專利名稱：來自海洋的卵鏈菌dp03及其產(chǎn)右旋糖苷酶的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種微生物，特別是一種分離自中國江蘇省連云港海域海水的卵鏈菌DP03 (.Catenovulum sp.) CGMCC N0.7386 ;本發(fā)明還涉及該菌株產(chǎn)右旋糖苷酶的方法。
背景技術(shù)：
右旋糖苷酶(EC3.2.1.11)是一種可以水解右旋糖苷鏈內(nèi)及鏈端α -1, 6糖苷鍵的糖苷水解酶，因而常被應(yīng)用于制糖工業(yè)、血漿代用品的生產(chǎn)及牙菌斑的預(yù)防及治療等方面。目前研究發(fā)現(xiàn)的產(chǎn)右旋糖苷酶的真菌包括青霉屬、擬青霉屬、曲霉屬、鐮孢屬、穗霉屬、輪枝孢屬、長蠕孢屬、毛殼屬及斯氏油脂酵母，細(xì)菌包括乳桿菌屬、鏈球菌屬、纖維弧菌屬、噬細(xì)胞菌屬、短桿菌屬、假單胞菌屬、棒桿菌屬、節(jié)桿菌屬、黃桿菌屬，這些產(chǎn)生菌主要為陸源微生物。與陸源酶相比，來自海洋微生物產(chǎn)生的酶，在耐鹽、耐堿、耐低溫等特性更利于工業(yè)化應(yīng)用，目前已從海洋微生物中篩選到產(chǎn)右旋糖苷酶的菌株主要為交替交替假單胞菌屬和弧菌屬(呂明生，王淑軍，房耀維，劉姝，陳麗，朱廣超，海洋細(xì)菌交替假單胞菌LP621右旋糖苷酶的方法及產(chǎn)品，發(fā)明專利，ZL200910029584.4 ;王淑軍，呂明生，房耀維，焦豫良，劉姝，曹茜，李瑛，王東，海洋低溫右旋糖酐酶與產(chǎn)酶方法及其產(chǎn)生菌S6-2，發(fā)明專利ZL201010534675.6)，因此從海洋環(huán)境出發(fā)，篩選高產(chǎn)右旋糖苷酶的菌株，是今后研究和開發(fā)右旋糖苷酶的關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新的能產(chǎn)右旋糖苷酶的來自海洋的卵鏈菌DP03。本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供上述來自海洋的卵鏈菌DP03產(chǎn)右旋糖苷酶的方法。`本發(fā)明的特征包括卵鏈菌DP03 (CaiefloraJa sp.)菌株本身(以下稱菌株DP03),以及利用該菌株發(fā)酵生產(chǎn)右旋糖苷酶的方法。本發(fā)明所涉及的菌株DP03是在中國江蘇省連云港海域的海水中分離到的卵鏈菌DP03 iCatenovulum sp.),該菌株已于2013年3月29日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，保藏編號為CGMCC N0.7386。保藏單位地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國科學(xué)院微生物研究所,聯(lián)系電話:010—64807355。以下對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的闡述。一、本發(fā)明菌株DP03的形態(tài)特征與生理生化特征。1.1形態(tài)特征:
菌株DP03為革蘭氏陰性桿菌，0.3-0.5 μπιΧ 0.7 - 1.0 μ m(見

圖1 )，菌株DP03無芽孢，能運動，在2216E固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)48h后，菌落呈淺白濕潤狀、邊緣整齊光滑、易挑取。在含有藍(lán)色葡聚糖的初篩培養(yǎng)基，能夠產(chǎn)生透明圈(見圖2)。1.2生理生化特征:該菌株接觸酶、氧化酶、甲基紅反應(yīng)呈陽性，鳥氨酸脫羧酶、賴氨酸脫羧酶、精氨酸雙水解酶、尿激酶、V-ρ、噴哚實驗呈陰性，能水解淀粉和油脂，能液化明膠、能利用葡萄糖、纖維二糖、麥芽糖、阿拉伯糖和蔗糖，部分生理生化結(jié)果見表I。表I菌株DP03的生理生化特征
權(quán)利要求
1.一種來自海洋的卵鏈菌 DP03 ( Catenovulum sp.) CGMCC N0.7386。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述來自海洋的卵鏈菌DP03( Catenovulum印.)，其特征在于，該菌株具有以下特征:卵鏈菌DP03為革蘭氏陰性短桿菌，大小為0.3-0.5 μπιΧ 0.7 - 1.0μ m ;在含有藍(lán)色葡聚糖的固體培養(yǎng)基上的菌落特征:白色不透明菌落，邊緣整齊、表面光滑、濕潤；該菌株接觸酶、氧化酶、甲基紅反應(yīng)呈陽性，鳥氨酸脫羧酶、賴氨酸脫羧酶、精氨酸雙水解酶、尿激酶、v-ρ、吲哚實驗呈陰性，能水解淀粉和油脂，能液化明膠、能利用葡萄糖、纖維二糖、麥芽糖、阿拉伯糖和蔗糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述來自海洋的卵鏈菌DP03( Catenovulum印.)，其特征在于，其生長特性為:卵鏈菌DP03生長溫度范圍為15-35°C，生長pH范圍為6-11，適宜生長的NaCl濃度為1%_10%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述來自海洋的卵鏈菌DP03( Catenovulum印.)，其特征在于，其生長特性為:卵鏈菌DP03最適生長溫度為30°C，最適生長pH為8.0，最適生長的NaCl濃度為2% ο
5.一種如權(quán)利要求1-4中任何一項所述來自海洋的卵鏈菌DP03產(chǎn)右旋糖[wl]酶的方法，其特征在于，其步驟如下:將卵鏈菌DP03接種到2216E培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)速180r/min，裝液量25%，30°C培養(yǎng)12h，得種子液；將種子液以1%的接種量接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，180r/min，30°C培養(yǎng)28h，10000r/min離心5min，取上清液即為右旋糖苷酶粗酶；所述的產(chǎn)酶培養(yǎng)基的組成為:馬鈴薯淀粉0. 5%，豆柏粉0.5%，右旋糖酐T20 1%, NaCl 2%，pH 8.0。
全文摘要
本發(fā)明是一種來自海洋的卵鏈菌DP03(Catenovulumsp.)CGMCCN0.7386。該菌株為革蘭氏陰性短桿菌；在含有藍(lán)色葡聚糖的固體培養(yǎng)基上的菌落特征白色不透明菌落，邊緣整齊、表面光滑、濕潤；該菌株接觸酶、氧化酶、甲基紅反應(yīng)呈陽性，鳥氨酸脫羧酶、賴氨酸脫羧酶、精氨酸雙水解酶、尿激酶、V-P、吲哚實驗呈陰性,能水解淀粉和油脂，能液化明膠、能利用葡萄糖、纖維二糖、麥芽糖、阿拉伯糖和蔗糖。該菌株低于4℃不能生長，最適生長溫度為30℃；生長pH范圍為6-11，最適生長pH為8.0；生長的NaCl濃度為1%-10%，最適生長的NaCl濃度為2%。本發(fā)明還公開了一種利用菌株DP03產(chǎn)右旋糖苷酶的方法。
文檔編號C12R1/01GK103194414SQ20131013996
公開日2013年7月10日 申請日期2013年4月22日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月22日
發(fā)明者呂明生, 王淑軍, 蔡阮鴻, 王小貝, 焦豫良, 房耀維 申請人:淮海工學(xué)院