專利名稱：羅斯氏菌(Roseburia)在治療和預(yù)防肥胖相關(guān)疾病中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物學領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及羅斯氏菌(Roseburia)在治療和預(yù)防肥胖相關(guān)疾病中的應(yīng)用，也涉及包含羅斯氏菌的組合物及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
肥胖癥是一種慢性疾病，許多因素都會導致肥胖，其發(fā)病起源至今未研究清楚。肥胖同時也是一系列疾病的誘導因子，如高血壓、糖尿病、冠心病、膽囊病、骨關(guān)節(jié)炎、睡眠中呼吸窒息、呼吸失調(diào)、子宮瘤、前列腺癌、乳腺癌和結(jié)腸癌等。根據(jù)NHI的報告，目前約有9700萬美國人超重和過度肥胖，其中與過度肥胖相關(guān)的II型糖尿病人數(shù)達到約1510萬人，每年約有20萬人死于與肥胖癥相關(guān)的疾病。肥胖通常是由于生理或生物化學功能改變而導致的體脂肪過剩。脂肪通常包括中性脂、磷脂和膽固醇。脂肪的增加是由于能量攝入大于能量的消耗。從發(fā)病原理上講，肥胖有兩種類型:(a)單純性肥胖(simple obesity)和(b)繼發(fā)性肥胖(second obesity)。單純性肥胖可劃分為先天性肥胖(idiopamic obesity)和后天性肥胖(acquired obesity),單純性肥胖患者數(shù)量可占95%以上的總肥胖數(shù)目。先天性肥胖是由大量的脂肪細胞所致，且常見于兒童期肥胖。后天性肥胖是由更大尺寸的脂肪細胞所致，且常見于成年期肥胖。繼發(fā)性肥胖又被稱為癥狀性肥胖，其通常是由內(nèi)分泌或新陳代謝疾病所致。目前有五種治療肥胖的策略:節(jié)食、鍛煉、行為治療、藥物治療和康復手術(shù)(therapetltic operation)。采取哪種策略主要視病人的健康危險因子和體重減輕的速度和效果而定，可選擇或組合這些策略對肥胖病人進行治療。其體重減輕的速度和效果受諸如年齡、身高、家族史和危險因子等多個因素的影響。飲食-鍛煉療法，即吃低熱量、低脂肪食物和進行有氧鍛煉，但這種方法一般認為對普通大眾不成功，且需要長期經(jīng)常性地堅持；去除體內(nèi)脂肪手術(shù)能達到立竿見影的效果，但存在諸多限制，如手術(shù)風險、除脂效果難以持久和花費過于昂貴等。藥物治療是目前主要的臨床治療肥胖及其肥胖相關(guān)疾病(如糖尿病)的方法。藥物治療的機制包括抑制食欲、增加能量消耗、刺激脂肪移動、降低甘油三酯合成和抑制脂肪吸收。目前主要的藥物為:苯丙醇胺(phenylpropanolamine, PPA)、羅氏鮮(orlistat,XenicalIII)和諾美婦(sibutramine,ReductilTM)。某些糖尿病人的高血糖通過飲食和/或鍛煉療法或使用上述治療化合物仍然不能得到適當控制。對于這些病人，應(yīng)使用外源胰島素。對病人來說，使用外源胰島素是很昂貴和痛苦的方法，還會給病人帶來多種并發(fā)癥。例如，由于沒有吃飯或不正常鍛煉，胰島素劑量的計算錯誤會導致胰島素響應(yīng)(低血糖)。此外，使用藥物還可能發(fā)生對藥物的局部或全身過敏或免疫抗性。目前本領(lǐng)域還沒有一種有效的、副作用小的治療和預(yù)防肥胖及其相關(guān)疾病的方法和藥物，因此本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)一種的新的，無毒副作用的，用于治療和預(yù)防肥胖及其相關(guān)疾病的藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供羅斯氏菌在治療和預(yù)防肥胖相關(guān)疾病方面的用途。本發(fā)明的另一目的是提供一種用于治療和預(yù)防肥胖相關(guān)疾病的藥品、飲料、食品組合物，或動物飼料組合物。本發(fā)明的另一目的是提供一種降低體重和/或血糖的方法及其應(yīng)用。在本發(fā)明的第一方面，提供了一種羅斯氏(Roseburia)菌的用途，所述菌用于制備預(yù)防和/或治療肥胖的組合物。 在另一優(yōu)選例中，所述組合物為藥物組合物、食品組合物、飲料組合物，或飼料組合物。在另一優(yōu)選例中，所述菌為Roseburia inulinivorans。在另一優(yōu)選例中，所述菌為Roseburia inulinivorans DSM 16841。在本發(fā)明的第二方面，提供了一種食品組合物，所述食品組合物含有有效量的羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物，以及余量的食品上可接受的載體。在另一優(yōu)選例中，所述的食物組合物的劑型選自固體、乳品、溶液制品、粉末制品、或懸浮液制品。在本發(fā)明的第三方面，提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物中含有有效量的羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物，以及藥學上可接受的載體。在另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物劑型選自顆粒劑、膠囊、片劑、粉末劑、口服液、混懸液、或乳劑。在另一優(yōu)選例中，本發(fā)明第二方面所述的食品組合物或本發(fā)明第三方面所述的藥物組合物配方如下:I X 10-1 X 1020cfu/mL的羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物；以及食品上或藥學上可接受的載體，和/或賦形劑。在另一優(yōu)選例中，本發(fā)明第二方面所述的食品組合物或本發(fā)明第三方面所述的組合物的配方如下:lX104_lX1015cfu/mL羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物；以及食品上或藥學上可接受的載體，和/或賦形劑。在另一優(yōu)選例中，本發(fā)明第二方面所述的食品組合物或本發(fā)明第三方面所述的組合物的配方如下:IX IO6-1X 10ncfu/mL羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物；以及食品上或藥學上可接受的載體，和/或賦形劑。在本發(fā)明第四方面，提供了本發(fā)明第二方面所述的食品組合物或本發(fā)明第三方面所述的藥物組合物的用途，所述組合物用于降低實驗對象的血糖和/或體重。在本發(fā)明的第五方面，提供了一種降低體重和/或血糖的方法，給所述實驗對象喂食本發(fā)明第二方面所述的食品組合物，和/或本發(fā)明第三方面所述的藥物組合物。應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在此不再一一累述。


圖1顯示了實驗分組信息和處理步驟。圖2顯示了飼喂10周內(nèi)3組鼠體重增加趨勢。圖3顯示了飼喂10周內(nèi)3組鼠體重增長差異P值比較結(jié)果。圖4顯示了飼喂第10周鼠血糖變化曲線。圖5顯示了飼喂第10周鼠血糖耐受情況(喂食葡萄糖溶液后120分鐘血糖值比較)。
具體實施例方式本發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入的研究和實驗，意外地發(fā)現(xiàn)，羅斯氏菌(Roseburia)具有預(yù)防和治療肥胖相關(guān)疾病的作用，將含有羅斯氏菌的活性組合物飼喂食實驗對象，發(fā)現(xiàn)該組合物能夠抑制體重增加，降低血糖，有效減輕糖尿病及肥胖等病癥。在此基礎(chǔ)上完成本發(fā)明。如本文所用，術(shù)語“含有”表示各種成分可一起應(yīng)用于本發(fā)明的混合物或組合物中。因此，術(shù)語“主要由...組成”和“由...組成”包含在術(shù)語“含有”中。如本文所用，術(shù)語“羅斯氏菌”，“Roseburia”可互換使用。在一個優(yōu)選例中，所述菌株為 Roseburia inulinivorans DSM 16841,來源于 DSMZ (Deutsche Sammlung vonMikroorganismen und Zellkulturen GmbH)。羅斯氏菌的生理特性如下:微彎桿，菌體大小約0.5 μ mX 2.3 5.0 μ m,不產(chǎn)芽孢,運動活躍,在細胞的凹面的近端處或一端生有一簇鞭毛。能夠發(fā)酵幾種碳水化合物，包括木糖、半乳糖、棉子糖、葡萄糖、麥芽糖、纖維二糖、蔗糖、淀粉和糖原，主要產(chǎn)生或只產(chǎn)生丁酸。培養(yǎng)條件:M2GSC培養(yǎng)基中，37°C厭氧培養(yǎng)2-5天。本發(fā)明提供了羅斯氏菌在治療和預(yù)防肥胖相關(guān)疾病方面的用途。受驗者攝入高脂肪的食物，菌株DSM 16841具有抑制該受驗者體重增加的能力。根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選例，經(jīng)菌株DSM 16841來治療的被喂以可導致肥胖的高脂肪的食物的CF57BL/6J小鼠，與未接受治療的對照組相比，其可保持體重無任何增加，且有助于血糖下降。因此，所述菌株能夠用以預(yù)防和治療肥胖及由肥胖引起的疾病，如糖尿病等。本發(fā)明還提供了一種組合物，優(yōu)選地，為藥物組合物。所述組合物包括有效量的羅斯氏菌，在一個優(yōu)選例中，所述組合物還包括選自下組的菌株:加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)，鼠李糖乳桿菌GM-020，鼠李糖乳桿菌PL60，或其組合。本發(fā)明藥物組合物可以以藥物片劑，針劑或膠囊的任一種形式給藥，所述藥物制劑包括賦形劑、藥物允許的媒介和載體，這些物質(zhì)可根據(jù)給藥途徑進行選擇。本發(fā)明中藥物制劑可進一步包含輔助的活性組份。乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、明膠、硅酸鈣、細結(jié)晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、纖維素、水、糖漿、甲基纖維素、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸鎂或礦物油等都可用作本發(fā)明中藥物組合物的載體、賦形劑或稀釋劑等。此外，本發(fā)明的藥物組合物可進一步包括潤滑劑、潤濕劑、乳化劑、懸浮液穩(wěn)定劑、防腐劑、甜味劑和香料等。本發(fā)明的藥物組合物可通過多種公知的方法以腸衣制劑生產(chǎn)，以便于藥物組合物的活性成分即微生物能順利通過胃而不被胃酸所破壞。另外，本發(fā)明的微生物可以常規(guī)方法制備的膠囊形式使用。例如，標準賦形劑和本發(fā)明的冷干微生物混合制成小球藥丸，然后將藥丸裝填入明膠膠囊中。此外，本發(fā)明的微生物和藥物允許使用的賦形劑如液體膠、纖維素、硅酸鹽或礦物油等混合制作懸浮液或分散液，這種懸浮液或分散液可裝入軟的明膠膠囊中。本發(fā)明的藥物組合物可制成腸衣片供口服使用。本申請中的術(shù)語-“腸衣”，包括所有常規(guī)藥物允許使用的包衣，這些包衣不被胃酸降解，但在小腸中能充分分解并快速釋放出本發(fā)明的微生物。木發(fā)明的腸衣能在合成胃酸如PH= I的HCl溶液中在36-38°C維持2小時以上，并優(yōu)選在合成腸液如pH = 7.0的緩沖液中在1.0小時內(nèi)分解。本發(fā)明的腸衣為以每片約16_30mg進行包衣,較佳地16_25mg,更佳地16_20mg進行包衣。本發(fā)明中腸衣厚度為5-100 μ m,理想的厚度為20-80 μ m。腸衣成分選自己公開知曉的常規(guī)聚合物。本發(fā)明優(yōu)選的腸衣由纖維素乙酸鄰苯二甲酸酯聚合物或偏苯三酸酯聚合物以及異丁烯酸的共聚物(例如，含有40%以上異丁烯酸和含有甲基纖維素鄰苯二甲酸羥丙酯或其酯類衍生物的異丁烯酸的共聚物)制備。本發(fā)明中腸衣所使用的纖維素乙酸鄰苯二甲酸酯的粘度為約45-90Cp，乙酰含量17-26%，鄰苯二甲酸含量30-40%。用于腸衣中的纖維素乙酸偏苯二酸酯粘度為約5_21cs,乙酞含量17-26%。纖維素乙酸偏苯三酸酯由Eastman科達公司生產(chǎn),可用于本發(fā)明中的腸衣材料。用于本發(fā)明腸衣中的羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酷，分子量一般為20，000-130, 000道爾頓，理想分子量為80，000-100, 000道爾頓，羥丙基含量為5-10 %，甲氧基含量為18-24%，鄰苯二甲酰基含量為21-35%。用于本發(fā)明腸衣中的羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酷為HP50，由日本Shin-EtsuChemidnl C0.Ltd.生產(chǎn)。HP50含有6-10%羥丙基，20-24%甲氧基，21-27%的丙基，其分子量為84，000道爾頓。另一種腸衣物質(zhì)為HP55，HP55含有5_9 %的羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯，18-22%甲氧基，27-35%的鄰苯二甲酸，其分子量為78,000道爾頓。本發(fā)明腸衣如下制備:使用常規(guī)方法將腸衣溶液噴霧到核心上。該腸包衣方法中所有溶劑為醇類(如乙醇)、酮類(如丙酮)、鹵代烴化合物(如二氯甲烷)、或其組合物。將軟化劑如二 -正丁基鄰苯二甲酸酯和三乙酸甘油酯加入到腸衣溶液中，其比例為I份包衣物對約0.05份或約0.3份軟化劑。噴霧方法優(yōu)選連續(xù)執(zhí)行，所噴霧的料量可根據(jù)包衣所采用的條件進行控制。噴霧壓力可隨意調(diào)節(jié)，一般而言，能在平均1-1.5巴壓力下獲得理想的結(jié)果。說明書中“藥物有效量”是指可對人和/或動物產(chǎn)生功能或活性的且可被人和/或動物所接受的量。比如，在本發(fā)明中，可制備含有l(wèi)X10-lX102°cfu/ml (特別的，可含有
IX IO4-1 X 1015cfu/mL ;更特別地，可含有I X IO6-1 X 10ncfu/ml)的羅斯氏菌和/或其代謝產(chǎn)物的制劑。當用于制備藥物組合物時，所用的羅斯氏菌或其代謝產(chǎn)物的有效劑量可隨施用的模式和待治療的疾病的嚴重程度而變化。適用于內(nèi)服的劑量形式，包含與固態(tài)或液態(tài)藥學上可接受的載體密切混合的約I X 10-1 X 1020cfu/ml (特別的，可含有I X IO4-1 X IO15Cfu/mL;更特別地，可含有l(wèi)X106-lX10ncfU/ml)的活性羅斯氏菌或發(fā)酵產(chǎn)生的活性成分?？烧{(diào)節(jié)此劑量方案以提供最佳治療應(yīng)答。例如，由治療狀況的迫切要求，可每天給予若干次分開的劑量，或?qū)┝堪幢壤販p少。所述的羅斯氏菌或其代謝產(chǎn)物可通過口服等途徑給予。固態(tài)載體包括:淀粉、乳糖、磷酸二鈣、微晶纖維素、蔗糖和白陶土，而液態(tài)載體包括:培養(yǎng)基、聚乙二醇、非離子型表面活性劑和食用油(如玉米油、花生油和芝麻油)，只要適合羅斯氏菌或其代謝產(chǎn)物特性和所需的特定給藥方式。在制備藥物組合物中通常使用的佐劑也可有利地被包括，例如調(diào)味齊U、色素、防腐劑和抗氧化劑如維生素E、維生素C、BHT和BHA。從易于制備和給藥的立場看，優(yōu)選的藥物組合物是固態(tài)組合物，尤其是片劑和固體填充或液體填充的膠囊?？诜o藥是優(yōu)選的。將本發(fā)明組合物施用給所述個體，每天給藥I次或多次。給藥劑量單位表示其形式上能分開且適用于人類或其他所有哺乳動物個體的劑量。每一單位含有藥物允許的載體和有效治療量的木發(fā)明微生物。給藥量隨病人的體重和肥胖嚴重程度、所包括的補充活性組份和所使用的微生物而變化。此外如可能，可分開給藥，并且如需要可連續(xù)給藥。因此，所述給藥量不會對本發(fā)明造成限制。此外，本發(fā)明中的“組合物”不僅意味著藥品而且表示可作為功能性食品和健康補充食品。在一個優(yōu)選例中，所述組合物包括:飲料、食品、藥品、動物飼料等。在本發(fā)明的一個優(yōu)選例中，還提供了一種食品組合物，它含有有效量的羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物，以及余量的食品上可接受的載體，所述的食物組合物的劑型選自固體、乳品、溶液制品、粉末制品、或懸浮液制品。在本發(fā)明的一個優(yōu)選例中，還提供了一種藥物組合物，它含有有效量的羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物，以及藥學上可接受的載體，所述的藥物組合物劑型選自顆粒劑、膠囊、片劑、粉末劑、口服液、混懸液、或乳劑。所述組合物的配方如下:1X 10-1 X 102Clcfu/mL的羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物；以及食品上或藥學上可接受的載體，和/或賦形劑。在另一優(yōu)選例中，所述組合物的配方如下:I X IO4-1 X 1015cfu/mL的羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物；以及食品上或藥學上可接受的載體，和/或賦形劑。在另一最優(yōu)選例中，所述組合物的配方如下:I X IO6-1 X 10ncfu/mL的羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物；以及食品上或藥學上可接受的載體，和/或賦形劑。本發(fā)明還提供一種降低體重和/或血糖的方法。在另一優(yōu)選例中，所述方法包括:攝取本發(fā)明的藥物組合物，食品組合物，飲料組合物，或其組合。所述實驗對象為人。在另一優(yōu)選例中，所述方法包括:攝取本發(fā)明的藥物組合物，食品組合物，或動物飼料，或其組合。所述實驗對象為動物，較佳地為鼠類，兔類。本發(fā)明的主要優(yōu)點在于:(a)本發(fā)明的羅斯氏菌具有優(yōu)異的預(yù)防肥胖及相關(guān)疾病特性；(b)本發(fā)明的羅斯氏菌具有治療肥胖及相關(guān)疾病，降低血糖的特性。
下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件如 Sambrook 等人，分子克隆:實驗室手冊(New York:Cold Spring Harbor LaboratoryPress, 1989)中所述的條件，或按照《微生物:實驗手冊》(James Cappuccino和NatalieSherman編，Pearson Education出版社)中所述的條件,或按照制造廠商所建議的條件。實施例1實驗材料小鼠:購買小鼠C57BL/6J(購自南方醫(yī)科大學實驗動物中心)，為正常飼養(yǎng)小鼠，6周齡，一共15只。小鼠生長過程處于同一環(huán)境，且喂養(yǎng)同樣的食物。菌株:Roseburiainulinivorans DSM 16841 菌株，購自 DSMZ (Deutsche Sammlungvon Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH)。高脂肪食物(HF):含58%豬油、25.6%的碳水化合物、16.4%的蛋白，購自北京華阜康生物科技股份有限公司。常規(guī)老鼠食物:購自南方醫(yī)科大學動物實驗中心。實施例2小鼠分組和誘導處理本實施例共設(shè)置3個實驗組，每組各5只。選取正常喂養(yǎng)(無需無菌)的6周齡C57BL/6J小鼠進行實驗。通過喂食法為小鼠腸道引入待檢驗的羅斯氏DSM 16841菌，通過葡萄糖耐量(OGGT)測試，鑒定小鼠的胰島素耐受能力。具體實驗分組信息和處理步驟見圖1。將購回的15只小鼠置于同一環(huán)境正常飼養(yǎng)至6周齡(食物無需消毒)，記錄喂食量并定期監(jiān)控小鼠體重變化與身體狀況。15只小鼠均分為3個實驗組(每實驗組5只重復)，分別置于超凈工作臺中，正式進入實驗期。根據(jù)實驗設(shè)計進行第一次喂食改變處理。在實驗期中小鼠必須生活在對應(yīng)的培養(yǎng)箱中，不可對換任意培養(yǎng)箱中的小鼠。保持培養(yǎng)箱中的清潔等問題。喂食方法采取灌喂(gavage)法，喂食定時定量，對所有小鼠統(tǒng)一標準。灌喂菌量定為0.15mL/10g體重，菌濃為I X 107cfu/mL，濃縮后濃度為IXlO8Cfu/mL,頻率為隔天一次。菌液需提前培養(yǎng)，每周活化保證新鮮，并分別測定濃度。實驗期中，每周記錄小鼠體重、體長、進食量等數(shù)據(jù)，用血糖儀檢測小鼠血糖含量，記錄各組小鼠出現(xiàn)糖尿病癥狀及的時間點。血糖測定方法:先饑餓10小時測定空腹血糖，再于喂食葡萄糖溶液后60分鐘和120分鐘測定餐后血糖。實施例4實驗結(jié)果:1.飼喂10周鼠體重增長結(jié)果見表I和圖2。表I
權(quán)利要求
1.一種羅斯氏(Roseburia)菌的用途，其特征在于，所述羅斯氏菌用于制備預(yù)防和/或治療肥胖的組合物。
2.按權(quán)利要求1所述的用途,其特征在于,所述菌為Roseburiainulinivorans。
3.按權(quán)利要求1所述的用途,其特征在于,所述菌為Roseburiainulinivorans DSM16841。
4.一種食品組合物，其特征在于，所述食品組合物含有有效量的羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物，以及余量的食品上可接受的載體。
5.按權(quán)利要求4所述的食物組合物，其特征在于，所述的食物組合物的劑型選自固體、乳品、溶液制品、粉末制品、或懸浮液制品。
6.一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物中含有有效量的羅斯氏(Roseburia)菌和/或其代謝產(chǎn)物，以及藥學上可接受的載體。
7.按權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物劑型為:顆粒劑、膠囊、片劑、粉末劑、口服液、混懸液、或乳劑。
8.權(quán)利要求4所述的食品組合物或權(quán)利要求6所述的藥物組合物的用途，其特征在于，所述組合物用于降低實驗對象的血糖和/或體重。
9.一種降低體重和/或血糖的方法，其特征在于，給所述實驗對象喂食權(quán)利要求4所述的食品組合物，和/或權(quán)利要求6所述的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供了羅斯氏菌(Roseburia)在治療和預(yù)防肥胖相關(guān)疾病中的應(yīng)用，本發(fā)明提供了羅斯氏菌在治療和預(yù)防肥胖相關(guān)疾病中的用途，還提供了一種用于治療和預(yù)防肥胖相關(guān)疾病的組合物，包括藥品、飲料、食品，或動物飼料組合物等，以及降低體重和/或血糖的方法。
文檔編號A23L2/52GK103082292SQ201110342339
公開日2013年5月8日 申請日期2011年11月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月2日
發(fā)明者覃俊杰, 李勝輝, 朱劍鋒, 李曉平, 梁穗莎, 王俊, 汪建, 楊煥明 申請人:深圳華大基因研究院, 深圳華大基因科技有限公司