專利名稱：一種易馴食人工飼料鱖魚(yú)相關(guān)基因snp分子標(biāo)記的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于魚(yú)類分子標(biāo)記制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及ー種與易馴食人工飼料鱖魚(yú)相關(guān)基因的SNP分子標(biāo)記的制備，所述的分子標(biāo)記可應(yīng)用于鱖魚(yú)育種基因型的輔助選擇。
背景技術(shù)：
鱖又稱鱖魚(yú)(Siniperca chuatsi)是淡水名貴魚(yú)類,隸屬于S盧形目S盧亞目，俗稱桂花魚(yú)、胖鱖、季花魚(yú)等。翹嘴鱖由于其具有生長(zhǎng)速度快等特性，已成為中國(guó)鱖養(yǎng)殖中的主養(yǎng)品種，但這種魚(yú)食性奇特，終生以活魚(yú)蝦為食，通常情況下絕對(duì)拒食死餌或配合飼料，這種 現(xiàn)象在魚(yú)類中十分罕見(jiàn)[1]。鱖商品化養(yǎng)殖歷來(lái)以投喂活餌進(jìn)行，鱖魚(yú)苗出膜即以其它種魚(yú)苗為食，因此自然條件下苗種成活率低，生產(chǎn)過(guò)程中，苗種培育及其活餌料供應(yīng)成了其養(yǎng)殖生產(chǎn)迅速大規(guī)模發(fā)展的兩大制約因素。能否使鱖通過(guò)人工馴化，轉(zhuǎn)為攝食非活餌，已成為鱖魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵。近年來(lái)，我國(guó)的鱖魚(yú)人工飼料研究取得了突破性進(jìn)展，吳遵霖等[2]在Im3網(wǎng)箱中用配合飼料馴飼鱖魚(yú)幼魚(yú)獲得成功，共馴化幼鱖4642尾，存活率達(dá)89. 6%，飼料系數(shù)I. 68-1. 78。梁旭方等[3_4]在幼鱖食性馴化取得成功的基礎(chǔ)上，又在水庫(kù)網(wǎng)箱中開(kāi)展了鮮魚(yú)、魚(yú)塊和配合飼料馴飼鱖魚(yú)2齡魚(yú)種(體長(zhǎng)17-21cm)的試驗(yàn)，試驗(yàn)亦獲得成功，馴化率分別達(dá)到100%、100%和88. 4%，飼料系數(shù)分別為I. 6、I. 4和2. 7，共馴化出鱖魚(yú)2齡魚(yú)種4047尾。配合飼料馴飼成功，只是提供整個(gè)養(yǎng)殖過(guò)程ー個(gè)良好的基礎(chǔ)和開(kāi)端。在長(zhǎng)期的養(yǎng)殖過(guò)程中，我們發(fā)現(xiàn)通過(guò)馴養(yǎng)，能逐步誘導(dǎo)部分鱖開(kāi)始以非活餌為食，即為易馴化鱖；而另一部分鱖則至死都只以新鮮活餌為食，即不易馴化鱖。在魚(yú)類中，NPY有促進(jìn)食欲作用與機(jī)體的能量平衡狀況有關(guān)[5]。魚(yú)類通過(guò)外周和下丘腦的攝食調(diào)控因子來(lái)調(diào)控NPY的分泌；當(dāng)能量處于正平衡時(shí)，瘦素和胰島素分泌増加，使NPY的分泌受到抑制；當(dāng)能量處于負(fù)平衡時(shí)，糖皮質(zhì)激素、刺鼠相關(guān)肽(AGRP)、Ghrelin和orexin的分泌増加，它們能啟動(dòng)NPY神經(jīng)元使NPY分泌増加，從而起促攝食作用。
此外，食欲促進(jìn)作用與相關(guān)特異性受體有夫。禁食24_48h的金魚(yú)下丘腦有大量的NPYmRNA表達(dá)；而禁食72h后的金魚(yú)大腦的端腦的前視區(qū)(telencephalonpre-optic)及丘腦頂蓋區(qū)域(optic tectum-thalamus regions)亦可找到NPY mRNA表達(dá)[6づ]。金魚(yú)腦室注射(i. c. V) NPY可増加金魚(yú)的攝食量M。同時(shí)，將哺乳動(dòng)物Yl或Y5受體拮抗劑注射入金魚(yú)腦室，可抑制NPY誘導(dǎo)的攝食活動(dòng)[9_1CI]。Narnaware [11]等在金魚(yú)腦室注射NPY Yl([31Leu，34Pro]NPY)、Y2 (NPY2-36)、及 Y5 ([D_32Trp]NPY)等受體激動(dòng)劑 2h 后，Yl 及 Y5 可促進(jìn)金魚(yú)的攝食活動(dòng)，而Y2受體對(duì)金魚(yú)的攝食活動(dòng)沒(méi)有影響。說(shuō)明金魚(yú)與哺乳動(dòng)物相似，推測(cè)在NPY所有受體中，Yl及Y5被認(rèn)為是其中樞神經(jīng)系統(tǒng)介導(dǎo)食欲調(diào)控過(guò)程中重要的受體[12_13]。但Aldegunde對(duì)虹鱒腦室注射Yl受體激動(dòng)劑(Leu31，Pro34) -NPY (4 u g)、Y2受體激動(dòng)劑NPY (3-36) (4ii g)及 Y5 受體激動(dòng)劑(cPPト7，NPY19-23，Ala31, Aib32, Gln34) -hPP (4 u g)后發(fā)現(xiàn)，注射Yl受體激動(dòng)劑的虹鱒增加短期(2h)攝食行為；注射Y2受體激動(dòng)劑的虹鱒的攝食行為明顯増加；但注射Y5受體激動(dòng)劑的虹鱒完全不受影響。推測(cè)在虹鱒中攝食是由Yl及Y2樣受體、而非Y5樣受體介導(dǎo)。這可能是虹鱒的Yl樣及Y2樣受體在食欲調(diào)節(jié)上有協(xié)作關(guān)系，而在金魚(yú)中這兩者是獨(dú)立作用的。魚(yú)類的攝食行為受到了食欲促進(jìn)因子包括了 NPY、食欲肽苯基ニ氫咪唑啉(orexin/hypocretin,包括 orexinA 及 orexinB)、甘丙月太(galanin, GAL)及 3 -END 的影響，它們都具食欲促進(jìn)作用。此外，在下丘腦還有食欲抑制因子包括胰酶分泌素、韓娃皮素(bombesin, BBS)、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(Corticotropin-releasingfactor family ofpeptides, CRF)、可卡因-安非他明調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄妝(Cocaine-andamphetamine-regulatedtranscript, CART)、速激肽(tachykinins)、瘦素及血清素(serotonin)有調(diào)節(jié)魚(yú)類食欲減退的作用[5’7’14’15]。NPY作為ー個(gè)最強(qiáng)的誘導(dǎo)因子，與這些促進(jìn)及抑制因子相互作用而對(duì)魚(yú)類的攝食進(jìn)行調(diào)節(jié)。胃蛋白酶(pepsinogen PEP)是ー種酸性胃消化蛋白水解酶，其前體胃蛋白酶原在成年脊椎動(dòng)物胃黏膜中合成，由胃主細(xì)胞分泌，在胃液的酸性條件下轉(zhuǎn)換成胃蛋白酶。PEP在酸性條件下水解蛋白質(zhì)[16]。這類酸性蛋白酶用作動(dòng)物飼料添加劑[17_18]，可促進(jìn)魚(yú)類對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，能夠提高飼料利用率，進(jìn)而促進(jìn)魚(yú)類生長(zhǎng)，魚(yú)類胃蛋白酶與食性關(guān)系ー直是研究的熱點(diǎn)，胃蛋白酶活性與食物適應(yīng)性關(guān)系已有不少報(bào)道[19_22]。脂類的貯存和代謝對(duì)動(dòng)物體維持正常的生命活動(dòng)具有重大意義。與陸生動(dòng)物相比，魚(yú)類對(duì)碳水化合物特別是多糖的利用效率較低，脂類作為其能源物質(zhì)就顯得更加重要。脂類是魚(yú)類必須的營(yíng)養(yǎng)元素之一，尤其是肉食性魚(yú)類所需能量的主要來(lái)源[23]。直接來(lái)自飼料或體內(nèi)代謝產(chǎn)生的游離脂肪酸(Free fatty acids，F(xiàn)FA)、甘油三酯是魚(yú)類維持生長(zhǎng)和生產(chǎn)的重要能源。脂酶是ー種水溶性的酶，對(duì)食物中脂肪的吸收、平衡能量和血漿脂蛋白的代謝起著重要的作用[24_25]，其中，脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase LPL)是脂蛋白代謝的關(guān)鍵酶之一，與機(jī)體的脂質(zhì)代謝及肥胖與否密切相關(guān)_，LPL生理功能是催化乳糜微粒(CM)和極低密度脂蛋白(VLDL)核心的甘油三酯(TG)分解為甘油和脂肪酸，以供組織氧化供能和貯存；LPL還參與VLDL和高密度脂蛋白(HDL)之間的載脂蛋白和磷脂的轉(zhuǎn)換[27]。而在牛、羊、豬、鼠等哺乳動(dòng)物中，LPL基因均已被克隆和定位，對(duì)豬LPL基因的研究已有關(guān)于其多態(tài)性及與經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)性研究的報(bào)道，如Harbitz等[28]對(duì)豬LPL基因多態(tài)性進(jìn)行了研究，但未確定不同基因型與生產(chǎn)性狀的關(guān)系。張依裕等[29]利用PCR-SSCP技術(shù)對(duì)鑒定鴨LPL基因內(nèi)含子5多態(tài)性進(jìn)行分析，結(jié)果在5發(fā)現(xiàn)4個(gè)SNP多態(tài)性，認(rèn)為AB基因型是體尺性狀的有利基因型。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，來(lái)自分子水平的信息，尤其是海量的DNA序列數(shù)據(jù)為人們進(jìn)ー步認(rèn)識(shí)和解釋生命的多祥性提供了前所未有的機(jī)會(huì)。因此，研究與遺傳表型相關(guān)的DNA序列變異就成了遺傳學(xué)研究的主要內(nèi)容之一。一般來(lái)說(shuō)，在同一物種的不同個(gè)體中，等位基因基本上具有相同的喊基序列。但實(shí)際上喊基序列在等位基因間常表現(xiàn)出或多或少的差異，這種差異稱為基因多態(tài)性。根據(jù)堿基序列改變的多少及堿基改變對(duì)相關(guān)檢測(cè)方法的影響，基因多態(tài)性分為多種類型。其中，最常見(jiàn)的是在基因組水平上有單個(gè)堿基變異所造成的DNA序列多態(tài)性,稱為單核苷酸多態(tài)性(single mucleotide polymorphism, SNP)。SNPs標(biāo)記在群體水平上的應(yīng)用研究最具有吸引力的方面是利用群體遺傳學(xué)中的連鎖不平 衡(linkagedisequilibrium, LD)原理來(lái)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析(associate study)。由于 SNPs 在基因組十分豐富，它的穩(wěn)定性和容易記錄使得人們可以利用連鎖不平衡分析來(lái)深入研究群體遺傳學(xué)的ー些基本理論問(wèn)題，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行關(guān)聯(lián)研究。進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析時(shí)，采用候選基因法來(lái)分析功能基因的等位基因與表型的關(guān)聯(lián)性，是ー個(gè)有效的方法。候選基因SNPs標(biāo)記是ー種重要的QTL定位方法，它通過(guò)掲示直接在生理上或在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中能得以表現(xiàn)的標(biāo)記基因與控制數(shù)量性狀的主效基因的關(guān)系，而用于QTL定位。國(guó)內(nèi)外學(xué)者通過(guò)候選基因法在尋找與水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)性狀相關(guān)的SNPs位點(diǎn)上也取得了初步成效。Tao W J等采用PCR-RFLP和雙向特異等位基因擴(kuò)增(bidirectionalamplificationof specific alleles, Bi-PASA)技術(shù)對(duì)北極嘉魚(yú)(Salvelinus alpinusL.)兩個(gè)全同胞家系中生長(zhǎng)相關(guān)的10個(gè)候選基因進(jìn)行了 SNPs位點(diǎn)的篩選，并進(jìn)行了 SNPs位點(diǎn)與生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)分析。結(jié)果表明，10個(gè)候選基因中有5個(gè)(GH1、GH2、IGFl、Pitl及GHRH/PACAP2)含有SNPs位點(diǎn)(8個(gè))，其中位于基因GHRH/PACAP2上的SNPs位點(diǎn)與北極嘉魚(yú)早期生長(zhǎng)速率存在極顯著性相關(guān)(P = 0. 00001)[31];同時(shí)表明，對(duì)于非模式生物，通過(guò)近緣種序列比對(duì)來(lái)設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增候選基因進(jìn)行QTL定位是ー種切實(shí)可行的方法。Gross等用TaqI酶切大西洋鮭(Salmo salarL. )GH1基因從第I外顯子到第4外顯子的1825bp片段,結(jié)果在內(nèi)含子3上發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的TaqI酶切位點(diǎn)，在I齡大西洋鮭大中小3個(gè)群體中共檢測(cè)到了 3個(gè)等位基因8種基因型，在這3個(gè)群體中不同等位基因和基因型的分布存在顯著性差異(P < 0. 05)[32] o Prudence 等對(duì)太平洋牡蟲(chóng)厲(Crassostrea gigas) amylase 基因(AMYA和AMYB)進(jìn)行了 PCR-RFLP分析，結(jié)果表明，AMYA和AMYB兩個(gè)基因的平均遺傳距離為I. 7cM ；三個(gè)家系中有兩個(gè)家系的牡蠣肉重與amylase基因型顯著相關(guān)，這對(duì)于遺傳育種中提高牡蠣生長(zhǎng)速度具有重要的潛在價(jià)值Xu等克隆了與尖吻鱸(Lates calcarifer)肌肉生長(zhǎng)相關(guān)的小清蛋白基因(PVALB1和PVALB2)，在PVALBl基因的3'非編碼區(qū)發(fā)現(xiàn)了一個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)，該位點(diǎn)與尖吻鱸孵出90天后的體重、體長(zhǎng)極顯著相關(guān)(P < 0. 01);同時(shí)通過(guò)直接測(cè)序法在PVALB2基因的三個(gè)內(nèi)含子上檢測(cè)到了三個(gè)SNPs位點(diǎn)，但沒(méi)有發(fā)現(xiàn)與尖吻鱸的生長(zhǎng)性狀存在相關(guān)性[34]。Kang等利用Southern雜交技術(shù)對(duì)牙鲆(Paralichthys olivaceus)GH第I外顯子到第5外顯子的2 114bp進(jìn)行了分析，Sau3AI限制性內(nèi)切酶在牙鲆大中小三個(gè)群體中有6個(gè)等位基因15種基因型，這些等位基因和基因型在三個(gè)不同群體中的分布具有顯著性差異(P < 0. 05)，可以將這些位點(diǎn)作為與牙鲆生長(zhǎng)相關(guān)的標(biāo)記[35]。Case等用DraI酶切大西洋鱈魚(yú)(Gadus morhua)和其他海域鱈魚(yú)pan I基因中的313bp片段,發(fā)現(xiàn)大西洋鱈魚(yú)pan I基因的變異對(duì)其生長(zhǎng)性狀有著重要的影響，其中屬于pan I ab基因型的鱈魚(yú)在出生十周后的體重和體長(zhǎng)明顯高于基因型pan I bb(P<0.01)[36]。相對(duì)其他動(dòng)植物而言，SNPs標(biāo)記應(yīng)用于水產(chǎn)動(dòng)物關(guān)聯(lián)分析方面起步較晚，研究還很少，但隨著SNPs技術(shù)的迅速發(fā)展和各國(guó)學(xué)者對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的重視，必將在水產(chǎn)動(dòng)物分子標(biāo)記輔助育種中得到廣泛的應(yīng)用。目前尚未見(jiàn)到有關(guān)馴食人工飼料鱖魚(yú)相關(guān)基因的SNP分子標(biāo)記的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供易馴食人工飼料鱖魚(yú)相關(guān)的三種基因的SNP分子標(biāo)記，利用分子標(biāo)記作為鱖魚(yú)育種基因型的輔助選擇。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案如下所示
本發(fā)明通過(guò)鱖兩周食性馴化及基因組DNA提取，引物設(shè)計(jì)，PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物純化測(cè)序、SNP篩查分析以及創(chuàng)造限制酶切位點(diǎn)PCR法確定基因型，根據(jù)CRS-PCR方法檢測(cè)到的基因型利用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，卡方檢驗(yàn)用于基因型與食性馴化表型的顯著性差異分析，獲得易馴食人工飼料鱖魚(yú)的三種基因的SNP分子標(biāo)記即神經(jīng)肽Y(neurop印tide Y)基因啟動(dòng)子區(qū)-1312位AA基因型(EF554595)，胃蛋白酶(p印sinogen)基因第7外顯子1、52位基因型組合CTCC和TTTT(EU908271)和脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase)基因第7外顯子 25、26、29 位基因型組合 ATTTCC (FJ811962)。
申請(qǐng)人通過(guò)基因克隆技術(shù)，得到三個(gè)與馴食人工飼料鱖魚(yú)相關(guān)的基因多態(tài)性SNP分子標(biāo)記，所述的分子標(biāo)記是下列基因片段所對(duì)應(yīng)的核苷酸序列(I)神經(jīng)肽Y基因的SNP分子標(biāo)記，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO :I所示，其中在該序列表的193bp處有ー個(gè)等位基因突變。(2)胃蛋白酶基因的SNP分子標(biāo)記，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO 2所示，其中在該序列表的Ibp處有ー個(gè)等位基因突變，在52bp處有ー個(gè)等位基因突變。(3)脂蛋白酯酶基因的SNP分子標(biāo)記，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO 3所示，其中在該序列表的25，26和29bp處分別有ー個(gè)等位基因突變。本發(fā)明制備的SNP分子標(biāo)記可應(yīng)用在檢測(cè)與馴食人工飼料鱖魚(yú)相關(guān)基因多態(tài)性中，可有效輔助選擇馴食人工飼料鱖魚(yú)基因型。


序列表SEQ ID NO 1是擴(kuò)增的神經(jīng)肽Y基因的SNP分子標(biāo)記的核苷酸序列，序列長(zhǎng)度為450bp。序列表SEQ ID NO 2是擴(kuò)增的胃蛋白酶基因的SNP分子標(biāo)記的核苷酸序列，序列長(zhǎng)度為141bp。序列表SEQ ID NO 3是擴(kuò)增的脂蛋白酷酶基因的SNP分子標(biāo)記的核昔酸序列，序列長(zhǎng)度為121bp。圖I :是本發(fā)明的實(shí)施例中鱖PEP基因第7外顯子的A位點(diǎn)不同基因型的測(cè)序峰圖分析。圖2 :是本發(fā)明的實(shí)施例中鱖PEP基因第7外顯子的B位點(diǎn)不同基因型的測(cè)序峰圖分析。圖3 :本發(fā)明的實(shí)施例中鱖PEP基因外顯子7A位點(diǎn)CRS-PCR產(chǎn)物HhaI酶切電泳結(jié)果分析。圖4 :本發(fā)明的實(shí)施例中鱖PEP基因外顯子7B位點(diǎn)CRS-PCR產(chǎn)物EcoRV酶切電泳結(jié)果分析。圖5 :本發(fā)明的實(shí)施例中鱖LPL基因第I外顯子的A、B位點(diǎn)不同基因型的測(cè)序峰圖分析。圖6 :本發(fā)明的實(shí)施例中鱖LPL基因第I外顯子的C位點(diǎn)不同基因型的測(cè)序峰圖分析。圖7 :本發(fā)明的實(shí)施例中鱖NPY基因5’調(diào)控區(qū)的SNP位點(diǎn)不同基因型的測(cè)序峰圖分析。圖8和圖9 :神經(jīng)肽Y基因突變前后的片段(下劃線顯示突變位點(diǎn))，其中圖8是神經(jīng)肽Y基因突變后的片段。圖9是神經(jīng)肽Y基因突變前的片段(下劃線顯示突變位點(diǎn))。
圖10和圖11 :是胃蛋白酶基因突變前后的片段；其中圖10是胃蛋白酶基因突變后的片段；圖11是胃蛋白酶基因突變前的片段(下劃線顯示突變位點(diǎn))。圖12和圖13脂蛋白酯酶基因突變前后的片段；其中圖12是脂蛋白酯酶基因突變后的片段；圖13是脂蛋白酯酶基因突變前的片段(下劃線顯示突變位點(diǎn))。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例II. I. I試驗(yàn)動(dòng)物 所用的鱖幼苗來(lái)自廣東省佛山市新榮魚(yú)苗繁殖場(chǎng)繁育并飼養(yǎng)到5-6cm規(guī)格，之后于廣東省淡水種苗繁育中心對(duì)其進(jìn)行喂食馴化。馴化的方法是先用鮮活的小魚(yú)喂食3天，饑餓2天；再用半死小魚(yú)喂食3天；用全死小魚(yú)喂食3天；之后將試驗(yàn)的鱖魚(yú)分成易馴化組和不易馴化兩組，取樣前對(duì)易馴化組和不易馴化組的鱖魚(yú)用鮮活的小魚(yú)喂食3天，饑餓2天后取樣。經(jīng)過(guò)兩周喂食馴化后，從1200尾喂養(yǎng)魚(yú)苗中挑選出易馴化和不易馴化兩組鱖幼苗,每組均為120尾。I. 2 方法I. 2. I鱖基因組DNA提取分離各組鱖的鰭條組織，鱖的鰭條組織基因組DNA提取與純化步驟按TIANGENDNA提取試劑盒(廣州合達(dá)生物科技有限公司產(chǎn)品)說(shuō)明書推薦方法操作。所得DNA樣本于-20°C保存。I. 2. 2引物設(shè)計(jì)根據(jù)本發(fā)明克隆得到的鱖魚(yú)NPY、PEP、LPL三個(gè)基因的核苷酸序列，在轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的基礎(chǔ)上挑選出三種基因SNP位點(diǎn)，用Primer Premier 5軟件對(duì)鱖基因設(shè)計(jì)引物(引物序列見(jiàn)表I所示)。表I本發(fā)明涉及的引物序列及PCR條件
引物名稱弓丨物序列益^用途
LPL-01F—~ CAAGACCCGTGAAATGATG外顯子 6 至外顯子
"TPL-OIRGTGGTGATGAGGAAGGAC8 (4805 6160bp)PEP-OIF"TGCGTGCTGATGGTATTC5g 外顯子 6 至外顯子PEP-OlRCTGCTGAAGATGGAATAG__ 8 (3800~ 5160bp)
"npy-oif gtcacctgtgtctaagata_ 60 30 5’ 側(cè)翼區(qū)
NPY-OlR TGGCGTCTCTTCTGCTC J__(-1933'351)1.2.3PCR 擴(kuò)增各引物和擴(kuò)增條件見(jiàn)表2。兩個(gè)組別每組各隨機(jī)挑30個(gè)樣本?？傆?jì)60個(gè)樣本直接測(cè)序。在0. 2mlPCR反應(yīng)管中依次加入表2的成份，將表2所述的混合液加ddH20至20. 0 yし表2 PCR擴(kuò)增體系的組成
權(quán)利要求
1.用于檢測(cè)與馴食人工飼料鱖魚(yú)相關(guān)基因多態(tài)性的SNP分子標(biāo)記，其特征在于，所述的分子標(biāo)記是下列基因片段所對(duì)應(yīng)的核苷酸序列 (1)神經(jīng)肽Y基因的SNP分子標(biāo)記，其核苷酸序列如序列表SEQID NO :I所示； (2)胃蛋白酶基因的SNP分子標(biāo)記，其核苷酸序列如序列表SEQID NO 2所示； (3)脂蛋白酯酶基因的SNP分子標(biāo)記，其核苷酸序列如序列表SEQID NO 3所示。
2.權(quán)利要求I所述的SNP分子標(biāo)記在檢測(cè)與馴食人工飼料鱖魚(yú)相關(guān)基因多態(tài)性中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明屬于魚(yú)的育種技術(shù)領(lǐng)域，涉及分子標(biāo)記技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明具體涉及一種用于檢測(cè)與馴食人工飼料鱖魚(yú)相關(guān)基因多態(tài)性的SNP分子標(biāo)記，其特征在于，所述的分子標(biāo)記是下列基因片段所對(duì)應(yīng)的核苷酸序列(1)神經(jīng)肽Y基因的SNP分子標(biāo)記，其核苷酸序列如序列表SEQ IDNO1所示；(2)胃蛋白酶基因的SNP分子標(biāo)記，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO2所示；(3)脂蛋白酯酶基因的SNP分子標(biāo)記，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO3所示。本發(fā)明為鱖魚(yú)馴食人工飼料鱖魚(yú)相關(guān)基因多態(tài)性的SNP分子標(biāo)記，可用于鱖魚(yú)的標(biāo)記輔助選擇。
文檔編號(hào)C12Q1/68GK102653757SQ20111005119
公開(kāi)日2012年9月5日 申請(qǐng)日期2011年3月3日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月3日
發(fā)明者何焱, 何珊, 葉衛(wèi), 方榮, 曹亮, 杜嵇華, 楊宇暉, 梁旭方, 符云 申請(qǐng)人:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)