選擇性遞送分子及使用方法
【專利摘要】本文公開了一種選擇性遞送分子，其包含：(a)有效抑制或防止向細(xì)胞內(nèi)的攝取或組織保留的酸性序列(部分A)，(b)分子轉(zhuǎn)運(yùn)或保留序列(部分B)，和(c)部分A和部分B之間的連接體，和(d)至少一個(gè)負(fù)荷物部分。
【專利說明】選擇性遞送分子及使用方法
交叉引用
[0001]本申請(qǐng)要求2011年7月29日提交的名稱為“選擇性遞送分子及使用方法(Selective Delivery Molecules and Methods of Use) ” 的美國臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?1/513，287的優(yōu)先權(quán)，其公開內(nèi)容在此引入作為參考。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0002]在某些實(shí)施方案中，本文公開了式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db]
式I 其中，
X為可裂解的連接體；
A為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列的肽；
B為具有含7-9個(gè)堿性氨基酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為大分子；且
Da和Db各自獨(dú)立地選自顯像劑和治療劑；且
其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，B中堿性氨基酸的數(shù)目大于A中酸性氨基酸的數(shù)目。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、α-氨基酸、β-氨基酸或Y-氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、4和4各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙酰基L-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，cB為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cB為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為賴氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cM為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X能被蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X能被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X包含能被MMP2、MMP7、MMP9或MMP14裂解的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，X包含肽鍵。在一些實(shí)施方案中，X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C (me)-AG、RPLALWRS、ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL 和 RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C (me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列DPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLKL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，M選自蛋白質(zhì)、天然聚合物、合成聚合物或樹枝狀聚合物。在一些實(shí)施方案中，M選自葡聚糖、PEG聚合物、白蛋白或其組合。在一些實(shí)施方案中，M為 PEG。在一些實(shí)施方案中，M 選自 PEG5kDa、PEG12kDa、PEG20kDa、PEG30kDa 和 PEG40kDa。
在一些實(shí)施方案中，Da和Db是 一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行F0rsters/5熒光共振能量轉(zhuǎn)移。在一些實(shí)施方案中，DA和DB為Cy5和Cy7。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，DA和DB為Cy5和ICG。在一些實(shí)施方案中，Da和Db是熒光部分和熒光猝滅部分。在一些實(shí)施方案中，式 I 的分子為:SDM-14、SDM-15、SDM-23、SDM-24、SDM-25、SDM-26、SDM-27、SDM-32或 SDM-35。
[0003]在某些實(shí)施方案中，本文公開了式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db]
式I 其中，
X為可裂解的連接體；
A為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列的肽；
B為具有含7-9個(gè)堿性氨基酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且 Da和Db各自獨(dú)立地為顯像劑；且
其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，B中堿性氨基酸的數(shù)目大于A中酸性氨基酸的數(shù)目。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、α-氨基酸、β-氨基酸或Y-氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、4和4各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，cB為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cB為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為賴氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為對(duì)-4-乙酰基L-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X能被蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X能被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X包含能被MMP2、MMP7、MMP9或MMP14裂解的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，X包含肽鍵。在一些實(shí)施方案中，X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C (me)-AG、RPLALWRS、ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL 和 RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C (me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列DPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLKL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行F0rsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移。在一些實(shí)施方案中，04和08為075和Cy7。在一些實(shí)施方案中，04和08為075和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，04和08為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和ICG。在一些實(shí)施方案中，Da和Db是熒光部分和熒光猝滅部分。在一些實(shí)施方案中，式I的分子為:SDM-14、SDM-15, SDM-23、SDM-24、SDM-25、SDM-26、SDM-27、SDM-32 或 SDM-35。
[0004]在某些實(shí)施方案中，本文公開了式II的分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
A1-X1-B1 ；
式II 其中，
X1為可裂解的連接體；
A1為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列且具有第一反應(yīng)性氨基酸部分Ck的肽；
B1為具有含7-9個(gè)堿性氨基酸的序列且具有第二反應(yīng)性氨基酸部分cB的肽；且 A1-X1-B1在A1或X1上具有第三反應(yīng)性氨基酸部分cM ;且
其中cA能夠與含有Da的第一負(fù)荷物(cargo)部分反應(yīng)，cB能夠與含有Db的第二負(fù)荷物部分反應(yīng)，且cM能夠與含有M的大分子載體反應(yīng)形成式I的分子。
在一些實(shí)施方案中，CA、CB和Cm各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和Cm具有正交反應(yīng)性的官能團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、α-氨基酸、β-氨基酸或Y-氨基酸。在一些實(shí)施方案中，各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，(^、(^和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，cB為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cB為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CAS D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為賴氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與輕胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cM為對(duì)-4-乙酰基L-苯丙氨酸。
[0005]在某些實(shí)施方案中，本文公開了含有式I分子的組織樣品:
[Da-ca] -A- [cm-M] -X-B- [ Cb-Db]；
式I 其中，X為可裂解的連接體；
A為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列的肽；
B為具有含7-9個(gè)堿性氨基酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且 Da和Db各自獨(dú)立地為顯像劑；且
其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，所述組織樣品是病理學(xué)玻片或切片。在一些實(shí)施方案中，所述組織樣品是癌性的。在一些實(shí)施方案中，該癌性組織為:乳腺癌組織、結(jié)腸癌組織、鱗狀細(xì)胞癌組織、前列腺癌組織、黑素瘤組織或甲狀腺癌組織。在一些實(shí)施方案中，該癌性組織為乳腺癌組織。在一些實(shí)施方案中，該癌性組織為結(jié)腸癌組織。在一些實(shí)施方案中，A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，B中堿性氨基酸的數(shù)目大于A中酸性氨基酸的數(shù)目。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、cB和cM各自獨(dú)立地選`自D氨基酸、L氨基酸、α-氨基酸、β-氨基酸或Y-氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CAS D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為賴氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X能被蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X能被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X包含能被MMP2、MMP7、MMP9或MMP14裂解的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，X包含肽鍵。在一些實(shí)施方案中，X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C (me)-AG、RPLALWRS、ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL和RLQLK (Ac)。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C (me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列DPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLKL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLK (Ac)。在一些實(shí)施方案中，Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行FOrsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為cy5和cy7。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和ICG。在一些實(shí)施方案中，Da和Db是熒光部分和熒光猝滅部分。在一些實(shí)施方案中，式I的分子為:SDM-14、SDM-15、SDM-23、SDM-24、SDM-25、SDM-26、SDM-27、SDM-32 和 SDM-35。
[0006]在某些實(shí)施方案中，本文公開了將一對(duì)顯像劑遞送至目標(biāo)組織的方法，包括使目標(biāo)組織接觸式I的分子:
[Da-ca] -A- [cm-M] -X-B- [ Cb-Db]；
式I 其中，
X為可裂解的連接體；
A為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列的肽；
B為具 有含7-9個(gè)堿性氨基酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且 Da和Db各自獨(dú)立地為顯像劑；且
其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，所述目標(biāo)組織是癌性的。在一些實(shí)施方案中，該癌性組織為:乳腺癌組織、結(jié)直腸癌組織、鱗狀細(xì)胞癌組織、前列腺癌組織、黑素瘤組織和甲狀腺癌組織。在一些實(shí)施方案中，該癌性組織為乳腺癌組織。在一些實(shí)施方案中，該癌性組織為結(jié)腸癌組織。在一些實(shí)施方案中，A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，B中堿性氨基酸的數(shù)目大于A中酸性氨基酸的數(shù)目。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，(^、4和cM各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，(^、4和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、4和cM各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、α -氨基酸、β -氨基酸或Y -氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，cB為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cB為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為賴氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cM為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X能被蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X能被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X包含能被MMP2、MMP7、MMP9或MMP14裂解的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，X包含肽鍵。在一些實(shí)施方案中，X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C (me)-AG、RPLALWRS、ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL 和 RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C (me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列DPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLKL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，04和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行Forsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移。在一些實(shí)施方案中，04和08為075和Cy7。在一些實(shí)施方案中，04和08為075和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，04和08為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和ICG。在一些實(shí)施方案中，Da和Db是熒光部分和熒光猝滅部分。在一些實(shí)施方案中，式I的分子為:SDM-14、SDM-15, SDM-23、SDM-24、SDM-25、SDM-26、SDM-27、SDM-32 和 SDM-35。
[0007]在某些實(shí)施方案中，本文公開了對(duì)有需要的個(gè)體內(nèi)的目標(biāo)組織進(jìn)行可視化的方法，包括:
(a)對(duì)個(gè)體施用能定位至該個(gè)體內(nèi)目標(biāo)組織的式I的分子，
[Da-ca] -A- [cm-M] -X-B- [ Cb-Db]；
式I 其中，
X為可裂解的連接體；
A為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列的肽；
B為具有含7-9個(gè)堿性`氨基酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且 Da和Db各自獨(dú)立地為顯像劑；且
其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸；且
(b)使至少一種顯像劑可視化。
在一些實(shí)施方案中，所述組織是癌性的。在一些實(shí)施方案中，該癌性組織為:乳腺癌組織、結(jié)直腸癌組織、鱗狀細(xì)胞癌組織、前列腺癌組織、黑素瘤組織或甲狀腺癌組織。在一些實(shí)施方案中，該癌性細(xì)胞或組織為乳腺癌組織。在一些實(shí)施方案中，該癌性細(xì)胞或組織為結(jié)腸癌組織。在一些實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括將目標(biāo)組織從個(gè)體中手術(shù)移除。在一些實(shí)施方案中，圍繞目標(biāo)組織的手術(shù)切緣減少。在一些實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括由移除的目標(biāo)細(xì)胞或組織制備組織樣品。在一些實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括對(duì)癌性組織分期。在一些實(shí)施方案中，A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，B中堿性氨基酸的數(shù)目大于A中酸性氨基酸的數(shù)目。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，(^、4和cM各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，(^、4和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、4和cM各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、α -氨基酸、β -氨基酸或Y -氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，cB為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cB為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為賴氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cM為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X能被蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X能被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X包含能被MMP2、MMP7、MMP9或MMP14裂解的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，X包含肽鍵。在一些實(shí)施方案中，X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C (me)-AG、RPLALWRS、ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL 和 RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C (me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列DPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLKL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，04和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行FGrsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移。在一些實(shí)施方案中，04和08為075和Cy7。在一些實(shí)施方案中，04和08為075和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，04和08為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和ICG。在一些實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括使Da和Db之間的Fdrsters/突光共振能量轉(zhuǎn)移可視化。在一些實(shí)施方案中，Da和Db是熒光部分和熒光猝滅部分。在一些實(shí)施方案中，該分子選自:SDM-14、SDM-15, SDM-23、SDM-24、SDM-25、SDM-26、SDM-27、SDM-32 和 SDM-35。
[0008]在某些實(shí)施方案中，本文公開了式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db]
式I 其中，
X為可被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解的肽連接體；
A為具有含5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的序列的肽；
B為具有含8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且
Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行F6rsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移； 且
其中[Cm-M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-Ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[Cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成I虧或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CbSD-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CaS D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C(me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和Cy7。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和ICG0
[0009]在某些實(shí)施方案中，本文公開了式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db]
式I 其中，
X為可被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解的肽連接體；
A為具有含5個(gè)連續(xù)谷氨酸的序列的肽；
B為具有含8個(gè)連續(xù)精氨酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且
Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行I oisters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移；且
其中[Cm-M]結(jié)合至A或X上的任 意位置，[Da-Ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[Cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cj^P cM各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C (me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和Cy7。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和ICG。
[0010]在某些實(shí)施方案中，本文公開了式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db]
式I 其中，
X為可被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解的肽連接體；
A為具有含9個(gè)連續(xù)谷氨酸的序列的肽；
B為具有含9個(gè)連續(xù)精氨酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且
Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行F6rsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移；且
其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cj^P cM各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為對(duì)-4-乙酰基L-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C (me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和Cy7。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和ICG。
[0011]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-14的選擇性遞送分子。
[0012]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-15的選擇性遞送分子。
[0013]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-23的選擇性遞送分子。
[0014]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-24的選擇性遞送分子。
[0015]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-25的選擇性遞送分子。
[0016]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-26的選擇性遞送分子。
[0017]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-27的選擇性遞送分子。
[0018]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-32的選擇性遞送分子。
[0019]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-35的選擇性遞送分子。
[0020]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)肽P-3的肽。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0021]圖1通過示出注射SDM-6的3只不同小鼠的全鼠熒光圖像而例示了選擇性遞送分子(SDM)的效果。這些圖像是注射后2小時(shí)拍攝的。
在右手側(cè)小鼠上指示了用于計(jì)算對(duì)比度的腫瘤和對(duì)側(cè)組織。三只小鼠的平均對(duì)比度為
1.1。
[0022]圖2例示了選擇性遞送分子的參比熒光變化。在本圖中，SDM-9用InM MMP-2酶進(jìn)行裂解。供體(左圖)熒光的增加和受體(右圖)熒光的減少表明在肽裂解后FRET降低。
[0023]圖3例示了蛋白酶裂解后選擇性遞送分子的熒光增強(qiáng)。SDM-10在緩沖鹽水中用InM MMP-9酶進(jìn)行裂解。Cy5熒光在肽裂解后增加了 >100倍，因?yàn)殁鐒┤玖喜辉僭诜肿觾?nèi)連接至Cy5，并且其不再能夠有效地猝滅Cy5。
[0024]圖4例示了選擇性遞送分子SDM-10在被腫瘤勻漿物裂解后的熒光增強(qiáng)。選擇性遞送分子IO(SDM-1O)用HT-1080腫瘤勻漿物進(jìn)行裂解。在37°C下InM MMP-9或IOuL腫瘤組織勻漿物(TH2和TH3)與IuM化合物13在IOOuL緩沖液中混合24h。GM6001是MMPs的普通廣譜抑制劑。對(duì)照泳道含有SDM-6，其在完整的、未裂解的形式下為高度熒光性的，跑在凝膠頂部。由于有效的猝滅，未裂解的SDM-10是非熒光性的(左起第二列)。在被MMP-9裂解后，含有熒光團(tuán)的片段解除猝滅(變?yōu)楦叨葻晒庑缘?，并跑到接近凝膠底部。如凝膠中所示，腫瘤勻漿物也裂解SDM-10從而產(chǎn)生高熒光性的產(chǎn)物。該反應(yīng)被MMP抑制劑阻斷，表明該裂解是由于腫瘤相關(guān)的MMPs引起的。
[0025]圖5例示了在靜脈內(nèi)尾靜脈施用2.9nmol的各化合物6小時(shí)后3種熒光化合物的生物分布。tkSDM-Ι和SDM-2相比，SDM-6具有高5倍的腫瘤內(nèi)組織分布。選擇性遞送分子I和2具有相等數(shù)目的谷氨酸和精氨酸，賦予它們凈中性核心，而SDM-6由于含有更多帶正電荷的精氨酸而具有3+凈電荷。
[0026]圖6例示了 FRET發(fā)射比成像用于確定小鼠淋巴結(jié)中是否存在癌癥的應(yīng)用。發(fā)射比圖像用方程2產(chǎn)生，其中Expl=0.7秒、Exp2=4.1秒且k=20。右手圖示出了比率圖像，其顯示了轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)(左下黑箭頭指示的非常大的淋巴結(jié))與非轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)(其它箭頭)之間的高對(duì)比度。與非轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)的較低比率的較暗像素相比，較高的比率顯示為較亮的像素(轉(zhuǎn)移性)。
[0027]圖7例示了來自離體小鼠組織活性分析的結(jié)果。SDM-23與活化的腫瘤和正常大腿肌肉組織勻漿物一起孵育。來自組織的酶活性導(dǎo)致了 SDM-23裂解并產(chǎn)生了大幅的FRET發(fā)射比增加(標(biāo)記的原發(fā)腫瘤)。比率增加是SDM裂解的結(jié)果。正常的肌肉組織未顯示出對(duì)SDM-23的裂解活性。
[0028]圖8例示了來自離體人組織分析的FRET發(fā)射比數(shù)據(jù)。SDM-25與正常人乳腺組織和癌性人乳腺組織(WD2808、WD2821、WD2815、WD2817、WD2824)勻漿物一起孵育。發(fā)現(xiàn)與正常人乳腺組織相比，癌性人乳腺組織中的酶活性及SDM-25裂解顯著較高(帶誤差的數(shù)據(jù)條)。
[0029]圖9例示了來自離體人組織分析的FRET發(fā)射比數(shù)據(jù)。SDM-25和SDM-32與正常健康人乳腺組織(WD2823)和癌性人乳腺組織(WD2808、WD2815)勻漿物一起孵育。發(fā)現(xiàn)與正常人乳腺組織相比，癌性人乳腺組織中的酶活性及SDM裂解較高。
[0030]圖10例示了來自用SDM-24處理的小鼠轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)模型的陽性和陰性淋巴結(jié)的FRET發(fā)射比數(shù)據(jù)的散點(diǎn)圖。病理學(xué)家基于H&E染色分析將淋巴結(jié)分為陽性或陰性的。
[0031]圖11例示了通過改變閥值而產(chǎn)生的ROC曲線，該閥值用于由在轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)模型中使用SDM-24獲得的發(fā)射比數(shù)據(jù)來指定陽性或陰性轉(zhuǎn)移預(yù)測。該數(shù)據(jù)對(duì)診斷癌性和非癌性淋巴結(jié)顯示出高靈敏度與特異性。
【具體實(shí)施方式】
[0032]選擇性遞送分子(SDM)允許將治療劑和/或顯像劑靶向遞送至特定細(xì)胞和/或組織。在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子包含(a)分子轉(zhuǎn)運(yùn)或保留序列(部分B)，(b)至少一個(gè)結(jié)合至部分A、B或X的負(fù)荷物部分(部分D)，(C)X連接體，和(d)大分子載體，以及(e)有效抑制或防止向細(xì)胞內(nèi)的攝取或組織保留的酸性序列(部分A)。在一些實(shí)施方案中，允許部分A與部分B分離的X連 接體的裂解能有效地允許部分B及相連的負(fù)荷物向細(xì)胞和組織內(nèi)的攝取或保留。然而，選擇性遞送分子可能受到快速的藥代動(dòng)力學(xué)清除，具有很短的血漿半衰期、廣泛的分布以及從多個(gè)具有非特異性攝取的非靶組織中緩慢的洗出。從而，對(duì)具有增加的體內(nèi)循環(huán)、相對(duì)于非靶組織在靶組織中的積累、受調(diào)節(jié)的外滲選擇性以及受調(diào)節(jié)的生物分布的選擇性遞送分子存在需求。對(duì)于顯像劑而言，需要在靶組織中相對(duì)于背景組織的對(duì)比度增加。
某些定義
[0033]除非另有說明，否則在此使用的以下術(shù)語具有規(guī)定的含義。
[0034]在此使用的術(shù)語“靶向分子”是指與目標(biāo)靶標(biāo)相關(guān)聯(lián)(例如，結(jié)合)的任何試劑(例如，肽、蛋白質(zhì)、核酸聚合物、適體或小分子)。目標(biāo)靶標(biāo)可以是組織、細(xì)胞、細(xì)胞結(jié)構(gòu)(例如，細(xì)胞器)、蛋白質(zhì)、肽、多糖或核酸聚合物。在一些實(shí)施方案中，靶向分子是與受試者的一個(gè)或多個(gè)癌細(xì)胞相關(guān)聯(lián)(例如，結(jié)合)的任何試劑。
[0035]術(shù)語“多肽”、“肽”和“蛋白質(zhì)”在此可互換使用，是指氨基酸殘基的聚合物。這些術(shù)語適用于天然存在的氨基酸聚合物以及一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基為非天然存在的氨基酸(例如，氨基酸類似物)的氨基酸聚合物。這些術(shù)語涵蓋了任意長度的氨基酸鏈，包括全長蛋白質(zhì)(即，抗原)，其中氨基酸殘基通過共價(jià)肽鍵連接。在此使用的術(shù)語“肽”是指氨基酸殘基的聚合物，一般長度為2個(gè)到約50個(gè)殘基。在某些實(shí)施方案中，肽的長度為約2、3、4、5、7、9、10或11個(gè)殘基到約50、45、40、45、30、25、20或15個(gè)殘基。在某些實(shí)施方案中，肽的長度為約8、9、10、11或12個(gè)殘基到約15、20或25個(gè)殘基。當(dāng)在此提供了氨基酸序列時(shí)，也考慮到了該序列的L-、D-或β氨基酸形式，以及其逆序、反轉(zhuǎn)和逆-反轉(zhuǎn)亞型。肽還包括其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基為對(duì)應(yīng)的天然存在的氨基酸的人造化學(xué)類似物的氨基酸聚合物以及天然存在的氨基酸聚合物。此外，該術(shù)語適用于通過肽鍵或通過其他修飾的連接所連接的氨基酸(例如，其中肽鍵被α酯、β酯、硫代酰胺、磷酰胺、氨基甲酸酯、羥基化物等等所代替(參見，例如，Spatola, (1983) Chem.Biochem.Amino Acids and Proteins7:267-357),其中酰胺被飽和胺所代替(參見，例如，Skiles等，美國專利號(hào)4，496，542，其在此引入作為參考，以及 Kaltenbronn 等(1990), Proc.1lth American Peptide Symposium,第 969-970頁，ESCOM Science Publ`ishers, The Netherlands,等等))。
[0036]術(shù)語“氨基酸”是指天然存在的和合成的氨基酸，以及以與天然存在的氨基酸相似的方式發(fā)揮功能的氨基酸類似物和氨基酸模擬物。天然存在的氨基酸是那些由遺傳密碼編碼的氨基酸以及之后修飾的氨基酸，例如，羥脯氨酸、Y -羰基谷氨酸和O-磷酸絲氨酸。氨基酸類似物是指具有與天然存在的氨基酸相同的基本化學(xué)結(jié)構(gòu)(即，結(jié)合至氫、羧基、氨基和R基團(tuán)的α碳)的化合物，例如高絲氨酸、正亮氨酸、甲硫氨酸亞砜。這樣的類似物具有修飾的R基團(tuán)(例如，正亮氨酸)或修飾的肽骨架，但是保留了與天然存在的氨基酸相同的基本化學(xué)結(jié)構(gòu)。氨基酸模擬物是指具有不同于氨基酸的一般化學(xué)結(jié)構(gòu)，但以與天然存在的氨基酸相似的方式發(fā)揮功能的化合物。氨基酸為D氨基酸或L氨基酸。
[0037]在此氨基酸可以由其通常已知的三字母符號(hào)或由IUPAC-1UB生物化學(xué)命名委員會(huì)(IUPAC-1UB Biochemical Nomenclature Commission)推薦的單字母符號(hào)來表不。同樣，核苷酸也可以由其通常被接受的單字母代碼來表示。
[0038]技術(shù)人員會(huì)認(rèn)可，對(duì)肽、多肽或蛋白質(zhì)序列進(jìn)行個(gè)別的置換、缺失或添加，以改變、添加或刪除編碼序列中的一個(gè)氨基酸或一小部分氨基酸，是一種“保守修飾的變體”，其中的改變導(dǎo)致了氨基酸被化學(xué)上相似的氨基酸所替代。提供功能上相似的氨基酸的保守置換表格是本領(lǐng)域公知的。這些保守修飾的變體不排除本發(fā)明的多態(tài)變體、種間同源體以及等位基因，而是除它們之外的。
[0039]在此使用的術(shù)語“標(biāo)記”表示便于對(duì)在此公開的靶向分子進(jìn)行可視化和/或檢測的分子。在一些實(shí)施方案中，標(biāo)記是熒光部分。
[0040]在涉及在此公開的靶向分子與靶標(biāo)(例如，純化的蛋白質(zhì)、癌細(xì)胞或癌性組織、腫瘤或轉(zhuǎn)移性病變、轉(zhuǎn)移或淋巴結(jié)或轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié))之間的相互作用時(shí)，短語“特異性結(jié)合”表示靶向分子與靶標(biāo)之間高親和鍵的形成。另外，該術(shù)語表示靶向分子對(duì)于非靶標(biāo)具有低親和力。
[0041]“選擇性結(jié)合”、“選擇性”等是指試劑與一種分子相互作用較之與另一種分子相互作用的偏好。優(yōu)選地，在此公開的靶向分子與靶標(biāo)之間的相互作用既是特異性的又是選擇性的。注意在一些實(shí)施方案中，將試劑設(shè)計(jì)為“特異性結(jié)合”和“選擇性結(jié)合”兩種不同的、但相似的靶標(biāo)，而不結(jié)合其它不期望的靶標(biāo)。
[0042]術(shù)語“個(gè)體”、“患者”或“受試者”可互換使用。在此使用時(shí)，它們表示任何哺乳動(dòng)物(即，在分類學(xué)中的動(dòng)物界:脊索動(dòng)物門:脊椎動(dòng)物亞門:哺乳綱中的任意目、科和屬的物種)。在一些實(shí)施方案中，哺乳動(dòng)物為人類。這些術(shù)語都不需要或受限于以衛(wèi)生保健工作者(例如，醫(yī)生、注冊(cè)護(hù)士、從業(yè)護(hù)士、醫(yī)師助理、護(hù)理員或臨終關(guān)懷醫(yī)院工作人員)的監(jiān)護(hù)(例如，長期性或間歇性)為特征的情形。
[0043]在此使用的術(shù)語“施用”、“投藥””、“給藥”等是指可用于將試劑或組合物遞送至期望的生物作用位點(diǎn)的方法。這些方法包括但不限于腸胃外注射(例如，靜脈內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、肌肉內(nèi)、血管內(nèi)、鞘內(nèi)、玻璃體內(nèi)、輸注或局部)。根據(jù)本文描述的試劑和方法任選地米用的給藥技術(shù)包括例如，在Goodman和Gilman, The Pharmacological Basis ofTherapeutics,當(dāng)前版；Pergamon ;和 Remington’ s, Pharmaceutical Sciences (當(dāng)前版),Mack Publishing C0., Easton, Pa.中所討論的。
[0044]在此使用的術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”是指不會(huì)消除本文描述的試劑的生物活性或性質(zhì)且相對(duì)無毒(即，材料的毒性顯著勝于材料的益處)的材料。在一些情況下，藥學(xué)上可接受的材料可以被施用至個(gè)體而不會(huì)產(chǎn)生顯著的不良生物效果，或不會(huì)以有害的方式與包含該材料的組合物中的任何成分發(fā)生顯著的相互作用。
[0045]在此使用的術(shù)語“手術(shù)”是指可用于通過物理干預(yù)在組織中考察、操作、改變或產(chǎn)生效果的任何方法。這些方法包括但不限于開放手術(shù)、內(nèi)窺鏡手術(shù)、腹腔鏡手術(shù)、微創(chuàng)手術(shù)、機(jī)器人手術(shù)以及任何可以影響癌性組織的操作，例如腫瘤切除、癌組織消融、癌癥分期、癌癥診斷、淋巴結(jié)分期、前哨淋巴結(jié)的檢測或癌癥的治療。
[0046]在此使用的術(shù)語“引導(dǎo)手術(shù)”是指外科醫(yī)生使用顯像劑來引導(dǎo)手術(shù)的任何手術(shù)操作。
[0047]在此使用的術(shù)語“癌癥”是指涉及人體內(nèi)不受控生長或增殖的細(xì)胞的任何疾病。癌癥可以進(jìn)一步通過細(xì)胞從原始部位遷移并擴(kuò)散至遠(yuǎn)處部位(即轉(zhuǎn)移)的能力來得到表征。癌癥可以是肉瘤、癌、淋巴瘤、白血病、胚細(xì)胞瘤或生殖細(xì)胞瘤。癌癥可能發(fā)生在多種組織中，包括但不限于肺、乳腺、卵巢、結(jié)腸、食道、直腸、骨、前列腺、腦、胰腺、膀胱、腎、肝、血細(xì)胞、淋巴結(jié)和胃。
選擇性遞送分子[0048]在某些實(shí)施方案中，本文公開了式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db]
式I 其中，
X為可裂解的連接體；
A為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列的肽；
B為具有含7-9個(gè)堿性氨基酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為大分子；且
Da和Db各自獨(dú)立地選自顯像劑和治療劑；且
其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[Cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，B中堿性氨基酸的數(shù)目大于A中酸性氨基酸的數(shù)目。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立`地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、α-氨基酸、β-氨基酸或Y-氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、4和4各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，cB為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cB為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為賴氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cM為對(duì)-4-乙酰基L-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X能被蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X能被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X包含能被MMP2、MMP7、MMP9或MMP14裂解的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，X包含肽鍵。在一些實(shí)施方案中，X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C (me)-AG、RPLALWRS、ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL 和 RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C (me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列DPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLKL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，M選自蛋白質(zhì)、天然聚合物、合成聚合物或樹枝狀聚合物。在一些實(shí)施方案中，M選自葡聚糖、PEG聚合物、白蛋白或其組合。在一些實(shí)施方案中，M為 PEG。在一些實(shí)施方案中，M 選自 PEG5kDa、PEG12kDa、PEG20kDa、PEG30kDa 和 PEG40kDa。
在一些實(shí)施方案中，Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行F0rsters/〃熒光共振能量轉(zhuǎn)移。在一些實(shí)施方案中，DA和DB為Cy5和Cy7。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，DA和DB為Cy5和ICG。在一些實(shí)施方案中，Da和Db是熒光部分和熒光猝滅部分。在一些實(shí)施方案中，式 I 的分子為:SDM-14、SDM-15、SDM-23、SDM-24、SDM-25、SDM-26、SDM-27、SDM-32或 SDM-35。
[0049]在某些實(shí)施方案中，本文公開了式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db]
式I 其中，
X為可裂解的連接體；
A為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列的肽；
B為具有含7-9個(gè)堿性氨基酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且 Da和Db各自獨(dú)立地為顯像劑；且
其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，B中堿性氨基酸的數(shù)目大于A中酸性氨基酸的數(shù)目。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，A為含有5個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、α-氨基酸、β-氨基酸或Y-氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、4和4各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，cB為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cB為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為賴氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cM為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X能被蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X能被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解。在一些實(shí)施方案中，X包含能被MMP2、MMP7、MMP9或MMP14裂解的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，X包含肽鍵。在一些實(shí)施方案中，X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C (me)-AG、RPLALWRS、ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL 和 RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C (me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列DPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PPRSFL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLKL。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，04和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行FOrsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移。在一些實(shí)施方案中，04和08為075和Cy7。在一些實(shí)施方案中，04和08為075和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，04和08為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和ICG。在一些實(shí)施方案中，Da和Db是熒光部分和熒光猝滅部分。在一些實(shí)施方案中，式I的分子為:SDM-14、SDM-15, SDM-23、SDM-24、SDM-25、SDM-26、SDM-27、SDM-32 或 SDM-35。
[0050]在某些實(shí)施方案中，本文公開了式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db]
式I 其中，
X為可被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解的肽連接體；
A為具有含5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的序列的肽；
B為具有含8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且
Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行F6rsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移；
且
其中[Cm-M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-Ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[Cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，4、4和cM各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，(^、4和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，cB為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CbSD-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CaS D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C(me)-AG。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和Cy7。在一些實(shí)施方案中，DA和DB為Cy5和Cy7。
[0051]在某些實(shí)施方案中，本文公開了式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db]
式I 其中，
X為可被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解的肽連接體；
A為具有含5個(gè)連續(xù)谷氨酸的序列的肽；
B為具有含8個(gè)連續(xù)精氨酸的序列的肽； CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為聚乙二醇(PEG) 聚合物；且
Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行F6rsters/i熒光共振能量轉(zhuǎn)移；且
其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，CA、CB和Cm各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和Cm各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C (me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和Cy7。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和ICG。
[0052]在某些實(shí)施方案中，本文公開了式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db]
式I 其中，
X為可被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解的肽連接體；
A為具有含9個(gè)連續(xù)谷氨酸的序列的肽；
B為具有含9個(gè)連續(xù)精氨酸的序列的肽；
CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地包含0-1個(gè)氨基酸；
M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且
Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行F6rsters/_^光共振能量轉(zhuǎn)移；且
其中[Cm-M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-Ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[Cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
在一些實(shí)施方案中，CA、CB和Cm各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA、cB和Cm各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列PLG-C (me)-AG。在一些實(shí)施方案中，X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和Cy7。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye750。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和IRDye800。在一些實(shí)施方案中，Da和Db為Cy5和ICG。
[0053]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-14的選擇性遞送分子。
[0054]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-15的選擇性遞送分子。
[0055]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-23的選擇性遞送分子。
[0056]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-24的選擇性遞送分子。
[0057]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-25的選擇性遞送分子。
[0058]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-26的選擇性遞送分子。
[0059]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-27的選擇性遞送分子。
[0060]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-32的選擇性遞送分子。
[0061]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-35的選擇性遞送分子。
[0062]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)肽P-3的肽。
[0063]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-14的選擇性遞送分子。
[0064]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-15的選擇性遞送分子。 [0065]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-23的選擇性遞送分子。
[0066]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-24的選擇性遞送分子。
[0067]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-25的選擇性遞送分子。
[0068]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-26的選擇性遞送分子。
[0069]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-27的選擇性遞送分子。
[0070]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-32的選擇性遞送分子。
[0071]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-35的選擇性遞送分子。
部分A
[0072]在一些實(shí)施方案中，A是具有含2到20個(gè)酸性氨基酸的序列的肽。在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約2到約20個(gè)酸性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約5到約20個(gè)酸性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到9個(gè)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到8個(gè)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到7個(gè)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5個(gè)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含6個(gè)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含7個(gè)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含8個(gè)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含9個(gè)酸性氨基酸的序列。
[0073]在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約2到約20個(gè)連續(xù)酸性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約5到約20個(gè)連續(xù)酸性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到9個(gè)連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到8個(gè)連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到7個(gè)連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5個(gè)連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含6個(gè)連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含7個(gè)連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含8個(gè)連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含9個(gè)連續(xù)酸性氨基酸的序列。
[0074]在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約2到約20個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的酸性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約5到約20個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的酸性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到9個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到8個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到7個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含6個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含7個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含8個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含9個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的酸性氨基酸的序列。
[0075]在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約2到約20個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的連續(xù)酸性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約5到約20個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的連續(xù)酸性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到9個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到8個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到7個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含6個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含7個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含8個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的連續(xù)酸性氨基酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含9個(gè)選自天冬氨酸和谷氨酸的連續(xù)酸性氨基酸的序列。
[0076]在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約2到約20個(gè)谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約5到約20個(gè)谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到9個(gè)谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到8個(gè)谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到7個(gè)谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5個(gè)谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含6個(gè)谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含7個(gè)谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含8個(gè)谷氨酸的序 列。在一些實(shí)施方案中，A具有含9個(gè)谷氨酸的序列。
[0077]在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約2到約20個(gè)連續(xù)的谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分A包含約5到約20個(gè)連續(xù)的谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到9個(gè)連續(xù)的谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到8個(gè)連續(xù)的谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5到7個(gè)連續(xù)的谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含5個(gè)連續(xù)的谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含6個(gè)連續(xù)的谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含7個(gè)連續(xù)的谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含8個(gè)連續(xù)的谷氨酸的序列。在一些實(shí)施方案中，A具有含9個(gè)連續(xù)的谷氨酸的序列。
[0078]在一些實(shí)施方案中，部分A包含5個(gè)連續(xù)的谷氨酸(即，EEEEE或eeeee)。在一些實(shí)施方案中，部分A包含9個(gè)連續(xù)的谷氨酸(即，EEEEEEEEE或eeeeeeeee)。
[0079]酸性部分A可以包括非酸性的氨基酸。酸性部分A可含有其他部分，例如帶負(fù)電荷的部分。在此處公開的選擇性遞送分子的實(shí)施方案中，酸性部分A可以是帶負(fù)電荷的部分，優(yōu)選地在不包括氨基酸的生理PH下具有約2到約20個(gè)負(fù)電荷。
[0080]在一些實(shí)施方案中，部分A中負(fù)電荷的量與部分B中正電荷的量大致相同。在一些實(shí)施方案中，部分A中負(fù)電荷的量與部分B中正電荷的量不同。在一些實(shí)施方案中，對(duì)于其中部分A中負(fù)電荷的量與部分B中正電荷的量不同的選擇性遞送分子，看到了改善的組織攝取。在一些實(shí)施方案中，對(duì)于其中部分A中負(fù)電荷的量與部分B中正電荷的量不同的選擇性遞送分子，觀察到改善的溶解性。在一些實(shí)施方案中，對(duì)于其中部分A中負(fù)電荷的量與部分B中正電荷的量不同的選擇性遞送分子，看到了更快的組織攝取。在一些實(shí)施方案中，對(duì)于其中部分A中負(fù)電荷的量與部分B中正電荷的量不同的選擇性遞送分子，看到了更多的組織攝取。
[0081]部分A為L-氨基酸或D-氨基酸。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，為了使得免疫原性和由背景肽酶或蛋白酶導(dǎo)致的非特異性裂解最小化，D-氨基酸是優(yōu)選的。已知寡-D-精氨酸序列的細(xì)胞攝取與寡-L-精氨酸的細(xì)胞攝取一樣好或比之更好。
[0082]應(yīng)當(dāng)理解，部分A可以包括非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸，例如，羥賴氨酸、鎖鏈素、異鎖鏈素或其他非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸。部分A可以包括修飾的氨基酸，包括翻譯后修飾的氨基酸，例如，甲基化的氨基酸(例如，甲基組氨酸、賴氨酸的甲基化形式，等等)、乙?；陌被?、酰胺化的氨基酸、甲?；陌被帷⒘u基化的氨基酸、磷酸化的氨基酸或其他修飾的氨基酸。部分A還可包括肽模擬部分，包括通過非肽鍵連接的部分和通過非氨基酸部分連接或連接至非氨基酸部分的氨基酸。
[0083]當(dāng)A位于氨基端或A位于羧基端時(shí)，在此公開的選擇性遞送分子都是有效的，即，肽鍵的任一方向都是允許的。
部分B
[0084]在一些實(shí)施方案中，B為具有含5到15個(gè)堿性氨基酸的序列的肽。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約20個(gè)堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約12個(gè)堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約9個(gè)堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約8個(gè)堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含9個(gè)堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含8個(gè)堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含7個(gè)堿性氨基酸。
`[0085]在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約20個(gè)連續(xù)的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約12個(gè)連續(xù)的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約9個(gè)連續(xù)的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約8個(gè)連續(xù)的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含9個(gè)連續(xù)的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含8個(gè)連續(xù)的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含7個(gè)連續(xù)的堿性氨基酸。
[0086]在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約20個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約12個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約9個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約8個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含9個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含8個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含7個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的堿性氨基酸。
[0087]在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約20個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的連續(xù)的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約12個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的連續(xù)的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約9個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的連續(xù)的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約8個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的連續(xù)的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含9個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的連續(xù)的堿性氨基酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含8個(gè)選自精氨酸、組氨酸和賴氨酸的連續(xù)的堿性氨基酸。
[0088]在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約20個(gè)精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約12個(gè)精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約9個(gè)精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約8個(gè)精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含9個(gè)精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含8個(gè)精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含7個(gè)精氨酸。
[0089]在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約20個(gè)連續(xù)的精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約5到約12個(gè)連續(xù)的精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約9個(gè)連續(xù)的精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含約7到約8個(gè)連續(xù)的精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含9個(gè)連續(xù)的精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含8個(gè)連續(xù)的精氨酸。在一些實(shí)施方案中，肽部分B包含7個(gè)連續(xù)的精氨酸。
[0090]堿性部分B可以包括非堿性氨基酸。堿性部分B可包含其他部分，例如帶正電荷的部分。在實(shí)施方案中，堿性部分B可以為帶正電荷的部分，優(yōu)選地在不包括氨基酸的生理pH下具有約5至約20個(gè)正電荷。在一些實(shí)施方案中，部分A中負(fù)電荷的量與部分B中正電荷的量大致相同。在一些實(shí)施方案中，部分A中負(fù)電荷的量與部分B中正電荷的量不同。
[0091]部分B為L-氨基酸或D-氨基酸。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，為了使得免疫原性和由背景肽酶或蛋白酶導(dǎo)致的非特異性裂解最小化，D-氨基酸是優(yōu)選的。已知寡-D-精氨酸序列的細(xì)胞攝取與寡-L-精氨酸的細(xì)胞攝取一樣好或比之更好。
[0092]應(yīng)當(dāng)理解， 部分B可以包括非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸，例如，羥賴氨酸、鎖鏈素、異鎖鏈素或其他非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸。部分B可以包括修飾的氨基酸，包括翻譯后修飾的氨基酸，例如，甲基化的氨基酸(例如，甲基組氨酸、賴氨酸的甲基化形式，等等)、乙?；陌被?、酰胺化的氨基酸、甲?；陌被?、羥基化的氨基酸、磷酸化的氨基酸或其他修飾的氨基酸。部分B還可包括肽模擬部分，包括通過非肽鍵連接的部分和通過非氨基酸部分連接或連接至非氨基酸部分的氨基酸。
[0093]在X為能被蛋白酶裂解的肽的實(shí)施方案中，可能優(yōu)選的是將X的C末端連接至B的N末端，從而由X裂解所產(chǎn)生的新的氨基末端能貢獻(xiàn)額外的正電荷，該正電荷添加到B中已經(jīng)存在的正電荷中。
偶聯(lián)基團(tuán)(C)
[0094]在一些實(shí)施方案中，負(fù)荷物(例如，Da和Db)和大分子載體(M)間接連接到A-X-B。
[0095]在一些實(shí)施方案中，負(fù)荷物(例如，Da和Db)和大分子載體(M)通過偶聯(lián)基團(tuán)(cA、4和4)間接連接到A-X-B。在一些實(shí)施方案中，負(fù)荷物(例如，Da和Db)和大分子載體(M)通過反應(yīng)性偶聯(lián)基團(tuán)(cA、cB和cM)間接連接到A-X-B。在一些實(shí)施方案中，負(fù)荷物(例如，0八和00和大分子載體(M)通過正交反應(yīng)性偶聯(lián)基團(tuán)(cA、4和4)間接連接到A-X-B。在一些實(shí)施方案中，Ca> Cb和Cm各自獨(dú)立地含有氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca> Cb和Cm各自獨(dú)立地含有0-10個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地含有I個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地含有2個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca> Cb和Cm各自獨(dú)立地含有3個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地含有4個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地含有5個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地含有6個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca> Cb和Cm各自獨(dú)立地含有7個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地含有8個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cj^P Cm各自獨(dú)立地含有9個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CpC1^P Cm各自獨(dú)立地含有10
個(gè)氨基酸。
[0096]在一些實(shí)施方案中，cA、(^和Cm各自獨(dú)立地含有衍生的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，多重負(fù)荷物(D)被連接到衍生的氨基酸偶聯(lián)基團(tuán)。
[0097]在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)基團(tuán)包含受體配體。
[0098]在一些實(shí)施方案中，cA、cB和Cm各自獨(dú)立地含有天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cA,cB和cM各自獨(dú)立地含有D氨基酸、L氨基酸、α -氨基酸、β-氨基酸或Y-氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地含有具有游離巰基的任意氨基酸、含有游離胺基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，(^、(^和Cm各自獨(dú)立地含有D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cb包含具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，cB包含D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca包含具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Ca包含D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca包含賴氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm包含具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cm包含對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
[0099]在一些實(shí)施方案中，cA、cB和Cm各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、α-氨基酸、β-氨基酸或Y-氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地為具有游離巰基的任意氨基酸、含有游離胺`基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，(^、(^和Cm各自獨(dú)立地選自:D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為具有游離巰基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cb為D-半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為具有N末端胺基的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，CaS D-谷氨酸。在一些實(shí)施方案中，Ca為賴氨酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為具有能夠在與輕胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Cm為對(duì)-4-乙酰基L-苯丙氨酸。
負(fù)荷物(D)
顯像劑
[0100]在一些實(shí)施方案中，顯像劑是一種染料。在一些實(shí)施方案中，顯像劑是一種突光部分。在一些實(shí)施方案中，熒光部分選自:熒光蛋白、熒光肽、熒光染料、熒光材料或其組合。
[0101]所有的熒光部分(fluorescent moieties)都涵蓋在術(shù)語“熒光部分(fluorescent moiety) ”中。本文給出的突光部分的具體實(shí)例是說明性的,并不意味著限制在此公開的靶向分子所使用的熒光部分。
[0102]熒光染料的實(shí)例包括但不限于咕噸類(例如，若丹明、對(duì)甲氨基酚和熒光素，以及它們的衍生物)；BimaneS ;香豆素類和它們的衍生物(例如，傘形酮和氨基甲基香豆素)；芳族胺(例如，丹酰；方酸染料)；苯并呋喃；熒光花青；吲哚羰花青；咔唑類；二氰基亞甲基批喃；聚甲炔；氧雜苯并蒽；咕噸；吡喃鐵；carbostyl ;花；吖唳酮；喹吖唳酮；紅突烯；蒽；蘧；酚蒽；芘；丁二烯；芪；卟啉；酞菁；鑭系金屬螯合物；稀土金屬螯合物；以及這些染料的衍生物。
[0103]熒光素染料的實(shí)例包括但不限于5-羧基熒光素、熒光素-5-異硫氰酸酯、熒光素-6-異硫氰酸酯和6-羧基熒光素。
[0104]若丹明染料的實(shí)例包括但不限于四甲基若丹明-6-異硫氰酸酯、5-羧基四甲基若丹明、5-羧基對(duì)甲氨基酚衍生物、四甲基和四乙基若丹明、二苯基二甲基和二苯基二乙基若丹明、二萘基若丹明、若丹明101磺酰氯(以商品名TEXAS RED?出售)。
[0105]花青染料的實(shí)例包括但不限于Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7、IRDYE680、AlexaFluor750、IRDye800Cff, ICG。
[0106]熒光肽的實(shí)例包括GFP (綠色熒光蛋白)或GFP的衍生物(例如，EBFP, EBFP2、Azurite、mKalamal、ECFP> Cerulean、CyPet> YFP> Citrine、Venus、YPet)。
[0107]通過任何合適的方法來檢測熒光標(biāo)記。例如，可通過用合適的光波長激發(fā)熒光染料并檢測得到的熒光(例如，通過顯微鏡檢查、目視觀察、通過膠片、通過使用電子檢測器例如電荷耦合器件(CCD)、光電倍增管等)來檢測熒光標(biāo)記。
[0108]在一些實(shí)施方案中，顯像劑用發(fā)射正電子的同位素(例如，18F)進(jìn)行標(biāo)記以用于正電子發(fā)射斷層攝影術(shù)(PET)，用Y射線同位素(例如，99mTc)進(jìn)行標(biāo)記以用于單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)(SPECT)，或用順磁分子或納米顆粒(例如，Gd3+螯合物或包被的磁性納米顆粒)進(jìn)行標(biāo)記以用于磁共振成像(MRI)。
[0109]在一些實(shí)施方案中，顯像劑用以下試劑進(jìn)行標(biāo)記:釓螯合物、氧化鐵粒子、超順磁性氧化鐵粒子、超小型順磁性粒子、錳螯合物或含鎵劑。
[0110]釓螯合物的實(shí)例包括但不限于二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)、1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷_1，4，7，10-四乙酸(DOTA)和1，4，7-三氮雜環(huán)壬烷-N，N' ,N''-三乙酸(ΝΟΤΑ)。
[0111]在一些實(shí)施方案中，顯像劑為用于近紅外(近IR)成像的近紅外熒光團(tuán)，用于生物發(fā)光成像的螢光素酶(螢火蟲、細(xì)菌或腔腸動(dòng)物的)或其它發(fā)光分子，或用于超聲的全氟化碳填充囊泡。
[0112]在一些實(shí)施方案中，顯像劑是核探針。在一些實(shí)施方案中，顯像劑為SPECT或PET放射性核素探針。在一些實(shí)施方案中，該放射性核素探針選自:锝螯合物、銅螯合物、放射性氟、放射性碘、銦螯合物。
[0113]Tc螯合物的實(shí)例包括但不限于HYNIC、DTPA和D0TA。
[0114]在一些實(shí)施方案中，顯像劑含有放射性部分，例如放射性同位素，如211At、1311、1251、9°Y、186Re、188Re、153Sm、212B1、32P、64Cu、Lu 的放射性同位素，以及其它。
[0115]在一些實(shí)施方案中，將含有顯像劑的根據(jù)式I的選擇性遞送分子用于引導(dǎo)手術(shù)。在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子優(yōu)先定位至癌性或其它不良組織(即，壞死組織)。在一些實(shí)施方案中，將含有顯像劑的根據(jù)式I的選擇性遞送分子用于引導(dǎo)手術(shù)以去除結(jié)直腸癌。在一些實(shí)施方案中，應(yīng)用選擇性遞送分子的引導(dǎo)手術(shù)允許外科醫(yī)生切除盡可能少的健康(即非癌性)組織。在一些實(shí)施方案中，應(yīng)用選擇性遞送分子的引導(dǎo)手術(shù)允許外科醫(yī)生可視化并切除比在沒有選擇性遞送分子存在下外科醫(yī)生所能夠切除的癌性組織更多的癌性組織。在一些實(shí)施方案中，該手術(shù)是熒光引導(dǎo)的手術(shù)。治療劑
[0116]在某些實(shí)施方案中，本文公開了在此公開的選擇性遞送分子用于將治療劑遞送至組織或多個(gè)細(xì)胞的用途。在一些實(shí)施方案中，治療劑為抗炎劑。在一些實(shí)施方案中，治療劑為抗癌劑。在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子用于治療結(jié)直腸癌。
[0117]在一些實(shí)施方案中，部分D獨(dú)立地為治療劑。在一些實(shí)施方案中，治療劑選自:化學(xué)治療劑、類固醇、免疫治療劑、靶向治療、抗炎劑或其組合。
[0118]在一些實(shí)施方案中，治療劑為B細(xì)胞受體途徑抑制劑。在一些實(shí)施方案中，治療劑為CD79A抑制劑、CD79B抑制劑、CD19抑制劑、Lyn抑制劑、Syk抑制劑、PI3K抑制劑、Blnk抑制劑、PLC Y抑制劑、ΡΚ(:β抑制劑或其組合。在一些實(shí)施方案中，治療劑為抗體、B細(xì)胞受體信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑、PI3K抑制劑、IAP抑制劑、mTOR抑制劑、放射性免疫治療劑、DNA損傷劑、蛋白酶體抑制劑、組蛋白脫酰酶抑制劑、蛋白激酶抑制劑、猬(hedgehog)抑制劑、Hsp90抑制劑、端粒酶抑制劑、Jakl/2抑制劑、蛋白酶抑制劑、PKC抑制劑、PARP抑制劑或其組合。在一些實(shí)施方案中，治療劑選自:苯丁酸氮芥、異環(huán)磷酰胺、多柔比星、美沙拉嗪、沙利度胺、來那度胺、坦羅莫司、依維莫司、氟達(dá)拉濱、福他替尼、紫杉醇、多西他賽、奧法木單抗、利妥昔單抗、地塞米松、潑尼松、CAL-101、替伊莫單抗、托西莫單抗、硼替佐米、噴司他丁、內(nèi)皮他丁、苯達(dá)莫司汀、苯丁酸氮芥、氮芥、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、美法侖、潑尼莫司汀、曲磷胺、白消安、甘露舒凡、曲奧舒凡、卡波醌、塞替派、三亞胺醌、卡莫司汀、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀、司莫司汀、鏈佐星、依托格魯、達(dá)卡巴嗪、二溴甘露醇、哌泊溴烷、替莫唑胺、氨甲蝶呤、培美曲塞、普拉曲沙、雷替曲塞、克拉屈濱、氯法拉濱、氟達(dá)拉濱、巰嘌呤、奈拉濱、硫鳥嘌呤、阿扎胞苷、卡培他濱、卡莫氟、阿糖胞苷、地西他濱、氟尿嘧啶、吉西他濱、替加氟、長春堿、長春新堿、長春地辛、長春氟寧、長春瑞濱、依托泊苷、替尼泊苷、秋水仙胺、多西他賽、紫杉醇、聚谷紫杉醇、曲貝替定、更生霉素、阿柔比星、柔紅霉素、多柔比星、表柔比星、伊達(dá)比星、米托蒽醌、吡柔比星、戊柔比星、佐柔比星、博來霉素、伊沙匹隆、絲裂霉素、普卡霉素、卡鉬、順鉬、奧沙利鉬、沙鉬、丙卡巴肼、氨基酮戊酸、乙法昔羅、氨基酮戊酸甲酯、葉吩姆鈉、替莫泊芬、達(dá)沙替尼、埃羅替尼、依維莫司、吉非替尼、伊馬替尼、拉帕替尼、尼羅替尼、帕唑帕尼、索拉非尼、舒尼替尼、坦羅莫司、阿利維A酸、六甲蜜胺、安吖啶、阿那格雷、三氧化二砷、天冬酰胺酶、貝沙羅汀、硼替佐米、塞來考昔、地尼白介素2、雌氮芥、羥基脲、伊立替康、氯尼達(dá)明、馬索羅酚、米替福新、米托胍腙、米托坦、奧利默森、培門冬酶、噴司他丁、羅米地新、塞西馬集、噻唑呋林、托泊替康、維A酸、伏林司他、二乙基二苯乙烯、炔雌醇、磷雌酚、聚磷酸雌二醇、孕諾酮、甲羥孕酮、甲地孕酮、布舍瑞林、戈舍瑞林、亮丙瑞林、曲普瑞林、氟維司群、他莫昔芬、托瑞米芬、比卡魯胺、氟他胺、尼魯米特、氨魯米特、阿那曲唑、依西美坦、福美坦、來曲唑、伏氯唑、阿巴瑞克、地加瑞克、二鹽酸組胺、米法莫肽、匹多莫德、普樂沙福、羅喹美克、胸腺噴丁、依維莫司、胍立莫司、來氟米特、霉酚酸、西羅莫司、環(huán)孢素、他克莫司、硫唑嘌呤、來那度胺、氨甲蝶呤、沙利度胺、碘芐胍、安西司亭、非格司亭、來格司亭、莫拉司亭、培非司亭、沙格司亭、天然干擾素α、干擾素a _2a、干擾素a_2b、復(fù)合干擾素α-l、干擾素α-η?、天然干擾素β、干擾素β-la、干擾素β-lb、干擾素Y、聚乙二醇干擾素a _2a、聚乙二醇干擾素a _2b、阿地白介素、奧普瑞白介素、BCG疫苗、醋酸格拉替雷、二鹽酸組胺、免疫花青、香菇多糖、黑素瘤疫苗、米法莫肽、培加酶、匹多莫德、普樂沙福、聚1:C、聚ICLC、羅喹美克、他索納明、胸腺噴丁、阿巴西普、阿貝莫司、阿來西普、抗淋巴細(xì)胞免疫球蛋白(馬)、抗胸腺細(xì)胞免疫球蛋白(兔)、依庫珠單抗、依法珠單抗、依維莫司、胍立莫司、來氟米特、莫羅單抗-CD3、霉酚酸、那他珠單抗、西羅莫司、阿達(dá)木單抗、阿非莫單抗、培化舍珠單抗、依那西普、戈利木單抗、英夫利昔單抗、阿那白滯素、巴利昔單抗、康納單抗、達(dá)珠單抗、美泊利單抗、利納西普、托珠單抗、烏司奴單抗、環(huán)孢素、他克莫司、硫唑嘌呤、來那度胺、氨甲蝶呤、沙利度胺、阿達(dá)木單抗、阿侖珠單抗、貝伐珠單抗、西妥昔單抗、培化舍珠單抗、依庫珠單抗、依法珠單抗、吉妥珠單抗、替伊莫單抗、莫羅單抗-CD3、那他珠單抗、帕木單抗、雷珠單抗、利妥昔單抗、托西莫單抗、曲妥珠單抗、卡妥索單抗、依決洛單抗、奧法木單抗、莫羅單抗-CD3、阿非莫單抗、戈利木單抗、替伊莫單抗、阿巴伏單抗、阿德木單抗、阿侖珠單抗、抗0)30單克隆抗體Xmab2513、抗MET單克隆抗體MetMab、阿泊珠單抗、apomab、阿西莫單抗、雙特異性抗體2B1、蘭妥莫單抗、brentuximab vedotin、卡羅單抗噴地肽、西妥木單抗、claudiximab、可那木單抗、達(dá)西珠單抗、地舒單抗、依庫珠單抗、依帕珠單抗、依帕珠單抗、厄馬索單抗、埃達(dá)珠單抗、芬妥木單抗、夫蘇木單抗、加利昔單抗、ganitumab、吉妥珠單抗奧佐米星、glembatumumab、替伊莫單抗、伊珠單抗奧佐米星、伊匹木單抗、來沙木單抗、林妥珠單抗、林妥珠單抗、魯卡木單抗、馬帕木單抗、馬妥珠單抗、米拉珠單抗、單克隆抗體CC49、奈昔木單抗、尼妥珠單抗、奧法木單抗、奧戈伏單抗、帕妥珠單抗、ramacurimab、雷珠單抗、西利珠單抗、sonepcizumab、他尼珠單抗、托西莫單抗、曲妥珠單抗、曲美木單抗、西莫白介素單抗(tucotuzumab celmoleukin)、維妥珠單抗、維西珠單抗、伏洛昔單抗、扎蘆木單抗、syk抑制劑(例如，R788)、恩扎妥林、達(dá)沙替尼、埃羅替尼、依維莫司、吉非替尼、伊馬替尼、拉帕替尼、尼羅替尼、帕唑帕尼、索拉非尼、舒尼替尼、坦羅莫司、血管發(fā)生抑制劑(例如，GT-1lU J1-1OU R1530)、激酶抑制劑(例如，AC220、AC480、ACE-041、AMG900、AP24534、Arry-614, AT7519、AT9283、AV-951、阿昔替尼、AZD1152、AZD7762、AZD8055、AZD8931、巴氟替尼、BAY73-4506、BGJ398、BGT226、BI811283、BI6727、BIBF1120、BIBW2992、BMS-690154、BMS-777607、 BMS-863233、 BSK-461364、 CAL-101, CEP-11981, CYC116、 DCC-2036、dinaciclib、乳酸多韋替尼、E7050、EMD1214063、ENMD-2076、福他替尼二鈉、GSK2256098、GSK690693、INCB18424、INN0-406、JNJ-26483327、JX-594、KX2-391、I inifanib、LY2603618、MGCD265、MK-0457、MK1496、MLN8054、MLN8237、MP470、NMS-1116354、NMS-1286937、0N01919.Na、0S1-027、0S1-930、Btk 抑制劑、PF-00562271、PF-02341066、PF-03814735、PF-04217903、PF-04554878、PF-04691`502、PF-3758309、PHA-739358、PLC3397、progenipoietin、R547、R763、雷莫蘆單抗、瑞戈非尼、R05185426、SAR103168、S3333333CH727965、SG1-1176、SGX523、 SNS-314、 TAK-593、 TAK-901、 TKI258、 TLN-232、 TTP607、 XL147、 XL228、XL281R05126766、XL418、XL765)、促分裂原活化蛋白激酶信號(hào)抑制劑(例如，U0126、PD98059、PD184352、PD0325901、ARRY-142886、SB239063、SP600125、BAY43-9006、渥曼青霉素或LY294002)、阿霉素、更生霉素、博來霉素、長春堿、順鉬、阿西維辛、阿柔比星、鹽酸阿考達(dá)唑、阿克羅寧、阿多來新、阿地白介素、六甲蜜胺、安波霉素、醋酸阿美蒽醌、氨魯米特、安吖唆、阿那曲唑、氨茴霉素、天冬酰胺酶、曲林菌素、阿扎胞苷、阿替派、阿佐霉素、巴馬司他、苯佐替派、比卡魯胺、鹽酸比生群、雙萘法德二甲磺酸鹽、比折來新、硫酸博來霉素、布喹那鈉、溴匹立明、白消安、放線菌素C、卡魯睪酮、卡醋胺、卡貝替姆、卡鉬、卡莫司汀、鹽酸卡柔比星、卡折來新、西地芬戈、苯丁酸氮芥、西羅霉素、克拉屈濱、甲磺酸克立那托、環(huán)磷酰胺、阿糖胞苷、達(dá)卡巴嗪、鹽酸柔紅霉素、地西他濱、右奧馬鉬、地扎胍寧、甲磺酸地扎胍寧、地吖醌、多柔比星、鹽酸多柔比星、屈洛昔芬、檸檬酸屈洛昔芬、丙酸屈他雄酮、達(dá)佐霉素、依達(dá)曲沙、鹽酸依氟鳥氨酸、依沙蘆星、恩洛鉬、恩普氨酯、依匹哌啶、鹽酸表柔比星、厄布洛唑、鹽酸依索比星、雌莫司汀、雌莫司汀磷酸鈉、依他硝唑、依托泊苷、磷酸依托泊苷、氯苯乙嘧胺、鹽酸法倔唑、法扎拉濱、芬維A胺、氟尿苷、磷酸氟達(dá)拉濱、氟尿嘧啶、氟西他濱、磷喹酮、福司曲星鈉、吉西他濱、鹽酸吉西他濱、羥基脲、鹽酸伊達(dá)比星、異環(huán)磷酰胺、iimofosine、白介素II (包括重組白介素II或rlL2)、干擾素a-2a、干擾素a-2b、干擾素α-η?、干擾素α-η3、干擾素β-la、干擾素Y _lb、異丙鉬、鹽酸伊立替康、醋酸蘭瑞肽、來曲唑、醋酸亮丙瑞林、鹽酸利阿唑、洛美曲索鈉、洛莫司汀、鹽酸洛索蒽醌、馬索羅酚、美坦辛、鹽酸氮芥、醋酸甲地孕酮、醋酸美侖孕酮、美法侖、美諾立爾、巰基嘌呤、氨甲蝶呤、氨甲蝶呤鈉、氯苯氨啶、美妥替哌、米丁度胺、米托卡星、絲裂紅素、米托潔林、米托馬星、絲裂霉素、米托司培、米托坦、鹽酸米托蒽醌、霉酚酸、諾考達(dá)唑(nocodazoie)、諾加霉素、奧馬鉬、奧昔舒侖、培門冬酶、培利霉素、戊氮芥、硫酸培洛霉素、培磷酰胺、哌泊溴烷、哌泊舒凡、鹽酸吡羅蒽醌、普卡霉素、普洛美坦、卟吩姆鈉、泊非霉素、潑尼莫司汀、鹽酸丙卡巴肼、嘌呤霉素、鹽酸嘌呤霉素、吡唑呋喃菌素、利波腺苷、羅谷亞胺、沙芬戈、鹽酸沙芬戈、司莫司汀、辛曲秦、磷乙酰天冬氨酸鈉、司帕霉素、鹽酸鍺螺胺、螺莫司汀、螺鉬、鏈黑菌素、鏈佐星、磺氯苯脲、他利霉素、替可加蘭鈉、替加氟、鹽酸替洛蒽醌、替莫泊芬、替尼泊甙、替羅昔隆、睪內(nèi)酯、硫唑嘌呤胺、硫鳥嘌呤、塞替派、噻唑羧胺核苷、替拉扎明、枸櫞酸托瑞米芬、醋酸曲托龍、磷酸曲西立濱、三甲曲沙、葡萄糖醛酸三甲曲沙、曲普瑞林、鹽酸妥布氯唑、尿嘧啶氮芥、烏瑞替派、伐普肽、維替泊芬、硫酸長春堿、硫酸長春新堿、長春地辛、硫酸長春地辛、硫酸長春匹定、硫酸長春甘酯、硫酸環(huán)氧長春堿、酒石酸長春瑞濱、硫酸異長春堿、硫酸長春利定、伏氯唑、澤尼鉬、凈司他丁、鹽酸佐柔比星。在一些實(shí)施方案中，治療劑選自:20-表-1，25-二羥基維生素D3、5-乙炔基尿嘧唆、阿比特龍、阿柔比星、酰基富烯、腺環(huán)戊醇、阿多來新、阿地白介素、ALL-TK拮抗劑、六甲蜜胺、氨 莫司汀、amidox、氨磷汀、氨基酮戊酸、氨柔比星、安Π丫唆、阿那格雷、阿那曲唑、穿心蓮內(nèi)酯、血管生成抑制劑、拮抗劑D、拮抗劑G、安雷利克斯(antarelix)、抗背部化形態(tài)發(fā)生蛋白-1、抗雄激素、前列腺癌、抗雌激素、抗瘤物(antineoplaston)、反義寡核苷酸、甘氨酸阿非科林、細(xì)胞凋亡基因調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑、脫嘌呤核酸、ara-CDP-DL-PTBA、精氨酸脫氨酶、asulacrine、阿他美坦、阿莫司汀、axinastatinl、axinastatin2、axinastatin3、阿扎司瓊、阿扎霉素、重氮酪氨酸、衆(zhòng)果赤霉素III衍生物、balanol、巴馬司他、BCR/ABL拮抗劑、苯并二氫卟酹、苯甲酰基星狀孢子素、β內(nèi)酰胺衍生物、β-alethine、β -clamycin B、樺木酸、bFGF抑制劑、比卡魯胺、比生群、雙氮丙唳基精胺、雙奈法德、bistratene A、比折來新、breflate、溴匹立明、布度鈦、丁硫氨酸硫酸亞胺、卡泊三醇、鈣磷酸蛋白C、喜樹堿衍生物、金絲雀痘IL-2、卡培他濱、甲酰胺-氨基-三唑、羧胺三唑、CaRest M3、CARN700、源自軟骨的抑制劑、卡折來新、酪蛋白激酶抑制劑(ICOS)、栗樹精胺、天蠶抗菌肽B、西曲瑞克、二氫卟酚(chlorlns)、氯喹喔啉磺胺藥物、西卡前列素、順式B卜啉、克拉屈濱、氯米芬類似物、克霉唑、collismycin A、collismycin B、考布他汀A4、考布他汀類似物、conagenin、crambescidin816、克立那托、自念珠藻環(huán)肽8、自念珠藻環(huán)肽A衍生物、curacin A、環(huán)戍蒽醌、cycloplatam、cypemycin、阿糖胞苷燒磷酯、細(xì)胞溶解因子、磷酸己烷雌酚、達(dá)昔單抗、地西他濱、脫氫代代寧B、地洛瑞林、地塞米松、右異環(huán)磷酰胺、右雷佐生、右維拉帕米、地吖醌、代代寧B、didox、二乙基去甲精胺、二氫-5-氮雜胞苷、9-二氧霉素、二苯基螺莫司汀、二十二烷醇、多拉司瓊、去氧氟尿苷、屈洛昔芬、屈大麻酚、多卡米星SA、依布硒、依考莫司汀、依地福新、依決洛單抗、依氟鳥氨酸、欖香烯、乙嘧替氟、表柔比星、依立雄胺、雌莫司汀類似物、雌激素激動(dòng)劑、雌激素拮抗劑、依他硝唑、磷酸依托泊苷、依西美坦、法倔唑、法扎拉濱、芬維A胺、非格司亭、非那雄胺、夫拉平度、氟卓斯汀、fluasteixme、氟達(dá)拉濱、鹽酸氟代柔紅霉素、福酚美克、福美坦、福司曲星、福莫司汀、德卟啉釓(gadolinium texaphyrin)、硝酸鎵、加洛他濱、加尼瑞克、明膠酶抑制劑、吉西他濱、谷胱甘肽抑制劑、h印sulfam、調(diào)蛋白、六甲撐二乙酰胺、金絲桃素、伊班膦酸、伊達(dá)比星、艾多昔芬、伊決孟酮、伊莫福新、伊洛馬司他、咪唑并吖啶酮、咪喹莫特、免疫刺激肽、胰島素如生長因子-1受體抑制劑、干擾素激動(dòng)劑、干擾素、白介素、碘芐胍、碘代多柔比星、4-甘薯苦醇、伊羅普拉、伊索拉定、isobengazole、isohomohalicondrin B、伊他司瓊、jasplakinolide、kahalalide F、片螺素-N三乙酸鹽、蘭瑞肽、leinamycin、來格司亭、硫酸香燕多糖、leptolstatin、來曲唑、白血病抑制因子、白細(xì)胞α干擾素、亮丙瑞林+雌激素+黃體酮、亮丙瑞林、左旋咪唑、利阿唑、線性多胺類似物、親脂性二糖肽、親脂性鉬化合物、lissocl inami de7、洛鉬、Φ丘蝴磷脂、洛美曲索、氯尼達(dá)明、洛索蒽醌、洛伐他汀、洛索立賓、勒托替康、德B卜啉镥、lysofylline、溶解肽、美坦辛、制甘糖酶素A(mannostatin A)、馬立馬司他、馬索羅酚、乳腺絲抑蛋白、基質(zhì)溶解因子抑制劑、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑、美諾立爾、麥爾巴隆、美替瑞林、甲硫氨酸酶、甲氧氯普胺、MIF抑制劑、米非司酮、米替福新、米立司亭、錯(cuò)配的雙鏈RNA、米托胍腙、二溴衛(wèi)矛醇、絲裂霉素類似物、米托萘胺、邁托毒素成纖維細(xì)胞生長因子-皂草素、米托蒽醌、莫法羅汀、莫拉司亭、單克隆抗體、人絨毛膜促性腺激素、單磷酰脂質(zhì)A+分枝桿菌細(xì)胞壁sk、莫哌達(dá)醇、多藥耐藥性基因抑制劑、基于多腫瘤抑制基因I的治療、氮芥抗癌劑、印度洋海綿B(mycaperoxide B)、分枝桿菌細(xì)胞壁提取物、myriaporone、N-乙?；啬橇帧-取代的苯甲酰胺、那法瑞林、nagrestip、納洛酮+噴他佐辛、napavin、naphterpin、那托司亭、奈達(dá)鉬、奈莫柔比星、奈立膦酸、中性內(nèi)肽酶、尼魯米特、nisamycin、一氧化氮調(diào)節(jié)劑、硝基氧抗氧化劑、nitrullyn、06-芐基鳥嘌呤、奧曲肽、okicenone、寡核苷酸、奧納司酮、昂丹司瓊、昂丹司瓊、oracin、口服細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑、奧馬鉬、奧沙特隆、奧沙利鉬、oxaunomycin、帕 勞胺(palauamine)、棕櫚酰根霉素(palmitoylrhizoxin)、帕米膦酸、人參三醇、帕諾米芬、副細(xì)菌素(parabactin)、帕折普汀、培門冬酶、培得星、戍聚糖聚硫酸鈉、噴司他丁、pentrozole、全氟溴燒、培磷酰胺、紫蘇醇、苯連氮霉素(phenazinomycin)、乙酸苯酯、磷酸酶抑制劑、畢西巴尼、鹽酸匹魯卡品、吡柔比星、吡曲克辛、placetin A、Placetin B、纖溶酶原激活物抑制劑、鉬絡(luò)合物、鉬化合物、鉬-三胺絡(luò)合物、葉吩姆鈉、泊非霉素、強(qiáng)的松、丙基二-吖啶酮、前列腺素J2、蛋白酶體抑制劑、基于蛋白A的免疫調(diào)節(jié)劑、蛋白激酶C抑制劑、多種蛋白激酶C抑制劑、微藻、蛋白酪氨酸磷酸酶抑制劑、嘌呤核苷磷酸化酶抑制劑、紅紫素、吡唑啉吖唆、吡醇羥乙酯血紅蛋白聚氧化乙烯共軛物、raf拮抗劑、雷替曲塞、雷莫司瓊、ras法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、ras抑制劑、ras_GAP抑制劑、去甲基瑞替普汀、依替膦酸錸Rel86、根霉素、核酶、RII視黃酰胺(retinamide)、羅谷亞胺、羅希吐堿(rohitukine)、羅莫妝、羅喹美克、rubiginone Bl、ruboxyl、沙芬戈、saintopin、SarCNU、肌植醇A、沙格司亭、Sdil模擬物、司莫司汀、衰老衍生的抑制劑1、有義寡核苷酸、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)劑、單鏈抗原結(jié)合蛋白、西佐喃、索布佐生、硼卡鈉、苯基乙酸鈉、soIvero1、生長調(diào)節(jié)素結(jié)合蛋白、索納明、膦門冬酸、螺旋霉素D (spicamycin D)、螺莫司汀、斯耐潘定(splenopentin)、軟海綿素1、角鯊胺、干細(xì)胞抑制劑、干細(xì)胞分裂抑制劑、stipiamide、溶基質(zhì)蛋白酶抑制劑、sulf inosine、超活性血管活性腸肽拮抗劑、suradista、蘇拉明、苦馬豆素、合成葡糖氨基聚糖、他莫司汀、它莫西芬甲碘化物、?；悄就?、他扎羅汀、替可加蘭鈉、替加氟、tellurapyrylium、端粒酶抑制劑、替莫泊芬、替莫唑胺、替尼泊苷、四氯癸燒氧化物、tetrazomine、菌體胚素(thaliblastine)、噻可拉林、血小板生成素、血小板生成素模擬物、胸腺法新、促胸腺生成素受體激動(dòng)劑、胸腺曲南、促甲狀腺激素、乙基本紫紅素錫(tin ethyl etiopurpurin)、替拉扎明、二茂鈦二氯化物、topsentin、托瑞米芬、全能干細(xì)胞因子、翻譯抑制劑、維A酸、三乙?；蜍铡⑶髁I、三甲曲沙、曲普瑞林、托烷司瓊、妥羅雄脲、酪氨酸激酶抑制劑、酪氨酸磷酸化抑制劑(tyrphostins)、UBC抑制劑、烏苯美司、泌尿生殖竇來源的生長抑制因子、尿激酶受體拮抗劑、伐普肽、variolin B、載體系統(tǒng)、紅細(xì)胞基因治療、維拉雷瑣、藜蘆明(veramine)、verdins、維替泊芬、長春瑞賓、vinxaltine、vitaxin、伏氯唑、扎諾特隆、澤尼鉬、亞節(jié)維C(zilascorb)、凈司他丁斯酯、氮芥、環(huán)磷酰胺、苯丁酸氮芥、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀(1musitne)、氨烯咪胺、氨甲蝶呤、阿糖胞苷、巰基嘌呤、硫鳥嘌呤、噴司他丁、氮芥、環(huán)磷酰胺、苯丁酸氮芥、美法侖(meiphalan)、乙烯亞胺、甲基蜜胺、六甲基蜜胺、噻替派、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、司莫司汀、鏈佐星、氨烯咪胺、氟尿嘧啶、氟尿苷、阿糖胞苷、巰基嘌呤、硫鳥嘌呤、噴司他丁、厄布洛唑(也稱為R-55104)、多拉司他汀10 (也稱為DLS-1O和NSC-376128)、羥乙基磺酸米伏布林(也稱為C1-980)、長春新堿、NSC-639829、圓皮海綿內(nèi)酯(也稱為NVP-XX-A-296)、ABT-751 (Abbott,也稱為 E-7010)、Altorhyrtins (例如 Altorhyrtin A和 Altorhyrtin C)、軟海綿素(Spongistatin)(例如軟海綿素1、軟海綿素2、軟海綿素3、軟海綿素4、軟海綿素5、軟海綿素6、軟海綿素7、軟海綿素8和軟海綿素9)、鹽酸西馬多丁(也稱為LU-103793和NSC-D-669356)、埃博霉素類(Epothilones)(例如埃博霉素A、埃博霉素B、埃博霉素C(也稱為脫氧埃博霉素A或dEpoA)、埃博霉素D (也稱為K0S-862、dEpoB和脫氧埃博霉素B)、埃博霉素E、埃博霉素F、埃博霉素B N-氧化物、埃博霉素A N-氧化物、16-氮雜-埃博霉素B、21-氨基埃博霉素B (也稱為BMS-310705)、21_羥基埃博霉素D (也稱為脫氧埃博霉素F和dEpoF) ,26-氟代埃博霉素)、澳瑞他汀(Auristatin)PE (也稱為NSC-654663)、索利多丁(也稱為 TZT-1027)、LS-4559-P (Pharmacia,也稱為 LS-4577)、LS_4578 (Pharmacia,也稱為LS-477-P)、LS-4477 ( Pharmacia)、LS-4559 (Pharmacia)、RPR-112378 (Aventis)、硫酸長春新堿、DZ-3358 (Daiichi)、FR-182877 (Fujisawa,也稱為 WS-9885B)、GS-164 (Takeda)、GS-198 (Takeda)、KAR-2 (Hungarian Academy of Sciences)、BSF-223651 (BASF,也稱為ILX-651 和 LU-223651)、SAH-49960 (Lilly/Novartis)、SDZ-268970 (Lilly/Novartis)、AM-97 (Armad/Kyowa Hakko)、AM-132 (Armad)、AM-138 (Armad/Kyowa Hakko)、IDN-5005 (Indena)、Cryptophycin52 (也稱為 LY-355703)、AC-7739 (Ajinomoto,也稱為AVE-8063A 和 CS-39.HCI)、AC-7700 (Ajinomoto，也稱為 AVE-8062、AVE-8062A、CS-39-L-Ser.HCI 和 RPR-258062A)、Vitilevuamide> Tubulysin A、Canadensol、矢車菊黃素(也稱為 NSC-106969)、T-138067 (Tularik,也稱為 T-67、TL-138067 和 T1-138067)、COBRA-1 (Parker Hughes Institute,也稱為 DDE-261 和 WH1-261)、HlO (Kansas StateUniversity) > H16 (Kansas State University) > Oncocidin Al (也稱為 BTO-956 和 DIME)、DDE-313(Parker Hughes I nstitute)、Fijianolide B、Laulimalide、SPA_2 (Parker HughesInstitute)、 SPA-1(Parker Hughes Institute,也稱為 SPIKET-P)、3-1AABU (Cytoskeleton/Mt.Sinai School of Medicine,也稱為 MF-569)、那可丁(也稱為NSC-5366)、Nascapine、D-24851 (Asta Medica)、A-105972 (Abbott)、Hemiasterlin、3-BAABU(Cytoskeleton/Mt.Sinai School of Medicine,也稱為 MF-191)、TMPN(ArizonaState University)、乙酸丙酮二茂f凡、T-138026 (Tularik)、Monsatrol、lnanocine (也稱為NSC-698666)>3-1AABE (CytoskeIeton/Mt.Sinai School of Medicine)、A-204197 (Abbott)、T-607 (Tuiarik,也稱為 T-900607)、RPR-115781 (Aventis)、軟珊瑚醇(例如去甲軟珊瑚醇、去乙酰軟珊瑚醇、異軟珊瑚醇A和Z-軟珊瑚醇)、Caribaeoside、Caribaeolin、軟海綿素 B、D-64131 (Asta Medica)、D-68144 (Asta Medica)、DiazonamideA、A-293620 (Abbott)、NP1-2350 (Nereus)、根薯酮內(nèi)酯 A、TUB-245 (Aventis)、A-259754(Abbott)、Diozostatin、(-)-Phenylahistin (也稱為 NSCL-96F037)、D-68838 (Asta Medica)、D-68836 (Asta Medica) > Myoseverin B、D-43411 (Zentaris,也稱為 D-81862)、A-289099 (Abbott)、A-318315 (Abbott)、HT1-286 (也稱為 SPA-110，三氟醋酸鹽)(Wyeth)、D-82317 (Zentaris)、D-82318 (Zentaris)、SC-12983 (NCI)、力司弗拉司達(dá)汀(Resverastatin)憐酸鈉、BPR-OY-OO7(National Health Research Institutes)和SSR-250411 (Sanofi)。
[0119]在一些實(shí)施方案中，治療劑為抗炎劑。在一些實(shí)施方案中，治療劑為抗TNF劑、IL-1受體拮抗劑、IL-2受體拮抗劑、細(xì)胞毒劑、免疫調(diào)節(jié)劑、抗生素、T細(xì)胞協(xié)同刺激阻斷劑、B細(xì)胞消耗劑、免疫抑制劑、烷基化劑、抗代謝物、植物生物堿、萜類、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、抗癌抗生素、抗體、激素治療、抗糖尿病劑、白三烯抑制劑，或其組合。在一些實(shí)施方案中，治療劑選自:阿來西普、依法珠單抗、氨甲蝶呤、阿維A、異維A酸、羥基脲、霉酚酸酯、柳氮磺吡啶、6-硫鳥嘌呤、Dovonex、Taclonex、倍他米松、他扎羅汀、輕氯喹、依那西普、阿達(dá)木單抗、英夫利昔單抗、阿巴他塞、利妥昔單抗、曲妥珠單抗、抗CD45單克隆抗體AHN-12(NCI)、碘-131 抗 BI 抗體(Corixa Corp.)、抗 CD66 單克隆抗體 BW250/183 (NCI,Southampton General Hospital)、抗 CD45 單克隆抗體(NCI, Baylor College ofMedicine)、抗 anb3 整`聯(lián)蛋白抗體(NCI)、Biff-8962 (Bioffa Inc.)、抗體 BC8(NCI)、抗體muJ591(NCI)、銦 Inlll 單克隆抗體 MN_14(NCI)、釔 Y90 單克隆抗體 MN-14(NCI)、F105 單克隆抗體(NIAID)、單克隆抗體 RAV12 (Raven Biotechnologies)、CAT-192 (人抗 TGF-β I單克隆抗體，Genzyme)、抗體 3F8 (NCI)、177Lu_J591 (Weill Medical College of CornellUniversity)、TB-403 (Biolnvent International AB)、阿那白滯素、硫唑嘌呤、環(huán)憐酸胺、環(huán)孢菌素A、來氟米特、D-青霉胺、阿米替林或去甲替林、苯丁酸氮芥、氮芥、普拉睪酮、LJP394 (阿貝莫司鈉)、LJP1082 (La Jolla Pharmaceutical)、依庫珠單抗、belibumab、rhuCD40L(NIAID)、依帕珠單抗、西羅莫司、他克莫司、吡美莫司、沙利度胺、抗胸腺細(xì)胞球蛋白-馬(Atgam, Pharmacia Up john)、抗胸腺細(xì)胞球蛋白-兔(Thymoglobul in, Genzyme)、莫羅單抗-CD3(FDA Office of Orphan Products Development)、巴利昔單抗、達(dá)珠單抗、利魯唑、克拉屈濱、那他珠單抗、干擾素β _lb、干擾素β-la、替扎尼定、巴氯芬、美沙拉嗪、安薩科、頗得斯安、氨水楊酸、巴柳氮、奧沙拉嗪、6-巰基嘌呤、AIN457(抗IL-17單克隆抗體，Novartis)、茶喊、D2E7 (來自 Knoll Pharmaceuticals 的人抗 TNF mAb)、美泊利單抗(抗IL-5抗體，SB240563)、康納單抗(抗IL-1 β抗體，NIAMS)、抗IL-2受體抗體(達(dá)利珠單抗，NHLBI)、CNT0328(抗IL-6單克隆抗體，Centocor)、ACZ885(全人抗白介素-1β單克隆抗體，Novartis)、CNT01275 (全人抗IL-12單克隆抗體，Centocor) >
(3S)-N-羥基-4-({4-[(4-羥基-2-丁炔基)氧]苯基}磺酰基)-2，2-二甲基-3-硫代嗎啉甲酰胺(阿雷司他)、戈里木單抗(CNT0148)、奧那西普、BG9924 (Biogen Idee)、培化舍珠單抗(CDP870, UCB Pharma)、AZD9056 (AstraZeneca)、AZD5069 (AstraZeneca)、AZD9668 (AstraZeneca)、AZD7928 (AstraZeneca)、AZD2914(AstraZeneca)、AZD6067 (AstraZeneca)、AZD3342 (AstraZeneca)、AZD8309 (AstraZeneca))、[ (IR) _3_ 甲基-1-({(2S)_3-苯基-2_[(對(duì)二氮雜苯-2-基羰基)氨基]丙?；鶀氨基)丁基]硼酸(硼替佐米)、AMG-714、(抗IL15人單克隆抗體，Amgen)、ABT_874(抗IL-12單克隆抗體，Abbott Labs)、MRA(托珠單抗，抗 IL-6 受體單克隆抗體，Chugai Pharmaceutical)、CAT-354 (人抗白介素-13 單克隆抗體,Cambridge Antibody Technology,MedImmune)、阿司匹林、水楊酸、龍膽酸、膽堿水楊酸鎂、水楊酸膽堿、膽堿水楊酸鎂、水楊酸膽堿、水楊酸鎂、水楊I(lǐng)fe納、~ 氣尼柳、卡洛分、非i右洛分、非i右洛分韓、氣比洛分、布洛分、麗洛分、nabutone、正酮洛酸、酮咯酸氨丁三醇、萘普生、奧沙普秦、雙氯芬酸、依托度酸、吲哚美辛、舒林酸、托美汀、甲氯滅、甲氯滅酸鈉、甲芬那酸、吡羅昔康、美洛昔康、塞來昔布、羅非昔布、伐地考昔、帕瑞考昔、艾托考昔、羅美昔布、CS-502 (Sankyo)、JTE-522 (Japan Tobacco Inc.) >L-745, 337 (Almirall)、NS398 (Sigma)、倍他米松(Celestone)、強(qiáng)的松(Deltasone)、阿氯米松、醛固酮、安西奈德、倍氯米松、倍他米松、布地奈德、環(huán)索奈德、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龍、氯潑尼醇、可的松、可的伐唑、地夫可特、去氧皮質(zhì)酮、地奈德、去羥米松、去氧皮質(zhì)酮、地塞米松、二氟拉松、二氟可龍、氟潑尼酯、氟氯縮松(fluclorolone)、氟氫可的松、氟氫縮松、氟米松、氟尼縮松、氟輕松、醋酸氟輕松、氟可丁、氟可龍、氟米龍、氟培龍、氟潑尼定、氟替卡松、福莫可他、福莫特羅、哈西奈德、鹵米松、氫化可的松、醋丙氫化可的松、丙丁氫化可的松、丁酸氫化可的松、氯替潑諾、甲羥松、甲潑尼松、甲潑尼龍、醋丙甲潑尼龍、糠酸莫米松、帕拉米松、潑尼卡酯、潑尼松、利美索龍、替可的松、曲安西龍、烏倍他索、吡格列酮、羅格列酮、格列美脲、格列本脲、氯磺丙脲、格列吡嗪、甲苯磺丁脲、妥拉磺脲、格華止、二甲雙胍、(格列本脲+ 二甲雙胍)、羅格列酮+ 二甲雙胍、(羅格列酮+格列美脲)、艾塞那肽、胰島素、西他列汀、(格列吡嗪和二`甲雙胍)、瑞格列奈、阿卡波糖、那格列奈、奧利司他、順鉬、卡鉬、奧沙利鉬、氮芥、環(huán)磷酰胺、苯丁酸氮芥、長春新堿、長春堿、長春瑞濱、長春地辛、巰嘌呤、氟達(dá)拉濱、噴司他丁、克拉屈濱、5-氟尿嘧啶(5FU)、氟尿苷(FUDR)、胞嘧啶阿拉伯糖苷、甲氧芐唆、乙胺喃唆、培美曲塞、紫杉醇、多西他賽、依托泊苷、替尼泊苷、伊立替康、托泊替康、安吖唳、依托泊苷、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、更生霉素、多柔比星、柔紅霉素、valrubicine、伊達(dá)比星、表柔比星、博來霉素、光輝霉素、絲裂霉素、非那雄胺、戈舍瑞林、氨魯米特、阿那曲唑、來曲唑、伏氯唑、依西美坦、4-雄留烯-3，6，17-三酮(〃6-0X0〃)、1，4，6-雄烷三烯-3，17-二酮(ATD)、福美司坦、睪內(nèi)酯、法倔唑、A-81834(3-(3-(l，1-二甲基乙基硫-5-(喹啉-2-基甲氧基)-1-(4-氯甲基苯基)吲哚-2-基)-2，2- 二甲基丙醛肟-0-2-乙酸、AME103 (Amira)、AME803 (Amira)、阿曲留通、ΒΑΥ-χ-1005 ((R) - (+) - α -環(huán)戊基-4- (2-喹啉基甲氧基)-苯乙酸)、CJ-13610 (4- (3- (4- (2-甲基-咪唑-1-基)-苯基磺?；?-苯基)_ 四氫-吡喃-4-甲酸酰胺)、DG-031 (DeCode)、DG-051 (DeCode)、ΜΚ886(1-[(4_ 氯苯基)甲基]3_[(1，1-二甲基乙基)硫]_α，α-二甲基-5-(1-甲基乙基)_1Η_吲哚_2_丙酸，鈉鹽)、厘1(591(3-(1-4[(4-氯苯基)甲基]-3-[(叔丁基硫)-5-((2-喹啉基)甲氧基)-1Η-吲哚-2]-，二甲基丙酸)、RP64966([4-[5-(3-苯基-丙基)噻吩_2_基]丁氧基]乙酸)、3六6541(0?)-5-[[4-(二甲基氨基)苯基]甲基]-N-(3-巰基-2-甲基-1-氧丙基-L-半胱氨酸)、SC-56938(l-[2-[4-(苯基甲基)苯氧基]乙基]_4_哌啶甲酸乙酯)、VIA-2291 (Via Pharmaceuticals)、WY-47, 288 (2-[ (1-萘酚氧)甲基]喹啉)、齊留通、ZD-2138(6-((3-氟-5-(四氫-4-甲氧基-2H-吡喃-4基)苯氧基)甲基)_1_甲基-2 (IH)-喹啉酮)、多西環(huán)素，或其組合。
大分子載體
[0120]術(shù)語“載體”是指調(diào)節(jié)血漿半衰期、溶解度或生物分布的惰性分子。在一些實(shí)施方案中，載體調(diào)節(jié)在此公開的選擇性遞送分子的血漿半衰期。在一些實(shí)施方案中，載體調(diào)節(jié)在此公開的選擇性遞送分子的溶解度。在一些實(shí)施方案中，載體調(diào)節(jié)在此公開的選擇性遞送分子的生物分布。
[0121]在一些實(shí)施方案中，載體降低非靶細(xì)胞或組織對(duì)選擇性遞送分子的攝取。在一些實(shí)施方案中，載體降低選擇性遞送分子向軟骨內(nèi)的攝取。在一些實(shí)施方案中，載體降低選擇性遞送分子向關(guān)節(jié)內(nèi)相對(duì)于向靶組織內(nèi)的攝取。
[0122]在一些實(shí)施方案中，載體提高靶細(xì)胞或組織對(duì)選擇性遞送分子的攝取。在一些實(shí)施方案中，載體降低選擇性遞送分子向肝臟內(nèi)相對(duì)于向靶組織內(nèi)的攝取。在一些實(shí)施方案中，載體降低選擇性遞送分子向腎臟內(nèi)的攝取。在一些實(shí)施方案中，載體提高向癌組織內(nèi)的攝取。在一些實(shí)施方案中，載體提高向淋巴道和/或淋巴結(jié)內(nèi)的攝取。
[0123]在一些實(shí)施方案中，載體通過降低腎小球過濾來提高血漿半衰期。在一些實(shí)施方案中，載體通過增加或降低代謝或蛋白酶降解來調(diào)節(jié)血漿半衰期。在一些實(shí)施方案中，由于腫瘤血管系統(tǒng)的增加的通透性和保留(EPR)，載體增加了腫瘤攝取。在一些實(shí)施方案中，載體提高選擇性遞送分子的水溶解性。
[0124]在一些實(shí)施方案中，任意M獨(dú)立地直接或間接(例如，通過cM)結(jié)合至A、B或X。在一些實(shí)施方案中，任意M獨(dú)立地在N端聚谷氨酸處結(jié)合至A。在一些實(shí)施方案中，任意M通過共價(jià)連接獨(dú)立地結(jié)合至A (或，N端聚谷氨酸)。在一些實(shí)施方案中，任意M獨(dú)立地在C端聚精氨酸處結(jié)合至B。在一些實(shí)施方案中，任意M通過共價(jià)連接獨(dú)立地結(jié)合至B (或C端聚精氨酸)。在一些實(shí)施方案中，任意M獨(dú)立地直接或間接結(jié)合至X與A、X與B、B與C/N末端以及A與C/N末端之間的連接體。在一些實(shí)施方案中，共價(jià)連接包括醚鍵、硫醚鍵、胺鍵、酰胺鍵、肟鍵、碳-碳鍵、碳-氮鍵、碳-氧鍵或碳-硫鍵。
[0125]在一些實(shí)施方案中，M選自蛋白質(zhì)、合成或天然聚合物或樹枝狀聚合物。在一些實(shí)施方案中，M選自葡聚糖、PEG聚合物(例如，PEG5kDa、PEG12kDa、PEG20kDa、PEG30kDa和PEG40kDa)、白蛋白或其組合。在一些實(shí)施方案中，M為PEG聚合物。
[0126]在一些實(shí)施方案中，M的大小為50_70kD。
[0127]在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子偶聯(lián)至白蛋白。在某些情況下，白蛋白在正常生理?xiàng)l件下被排除在腎小球?yàn)V液之外。在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子包含能夠與白蛋白形成共價(jià)偶聯(lián)物的反應(yīng)基團(tuán)，例如馬來酰亞胺。含有白蛋白的選擇性遞送分子導(dǎo)致在腫瘤中裂解的選擇性遞送分子以裂解依賴的方式發(fā)生增多的積累。在一些實(shí)施方案中，白蛋白偶聯(lián)物具有良好 的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。[0128]在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子偶聯(lián)至PEG聚合物。在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子偶聯(lián)至PEG5kDa聚合物。在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子偶聯(lián)至PEG12kDa聚合物。在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子偶聯(lián)至PEG20kDa聚合物。在一些實(shí)施方案中，30kD PEG偶聯(lián)物與游離肽相比具有更長的半衰期。在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子偶聯(lián)至具有肝腎清除率的20-40kD PEG聚合物。
[0129]在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子偶聯(lián)至葡聚糖。在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子偶聯(lián)至70kDa葡聚糖。在一些實(shí)施方案中，葡聚糖偶聯(lián)物，作為分子量的混合物，難以可再現(xiàn)地合成和純化。
[0130]在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子偶聯(lián)至鏈霉親和素。
[0131]在一些實(shí)施方案中，選擇性遞送分子偶聯(lián)至第五代PAMAM樹枝狀聚合物。
[0132]在一些實(shí)施方案中，對(duì)載體加帽。在一些實(shí)施方案中，對(duì)載體加帽改善了藥代動(dòng)力學(xué)，并通過增加親水性降低了載體的細(xì)胞毒性。在一些實(shí)施方案中，所述帽選自:乙?；?、琥珀?；?、3-羥基丙?；?、2-硫代苯甲酰基、縮水甘油基、PEG-2、PEG-4、PEG-8和PEG-12。
部分X (連接體)
[0133]在一些實(shí)施方案中，由一個(gè)或多個(gè)氨基酸組成的連接體用于連接肽序列A (即，設(shè)計(jì)為抑制肽B的遞送活動(dòng)的序列)和肽序列B。通常，肽連接體除了連接這些分子或在它們之間保持一定的最小距離或其它空間關(guān)系外，將不具有特定的生物活性。然而，可以對(duì)連接體的組成氨基酸進(jìn)行選擇，以影響分子的一些性質(zhì)，例如折疊、凈電荷或疏水性。
[0134]在活細(xì)胞中，由于部分A的存在，在此公開的完整的選擇性遞送分子可能無法進(jìn)入細(xì)胞。從而，由于阻止細(xì)胞攝取的部分A不能有效地在健康細(xì)胞中被胞內(nèi)酶裂解(因?yàn)槠錈o法被吸收，并且將無法接觸到此類胞內(nèi)酶)，因此裂解X的嚴(yán)格的胞內(nèi)過程將不能在健康細(xì)胞中有效裂解X。然而，當(dāng)細(xì)胞受損傷或病變(例如，癌性細(xì)胞、缺氧細(xì)胞、缺血細(xì)胞、凋亡細(xì)胞、壞死細(xì)胞)時(shí)，此類胞內(nèi)酶從細(xì)胞中漏出，將會(huì)發(fā)生A的裂解，允許部分B和/或負(fù)荷物進(jìn)入細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)部分B和/或負(fù)荷物D向相鄰細(xì)胞的靶向遞送。在一些實(shí)施方案中，X在胞外間隙中裂解。
[0135]在一些實(shí)施方案中，毛細(xì)血管經(jīng)常在腫瘤和其它創(chuàng)傷部位周圍滲漏這一事實(shí)增強(qiáng)了高分子量的分子(例如，約30kDa或更大的分子量)到達(dá)間質(zhì)區(qū)室的能力。在一些實(shí)施方案中，不表達(dá)相關(guān)蛋白酶但緊鄰表達(dá)的細(xì)胞的X連接體細(xì)胞從選擇性遞送分子中獲取負(fù)荷物，因?yàn)閄連接體的連接一般是胞外的。在一些實(shí)施方案中，由于細(xì)胞表型的異質(zhì)性和消除盡可能高百分比的可疑細(xì)胞的愿望，這種旁觀者靶向在腫瘤治療中是有益的。
[0136]在一些實(shí)施方案中，X為可裂解的連接體。
[0137]在一些實(shí)施方案中，連接體為柔性的。在一些實(shí)施方案中，連接體為剛性的。
[0138]在一些實(shí)施方案中，連接體包含線性結(jié)構(gòu)。在一些實(shí)施方案中，連接體包含非線性結(jié)構(gòu)。在一些實(shí)施方案中，連接體包含分支結(jié)構(gòu)。在一些實(shí)施方案中，連接體包含環(huán)狀結(jié)構(gòu)。
[0139]在一些實(shí)施方案中，X為約5到約30個(gè)原子的長度。在一些實(shí)施方案中，X為約6個(gè)原子的長度。在一些實(shí)施方案中，X為約8個(gè)原子的長度。在一些實(shí)施方案中，X為約10個(gè)原子的長度。在一些實(shí)施方案中，X為約12個(gè)原子的長度。在一些實(shí)施方案中，X為約14個(gè)原子的長度。在一些實(shí)施方案中，X為約16個(gè)原子的長度。在一些實(shí)施方案中，X為約18個(gè)原子的長度。在一些實(shí)施方案中，X為約20個(gè)原子的長度。在一些實(shí)施方案中，X為約25個(gè)原子的長度。在一些實(shí)施方案中，X為約30個(gè)原子的長度。
[0140]在一些實(shí)施方案中，連接體通過共價(jià)連接將肽部分A( 即，阻止細(xì)胞攝取的肽序列)結(jié)合至肽部分B(即，遞送序列)。在一些實(shí)施方案中，共價(jià)連接包含醚鍵、硫醚鍵、胺鍵、酰胺鍵、肟鍵、腙鍵、碳-碳鍵、碳-氮鍵、碳-氧鍵或碳-硫鍵。
[0141]在一些實(shí)施方案中，X包含肽鍵。肽鍵包含L-氨基酸和/或D-氨基酸。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，為了使得免疫原性和由背景肽酶或蛋白酶導(dǎo)致的非特異性裂解最小化，D-氨基酸是優(yōu)選的。已知寡-D-精氨酸序列的細(xì)胞攝取與寡-L-精氨酸的細(xì)胞攝取一樣好，或比之更好。
[0142]在一些實(shí)施方案中，X連接體被設(shè)計(jì)為在特定條件的存在下或在特定環(huán)境下裂解。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，X連接體可在生理?xiàng)l件下裂解。這樣的X連接體的裂解可以例如被與需要遞送負(fù)荷物的細(xì)胞相關(guān)的特定病理信號(hào)或特定環(huán)境所增強(qiáng)或影響。X連接體針對(duì)被特定條件例如被特定酶裂解的設(shè)計(jì)允許將細(xì)胞攝取靶向至獲得此類條件的特定位置。從而，選擇性遞送分子提供將細(xì)胞攝取特異性靶向至期望的細(xì)胞、組織或區(qū)域的一種重要方式是通過將連接體部分X設(shè)計(jì)為能夠被此類靶向細(xì)胞、組織或區(qū)域附近的條件所裂解。
[0143]在一些實(shí)施方案中，X為pH-敏感的連接體。在一些實(shí)施方案中，X在堿性pH條件下裂解。在一些實(shí)施方案中，X在酸性pH條件下裂解。在一些實(shí)施方案中，X被蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶或其組合裂解。在一些實(shí)施方案中，X被還原劑裂解。
[0144]在一些實(shí)施方案 中，X被MMP裂解?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMP)的水解活性已與轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞的侵襲性遷移相關(guān)聯(lián)。在某些情況下，MMP被發(fā)現(xiàn)于炎癥部位附近。在某些情況下，MMP被發(fā)現(xiàn)于中風(fēng)部位附近(即，以血流量減少后腦損傷為特征的疾病)。從而，對(duì)具有本發(fā)明特征的分子的攝取能夠引導(dǎo)負(fù)荷物(至少一個(gè)部分D)向在胞外環(huán)境中具有活性MMP的特定細(xì)胞、組織或區(qū)域的細(xì)胞攝取。在一些實(shí)施方案中，X連接體含有被金屬蛋白酶MMP-2、MMP-9或MMP-7 (在癌癥和炎癥中涉及的MMPs)所裂解的氨基酸序列PLG-C (Me) -AG (SEQ IDNO:1)、PLGLAG(SEQ ID NO:2)。
[0145]在一些實(shí)施方案中，X被可在癌細(xì)胞附近發(fā)現(xiàn)的蛋白水解酶或還原性環(huán)境所裂解。這樣的環(huán)境或這樣的酶通常在正常細(xì)胞附近不能發(fā)現(xiàn)。
[0146]在一些實(shí)施方案中，X被包括但不限于凝血酶的絲氨酸蛋白酶裂解。
[0147]在一些實(shí)施方案中，X在經(jīng)歷低氧的組織中或其附近被裂解。在一些實(shí)施方案中，在低氧組織中或其附近的裂解能夠允許癌細(xì)胞和癌組織、梗塞區(qū)域及其他低氧區(qū)域的靶向。在一些實(shí)施方案中，X包含二硫鍵。在一些實(shí)施方案中，包含二硫鍵的連接體優(yōu)先在低氧區(qū)域裂解，從而將負(fù)荷物遞送靶向至該區(qū)域中的細(xì)胞。低氧被認(rèn)為能導(dǎo)致癌細(xì)胞變得更耐受放療和化療，并且還可以啟動(dòng)血管發(fā)生。在低氧環(huán)境中，例如在存在滲漏或壞死細(xì)胞時(shí)，游離硫醇和其它還原劑在胞外可獲得，而通常使胞外環(huán)境保持氧化的O2明顯被消耗。在一些實(shí)施方案中，該氧化還原平衡的變化促進(jìn)了 X連接體中二硫鍵的還原和裂解。除了利用硫醇-二硫化物平衡的二硫鍵外，在設(shè)計(jì)為在低氧環(huán)境中裂解的X連接體中還可以使用包括當(dāng)還原成氫醌時(shí)會(huì)裂解的醌的鍵。
[0148]在一些實(shí)施方案中，X在壞死環(huán)境中裂解。壞死通常導(dǎo)致酶或其他細(xì)胞內(nèi)容物的釋放，該酶或細(xì)胞內(nèi)容物可用于引發(fā)X連接體的裂解。在一些實(shí)施方案中，壞死酶(例如，鈣蛋白酶)對(duì)X的裂解允許負(fù)荷物被病變細(xì)胞和尚未完全滲漏的鄰近細(xì)胞吸收。[0149]在一些實(shí)施方案中，X為酸不穩(wěn)定的連接體。在一些實(shí)施方案中，X包含乙縮醛或乙烯醚鍵。由于從氧化磷酸化到無氧糖酵解和乳酸產(chǎn)生的Warburg轉(zhuǎn)移，在受損部位或低氧組織中觀察到酸中毒。在一些實(shí)施方案中，通過將B中的一些精氨酸替換為組氨酸(其只在低于PH7時(shí)變?yōu)殛栯x子)，而將酸中毒用作負(fù)荷物攝取的引發(fā)物。
[0150]應(yīng)當(dāng)理解，在此公開的連接體可以包括非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸，例如，羥賴氨酸、鎖鏈素、異鎖鏈素或其他非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸。在此公開的連接體可以包括修飾的氨基酸，包括翻譯后修飾的氨基酸，例如，甲基化的氨基酸(例如，甲基組氨酸、賴氨酸的甲基化形式，等等)、乙?；陌被帷Ⅴ０坊陌被?、甲?；陌被帷⒘u基化的氨基酸、磷酸化的氨基酸或其他修飾的氨基酸。在此公開的連接體還可包括肽模擬部分，包括通過非肽鍵連接的部分和通過非氨基酸部分連接或連接至非氨基酸部分的氨基酸。
[0151]在一些實(shí)施方案中，連接體X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C (me)-AG、RPLALWRS、ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL 和 RLQLK(Ac)。在一些實(shí)施方案中，連接體X包含氨基酸序列PLGLAG。在一些實(shí)施方案中，連接體X包含氨基酸序列PLG-C (me) -AG。在一些實(shí)施方案中，連接體X包含氨基酸序列PLGxAG，其中x為任意氨基酸(天然存在的或非天然存在的)。在一些實(shí)施方案中，連接體X包含氨基酸序列RPLALWRS。在一些實(shí)施方案中，連接體X包含氨基酸序列ESPAYYTA。在一些實(shí)施方案中，連接體X包含氨基酸序列DPRSFL。在一些實(shí)施方案中，連接體X包含氨基酸序列PPRSFL。在一些實(shí)施方案中，連接體X包含氨基酸序列RLQLKL。在一些實(shí)施方案中，連接體X包含氨基酸序列RLQLK (Ac)。
[0152]在一些實(shí)施方案中，連接體X包含選自以下的肽:PR(S/T) (L/I) (S/T)(其中括號(hào)中的字母表示指明的氨基酸中的任何一種可以位于該序列中的該位置處)；GGAANLVRGG ；SGRIGFLRTA ；SGRSA ；GFLG ；ALAL ；FK ;PIC(Et)F-F(其中 C(Et)表示 S-乙基半胱氨酸(巰基上連接有乙基的半胱氨酸 )表示該序列及之后的序列中典型的裂解位點(diǎn))；GGPRGLPG ；HSSKLQ ；LVLA-SSSFGY ；GVSQNY-PIVG ；GVVQA-SCRLA ；f (Pip)R-S(其中 “f” 表示 D-苯丙氨酸，“Pip”表示哌啶-2-羧酸(六氫吡啶羧酸，一種具有六元環(huán)的脯氨酸類似物)；DEVD;GffEHDG ;RPLALWRS，或其組合。
[0153]在一些實(shí)施方案中，X在低氧條件下被裂解。在一些實(shí)施方案中，X包含二硫鍵。在一些實(shí)施方案中，X包含奎寧。
[0154]在一些實(shí)施方案中，X在壞死條件下被裂解。在一些實(shí)施方案中，X包含能被鈣蛋白酶裂解的分子。
[0155]在一些實(shí)施方案中，X包含6-氨基己?；?-(氨基)-3_氧雜戍?；?或其組合。在一些實(shí)施方案中，X包含二硫鍵。
[0156]在一些實(shí)施方案中，連接體為烷基。在一些實(shí)施方案中，連接體為雜烷基。
[0157]在一些實(shí)施方案中，連接體為亞烷基。在一些實(shí)施方案中，連接體為亞烯基。在一些實(shí)施方案中，連接體為亞炔基。在一些實(shí)施方案中，連接體為亞雜烷基。
[0158]“烷基”基團(tuán)是指脂肪烴基團(tuán)。烷基部分可以是飽和烷基或不飽和烷基。根據(jù)其結(jié)構(gòu)，烷基基團(tuán)可以是單價(jià)基團(tuán)或雙價(jià)基團(tuán)(即，亞烷基基團(tuán))。
[0159]“烷基”部分可以具有1-10個(gè)碳原子(無論何時(shí)在本文中出現(xiàn)，數(shù)字范圍例如“1-10”表示給定范圍內(nèi)的每個(gè)整數(shù)；例如，“1-10個(gè)碳原子”表示烷基基團(tuán)可由I個(gè)碳原子、2個(gè)碳原子、3個(gè)碳原子，等等，直至并包括10個(gè)碳原子組成，盡管目前的定義也覆蓋了不指定數(shù)字范圍的術(shù)語“烷基”的出現(xiàn))。烷基基團(tuán)也可以是含有1-6個(gè)碳原子的“低級(jí)烷基”。本文描述的化合物的烷基基團(tuán)可被指定為“C1-C4烷基”或類似的指定。僅舉例來說，“C1-C4烷基”表示在烷基鏈中有1-4個(gè)碳原子，即，該烷基鏈選自:甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。典型的烷基基團(tuán)包括但絕不不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戍基、己基、乙烯基、丙烯基、丁烯基等等。
[0160]在一些實(shí)施方案中，連接體包含環(huán)結(jié)構(gòu)(例如，芳基)。在此使用的術(shù)語“環(huán)”是指任何共價(jià)閉合的結(jié)構(gòu)。環(huán)包括，例如，碳環(huán)(例如，芳基和環(huán)烷基)、雜環(huán)(例如，雜芳基和非芳香雜環(huán))、芳香基(例如芳基和雜芳基)和非芳香基(例如，環(huán)烷基和非芳香雜環(huán))。環(huán)可以任選地被取代。環(huán)可以是單環(huán)或多環(huán)。
[0161]在此使用的術(shù)語“芳基”是指芳香環(huán)，其中每個(gè)成環(huán)的原子是碳原子。芳基環(huán)可以由5、6、7、8、9或多于9個(gè)碳原子形成。芳基基團(tuán)可以任選地被取代。芳基基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于苯基、萘基、菲基、蒽基、芴基和茚基。根據(jù)結(jié)構(gòu)，芳基基團(tuán)可以是單價(jià)基團(tuán)或雙價(jià)基團(tuán)(即，亞芳基基團(tuán))。
[0162]術(shù)語“環(huán)烷基”是指單環(huán)或多環(huán)非芳香基團(tuán)，其中每個(gè)成環(huán)的原子(即骨架原子)是碳原子。環(huán)烷基可以為飽和的或部分不飽和的。環(huán)烷基基團(tuán)包括具有3-10個(gè)環(huán)原子的基團(tuán)。環(huán)烷基包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。
[0163]在一些實(shí)施方案中，所述環(huán)為環(huán)烷。在一些實(shí)施方案中，所述環(huán)為環(huán)烯。
[0164]在一些實(shí)施方案中，所述環(huán)為芳香環(huán)。術(shù)語“芳香的”是指具有含4η+2 π電子的離域η -電子體系的平面環(huán)，其中η為整數(shù)。芳香環(huán)可以由5、6、7、8、9或多于9個(gè)碳原子形成。芳香基可以任選地被取代。術(shù)語“芳香基”包括碳環(huán)芳基(例如，苯基)和雜環(huán)芳基(或“雜芳基”或“雜芳香基”)基團(tuán)(例如，吡啶)。該術(shù)語包括單環(huán)或稠環(huán)的多環(huán)(即，共孚相鄰碳原子對(duì)的環(huán))基團(tuán)。
[0165]在一些實(shí)施方案中，所述環(huán)為雜環(huán)。術(shù)語“雜環(huán)”是指含有1-4個(gè)各自選自0、S和N的雜原子的雜芳香和雜脂環(huán)基團(tuán)，其中各雜環(huán)基團(tuán)在其環(huán)系中具有4-10個(gè)原子，且條件為所述基團(tuán)的環(huán)不含有兩個(gè)鄰近的O或S原子。非芳香雜環(huán)基團(tuán)包括在其環(huán)系中只具有3個(gè)原子的基團(tuán)，但是芳香雜環(huán)基團(tuán)在其環(huán)系中必須具有至少5個(gè)原子。雜環(huán)基團(tuán)包括苯并稠合的環(huán)系。3元雜環(huán)基團(tuán)的一個(gè)實(shí)例是吖丙啶基。4元雜環(huán)基團(tuán)的一個(gè)實(shí)例是氮雜環(huán)丁基(衍生自氮雜環(huán)丁烷)。5元雜環(huán)基團(tuán)的一個(gè)實(shí)例是噻唑基。6元雜環(huán)基團(tuán)的一個(gè)實(shí)例是吡啶基，而10元雜環(huán)基團(tuán)的一個(gè)實(shí)例是喹啉基。非芳香雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例是吡咯烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫噻喃基、哌啶子基、嗎啉基、硫代嗎啉基、噻噁烷基、哌嗪基、氮雜環(huán)丁基、氧雜環(huán)丁基、硫雜環(huán)丁基、高哌啶基、氧雜
環(huán)庚基、硫雜環(huán)庚基、氧氮雜革基、二氮雜革基、硫氮雜革」基、1，2，3，6-四氫吡啶基、2-吡
咯啉基、3-吡咯啉基、二氫吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3- 二氧戊環(huán)基、批唑啉基、二噻烷基、二硫戊環(huán)基、二氫吡喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷基、3-氮雜雙環(huán)[4.1.0]庚烷基、3H-吲哚基和喹嗪基。芳香族雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例是吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異噁唑基、噻唑基、噁唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、增啉基、噴唑基、噴嗪基、酞嗪基、噠嗪基、三嗪基、異吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃并吡啶基。前述基團(tuán)可以是C連接的或N連接的(如果可能的話)。例如，衍生自吡咯的基團(tuán)可以是吡咯-1-基(N連接的)或吡咯-3-基(C連接的)。此外，衍生自咪唑的基團(tuán)可以是咪唑-1-基或咪唑-3-基(兩個(gè)均是N連接的)或咪唑-2-基、咪唑-4-基或咪唑-5-基(全是C連接的)。雜環(huán)基團(tuán)包括苯并稠合的環(huán)系和用一個(gè)或兩個(gè)氧(=0)部分取代的環(huán)系例如吡咯烷-2-酮。根據(jù)結(jié)構(gòu)，雜環(huán)基團(tuán)可以是單價(jià)基團(tuán)或雙價(jià)基團(tuán)(即，亞雜環(huán)基團(tuán))。
[0166]在一些實(shí)施方案中，所述環(huán)是稠合的。術(shù)語“稠合的”是指其中兩個(gè)或多個(gè)環(huán)共享一個(gè)或多個(gè)鍵的結(jié)構(gòu)。在一些實(shí)施方案中，所述環(huán)為二聚體。在一些實(shí)施方案中，所述環(huán)為三聚體。在一些實(shí)施方案中，所述環(huán)為取代的。
[0167]術(shù)語“碳環(huán)的”或“碳環(huán)”是指其中每個(gè)成環(huán)原子都為碳原子的環(huán)。碳環(huán)包括芳基和環(huán)烷基。該術(shù)語因此將碳環(huán)與在環(huán)骨架中含有至少一個(gè)不同于碳的原子(即雜原子)的雜環(huán)(“雜環(huán)的”)區(qū)分開。雜環(huán)包括雜芳基和雜環(huán)烷基。碳環(huán)和雜環(huán)可以任選地被取代。
[0168]在一些實(shí)施方案中，連接體為取代的。術(shù)語“任選地取代的”或“取代的”意指所提到的基團(tuán)可被一個(gè)或多個(gè)另外的基團(tuán)取代，所述另外的基團(tuán)單獨(dú)且獨(dú)立地選自C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基、芳基、雜芳基、C2-C6雜脂環(huán)、羥基X1-C6烷氧基、芳氧基、C1-C6烷硫基、芳硫 基、C1-C6烷基亞砜、芳基亞砜、C1-C6烷基砜、芳基砜、氰基、鹵素、C2-C8酰基、C2-C8酰氧基、硝基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6氟代烷基和氨基，包括C1-C6烷基氨基，及其受保護(hù)的衍生物。舉例來說，任選的取代基可以是LsRs，其中每個(gè)Ls獨(dú)立地選自鍵、-O-、-C (=0) -、-S-、-S (=0)-、-S (=0) 2_、-NH-、-NHC (=0) -、-C (=0) NH-、S (=0) 2NH_、-NHS (=0) 2_、-OC (=0) NH-、-NHC (=0)0_、- (C1-C6烷基)_或-(C2-C6烯基)-;且每個(gè)Rs獨(dú)立地選自H、(C1-C4烷基)、(C3-C8環(huán)燒基)、雜芳基、芳基和C1-C6雜烷基。任選地取代的非芳香基團(tuán)可以被一個(gè)或多個(gè)氧(=0)取代?？尚纬缮鲜鋈〈谋Ｗo(hù)性衍生物的保護(hù)基團(tuán)是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。
[0169]在一些實(shí)施方案中，在此公開的選擇性遞送分子包含單個(gè)連接體。使用單一機(jī)理介導(dǎo)成像和治療性負(fù)荷物的攝取是特別有價(jià)值的，因?yàn)榭梢杂脽o害的示蹤劑量進(jìn)行成像來檢測后續(xù)的治療劑量是否可能正確地集中于靶組織中。
[0170]在一些實(shí)施方案中，在此公開的選擇性遞送分子包含多個(gè)連接體。當(dāng)在此公開的選擇性遞送分子包括多個(gè)X鍵時(shí)，部分A與分子的其它部分的分離需要裂解所有的X鍵。多個(gè)X連接體的裂解可以是同時(shí)或相繼的。多個(gè)X鍵可以包括具有不同特異性的X鍵，從而部分A與分子的其它部分的分離需要該分子遇到多于一個(gè)條件或環(huán)境(“胞外信號(hào)”)。因此多個(gè)X X連接體的裂解可以用作此類胞外信號(hào)的組合的檢測器。例如，選擇性遞送分子可以包括連接堿性部分B與酸性部分A的兩個(gè)連接體部分Xa和Xb。兩個(gè)X連接體Xa和Xb必須在酸性部分A與堿性部分B分離前進(jìn)行裂解，從而允許部分B和負(fù)荷物部分C (如果有的話)進(jìn)入細(xì)胞。應(yīng)當(dāng)理解，連接體區(qū)可獨(dú)立于可能存在的另一個(gè)連接體而連接至堿性部分B或負(fù)荷物部分C，并且在需要的時(shí)候，可以包含多于兩個(gè)連接體區(qū)X。
[0171]可以使用兩個(gè)或更多個(gè)連接體的組合來進(jìn)一步調(diào)節(jié)分子的靶向和向期望的細(xì)胞、組織或區(qū)域的遞送。如果需要的話，使用胞外信號(hào)的組合來使得X連接體的裂解特異性變寬或變窄。當(dāng)多個(gè)X連接體平行連接時(shí)，裂解特異性變窄，因?yàn)槊總€(gè)X連接體都必須在部分A可以與分子的其它部分分離之前進(jìn)行裂解。當(dāng)多個(gè)X連接體順序連接時(shí)，裂解特異性變寬，因?yàn)槿我籜連接體上的裂解都允許部分A與分子的其它部分分離。例如，為了檢測蛋白酶或低氧(即，在蛋白酶或低氧的存在下裂解X)，將X連接體設(shè)計(jì)為串聯(lián)地放置蛋白酶敏感性和還原敏感性位點(diǎn)，從而使得任何一個(gè)的裂解將足以允許酸性部分A的分離?；蛘?，為了檢測蛋白酶和低氧兩者的存在(即，在蛋白酶和低氧兩者同時(shí)存在、而不是只有一者存在的情況下裂解X)，將X連接體設(shè)計(jì)為在至少一對(duì)彼此用二硫鍵鍵合的半胱氨酸之間放置蛋白酶敏感性位點(diǎn)。在這種情況下，為了允許部分A的分離，需要蛋白酶裂解和二硫鍵還原兩者。
示例性的選擇性遞送分子
[0172]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-14的選擇性遞送分子。
[0173]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-15的選擇性遞送分子。
[0174]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-23的選擇性遞送分子。
[0175]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-24的選擇性遞送分子。
[0176]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-25的選擇性遞送分子。
[0177]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-26的選擇性遞送分子。
[0178]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-27的選擇性遞送分子。
[0179]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-32的選擇性遞送分子。
[0180]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-35的選擇性遞送分子。
`[0181]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)肽P-3的肽。
[0182]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-14的選擇性遞送分子。
[0183]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-15的選擇性遞送分子。
[0184]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-23的選擇性遞送分子。
[0185]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-24的選擇性遞送分子。
[0186]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-25的選擇性遞送分子。
[0187]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-26的選擇性遞送分子。
[0188]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-27的選擇性遞送分子。
[0189]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-32的選擇性遞送分子。
[0190]在某些實(shí)施方案中，本文公開了根據(jù)SDM-35的選擇性遞送分子。
[0191]在一些實(shí)施方案中，該選擇性遞送分子具有選自以下的結(jié)構(gòu):SDM_1、SDM-2、SDM-3、SDM-4、SDM-5、SDM-6、SDM-7、SDM-8、SDM-9、SDM-10、SDM-11、SDM-12、SDM-13、SDM-14、SDM-15、SDM-16、SDM-17、SDM-18、SDM-19、SDM-20、SDM-21、SDM-22、SDM-23、SDM-24、SDM-25、SDM-26、SDM-27、SDM-28、SDM-29、SDM-30、SDM-31、SDM-32, SDM-3 3, SDM-34、SDM-35, SDM-36、SDM-37、SDM-38、SDM-39 和 SDM-40。
【權(quán)利要求】
1.一種式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db] 式I 其中， X為可裂解的連接體； A為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列的肽； B為具有含7-9個(gè)堿性氨基酸的序列的肽； CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸； M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且 Da和Db各自獨(dú)立地為顯像劑；且 其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
2.權(quán)利要求1的分子，其中A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。
3.權(quán)利要求2的分子，其中B中堿性氨基酸的數(shù)目大于A中酸性氨基酸的數(shù)目。
4.權(quán)利要求1的分子，其中A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽。
5.權(quán)利要求1的分子，其中B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
6.權(quán)利要求1的分子，其中A`為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
7.權(quán)利要求6的分子，其中A為含有5個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
8.權(quán)利要求1的分子,其中(^、4和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。
9.權(quán)利要求8的分子，其中cA、Cb和Cm各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、Ct-氨基酸、氨基酸或Y-氨基酸。
10.權(quán)利要求1的分子，其中(^、(^和Cm各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
11.權(quán)利要求1的分子，其中CpC1^PCm各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
12.權(quán)利要求10的分子，其中cB為具有游離巰基的任意氨基酸。
13.權(quán)利要求12的分子，其中CbSD-半胱氨酸。
14.權(quán)利要求10的分子，其中cA為具有N末端胺基的任意氨基酸。
15.權(quán)利要求14的分子，其中cASD-谷氨酸。
16.權(quán)利要求1的分子,其中cA為賴氨酸。
17.權(quán)利要求10的分子，其中cM為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
18.權(quán)利要求17的分子，其中cM為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
19.權(quán)利要求1的分子，其中X能被蛋白酶裂解。
20.權(quán)利要求19的分子，其中X能被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解。
21.權(quán)利要求20的分子，其中X包含能被MMP2、MMP7、MMP9或MMP14裂解的氨基酸序列。
22.權(quán)利要求1的分子，其中X包含肽鍵。
23.權(quán)利要求22的分子，其中X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C(me) -AG、RPLALffRS, ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL 和 RLQLK (Ac)。
24.權(quán)利要求23的分子，其中X包含氨基酸序列PLGLAG。
25.權(quán)利要求23的分子，其中X包含氨基酸序列PLG-C(me)-AG。
26.權(quán)利要求23的分子，其中X包含氨基酸序列RPLALWRS。
27.權(quán)利要求23的分子，其中X包含氨基酸序列DPRSFL。
28.權(quán)利要求23的分子，其中X包含氨基酸序列PPRSFL。
29.權(quán)利要求23的分子，其中X包含氨基酸序列RLQLKL。
30.權(quán)利要求23的分子，其中X包含氨基酸序列RLQLK(Ac)。
31.權(quán)利要求1-30中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行F0rsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移。
32.權(quán)利要求31的分子，其中Da和Db為Cy5和Cy7。`
33.權(quán)利要求31的分子，其中Da和Db為Cy5和IRDye750。
34.權(quán)利要求31的分子，其中Da和Db為Cy5和IRDye800。
35.權(quán)利要求31的分子，其中Da和Db為Cy5和ICG。
36.權(quán)利要求1-30中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為熒光部分和熒光猝滅部分。
37.權(quán)利要求1的分子，其中所述式I的分子為:
i)SDM-14
ii)SDM-15
iii)SDM-23
iv)SDM-24
v)SDM-25
vi)SDM-26
vii)SDM-27
viii)SDM-32;或
ix)SDM-35。
38.式II的分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
A1-X1-B1 ； 式II 其中， X1為可裂解的連接體； A1為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸且具有第一反應(yīng)性氨基酸部分Ck的序列的肽； B1為具有含7-9個(gè)堿性氨基酸且具有第二反應(yīng)性氨基酸部分cB的序列的肽；且 A1-X1-B1在A1或X1上具有第三反應(yīng)性氨基酸部分cM ;且 其中cA能夠與含有Da的第一負(fù)荷物部分反應(yīng)，cB能夠與含有Db的第二負(fù)荷物部分反應(yīng)，且cM能夠與含有M的大分子載體反應(yīng)以形成式I的分子。
39.權(quán)利要求38的分子，其中所述cA、cB和cM具有正交反應(yīng)性的官能團(tuán)。
40.權(quán)利要求38的分子，其中(^、4和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。
41.權(quán)利要求38的分子，其中cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、α-氨基酸、氨基酸或Y-氨基酸。
42.權(quán)利要求38的分子，其中(^、(^和cM各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
43.權(quán)利要求38的分子，其中cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙酰基L-苯丙氨酸。
44.權(quán)利要求42的分子，其中cB為具有游離巰基的任意氨基酸。
45.權(quán)利要求44的分子,其中cB為D-半胱氨酸。
46.權(quán)利要求42的分子，其中cA為具有N末端胺基的任意氨基酸。
47.權(quán)利要求46的分子，其中cA為D-谷氨酸。
48.權(quán)利要求38的分子,其中cA為賴氨酸。
49.權(quán)利要求42的分子，其中cM為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
50.權(quán)利要 求49的分子，其中cM為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
51.一種含有式I的分子的組織樣品:
[Da-ca] -A- [cm-M] -X-B- [ Cb-Db]； 式I 其中， X為可裂解的連接體； A為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列的肽； B為具有含7-9個(gè)堿性氨基酸的序列的肽； Ca> Cb和Cm獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸； M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且 Da和Db各自獨(dú)立地為顯像劑；且 其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
52.權(quán)利要求51的組織樣品，其中所述組織樣品是病理學(xué)玻片或切片。
53.權(quán)利要求51的組織樣品，其中所述組織樣品是癌性的。
54.權(quán)利要求53的組織樣品，其中所述癌性組織為:乳腺癌組織、結(jié)腸癌組織、鱗狀細(xì)胞癌組織、前列腺癌組織、黑素瘤組織或甲狀腺癌組織。
55.權(quán)利要求53的組織樣品，其中所述癌性組織為乳腺癌組織。
56.權(quán)利要求53的組織樣品，其中所述癌性組織為結(jié)腸癌組織。
57.權(quán)利要求51的組織樣品，其中A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。
58.權(quán)利要求57的組織樣品，其中B中堿性氨基酸的數(shù)目大于A中酸性氨基酸的數(shù)目。
59.權(quán)利要求51的組織樣品，其中A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽。
60.權(quán)利要求51的組織樣品，其中B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
61.權(quán)利要求51的組織樣品，其中A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
62.權(quán)利要求61的組織樣品，其中A為含有5個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
63.權(quán)利要求51的組織樣品，其中(^、(^和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。
64.權(quán)利要求63的組織樣品，其中cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、 氨基酸、氨基酸或Y-氨基酸。
65.權(quán)利要求51的組織樣品，其中(^、(^和cM各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
66.權(quán)利要求51的組織樣品，其中cA、4和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
67.權(quán)利要求65的組織樣品，其中cB為具有游離巰基的任意氨基酸。
68.權(quán)利要求67的組織樣品，其中cB為D-半胱氨酸。
69.權(quán)利要求65的組織樣品，其中cA為具有N末端胺基的任意氨基酸。
70.權(quán)利要求69的組織樣品，其中cA為D-谷氨酸。
71.權(quán)利要求63的組織樣品，`其中cA為賴氨酸。
72.權(quán)利要求65的組織樣品，其中cM為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
73.權(quán)利要求72的組織樣品，其中cM為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
74.權(quán)利要求51的組織樣品，其中X能被蛋白酶裂解。
75.權(quán)利要求74的組織樣品，其中X能被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解。
76.權(quán)利要求75的組織樣品，其中X包含能被MMP2、MMP7、MMP9或MMP14裂解的氨基酸序列。
77.權(quán)利要求51的組織樣品，其中X包含肽鍵。
78.權(quán)利要求77的組織樣品，其中X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C (me) -AG、RPLALffRS, ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL 和 RLQLK (Ac)。
79.權(quán)利要求77的組織樣品，其中X包含氨基酸序列PLGLAG。
80.權(quán)利要求77的組織樣品，其中X包含氨基酸序列PLG-C(me) -AG。
81.權(quán)利要求77的組織樣品，其中X包含氨基酸序列RPLALWRS。
82.權(quán)利要求77的組織樣品，其中X包含氨基酸序列DPRSFL。
83.權(quán)利要求77的組織樣品，其中X包含氨基酸序列PPRSFL。
84.權(quán)利要求77的組織樣品，其中X包含氨基酸序列RLQLKL。
85.權(quán)利要求77的組織樣品，其中X包含氨基酸序列RLQLK(Ac)。
86.權(quán)利要求51-85中任一項(xiàng)的組織樣品，其中Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行F’6rsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移。
87.權(quán)利要求86的組織樣品，其中Da和Db為Cy5和Cy7。
88.權(quán)利要求86的組織樣品，其中Da和Db為Cy5和IRDye750。
89.權(quán)利要求86的組織樣品，其中Da和Db為Cy5和IRDye800。
90.權(quán)利要求86的組織樣品，其中Da和Db為Cy5和ICG0
91.權(quán)利要求51-85中任一項(xiàng)的組織樣品，其中Da和Db為熒光部分和熒光猝滅部分。
92.權(quán)利要求51的組織樣品，其中所述式I的分子為:
i)SDM-14
ii)SDM-15
iii)SDM-23
iv)SDM-24
v)SDM-25
vi)SDM-26
vii)SDM-27
viii)SDM-32;和
ix)SDM-35。`
93.一種將一對(duì)顯像劑遞送至目標(biāo)組織的方法，包括使目標(biāo)組織接觸式I的分子: [Da-ca] -A- [cm-M] -X-B- [ Cb-Db]； 式I 其中， X為可裂解的連接體； A為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列的肽； B為具有含7-9個(gè)堿性氨基酸的序列的肽； Ca> Cb和Cm獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸； M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且 Da和Db各自獨(dú)立地為顯像劑；且 其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
94.權(quán)利要求93的方法，其中所述目標(biāo)組織是癌性的。
95.權(quán)利要求94的方法，其中所述癌性組織為:乳腺癌組織、結(jié)直腸癌組織、鱗狀細(xì)胞癌組織、前列腺癌組織、黑素瘤組織和甲狀腺癌組織。
96.權(quán)利要求94的方法，其中所述癌性組織為乳腺癌組織。
97.權(quán)利要求94的方法，其中所述癌性組織為結(jié)腸癌組織。
98.權(quán)利要求93的方法，其中A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。
99.權(quán)利要求93的方法，其中B中堿性氨基酸的數(shù)目大于A中酸性氨基酸的數(shù)目。
100.權(quán)利要求93的方法，其中A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽。
101.權(quán)利要求93的方法，其中B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
102.權(quán)利要求93的方法，其中A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
103.權(quán)利要求102的方法，其中A為含有5個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
104.權(quán)利要求93的方法，其中(^、4和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。
105.權(quán)利要求104的方法,其中cM各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、α-氨基酸、氨基酸或Y-氨基酸。
106.權(quán)利要求93的方法，其中cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
107.權(quán)利要求93的方法,其中cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙酰基L-苯丙氨酸。
108.權(quán)利要求106的方法，其中cB為具有游離巰基的任意氨基酸。
109.權(quán)利要求108的方法，其中cB為D-半胱氨酸。
110.權(quán)利要求106的方法，其中cA為具有N末端胺基的任意氨基酸。
111.權(quán)利要求110的方法，其中cASD-谷氨酸。
112.權(quán)利要求93的方法，其中cA為賴氨酸。
113.權(quán)利要求106的方法，其中cM為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
114.權(quán)利要求113的方法，其中cM為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
115.權(quán)利要求93的方法，其中X能被蛋白酶裂解。
116.權(quán)利要求115的方法，其中X能被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解。
117.權(quán)利要求116的方法，其中X包含能被MMP2、MMP7、MMP9或MMP14裂解的氨基酸序列。
118.權(quán)利要求93的方法，其中X包含肽鍵。
119.權(quán)利要求118的方法，其中X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C (me) -AG、RPLALWRS、ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL 和 RLQLK (Ac)。
120.權(quán)利要求119的方法，其中X包含氨基酸序列PLGLAG。
121.權(quán)利要求119的方法，其中X包含氨基酸序列PLG-C(me)-AG。
122.權(quán)利要求119的方法，其中X包含氨基酸序列RPLALWRS。
123.權(quán)利要求119的方法，其中X包含氨基酸序列DPRSFL。
124.權(quán)利要求119的方法，其中X包含氨基酸序列PPRSFL。
125.權(quán)利要求119的方法，其中X包含氨基酸序列RLQLKL。
126.權(quán)利要求119的方法，其中X包含氨基酸序列RLQLK(Ac)。
127.權(quán)利要求93-126中任一項(xiàng)的方法，其中Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行Fdrsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移。
128.權(quán)利要求127的方法，其中Da和Db為Cy5和Cy7。
129.權(quán)利要求127的方法，其中Da和Db為Cy5和IRDye750。
130.權(quán)利要求127的方法，其中Da和Db為Cy5和IRDye800。
131.權(quán)利要求127的方法，其中DjPDb為Cy5和ICG。
132.權(quán)利要求93-126中任一項(xiàng)的方法，其中Da和Db是熒光部分和熒光猝滅部分。
133.權(quán)利要求93的方法，其中所述式I的分子為:i)SDM-14
ii)SDM-15
iii)SDM-23
iv)SDM-24
v)SDM-25
vi)SDM-26
vii)SDM-27
viii)SDM-32;和
ix)SDM-35。
134.一種對(duì)有需要的個(gè)體內(nèi)的目標(biāo)組織進(jìn)行可視化的方法，包括: i)對(duì)所述個(gè)體施用能定位至所述個(gè)體內(nèi)目標(biāo)組織的式I的分子，
[Da-ca] -A- [cm-M] -X-B- [ Cb-Db]； 式I 其中， X為可裂解的連接體；` A為具有含5-9個(gè)酸性氨基酸的序列的肽； B為具有含7-9個(gè)堿性氨基酸的序列的肽； Ca> Cb和Cm獨(dú)立地為0-1個(gè)氨基酸； M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且 Da和Db各自獨(dú)立地為顯像劑；且 其中[cm_M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸；且 ?)使至少一種所述顯像劑可視化。
135.權(quán)利要求134的方法，其中所述組織是癌性的。
136.權(quán)利要求135的方法，其中所述癌性組織為:乳腺癌組織、結(jié)直腸癌組織、鱗狀細(xì)胞癌組織、前列腺癌組織、黑素瘤組織或甲狀腺癌組織。
137.權(quán)利要求135的方法，其中所述癌性細(xì)胞或組織為乳腺癌組織。
138.權(quán)利要求135的方法，其中所述癌性細(xì)胞或組織為結(jié)腸癌組織。
139.權(quán)利要求134的方法，進(jìn)一步包括將目標(biāo)組織從所述個(gè)體中手術(shù)移除。
140.權(quán)利要求139的方法，其中目標(biāo)組織周圍的手術(shù)切緣減少。
141.權(quán)利要求139的方法，進(jìn)一步包括由所述移除的目標(biāo)組織制備組織樣品。
142.權(quán)利要求134的方法，進(jìn)一步包括對(duì)所述癌性組織分期。
143.權(quán)利要求134的方法，其中A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。
144.權(quán)利要求134的方法，其中B中堿性氨基酸的數(shù)目大于A中酸性氨基酸的數(shù)目。
145.權(quán)利要求134的方法，其中A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽。
146.權(quán)利要求134的方法，其中B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
147.權(quán)利要求134的方法，其中A為含有5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
148.權(quán)利要求147的方法，其中A為含有5個(gè)連續(xù)谷氨酸的肽且B為含有8個(gè)連續(xù)精氨酸的肽。
149.權(quán)利要求134的方法，其中(^、4和cM各自獨(dú)立地選自天然存在的氨基酸或非天然存在的氨基酸。
150.權(quán)利要求149的方法,其中CpC1^PcM各自獨(dú)立地選自D氨基酸、L氨基酸、α -氨基酸、氨基酸或Y-氨基酸。
151.權(quán)利要求134的方法,其中(^、(^和cM各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
152.權(quán)利要求134的方法，其中cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙酰基L-苯丙氨酸。
153.權(quán)利要求151的方法，其中cB為具有游離巰基的任意氨基酸。
154.權(quán)利要求153的方法，其中cB為D-半胱氨酸。
155.權(quán)利要求151的方法，其中cA為具有N末端胺基的任意氨基酸。
156.權(quán)利要求155的方法,其中ck%D-谷氨酸。
157.權(quán)利要求134的方法，其中cA為賴氨酸。
158.權(quán)利要求151的方法，其中cM為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
159.權(quán)利要求158`的方法，其中cM為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
160.權(quán)利要求134的方法，其中X能被蛋白酶裂解。
161.權(quán)利要求160的方法，其中X能被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解。
162.權(quán)利要求161的方法，其中X包含能被MMP2、MMP7、MMP9或MMP14裂解的氨基酸序列。
163.權(quán)利要求134的方法，其中X包含肽鍵。
164.權(quán)利要求163的方法，其中X包含選自以下的氨基酸序列:PLGLAG、PLG-C (me) -AG、RPLALWRS、ESPAYYTA、DPRSFL、PPRSFL、RLQLKL 和 RLQLK (Ac)。
165.權(quán)利要求164的方法，其中X包含氨基酸序列PLGLAG。
166.權(quán)利要求164的方法，其中X包含氨基酸序列PLG-C(me)-AG。
167.權(quán)利要求164的方法，其中X包含氨基酸序列RPLALWRS。
168.權(quán)利要求164的方法，其中X包含氨基酸序列DPRSFL。
169.權(quán)利要求164的方法，其中X包含氨基酸序列PPRSFL。
170.權(quán)利要求164的方法，其中X包含氨基酸序列RLQLKL。
171.權(quán)利要求164的方法，其中X包含氨基酸序列RLQLK(Ac)。
172.權(quán)利要求134-171中任一項(xiàng)的方法，其中Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行Fiksters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移。
173.權(quán)利要求172的方法，其中Da和Db為Cy5和Cy7。
174.權(quán)利要求172的方法，其中Da和Db為Cy5和IRDye750。
175.權(quán)利要求172的方法，其中Da和Db為Cy5和IRDye800。
176.權(quán)利要求172的方法，其中Da和Db為Cy5和ICG。
177.權(quán)利要求172的方法，進(jìn)一步包括使Da和Db之間的Forsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移可視化。
178.權(quán)利要求134-171中任一項(xiàng)的方法，其中Da和Db是熒光部分和熒光猝滅部分。
179.權(quán)利要求134的方法，其中所述分子選自:
i)SDM-14
ii)SDM-15
iii)SDM-23
iv)SDM-24
v)SDM-25
vi)SDM-26
vii)SDM-27
viii)SDM-32;和
ix)SDM-35。
180.一種式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db] 式I 其中， X為可被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解的肽連接體； A為具有含5或9個(gè)連續(xù)谷氨酸的序列的肽； B為具有含8或9個(gè)連續(xù)精氨酸的序列的肽； CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地為氨基酸； M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且 Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行Fdrsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移；且 其中[Cm-M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-Ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[Cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
181.權(quán)利要求180的分子，其中A和B不具有相等數(shù)目的酸性和堿性氨基酸。
182.權(quán)利要求180的分子，其中(^、4和cM各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
183.權(quán)利要求180的分子,其中cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
184.權(quán)利要求182的分子，其中cB為具有游離巰基的任意氨基酸。
185.權(quán)利要求184的分子，其中cB為D-半胱氨酸。
186.權(quán)利要求182的分子，其中cA為具有N末端胺基的任意氨基酸。
187.權(quán)利要求186的分子，其中cASD-谷氨酸。
188.權(quán)利要求182的分子，其中cM為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
189.權(quán)利要求188的分子，其中cM為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
190.權(quán)利要求180的分子，其中X包含氨基酸序列PLGLAG。
191.權(quán)利要求180的分子，其中X包含氨基酸序列PLG-C(me)-AG。
192.權(quán)利要求180的分子，其中X包含氨基酸序列RPLALWRS。
193.權(quán)利要求180-192中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為Cy5和Cy7。
194.權(quán)利要求180-192中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為Cy5和IRDye750。
195.權(quán)利要求180-192中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為Cy5和IRDye800。
196.權(quán)利要求180-192中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為Cy5和ICG。
197.一種式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):
[Da-ca] -A- [cm_M] -X-B- [ Cb-Db] 式I 其中， X為可被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解的肽連接體； A為具有含5個(gè)連續(xù)谷氨酸的序列的肽； B為具有含8個(gè)連續(xù)精氨酸的序列的肽； CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地為氨基酸； M為聚乙二醇(PEG)聚合物`；且 Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行Fdrsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移；且 其中[Cm-M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-Ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[Cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
198.權(quán)利要求197的方法，其中(^、4和cM各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
199.權(quán)利要求197的方法，其中cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
200.權(quán)利要求197的方法，其中cB為具有游離巰基的任意氨基酸。
201.權(quán)利要求200的方法，其中cB為D-半胱氨酸。
202.權(quán)利要求197的方法，其中cA為具有N末端胺基的任意氨基酸。
203.權(quán)利要求202的方法，其中cA為D-谷氨酸。
204.權(quán)利要求197的方法，其中cM為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
205.權(quán)利要求204的組織樣品，其中cM為對(duì)-4-乙酰基L-苯丙氨酸。
206.權(quán)利要求197的分子，其中X包含氨基酸序列PLGLAG。
207.權(quán)利要求197的分子，其中X包含氨基酸序列PLG-C(me)-AG。
208.權(quán)利要求197的分子，其中X包含氨基酸序列RPLALWRS。
209.權(quán)利要求197-208中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為Cy5和Cy7。
210.權(quán)利要求197-208中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為Cy5和IRDye750。
211.權(quán)利要求197-208中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為Cy5和IRDye800。
212.權(quán)利要求197-208中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為Cy5和ICG。
213.—種式I的選擇性遞送分子，其具有以下結(jié)構(gòu):[Da-ca] -A- [cm-M] -X-B- [ Cb-Db] 式I 其中， X為可被基質(zhì)金屬蛋白酶裂解的肽連接體； A為具有含9個(gè)連續(xù)谷氨酸的序列的肽； B為具有含9個(gè)連續(xù)精氨酸的序列的肽； CA、Cb和Cm各自獨(dú)立地為氨基酸； M為聚乙二醇(PEG)聚合物；且 Da和Db是一對(duì)受體和供體熒光部分，它們能夠彼此進(jìn)行Fdrsters/熒光共振能量轉(zhuǎn)移；且 其中[Cm-M]結(jié)合至A或X上的任意位置，[Da-Ca]結(jié)合至A上的任意氨基酸，且[Cb-Db]結(jié)合至B上的任意氨基酸。
214.權(quán)利要求213的方法，其中(^、4和cM各自獨(dú)立地選自具有游離巰基的任意氨基酸、具有N末端胺基的任意氨基酸、以及具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
215.權(quán)利要求213的方法，其中cA、cB和cM各自獨(dú)立地選自D-半胱氨酸、D-谷氨酸、賴氨酸和對(duì)-4-乙酰基L-苯丙氨酸。
216.權(quán)利要求213的方`法，其中cB為具有游離巰基的任意氨基酸。
217.權(quán)利要求216的方法，其中CbSD-半胱氨酸。
218.權(quán)利要求213的方法，其中cA為具有N末端胺基的任意氨基酸。
219.權(quán)利要求218的方法，其中cASD-谷氨酸。
220.權(quán)利要求213的方法，其中cM為具有能夠在與羥胺或肼基反應(yīng)時(shí)形成肟或腙鍵的側(cè)鏈的任意氨基酸。
221.權(quán)利要求220的組織樣品，其中cM為對(duì)-4-乙?；鵏-苯丙氨酸。
222.權(quán)利要求213的分子，其中X包含氨基酸序列PLGLAG。
223.權(quán)利要求213的分子，其中X包含氨基酸序列PLG-C(me)-AG。
224.權(quán)利要求213的分子，其中X包含氨基酸序列RPLALWRS。
225.權(quán)利要求213-224中任一項(xiàng)的分子，其中DA和DB為Cy5和Cy7。
226.權(quán)利要求213-224中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為Cy5和IRDye750。
227.權(quán)利要求213-224中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為Cy5和IRDye800。
228.權(quán)利要求213-224中任一項(xiàng)的分子，其中Da和Db為Cy5和ICG。
229.—種根據(jù)SDM-14的選擇性遞送分子。
230.—種根據(jù)SDM-15的選擇性遞送分子。
231.一種根據(jù)SDM-23的選擇性遞送分子。
232.—種根據(jù)SDM-24的選擇性遞送分子。
233.—種根據(jù)SDM-25的選擇性遞送分子。
234.—種根據(jù)SDM-26的選擇性遞送分子。
235.—種根據(jù)SDM-27的選擇性遞送分子。
236.—種根據(jù)SDM-32的選擇性遞送分子。
237.—種根據(jù)SDM-35的選擇性遞送分子。
238.—種根據(jù)肽P-3的肽。`
【文檔編號(hào)】C12N5/09GK103874512SQ201280047936
【公開日】2014年6月18日 申請(qǐng)日期:2012年7月27日 優(yōu)先權(quán)日:2011年7月29日
【發(fā)明者】劉俊杰, 吉瑟斯·岡薩雷斯 申請(qǐng)人:艾維拉斯生物科學(xué)公司