包封于類脂質(zhì)雙分子層的內(nèi)水相中得到的。由于活性物質(zhì)被包封在脂質(zhì)體 中，具有長效、靶向等優(yōu)點，脂質(zhì)體制劑在新產(chǎn)品開發(fā)方面表現(xiàn)出極大的開發(fā)潛力。許多研 究機構(gòu)和制藥公司都致力于脂質(zhì)體制劑產(chǎn)品的開發(fā)，其中一個重要的應(yīng)用是保護所包封的 活性物質(zhì)不受外界環(huán)境的破壞。將凍干保護劑加入到制得的脂質(zhì)體分散液中，冷凍干燥，制 備得到甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體，可增加脂質(zhì)體的物理化學(xué)穩(wěn)定性，減小產(chǎn)品的體積，便于 貯存和運輸，延長食品貨架期，同時方便食品加工及應(yīng)用，擴展其應(yīng)用領(lǐng)域。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體制備方法，增強甘氨酸螯合鋅 在胃液強酸體系中的穩(wěn)定性，提高生物利用率，達到更好的補鋅效果，并且能夠更方便地貯 存、運輸，延長食品貨架期，使其更廣泛的應(yīng)用于食品體系。 本發(fā)明的技術(shù)方案以甘氨酸螯合鋅為芯材，卵磷脂、膽固醇為膜材，輔以吐溫80，采用反相蒸發(fā)法制備甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體懸浮液，然后采用冷凍干燥法制備甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體。 甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體的制備方法，包括 (1)甘氨酸螯合鋅水溶液的配制將甘氨酸螯合鋅溶于去離子水中，控制甘氨酸螯合鋅的濃度《15mg/mL ;(2)脂質(zhì)無水乙醚溶液的配制將卵磷脂、膽固醇按質(zhì)量比io : i 5 : i溶于
無水乙醚，控制卵磷脂在其乙醚溶液中的濃度《25mg/mL ; (3)乳狀液的制備將甘氨酸螯合鋅水溶液和脂質(zhì)無水乙醚溶液以體積比l : 3
混合，于冰水浴中超聲至混合物變?yōu)閱蜗喾稚Ⅲw系，形成油包水型乳狀液； (4)甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液的生成將形成的油包水型乳狀液于30°C
4(TC水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去無水乙醚，去除無水乙醚時有凝膠生成，進一步旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，凝膠塌
陷，形成混懸液后，加入濃度為12mg/mL 28mg/mL吐溫80的水溶液，使溶液中含有的吐溫
80與卵磷脂的質(zhì)量比為4 : 5 5 : 4，將該體系在3(TC 4(TC水浴下旋轉(zhuǎn)水合15 30
分鐘；得到甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液； (5)凍干保護劑的加入將凍干保護劑以保護劑卵磷脂的質(zhì)量比^ 6 : 1的量加入甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液中； (6)前體脂質(zhì)體的生成將加入了凍干保護劑的甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液冷凍干燥，產(chǎn)品即為甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體。 所述的甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于所述的凍干保護劑為葡萄糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖或海藻糖。 所述的甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體的制備方法，其中凍干保護劑的加入優(yōu)選為將凍干保
護劑以凍干保護劑卵磷脂的質(zhì)量比^ 20 : i的量加入甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液中。 所述的甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于所述的冷凍干燥條件為溫度-39"，真空度23. 8Pa，干燥時間24h。 甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體的復(fù)水取0.2g甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體，于p朋.8-pH7. 0的磷酸緩沖液中分散，3min內(nèi)可完全形成分散液，即經(jīng)甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體復(fù)水，又重新得到了甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體懸浮液。用EDTA滴定法測定包封芯材的保留率，包封芯材保留率在75% -96%。 甘氨酸螯合鋅脂質(zhì)體復(fù)水后粒徑的測定采用動態(tài)光散射粒度儀進行測定，測定溫度為25t:，樣品稀釋至卵磷脂質(zhì)量濃度0. 025%。制得的甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體復(fù)水后的平均粒徑在100nm-250nm。 本發(fā)明的有益效果以甘氨酸螯合鋅為芯材，卵磷脂、膽固醇為膜材，輔以吐溫80，采用反相蒸發(fā)法制備甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體，然后冷凍干燥制備出甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體?？稍鰪姼拾彼狎箱\在胃酸的強酸性體系中的穩(wěn)定性，達到提高生物利用率和更好的補鋅效果，并能使其能夠增加脂質(zhì)體的物理化學(xué)穩(wěn)定性，更方便地貯存、運輸，和在更廣泛的食品體系中應(yīng)用。
具體實施方式
實施例1
稱取卵磷脂200mg、膽固醇20mg，溶于30mL無水乙醚中(有機相)；稱取20mg甘氨酸螯合鋅溶解在10mL去離子水中(水相)。將所得有機相和水相混合，經(jīng)過超聲處理形成穩(wěn)定均一的油包水型乳狀液，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，35t:水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，5 IO分鐘會有凝膠狀生成，隨著旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)繼續(xù)(真空度至O. 05mpa)，凝膠塌陷，保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶中加入10mL濃度為25mg/mL的吐溫80的水溶液，35t:水浴中旋轉(zhuǎn)水合30分鐘。水合后，即得甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液。移取甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液20mL于表面皿中，分散液中含有卵磷脂質(zhì)量為200mg，加入4g葡萄糖做凍干保護劑。首先將冷凍干燥機預(yù)冷20分鐘至_391:，然后將樣品放入，抽真空至23. 8Pa，冷凍24h，所得樣品保存于干燥器中，所得到包封芯材的保留率為75. 14%，粒徑分布為20nm-400nm。
實施例2 稱卵磷脂300mg、膽固醇60mg，溶于30mL無水乙醚中(有機相)；稱120mg甘氨酸螯合鋅溶解在10mL去離子水中(水相)。將所得有機相和水相混合，經(jīng)過超聲處理形成穩(wěn)定均一的油包水型乳狀液，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，4(TC水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，5 10分鐘會有凝膠狀生成，隨著旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)繼續(xù)(真空度至0. 05mpa)，凝膠塌陷，保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶中加入20mL 15mg/mL吐溫80水溶液，4(TC水浴中旋轉(zhuǎn)水合30分鐘。水合后即得甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液。移取甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液20mL于表面皿中，分散液中含有卵磷脂質(zhì)量為200mg，加入4g乳糖做凍干保護劑。首先將冷凍干燥機預(yù)冷20分鐘至-39°C ，然后將樣品放入，抽真空至23. 8Pa，冷凍24h，所得樣品保存于干燥器中，所得到包封芯材的保留率為80. 64%，粒徑分布為20nm-500nm。
實施例3 稱卵磷脂250mg、膽固醇30mg，溶于24mL無水乙醚中(有機相)；稱100mg甘氨酸螯合鋅溶解在8mL去離子水中(水相)。將所得有機相和水相混合，經(jīng)過超聲處理形成穩(wěn)定均一的油包水型乳狀液，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，4(TC水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，5 10分鐘會有凝膠狀生成，隨著旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)繼續(xù)(真空度至0. 05mpa)，凝膠塌陷，保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶中加入含有200mg吐溫80的水溶液12mL，35t:水浴中旋轉(zhuǎn)水合30分鐘。即得甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液。移取甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液20mL于表面皿中，分散液中含有卵磷脂質(zhì)量為200mg，加入4g蔗糖做凍干保護劑。首先將冷凍干燥機預(yù)冷20分鐘至-39°C ，然后將樣品放入，抽真空至23. 8Pa，冷凍24h，所得樣品保存于干燥器中，所得到包封芯材的保留率為85. 43%，粒徑分布為30nm-400nm。
實施例4 稱卵磷脂250mg、膽固醇30mg，溶于24mL無水乙醚中(有機相)；稱20mg甘氨酸螯合鋅溶解在8mL去離子水中(水相)。將所得有機相和水相混合，經(jīng)過超聲處理形成穩(wěn)定均一的油包水型乳狀液，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，4(TC水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，5 10分鐘會有凝膠狀生成，隨著旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)繼續(xù)(真空度至0. 05mpa)，凝膠塌陷，保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶中加入含有200mg吐溫80的水溶液12mL，35t:水浴中旋轉(zhuǎn)水合30分鐘。水合后，即得甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液。移取甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液20mL于表面皿中，分散液中含有卵磷脂質(zhì)量為200mg，加入4g麥芽糖做凍干保護劑。首先將冷凍干燥機預(yù)冷20分鐘至-39°C ，然后將樣品放入，抽真空至23. 8Pa，冷凍24h，
5所得樣品保存于干燥器中，所得到包封芯材的保留率為79. 12%，粒徑分布為30nm-500nm。
實施例5 稱卵磷脂250mg、膽固醇30mg，溶于24mL無水乙醚中(有機相)；稱20mg甘氨酸螯合鋅溶解在8mL去離子水中(水相)。將所得有機相和水相混合，經(jīng)過超聲處理形成穩(wěn)定均一的油包水型乳狀液，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，4(TC水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，5 10分鐘會有凝膠狀生成，隨著旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)繼續(xù)(真空度至0. 05mpa)，凝膠塌陷，保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶中加入含有200mg吐溫80的水溶液12mL，35t:水浴中旋轉(zhuǎn)水合30分鐘。移取甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液20mL于表面皿中，分散液中含有卵磷脂質(zhì)量為200mg，加入4g海藻糖做凍干保護劑。首先將冷凍干燥機預(yù)冷20分鐘至_39°C，然后將樣品放入，抽真空至23. 8Pa，冷凍24h，所得樣品保存于干燥器中，所得到包封芯材的保留率為95. 34%，粒徑分布為20nm-400nm。
權(quán)利要求
一種甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體的制備方法，包括(1)甘氨酸螯合鋅水溶液的配制將甘氨酸螯合鋅溶于去離子水中，控制甘氨酸螯合鋅的濃度≤15mg/mL；(2)脂質(zhì)無水乙醚溶液的配制將卵磷脂、膽固醇按質(zhì)量比10∶1～5∶1溶于無水乙醚，控制卵磷脂在其乙醚溶液中的濃度≤25mg/mL；(3)乳狀液的制備將甘氨酸螯合鋅水溶液和脂質(zhì)無水乙醚溶液以體積比1∶3混合，于冰水浴中超聲至混合物變?yōu)閱蜗喾稚Ⅲw系，形成油包水型乳狀液；(4)甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液的生成將形成的油包水型乳狀液于30℃～40℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去無水乙醚，去除無水乙醚時有凝膠生成，進一步旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，凝膠塌陷，形成混懸液后，加入濃度為12mg/mL～28mg/mL吐溫80的水溶液，使溶液中含有的吐溫80與卵磷脂的質(zhì)量比為4∶5～5∶4，將該體系在30℃～40℃水浴下旋轉(zhuǎn)水合15～30分鐘；得到甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液；(5)凍干保護劑的加入將凍干保護劑以凍干保護劑∶卵磷脂的質(zhì)量比≥6∶1的量加入甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液中；(6)前體脂質(zhì)體的生成將加入了凍干保護劑的甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液冷凍干燥，產(chǎn)品即為甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體。
2. 如權(quán)利要求1所述的甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于所述的凍干 保護劑為葡萄糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖或海藻糖。
3. 如權(quán)利要求1所述的甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于所述的凍干保護劑的加入為將凍干保護劑以凍干保護劑卵磷脂的質(zhì)量比^20 : i的量加入甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液中。
4. 如權(quán)利要求1所述的甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于所述的冷凍 干燥條件為溫度-39t:，真空度23. 8Pa，干燥時間24h。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體的制備方法，屬于微量元素鋅強化食品技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明采用反相蒸發(fā)法制備甘氨酸螯合鋅納米脂質(zhì)體分散液，然后冷凍干燥制備出甘氨酸螯合鋅前體脂質(zhì)體。不同的凍干保護劑得到的前體脂質(zhì)體復(fù)水后包封芯材的保留率可達75％～96％，平均粒徑在100到250nm之間，可增加脂質(zhì)體的物理化學(xué)穩(wěn)定性，便于貯存和運輸，方便食品加工及應(yīng)用，擴展其應(yīng)用領(lǐng)域。
文檔編號A23L1/304GK101720938SQ20091022212
公開日2010年6月9日 申請日期2009年11月10日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月10日
發(fā)明者丁保淼, 樂琳, 夏書芹, 宋詩清, 張曉鳴, 賈承勝, 韓露, 黃梅桂 申請人:江南大學(xué)