專(zhuān)利名稱(chēng)：一種改良雙相血培養(yǎng)瓶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于體外診斷技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種改良雙相血培養(yǎng)瓶。
背景技術(shù)：
血培養(yǎng)是臨床維生素檢查中最重要的項(xiàng)目之一。臨床幾乎所有的發(fā)熱性疾病，如多種細(xì)菌性傳染病、肺炎、腦膜炎、泌尿系統(tǒng)感染、以及發(fā)熱待查等，均可能因細(xì)菌進(jìn)入血液而引起菌血癥、敗血癥。雙相血培養(yǎng)瓶主要用于血液中需氧和兼性厭氧菌的體外培養(yǎng)和無(wú)菌體液培養(yǎng)。所謂雙相血培養(yǎng)，是指培養(yǎng)瓶中存在雙相培養(yǎng)基，即固相和液相；培養(yǎng)時(shí)，先將血液以無(wú)菌操作方式注入液相培養(yǎng)基輕輕搖勻并浸潤(rùn)固相培養(yǎng)基表面，再進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng)。此雙相系統(tǒng)形成不同的氧濃度梯度，利于對(duì)氧濃度要求不同的維生素的生長(zhǎng)；并且固相的存在使分離培養(yǎng)變得簡(jiǎn)單，無(wú)污染，便于菌落的觀察，以及后續(xù)的藥敏試驗(yàn)及菌種鑒定。
為了盡快對(duì)病人作針對(duì)性抗菌治療，準(zhǔn)確、及時(shí)的血培養(yǎng)結(jié)果就尤為重要。而雙相血培養(yǎng)基的質(zhì)量好壞則對(duì)血培養(yǎng)的陽(yáng)性檢出率的高低和檢出時(shí)間起著決定性的作用。
然而目前市場(chǎng)上常用的雙相血培養(yǎng)瓶的質(zhì)量卻參差不齊，不容樂(lè)觀，質(zhì)量低劣的培養(yǎng)基不僅容易漏檢，降低細(xì)菌的陽(yáng)性檢出率，而且有可能因?yàn)槌省凹訇幮浴倍斐烧`診，這樣不僅會(huì)延長(zhǎng)患者的治療時(shí)間、增加醫(yī)療費(fèi)用，有時(shí)甚至?xí)氋F的治愈機(jī)會(huì)。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種配方齊全、診斷準(zhǔn)確高效的改良雙相血培養(yǎng)瓶。
本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種改良雙相血培養(yǎng)瓶，包括由腦心浸液瓊脂構(gòu)成的固相和由含抗凝劑的新鮮肉湯組成的液相，固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成(1)固相中，腦心浸液肉湯35(Γ400份、瓊脂粉20(Γ300份、酵母浸粉45 55份、核酸 15 25份、谷氨酸鈉5 15份，其余為去離子水，共計(jì)10000份；(2)液相中，腦心浸液肉湯35CT400份、酵母浸粉45 55份、聚茴香腦磺酸鈉2 3份、輔酶10. 05 O. 15份、維生素B6O. 5 I. 5份、維生素B1O. 001 O. 003份、維生素B12O. 0005 O. 0007 份、L-谷氨酰胺f 3份、L-胱氨酸O. 2^0. 3份、L-半胱氨酸鹽酸鹽5飛份、腺嘌呤硫酸鹽O. f O. 3份、鳥(niǎo)嘌呤鹽酸鹽O. 005、. 007份、硝酸鐵O. 003、. 005份、對(duì)氨基苯甲酸 O. ooro. 005份，其余為去離子水，共計(jì)10000份。其優(yōu)選的固相和液相中，各原料的重量配比為(1)固相中，腦心浸液肉湯385份、瓊脂粉230份、酵母浸粉50份、核酸20份、谷氨酸鈉 10份，其余為去離子水，共計(jì)10000份；(2)液相中，腦心浸液肉湯385份、酵母浸粉50份、聚茴香腦磺酸鈉2.5份、輔酶10. 10 份、維生素B6L O份、維生素B1O. 002份、維生素B12O. 0006份、L-谷氨酰胺2份、L-胱氨酸 O. 22份、L-半胱氨酸鹽酸鹽5. 18份、腺嘌呤硫酸鹽O. 2份、鳥(niǎo)嘌呤鹽酸鹽O. 006份、硝酸鐵O.004份、對(duì)氨基苯甲酸O. 0045份，其余為去離子水，共計(jì)10000份。
本發(fā)明所述原料均采用非高壓滅菌技術(shù)進(jìn)行除菌，有效減少營(yíng)養(yǎng)成分的流失，并采用負(fù)壓灌裝工藝，預(yù)充了二氧化碳?xì)怏w，使其不僅能促進(jìn)血中常見(jiàn)細(xì)菌的快速繁殖，更能支持各種苛養(yǎng)菌的生長(zhǎng)。
本發(fā)明的原料成分齊全，營(yíng)養(yǎng)豐富。固相中除了有腦心浸液肉湯、酵母浸粉等營(yíng)養(yǎng)成分和瓊脂粉等凝固物質(zhì)外，更是添加了核酸和谷氨酸鈉作為細(xì)菌生長(zhǎng)刺激劑，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明更能有效的加速細(xì)菌的生長(zhǎng)；這樣的一種配方組合，能夠大大縮短陽(yáng)性菌的發(fā)現(xiàn)時(shí)間， 特別是一些具有傳染性的病原菌，縮短檢出時(shí)間，更有利于醫(yī)院及時(shí)確定作消毒隔離或轉(zhuǎn)院處理，避免造成更嚴(yán)重的醫(yī)院感染。
液相中除了加入了腦心浸液肉湯、酵母浸粉等基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以外，更是添加了各種必需營(yíng)養(yǎng)素如L-谷氨酰胺、L-胱氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽等完整的氨基酸系列；維生素 B6、維生素B1、維生素B12等復(fù)合維生素；最適濃度的抗凝劑SPS，可有效中和溶菌酶、抑制吞噬細(xì)胞以及使某些氨基糖苷類(lèi)抗生素失活，使細(xì)菌更好地生長(zhǎng)；更是比常規(guī)血培養(yǎng)基多加了很多獨(dú)特的生長(zhǎng)因子輔酶I、腺嘌呤硫酸鹽、鳥(niǎo)嘌呤鹽酸鹽等，更有利于苛養(yǎng)菌如鏈球菌、奈瑟氏菌、嗜血桿菌的生長(zhǎng)檢出。
本發(fā)明中合理的配方比例和完善的營(yíng)養(yǎng)成分既能確保血液中常見(jiàn)細(xì)菌的快速繁殖，更有利于各種苛養(yǎng)菌的生長(zhǎng)。最重要的是能大大提高陽(yáng)性檢出率和檢出時(shí)間，培養(yǎng)結(jié)果準(zhǔn)確及時(shí)，對(duì)于臨床診斷和治療具有極其重要的意義。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例I:一種改良雙相血培養(yǎng)瓶，包括由腦心浸液瓊脂構(gòu)成的固相和由含抗凝劑的新鮮肉湯組成的液相，其中，固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成(1)固相中，腦心浸液肉湯350g、瓊脂粉200g、酵母浸粉45g、核酸15g、谷氨酸鈉5g，其余為去尚子水，共計(jì)IOkg;(2)液相中，腦心浸液肉湯350g、酵母浸粉45g、聚茴香腦磺酸鈉2g、輔酶10.05g、維生素B6O. 5g、維生素B1O. OOlg、維生素B12O. 0005g、L-谷氨酰胺lg、L-胱氨酸O. 2g、L-半胱氨酸鹽酸鹽5g、腺嘌呤硫酸鹽O. lg、鳥(niǎo)嘌呤鹽酸鹽O. 005g、硝酸鐵O. 003g、對(duì)氨基苯甲酸O.004g,其余為去離子水,共計(jì)10kg。
實(shí)施例2:一種改良雙相血培養(yǎng)瓶，包括由腦心浸液瓊脂構(gòu)成的固相和由含抗凝劑的新鮮肉湯組成的液相，其中，固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成(1)固相中，腦心浸液肉湯400g、瓊脂粉300g、酵母浸粉55g、核酸25g、谷氨酸鈉15g， 其余為去離子水，共計(jì)IOkg ；(2)液相中，腦心浸液肉湯400g、酵母浸粉55g、聚茴香腦磺酸鈉3g、輔酶10.15g、維生素B6L 5g、維生素B1O. 003g、維生素B12O. 0007g、L-谷氨酰胺3g、L-胱氨酸O. 3g、L-半胱氨酸鹽酸鹽6g、腺嘌呤硫酸鹽O. 3g、鳥(niǎo)嘌呤鹽酸鹽O. 007g、硝酸鐵O. 005g、對(duì)氨基苯甲酸O.005g,其余為去離子水,共計(jì)10kg。
實(shí)施例3:一種改良雙相血培養(yǎng)瓶，包括由腦心浸液瓊脂構(gòu)成的固相和由含抗凝劑的新鮮肉湯組成的液相，其中，固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成(I)固相中，腦心浸液肉湯385g、瓊脂粉230g、酵母浸粉50g、核酸20g、谷氨酸鈉10g，其余為去離子水，共計(jì)IOkg ；(2)液相中，腦心浸液肉湯385g、酵母浸粉50g、聚茴香腦磺酸鈉2. 5g、輔酶10. 10g、維生素B6L 0g、維生素B1O. 002g、維生素B12O. 0006g、L-谷氨酰胺2g、L-胱氨酸O. 22g、L-半胱氨酸鹽酸鹽5. 18g、腺嘌呤硫酸鹽O. 2g、鳥(niǎo)嘌呤鹽酸鹽O. 006g、硝酸鐵O. 004g、對(duì)氨基苯甲酸O. 0045g,其余為去離子水,共計(jì)10kg。
權(quán)利要求
1.一種改良雙相血培養(yǎng)瓶，包括由腦心浸液瓊脂構(gòu)成的固相和由含抗凝劑的新鮮肉湯組成的液相，其特征為，固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成(1)固相中， 腦心浸液肉湯35(Γ400份、瓊脂粉20(Γ300份、酵母浸粉45 55份、核酸15 25份、谷氨酸鈉5 15份，其余為去離子水，共計(jì)10000份；(2)液相中，腦心浸液肉湯35(Γ400份、酵母浸粉45 55份、聚茴香腦磺酸鈉2 3份、輔酶10. 05 O. 15份、維生素B6O. 5 I. 5份、維生素 B1O. 001 O. 003份、維生素B12O. 0005 O. 0007份、L-谷氨酰胺I 3份、L-胱氨酸O. 2 O. 3份、 L-半胱氨酸鹽酸鹽5飛份、腺嘌呤硫酸鹽O. Γ0. 3份、鳥(niǎo)嘌呤鹽酸鹽O. 005^0. 007份、硝酸鐵O. 003、. 005份、對(duì)氨基苯甲酸O. ΟΟΓΟ. 005份，其余為去離子水，共計(jì)10000份。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的改良雙相血培養(yǎng)瓶，其特征為，固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成(I)固相中，腦心浸液肉湯385份、瓊脂粉230份、酵母浸粉50份、核酸20份、谷氨酸鈉10份，其余為去離子水，共計(jì)10000份；(2)液相中，腦心浸液肉湯385 份、酵母浸粉50份、聚茴香腦磺酸鈉2. 5份、輔酶10. 10份、維生素B6L O份、維生素B1O. 002 份、維生素B12O. 0006份、L-谷氨酰胺2份、L-胱氨酸O. 22份、L-半胱氨酸鹽酸鹽5. 18份、 腺嘌呤硫酸鹽O. 2份、鳥(niǎo)嘌呤鹽酸鹽O. 006份、硝酸鐵O. 004份、對(duì)氨基苯甲酸O. 0045份， 其余為去離子水，共計(jì)10000份。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種改良雙相血培養(yǎng)瓶，其特征在于所述原料均采用非高壓滅菌技術(shù)進(jìn)行除菌，并采用負(fù)壓灌裝工藝，預(yù)充了二氧化碳?xì)怏w。
全文摘要
本發(fā)明屬于體外診斷技術(shù)領(lǐng)域，特別公開(kāi)了一種改良雙相血培養(yǎng)瓶。該改良雙相血培養(yǎng)瓶，固相由腦心浸液肉湯、瓊脂粉、酵母浸粉、核酸、谷氨酸鈉按一定重量配比，添加去離子水混合配制而成。液相由腦心浸液肉湯、酵母浸粉、聚茴香腦磺酸鈉、輔酶I，維生素B6、維生素B1、維生素B12、L-谷氨酰胺、L-胱氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽、腺嘌呤硫酸鹽、鳥(niǎo)嘌呤鹽酸鹽、硝酸鐵、對(duì)氨基苯甲酸，按一定重量配比，添加去離子水混合配制而成。本發(fā)明中合理的配方比例和完善的營(yíng)養(yǎng)成分既能確保血液中常見(jiàn)細(xì)菌的快速繁殖，更有利于各種苛養(yǎng)菌的生長(zhǎng)。最重要的是能大大提高陽(yáng)性檢出率和檢出時(shí)間，培養(yǎng)結(jié)果準(zhǔn)確及時(shí)，對(duì)于臨床診斷和治療具有極其重要的意義。
文檔編號(hào)C12M1/24GK102925345SQ20121047632
公開(kāi)日2013年2月13日 申請(qǐng)日期2012年11月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月22日
發(fā)明者寧春華, 聶暉, 孟俊華, 崔蘭蘭, 霍雨艷, 李福川, 陳玉芹, 譚坤 申請(qǐng)人:濟(jì)南百博生物技術(shù)有限責(zé)任公司