硫酸新霉素紫外分光光度計(jì)檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種硫酸新霉素紫外分光光度計(jì)檢測(cè)方法。該方法研究了硫酸新霉素與Cu2+絡(luò)合物形成的條件，建立了在酒石酸鉀鈉堿性介質(zhì)中，常溫下反應(yīng)10min～30min，生成藍(lán)色絡(luò)合物，其中631nm波長(zhǎng)處有最大吸收。應(yīng)用本發(fā)明對(duì)硫酸新霉素原料和成品可溶性粉的回收率和含量測(cè)定，結(jié)果顯示，該方法通用性好、快捷，不受制劑中其它共存物的干擾，為醫(yī)藥工業(yè)提供了硫酸新霉素含量的快速檢測(cè)方法。本發(fā)明專屬性強(qiáng)，精密度好，操作簡(jiǎn)單。
【專利說(shuō)明】
硫酸新霉素紫外分光光度計(jì)檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及一種硫酸新霉素紫外分光光度計(jì)檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]硫酸新霉素可溶性粉是一種易溶于水，性質(zhì)穩(wěn)定，用途較廣的氨基糖苷類抗生素制劑，獸醫(yī)臨床上廣泛用于治療畜禽的葡萄球菌、痢疾桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等感染引起的胃腸道感染。目前，中國(guó)藥典2010年版采用微生物檢定法測(cè)定含量。其操作復(fù)雜、測(cè)定周期長(zhǎng)、試劑價(jià)格昂貴，影響因素較多，不過(guò)隨著新技術(shù)的發(fā)展，設(shè)備自動(dòng)化程度的提高，此法準(zhǔn)確性也得到進(jìn)一步改善，不過(guò)不適宜在生產(chǎn)過(guò)程中進(jìn)行半成品的質(zhì)量控制，此法也將逐步被其他方法取代。由于硫酸新霉素結(jié)構(gòu)中缺乏強(qiáng)紫外吸收的基團(tuán)，多采用衍生化處理后進(jìn)行含量測(cè)定。當(dāng)前檢測(cè)新霉素的化學(xué)方法常用2，4 一二硝基氟苯(DNF B)、鄰苯二甲醛(0ΡΑ )、茚三酮-吡啶、乙酰丙酮-甲醛等為衍生試劑，因試驗(yàn)中使用的多為有毒試劑和有機(jī)溶劑，增加了操作過(guò)程的危險(xiǎn)性，給人身帶來(lái)不利的影響。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種安全簡(jiǎn)便的硫酸新霉素紫外分光光度計(jì)檢測(cè)方法。
[0004]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:硫酸新霉素紫外分光光度計(jì)檢測(cè)方法，包括以下步驟:
(1)精密稱取硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)品，配成20mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液；
(2)精密量取標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液于容量瓶中，加入堿性酒石酸銅試液，并用純水稀釋到刻度，制成濃度范圍為I?6mg/mL的硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(3)精密稱取硫酸新霉素原粉或成品硫酸新霉素可溶性粉于容量瓶中，完全溶解后過(guò)濾；
(4)準(zhǔn)確移取濾液于容量瓶中，加入堿性酒石酸銅試液，用純水稀釋至刻度；
(5)充分搖勾后靜置10?30min，于最大吸收峰的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度；
(6)以吸光度A對(duì)濃度C作線性回歸方程，將吸光度代入公式計(jì)算硫酸新霉素的含量。
[0005]作為優(yōu)選:
步驟(I)中稱取硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)品0.5g。
[0006]步驟(2 )中分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液ImL、2mL、3mL、4mL、5mL、7.5mL于容量瓶中，再分別加入2?5mL堿性酒石酸銅試液，并用純水稀釋到刻度，制成濃度范圍為I?6mg/mL的硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0007]步驟(3)中精密稱取硫酸新霉素原粉0.2?0.5g或成品硫酸新霉素可溶性粉I?2g于容量瓶中，完全溶解后過(guò)濾。
[0008]步驟(4)中，準(zhǔn)確移取濾液5mL于容量瓶中，加入2mL堿性酒石酸銅試液，用純水稀釋至刻度。
[0009]本發(fā)明的有益效果是:
(I)使用堿性酒石酸銅試液作為反應(yīng)試劑，使用安全方便。
[0010](2)對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行過(guò)濾，減少了對(duì)吸光度的影響。
[0011](3)反應(yīng)溫度和時(shí)間的優(yōu)化。
[0012]與微生物法相比，本發(fā)明的分光光度法檢測(cè)具有簡(jiǎn)便、快速、易于操作等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)試驗(yàn)環(huán)境、儀器設(shè)備要求不高，適合一般生產(chǎn)企業(yè)使用。
【具體實(shí)施方式】
[0013]由于薄層色譜法、高效液相色譜法、分光光度法等方法中存在反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)或使用了較多的有機(jī)溶劑等問(wèn)題。本實(shí)施例的目的是提供一個(gè)通用、快捷的藥物中硫酸新霉素含量檢測(cè)方法，滿足硫酸新霉素生產(chǎn)控制和制劑檢測(cè)的需要，以取代費(fèi)時(shí)的藥典方法一微生物檢定法。
[0014]—種硫酸新霉素紫外分光光度計(jì)檢測(cè)方法，包括以下步驟:
(1)精密稱取硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)品0.5g，配成20mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液；
(2)分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液ImL、2mL、3mL、4mL、5mL、7.5mL于25mL容量瓶中，分別加入2?5mL堿性酒石酸銅試液，并用純水稀釋到刻度，制成濃度范圍為I?6mg/mL的硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(3)精密稱取硫酸新霉素原粉0.2?0.5g或成品硫酸新霉素可溶性粉I?2g于50mL容量瓶中，完全溶解后過(guò)濾；
(4)準(zhǔn)確移取濾液5mL于1mL容量瓶中，加入2mL堿性酒石酸銅試液，用純水稀釋至刻度；
(5)充分搖勾后靜置10?30min，于最大吸收峰的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度；
(6)以吸光度A對(duì)濃度C作線性回歸方程，將吸光度代入公式計(jì)算硫酸新霉素的含量。
[0015]本實(shí)施案例研究了硫酸新霉素與Cu2+絡(luò)合物形成的條件，建立了在酒石酸鉀鈉堿性介質(zhì)中，常溫下反應(yīng)1min?30min，生成藍(lán)色絡(luò)合物，其中631nm波長(zhǎng)處有最大吸收。應(yīng)用本實(shí)施例對(duì)硫酸新霉素原料和成品硫酸新霉素可溶性粉的回收率和含量測(cè)定，結(jié)果顯示，該方法通用性好、快捷，不受制劑中其它共存物的干擾，為醫(yī)藥工業(yè)提供了硫酸新霉素含量的快速檢測(cè)方法。本方法專屬性強(qiáng)，精密度好，操作簡(jiǎn)單。
[0016]對(duì)于成品硫酸新霉素可溶性粉來(lái)說(shuō)，除了主成份外，還有賦形劑淀粉和葡萄糖等。這些共存物在水中溶解不完全，處理樣品時(shí)，經(jīng)過(guò)過(guò)濾可除去絕大部分，本實(shí)施例對(duì)其干擾問(wèn)題作了探索，發(fā)現(xiàn)淀粉和低于10%的葡萄糖含量對(duì)硫酸新霉素的測(cè)定無(wú)影響。
[0017]以上所述的本發(fā)明實(shí)施方式，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限定。任何在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.光光度計(jì)檢測(cè)方法，包括以下步驟: (1)精密稱取硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)品，配成20mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液； (2)精密量取標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液于容量瓶中，加入堿性酒石酸銅試液，并用純水稀釋到刻度，制成濃度范圍為I?6mg/mL的硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線； (3)精密稱取硫酸新霉素原粉或成品硫酸新霉素可溶性粉于容量瓶中，完全溶解后過(guò)濾； (4)準(zhǔn)確移取濾液于容量瓶中，加入堿性酒石酸銅試液，用純水稀釋至刻度； (5)充分搖勾后靜置10?30min，于最大吸收峰的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度； (6)以吸光度A對(duì)濃度C作線性回歸方程，將吸光度代入公式計(jì)算硫酸新霉素的含量。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸新霉素紫外分光光度計(jì)檢測(cè)方法，其特征在于，步驟(I)中稱取硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)品0.5g。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸新霉素紫外分光光度計(jì)檢測(cè)方法，其特征在于，步驟(2)中分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液ImL、2mL、3mL、4mL、5mL、7.5mL于容量瓶中，再分別加入2?5mL堿性酒石酸銅試液，并用純水稀釋到刻度，制成濃度范圍為I?6mg/mL的硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸新霉素紫外分光光度計(jì)檢測(cè)方法，其特征在于，步驟(3)中精密稱取硫酸新霉素原粉0.2?0.5g或成品硫酸新霉素可溶性粉I?2g于容量瓶中，完全溶解后過(guò)濾。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸新霉素紫外分光光度計(jì)檢測(cè)方法，其特征在于，步驟(4)中，準(zhǔn)確移取濾液5mL于容量瓶中，加入2mL堿性酒石酸銅試液，用純水稀釋至刻度。
【文檔編號(hào)】G01N1/28GK106053374SQ201610695376
【公開(kāi)日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年8月22日
【發(fā)明人】孟慶娟, 楊曉龍, 張廣志, 胡廣偉
【申請(qǐng)人】安徽華澳生物技術(shù)有限公司