用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒及基因芯片的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒以及相應的基因芯片。所述的試劑盒包括：檢測人基因組的7個SNP位點的PCR擴增引物和單堿基延伸引物，所述7個SNP位點是rs1412829、rs1572072、rs28421666、rs2860580、rs2894207、rs6774494、rs9510787；還包括檢測人基因組的4個SNP位點的PCR擴增引物和單堿基延伸引物，所述4個SNP位點是rs2853668、rs31489、rs402710和rs4635969；還包括檢測與鼻咽癌相關(guān)的EB病毒亞型特異性的單核苷酸多態(tài)性位點G155391A的巢氏PCR擴增引物。所述的基因芯片包括：檢測人基因組的11個SNP位點的上下游引物和探針，所述11個SNP位點是rs1412829、rs1572072、rs28421666、rs2860580、rs2894207、rs6774494、rs9510787、rs2853668、rs31489、rs402710、rs4635969；以及檢測與鼻咽癌相關(guān)的EB病毒亞型特異性的單核苷酸多態(tài)性位點G155391A的上下游引物和探針。
【專利說明】用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒及基因芯片
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒以及相應的基因芯片，用于預測鼻咽癌發(fā)病風險、進行鼻咽癌高危人群篩查以提高鼻咽癌早診率。
【背景技術(shù)】
[0002]鼻咽癌是鼻咽上皮來源的惡性腫瘤，多發(fā)于鼻咽頂部和咽隱窩，是一種多因素影響的復雜性疾病，其發(fā)生及發(fā)展與遺傳因素、EBV病毒感染及環(huán)境因素密切相關(guān)。中國是世界鼻咽癌高發(fā)區(qū)，據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，2008年，中國新發(fā)病例占全球39.2%(33101人)，因鼻咽癌死亡病例占全球40.5% (20899人)；并且，鼻咽癌好發(fā)于壯年，嚴重影響人民健康和經(jīng)濟發(fā)展。
[0003]近幾年，巴德年院士提出的現(xiàn)代“3P”醫(yī)學理念正不斷得到推廣。“3P”醫(yī)學模式，即預測(Prediction)、預防(Prevention)和個體化診療(Personalization),強調(diào)利用個體基因組等信息，進行疾病的預測和防治，對于疾病的態(tài)度由“重治”轉(zhuǎn)變?yōu)椤爸胤馈?。同樣，鼻咽癌的防治關(guān)鍵將是進行患病高危人群的篩查，提高早診率。臨床研究發(fā)現(xiàn)，鼻咽癌早期治療效果遠高于晚期。臨床分期是影響治療效果的重要因素，早期無局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移鼻咽癌的5年生存率(75.7%)遠高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移鼻咽癌(58.2%)和晚期遠處轉(zhuǎn)移鼻咽癌(34.9%)。然而，目前仍然缺乏有效的用于高危人群篩查、早期診斷的方法策略，加上鼻咽癌的早期癥狀無特異性和原發(fā)部位較隱蔽，不易被發(fā)現(xiàn)，80%鼻咽癌患者就診時已處于中晚期，治療效果不理想，導致臨床上鼻咽癌的5年生存率一直徘徊于60%左右。進行鼻咽癌高發(fā)區(qū)人群篩選，能夠篩選患病高危人群，提高鼻咽癌早診率，是提高治療效果的關(guān)鍵。因而，開發(fā)鼻咽癌發(fā)病風險預測、用于鼻咽癌高危人群篩查的新型手段具有重要的意義。
[0004]目前臨床上提高鼻咽癌早期診斷率主要是通過提高個人健康意識，結(jié)合鼻咽腔檢查，并利用EB病毒抗體檢測技術(shù)以評估EB病毒感染情況(詳見專利:CN92114135 “一種檢測EB病毒抗體的顯色試劑及其制造方法”;CN200710027841 “檢測多種抗EB病毒抗原抗體的液相芯片試劑盒及其制備方法”;CN201010255146 “EB病毒IgA抗體檢測試劑盒(膠體金法)及制備方法”;CN200710029366.1 “檢測EB病毒gp78抗體的CBA試劑盒及其制備方法”等)。但是這種策略 難以應用于大規(guī)模人群的高危人群篩查以及鼻咽癌的早期預防預警，也未能夠有效地提高早診率。因此，對于鼻咽癌高危人群，根據(jù)個體攜帶鼻咽癌易感基因情況進行鼻咽癌發(fā)病風險預測以提高鼻咽癌早診率顯得非常重要。
[0005]遺傳因素在不少腫瘤的發(fā)生中起到不容忽視的重要作用。在其它相關(guān)的惡性腫瘤研究當中，研究者能夠利用個體攜帶易感基因的情況，對其發(fā)病風險進行預測。例如，分別攜帶BRCAl和BRCA2基因突變的女性，罹患乳腺癌的相對風險分別是正常群體的5 —45倍和9 一 21倍；并且，Antoniou等人通過7個風險相關(guān)位點聯(lián)合分析發(fā)現(xiàn),在BRCA2突變攜帶者中，5%高危組到80歲時發(fā)生乳腺癌的可能性為80~96%，而低危組僅為42~50%，指出這些患病風險差異可以用于指導臨床方案。然而，目前缺乏有效的鼻咽癌發(fā)病風險預測產(chǎn)品。雖然已有個別申請專利根據(jù)鼻咽癌相關(guān)基因來判定個體對鼻咽癌是否易感的方法，如PLUNC的C-2128T位點、C-1888T位點或由此兩位點組成的單倍型(詳見專利:CN200510008650.1 “一種檢測與鼻咽癌相關(guān)的易感基因PLUNC基因型的方法及PLUNC易感基因”)，CYP2E1基因上Rsall多態(tài)性，TNF-β基因上G252A位點多態(tài)性，GSTMl基因缺失與否(Present/Null)，GSTTl 基因缺失與否(Present/Null)(詳見專利:CN201210053659 “鼻咽癌易感基因無創(chuàng)檢測試劑盒”)等。然而，該方法僅針對極少數(shù)的指標檢測，準確率較低；并且，該方法可靠性有待于大規(guī)模人群樣本進行驗證。另外，EB病毒已被國際癌癥研究聯(lián)盟(IARC)確定為I類致癌物，而鼻咽癌與EB病毒有密切的關(guān)聯(lián)。因此，綜合考慮基因易感因素和EB病毒因素對鼻咽癌發(fā)病風險的預測十分必要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供了一種用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒以及相應的基因芯片，可同時檢測多個鼻咽癌易感基因的SNP位點，可以為個體罹患鼻咽癌風險程度、鼻咽癌高發(fā)區(qū)人群普查，篩查鼻咽癌發(fā)病高危人群以及進行相應預防措施提供參考。
[0007]本發(fā)明所述的一種用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒包括:檢測人基因組的7個SNP位點的PCR擴增引物和單堿基延伸引物，所述7個SNP位點是rsl412829、rsl572072、rs28421666、rs2860580、rs2894207、rs6774494、rs9510787。
[0008]根據(jù)本發(fā)明所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒的進一步特征，所述檢測rsl412829的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO:1和SEQ ID NO: 2，以及單堿基延伸弓丨物的序列為SEQ ID N0:3 ;所述檢測rsl572072的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO: 4和SEQ ID NO:5，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO:6 ;所述檢測rs28421666的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID N0:7和SEQ ID NO:8，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ IDN0:9 ;所述檢測rs2860580的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO: 10和SEQ ID NO: 11，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO: 12 ;所述檢測rs2894207的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID N0:13和SEQ ID NO: 14，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID N0:15;所述檢測rs6774494的PCR擴增引物的序列分別為SEQ IDN0:16和SEQ ID NO: 17，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO: 18 ;所述檢測rs9510787的PCR擴增引物的序列分別為SEQID NO: 19和SEQ ID NO:20，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO:21。
[0009]根據(jù)本發(fā)明所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒的進一步特征，所述的試劑盒還包括檢測人基因組的4個SNP位點的PCR擴增引物和單堿基延伸引物，所述4個SNP位點是 rs2853668、rs31489、rs402710 和 rs4635969。
[0010]根據(jù)本發(fā)明所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒的進一步特征，所述檢測rs2853668的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID N0:22和SEQ ID N0:23，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO: 24 ;所述檢測rs31489的PCR擴增引物的序列分別為SEQ IDNO:25和SEQ ID N O:26,以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO:27 ;所述檢測rs402710的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID N0:28和SEQ ID NO:29，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID N0:30 ;所述檢測rs4635969的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID N0:31和SEQID NO:32，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID N0:33。
[0011]根據(jù)本發(fā)明所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒的進一步特征，所述的試劑盒還包括檢測與鼻咽癌相關(guān)的EB病毒亞型特異性的單核苷酸多態(tài)性位點G155391A(GenBank登錄號:NC_007605)的巢氏PCR擴增引物。
[0012]根據(jù)本發(fā)明所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒的進一步特征，所述檢測與鼻咽癌相關(guān)的EB病毒亞型特異性的單核苷酸多態(tài)性位點G155391A的巢氏PCR擴增引物的初級PCR引物的序列為SEQ ID N0:34和SEQ ID NO:35，以及次級PCR引物的序列為SEQ IDNO:36 和 SEQ ID NO:37。
[0013]本發(fā)明所述的試劑盒以是以本發(fā)明人的基于國際范圍內(nèi)最大規(guī)模樣本量的鼻咽癌人群和正常人對照人群及全基因組水平鼻咽癌易感基因篩查結(jié)果的前期研究為基礎，結(jié)合其它的鼻咽癌相關(guān)易感基因，選擇11個單核苷酸多態(tài)性位點(SNP)及EBV分型信息進行制備的，針對每個位點的引物序列都是經(jīng)過特異性篩選的。采取受檢者外周血、唾液或漱口水來源的基因組DNA，在本發(fā)明所述的試劑盒上進行基因分型檢測，再利用多重PCR擴增、質(zhì)譜檢測(Sequenom)及桑格(Sanger)測序方法，檢測單核苷酸位點，綜合分析環(huán)境因素(腌制食品食用史、既往吸煙史、新鮮水果蔬菜食用量)、腫瘤家族史及鼻咽癌易感基因位點單核苷酸多態(tài)性(SNP)信息，利用遺傳風險計分模型，推測受檢者罹患鼻咽癌的風險程度，克服了現(xiàn)有的僅僅通過檢測EB病毒感染情況、或者依靠極少數(shù)且尚待大規(guī)模驗證的易感基因指標的等結(jié)果來進行鼻咽癌發(fā)病風險判斷的不足。本發(fā)明所述的試劑盒能夠在受檢者任何一個年齡階段進行檢測，結(jié)合受檢者環(huán)境暴露因素，提示受檢者不同時期罹患鼻咽癌的風險程度，能夠進行大規(guī)模人群普查、篩選鼻咽癌發(fā)病高危人群，實現(xiàn)鼻咽癌發(fā)病風險預測、預警，提高早診率。
[0014]本發(fā)明所述的一種用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的基因芯片包括:檢測人基因組的11個SNP位點的上下游引物和探針，所述11個SNP位點是rsl412829、rsl572072、rs28421666、rs2860580, rs2894207、rs6774494、rs9510787、rs2853668、rs31489、rs402710、rs4635969 ;以及檢測檢測與鼻咽癌相關(guān)的EB病毒亞型特異性的單核苷酸多態(tài)性位點G155391A的上下 游引物和探針。
[0015]根據(jù)本發(fā)明所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的基因芯片的進一步特征，所述檢測rsl412829的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:38和SEQ ID N0:39，以及探針的序列為SEQ ID N0:40和SEQ ID N0:41 ;所述檢測rsl572072的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:42 和 SEQ ID NO:43，以及探針的序列為 SEQ ID N0:44 和 SEQ ID NO:45 ;所述檢測rs28421666的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:46和SEQ ID N0:47，以及探針的序列為SEQ ID N0:48和SEQID NO:49 ;所述檢測rs2860580的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:50 和 SEQ ID NO:51，以及探針的序列為 SEQ ID N0:52 和 SEQ ID N0:53;所述檢測rs2894207的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:54和SEQ ID N0:55，以及探針的序列為SEQ ID N0:56和SEQ ID NO:57 ;所述檢測rs6774494的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:58 和 SEQ ID NO:59，以及探針的序列為 SEQ IDN0:60 和 SEQ ID N0:61 ;所述檢測rs9510787的上下游引物的序列分別為SEQID NO:62和SEQ ID N0:63,以及探針的序列為SEQ ID NO:64 SEQ ID NO:65 ;所述檢測rs2853668的上下游引物的序列分別為SEQID N0:66和SEQ IDN0:67，以及探針的序列為SEQ ID N0:68和SEQ ID NO:69 ;所述檢測rs31489的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:70和SEQ ID NO:71，以及探針的序列為SEQID N0:72和SEQ ID NO:73 ;所述檢測rs402710的上下游引物的序列分別為SEQ ID NO:74和SEQ ID NO:75，以及探針的序列為SEQ ID N0:76和SEQID NO:77 ;所述檢測rs4635969的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:78和SEQ ID NO:79，以及探針的序列為SEQ ID NO:80和SEQ ID NO:81 ;所述檢測檢測與鼻咽癌相關(guān)的EB病毒亞型特異性的單核苷酸多態(tài)性位點G155391A (GenBank登錄號:NC-007605)的上下游引物的序列分別為SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83，以及探針的序列為 SEQ ID N0:84 和 SEQ ID NO:85。
[0016]本發(fā)明所述的基因芯片是以本發(fā)明人基于世界范圍內(nèi)最大規(guī)模樣本量的鼻咽癌人群和正常對照人群，以及全基因組水平鼻咽癌易感基因篩查結(jié)果的前期研究為基礎，結(jié)合新的獨立人群研究發(fā)現(xiàn)的鼻咽癌相關(guān)易感基因，選擇11個單核苷酸多態(tài)性位點(SNP)及EBV分型信息進行制備的，針對每個位點的引物和探針序列都是經(jīng)過特異性篩選的結(jié)果。采取受檢者外周血、唾液或漱口水來源的基因組DNA，在本發(fā)明所述的基因芯片上進行基因分型檢測，檢測這11個單核苷酸位點以及與鼻咽癌相關(guān)的EB病毒亞型特異性的單核苷酸多態(tài)性位點G155391A (GenBank登錄號:NC_007605)信息；綜合受檢者各位點的基因型信息，利用遺傳風險計分模型，推測受檢者罹患鼻咽癌的風險程度。
【具體實施方式】
[0017](一)用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的與鼻咽癌發(fā)病顯著相關(guān)的SNP位點
[0018]本發(fā)明是基于鼻咽癌人群和正常人對照人群的大規(guī)模樣本量的鼻咽癌全基因組關(guān)聯(lián)分析，以及全基因組水平鼻咽癌易感基因篩查結(jié)果的前期研究(A genome-wideassociation study of nasopharyngeal carcinoma identifies three newsusceptibility loci, Jin-Xin Bei et al, Nature Genetics, Volume42, Number7, 600-603，July2010)為基礎，同時,發(fā)明人利用薈萃分析(meta-analysis)的統(tǒng)計學方法對大規(guī)模的全基因組關(guān)聯(lián)數(shù)據(jù)進行整合分析，獲得1300個候選SNP位點，并在獨立的廣東人群隊列(2735例鼻咽癌病人和3112例對照)和廣西人群隊列(790例鼻咽癌病人和1009例對照)中進行驗證，結(jié)合HapMap、dbSNP等數(shù)據(jù)庫挑選出SNP位點，并進行位點實驗成功率評分，從中確定了與鼻咽癌發(fā)病顯著相關(guān)的11個SNP位點。
[0019]在發(fā)明人所研究的隊列中，進行了 SNP位點關(guān)聯(lián)分析，挑選的11個位點與鼻咽癌發(fā)病關(guān)聯(lián)程度如下表:
[0020]表1:
【權(quán)利要求】
1.一種用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括: 檢測人基因組的7個SNP位點的PCR擴增引物和單堿基延伸引物，所述7個SNP位點是 rsl412829、rsl572072、rs28421666、rs2860580、rs2894207、rs6774494、rs9510787。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒，其特征在于: 所述檢測rsl412829的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO:1和SEQ IDNO: 2,以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO:3 ； 所述檢測rsl572072的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO: 4 SEQ IDNO: 5,以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO:6 ； 所述檢測rs28421666的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID N0:7和SEQ IDN0:8，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO:9 ； 所述檢測rs2860580的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO: 10和SEQ IDN0:11，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO: 12 ； 所述檢測rs2894207的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO: 13和SEQ IDNO: 14，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO: 15 ； 所述檢測rs6774494的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO: 16和SEQ IDNO: 17，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO: 18 ； 所述檢測rs9510787的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO: 19和SEQ IDNO:20, U及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID N0:21。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒，其特征在于:還包括檢測人基因組的4個SNP位點的PCR擴增引物和單堿基延伸引物，所述4個SNP位點是rs2853668、rs31489、rs402710 和 rs4635969。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒，其特征在于: 所述檢測rs2853668的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID N0:22和SEQ IDNO:23, U及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO:24 ； 所述檢測rs31489的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO: 25和SEQ IDNO:26,以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO:27 ； 所述檢測rs402710的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO: 28和SEQ IDN0:29，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID NO:30 ； 所述檢測rs4635969的PCR擴增引物的序列分別為SEQ ID NO: 31和SEQ IDNO: 32，以及單堿基延伸引物的序列為SEQ ID N0:33。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒，其特征在于:還包括檢測與鼻咽癌相關(guān)的EB病毒亞型特異性的單核苷酸多態(tài)性位點G155391A (GenBank登錄號:NC-007605)的巢氏PCR擴增引物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的試劑盒，其特征在于:所述檢測與鼻咽癌相關(guān)的EB病毒亞型特異性的單核苷酸多態(tài)性位點G155391A (GenBank登錄號:NC-007605)的巢氏PCR擴增引物的初級PCR引物的序列為SEQ ID NO: 34和SEQ ID NO: 35，以及次級PCR引物的序列為SEQ ID N0:36和SEQ ID N0:37。
7.一種用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的基因芯片，其特征在于，所述基因芯片包括: 檢測人基因組的11個SNP位點的上下游引物和探針，所述11個SNP位點是rs 1412829、rsl572072、 rs28421666、 rs2860580、 rs2894207、 rs6774494、 rs9510787、 rs2853668、rs31489、rs402710、rs4635969 ;以及 檢測與鼻咽癌相關(guān)的EB病毒亞型特異性的單核苷酸多態(tài)性位點G155391A (GenBank登錄號:NC-007605)的上下游引物和探針。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于鼻咽癌發(fā)病風險預測的基因芯片，其特征在于: 所述檢測rsl412829的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:38和SEQ IDN0:39，以及探針的序列為SEQ ID N0:40和SEQ ID NO:41 ； 所述檢測rsl572072的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:42和SEQ IDN0:43，以及探針的序列為SEQ ID N0:44和SEQ ID NO:45 ； 所述檢測rs28421666的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:46和SEQ IDN0:47，以及探針的序列為SEQ ID NO:48和SEQ ID NO:49 ； 所述檢測rs2860580的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:50和SEQ IDN0:51，以及探針的序列為SEQ ID N0:52和SEQ ID NO:53 ； 所述檢測rs2894207的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:54和SEQ IDN0:55，以及探針的序列為SEQ ID NO:56和SEQ ID NO:57 ； 所述檢測rs6774494的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:58和SEQ IDN0:59，以及探針的序列為SEQ ID NO:60和SEQ ID NO:61 ； 所述檢測rs9510787的上下游引物的序列分別為SEQ ID NO:62和SEQ IDNO:63，以及探針的序列為SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:65 ； 所述檢測rs2853668的上下游引`物的序列分別為SEQ ID NO:66和SEQ IDNO:67，以及探針的序列為SEQ ID NO:68和SEQ ID NO:69 ； 所述檢測rs31489的上下游引物的序列分別為SEQ ID N0:70和SEQ ID NO:71，以及探針的序列為 SEQ ID NO:72 和 SEQ ID NO:73 ； 所述檢測rs402710的上下游引物的序列分別為SEQ ID NO:74和SEQ IDNO:75，以及探針的序列為 SEQ ID NO:76 和 SEQ ID NO:77 ； 所述檢測rs4635969的上下游引物的序列分別為SEQ ID NO:78和SEQ IDNO:79，以及探針的序列為 SEQ ID NO:80 SEQ ID NO:81 ； 所述檢測與鼻咽癌相關(guān)的EB病毒亞型特異性的單核苷酸多態(tài)性位點G155391A(GenBank登錄號:NC_007605)的上下游引物的序列分別為SEQ IDNO:82和SEQ ID NO:83,以及探針的序列為SEQ ID N0:84和SEQ ID NO:85。
【文檔編號】C12Q1/68GK103757104SQ201310752858
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2013年12月30日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月28日
【發(fā)明者】曾益新, 崔倩, 賈衛(wèi)華, 貝錦新, 徐淼, 劉穩(wěn)升 申請人:中山大學腫瘤防治中心