相關申請的交叉引用本申請要求2014年8月21日提交的美國臨時專利申請?zhí)?2/040,393的優(yōu)先權，其全部內容通過引用并入本文。發(fā)明領域本發(fā)明涉及乳制品替代物、其制造方法和包含不含動物成分的乳脂和用于食品應用的蛋白質諸如乳、黃油、奶酪、酸奶和奶油的組合物。發(fā)明背景全球乳制品市場估計為5000億美元，平均年增長率為4％。牛乳占市場的很大一部分，而基于植物的替代物在美國占10億美元，并且對于乳糖不耐性乳估計約7億美元。已知牛乳具有四種特定酪蛋白，α-s1-酪蛋白、α-s2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白。哺乳動物或哺乳類動物產生的乳是非常復雜的流體，其包括數(shù)千種組分(例如，如果鑒定所有三酸甘油酯)。哺乳動物或哺乳類動物產生的乳包括水、各種不同的脂質、糖、各種不同的蛋白質和各種不同的無機鹽和化合物(參見例如，bolandandthompson(eds),milkproteinsfromexpressiontofood,academicpress,2014)。盡管哺乳動物產生的乳(諸如牛乳)被許多人認為是理想的營養(yǎng)來源，但由于與哺乳動物或哺乳類動物產生的乳的過敏原性、某些組分的乳糖不耐受性、個人偏好以及感知的乳制品行業(yè)減小的環(huán)境效益相關的原因，已尋求哺乳動物或哺乳類動物產生的乳(諸如牛乳)的各種乳替代物，諸如基于植物或堅果的乳，例如大豆、杏仁或椰子奶。例如，由乳制品排放造成的環(huán)境影響可導致顯著水平的硝酸鹽，其有可能污染地下水。地下水形成其中地表水供應受限的許多城鎮(zhèn)和農場的主要水供來源。在美國，一半人口完全或部分地依賴地下水，而歐洲也有類似的數(shù)據(jù)(參見例如在www.depi.vic.gov.au/agriculture-and-food/dairy/managing-effluent/dairy-effluent-protecting-groundwater的維多利亞州環(huán)境與初級產業(yè)政府部門網(wǎng)站)。乳中食物傳播的病原體的存在是由于與乳制品農場環(huán)境中受污染源的直接接觸以及受感染動物的乳房排泄物。人類疾病的爆發(fā)已經(jīng)追溯到未經(jīng)巴氏殺菌的乳的消耗，并且也已經(jīng)追溯到巴氏殺菌的乳。乳和奶制品中通常遇到的主要污染物包括殺蟲劑殘留物、重金屬和黃曲霉毒素m1(awasthi等人,indianj.publichealth56:95-99,2012)。現(xiàn)有的乳制品替代物，諸如大豆、杏仁或椰子奶在風味和功能方面都不符合標準；此外，乳制品乳的大部分工業(yè)和文化意義源自其在衍生產品諸如奶酪、酸奶、奶油或黃油中的有用性?；诜侨橹破分参锏娜椋M管解決了環(huán)境和健康問題(并且盡管為小部分人口提供足夠的風味)，但當經(jīng)受用于乳制品乳的相同過程時，幾乎普遍無法形成這樣的衍生產品。因此，需要的是具有期望的風味和性能特征的乳制品替代物或組合物，例如，復制乳制品風味、使食物傳播的病原體最少化并且在生產中具有較低的環(huán)境影響、同時保留用于乳制品乳的衍生物或下游應用且同時提供與哺乳動物或哺乳類動物產生的乳類似的營養(yǎng)特征的組合物。發(fā)明概述本發(fā)明基于以下發(fā)現(xiàn)：哺乳動物產生的乳中組分的僅一個子集可用于生成具有哺乳動物產生的乳的類似風味、類似外觀、類似營養(yǎng)價值、類似香氣和類似口感的組合物。本文提供了組合物，其包括：約0.3g/l至約1.1g/lκ-酪蛋白蛋白質；約1.25g/l至約4.9g/lβ-酪蛋白蛋白質；最終總濃度為約0重量％至約45重量％的一種或多種脂質；最終總濃度為約0.01重量％至約6重量％的一種或多種風味化合物；最終總濃度為約0.1重量％至約6重量％的一種或多種甜味劑；和最終總濃度為約0.15重量％至約1.5重量％的灰分，其中所述組合物不包括動物來源組分。還提供了組合物，其包括：約0.3g/l至約1.1g/lκ-酪蛋白蛋白質；約1.25g/l至約4.9g/lβ-酪蛋白蛋白質；最終總濃度為約0重量％至約45重量％的一種或多種脂質；最終總濃度為約0.01重量％至約6重量％的一種或多種風味化合物；最終總濃度為約0.1重量％至約6重量％的一種或多種甜味劑；和最終總濃度為約0.15重量％至約1.5重量％的灰分，其中所述組合物：不包括在哺乳動物產生的乳中發(fā)現(xiàn)的至少一種組分；包括哺乳動物產生的乳中不存在的至少一種組分；和/或包括與哺乳動物產生的乳中的至少一種組分的濃度相比更高或更低濃度的至少一種組分。在這些組合物的一些實施方案中，所述組合物包括與哺乳動物產生的乳中的一種或多種組分的濃度相比更高濃度的至少一種組分，所述組分選自：鈣、磷酸鹽、b復合維生素、維生素a、維生素d、維生素e和維生素k。在這些組合物的一些實施方案中，所述組合物不包括在哺乳動物產生的乳中發(fā)現(xiàn)的至少一種組分，所述組分選自：乳糖、細菌、分枝桿菌、過敏原、病毒、朊病毒、酵母、生長激素、白細胞、抗生素、重金屬、免疫球蛋白、乳鐵蛋白、乳過氧化物酶和脂肪酶。在這些組合物的一些實施方案中，其中所述組合物包括哺乳動物產生的乳中不存在的至少一種組分，所述組分選自人造甜味劑、植物來源的脂質、非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質。還提供了組合物，其包括：約0.3g/l至約1.1g/l非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質；約1.25g/l至約4.9g/l非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質；最終總濃度為約0重量％至約45重量％的一種或多種脂質；最終總濃度為約0.01重量％至約6重量％的一種或多種風味化合物；最終總濃度為約0.1重量％至約6重量％的一種或多種甜味劑；和最終總濃度為約0.15重量％至約1.5重量％的灰分。還提供了包括包含κ-酪蛋白蛋白質和β-酪蛋白蛋白質的膠束的組合物，其中所述膠束具有約50nm至約350nm的直徑，且所述κ-酪蛋白蛋白質和β-酪蛋白蛋白質是非糖基化的或具有非哺乳動物糖基化模式。在這些方法的一些實施方案中，所述組合物包括最終濃度為約2.0重量％至約6重量％的膠束。在這些組合物的一些實施方案中，所述膠束中β-酪蛋白蛋白質與κ-酪蛋白蛋白質的比率為約3.5:1至約5.5:1(例如約4:1至約5:1)。在這些方法的一些實施方案中，所述組合物還包括：最終總濃度為約0重量％至約45重量％的一種或多種脂質；最終總濃度為約0.01重量％至約6重量％的一種或多種風味化合物；最終總濃度為約0.1重量％至約6重量％的一種或多種甜味劑；和最終總濃度為約0.15重量％至約1.5重量％的灰分。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述組合物包含約0.27重量％至約0.75重量％的κ-酪蛋白蛋白質和約1.23重量％至約3.27重量％的β-酪蛋白蛋白質。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，一種或多種脂質的最終總濃度為約0重量％至約4.5重量％。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述一種或多種脂質選自：向日葵油、椰子油、三丁酸甘油酯、單酸甘油酯和雙酸甘油酯、游離脂肪酸和磷脂。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述組合物包括下列中的一種或多種：最終濃度為約1重量％至約28重量％的向日葵油；最終濃度為約0.5重量％至約14重量％的椰子油；最終濃度為約0.05重量％至約1.0重量％的三丁酸甘油酯；最終總濃度為約0.08重量％至約1.2重量％的單酸甘油酯和雙酸甘油酯；最終總濃度為約0.02重量％至約0.28重量％的游離脂肪酸；和最終總濃度為約0.02重量％至約0.3重量％的磷脂。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述游離脂肪酸包含至少一種選自以下的脂肪酸：丁酸、己酸、辛酸和癸酸。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述磷脂是大豆卵磷脂磷脂、向日葵卵磷脂磷脂、棉花卵磷脂磷脂或油菜籽卵磷脂磷脂。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述單酸甘油酯和雙酸甘油酯是植物來源的單酸甘油酯和雙酸甘油酯，或者是細菌來源的單酸甘油酯和雙酸甘油酯。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述風味化合物包括至少一種選自以下的風味化合物：δ-癸內酯、丁酸乙酯、2-呋喃基甲基酮、2,3-戊二酮、γ-十一內酯和δ-十一內酯。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述一種或多種甜味劑是糖。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述糖選自：葡萄糖、甘露糖、麥芽糖、果糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、莫納甜和塔格糖。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述一種或多種甜味劑是人造甜味劑。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述人造甜味劑選自：甜葉菊、阿司帕坦、環(huán)己烷氨基磺酸鹽、糖精、三氯蔗糖、羅漢果甜苷、布拉齊因、仙茅甜蛋白、赤蘚糖醇、甘草甜素、菊粉、異麥芽糖醇、乳糖醇（lacititol）、馬檳榔甜蛋白、麥芽糖醇、甘露醇、神秘果蛋白、莫納甜、莫奈林（monelin）、奧斯來?。╫sladin）、倍他丁、山梨糖醇、奇異果甜蛋白、木糖醇、乙酰氨基磺酸鉀、advantame、阿力甜、阿司帕坦-乙酰氨基磺酸鹽、環(huán)己烷氨基磺酸鈉、甘素、甜素、新橙皮苷二氫查耳酮、紐甜和p-4000。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述灰分包括下列中的一種或多種：鈣、磷、鉀、鈉、檸檬酸鹽和氯化物。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述灰分包含cacl2、kh2po4和檸檬酸鈉中的一種或多種(例如，一種、兩種或三種)。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，cacl2具有約0.05g/l至約0.2g/l的最終濃度；kh2po4具有約0.2g/l至約0.4g/l的最終濃度；且檸檬酸鈉具有約0.1g/l至約0.3g/l的最終濃度。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述κ-酪蛋白蛋白質是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象κ-酪蛋白蛋白質。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述β-酪蛋白蛋白質是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象β-酪蛋白蛋白質。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述組合物還包括：最終濃度為約0.4g/l重量％至約2.5重量％的α-乳白蛋白蛋白質；和/或最終濃度為約2.5重量％至約4.5重量％的β-乳球蛋白蛋白質。在本文所述的任何方法的一些實施方案中，所述α-乳白蛋白蛋白質是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象α-乳白蛋白蛋白質。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述β-乳球蛋白蛋白質是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象β-乳球蛋白蛋白質。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述組合物還包括：最終濃度為約11重量％至約16重量％的α-s1-酪蛋白蛋白質；和/或最終濃度為約2重量％至約5重量％的α-s2-酪蛋白蛋白質。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述α-s1-酪蛋白蛋白質是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象α-s1-酪蛋白蛋白質；和/或所述α-s2-酪蛋白蛋白質是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象α-s2-酪蛋白蛋白質。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述組合物還包括下列中的一種或多種：血清白蛋白、乳鐵蛋白和轉鐵蛋白。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述血清白蛋白是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象血清白蛋白；所述乳鐵蛋白是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象乳鐵蛋白；和/或所述轉鐵蛋白是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象轉鐵蛋白。本文所述的任何組合物的一些實施方案還包括一種或多種顏色平衡劑。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述一種或多種顏色平衡劑是β-胡蘿卜素或胭脂樹橙。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述組合物具有約6.2至約7.2(例如約6.2至約6.8)的ph。還提供了組合物，其包括：哺乳動物產生的乳或加工的哺乳動物產生的乳；和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質中的一種或兩種。在這些方法的一些實施方案中，所述組合物中非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質的最終濃度為0.02重量％至約3.0重量％。在這些方法的一些實施方案中，所述組合物中非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質的最終濃度為0.02重量％至約3.0重量％。在這些方法的一些實施方案中，所述組合物中非糖基化和/或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質的最終濃度為約0.02重量％至約0.6重量％；且所述組合物中非糖基化和/或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白的最終濃度為約0.02重量％至約2.5重量％。還提供了粉末組合物，其包括：最終濃度為約3.6重量％至約5.4重量％的κ-酪蛋白蛋白質；最終濃度為約16.3重量％至約24.5重量％的β-酪蛋白蛋白質；最終濃度為約35重量％至約40重量％的甜味劑；最終濃度為約25重量％至約30重量％的一種或多種脂質；最終濃度為約5重量％至約7重量％的灰分；和最終濃度為約2重量％至約5重量％的水，其中所述κ-酪蛋白蛋白質是非糖基化的和/或具有非哺乳動物糖基化模式，和/或所述β-酪蛋白蛋白質是非糖基化的和/或具有非哺乳動物糖基化模式。還提供了核酸，其包括：啟動子；編碼信號序列的序列；編碼乳蛋白質的序列；和酵母終止序列，其中啟動子可操作地連接至信號序列，所述信號序列可操作地連接至編碼乳蛋白質的序列，且所述終止序列可操作地連接至編碼乳蛋白質的序列。在這些核酸的一些實施方案中，所述啟動子是組成型啟動子。在這些核酸的一些實施方案中，所述啟動子是誘導型啟動子。在這些核酸的一些實施方案中，所述信號序列是來自編碼的乳蛋白質或不同乳蛋白質的信號序列，或者是來自酵母交配因子的信號序列。在這些核酸的一些實施方案中，所述編碼的乳蛋白質選自：β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-s1-酪蛋白、α-s2-酪蛋白、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳鐵蛋白或轉鐵蛋白。在這些核酸的一些實施方案中，所述核酸包含細菌復制起點。在這些核酸的一些實施方案中，所述核酸還包括選擇標記物。在這些核酸的一些實施方案中，所述選擇標記物是抗生素抗性基因。這些核酸的一些實施方案還包括：另外的啟動子序列；編碼信號序列的另外的序列；編碼另外的乳蛋白質的序列；和另外的酵母終止序列，其中另外的啟動子序列可操作地連接至編碼信號序列的另外的序列，編碼信號序列的序列可操作地連接至編碼另外的乳蛋白質的序列，且編碼另外的乳蛋白質的序列可操作地連接至另外的酵母終止序列。還提供了包括本文所述的任何核酸的宿主細胞。在這些宿主細胞的一些實施方案中，所述宿主細胞是酵母菌株(例如，克魯維酵母屬種、畢赤酵母屬種、酵母屬種、四膜蟲屬種、耶氏酵母屬種、漢遜酵母屬種、布氏菌屬種(blastobotryssp.)、念珠菌屬種、接合酵母屬種或德巴利氏酵母屬種)。本文還提供了生產非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的重組乳蛋白質的方法，所述方法包括：在足以允許分泌非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的乳蛋白質的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)本文所述的任何宿主細胞；和從培養(yǎng)基中收獲非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的乳蛋白質。還提供了生產包括非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白的膠束的方法，其包括：在足以允許從宿主細胞釋放膠束的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)本文提供的任何宿主細胞，其中所述宿主細胞包括核酸，所述核酸包括編碼β-酪蛋白的序列和編碼κ-酪蛋白的序列。還提供了補充哺乳動物產生的乳的方法，其包括：提供哺乳動物產生的乳或加工的哺乳動物產生的乳；和將以下中的至少一種混合至所述乳中：非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質；非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質；以及包括非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質的膠束。還提供了生產組合物的方法，其包括：超聲處理包括包含β-酪蛋白蛋白質和κ-酪蛋白蛋白質或包含含有β-酪蛋白蛋白質和κ-酪蛋白蛋白質的膠束的蛋白質混合物的液體；將灰分混入液體中；向所述液體中加入一種或多種脂質、一種或多種風味化合物和一種或多種顏色平衡劑的混合物，且超聲處理所述液體；和向所述液體中加入一種或多種甜味劑，從而生產組合物。在這些方法的一些實施方案中，所述β-酪蛋白蛋白質是非糖基化的或具有非哺乳動物糖基化模式，和/或κ-酪蛋白蛋白質是非糖基化的或具有非哺乳動物糖基化模式。在這些方法的一些實施方案中，所述灰分包括下列中的一種或多種：鈣、磷、鉀、鈉、檸檬酸鹽和氯化物。在這些方法的一些實施方案中，添加的灰分包括cacl2、kh2po4和檸檬酸鈉中的一種或多種(例如，一種、兩種或三種)。在這些方法的一些實施方案中，所述一種或多種脂質包含以下中的至少一種：向日葵油、椰子油、三丁酸甘油酯、單酸甘油酯和雙酸甘油酯、游離脂肪酸和磷脂。在這些方法的一些實施方案中，所述游離脂肪酸包含至少一種選自以下的脂肪酸：丁酸、己酸、辛酸和癸酸。在這些方法的一些實施方案中，所述磷脂是大豆卵磷脂磷脂、向日葵卵磷脂磷脂、棉花卵磷脂磷脂或油菜籽卵磷脂磷脂。在這些方法的一些實施方案中，所述單酸甘油酯和雙酸甘油酯是植物來源的單酸甘油酯和雙酸甘油酯，或者是細菌來源的單酸甘油酯和雙酸甘油酯。在這些方法的一些實施方案中，所述風味化合物包括至少一種選自以下的風味化合物：δ-癸內酯、丁酸乙酯、2-呋喃基甲基酮、2,3-戊二酮、γ-十一內酯和δ-十一內酯。在這些方法的一些實施方案中，所述一種或多種顏色平衡劑是β-胡蘿卜素或胭脂樹橙。在這些方法的一些實施方案中，所述一種或多種甜味劑是糖。在這些方法的一些實施方案中，所述糖選自：葡萄糖、甘露糖、麥芽糖、果糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、莫納甜和塔格糖。在這些方法的一些實施方案中，所述一種或多種甜味劑是人造甜味劑。在這些方法的一些實施方案中，所述人造甜味劑選自：甜葉菊、阿司帕坦、環(huán)己烷氨基磺酸鹽、糖精、三氯蔗糖、羅漢果甜苷、布拉齊因、仙茅甜蛋白、赤蘚糖醇、甘草甜素、菊粉、異麥芽糖醇、乳糖醇、馬檳榔甜蛋白、麥芽糖醇、甘露醇、神秘果蛋白、莫納甜、莫奈林、奧斯來丁、倍他丁、山梨糖醇、奇異果甜蛋白、木糖醇、乙酰氨基磺酸鉀、advantame、阿力甜、阿司帕坦-乙酰氨基磺酸鹽、環(huán)己烷氨基磺酸鈉、甘素、甜素、新橙皮苷二氫查耳酮、紐甜和p-4000。在這些方法的一些實施方案中，所述液體的ph為約6.2至約7.4(例如約6.4至約6.8)。在這些方法的一些實施方案中，所述β-酪蛋白蛋白質是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象β-酪蛋白；和/或所述κ-酪蛋白蛋白質是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象κ-酪蛋白蛋白質。在這些方法的一些實施方案中，所述蛋白質混合物還包括一種或多種選自以下的蛋白質：α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、α-s1-酪蛋白、α-s2-酪蛋白、乳鐵蛋白、轉鐵蛋白和血清白蛋白。還提供了通過本文所述的任何方法產生的組合物。還提供了制備黃油、奶酪、酪蛋白酸鹽或酸奶的方法，其包括：提供本文所述的任何組合物；和使用本文所述的任何組合物作為起始材料生產黃油、奶酪、酪蛋白酸鹽或酸奶。還提供了試劑盒，其包括：(a)一種或多種乳蛋白質、一種或多種脂肪和一種或風味化合物的混合物；和(b)灰分和至少一種甜味劑的混合物。在這些試劑盒的一些實施方案中，所述一種或多種乳蛋白質選自：β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、α-s1-酪蛋白、α-s2-酪蛋白、乳鐵蛋白、轉鐵蛋白和血清白蛋白。在這些試劑盒的一些實施方案中，所述一種或多種乳蛋白質是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象乳蛋白質。在這些試劑盒的一些實施方案中，所述一種或多種脂肪選自：向日葵油、椰子油、三丁酸甘油酯、單酸甘油酯和雙酸甘油酯、游離脂肪酸和磷脂。在這些試劑盒的一些實施方案中，所述游離脂肪酸包括至少一種選自以下的脂肪酸：丁酸、己酸、辛酸和癸酸。在這些試劑盒的一些實施方案中，所述磷脂是大豆卵磷脂磷脂、向日葵卵磷脂磷脂、棉花卵磷脂磷脂或油菜籽卵磷脂磷脂。在這些試劑盒的一些實施方案中，所述單酸甘油酯和雙酸甘油酯是植物來源的單酸甘油酯和雙酸甘油酯，或者是細菌來源的單酸甘油酯和雙酸甘油酯。在這些試劑盒的一些實施方案中，所述風味化合物包含至少一種選自以下的風味化合物：δ-癸內酯、丁酸乙酯、2-呋喃基甲基酮、2,3-戊二酮、γ-十一內酯和δ-十一內酯。在這些試劑盒的一些實施方案中，(a)中的混合物還包括一種或多種顏色平衡劑。在這些試劑盒的一些實施方案中，所述一種或多種顏色平衡劑是β-胡蘿卜素或胭脂樹橙。在這些試劑盒的一些實施方案中，所述一種或多種甜味劑是糖(例如，選自以下的糖：葡萄糖、甘露糖、麥芽糖、果糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、莫納甜和塔格糖)。在這些試劑盒的一些實施方案中，所述一種或多種甜味劑是人造甜味劑(例如，選自以下的人造甜味劑：甜葉菊、阿司帕坦、環(huán)己烷氨基磺酸鹽、糖精、三氯蔗糖、羅漢果甜苷、布拉齊因、仙茅甜蛋白、赤蘚糖醇、甘草甜素、菊粉、異麥芽糖醇、乳糖醇、馬檳榔甜蛋白、麥芽糖醇、甘露醇、神秘果蛋白、莫納甜、莫奈林、奧斯來丁、倍他丁、山梨糖醇、奇異果甜蛋白、木糖醇、乙酰氨基磺酸鉀、advantame、阿力甜、阿司帕坦-乙酰氨基磺酸鹽、環(huán)己烷氨基磺酸鈉、甘素、甜素、新橙皮苷二氫查耳酮、紐甜和p-4000)。在任何這些試劑盒的一些實施方案中，所述灰分包括下列中的一種或多種：鈣、磷、鉀、鈉、檸檬酸鹽和氯化物。在這些試劑盒的一些實施方案中，所述灰分包括cacl2、kh2po4和檸檬酸鈉中的一種或多種(例如，一種、兩種或三種)。這些試劑盒的一些實施方案還包括制備本文所述的任何組合物的說明書。還提供了包括至少一種本文所述的核酸的試劑盒。本文還提供了乳制品替代食品，其包括一種或多種分離的乳蛋白質組分、脂肪、碳水化合物和灰分。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述食品是非動物來源的。在這些替代食品的一些實施方案中，所述食品包括乳、黃油、奶酪、酪蛋白酸鹽、酸奶和奶油。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述分離的乳蛋白質組分包括酪蛋白和乳清蛋白質。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述酪蛋白蛋白質還包括α-s1、α-s2、β和κ-酪蛋白。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述酪蛋白蛋白質還包括α-s1、β和κ-酪蛋白蛋白質。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述酪蛋白蛋白質還包括用于膠束形成的組分。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述酪蛋白蛋白質在ph4.0-6.0下表現(xiàn)出乳凝性質。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述酪蛋白蛋白質為至少或等于2.5%(w/v)且小于或等于10%(w/v)。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述乳清蛋白質還包括β-乳球蛋白和α-乳白蛋白。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述乳清蛋白質形成聚合物基質凝膠。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述乳清蛋白質為至少0.1%(w/v)且小于或等于1%(w/v)。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述一種或多種乳蛋白質組分與微生物分離。在任何這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述一種或多種乳蛋白質組分與重組微生物分離。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述一種或多種乳蛋白質組分在真核微生物中合成。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述真核微生物包括酵母。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述酵母包括克魯維酵母菌屬種、畢赤酵母屬種、酵母屬種和四膜蟲屬種(tetrahymenasp.)。在這些替代食品的一些實施方案中，所述脂肪包括三酸甘油酯。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述脂肪包含高油酸油。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述高油酸油還包括單不飽和物、油酸、亞油酸、亞麻酸和飽和物中的一種或多種。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述脂肪包含短鏈脂肪酸。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述短鏈脂肪酸包括丁酸、己酸、辛酸和癸酸。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述一種或多種脂肪包含反式酯化脂肪酸。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述一種或多種脂肪分離自植物。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述植物選自下列中的一種或多種：向日葵、玉米、橄欖、大豆、花生、胡桃、杏仁、芝麻、棉籽、卡諾拉、紅花、亞麻籽、棕櫚、棕櫚仁、棕櫚果、椰子、巴巴蘇、乳木果油、芒果脂、可可脂、小麥胚芽和米糠油。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述糖包含半乳糖、蔗糖、葡萄糖、果糖和麥芽糖。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述乳制品替代食品基本上不含乳糖。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述灰分包括礦物質。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述礦物質還包括下列中的一種或多種：鈉、鉀、鈣、鎂、磷、鐵、銅、鋅、氯化物、錳、硒、碘、視黃醇、胡蘿卜素、維生素、維生素d、維生素e、維生素b12、硫胺素和核黃素。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述灰分包括陰離子。在這些乳制品替代食品的一些實施方案中，所述礦物質還包括下列中的一種或多種：磷酸鹽、檸檬酸鹽、硫酸鹽、碳酸鹽和氯化物。還提供了制備乳制品替代食品的方法，其包括使一種或多種分離的乳蛋白質組分、互酯化脂肪、碳水化合物和灰分接觸的步驟。這些方法的一些實施方案還包括從低級真核生物分離一種或多種乳蛋白質組分的步驟。還提供了改變乳制品替代產品的風味特征的方法，其包括調節(jié)包括乳蛋白質組分、碳水化合物和灰分的混合物中的脂肪酸的組合。在這些方法的一些實施方案中，所述調節(jié)步驟包括包含三種油酸的三酸甘油酯和包含丁酸、一種己酸和一種辛酸的短鏈三酸甘油酯。在這些方法的一些實施方案中，所述調節(jié)步驟包括增加或減少包含丁酸、己酸、辛酸和癸酸的脂肪酸。在這些方法的一些實施方案中，乳制品替代產品的風味特征模擬一種或多種乳制品的風味特征。在這些方法的一些實施方案中，一種或多種乳制品的風味特征包括牛乳、山羊乳、豆乳、杏仁乳和椰子乳。在這些方法的一些實施方案中，所述風味特征包括選自以下的一種或多種感官印象：黃油味的、堅果味的、甜味的、酸味的、水果味的、花香味的、苦味的、木質味的、土味的、豆腥味的、辣味的、金屬味的、甜味的、霉味的、油味的和醋味的。本文公開了生產乳制品替代產品的方法和組合物。在一些實施方案中，提供了用于乳制品替代食品的方法和組合物，所述乳制品替代食品包含一種或多種分離的乳蛋白質組分、脂肪、碳水化合物和灰分。在某些實施方案中，提供用于包含酪蛋白蛋白質和乳清蛋白質的乳制品替代組合物的方法和組合物，其中所述組合物基本上不含動物產品，且其中所述酪蛋白蛋白質與乳清蛋白質的比率優(yōu)選為優(yōu)選的(w/v)比率。在某些其他實施方案中，提供了調節(jié)乳制品替代食品的風味特征的方法，其包括調節(jié)包含乳蛋白質組分、脂肪、碳水化合物和灰分的混合物中的脂肪酸含量。優(yōu)選的調節(jié)步驟包括增加或減少包含丁酸、己酸、辛酸和癸酸的一種或多種脂肪酸。在另外實施方案中，本發(fā)明的方法和組合物提供所需(w/v)比率的乳蛋白質組分和脂肪。在各個方面，本發(fā)明的方法和組合物提供仍然保持其功能特征和感官性質的乳制品替代物。在一些實施方案中，核心功能可以是但不限于實現(xiàn)類似于常規(guī)乳制品的營養(yǎng)特征，并且復制其核心功能中的一種或多種(如果不是全部)。在其他實施方案中，所述核心功能可以是但不限于復制與傳統(tǒng)的基于乳制品的產品相同或類似的感官特征，其包括但不限于味道、外觀、處理和口感、所需密度、結構、質地、彈力、彈性、凝結、結合、發(fā)酵、通氣、發(fā)泡、乳脂性和乳化。優(yōu)選的方法和組合物提供乳制品替代產品，諸如乳、黃油、奶酪、酸奶和奶油。本文提供了包含(3.3％)一種或多種分離的乳蛋白質組分、(4.0％)脂肪、(2.4％)碳水化合物和(0.7％)灰分(w/v)的非乳制品乳替代物的制劑。通過調節(jié)三酸甘油酯水平和三酸甘油酯的脂肪酸組成來改變脂肪含量，增強了非乳制品乳替代物的風味特征。所述方法和乳制品替代物組合物的優(yōu)點包括減少或去除天然乳制品中通常發(fā)現(xiàn)的抗生素殘留物、重金屬、細菌和摻雜物以及減少環(huán)境影響。因此，本發(fā)明的某些方面提供了不含動物成分的乳制品替代物，其具有所需風味特征，例如復制乳制品風味、使食物傳播的病原體最少化，且具有較低的環(huán)境影響，同時保持乳制品乳的下游應用。除非本文另有定義，與本發(fā)明結合使用的科學和技術術語應當具有本領域普通技術人員通常理解的含義。此外，除非上下文另有要求，單數(shù)術語應當包括復數(shù)術語，并且復數(shù)術語應當包括單數(shù)術語。通常，與本文所述的乳制品加工、生物化學、酶學、分子和細胞生物學、微生物學、遺傳學和蛋白和核酸化學和雜交關聯(lián)使用的命名，和其技術，是本領域公知并且通常使用的那些。本文描述了用于本發(fā)明的方法和材料；也可以使用本領域已知的其他合適的方法和材料。所述材料、方法和實例僅僅是說明性的，且并不意欲是限制性的。本文中提及的所有出版物、專利、專利申請、序列、數(shù)據(jù)庫條目和其他參考文獻都通過引用并入本文，其程度如同每個單獨的出版物、專利、專利申請、序列、數(shù)據(jù)庫條目和其他參考文獻被具體且單獨地指明通過引用并入。在沖突的情況下，將以本說明書，包括定義，為準。本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點從以下詳述和附圖以及權利要求書將是顯而易見的。本文使用的術語和描述僅用于描述特定實施方案的目的，且不旨在限制本發(fā)明。如本文所使用，單數(shù)形式“一個/種(a)”、“一個/種(an)”和“該/所述(the)”同樣包括復數(shù)對象，除非上下文另有明確指出。術語“包括(including)”、“包括(includes)”、“具有(having)”、“具有(has)”、“具有(with)”或其變體旨在以類似于術語“包含”的方式包括?！胺蛛x的”rna、dna或混合聚合物是與天然伴隨其天然宿主細胞中的天然多核苷酸的其他細胞成分(例如核糖體、聚合酶和與其天然相關的基因組序列)基本上分離的rna、dna或混合聚合物。如本文中所用，“分離的”有機分子(例如，脂肪酸或scfa)是與其起源的宿主細胞的細胞成分(膜脂質、染色體、蛋白質)基本上分離的有機分子。如本文中所用，關于蛋白質的術語“分離的”表示蛋白質的制劑為至少60％純，例如大于65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％純。該術語不要求生物分子已經(jīng)與所有其他化學品分離，盡管某些分離的生物分子可以純化至接近均勻性。術語“多核苷酸”或“核酸分子”是指至少10個堿基長度的核苷酸的聚合形式。該術語包括dna分子(例如cdna或基因組或合成dna)和rna分子(例如mrna或合成rna)，以及含有非天然核苷酸類似物、非天然核苷間鍵或兩者的dna或rna的類似物。核酸可以是任何拓撲構象。例如，核酸可以是單鏈或雙鏈或環(huán)狀的。術語“scfa”是短鏈脂肪酸的縮寫，術語“hoso”是高油酸向日葵油的縮寫，“sctg”是短鏈三酸甘油酯的縮寫。術語“乳蛋白質組分”是指在乳中發(fā)現(xiàn)的蛋白質或蛋白質等同物和變體，諸如酪蛋白、乳清或酪蛋白和乳清的組合，包括它們的亞基，其衍生自各種來源并且如本文進一步定義。術語“乳蛋白質”是指哺乳動物產生的乳中發(fā)現(xiàn)的蛋白質或具有與哺乳動物產生的乳中發(fā)現(xiàn)的蛋白質的序列至少80％同一(例如，至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％同一)的序列的蛋白質。乳蛋白質的非限制性實例包括：β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-s1-酪蛋白、α-s2-酪蛋白、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳鐵蛋白、轉鐵蛋白和血清白蛋白。另外的乳蛋白質是本領域已知的。術語“酪蛋白蛋白質”是本領域已知的，并且表示存在于哺乳動物產生的乳中并且能夠與家族中的其他蛋白質自組裝以形成膠束和/或在酸性ph下從水溶液中沉淀出來的蛋白質家族。酪蛋白蛋白質的非限制性實例包括：β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-s1-酪蛋白和α-s2-酪蛋白。本文提供了來自不同哺乳動物的酪蛋白蛋白質的序列的非限制性實例。其他哺乳動物酪蛋白的另外的序列是本領域已知的。術語“哺乳動物產生的乳”是本領域已知的，并且是指由哺乳動物產生的乳。術語“加工的哺乳動物產生的乳”是指使用乳制品工業(yè)中已知的一個或多個步驟(例如均質化、巴氏殺菌、照射或補充)加工的哺乳動物產生的乳。術語“哺乳動物來源的組分”是指從哺乳動物的體內獲得的分子或化合物(例如，蛋白質、脂質或核酸)或從由哺乳動物產生的流體或固體獲得的分子。術語“乳的組分”或“乳組分”是哺乳動物產生的乳中存在的分子、化合物、元素或離子。術語“非哺乳動物糖基化模式”是指與參考蛋白質(例如，哺乳動物細胞、例如cho細胞、mek細胞或哺乳動物乳房細胞中產生和翻譯后修飾的的相同蛋白質))相比，非哺乳動物細胞(例如，酵母細胞、昆蟲細胞或細菌細胞)中產生和翻譯后修飾的蛋白質中糖基化的一個或多個位置的差異和/或所述蛋白質中一個或多個位置的糖基化的量和/或類型的差異之一。術語“脂質”是指包括脂肪?；?例如，飽和或不飽和酰基鏈)的一種或多種分子(例如，生物分子)。例如，術語脂質包括油、磷脂、游離脂肪酸、磷脂、單酸甘油酯、雙酸甘油酯和三酸甘油酯。脂質的非限制性實例在本文中描述。脂質的另外實例是本領域已知的。術語“植物來源的脂質”是指由植物(例如單子葉植物或雙子葉植物)獲得和/或產生的脂質。術語“甜味劑”是指當加入組合物時使得組合物當被哺乳動物(諸如人)攝入時嘗起來甜的糖(例如，單糖、二糖或多糖)或人造甜味劑(例如，小分子人造甜味劑或蛋白質人造甜味劑)。甜味劑的非限制性實例在本文中描述。甜味劑的另外實例是本領域已知的。術語“灰分”是本領域已知的術語，并且表示可以在哺乳動物產生的乳中發(fā)現(xiàn)的一種或多種離子、元素、礦物質和/或化合物。在哺乳動物產生的乳中發(fā)現(xiàn)的非限制性離子、元素、礦物質和化合物在本文中描述。在哺乳動物產生的乳中發(fā)現(xiàn)的另外的離子、元素、礦物質和化合物也是本領域已知的。術語“顏色平衡劑”或“著色劑”是指加入組合物中以調節(jié)組合物的顏色、例如使組合物的顏色看起來更類似于哺乳動物產生的乳的試劑。顏色平衡劑或著色劑的非限制性實例包括β-胡蘿卜素和胭脂樹橙。顏色平衡劑的其他實例是本領域已知的。顏色平衡劑或著色劑可以由植物產生或獲得。術語“膠束”是指作為組合物中的分散體存在的通常(或大致)球形超分子結構。膠束可以具有例如由帶電外層構成的表面。膠束可以包封一種或多種生物分子。例如，膠束可以包封兩種或更多種蛋白質(例如，β-酪蛋白蛋白質和κ-酪蛋白蛋白質)。膠束可以具有約10nm至約350nm的直徑。膠束的另外方面和特征是本領域已知的。短語“哺乳動物產生的乳中的組分的濃度”是指由哺乳動物產生的乳中的組分的濃度或由相同物種的哺乳動物群體產生的乳中的組分的平均濃度。如本文中所用的術語“衰減”通常是指對基因序列或控制基因序列轉錄的序列進行的功能缺失，包括突變，部分或完全缺失，插入或其他變型，其減少或抑制基因產物的產生，或使基因產物無功能。在一些情況下，功能缺失被描述為敲除突變。衰減還包括通過改變核酸序列、將基因置于較低活性啟動子的控制下、下調、表達靶向感興趣的基因的干擾rna、核酶或反義序列或通過本領域已知的任何其他技術的氨基酸序列變化。在一個實例中，特定酶對反饋抑制或由不是產物或反應物的組合物引起的抑制(非途徑特異性反饋)的敏感性被減弱，使得酶活性不受化合物的存在的影響。在其他情況下，已經(jīng)被改變?yōu)榛钚暂^低的酶可以被稱為減毒的。缺失：從核酸分子中去除一個或多個核苷酸或從蛋白質中去除一個或多個氨基酸，任一側的區(qū)域連接在一起。敲除：其表達或活性水平已降低至零的基因。在一些實例中，經(jīng)由其編碼序列的一些或全部的缺失敲除基因。在其他實例中，經(jīng)由將一個或多個核苷酸引入其開放閱讀框中來敲除基因，這導致無義或另外非功能性蛋白質產物的翻譯。術語“合成乳替代物”是指與乳制品乳相似、類似、等于或幾乎相同的組合物。術語“風味”是指食物或飲料的味道和/或香氣。術語“重組”是本領域已知的術語。當提及核酸(例如基因)時，術語“重組”可用于例如描述已經(jīng)從其天然存在環(huán)境中移取的核酸，與當其在自然界中發(fā)現(xiàn)時與所述核酸相鄰或接近的核酸的全部或部分不締合的核酸，可操作地連接至其在自然界中不連接的核酸的核酸或在自然界中不存在的核酸。術語“重組”可用于例如描述克隆的dna分離物，或包括化學合成的核苷酸類似物的核酸。當使用“重組”來描述蛋白質時，其可以是指例如與自然界中產生蛋白質的細胞的種類或類型相比不同種類或類型的細胞中產生的蛋白質。如本文中所用，如果將異源序列放置鄰近于內源核酸序列、使得該內源核酸序列的表達被改變，則生物體基因組中的內源核酸序列(或該序列的編碼的蛋白質產物)在本文中被認為是“重組的”。在這種背景下，異源序列是不是天然鄰近于內源核酸序列的序列，無論異源序列本身是內源的(源自相同的宿主細胞或其后代)還是外源的(源自不同的宿主細胞或其后代)。舉例來說，啟動子序列可以取代(例如，通過同源重組)宿主細胞基因組中基因的天然啟動子，使得該基因具有改變的表達模式。該基因現(xiàn)在將變得“重組”，因為它與天然側接其的至少一些序列分離。如果核酸含有對基因組中的相應核酸不天然存在的任何修飾，則其也被認為是“重組的”。例如，如果內源編碼序列含有人工(例如通過人為干預)引入的插入、缺失或點突變，則其被認為是“重組的”?！爸亟M核酸”還包括在異源部位整合到宿主細胞染色體中的核酸和作為附加體存在的核酸構建體。在核酸序列的背景下，術語“百分比序列同一性”或“同一”是指當針對最大對應比對時，兩個序列中相同的殘基。序列同一性比較的長度可以在至少約九個核苷酸、通常至少約20個核苷酸、更通常至少約24個核苷酸、通常至少約28個核苷酸、更通常至少約32個核苷酸且優(yōu)選地至少約36或更多個核苷酸的區(qū)段。存在本領域已知的許多可用于測量核苷酸序列同一性的不同算法。例如，可以使用fasta、gap或bestfit來比較多核苷酸序列，所述fasta、gap或bestfit是wisconsinpackageversion10.0,geneticscomputergroup(gcg),madison,wis中的程序。fasta提供在查詢和搜索序列之間的最佳重疊區(qū)域的比對和百分比序列同一性。參見例如，pearson,methodsenzymol.183:63-98,1990(其全文通過引用并入本文)。例如，核酸序列之間的百分比序列同一性可以使用具有其默認參數(shù)(字長為6，評分矩陣的nopam因子)的fasta或使用具有如gcg版本6.1(其通過引用并入本文)中提供的其默認參數(shù)的gap來確定?；蛘撸梢允褂糜嬎銠C程序blast(altschul等人,j.mol.biol.215:403-410,1990;gish和states,naturegenet.3:266-272,1993;madden等人,meth.enzymol.266:131-141,1996;altschul等人,nucleicacidsres.25:3389-3402,1997;zhang和madden,genomeres.7:649-656,1997)，特別是blastp或tblastn(altschul等人,nucleicacidsres.25:3389-3402,1997)來比較序列。當涉及核酸或其片段時，術語“基本上同源性”或“基本上相似性”表示當與另一核酸(或其互補鏈)具有適當核苷酸插入或缺失的情況下最佳比對時，在核苷酸堿基的至少約76％、80％、85％、優(yōu)選至少約90％、更優(yōu)選至少約95％、96％、97％、98％或99％中存在核苷酸序列同一性，如通過任何公知的序列同一性算法，諸如如上所討論的fasta、blast或gap所測量?？蛇x地，當在嚴格雜交條件下核酸或其片段與另一核酸、另一核酸的鏈或其互補鏈雜交時，存在基本上同源性或相似性。在核酸雜交實驗的背景下，“嚴格雜交條件”和“嚴格洗滌條件”取決于許多不同的物理參數(shù)。核酸雜交將受條件諸如鹽濃度、溫度、溶劑、雜交物質的堿基組成、互補區(qū)的長度以及雜交核酸之間核苷酸堿基錯配的數(shù)目的影響，如本領域技術人員所容易理解。本領域普通技術人員知道如何改變這些參數(shù)以實現(xiàn)雜交的特別嚴格性。一般而言，在特定的一組條件下，在特定dna雜合體的熱熔點(tm)下約25℃進行“嚴格雜交”。在特定的一組條件下，在特定dna雜合體的tm下約5℃的溫度進行“嚴格洗滌”。tm是50％的靶序列與完全匹配的探針雜交的溫度。參見sambrook等人,molecularcloning:alaboratorymanual,第2版,coldspringharborlaboratorypress,coldspringharbor,n.y.,第9.51頁,1989，其通過引用并入本文。為了本文的目的，對于溶液相雜交，“嚴格條件”被定義為在6xssc(其中20xssc含有3.0mnacl和0.3m檸檬酸鈉)、1％sds中在65℃下水相雜交(即，不含甲酰胺)8-12小時，然后在0.2xssc、0.1％sds中在65℃下兩次洗滌20分鐘。本領域技術人員將理解，65℃下的雜交將以不同的速率發(fā)生，這取決于許多因素，包括雜交的序列的長度和百分比同一性。本發(fā)明的核酸(也稱為多核苷酸)可以包括rna、cdna、基因組dna和合成形式的有義鏈和反義鏈以及上述的混合聚合物。它們可以被化學或生物化學修飾，或者可以含有非天然或衍生的核苷酸堿基，如本領域技術人員將容易理解。這樣的修飾包括例如標記物、甲基化、用類似物取代一個或多個天然存在的核苷酸、核苷酸間修飾諸如不帶電荷的鍵(例如，膦酸甲酯、磷酸三酯、氨基磷酸酯、氨基甲酸酯等)、帶電荷的鍵(例如，硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯等)、突出部分(例如，多肽)、嵌入劑(例如，吖啶、補骨脂素等)、螯合劑、烷基化劑和修飾的鍵(例如，α異頭核酸等)。修飾的核苷酸的實例描述于malyshev等人,nature509:385-388,2014;和li等人,j.am.chem.soc.136:826-829,2014。還包括在其經(jīng)由氫鍵鍵合和其他化學相互作用結合指定序列的能力方面模擬多核苷酸的合成分子。這樣的分子是本領域已知的，并且包括例如其中肽鏈取代分子主鏈中的磷酸酯鍵的那些。其他修飾可以包括例如其中核糖環(huán)含有橋連部分或其他結構諸如“鎖定”核酸中發(fā)現(xiàn)的修飾的類似物。當應用于核酸序列時，術語“突變的”意味著與參考核酸序列相比，核酸序列中的核苷酸可被插入、缺失或改變?？梢栽诨蜃M行單個改變(點突變)，或者可以在單個基因座插入、缺失或改變多個核苷酸。此外，可以在核酸序列內的任何數(shù)目的基因座進行一個或多個改變。核酸序列可以通過本領域已知的任何方法進行突變，所述方法包括但不限于誘變技術諸如“易錯pcr”(在dna聚合酶的復制保真度低的條件下進行pcr的方法，使得沿著pcr產物的整個長度獲得高點突變率；參見例如leung等人,technique1:11-15,1989,以及caldwell和joyce,pcrmethodsapplic.2:28-33,1992)；和“寡核苷酸定向誘變”(能夠在任何感興趣的克隆的dna片段中產生位點特異性突變的方法；參見例如reidhaar-olson和sauer,science241:53-57,1988)。如本文中所用的術語“載體”意指能夠運輸已與之連接的另一核酸的核酸分子。一種類型的載體是“質?！?，其通常是指可以連接入另外的dna區(qū)段的環(huán)狀雙鏈dna環(huán)，但也包括線性雙鏈分子，諸如從通過聚合酶鏈式反應(pcr)的擴增或用限制酶處理環(huán)狀質粒得到的那些。其他載體包括粘粒、細菌人工染色體(bac)和酵母人工染色體(yac)。另一種類型的載體是病毒載體，其中另外的dna區(qū)段可以連接到病毒基因組中(下面更詳細地討論)。某些載體能夠在引入它們的宿主細胞中自主復制(例如，具有在宿主細胞中起作用的復制起點的載體)。其他載體可以引入宿主細胞后整合到宿主細胞的基因組中，并因此與宿主基因組一起復制。此外，某些優(yōu)選的載體能夠指導與它們可操作地連接的基因的表達。這樣的載體在本文中稱為“重組表達載體”(或簡稱為“表達載體”)?？捎糜诒磉_本文所述的重組基因的啟動子包括組成型和誘導型/抑制型啟動子。誘導型/抑制型啟動子的實例包括半乳糖誘導型啟動子(例如，plac4-pbi)。當多個重組基因在工程改造的酵母中表達時，不同的基因可以通過不同的啟動子或通過不同的操縱子中的不同的啟動子控制，或者兩個或更多個基因的表達可以通過作為操縱子的一部分的單個啟動子來控制。術語“可操作地連接的”表達控制序列是指其中表達控制序列與感興趣的基因連續(xù)以控制感興趣的基因以及與以反式或一定距離起作用的表達控制序列連續(xù)以控制感興趣的基因的鍵。術語“表達控制序列”或“調節(jié)序列”可互換使用，并且如本文中所用，是指對于影響其可操作地連接的編碼序列的表達所必需的多核苷酸序列。表達控制序列是控制核酸序列的轉錄、轉錄后事件和翻譯的序列。表達控制序列包括適當?shù)霓D錄起始、終止、啟動子和增強子序列；有效的rna處理信號，諸如剪接和聚腺苷酸化信號；穩(wěn)定胞漿mrna的序列；提高翻譯效率的序列(例如，核糖體結合位點)；增強蛋白質穩(wěn)定性的序列；并且當需要時，增強蛋白質分泌的序列。這種控制序列的性質根據(jù)宿主生物體而不同；在原核生物中，這種控制序列通常包括啟動子、核糖體結合位點和轉錄終止序列。術語“控制序列”旨在至少包括其存在對于表達必不可少的所有組分，并且還可以包括其存在有利的另外組分，例如前導序列和融合伴侶序列。術語“轉染(transfect)”、“轉染(transfection)”、“轉染(transfecting)”等是指將異源核酸引入真核生物細胞(高等和低等真核生物細胞)。歷史上，術語“轉化”已被用于描述將核酸引入酵母或真菌細胞中；然而，在本文中，術語“轉染”用于指將核酸引入任何真核細胞，包括酵母和真菌細胞。如本文中所用的術語“重組宿主細胞”(“表達宿主細胞”、“表達宿主系統(tǒng)”、“表達系統(tǒng)”或簡稱“宿主細胞”)意指重組載體已經(jīng)引入其中的細胞。應當理解，這些術語不僅意指特定受試細胞，而且意指這種細胞的后代。因為某些修飾可以由于突變或環(huán)境的影響發(fā)生在后代中，這樣的后代，實際上可能與親本細胞不相同，但仍然被包括在如本文中所用的宿主細胞的范圍內。重組宿主細胞可以是在培養(yǎng)物中生長的分離的細胞或細胞系，或者可以是駐留在活組織或生物體中的細胞。優(yōu)選的宿主細胞是酵母和真菌。術語“酵母和絲狀真菌”包括但不限于任何克魯維酵母屬，諸如乳酸克魯維酵母、馬克斯克魯維酵母，酵母屬，諸如釀酒酵母，畢赤酵母屬，諸如巴斯德畢赤酵母、芬蘭畢赤酵母、喜海藻糖畢赤酵母、考拉姆畢赤酵母、膜醭畢赤酵母、微小畢赤酵母(ogataeaminuta、林德內氏畢赤酵母)、opuntiae畢赤酵母、耐熱畢赤酵母、salictaria畢赤酵母、guercuum畢赤酵母、皮杰普氏畢赤酵母、stiptis畢赤酵母、甲醇畢赤酵母，多形漢遜酵母，白色念珠菌，任何曲霉屬，諸如構巢曲霉菌、黑曲霉、米曲霉、里氏木霉、金孢子菌，鐮刀菌屬，禾谷鐮孢菌、鐮孢霉、小立碗蘚和粗糙脈孢菌。如本文中所用，術語“主要”或其變體將被理解為是指，例如，a)在脂肪的背景下，特定脂肪酸組合物相對于脂肪酸組合物的總量的量；b)在蛋白質的背景下，特定蛋白質組合物(例如，β-酪蛋白)相對于蛋白質組合物的總量(例如α-、β-和κ-酪蛋白)的量。術語“約”、“近似”或“類似于”是指如本領域普通技術人員所確定的特定值的可接受誤差范圍內，其部分取決于如何測量或確定所述值，或測量系統(tǒng)的限制。應當理解，下面描述的所有范圍和量都是近似值，并不意圖限制本發(fā)明。當使用范圍和數(shù)字的情況下，這些可以是近似的，以包括統(tǒng)計范圍或測量誤差或變化。在一些實施方案中，例如，測量可以是正或負10％。短語“基本上不含”用于表示指示的組分(如果存在)以不對組合物的性質有貢獻或僅以極小的方式貢獻的量存在。在各種實施方案中，在組合物基本上不含特定組分的情況下，所述組分以小于功能量存在。在各種實施方案中，所述組分可以以痕量存在。特定限值將根據(jù)組分的性質而變化，但可以是例如選自小于10重量％、小于9重量％、小于8重量％、小于7重量％、少于6重量％、小于5重量％、小于4重量％、小于3重量％、小于2重量％、小于1重量％、或小于0.5重量％。如本文中所用，術語“基本上不含”特定碳水化合物，諸如乳糖，用于表明食物組合物基本上沒有碳水化合物殘留物。以純度表示，基本上不含意味著碳水化合物殘留物的量不超過10％，優(yōu)選低于5％，更優(yōu)選低于1％，最優(yōu)選低于0.5％，其中百分比以重量或摩爾百分比計。因此，根據(jù)本發(fā)明的食物組合物中基本上所有的碳水化合物殘留物都不含例如乳糖。除非另有說明，成分的百分比(％)是指總重量％。除非另有說明，并且作為一般格式“seqidno:”下描述的所有序列的實例，“包含seqidno:1的核酸”是指核酸，其至少一部分具有(i)seqidno:1的序列，或(ii)與seqidno:1互補的序列。兩者之間的選擇由上下文決定。例如，如果核酸用作探針，則兩者之間的選擇由探針與所需靶標互補的要求決定。附圖簡述圖1表示代表生產合成乳替代物的示例性方法的流程圖。圖2a表示描繪示例性乳蛋白質組分的沉淀物的圖片。圖2b表示描繪示例性乳蛋白質組分的團粒的圖片。圖3表示顯現(xiàn)乳蛋白質組分的銀染sds-page凝膠的圖像。圖4是syproruby染色的sds-page凝膠，其顯示由ost信號序列、天然α-乳白蛋白信號序列和α交配因子信號序列介導的α-乳白蛋白的分泌水平，如實施例6中所述。圖5顯示使用天然α-乳白蛋白信號肽或ost1信號肽的野生型酵母細胞或表達α-乳白蛋白的酵母細胞分泌α-乳白蛋白的水平(通過如實施例6中所述的elisa測定法所測定)。圖6顯示野生型酵母細胞和包括如實施例6中所述的載體的酵母細胞分泌β-乳球蛋白的水平(使用sds-page)。圖7是顯示野生型酵母和包括如實施例6中所述的載體的酵母細胞分泌β-乳球蛋白的水平的蛋白質印跡。圖8是顯示野生型酵母和包括如實施例6中所述的載體的酵母細胞產生的分泌的β-酪蛋白和分泌的α-s1-酪蛋白的水平的圖。圖9是顯示實施例7中描述的方法中的步驟的示意圖。圖10是通過本文所述的方法制成的組合物的圖像。發(fā)明詳述本發(fā)明基于哺乳動物產生的乳中存在的僅有少數(shù)組分提供了哺乳動物產生的乳的質地和味道的發(fā)現(xiàn)，以及與哺乳動物產生的乳相比具有類似味道、香氣和口感的組合物的開發(fā)。鑒于這一發(fā)現(xiàn)，本文提供了這樣的組合物、制備組合物的方法以及包括這些組合物和可用于制備這些組合物的混合物的試劑盒。本文提供的組合物提供了與哺乳動物產生的乳相比具有類似味道、口感、香氣和營養(yǎng)價值、但是缺乏可被認為是不期望的哺乳動物產生的乳的一種或多種組分(例如過敏原、乳糖、抗生素、激素(例如應激激素和/或生長激素)、重金屬、細菌(例如大腸桿菌)、病毒和朊病毒)的組合物。本文提供的組合物相比于哺乳動物產生的乳具有改善的保質期，并且相比于哺乳動物產生的乳可以具有改善的香味特征。本文還提供了用于乳制品替代食品的方法和組合物，所述乳制品替代食品包含一種或多種分離的乳蛋白質組分、脂肪、碳水化合物和灰分。在某些方面，所述方法和組合物包含乳或乳樣蛋白質等效物。優(yōu)選地，乳蛋白質組分基本上不含雜質。在一些實施方案中，乳蛋白質組分包含微生物衍生或產生的酪蛋白、乳清或其組合。更優(yōu)選地，提供了引入編碼一種或多種乳蛋白質組分的工程改造的核酸序列的方法。甚至更優(yōu)選地，乳蛋白質組分不是動物來源的。在其他優(yōu)選的實施方案中，修飾重組乳蛋白質組分以表達相同的磷酸酯基團或缺乏與酪蛋白蛋白質連接的磷酸酯基團和/或碳水化合物基團。通過使重組β-酪蛋白和κ-酪蛋白具有與哺乳動物產生的乳中存在的相同蛋白質相同的磷酸酯基團，重組β-酪蛋白和重組κ-酪蛋白能夠形成膠束。通常根據(jù)本領域眾所周知的常規(guī)方法，并且如本說明書通篇引用并討論的各種通用和更具體的參考文獻中所述，執(zhí)行本發(fā)明的方法和技術，除非另有指明。參見例如，sambrook等人,molecularcloning:alaboratorymanual,第2版,coldspringharborlaboratorypress,coldspringharbor,n.y.,1989;ausubel等人,currentprotocolsinmolecularbiology,greenepublishingassociates,1992,andsupplementsto2002);harlow和lane,antibodies:alaboratorymanual,coldspringharborlaboratorypress,coldspringharbor,n.y.,1990;taylor和drickamer,introductiontoglycobiology,oxforduniv.press,2003;worthingtonenzymemanual,worthingtonbiochemicalcorp.,freehold,n.j.;handbookofbiochemistry:sectionaproteins,voli,crcpress,1976;handbookofbiochemistry:sectionaproteins,volii,crcpress,1976;essentialsofglycobiology,coldspringharborlaboratorypress,1999。用于任何方法和組合物中的示例性材料和方法描述如下，并且可以以任何組合使用?？捎糜谌魏畏椒ê徒M合物中的另外材料和方法也是本領域已知的。酪蛋白蛋白質酪蛋白蛋白質包括哺乳動物乳中發(fā)現(xiàn)的多種不同蛋白質。酪蛋白蛋白質的非限制性實例包括：β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-s2-酪蛋白和α-s1-酪蛋白。作為從哺乳動物或哺乳動物產生的乳獲得酪蛋白蛋白質用于乳制品制造中的替代方案，本發(fā)明提供了用于生產重組酪蛋白蛋白質的方法和組合物。在本發(fā)明的各個方面，提供了用于非動物來源的酪蛋白的方法和組合物，所述非動物來源的酪蛋白具有類似的溶解度和類似的濁度，以及適于摻入各種食品中的熱穩(wěn)定性。優(yōu)選地，非動物來源的酪蛋白具有優(yōu)異的溶解度、類似的濁度和適于摻入各種乳制品替代產品中的熱穩(wěn)定性。另外，所述蛋白質的進一步特征包括在這種熱處理期間更少或沒有聚集或沉淀，并且適用于程序諸如巴氏殺菌、濃縮等。乳中非動物來源的酪蛋白的功能差異可以在以下方面表征：液體的粘度；蛋白質耐熱的能力；蛋白質形成膠束的能力；和蛋白質保持不同礦物質和維生素的能力。β-酪蛋白如由greenberg等人(j.biol.chem.259:5132-5138,1984)測定的人β-酪蛋白的初級結構顯示為磷酸化蛋白質，其在位于氨基末端附近的特定絲氨酰和蘇氨酰殘基處具有磷酸化位點。人和牛β-酪蛋白的比較顯示47％同一性。β-酪蛋白蛋白質的非限制性實例是seqidno:25、27、29、31、33、35、36、38、40、42、44和46。編碼β-酪蛋白蛋白質的核酸序列的非限制性實例是seqidno:26、28、30、32、34、37、39、41、43、45、47和144。β-酪蛋白蛋白質可以是來自任何哺乳動物物種的β-酪蛋白蛋白質，例如牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象β-酪蛋白蛋白質。不同β-酪蛋白蛋白質和編碼不同β-酪蛋白蛋白質的核酸的另外的序列是本領域已知的。β-酪蛋白蛋白質還可以是與野生型β-酪蛋白蛋白質(例如seqidno:25、27、29、31、33、35、36、38、40、42、44或46)至少50％(例如，至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或至少99.5％)同一的蛋白質。編碼β-酪蛋白蛋白質的核酸可以編碼與野生型β-酪蛋白蛋白質(例如seqidno:25、27、29、31、33、35、36、38、40、42、44或46)至少50％(例如，至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或至少99.5％)同一的蛋白質。已知用于從基因工程改造的細菌細胞分離β-酪蛋白已知的方法通常涉及從源自裂解或分級的細胞的上清液沉淀β-酪蛋白。例如，simons,等人,proteineng.6:763-770(1993)，使用基因工程改造的大腸桿菌來表達牛β-酪蛋白。積聚在細菌的周質空間中的蛋白質通過滲透壓休克釋放至細胞懸浮液中。離心懸浮液后，將沉淀中的β-酪蛋白重新懸浮于冷水洗滌液中，并再次離心。存在于上清液中的β-酪蛋白通過用乙酸酸化來沉淀，過濾，并通過hplc進一步純化。類似地，hansson,等人,proteinexpress.purif.4:373-381,1993，使用基因工程改造的大腸桿菌來表達β-酪蛋白。存在于細胞裂解物中的β-酪蛋白用硫酸銨沉淀，溶解在乙醇胺和6m尿素中，并通過離子交換色譜進一步純化。參見例如美國專利號6,121,421。此外，比已知技術更簡單和更有效的用于分離在酵母中重組產生的β-酪蛋白的方法也是已知的。choi等人,j.agric.foodchem.49(4):1761-1766,2001.巴斯德畢赤酵母中糖基化牛β-酪蛋白(l70s/p71s)的表達和純化導致以下觀察結果：大多數(shù)牛β-酪蛋白在巴斯德畢赤酵母中不被高糖基化，且其分子量被估計為33.6kda。糖基化的牛β-酪蛋白通常在與天然牛β-酪蛋白相同的程度上被磷酸化。κ-酪蛋白κ-酪蛋白均被磷酸化和糖基化。人κ-酪蛋白的序列由brignon等人(fed.eur.biol.soc.lett.188:48-54,1985)測定。參見例如美國專利號5,710,044。κ-酪蛋白蛋白質的非限制性實例是seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21和23。編碼κ-酪蛋白蛋白質的核酸序列的非限制性實例是seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24和148。κ-酪蛋白蛋白質可以是來自任何哺乳動物物種的κ-酪蛋白蛋白質，例如牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象κ-酪蛋白蛋白質。不同κ-酪蛋白蛋白質和編碼不同κ-酪蛋白蛋白質的核酸的另外的序列是本領域已知的。κ-酪蛋白蛋白質還可以是與野生型κ-酪蛋白蛋白質(例如seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21或23)至少50％(例如，至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或至少99.5％)同一的蛋白質。編碼κ-酪蛋白蛋白質的核酸可以編碼與野生型κ-酪蛋白蛋白質(例如seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21或23)至少50％(例如，至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或至少99.5％)同一的蛋白質。α-s1-酪蛋白α-s1-酪蛋白蛋白質的非限制性實例是seqidno:48、50、52、54、56、57、59、61、63、64、66、68、70、72、74和76。編碼α-s1-酪蛋白蛋白質的核酸序列的非限制性實例是seqidno:49、51、53、55、58、60、62、65、67、69、71、73、75、77和147。α-s1-酪蛋白蛋白質可以是來自任何哺乳動物物種的α-s1-酪蛋白蛋白質，例如牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象α-s1-酪蛋白蛋白質。不同α-s1-酪蛋白蛋白質和編碼不同α-s1-酪蛋白蛋白質的核酸的另外的序列是本領域已知的。α-s1-酪蛋白蛋白質還可以是與野生型α-s1-酪蛋白蛋白質(例如seqidno:48、50、52、54、56、57、59、61、63、64、66、68、70、72、74或76)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。編碼α-s1-酪蛋白蛋白質的核酸可以編碼與野生型α-s1-酪蛋白蛋白質(例如seqidno:48、50、52、54、56、57、59、61、63、64、66、68、70、72、74或76)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。α-s2-酪蛋白α-s2-酪蛋白蛋白質的非限制性實例是seqidno:78、80、82、84、86、88和90。編碼α-s2-酪蛋白蛋白質的核酸序列的非限制性實例是seqidno:79、81、83、85、87、89、91、145和146。α-s2-酪蛋白蛋白質可以是來自任何哺乳動物物種的α-s2-酪蛋白蛋白質，例如牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象α-s2-酪蛋白蛋白質。不同α-s2-酪蛋白蛋白質和編碼不同α-s2-酪蛋白蛋白質的核酸的另外的序列是本領域已知的。α-s2-酪蛋白蛋白質還可以是與野生型α-s2-酪蛋白蛋白質(例如seqidno:78、80、82、84、86、88或90)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。編碼α-s2-酪蛋白蛋白質的核酸可以編碼與野生型α-s2-酪蛋白蛋白質(例如seqidno:78、80、82、84、86、88或90)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。包括酪蛋白蛋白質的膠束在牛乳中，酪蛋白或酪蛋白膠束通常占懸浮液中整個混合物的2.5％。如果不存在足夠的酪蛋白，則不會形成對乳的最佳表現(xiàn)非常重要的膠束。太多蛋白質不能正確溶解，導致不合需要的混合物。酪蛋白膠束可以包括水和鹽-主要是鈣和磷。通過離心容易地分離和移取酪蛋白膠束。通過用酸沉淀酪蛋白以將ph降低至約4.6來容易地從乳清分離。在一些實施方案中，膠束可以包括β-酪蛋白蛋白質(例如本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)和κ-酪蛋白蛋白質(例如本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)。在一些實例中，所述膠束中β-酪蛋白蛋白質與κ-酪蛋白蛋白質的比率為約2.0:1至約5.5:1、2.0:1至約5.0:1、2.0:1至約4.5:1、約2.0:1至約4.0:1、約2.0:1至約3.5:1、約2.0:1至約3.0:1、約2.0:1至約2.5:1、約2.5:1至約5.0:1、約2.5:1至約4.5:1、約2.5:1至約4.0:1、約2.5:1至約3.5:1、約2.5:1至約3.0:1、3.0:1至約5.0:1、約3.0:1至約4.5:1、約3.0:1至約4.0:1、約3.0:1至約3.5:1、約3.5:1至約5.0:1、約3.5:1至約4.5:1、約3.5:1至約4.0:1、約4.0:1至約5.0:1、約4.0:1至約4.5:1或約4.5:1至約5.0:1。在一些實例中，所述膠束具有以下的直徑(或膠束群具有以下的平均直徑)：20nm至約350nm、約320nm、約300nm、約280nm、約260nm、約240nm、約220nm、約200nm、約180nm、約160nm、約140nm、約120nm、約100nm、約80nm、約60nm或約40nm；約40nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm、約280nm、約260nm、約240nm、約220nm、約200nm、約180nm、約160nm、約140nm、約120nm、約100nm、約80nm或約60nm；約60nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm、約280nm、約260nm、約240nm、約220nm、約200nm、約180nm、約160nm、約140nm、約120nm或約100nm；約80nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm、約280nm、約260nm、約240nm、約220nm、約200nm、約180nm、約160nm、約140nm、約120nm或約100nm；約100nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm、約280nm、約260nm、約240nm、約220nm、約200nm、約180nm、約160nm、約140nm或約120nm；約120nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm、約280nm、約260nm、約240nm、約220nm、約200nm、約180nm、約160nm或約140nm；約140nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm、約280nm、約260nm、約240nm、約220nm、約200nm、約180nm或約160nm；約160nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm、約280nm、約260nm、約240nm、約220nm、約200nm或約180nm；約180nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm、約280nm、約260nm、約240nm、約220nm或約200nm；約200nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm、約280nm、約260nm、約240nm或約220nm；約220nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm、約280nm、約260nm或約240nm；約240nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm、約280nm或約260nm；約260nm至約350nm、約340nm、約320nm、約300nm或約280nm；約280nm至約350nm、約340nm、約320nm或約300nm；約300nm至約350nm或約325nm；或約325nm至約350nm。乳清蛋白乳清通常被稱為奶酪的副產品，并且也被認為是乳過敏的一個原因。典型的乳清組合物包含β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白、免疫球蛋白、乳鐵蛋白和轉鐵蛋白的混合物。乳清蛋白不含磷，并且在低ph下保留在溶液中，而酪蛋白不是如此。在一個實施方案中，使用包含β-乳球蛋白和α-乳白蛋白的乳白蛋白的選擇組合作為乳蛋白組分或組合物的主要組分或至少一部分。以下提供不同乳清蛋白的非限制性實例。α-乳白蛋白α-乳白蛋白蛋白質的非限制性實例是seqidno:92、94、96和98。編碼α-乳白蛋白蛋白質的核酸序列的非限制性實例是seqidno:93、95、97、99和157。α-乳白蛋白蛋白質可以是來自任何哺乳動物物種的α-乳白蛋白蛋白質，例如牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象α-乳白蛋白蛋白質。不同α-乳白蛋白蛋白質和編碼不同α-乳白蛋白蛋白質的核酸的另外的序列是本領域已知的。α-乳白蛋白蛋白質還可以是與野生型α-乳白蛋白蛋白質(例如seqidno:92、94、96或98)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。編碼α-乳白蛋白蛋白質的核酸可以編碼與野生型α-乳白蛋白蛋白質(例如seqidno:92、94、96或98)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。β-乳球蛋白β-乳球蛋白蛋白質的非限制性實例是seqidno:100、102、104和106。編碼β-乳球蛋白蛋白質的核酸序列的非限制性實例是seqidno:101、103、105、107和143。β-乳球蛋白蛋白質可以是來自任何哺乳動物物種的β-乳球蛋白蛋白質，例如牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象β-乳球蛋白蛋白質。不同β-乳球蛋白蛋白質和編碼不同β-乳球蛋白蛋白質的核酸的另外的序列是本領域已知的。β-乳球蛋白蛋白質還可以是與野生型β-乳球蛋白蛋白質(例如seqidno:100、102、104或106)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。編碼β-乳球蛋白蛋白質的核酸可以編碼與野生型β-乳球蛋白蛋白質(例如seqidno:100、102、104或106)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。乳鐵蛋白乳鐵蛋白蛋白質的非限制性實例是seqidno:108、110、112和114。編碼乳鐵蛋白蛋白質的核酸序列的非限制性實例是seqidno:109、111、113和115。乳鐵蛋白蛋白質可以是來自任何哺乳動物物種的乳鐵蛋白蛋白質，例如牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象乳鐵蛋白蛋白質。不同乳鐵蛋白蛋白質和編碼不同乳鐵蛋白蛋白質的核酸的另外的序列是本領域已知的。乳鐵蛋白蛋白質還可以是與野生型乳鐵蛋白蛋白質(例如seqidno:108、110、112或114)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。編碼乳鐵蛋白蛋白質的核酸可以編碼與野生型乳鐵蛋白蛋白質(例如seqidno:108、110、112或114)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。轉鐵蛋白轉鐵蛋白蛋白質的非限制性實例是seqidno:116和118。編碼轉鐵蛋白蛋白質的核酸序列的非限制性實例是seqidno:117和119。轉鐵蛋白蛋白質可以是來自任何哺乳動物物種的轉鐵蛋白蛋白質，例如牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象轉鐵蛋白蛋白質。不同轉鐵蛋白蛋白質和編碼不同轉鐵蛋白蛋白質的核酸的另外的序列是本領域已知的。轉鐵蛋白蛋白質還可以是與野生型轉鐵蛋白蛋白質(例如seqidno:116或118)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。編碼轉鐵蛋白蛋白質的核酸可以編碼與野生型轉鐵蛋白蛋白質(例如seqidno:116或118)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。血清白蛋白血清白蛋白蛋白質的非限制性實例是seqidno:120、122、124和126。編碼血清白蛋白蛋白質的核酸序列的非限制性實例是seqidno:121、123、125和127。血清白蛋白蛋白質可以是來自任何哺乳動物物種的血清白蛋白蛋白質，例如牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象血清白蛋白蛋白質。不同血清白蛋白蛋白質和編碼不同血清白蛋白蛋白質的核酸的另外的序列是本領域已知的。血清白蛋白蛋白質還可以是與野生型血清白蛋白蛋白質(例如seqidno:20、122、124或126)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。編碼血清白蛋白蛋白質的核酸可以編碼與野生型血清白蛋白蛋白質(例如seqidno:20、122、124或126)至少80％(例如，至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或至少99.5％)同一的蛋白質。哺乳動物生產的乳中的脂質乳脂肪含有約400種不同的脂肪酸，使其成為所有天然脂肪中最復雜的。乳脂肪酸幾乎等同地源自兩個來源，奶牛的瘤胃中的飼料和微生物活性，而牛乳中的脂質主要作為水包油乳劑存在于小球中。脂肪存在于所有天然乳制品中，并且對于感官特征諸如風味、口感和稠度至關重要。此外，脂肪提供營養(yǎng)和健康益處。乳脂肪主要由三酸甘油酯組成，約98％，而其他乳脂質是二酰基甘油(約2％的脂質級分)，膽固醇(小于0.5％)，磷脂(約1％)和游離脂肪酸(ffa)(約0.1％)jensenrg,newburgds.bovinemilklipids,handbookofmilkcomposition.jensenrglondon:academicpress;1995.543–75.此外，還有痕量的乙醚脂質、碳氫化合物、脂溶性維生素、風味化合物和由飼料引入的化合物(lindmarkmanssonh.,food&nutritionresearch2008.doi:10.3402/fnr.v52i0.1821)。乳脂肪三酸甘油酯由超過400種不同的脂肪酸合成，使乳脂肪成為所有天然脂肪中最復雜的。乳中幾乎所有脂肪酸都以痕量存在，而僅約15種酸以1％或更高水平存在。許多因素與牛乳脂質的量和脂肪酸組成的變化相關。它們可以是動物來源的，即與遺傳學(品種和選擇)、哺乳期、乳腺炎和瘤胃發(fā)酵相關，或者它們可能是飼料相關的因素，即與纖維和能量攝入量、膳食脂肪以及季節(jié)和區(qū)域效果相關。乳脂肪中的脂肪酸根據(jù)似乎在反芻動物中普遍使用的模式排列在三酸甘油酯中。山羊中不飽和脂肪酸(例如，油酸和亞麻酸)百分比與對于牛乳發(fā)現(xiàn)的平均值沒有差異。山羊和奶牛的乳脂肪之間的主要差異是特定短鏈脂肪酸之間的百分比分布。山羊具有顯著更高的癸酸、辛酸和己酸。大量的這些特定脂肪酸是與山羊乳相關的特征風味和氣味的原因。johnc.bruhn,fst,ucdavis,davis,ca95616-8598;seewww.drinc.ucdavis.edu/goat1.htm;www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/pmc2596709/#__ffn_sectitle;foodnutrres.2008;52:10.3402/fnr.v52i0.1821.2008年6月11日公開。doi:10.3402/fnr.v52i0.1821。乳脂肪酸幾乎等同地來源于兩個來源，奶牛的瘤胃中的飼料和微生物活性。奶牛的乳腺中的脂肪酸合成系統(tǒng)產生長度為4-16個碳的偶數(shù)碳的脂肪酸，并且以摩爾和重量計占脂肪酸的約60％和45％。乳腺中的這種從頭合成是4:0–14:0酸以及16:0的約一半來自乙酸酯和β-羥基丁酸酯。通過飼料組分的發(fā)酵在瘤胃中產生乙酸和丁酸。在通過瘤胃上皮吸收期間，丁酸被轉化成β-羥基丁酸酯。中鏈和長鏈脂肪酸，但主要是18:0，可以在乳腺中去飽和以形成相應的單飽和酸。脂肪酸不在三?；视头肿拥娜齻€位置隨機酯化(macgibbonahk,taylormw.compositionandstructureofbovinemilklipidsadvanceddairychemistry.foxpfmcsweeneyplhnewyork:springer;2006.1–42.)。短鏈酸丁酸(4:0)和己糖(6:0)幾乎完全在sn-3酯化。中鏈脂肪酸(8:0–14:0)以及16:0優(yōu)先在位置sn-1和sn-2酯化。將硬脂酸(18:0)選擇性置于位置sn-1，而油酸(18:1)顯示出對位置sn-1和sn-3的偏好(lindmark2008)。存在具有配制成所選脂肪酸特征的脂肪組分的乳替代產品，然而，這種三酸甘油酯不被酯交換至長鏈單不飽和脂肪酸三酸甘油酯，諸如植物油中所發(fā)現(xiàn)。美國專利申請?zhí)?0140147548公開了通過添加中鏈三酸甘油酯、特別是己酸、辛酸、癸酸和月桂酸脂肪酸或其組合的年幼動物的乳替代品。本組合物中的脂質任何組合物中或用于本文所述的任何方法中的脂質可包括：一種或多種脂肪、一種或多種油、一種或多種單酸甘油酯、雙酸甘油酯和/或三酸甘油酯、一種或多種游離脂肪酸和一種或多種磷脂。示例性的油、單酸甘油酯、雙酸甘油酯、游離脂肪酸和磷脂如下所述。脂肪、油、單酸甘油酯、雙酸甘油酯、三酸甘油酯、游離脂肪酸和磷脂的另外實例是本領域已知的。油用于本組合物或方法中的油可包括例如植物來源的油?；谥参锏挠偷姆窍拗菩詫嵗ㄏ蛉湛汀⒁佑?、花生油、玉米油、棉籽油、橄欖油、棕櫚油、菜籽油、紅花油、芝麻油、大豆油、杏仁油、山毛櫸堅果油、巴西堅果油、腰果油、榛子油、澳洲堅果油、蒙古堅果油、山核桃油、松子油、開心果油、核桃油和鱷梨油。單酸甘油酯和雙酸甘油酯可用于本發(fā)明中的單酸甘油酯和雙酸甘油酯可以是植物來源的單酸甘油酯和雙酸甘油酯。例如，單酸甘油酯和雙酸甘油酯可以源自向日葵、椰子、花生、棉籽、橄欖、棕櫚、菜籽、紅花、芝麻籽、大豆、杏仁、山毛櫸堅果、巴西堅果、腰果、榛子、澳洲堅果、蒙古堅果、山核桃、松子、開心果、核桃油和鱷梨。單酸甘油酯和雙酸甘油酯可以包括本文列出的任何游離脂肪酸的?；?。單酸甘油酯和雙酸甘油酯的另外實例是本領域已知的。游離脂肪酸本文所述的組合物可以包括并且本文所述的方法可以包括使用一種或多種游離脂肪酸。游離脂肪酸的非限制性實例包括丁酸、己酸、辛酸和癸酸。脂肪酸的另外實例包括月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、山萮酸、二十四烷酸、蠟酸、肉豆蔻油酸、棕櫚油酸(pamitoleicacid)、sapienicacid、油酸、反油酸、異油酸、亞油酸、油酸、亞麻酸、α-亞麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、芥酸、二十二碳六烯酸、ω-3脂肪酸和ω-6脂肪酸。在一些實例中，游離脂肪酸是飽和的。在一些實例中，游離脂肪酸是不飽和的。在一些實施方案中，游離脂肪酸不是源自哺乳動物或由哺乳動物產生。游離脂肪酸的另外實例是本領域已知的。磷脂本文所述的組合物和本文所述的方法可以包括使用一種或多種磷脂。磷脂的非限制性實例包括卵磷脂磷脂(例如大豆卵磷脂磷脂、向日葵卵磷脂磷脂、棉卵磷脂磷脂、油菜籽卵磷脂磷脂、米糠卵磷脂磷脂和玉米卵磷脂磷脂)。在一些實施方案中，磷脂不是源自哺乳動物或由哺乳動物產生。磷脂的另外方面是本領域已知的。風味化合物本文所述的任何組合物或方法可以包括或包括使用一種或多種不同的風味化合物。風味化合物的非限制性實例包括δ-癸內酯、丁酸乙酯、2-呋喃基甲基酮、2,3-戊二酮、γ-十一內酯和δ-十一內酯。風味化合物的另外實例包括人造香料，例如巧克力、咖啡、草莓、杏仁、榛子、香草、綠茶、愛爾蘭奶油和椰子調味劑。風味化合物的另外實例是本領域已知的?；曳直疚乃龅娜魏谓M合物或方法可以包括或包括使用灰分?；曳挚梢岳绨ㄏ铝兄械囊环N或多種(二種、三種、四種、五種、六種、七種、八種、九種、十種、十一種、十二種、十三種、十四種、十五種、十六種、十七種、十八種、十九種、二十種)：鈣、磷、鉀、鈉、檸檬酸鹽、氯化物、磷酸鹽、鎂、鐵、鉬、錳、銅、硫胺素(維生素b1)、核黃素(維生素b2)、煙酸(維生素b3)、泛酸(維生素b5)、維生素b6(吡哆醇)、維生素b12(鈷胺素)、維生素c、葉酸鹽、維生素a、維生素d、維生素e和維生素。在一些實例中，所述灰分包括cacl2、kh2po4和檸檬酸鈉中的一種或多種(例如，兩種或三種)。灰分可以作為粉末或溶液提供?；曳值牧硗饨M分和方面是本領域已知的。在一些實施方案中，所述灰分不是源自哺乳動物或由哺乳動物產生。顏色平衡劑各種不同顏色平衡劑是本領域已知的。例如，顏色平衡劑可以是從植物(例如，單子葉植物或雙子葉植物)獲得的化合物。在一些實例中，所述顏色平衡劑是合成化合物。在一些實例中，所述顏色平衡劑不是從哺乳動物或哺乳動物細胞獲得或由哺乳動物或哺乳動物細胞產生。顏色平衡劑的非限制性實例包括β-胡蘿卜素和胭脂樹橙。甜味劑甜味劑可以是糖(例如，單糖、二糖或多糖)或人造甜味劑。作為糖的甜味劑的非限制性實例包括葡萄糖、甘露糖、麥芽糖、果糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、莫納甜和塔格糖。在本文所述的任何組合物或方法中可用作甜味劑的糖的另外實例是本領域已知的。作為人造甜味劑的甜味劑的非限制性實例包括甜葉菊、阿司帕坦、環(huán)己烷氨基磺酸鹽、糖精、三氯蔗糖、羅漢果甜苷、布拉齊因、仙茅甜蛋白、赤蘚糖醇、甘草甜素、菊粉、異麥芽糖醇、乳糖醇、馬檳榔甜蛋白、麥芽糖醇、甘露醇、神秘果蛋白、莫納甜、莫奈林、奧斯來丁、倍他丁、山梨糖醇、奇異果甜蛋白、木糖醇、乙酰氨基磺酸鉀、advantame、阿力甜、阿司帕坦-乙酰氨基磺酸鹽、環(huán)己烷氨基磺酸鈉、甘素、甜素、新橙皮苷二氫查耳酮、紐甜和p-4000。本文所述的任何組合物或方法中可用作甜味劑的另外人造甜味劑是本領域已知的。組合物本文提供了組合物，其包括：約0.3g/l至約1.1g/l(例如，約0.3g/l至約1.0g/l、約0.3g/l至約0.9g/l、約0.3g/l至約0.8g/l、約0.3g/l至約0.7g/l、約0.3g/l至約0.6g/l、約0.3g/l至約0.5g/l、約0.3g/l至約0.4g/l、約0.4g/l至約1.1g/l、約0.4g/l至約1.0g/l、約0.4g/l至約0.9g/l、約0.4g/l至約0.8g/l、約0.4g/l至約0.7g/l、約0.4g/l至約0.6g/l、約0.4g/l至約0.5g/l、約0.5g/l至約1.1g/l、約0.5g/l至約1.0g/l、約0.5g/l至約0.9g/l、約0.5g/l至約0.8g/l、約0.5g/l至約0.7g/l、約0.5g/l至約0.6g/l、約0.6g/l至約1.1g/l、約0.6g/l至約1.0g/l、約0.6g/l至約0.9g/l、約0.6g/l至約0.8g/l、約0.6g/l至約0.7g/l、約0.7g/l至約1.1g/l、約0.7g/l至約1.0g/l、約0.7g/l至約0.9g/l、約0.7g/l至約0.8g/l、約0.8g/l至約1.1g/l、約0.8g/l至約1.0g/l、約0.8g/l至約0.9g/l、約0.9g/l至約1.1g/l、約0.9g/l至約1.0g/l、約1.0g/l至約1.1g/l、或約0.27重量%至約0.75重量%)κ-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)；約1.25g/l至約4.9g/l(例如，約1.25g/l至約4.6g/l、約1.25g/l至約4.4g/l、約1.25g/l至約4.2g/l、約1.25g/l至約4.0g/l、約1.25g/l至約3.8g/l、約1.25g/l至約3.6g/l、約1.25g/l至約3.4g/l、約1.25g/l至約3.2g/l、約1.25g/l至約3.0g/l、約1.25g/l至約2.8g/l、約1.25g/l至約2.6g/l、約1.25g/l至約2.4g/l、約1.25g/l至約2.2g/l、約1.25g/l至約2.0g/l、約1.25g/l至約1.8g/l、約1.25g/l至約1.6g/l、約1.25g/l至約1.4g/l、約1.4g/l至約4.9g/l、約1.4g/l至約4.6g/l、約1.4g/l至約4.4g/l、約1.4g/l至約4.2g/l、約1.4g/l至約4.0g/l、約1.4g/l至約3.8g/l、約1.4g/l至約3.6g/l、約1.4g/l至約3.4g/l、約1.4g/l至約3.2g/l、約1.4g/l至約3.0g/l、約1.4g/l至約2.8g/l,1.4g/l至約2.6g/l、約1.4g/l至約2.4g/l、約1.4g/l至約2.2g/l、約1.4g/l至約2.0g/l、約1.4g/l至約1.8g/l、約1.4g/l至約1.6g/l、約1.6g/l至約4.9g/l、約1.6g/l至約4.6g/l、約1.6g/l至約4.4g/l、約1.6g/l至約4.2g/l、約1.6g/l至約4.0g/l、約1.6g/l至約3.8g/l、約1.6g/l至約3.6g/l、約1.6g/l至約3.4g/l、約1.6g/l至約3.2g/l、約1.6g/l至約3.0g/l、約1.6g/l至約2.8g/l,1.6g/l至約2.6g/l、約1.6g/l至約2.4g/l、約1.6g/l至約2.2g/l、約1.6g/l至約2.0g/l、約1.6g/l至約1.8g/l、約1.8g/l至約4.9g/l、約1.8g/l至約4.6g/l、約1.8g/l至約4.4g/l、約1.8g/l至約4.2g/l、約1.8g/l至約4.0g/l、約1.8g/l至約3.8g/l、約1.8g/l至約3.6g/l、約1.8g/l至約3.4g/l、約1.8g/l至約3.2g/l、約1.8g/l至約3.0g/l、約1.8g/l至約2.8g/l,1.8g/l至約2.6g/l、約1.8g/l至約2.4g/l、約1.8g/l至約2.2g/l、約1.8g/l至約2.0g/l、約2.0g/l至約4.9g/l、約2.0g/l至約4.6g/l、約2.0g/l至約4.4g/l、約2.0g/l至約4.2g/l、約2.0g/l至約4.0g/l、約2.0g/l至約3.8g/l、約2.0g/l至約3.6g/l、約2.0g/l至約3.4g/l、約2.0g/l至約3.2g/l、約2.0g/l至約3.0g/l、約2.0g/l至約2.8g/l,2.0g/l至約2.6g/l、約2.0g/l至約2.4g/l、約2.0g/l至約2.2g/l、約2.2g/l至約4.9g/l、約2.2g/l至約4.6g/l、約2.2g/l至約4.4g/l、約2.2g/l至約4.2g/l、約2.2g/l至約4.0g/l、約2.2g/l至約3.8g/l、約2.2g/l至約3.6g/l、約2.2g/l至約3.4g/l、約2.2g/l至約3.2g/l、約2.2g/l至約3.0g/l、約2.2g/l至約2.8g/l,2.2g/l至約2.6g/l、約2.2g/l至約2.4g/l、約2.4g/l至約4.9g/l、約2.4g/l至約4.6g/l、約2.4g/l至約4.4g/l、約2.4g/l至約4.2g/l、約2.4g/l至約4.0g/l、約2.4g/l至約3.8g/l、約2.4g/l至約3.6g/l、約2.4g/l至約3.4g/l、約2.4g/l至約3.2g/l、約2.4g/l至約3.0g/l、約2.4g/l至約2.8g/l,2.4g/l至約2.6g/l、約2.6g/l至約4.9g/l、約2.6g/l至約4.6g/l、約2.6g/l至約4.4g/l、約2.6g/l至約4.2g/l、約2.6g/l至約4.0g/l、約2.6g/l至約3.8g/l、約2.6g/l至約3.6g/l、約2.6g/l至約3.4g/l、約2.6g/l至約3.2g/l、約2.6g/l至約3.0g/l、約2.6g/l至約2.8g/l、約2.8g/l至約4.9g/l、約2.8g/l至約4.6g/l、約2.8g/l至約4.4g/l、約2.8g/l至約4.2g/l、約2.8g/l至約4.0g/l、約2.8g/l至約3.8g/l、約2.8g/l至約3.6g/l、約2.8g/l至約3.4g/l、約2.8g/l至約3.2g/l、約2.8g/l至約3.0g/l、約3.0g/l至約4.9g/l、約3.0g/l至約4.6g/l、約3.0g/l至約4.4g/l、約3.0g/l至約4.2g/l、約3.0g/l至約4.0g/l、約3.0g/l至約3.8g/l、約3.0g/l至約3.6g/l、約3.0g/l至約3.4g/l、約3.0g/l至約3.2g/l、約3.2g/l至約4.9g/l、約3.2g/l至約4.6g/l、約3.2g/l至約4.4g/l、約3.2g/l至約4.2g/l、約3.2g/l至約4.0g/l、約3.2g/l至約3.8g/l、約3.2g/l至約3.6g/l、約3.2g/l至約3.4g/l、約3.4g/l至約4.9g/l、約3.4g/l至約4.6g/l、約3.4g/l至約4.4g/l、約3.4g/l至約4.2g/l、約3.4g/l至約4.0g/l、約3.4g/l至約3.8g/l、約3.4g/l至約3.6g/l、約3.6g/l至約4.9g/l、約3.6g/l至約4.6g/l、約3.6g/l至約4.4g/l、約3.6g/l至約4.2g/l、約3.6g/l至約4.0g/l、約3.6g/l至約3.8g/l、約3.8g/l至約4.9g/l、約3.8g/l至約4.6g/l、約3.8g/l至約4.4g/l、約3.8g/l至約4.2g/l、約3.8g/l至約4.0g/l、約4.0g/l至約4.9g/l、約4.0g/l至約4.6g/l、約4.0g/l至約4.4g/l、約4.0g/l至約4.2g/l、約4.2g/l至約4.9g/l、約4.2g/l至約4.6g/l、約4.2g/l至約4.4g/l、約4.4g/l至約4.9g/l、約4.4g/l至約4.6g/l、約4,6g/l至約4.9g/l、或約1.23重量%至約3.27重量%)β-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)；最終總濃度為約0重量%至約45重量%(例如，0重量%；約0重量%至約4.5重量%；約0.5重量%至約40重量%、約35重量%、約30重量%、約25重量%、約20重量%、約15重量%、約10重量%、約8重量%、約6重量%、約5重量%、約4重量%、約3重量%、約2重量%、或約1重量%；約1.0重量%至約40重量%、約35重量%、約30重量%、約25重量%、約20重量%、約15重量%、約10重量%、約8重量%、約6重量%、約5重量%、約4重量%、約3重量%、或約2重量%；約2重量%至約40重量%、約35重量%、約30重量%、約25重量%、約20重量%、約15重量%、約10重量%、約8重量%、約6重量%、約5重量%、約4重量%、或約3重量%；約3重量%至約40重量%、約35重量%、約30重量%、約25重量%、約20重量%、約15重量%、約10重量%、約8重量%、約6重量%、約5重量%、或約4重量%；約4重量%至約40重量%、約35重量%、約30重量%、約25重量%、約20重量%、約15重量%、約10重量%、約8重量%、約6重量%、或約5重量%；約5重量%至約40重量%、約35重量%、約30重量%、約25重量%、約20重量%、約15重量%、約10重量%、約8重量%、或約6重量%；約6重量%至約40重量%、約35重量%、約30重量%、約25重量%、約20重量%、約15重量%、約10重量%、或約8重量%；約8重量%至約40重量%、約35重量%、約30重量%、約25重量%、約20重量%、約15重量%、或約10重量%；約10重量%至約40重量%、約35重量%、約30重量%、約25重量%、約20重量%、或約15重量%；約15重量%至約40重量%、約35重量%、約30重量%、約25重量%、或約20重量%；約20重量%至約40重量%、約35重量%、約30重量%、或約25重量%；約25重量%至約40重量%、約35重量%、或約30重量%；約30重量%至約40重量%、或約35重量%；或約35重量%至約40重量%)的一種或多種脂質(例如，本文所述的任何一種或多種脂質)；最終總濃度為約0.01重量%至約6重量%(例如，約0.1重量%至約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、約2.5重量%、約2.0重量%、約1.5重量%、約1.0重量%、或約0.5重量%；約0.5重量%至約6重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、約2.5重量%、約2.0重量%、約1.5重量%、或約1.0重量%；約1.0重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、約2.5重量%、約2.0重量%、或約1.5重量%；約1.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、約2.5重量%、或約2.0重量%；約2.0重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、或約2.5重量%；約2.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、或約3.0重量%；約3.0重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、或約3.5重量%；約3.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、或約4.0重量%；約4.0重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%；約4.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、或約5.0重量%；約5.0重量%至約6.0重量%或約5.5重量%；或約5.5重量%至約6.0重量%)的一種或多種風味化合物(例如，本文所述的任何一種或多種風味化合物)；最終總濃度為約0.1重量%至約6重量%(例如，約0.1重量%至約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、約2.5重量%、約2.0重量%、約1.5重量%、約1.0重量%、或約0.5重量%；約0.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、約2.5重量%、約2.0重量%、約1.5重量%、或約1.0重量%；約1.0重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、約2.5重量%、約2.0重量%、或約1.5重量%；約1.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、約2.5重量%、或約2.0重量%；約2.0重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、或約2.5重量%；約2.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、或約3.0重量%；約3.0重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、或約3.5重量%；約3.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、或約4.0重量%；約4.0重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、或約4.5重量%；約4.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、或約5.0重量%；約5.0重量%至約6.0重量%、或約5.5重量%；或約5.5重量%至約6.0重量%)的一種或多種甜味劑(例如，本文所述的任何一種或多種甜味劑)；和最終總濃度為約0.15重量%至約1.5重量%(例如，約0.15重量%至約1.4重量%、約1.3重量%、約1.2重量%、約1.1重量%、約1.0重量%、約0.9重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、約0.5重量%、約0.4重量%、約0.3重量%、或約0.2重量%；約0.2重量%至約1.5重量%、約1.4重量%、約1.3重量%、約1.2重量%、約1.1重量%、約1.0重量%、約0.9重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、約0.5重量%、約0.4重量%、或約0.3重量%；約0.3重量%至約1.5重量%、約1.4重量%、約1.3重量%、約1.2重量%、約1.1重量%、約1.0重量%、約0.9重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、約0.5重量%、或約0.4重量%；約0.4重量%至約1.5重量%、約1.4重量%、約1.3重量%、約1.2重量%、約1.1重量%、約1.0重量%、約0.9重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、或約0.5重量%；約0.5重量%至約1.5重量%、約1.4重量%、約1.3重量%、約1.2重量%、約1.1重量%、約1.0重量%、約0.9重量%、約0.8重量%、或約0.6重量%；約0.6重量%至約1.5重量%、約1.4重量%、約1.3重量%、約1.2重量%、約1.1重量%、約1.0重量%、約0.9重量%、或約0.8重量%；約0.8重量%至約1.4重量%、約1.3重量%、約1.2重量%、約1.1重量%、約1.0重量%、或約0.9重量%；約0.9重量%至約1.5重量%、約1.4重量%、約1.3重量%、約1.2重量%、約1.1重量%、或約1.0重量%；約1.0重量%至約1.5重量%、約1.4重量%、約1.3重量%、約1.2重量%、或約1.1重量%；約1.1重量%至約1.5重量%、約1.4重量%、約1.3重量%、或約1.2重量%；約1.2重量%至約1.5重量%、約1.4重量%、或約1.3重量%；約1.3重量%至約1.5重量%或約1.4重量%；或約1.4重量%至約1.5重量%)的灰分，其中所述組合物不包含動物來源組分。還提供了組合物，其包括：約0.3g/l至約1.1g/l(例如，上述段落中描述的約0.3g/l至約1.1g/l的任何子范圍)κ-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)；約1.25g/l至約4.9g/l(例如，上述段落中描述的約1.25g/l至約4.9g/l的任何子范圍)β-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)；最終總濃度為約0重量％至約45重量％(例如，上述段落中描述的約0重量％至約45重量％的所有子范圍)的一種或多種脂質(例如，本文所述的任何一種或多種脂質)；最終總濃度為約0.01重量％至約6重量％(例如，上述段落中描述的約0.01重量％至約6重量％的所有子范圍)的一種或多種風味化合物(例如，本文所述的任何一種或多種風味化合物)；最終總濃度為約0.1重量％至約6重量％(例如，上述段落中描述的約0.1重量％至約6重量％的所有子范圍)的一種或多種甜味劑(例如，本文所述的任何一種或多種甜味劑)；和最終總濃度為約0.15重量％至約1.5重量％(例如，上述段落中描述的約0.15重量％至約1.5重量％的所有子范圍)的灰分(例如，本文所述的任何示例性灰分)，其中：所述組合物：不包括在哺乳動物產生的乳中發(fā)現(xiàn)的至少一種組分；包括哺乳動物產生的乳中不存在的至少一種組分；和/或包括與哺乳動物產生的乳中的至少一種組分的濃度相比更高或更低濃度的至少一種組分。在這些組合物的一些實例中，所述組合物包括與哺乳動物產生的乳中的一種或多種組分的濃度相比更高濃度的至少一種組分，所述組分選自：鈣、磷酸鹽、b復合維生素、維生素a、維生素d、維生素e和維生素k。在這些組合物的一些實施方案中，所述組合物不包括在哺乳動物產生的乳中發(fā)現(xiàn)的至少一種組分，所述組分選自：乳糖、細菌、分枝桿菌、過敏原、病毒、朊病毒、酵母、生長激素、白細胞、抗生素、重金屬、免疫球蛋白、乳鐵蛋白、乳過氧化物酶和脂肪酶。在這些組合物的一些實例中，所述組合物包括哺乳動物產生的乳中不存在的至少一種組分，所述組分選自人造甜味劑、植物來源的脂質、非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質。還提供了組合物，其包括：約0.3g/l至約1.1g/l(例如，該章節(jié)中描述的約0.3g/l至約1.1g/l的任何子范圍)非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)；約1.25g/l至約4.9g/l(例如，該章節(jié)中描述的約1.25g/l至約4.9g/l的任何子范圍)非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)；最終總濃度為約0重量％至約45重量％(例如，該章節(jié)中描述的約0重量％至約45重量％的所有子范圍)的一種或多種脂質(例如，本文所述的任何一種或多種脂質)；最終總濃度為約0.01重量％至約6重量％(例如，該章節(jié)中描述的約0.01重量％至約6重量％的所有子范圍)的一種或多種風味化合物(例如，本文所述的任何一種或多種風味化合物)；最終總濃度為約0.1重量％至約6重量％(例如，該章節(jié)中描述的約0.1重量％至約6重量％的所有子范圍)的一種或多種甜味劑(例如，本文所述的任何一種或多種甜味劑)；和最終總濃度為約0.15重量％至約1.5重量％(例如，該章節(jié)中描述的約0.15重量％至約1.5重量％的所有子范圍)的灰分(例如，本文所述的任何灰分)。還提供了包括膠束的組合物，所述膠束包括κ-酪蛋白蛋白質(例如本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)和β-酪蛋白蛋白質(例如本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)，其中所述膠束具有約50nm至約350nm的直徑(例如，本文所述的膠束的直徑的任何子范圍)，且所述κ-酪蛋白蛋白質和β-酪蛋白蛋白質是非糖基化的或具有非哺乳動物糖基化模式。在一些實施方案中，所述組合物包括最終濃度為以下的膠束：約2.0重量%至約6重量%(例如，約2.0重量%至約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、或約2.5重量%；約2.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、或約3.0重量%；約3.0重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、或約3.5重量%；約3.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、或約3.5重量%；約3.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、或約4.0重量%；約4.5重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、約4.5重量%、或約4.0重量%；約4.0重量%至約6.0重量%、約5.5重量%、約5.0重量%、或約4.5重量%；約4.5重量%至約5.5重量%、或約5.0重量%；約5.0重量%至約6.0重量%或5.5重量%；或約5.5重量%至約6.0重量%)。在這些組合物的一些實施方案中，所述膠束中β-酪蛋白蛋白質與κ-酪蛋白蛋白質的比率為約2.0:1至約5.5:1(例如，對于本文膠束所述的比率約2.0:1至約5.5:1的任何子范圍)。在一些實施方案中，這些組合物還包括：最終總濃度為約0重量％至約45重量％(例如，該章節(jié)中描述的約0重量％至約45重量％的所有子范圍)的一種或多種脂質(例如，本文所述的任何一種或多種脂質)；最終總濃度為約0.01重量％至約6重量％(例如，該章節(jié)中描述的0.01重量％至約6重量％的所有子范圍)的一種或多種風味化合物(例如，本文所述的任何一種或多種風味化合物)；最終總濃度為約0.1重量％至約6重量％(例如，該章節(jié)中描述的約0.1重量％至約6重量％的所有子范圍)的一種或多種甜味劑(例如，本文所述的任何一種或多種甜味劑)；和最終總濃度為約0.15重量％至約1.5重量％(例如，該章節(jié)中描述的約0.15重量％至約1.5重量％的所有子范圍)的灰分(例如，本文所述的任何灰分)。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述一種或多種脂質選自：向日葵油、椰子油、三丁酸甘油酯、單酸甘油酯和雙酸甘油酯、游離脂肪酸和磷脂。本文所述的任何組合物的一些實例還包括下列中的一種或多種：最終濃度為約1重量%至約28重量%(例如，約1重量%至約26重量%、約24重量%、約22重量%、約20重量%、約18重量%、約16重量%、約14重量%、約12重量%、約10重量%、約8重量%、約6重量%、約4重量%、或約2重量%；約2重量%至約28重量%、約26重量%、約24重量%、約22重量%、約20重量%、約18重量%、約16重量%、約14重量%、約12重量%、約10重量%、約8重量%、約6重量%、或約4重量%；約4重量%至約28重量%、約26重量%、約24重量%、約22重量%、約20重量%、約18重量%、約16重量%、約14重量%、約12重量%、約10重量%、約8重量%、或約6重量%；約6重量%至約28重量%、約26重量%、約24重量%、約22重量%、約20重量%、約18重量%、約16重量%、約14重量%、約12重量%、約10重量%、或約8重量%；約8重量%至約28重量%、約26重量%、約24重量%、約22重量%、約20重量%、約18重量%、約16重量%、約14重量%、約12重量%、或約10重量%；約10重量%至約28重量%、約26重量%、約24重量%、約22重量%、約20重量%、約18重量%、約16重量%、約14重量%、或約12重量%；約12重量%至約28重量%、約26重量%、約24重量%、約22重量%、約20重量%、約18重量%、約16重量%、或約14重量%；約14重量%至約28重量%、約26重量%、約24重量%、約22重量%、約20重量%、約18重量%、或約16重量%；約16重量%至約28重量%、約26重量%、約24重量%、約22重量%、約20重量%、約18重量%；約18重量%至約28重量%、約26重量%、約24重量%、約22重量%、或約20重量%；約20重量%至約28重量%、約26重量%、約24重量%、約22重量%；約22重量%至約28重量%、約26重量%、約24重量%；約24重量%至約28重量%或約26重量%；或約28重量%至約30重量%)的向日葵油；最終濃度為約0.5重量%至約14重量%(例如，約0.5重量%至約12重量%、約10重量%、約8重量%、約6重量%、約4重量%、約2重量%、或約1重量%；約1重量%至約14重量%、約12重量%、約10重量%、約8重量%、約6重量%、約4重量%、或約2重量%；約2重量%至約12重量%、約10重量%、約8重量%、約6重量%、或約4重量%；約4重量%至約14重量%、約12重量%、約10重量%、約8重量%、或約6重量%；約6重量%至約14重量%、約12重量%、約10重量%、或約8重量%；約8重量%至約14重量%、約12重量%、或約10重量%；約10重量%至約14重量%或12重量%；或約12重量%至約14重量%)的椰子油；最終濃度為約0.05重量to約1.0重量%(例如，約0.05重量%至約0.9重量%、約0.8重量%、約0.7重量%、約0.6重量%、約0.5重量%、約0.4重量%、約0.3重量%、或約0.2重量%；0.1重量%至約1.0重量%、約0.9重量%、約0.8重量%、約0.7重量%、約0.6重量%、約0.5重量%、約0.4重量%、約0.3重量%、或約0.2重量%；約0.2重量%至約1.0重量%、約0.9重量%、約0.8重量%、約0.7重量%、約0.6重量%、約0.5重量%、或約0.4重量%；約0.4重量%至約1.0重量%、約0.9重量%、約0.8重量%、約0.7重量%、約0.6重量%、或約0.5重量%；約0.5重量%至約1.0重量%、約0.9重量%、約0.8重量%、約0.7重量%、或約0.6重量%；約0.6重量%至約1.0重量%、約0.9重量%、約0.8重量%、或約0.7重量%；約0.7重量%至約1.0重量%、約0.9重量%、或約0.8重量%；約0.8重量%至約1.0重量%或約0.9重量%；或約0.9重量%至約1.0重量%)的三丁酸甘油酯；最終濃度為約0.08重量%至約1.2重量%(例如，0.08重量%至約1.0重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、約0.4重量%、或約0.2重量%；約0.2重量%至約1.2重量%、約1.0重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、或約0.4重量%；約0.4重量%至約1.2重量%、約1.0重量%、約0.8重量%、或約0.6重量%；約0.6重量%至約1.2重量%、約1.0重量%、或約0.8重量%；約0.8重量%至約1.2重量%或約1.0重量%的單酸甘油酯和雙酸甘油酯(例如本文所述的任何一種或多種單甘油酯或雙酸甘油酯)；或約1.0重量%至約1.2重量%)；和最終總濃度為約0.02重量%至約0.28重量%的游離脂肪酸；和最終總濃度為約0.02重量%至約0.3重量%(例如，約0.02重量%至約0.25重量%、約0.20重量%、約0.15重量%、或約0.10重量%；約0.05重量%至約0.3重量%、約0.25重量%、約0.20重量%、約0.15重量%、或約0.10重量%；約0.10重量%至約0.30重量%、約0.25重量%、約0.20重量%、或約0.15重量%；約0.15重量%至約0.30重量%、約0.25重量%、或約0.20重量%；約0.20重量%至約0.30重量%或約0.25重量%；或約0.25重量%至約0.30重量%)的磷脂(例如，本文所述的任何一種或多種磷脂)。在任何組合物的一些實施方案中，所述游離脂肪酸包括至少一種(例如，兩種、三種或四種)選自以下的脂肪酸：丁酸、己酸、辛酸和癸酸。在任何組合物的一些實施方案中，所述磷脂是大豆卵磷脂磷脂、向日葵卵磷脂磷脂、棉花卵磷脂磷脂或油菜籽卵磷脂磷脂。在本文所述的任何組合物的一些實例中，所述風味化合物包括至少一種選自以下的風味化合物：δ-癸內酯、丁酸乙酯、2-呋喃基甲基酮、2,3-戊二酮、γ-十一內酯和δ-十一內酯。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述一種或多種甜味劑是糖(例如，葡萄糖、甘露糖、麥芽糖、果糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、莫納甜或塔格糖)。在本文所述的任何組合物的一些實例中，所述一種或多種甜味劑是人造甜味劑(例如，甜葉菊、阿司帕坦、環(huán)己烷氨基磺酸鹽、糖精、三氯蔗糖、羅漢果甜苷、布拉齊因、仙茅甜蛋白、赤蘚糖醇、甘草甜素、菊粉、異麥芽糖醇、乳糖醇、馬檳榔甜蛋白、麥芽糖醇、甘露醇、神秘果蛋白、莫納甜、莫奈林、奧斯來丁、倍他丁、山梨糖醇、奇異果甜蛋白、木糖醇、乙酰氨基磺酸鉀、advantame、阿力甜、阿司帕坦-乙酰氨基磺酸鹽、環(huán)己烷氨基磺酸鈉、甘素、甜素、新橙皮苷二氫查耳酮、紐甜或p-4000)。在本文所述的任何組合物的一些實例中，所述灰分包括下列中的一種或多種(例如，兩種、三種、四種、五種或六種)：鈣、磷、鉀、鈉、檸檬酸鹽和氯化物。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述灰分包含cacl2、kh2po4和檸檬酸鈉中的一種或多種(例如，兩種或三種)。本文所述的組合物的一些實施方案包括：最終濃度為約0.05g/l至約0.2g/l(例如，約0.05g/l至約0.15g/l、約0.05g/l至約0.10g/l、約0.10g/l至約0.20g/l、約0.10g/l至約0.15g/l、或約0.15g/l至約0.2g/l)的cacl2；最終濃度為約0.2g/l至約0.4g/l(例如，約0.2g/l至約0.35g/l、約0.2g/l至約0.30g/l、約0.2g/l至約0.25g/l、約0.25g/l至約0.4g/l、約0.25g/l至約0.30g/l、約0.30g/l至約0.40g/l、或約0.30g/l至約0.35g/l、或約0.35g/l至約0.40g/l)的kh2po4；和/或最終濃度為約0.1g/l至約0.3g/l(例如，0.1g/l至約0.25g/l、約0.1g/l至約0.20g/l、約0.1g/l至約0.15g/l、約0.15g/l至約0.30g/l、約0.15g/l至約0.25g/l、約0.15g/l至約0.20g/l、約0.20g/l至約0.30g/l、約0.20g/l至約0.25g/l、或約0.25g/l至約0.30g/l)的檸檬酸鈉。在本文所述的任何組合物中，所述κ-酪蛋白蛋白質可以是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象κ-酪蛋白蛋白質。在本文所述的任何組合物中，所述β-酪蛋白蛋白質可以是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象β-酪蛋白蛋白質。在本文所述的任何組合物的一些實例中，其還可以包括：最終濃度為約0.4重量%至約2.5重量%(例如，約0.4重量%至約2.0重量%、約1.5重量%、或約1.0重量%；約1.0重量%至約2.5重量%、約2.0重量%、或約1.5重量%、約1.5重量%至約2.5重量%或2.0重量%；或約2.0重量%至約2.5重量%)的α-乳白蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何α-乳白蛋白蛋白質)，和/或最終濃度為約2.5重量％至約4.5重量％的β-乳球蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何β-乳球蛋白蛋白質)。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述α-乳白蛋白蛋白質可以是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象α-乳白蛋白蛋白質。在本文所述的任何組合物的一些實施方案中，所述β-乳球蛋白蛋白質可以是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象β-乳球蛋白蛋白質。本文所述的任何組合物的一些實施方案還包括：最終濃度為約11重量%至約16重量%(例如，約11重量%至約15重量%、約14重量%、約13重量%、或約12重量%；約12重量%至約16重量%、約15重量%、約14重量%、或約13重量%；約13重量%至約16重量%、約15重量%、或約14重量%；約14重量%至約16重量%或15重量%；或約15重量%至約16重量%)的α-s1-酪蛋白蛋白質(例如本文所述的任何α-s1-酪蛋白蛋白質)；和/或最終濃度為約2重量%至約5重量%(例如，約2重量%至約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、約3.0重量%、或約2.5重量%；約2.5重量%至約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、約3.5重量%、或約3.0重量%；約3.0重量%至約5.0重量%、約4.5重量%、約4.0重量%、或約3.5重量%；約3.5重量%至約5重量%、約4.5重量%、或約4.0重量%；約4.0重量%至約5.0重量%或4.5重量%；或約4.5重量%至約5.0重量%)的α-s2-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何α-s2-酪蛋白蛋白質)。在本文所述的任何組合物的一些實例中，所述α-s1-酪蛋白蛋白質可以是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象α-s1-酪蛋白蛋白質；和/或所述α-s2-酪蛋白蛋白質可以是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象α-s2-酪蛋白蛋白質。本文所述的任何組合物的一些實例還包括血清白蛋白(例如，本文所述的任何血清白蛋白蛋白質)、乳鐵蛋白(例如，本文所述的任何乳鐵蛋白蛋白質)和轉鐵蛋白(例如，本文所述的任何轉鐵蛋白)中的一種或多種(例如，兩種或三種)。在本文所述的任何組合物的一些實例中，所述血清白蛋白可以是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象血清白蛋白；所述乳鐵蛋白可以是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象乳鐵蛋白；和/或所述轉鐵蛋白可以是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象轉鐵蛋白。在本文所述的任何組合物的一些實例中，所述組合物還包括一種或多種顏色平衡劑(例如，本文所述的任何著色劑，例如，β-胡蘿卜素或胭脂樹橙)。本文所述的任何組合物可以具有約6.2至約7.2(例如，約6.2至約7.0、約6.2至約6.8、約6.2至約6.6、約6.2至約6.4、約6.4至約7.2、約6.4至約7.0、約6.4至約6.8、約6.4至約6.6、約6.6至約7.2、約6.6至約7.0、約6.6至約6.8、約6.8至約7.2、約6.8至約7.0、或約7.0至約7.2)的ph。在各種實施方案中，以干重或總重計，所述乳蛋白質組分包含約0.5%、約1%、約1.5%、約2%、約2.5%、約3%、約3.5%、約4%、約4.5%、約5%、約6%乳蛋白質。在一些實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約0.5-2.5%、約1-2%、約2-3%、或約4-10%蛋白質。在具體實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約10-15％蛋白質。廣泛范圍的酪蛋白，包括與野生型酪蛋白具有實質同源性的酪蛋白、酪蛋白的變體、突變體作為乳蛋白質的組分表達并摻入。干燥組合物還提供了粉末組合物，其包括：最終濃度為約3.6重量%至約5.4重量%(例如，約3.6重量%至約5.2重量%、約5.0重量%、約4.8重量%、約4.6重量%、約4.4重量%、約4.2重量%、約4.0重量%、或約3.8重量%；約3.8重量%至約5.4重量%、約5.2重量%、約5.0重量%、約4.8重量%、約4.6重量%、約4.4重量%、約4.2重量%、或約4.0重量%；約4.0重量%至約5.4重量%、約5.2重量%、約5.0重量%、約4.8重量%、約4.6重量%、約4.4重量%、或約4.2重量%；約4.2重量%至約5.2重量%、約5.2重量%、約5.0重量%、約4.8重量%、約4.6重量%、或約4.4重量%；約4.8重量%至約5.4重量%、約5.2重量%、或約5.0重量%；約5.0重量%至約5.4重量%或約5.2重量%；或約5.2重量%至約5.4重量%)的κ-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何α-酪蛋白蛋白質)；最終濃度為約16.3重量%至約24.5重量%;16.3重量%至約22重量%、約20重量%、或約18重量%；約18重量%至約24.5重量%、約22重量%、或約20重量%；約20重量%至約24.5重量%至約22重量%；或約22重量%至約24.5重量%)的β-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)；最終濃度為約35重量%至約40重量%(例如，約35重量%至約39重量%、約38重量%、約37重量%、或約36重量%；約36重量%至約40重量%、約39重量%、約38重量%、或約37重量%；約37重量%至約40重量%、約39重量%、或約38重量%；約38重量%至約40重量%或39重量%；或約39重量%至約40重量%)的甜味劑(例如，本文所述的任何一種或多種甜味劑)；最終濃度為約25重量%至約30重量%(例如，約25重量%至約29重量%、約28重量%、約27重量%、或約26重量%；約26重量%至約30重量%、約29重量%、約28重量%、或約27重量%；約27重量%至約30重量%、約29重量%、或約28重量%；約28重量%至約30重量%或約29重量%；或約29重量%至約30重量%)的一種或多種脂質(例如，本文所述的任何一種或多種脂質)；最終濃度為約5重量%至約7重量%(例如，約5重量%至約6.5重量%、約6.0重量%、或約5.5重量%；約5.5重量%至約7.0重量%、約6.5重量%、或約6.0重量%；約6.0重量%至約7.0重量%或約6.5重量%；或約6.5重量%至約7.0重量%)的灰分(例如，本文所述的任何灰分)；和最終濃度為約2重量%至約5重量%(例如，約2重量%至約4重量%或約3重量%；約3重量%至約5重量%或約4重量%；或約4重量%至約5重量%)的水，其中所述κ-酪蛋白蛋白質是非糖基化的和/或具有非哺乳動物糖基化模式，和/或所述β-酪蛋白蛋白質是非糖基化的和/或具有非哺乳動物糖基化模式。任何粉末組合物可以含有本文所述的任何組合物中所述的任何組分(例如，分別為本文對于每種組分所述的任何濃度的任何一種或多種配色劑，α-s1-酪蛋白蛋白質、α-s2-酪蛋白蛋白質、α-乳白蛋白蛋白質、β-乳球蛋白蛋白質、乳鐵蛋白蛋白質、轉鐵蛋白蛋白質和血清白蛋白蛋白質)。補充的乳組合物本文還提供了組合物，其包括：哺乳動物產生的乳或加工的哺乳動物產生的乳；和下列中的一種或多種(例如兩種或三種)：非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質；非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質；或包括非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質的膠束。在一些實例中，所述組合物包括哺乳動物產生的乳或加工的哺乳動物產生的乳和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質。在一些實例中，所述組合物包括哺乳動物產生的乳或加工的哺乳動物產生的乳和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質。在其他實例中，所述組合物包括哺乳動物產生的乳或加工的哺乳動物產生的乳和包括非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質的膠束。在一些實例中，所述組合物中非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質的最終濃度或非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質的最終濃度為：(最終組合物的)0.02重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、約1.0重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、約0.4重量%、約0.2重量%、或約0.1重量%；約0.1重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、約1.0重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、約0.4重量%、或約0.2重量%；約0.2重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、約1.0重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、或約0.4重量%；約0.8重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、或約1.0重量%；約1.0重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、或約1.2重量%；約1.2重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、或約1.4重量%；約1.4重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、或約1.6重量%；約1.6重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、或約1.8重量%；約1.8重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、或約2.0重量%；約2.0重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、或約2.2重量%；約2.2重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、或約2.4重量%；約2.4重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、或約2.6重量%；約2.6重量%至約3.0重量%或約2.8重量%；或約2.8重量%至約3.0重量%。在一些組合物中，所述組合物中非糖基化和/或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質的最終濃度為約0.02重量%至約0.6重量%(例如，約0.02重量%至約0.5重量%、約0.02重量%至約0.4重量%、約0.02重量%至約0.3重量%、約0.02重量%至約0.2重量%、約0.02重量%至約0.1重量%、約0.1重量%至約0.5重量%、約0.1重量%,至約0.4重量%、約0.1重量%至約0.3重量%、約0.1重量%至約0.2重量%、約0.2重量%至約0.5重量%、約0.2重量%至約0.4重量%、約0.2重量%至約0.3重量%、約0.3重量%至約0.5重量%、約0.3重量%至約0.4重量%、或約0.4重量%至約0.5重量%)；且所述組合物中非糖基化和/或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質的最終濃度為約0.02重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、約1.0重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、約0.4重量%、或約0.2重量%；約0.2重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、約1.0重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、或約0.4重量%；約0.4重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、約1.0重量%、約0.8重量%、或約0.6重量%；約0.6重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、約1.0重量%、或約0.8重量%；約0.8重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、或約1.0重量%；約1.0重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、或約1.2重量%；約1.2重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、或約1.4重量%；約1.4重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、或約1.6重量%；約1.6重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、或約1.8重量%；約1.8重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、或約2.0重量%；約1.8重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、或約2.0重量%；約2.0重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、或約2.2重量%；約2.2重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、或約2.4重量%；約2.4重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、約2.8重量%、或約2.6重量%；約2.6重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、約3.0重量%、或約2.8重量%；約2.8重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、約3.2重量%、或約3.0重量%；約3.0重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、約3.4重量%、或約3.2重量%；約3.2重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、約3.6重量%、或約3.4重量%；約3.4重量%至約4.0重量%、約3.8重量%、或約3.6重量%；約3.6重量%至約4.0重量%或約3.8重量%；或約3.8重量%至約4.0重量%。在一些實例中，所述組合物中包括非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質的膠束的最終濃度為：(最終組合物的)0.02重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、約1.0重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、約0.4重量%、約0.2重量%、或約0.1重量%；約0.1重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、約1.0重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、約0.4重量%、或約0.2重量%；約0.2重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、約1.0重量%、約0.8重量%、約0.6重量%、或約0.4重量%；約0.8重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、約1.2重量%、或約1.0重量%；約1.0重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、約1.4重量%、或約1.2重量%；約1.2重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、約1.6重量%、或約1.4重量%；約1.4重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、約1.8重量%、或約1.6重量%；約1.6重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、約2.0重量%、或約1.8重量%；約1.8重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、約2.2重量%、或約2.0重量%；約2.0重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、約2.4重量%、或約2.2重量%；約2.2重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、約2.6重量%、或約2.4重量%；約2.4重量%至約3.0重量%、約2.8重量%、或約2.6重量%；約2.6重量%至約3.0重量%或約2.8重量%；或約2.8重量%至約3.0重量%。核酸和載體還提供了核酸(例如，載體)，其包括：啟動子(例如，酵母、細菌或哺乳動物啟動子)；編碼信號序列的序列；編碼乳蛋白質的序列(例如，本文所述的任何示例性序列)；和酵母終止序列，其中啟動子可操作地連接至信號序列，所述信號序列可操作地連接至編碼乳蛋白質的序列，且所述終止序列可操作地連接至編碼乳蛋白質的序列。在這些核酸的一些實例中，所述啟動子是組成型啟動子或誘導型啟動子。啟動子的非限制性實例在本文中描述?？捎糜谶@些核酸中的另外啟動子是本領域已知的。本文所述的任何載體中的信號序列可以是來自編碼的乳蛋白質或不同乳蛋白質的信號序列，或者是來自酵母交配因子(例如，任何α交配因子)的信號序列。在一些實例中，編碼的乳蛋白質選自：β-酪蛋白(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)、κ-酪蛋白(例如，本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)、α-s1-酪蛋白(例如，本文所述的任何α-s1-酪蛋白蛋白質)、α-s2-酪蛋白(例如，本文所述的任何α-s2-酪蛋白蛋白質)、α-乳白蛋白(例如，本文所述的α-乳白蛋白蛋白質)、β-乳球蛋白(例如，本文所述的任何β-乳球蛋白蛋白質)、乳鐵蛋白(例如，本文所述的任何乳鐵蛋白蛋白質)或轉鐵蛋白(例如，本文所述的任何轉鐵蛋白蛋白質)?？捎糜诒景l(fā)明載體中的另外信號序列是本領域已知的。本文所述的任何核酸還可包括細菌復制起點。本文所述的任何核酸還可包括選擇標記物(例如，抗生素抗性基因)。細菌復制起點的序列是本領域已知的?？股乜剐曰虻姆窍拗菩詫嵗诒疚闹忻枋??？剐曰虻牧硗鈱嵗潜绢I域已知的。終止序列的非限制性實例在本文中描述。終止序列的另外實例是本領域已知的。本文提供的核酸的一些實施方案還包括：另外的啟動子序列(例如，本文所述的任何示例性啟動子)；編碼信號序列(例如，本文所述的任何示例性信號序列)的另外的序列；編碼另外的乳蛋白質(例如，編碼本文所述的乳蛋白質的任何示例性序列)的序列；和另外的酵母終止序列(例如，本文所述的任何示例性酵母終止序列)，其中另外的啟動子序列可操作地連接至編碼信號序列的另外的序列，編碼信號序列的序列可操作地連接至編碼另外的乳蛋白質的序列，且編碼另外的乳蛋白質的序列可操作地連接至另外酵母末端序列。另外的乳蛋白質可以是例如β-酪蛋白(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)、κ-酪蛋白(例如，本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)、α-s1-酪蛋白(例如，本文所述的任何α-s1-酪蛋白蛋白質)、α-s2-酪蛋白(例如，本文所述的任何α-s2-酪蛋白蛋白質)、α-乳白蛋白(例如，本文所述的α-乳白蛋白蛋白質)、β-乳球蛋白(例如，本文所述的任何β-乳球蛋白蛋白質)、乳鐵蛋白(例如，本文所述的任何乳鐵蛋白蛋白質)或轉鐵蛋白(例如，本文所述的任何轉鐵蛋白蛋白質)。在一些實施方案中，所述核酸包括編碼β-酪蛋白的序列和編碼κ-酪蛋白的序列。所述啟動子和另外啟動子可以相同或不同。酵母終止序列和另外的酵母終止序列可以相同或不同。信號序列和另外信號序列可以相同或不同。本發(fā)明還包括含有編碼酪蛋白或乳清多肽的分離的dna序列的載體和包含所述載體的宿主細胞。所述載體還可包含分離的dna序列，其包含編碼酪蛋白的核苷酸序列(其中所述核苷酸序列可操作地連接至啟動子)，編碼α交配因子或其變體的核苷酸序列，編碼細菌抗性標記物的核苷酸序列和轉錄終止子。一種或多種合適的啟動子用于表達編碼酪蛋白或乳清蛋白質的基因，其可以是在宿主細胞中有功能并且能夠誘導由該基因編碼的產物的表達的任何啟動子。合適的啟動子包括例如plac4-pbi、t7、ptac、pgal、λpl、λpr、bla、spa、adh、cyc、tdh3、adh1和clb1。將核酸引入細胞將核酸(例如，本文所述的任何核酸)引入細胞以生成宿主細胞的方法是本領域公知的。可用于將核酸引入細胞的技術的非限制性實例包括：磷酸鈣轉染、樹枝狀大分子轉染、脂質體轉染(例如，陽離子脂質體轉染)、陽離子聚合物轉染、電穿孔、細胞擠壓、超聲處理、光學轉染、原生質體融合、impalefection、水動力遞送、基因槍、磁轉染和病毒轉導。基于本領域用于將核酸引入細胞的某些技術對于不同類型的宿主細胞更有效的知識，本領域技術人員將能夠選擇用于將核酸引入細胞的一種或多種合適的技術。用于將核酸引入酵母細胞的示例性方法描述于kawai等人,bioeng.bugs1:395-403,2010。宿主細胞本文還提供了包含本文所述的任何核酸(例如，載體)的宿主細胞。在一些實例中，本文所述的核酸穩(wěn)定整合在宿主細胞的基因組(例如染色體)內。在其他實例中，本文所述的核酸并不穩(wěn)定整合在宿主細胞的基因組內。在一些實施方案中，所述宿主細胞是酵母菌株或細菌菌株。在一些實施方案中，所述宿主細胞可以是例如選自以下的酵母菌株：克魯維酵母屬種、畢赤酵母屬種、酵母屬種、四膜蟲屬種、耶氏酵母屬種、漢遜酵母屬種、布氏菌屬種(blastobotryssp.)、念珠菌屬種、接合酵母屬種和德巴利氏酵母屬種?？捎米魉拗骷毎慕湍妇甑牧硗夥窍拗菩詫嵗侨樗峥唆斁S酵母、馬克斯克魯維酵母、釀酒酵母和巴斯德畢赤酵母?？捎米魉拗骷毎牧硗饨湍妇攴N是本領域已知的。在一些實例中，所述宿主細胞可以是原生動物，諸如例如嗜熱四膜蟲、hegewischi四膜蟲、hyperangularis四膜蟲、malaccensis四膜蟲、色點四膜蟲、梨形四膜蟲和貪食四膜蟲。本發(fā)明的一個目標是通過在本文提供的任何宿主細胞中重組表達乳蛋白質組分來將其分離。生產重組乳蛋白質的方法和制備膠束的方法還提供了生產非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的重組乳蛋白質(例如，本文所述的任何一種或多種乳蛋白質)的方法，其包括：在足以允許分泌非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的乳蛋白質的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)本文所述的任何宿主細胞；和從培養(yǎng)基中收獲非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的乳蛋白質。用于這些方法中的合適的培養(yǎng)基是本領域已知的。足以允許分泌乳蛋白質的培養(yǎng)條件也是本領域已知的。在這些方法中使用的宿主細胞可以是本文所述的任何宿主細胞。宿主細胞可以包括本文所述的任何核酸。產生的重組乳蛋白質可以是下列中的一種或多種：β-酪蛋白(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)、κ-酪蛋白(例如，本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)、α-s1-酪蛋白(例如，本文所述的任何α-s1-酪蛋白)、α-s2-酪蛋白(例如，本文所述的任何α-s2-酪蛋白)、α-乳白蛋白(例如，本文所述的任何α-乳白蛋白蛋白質)、β-乳球蛋白(例如，本文所述的任何β-乳球蛋白蛋白質)、乳鐵蛋白(例如，本文所述的任何乳鐵蛋白蛋白質)、轉鐵蛋白(例如，本文所述的任何轉鐵蛋白蛋白質)和血清白蛋白(例如，本文所述的任何血清白蛋白蛋白質)。這些方法中的一些還包括從培養(yǎng)基中分離(例如，純化)重組乳蛋白質。從液體中分離(例如，純化)重組乳蛋白質的方法是本領域公知的。用于分離(例如，純化)重組乳蛋白質的示例性方法描述于imafidon等人,crit.rev.foodsci.nutrition37:663-669,1997)。還提供了生產包括非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白(例如，本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)的膠束的方法，其包括：在足以允許從宿主細胞釋放膠束的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)本文所述的任何宿主細胞，其中所述宿主細胞包含核酸，所述核酸包括編碼β-酪蛋白的序列和編碼κ-酪蛋白的序列；和從培養(yǎng)基中收獲膠束。用于這些方法中的合適的培養(yǎng)基是本領域已知的。在這些方法中使用的宿主細胞可以是本文所述的任何宿主細胞。宿主細胞可以包括本文所述的任何核酸。產生的膠束可以是本文所述的任何膠束(并且可以具有本文所述的膠束的任何物理特征)。這些方法中的一些還包括從培養(yǎng)基中分離(例如，純化)膠束。從液體中分離(例如，純化)膠束的方法是本領域公知的(例如，超速離心)。培養(yǎng)酵母宿主細胞的示例性詳情描述于idiris等人,appl.microbiol.biotechnol.86:403-417,2010;zhang等人,biotechnol.bioprocess.eng.5:275-287,2000;zhu,biotechnol.adv.30:1158-1170,2012;li等人,mabs2:466-477,2010。本發(fā)明的目的是表達一種或多種不同形式的酪蛋白，以應用于各種類型的乳制品替代產品。酪蛋白亞基諸如α-s1-酪蛋白、α-s2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白的差異在于一個或多個氨基酸變化。在某些實施方案中，所述方法和組合物包括摻入牛酪蛋白諸如α-s1-酪蛋白、α-s2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白。在其他實施方案中，所述方法和組合物包括摻入人酪蛋白諸如β-酪蛋白和κ-酪蛋白。參見美國專利號5,942,274。在替代實施方案中，所述酪蛋白選自一種或多種以下來源，包括但不限于：牛、人、水牛、駱駝、山羊、綿羊、馬、海豚、鯨魚、北美野山羊和豬。還提供了用于生產乳蛋白質組分的方法，其可以包括例如使用如實施例1中所述的本發(fā)明的質?；驑嫿w。該方法包括制備感興趣的質粒，將質粒插入適當?shù)乃拗骷毎校谑沟酶信d趣的蛋白質表達的合適時間和合適條件下培養(yǎng)宿主細胞，然后純化蛋白質?？梢曰谄浞肿恿?，例如通過尺寸排阻色譜法、通過膜進行超濾或密度離心，分離蛋白質。在一些實施方案中，可以基于其表面電荷，例如通過等電沉淀、陰離子交換色譜或陽離子交換色譜，分離蛋白質。也可以基于其溶解度，例如通過硫酸銨沉淀、等電沉淀、表面活性劑、洗滌劑或溶劑萃取，分離蛋白質。也可以通過它們與另一分子的親和力，使用例如疏水相互作用色譜、活性染料或羥基磷灰石，分離蛋白質。親和色譜還可以包括使用對蛋白質具有特異性結合親和力的抗體，用于his標記的重組蛋白質的鎳nta，結合糖蛋白上的糖部分的凝集素，或特異性結合蛋白質的其他分子。通常，在最佳ph下離心，得到純化效率>95％。天然酪蛋白和乳清蛋白的等電點是已知的。在本質上，牛α-s1-酪蛋白的ph為4.91，牛α-s2-酪蛋白的ph為4.1，牛β-酪蛋白的ph為4.5，牛κ-酪蛋白的ph為4.1，牛α-乳白蛋白的ph為4.2，且牛β-乳球蛋白的ph為5.2。重組產生的酪蛋白和乳清可以在其磷酸酯基團和糖基團方面不同。用于蛋白質純化的其他方法包括膜過濾以除去任何潛在的細菌或污染物，隨后凍干用于蛋白質分離。優(yōu)選地，所述方法和組合物提供在等于或低于$1,000/kg、$500/kg、$10/kg、$1.0/kg、$0.10/kg、$0.010/kg或$0.0010/kg乳蛋白質組分下有競爭力的生產成本。在更優(yōu)選的實施方案中，所述成本低于$0.009、$0.007、$0.006、$0.005/kg的乳蛋白質組分。補充哺乳動物產生的乳的方法本文還提供了補充哺乳動物產生的乳的方法，其包括：提供哺乳動物產生的乳或加工的哺乳動物產生的乳；和將以下中的至少一種混合至所述乳中：非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)；非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)；和包含非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的β-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)和非糖基化或具有非哺乳動物糖基化模式的κ-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)的膠束(例如，本文所述的任何膠束)?？梢詫ⅵ?酪蛋白、κ-酪蛋白和膠束中的一種或多種混入乳中，以實現(xiàn)本文中稱為“補充的乳組合物”的章節(jié)中描述的組合物中β-酪蛋白蛋白質、κ-酪蛋白蛋白質和膠束中任何示例性最終濃度?；旌系姆椒ㄊ潜绢I域公知的。如本領域技術人員可以理解，本文所述的另外組分也可以混入乳中(例如，本文所述的任何組分而不限于此)。制備組合物的方法還提供了生產組合物的方法，其包括：超聲處理液體，所述液體包括包含β-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)和κ-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)的蛋白質混合物，或包括包含β-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何β-酪蛋白蛋白質)和κ-酪蛋白蛋白質(例如，本文所述的任何κ-酪蛋白蛋白質)的膠束；將灰分(例如，本文所述的任何灰分)混入液體中；向所述液體中加入一種或多種脂質(例如，本文所述的任何一種或多種液體)、一種或多種風味化合物(例如，本文所述的任何一種或多種風味化合物)和一種或多種顏色平衡劑(例如，本文所述的任何一種或多種顏色平衡劑)的混合物，并且超聲處理液體；和向所述液體中加入一種或多種甜味劑(例如，本文所述的任何一種或多種甜味劑)，由此產生所述組合物。在這些方法的一些實例中，所述β-酪蛋白蛋白質是非糖基化的或具有非哺乳動物糖基化模式，和/或κ-酪蛋白蛋白質是非糖基化的或具有非哺乳動物糖基化模式。在這些方法的一些實例中，所述灰分包括下列中的一種或多種：鈣、磷、鉀、鈉、檸檬酸鹽和氯化物。在任何這些方法的一些實例中，添加的灰分包括cacl2、kh2po4和檸檬酸鈉中的一種或多種(例如，兩種或三種)。在這些方法的一些實例中，所述一種或多種脂質包含以下中的至少一種(例如兩種、三種、四種、五種、六種或七種)：向日葵油、椰子油、三丁酸甘油酯、單酸甘油酯和雙酸甘油酯、游離脂肪酸和磷脂。在這些方法的一些實例中，所述游離脂肪酸包含至少一種選自以下的脂肪酸：丁酸、己酸、辛酸和癸酸。在這些方法的一些實例中，所述磷脂是大豆卵磷脂磷脂、向日葵卵磷脂磷脂、棉花卵磷脂磷脂或油菜籽卵磷脂磷脂。在這些方法的一些實施方案中，所述風味化合物包括至少一種(例如兩種、三種、四種、五種或六種)選自以下的風味化合物：δ-癸內酯、丁酸乙酯、2-呋喃基甲基酮、2,3-戊二酮、γ-十一內酯和δ-十一內酯。在這些方法的一些實例中，所述一種或多種顏色平衡劑是β-胡蘿卜素或胭脂樹橙。在這些方法的一些實施方案中，所述一種或多種甜味劑是糖(例如，葡萄糖、甘露糖、麥芽糖、果糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、莫納甜或塔格糖)或人造甜味劑(例如，甜葉菊、阿司帕坦、環(huán)己烷氨基磺酸鹽、糖精、三氯蔗糖、羅漢果甜苷、布拉齊因、仙茅甜蛋白、赤蘚糖醇、甘草甜素、菊粉、異麥芽糖醇、乳糖醇、馬檳榔甜蛋白、麥芽糖醇、甘露醇、神秘果蛋白、莫納甜、莫奈林、奧斯來丁、倍他丁、山梨糖醇、奇異果甜蛋白、木糖醇、乙酰氨基磺酸鉀、advantame、阿力甜、阿司帕坦-乙酰氨基磺酸鹽、環(huán)己烷氨基磺酸鈉、甘素、甜素、新橙皮苷二氫查耳酮、紐甜或p-4000)。所得組合物的ph可以為約ph6.2至約ph7.4(例如，約6.2至約7.2；約6.2至約7.0、約6.2至約6.8、約6.2至約6.6、約6.2至約6.4、約6.4至約7.2、約6.4至約7.0、約6.4至約6.8、約6.4至約6.6、約6.6至約7.2、約6.6至約7.0、約6.6至約6.8、約6.8至約7.2、約6.8至約7.0、或約7.0至約7.2)。在任何這些方法中，所述β-酪蛋白蛋白質可以是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象β-酪蛋白蛋白質；和/或所述κ-酪蛋白蛋白質可以是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象κ-酪蛋白蛋白質。在這些方法的一些實施方案中，所述蛋白質混合物還包含一種或多種選自以下的蛋白質：α-乳白蛋白(例如，本文所述的任何α-乳白蛋白蛋白質)、β-乳球蛋白(例如，本文所述的任何β-乳球蛋白蛋白質)、α-s1-酪蛋白(例如，本文所述的任何α-s1-酪蛋白蛋白質)、α-s2-酪蛋白(例如，本文所述的任何α-s2-酪蛋白蛋白質)、乳鐵蛋白(例如，本文所述的任何乳鐵蛋白蛋白質)、轉鐵蛋白(例如，本文所述的任何轉鐵蛋白蛋白質)和血清白蛋白(例如，本文所述的任何血清白蛋白蛋白質)。如本領域技術人員可以理解，可以計算在這些方法中使用的每種組分的量，以便產生本文所述的任何組合物。制備黃油、奶酪、酪蛋白酸鹽或酸奶的方法本文還提供了制備黃油、奶酪、酪蛋白酸鹽或酸奶的方法，其包括提供本文提供的任何組合物；和使用本文提供的任何組合物作為起始材料生產黃油、奶酪、酪蛋白酸鹽或酸奶。制備黃油、奶酪、酪蛋白酸鹽或酸奶的方法是本領域公知的。參見例如scott,cheesemakingpractice,kluweracademic/plenumpublishers,newyork,ny,1998；美國專利號4,360,535(其描述制備奶油的方法)；u.s285,878(其描述制備黃油的方法)。試劑盒還提供了試劑盒，其包括：(a)一種或多種乳蛋白質(例如，本文所述的任何乳蛋白質，包括本文所述的β-酪蛋白蛋白質、κ-酪蛋白蛋白質、α-s1-蛋白質、α-s2蛋白質、α-乳白蛋白蛋白質、β-乳球蛋白蛋白質、乳鐵蛋白蛋白質、轉鐵蛋白質蛋白質和血清白蛋白蛋白質中的任何一種或多種)、一種或多種脂質(例如，本文所述的任何一種或多種脂質)和一種或風味化合物(例如，本文所述的任何一種或多種風味化合物)的混合物；和(b)灰分(例如，本文所述的任何灰分)和至少一種甜味劑(例如，本文所述的任何一種或多種甜味劑)的混合物。在這些試劑盒的一些實例中，所述一種或多種乳蛋白質是牛、人、綿羊、山羊、水牛、駱駝、馬、驢、狐猴、熊貓、豚鼠、松鼠、熊、獼猴、大猩猩、黑猩猩、北美野山羊(mountaingoat)、猴、猿、貓、狗、沙袋鼠(wallaby)、大鼠、小鼠、象、負鼠、兔、鯨魚、狒狒、長臂猿、猩猩、山魈(mandrill)、豬、狼、狐貍、獅子、老虎、針鼴鼠或猛犸象乳蛋白質。在這些試劑盒的一些實例中，所述一種或多種脂肪選自：向日葵油、椰子油、三丁酸甘油酯、單酸甘油酯和雙酸甘油酯、游離脂肪酸和磷脂。所述試劑盒中存在的脂肪酸可以包括至少一種選自以下的脂肪酸：丁酸、己酸、辛酸和癸酸。所述試劑盒中的磷脂可以是大豆卵磷脂磷脂、向日葵卵磷脂磷脂、棉花卵磷脂磷脂或油菜籽卵磷脂磷脂。所述試劑盒中的風味化合物可以包括至少一種選自以下的風味化合物：δ-癸內酯、丁酸乙酯、2-呋喃基甲基酮、2,3-戊二酮、γ-十一內酯和δ-十一內酯。在所述試劑盒的一些實施方案中，(a)中的混合物還包括一種或多種顏色平衡劑(例如，本文所述的任何顏色平衡劑，例如β-胡蘿卜素或胭脂樹橙)。在所述試劑盒的一些實例中，所述一種或多種甜味劑是糖(例如，葡萄糖、甘露糖、麥芽糖、果糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、莫納甜或塔格糖)或人造甜味劑(例如，甜葉菊、阿司帕坦、環(huán)己烷氨基磺酸鹽、糖精、三氯蔗糖、羅漢果甜苷、布拉齊因、仙茅甜蛋白、赤蘚糖醇、甘草甜素、菊粉、異麥芽糖醇、乳糖醇、馬檳榔甜蛋白、麥芽糖醇、甘露醇、神秘果蛋白、莫納甜、莫奈林、奧斯來丁、倍他丁、山梨糖醇、奇異果甜蛋白、木糖醇、乙酰氨基磺酸鉀、advantame、阿力甜、阿司帕坦-乙酰氨基磺酸鹽、環(huán)己烷氨基磺酸鈉、甘素、甜素、新橙皮苷二氫查耳酮、紐甜或p-4000)。所述試劑盒可以包括灰分，其包括下列中的一種或多種：鈣、磷、鉀、鈉、檸檬酸鹽和氯化物。在一些實例中，所述試劑盒中的灰分包括cacl2、kh2po4和檸檬酸鈉中的一種或多種(例如，兩種或三種)。在所述試劑盒的一些實施方案中，(a)中的混合物提供在光密和氣密的包裝(例如，金屬箔，例如鋁箔)中，和/或(b)中的混合物提供在氣密包裝(例如，密封塑料袋)中。所述試劑盒的一些實例還包括制備本文所述的任何組合物的說明書。本文還提供了包含至少一種本文所述的核酸的試劑盒。調節(jié)風味特征感覺印象諸如“飼料樣”、“乏味”或“不潔凈”被描述為從牛攝入的食物和其周圍的氣味中吸收的風味描述。其他由于大量細菌生長而通過微生物作用發(fā)展。化學變化也可以通過酶作用、與金屬(諸如銅)接觸或暴露于陽光或強烈熒光而進行。質量控制主管不斷努力避免乳和其他乳制品中的異味。因此，本發(fā)明的一個目的是減少、消除或甚至掩蓋各種乳制品的不期望風味和氣味。在本發(fā)明的某些優(yōu)選方面，改變脂肪含量可以改變各種乳制品替代產品的風味和氣味。例如，增加丁酸含量可以將非乳制奶酪的風味特征改變成類似于帕爾馬奶酪的風味特征。在其他實施方案中，調節(jié)三酸甘油酯諸如己酸、癸酸和/或辛酸導致類似于山羊奶酪的風味特征。因此，用脂肪酸組分的比率調節(jié)三酸甘油酯提供了不同的風味特征，其可以被微調以類似于各種所需乳制品的那些。類似地，所述方法和組合物通過調節(jié)摻入乳制品替代產品中的各種三酸甘油酯來使一種或多種不期望的香氣最小化。在某些方面，通過以所需組合摻入與基于植物的油(例如向日葵油)組合的合成的短鏈三酸甘油酯來調節(jié)。例如，[c18c18c6]和[c18c6c18]的混合物提供與[c18c4c4]和[c18c10c10]的混合物不同的風味特征。乳制品替代產品可以使用本發(fā)明的方法和組合物制備各種各樣乳制品替代產品。這樣的產品包括但不限于乳、全乳、酪乳、脫脂乳、嬰兒配方、煉乳、干乳、蒸乳、黃油、澄清黃油、奶油和各種類型的奶酪。乳制品替代產品也可以作為乳制品的替代物摻入各種食品應用中，其包括以下冰淇淋、冷凍奶油凍、冷凍酸奶、餅干、蛋糕、白軟干酪、奶油干酪、法式鮮奶油、凝乳和酸奶。在某些方面，本發(fā)明提供了一種或多種選自α-s1-酪蛋白、α-s2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白的酪蛋白的亞基，其用于乳制品替代產品中的乳蛋白質組分。酪蛋白亞基的選擇組合用作乳蛋白質組分的主要或至少一部分。在優(yōu)選實施方案中，所述酪蛋白組合物包含以下量的酪蛋白亞基，使得約12-15g/lα-s1-酪蛋白、約3-4g/lα-s2-酪蛋白、約9-11g/lβ-酪蛋白和約2-4g/lκ-酪蛋白代表合成乳制品中的總酪蛋白。在各種實施方案中，以干重或總重計，所述酪蛋白組合物可以包含約0.5%、約1%、約1.5%、約2%、約2.5%、約3%、約3.5%、約4%、約4.5%、約5%、約6%蛋白質。在一些實施方案中，以干重或總重計，所述酪蛋白組合物可以包含約0.5-2.5%、約1-2%、約2-3%、或約4-10%酪蛋白蛋白質。在具體實施方案中，以干重或總重計，所述酪蛋白組合物可以包含約1.5-10％蛋白質。在某些方面，乳制品替代產品的方法和組合物基本上不含一種或多種血清蛋白質。血清蛋白質通常包含酶、激素、生長因子、營養(yǎng)素轉運蛋白和抗病因子等蛋白質。在另外實施方案中，乳制品替代產品的方法和組合物基本上不含一種或多種免疫球蛋白，其可誘導不期望的免疫應答。在一些實施方案中，以干重或總重計，乳清組合物可以包含約0.001％、約0.05％、約0.1％、約0.5％、約1％、約1.5％、約2％、約2.5％、約3％、約3.5％、約4%乳清蛋白質。在一些實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約0.1-1%、約1-2%、約2-3%、或約0.1-2.3%蛋白質。在具體實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約10-15％蛋白質。在各種實施方案中，將碳水化合物摻入乳制品替代產品中。這些碳水化合物為產品的風味特征提供溫和的甜味，并且還充當快速作用的能量和營養(yǎng)來源。碳水化合物包括但不限于糖諸如半乳糖、蔗糖、葡萄糖、果糖和麥芽糖。不含乳制品的糖源包括但不限于甜菜和其他植物諸如芹菜、羅勒屬植物、蜂蜜、櫻桃、玉米、菠菜、李子、獼猴桃和豌豆。乳糖不耐受是許多乳消費者常見的。因此，在優(yōu)選的實施方案中，從乳制品替代組合物省略了碳水化合物諸如乳糖。在優(yōu)選的實施方案中，乳制品替代組合物的方法和組合物基本上不含乳糖。在一些實施方案中，以干重或總重計，所述碳水化合物組合物可以包含約1％、約1.5％、約2％、約2.5％、約3％、約3.5％、約4％、約4.5％、約5％碳水化合物。在一些實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約1-3％、約2-4％或約10-30％碳水化合物。在具體實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約2-5％碳水化合物。灰分歸因于酪蛋白膠束的結構和穩(wěn)定性?；曳謱τ趯⒆鳛槿榛蚰逃偷娜橐罕３衷谝黄鹗欠浅Ｖ匾?。存在于灰分中的鈣和磷酸鹽與脂肪球和酪蛋白膠束相互作用以保持乳化混合物。所述灰分還影響感覺特征，諸如口感，稠度，和在一定程度上，乳的風味。在一些實施方案中，以干重或總重計，所述灰分組合物可以包含約0.1％、約0.2％、約0.3％、約0.4％、約0.5％、約0.6％、約0.7％、約0.8％、約0.9％、約1％、約2％或約3％灰分。在一些實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約0.1-0.3％、約0.5-0.7％、約0.7-1％或約1-2％灰分。在具體實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約0.6-0.8％蛋白質。各種不含動物成分的乳制品的另外成分包括維生素、調味劑、天然或人造甜味劑、著色劑、鹽、ph調節(jié)劑、粘合劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑、必需氨基酸、抗結塊劑、消泡劑和其混合物。在一些實施方案中，以干重或總重計，剩余的成分組合物可以包含約0％、約0.01％、約0.1％、約0.5％、約1％、約2％、約3％、約4％或約5％添加劑。在一些實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約0.001-0.01％、約0.01-1％、約0.01-2％、或約1-5％添加劑。在具體實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約0-10％添加劑。在一些方面，本發(fā)明提供具有脂肪的乳制品替代物的方法和組合物，其包含各種水平的三酸甘油酯含量。在優(yōu)選的實施方案中，來自各種植物來源的分離的三酸甘油酯與乳蛋白組分、碳水化合物和灰分一起摻入。本發(fā)明的一個目的是調節(jié)在植物中分離并在乳品替代產品中酯交換的脂肪酸以類似于天然乳制品中發(fā)現(xiàn)的脂肪酸的百分比，和/或開發(fā)具有自然界中未發(fā)現(xiàn)的改善風味的新穎風味特征。在一些實施方案中，調節(jié)特異性短鏈-中鏈鏈脂肪酸包括但不限于丁酸、癸酸、辛酸、己酸和月桂酸，在乳制品替代產品中提供所需的風味特征。在一些實施方案中，以干重或總重計，合成乳中的脂肪組合物包含約0％、約1％、約2％、約3％、約3.5％、約4％脂肪。在一些實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約1-2％、約2-3％、約3-4％脂肪。在具體實施方案中，以干重或總重計，所述組合物可以包含約3-4％脂肪。在替代實施方案中，奶油中的脂肪組合物可以包含約10％、約20％、約30％、約40％、約50％或甚至60％。優(yōu)選地，奶油中的脂肪組合物通常為約40至約50％。在一些方面，短鏈三酸甘油酯與較長的鏈油組合以產生酯交換的脂肪酸酯。優(yōu)選地，所述較長鏈油選自：向日葵、玉米、橄欖、大豆、花生、胡桃、杏仁、芝麻、棉籽、卡諾拉、紅花、亞麻籽、棕櫚、棕櫚仁、棕櫚果、椰子、巴巴蘇、乳木果油、芒果脂、可可脂、小麥胚芽和米糠油。更優(yōu)選地，所述較長鏈油包含工程改造的向日葵品種，其將油酸過表達400％。較長鏈油也可以提供風味特征，例如，減少或甚至去除鮮明并柔和所需最終產品的整體風味特征。在一些實施方案中，乳制品替代品的脂肪組分包含酯交換為更長鏈油諸如高油酸向日葵油的選擇三酸甘油酯(實施例2)。預期相同的四種短鏈脂肪酸可以給予乳和衍生產品諸如奶酪其特定的風味，諸如堅固性和豐富度。摻入三酸甘油酯和較長鏈油的各種組合以產生許多不同的風味特征。在一個實施方案中，具有三種油酸的三酸甘油酯和在這種情況下具有一種丁酸、一種己酸和一種辛酸合成的短鏈三酸甘油酯，產生所需的合成“乳脂肪”三酸甘油酯。另外的實施方案包括摻入各種短鏈三酸甘油酯以調節(jié)稍微不同的風味特征，例如包含己酸的短鏈三酸甘油酯；包含己酸和丁酸的短鏈三酸甘油酯；包含己酸和癸酸的短鏈三酸甘油酯。因此，方法和組合物提供合成的短鏈三酸甘油酯與向日葵油三酸甘油酯的各種組合，導致不同的風味特征。合成乳包含本發(fā)明的微生物衍生的蛋白質的合成乳制劑的示例性實施方案在實施例4中說明。例如，本發(fā)明的制劑摻入牛酪蛋白的所有四個亞基：α-s1-酪蛋白、α-s2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白和兩種乳清蛋白質α-乳白蛋白和β-乳球蛋白作為制劑中主要的乳蛋白質組分。示例性合成乳制劑還包含如圖1中所示的基于植物的酯交換脂肪。另外組分包括碳水化合物和灰分。所得乳替代產品表現(xiàn)出看起來、功能、味道、聞起來和感覺像天然乳的特征。作為本發(fā)明的關鍵方面之一，修改合成乳的制劑可以通過調節(jié)油含量、即加入以模仿不同風味的乳中的三酸甘油酯的類型來表現(xiàn)出不同的感官印象，諸如調味。如youngw.park,bioactivecomponentsinmilkanddairyproducts,technology&engineering,pp60,2009中所述，甾醇是乳中總脂質的一小部分，主要甾醇為膽固醇(300mg/100g脂肪，其等效于10mg/100ml牛乳)(park等人,smallrumin.res.68:88-113,2007)。山羊乳已被顯示含有比其他乳更少的膽固醇，但通常含有比牛乳更高的總脂肪。參見，posati等人,1976.compositionoffoods.agric.handbookno.8-1.ars,usda,washington,d.c.,1976;jenness,j.dairysci.63:1605–1630,1980;和juarez等人,intl.dairyfed.bull.no.202.pp.54-67,1986,已經(jīng)顯示山羊乳比牛具有更多棕櫚酸和油酸級分。膽固醇含量在不同品種間顯著變化，而山羊乳中的大多數(shù)膽固醇呈游離狀態(tài)，其中酯形式中僅為少量52mg/100g脂肪。參見例如，arora等人,ind.j.dairysci.29:191。在某些實施方案中，本發(fā)明的方法和組合物通過調節(jié)油含量、即三酸甘油酯的類型來提供與乳制品相比具有較少膽固醇或不含膽固醇或具有相同膽固醇含量的合成乳制品。在其他實施方案中，與乳制乳相比，飽和和不飽和脂肪的量也在奶制品替代物中調節(jié)至至少更少或相同量的脂肪。在優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的合成乳制品的飽和脂肪非常低，但是聞起來和嘗起來像乳制乳。在本發(fā)明的優(yōu)選實施方案中，長鏈脂肪酸，通常是乳中的飽和脂肪酸，而不是單不飽和酸，諸如油酸。本發(fā)明可能不需要或至少使巴氏殺菌最少化，因為在通過配制方法組合之前，可以分別使每種組分無菌。在本發(fā)明的其他實施方案中，本發(fā)明的合成乳制品可經(jīng)歷巴氏殺菌。均質化對于本發(fā)明的方法和組合物是任選的，如同天然乳的情況。當作為獨立液體飲料銷售時，本發(fā)明的合成乳制品可以以均勻的形式銷售。本發(fā)明的乳替代物與乳制乳之間的差異包括風味、營養(yǎng)價值和儲存穩(wěn)定性。調味可以基于三酸甘油酯以及可賦予乏味度或清晰度或不同香味(諸如奶牛、山羊、椰子、杏仁或大豆)的其他天然或人造香料調節(jié)至所需的感官印象。合成奶酪在本發(fā)明的其他方面，提供了包含一種或多種分離的乳蛋白質組分、脂肪、碳水化合物和灰分的方法和組合物，以產生各種類型的奶酪產品。通常，所述奶酪由本發(fā)明的乳蛋白質組分制成。通過調節(jié)三酸甘油酯將一種或多種感官印象摻入奶酪產品中。因此，可以產生具有不同外觀、香氣、味道和質地的所需感官特征的乳酪。對于一些奶酪品種，除了調節(jié)三酸甘油酯之外，還在奶酪制作過程中使用一種或多種細菌用于發(fā)酵，其中產生發(fā)酵產物和副產物諸如乳酸、二氧化碳、醇類、醛類和酮類。奶酪的類型包括乳清干酪諸如意大利乳清干酪(ricotta)和馬蘇里拉奶酪(mozzarella)，半軟乳酪包括哈瓦蒂干酪(havarti)和芒斯特芝士(munster)，中等硬奶酪諸如swiss和jarlsberg，硬奶酪諸如切達干酪(cheddar)和軟成熟干酪諸如布里干酪(brie)和卡門伯特干酪(camembert)。合成奶油直接可用的奶油替代物應優(yōu)選包含約50至90重量％水，更優(yōu)選約65至80重量％水，其中堿分散在水中。用于替代奶油的基料應有利地含有(使用基料的總重量作為100％計算的所有百分比)約22至87重量％碳水化合物(更優(yōu)選約30至64％)，約12至70重量％的顆粒脂肪(最優(yōu)選約28至60％)和約0.4至8重量％的所選乳化劑或其組群(最優(yōu)選約1至4％)。在優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的產品在水性乳液中是穩(wěn)定的。如本文中所用，當滿足以下最低標準時，干燥的含液體脂肪的非乳制食品被認為是“穩(wěn)定的”：重新配制的乳液穩(wěn)定性、增白能力、上油或油分離、羽化沉淀。參見美國專利號4,310,561。合成黃油商業(yè)黃油含有80-82％乳脂肪、16-17％水和1-2％除脂肪外的乳固體(有時稱為凝乳)。本文提供的乳制品替代產品或組合物的優(yōu)點本發(fā)明的所需優(yōu)點是與常規(guī)乳制品相比環(huán)境性質的，諸如8倍能量效率，260倍水效率。其他環(huán)境優(yōu)勢包括比常規(guī)乳生產更少的用水量，其估計為約1000l/l，和對于傳統(tǒng)乳生產減少的土地使用量通常需要放牧，作物土地，每年減少從傳統(tǒng)的乳生產中排放的6000億kg二氧化碳的能力。本發(fā)明還提供飼料、操作、勞動、動物和銷售的成本的減少或消除。優(yōu)選地，基本上將飼料成本降低8倍。食品安全的優(yōu)點包括減少或去除抗生素殘留物、重金屬、細菌、摻雜物。因此，本發(fā)明的某些方面提供無細菌的不含動物成分的乳，不需要巴氏殺菌或冷運輸，但具有延長的保存期限并且表現(xiàn)出許多特征，諸如味道、外觀、處理和口感特性，其與其傳統(tǒng)的乳制品對應物相同或至少非常類似。優(yōu)選地，乳制品替代產品基本上不含細菌，諸如布魯氏菌屬(brucella)、彎曲桿菌屬(camplyobacter)、利斯特氏菌屬(listeria)、分枝桿菌屬(mycobacterium)、沙門氏菌屬(salmonella)、志賀氏菌屬(shigella)、耶爾森菌屬(yersinia)、賈第蟲屬(giardia)和諾如病毒(noroviruses)，因此對于食用更安全。另外優(yōu)點包括最少巴氏滅菌或沒有巴氏滅菌和/或均質化。更優(yōu)選地，乳制品替代物對于生產和分配持續(xù)相對長時段(例如，至少三周，優(yōu)選較長的)是儲存穩(wěn)定的。甚至更優(yōu)選地，乳制品替代產品具有較低的環(huán)境影響。下面參考示例性應用來描述本發(fā)明的幾個方面用于說明。應當理解，闡述了許多具體細節(jié)、關系和方法以提供對本發(fā)明的完全理解。然而，相關領域的普通技術人員將容易地認識到，可以在沒有一個或多個具體細節(jié)或具有其他方法的情況下實踐本發(fā)明。實施例實施例1載體蛋白質序列牛α-s1酪蛋白(uniprot登錄號p02662)、牛α-2酪蛋白(uniprot登錄號p02663)、牛β-酪蛋白(uniprot登錄號p02666)、牛κ-酪蛋白(uniprot登錄號p02668)、牛α-乳白蛋白(uniprot登錄號b6v3i5)和牛β-乳球蛋白(uniprot登錄號p02754)在uniprot.org上獲得，并用以下變化改變：從n-末端去除15或21-殘基信號肽；向dna的5'末端加入xhoi(ctcgag)核酸內切酶識別序列和kex內肽酶識別序列(aaaaga)；和向dna的3'末端加入sali(gtcgac)核酸內切酶識別序列。通過以上示順序組合四個酪蛋白的序列來制備另外的組合序列，用以下dna段分離每個序列：ggctcaggatcagggtcgaaaagaggctcaggatcagggtcg(seqidno:128)。在這里，未加下劃線的片段編碼(gs)6接頭序列用于足夠的翻譯后間隔和對kex蛋白酶的可及性，并且加下劃線的區(qū)段編碼翻譯后切開蛋白質的kex內肽酶序列。如上，整個盒在5'末端側接xhoi，且在3'末端側接sali，用于連接至pklac2(newenglandbiolabs,beverly,ma)中。dna由gen9,inc.(cambridge,ma)或idt(coralville,ia)合成。所使用的質粒尤其具有多克隆位點、lac啟動子、基于乙酰胺的報告基因和α-交配因子基因，其用作融合蛋白用于分泌外源蛋白質。酵母轉染通過將0.5ml含有25％甘油的感受態(tài)細胞的管在冰上解凍并加入0.62ml酵母轉染試劑來完成酵母的轉染。然后將混合物在30℃下加熱30分鐘，在37℃下熱休克1小時。然后將細胞以7000rpm沉淀并用1.0mlypgal培養(yǎng)基洗滌兩次。然后將細胞混合物轉移至無菌培養(yǎng)管中，并在30℃下在300rpm恒速搖動下培育3小時。然后將細胞混合物轉移至無菌的1.5ml微量離心管中，并以7000rpm將細胞沉淀2分鐘，并重新懸浮于1ml無菌的1xpbs中。將10、50和100μl的細胞懸浮液置于分開的各自含有50μl無菌去離子水的新鮮無菌的1.5ml微量離心管中。將管短暫混合并鋪展至含有用于選擇的5mm乙酰胺的單獨的酵母碳基瓊脂(ycb瓊脂)平板上。然后將平板在30℃下倒置培育4天，直至形成菌落。然后將15個單獨的菌落劃線至含有5mm乙酰胺的新鮮ycb瓊脂平板上，并在30℃下培育2天。內部設計編碼α-乳白蛋白和β-乳球蛋白(兩種主要乳白蛋白)的dna，并從idt預定合成，并根據(jù)供應商提供的方案轉染入來自newenglandbiolabs試劑盒(目錄號e1000s)的感受態(tài)乳酸克魯維酵母細胞。高通量轉染子選擇從每個ycb瓊脂平板，一旦菌落已足夠生長，就測試30個平板中的每一個的載體質粒的成功整合。這隨后進行每個平板的pcr分析，以測試具有多個載體整合體的特殊細胞。一旦分離，使用產量最高的個別培養(yǎng)物用于放大培養(yǎng)。該過程可以用連續(xù)更高濃度的選擇壓力迭代，以迫使菌落形成更高拷貝數(shù)的我們工程改造的質粒。進行5次轉染事件，并鋪板在5個由無氮酵母碳基培養(yǎng)基組成的平板上。(因此，如果不攝取外源dna本身，這些平板上任何觀察到的生長都暗示質粒的成功攝取)。在這5個平板中，100％顯示陽性生長。選擇來自5個平板的30個單獨的菌落用于放大培養(yǎng)，并且每個在單獨的ycb瓊脂平板上生長以產生純合培養(yǎng)平板，以允許容易的表征和管理。3天生長期后，將來自每個平板的單個菌落最初加入含有2mlypgal培養(yǎng)基的10ml玻璃培養(yǎng)管中，以測試蛋白質表達。在兩天的生長期后，將細胞沉淀出來，并將上清液在sdspage凝膠上運行以檢查蛋白質表達。將提供最佳蛋白質表達的菌株放大培養(yǎng)至10ml、100ml、500ml和最終1l培養(yǎng)容器。使來自每種乳清蛋白的2升培養(yǎng)物生長。從總量中收集約1克蛋白質，表明0.5g/l的非優(yōu)化產率/生產率。在1l搖瓶培養(yǎng)物中放大培養(yǎng)將培養(yǎng)物放大培養(yǎng)并以至少1:10的分割比率接種在1l搖瓶中。在接種前，使接種燒瓶在沒有乙酰胺補充的生產培養(yǎng)基中生長24小時。在分批補料生產運行的開始當天，將反應器裝入目標起始體積的90％，并加熱至運行溫度?，F(xiàn)在，將溫度設置在30°c，以節(jié)省與加熱反應器相關的能量成本?？梢栽诠に噧?yōu)化階段中探索另外參數(shù)。當反應器達到30℃時，使用蠕動泵將接種燒瓶逐滴加入反應容器中。使用供應商提供的軟件將反應器維持在目標ph。每天兩次從反應器液體培養(yǎng)基取出樣品，以定量細胞的葡萄糖和電解質使用量，且作為反應器的ph和溶解氣體測量的雙重檢查。每次測量后，加入大劑量葡萄糖以維持目標葡萄糖濃度10％開始，盡管這在工藝開發(fā)中也可改變。當細胞達到最大密度時，通過加入半乳糖(這引發(fā)了我們的pklac2質粒上的啟動子)來觸發(fā)蛋白質產生。補充半乳糖，直到運行結束。最佳運行長度同樣可以在工藝開發(fā)中確定，但設定為5天分批補料。完全運行后，從反應器移取酵母細胞，并如下所討論純化蛋白質。酪蛋白蛋白質純化以下酪蛋白蛋白質α-s1酪蛋白、α-s2酪蛋白和β-酪蛋白是固有地疏水性的，當從酵母分泌并與水接觸時，其沉淀出來。從反應器介質的純化包括從培養(yǎng)基表面收集蛋白質，隨后干燥以分離純蛋白質。κ-酪蛋白是固有地親水性的，并且κ-酪蛋白的純化包括溶液的ph變化為4.6，隨后以10,000rcf離心。組合的酪蛋白盒以與κ-酪蛋白相同的方式作用。乳清蛋白質純化α-乳白蛋白：α-乳白蛋白的等電點為4.2。當生物反應器介質溶液的ph降至4.2時，蛋白質的溶解度最低。這將蛋白質從溶液中敲出并允許通過離心收集。β-乳球蛋白：類似于α-乳白蛋白的純化，溶液的ph降低至5.2，β-乳球蛋白的等電點。這中和蛋白質的電荷，并允許通過以14,000rcf離心將其收集。蛋白質純化將2l培養(yǎng)基在地板離心機中以3,000g離心以沉淀出酵母細胞。將沉淀棄去，并將上清液轉移至新的容器中，對于α-乳白蛋白，將溶液的ph降低至4.2，且對于β-乳球蛋白，將溶液的ph降低至5.2(圖2a)。這隨后為將上清液在35℃下在搖瓶中培育30分鐘，在地板離心機中以14,000g離心以沉淀出蛋白質混合物(圖2b)。蛋白質表征通過離心分離蛋白質后，將固體沉淀和上清液溶液在14％sda-page凝膠上運行以檢查蛋白質的表達。在14kda和18kda處觀察到陽性條帶(圖3)，其分別與牛來源的α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的大小相關。進行進一步表征，以確定在初級序列、糖基化和磷酸化方面的等效性。實施例2三酸甘油酯合成通過將短鏈三酸甘油酯酯交換至高油酸向日葵油(來自定制工程改造的向日葵變體(其表達如表1中所述的以下比率的脂肪酸酯)的油)來制備乳脂肪三酸甘油酯：表1：www.sunflowernsa.com/uploads/resources/51/warner_.pdf。短鏈三酸甘油酯制備主要負責乳和奶油中豐富風味的短鏈脂肪酸是具有4至10的偶數(shù)碳的分子，并如表2中所述以以下比率混合：表2：www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/pmc2596709/pdf/fnr-52-1821.pdf。表3：鏈長名稱混合物中的質量分數(shù)(％)4丁酸/丁酸406己酸/己酸268辛酸/辛酸1110癸酸/癸酸22表3中的分數(shù)基于牛乳中這些物質的相對存在率，但可以在工藝開發(fā)期間進行改變，以便設計更好的品嘗產品和設計其他物種諸如水牛或山羊的乳。將上示質量比的短鏈脂肪酸與甲苯、對甲苯磺酸和甘油在通常用于酯化反應的dean-stark分水器中組合，以除去在縮合反應中產生的水。反應在通風柜中進行數(shù)小時，直到觀察到進入分水器的水位持續(xù)30分鐘以上不變。使容器冷卻并將混合物從反應燒瓶中取出。將混合物用5％碳酸鈉溶液洗滌兩次，并用純水洗滌5次。定期添加鹽水(10％nacl水溶液)，以破壞在分液漏斗中形成的乳液。將短鏈三酸甘油酯、水、甲苯和雜質的洗滌混合物在旋轉蒸發(fā)器中在90℃和54mbar氣氛下干燥1小時，直到其過量進行得很好，以便最小化食物污染的機會。酯交換將短鏈三酸甘油酯混合物與高油酸向日葵油以1:8的體積比組合。加入等于油混合物質量的1％的質量的甲醇鈉以催化酯交換反應，并將反應容器加熱至65℃，在惰性氬氣氣氛下連續(xù)攪拌6小時。加入5％乙酸混合物以淬滅反應，然后將油用去離子水洗滌5次，并在旋轉蒸發(fā)器中在>90℃下干燥1小時。將成品乳脂肪高壓滅菌以確保無菌性，并因此適用于如上所述的乳或奶油。實施例3乳制劑一種非限制性乳組合物制劑描述如下。表4：組分%(w/v)范圍量(g/l)酪蛋白蛋白質1–1010–100乳清蛋白質0–10–10基于植物的乳脂肪0–80–80ml/l糖0–50–50灰分0.1–11–10鈣0.1–0.51–lx(功能添加劑)0-10–10l按照表4，每1升乳通過以下程序實現(xiàn)乳制劑。將26克酪蛋白、3.5克乳清和5克灰分組合并充分混合。將40ml三酸甘油酯解凍并加熱至55℃。將蛋白質混合物緩慢倒入三酸甘油酯中并以高速渦旋5分鐘。同時，將3.5克乳清和24克半乳糖加入850ml去離子水中；將混合物加熱至37℃。將三酸甘油酯/蛋白質/灰分混合物移入waring商業(yè)攪拌機并以低速共混。將乳清/半乳糖/水混合物緩慢倒入混合器中；蓋子置于攪拌器上。將混合物以高速共混十分鐘。加入去離子水至1000ml的最終體積?？梢允褂矛F(xiàn)有方法任選地均化乳?？梢酝ㄟ^改變固體的比率來改變用于奶油或任意奶制劑的上述方案；然而，我們的初步研究表明，蛋白質混合物中灰分的存在和相當大比例的乳清的分離可以極大地影響乳液的質量。實施例4合成的乳制劑作為初步的概念證據(jù)，為了確定是否可以重組乳的關鍵組分以形成乳，購買干燥食品級純化酪蛋白和研究級乳清。愛爾蘭奶油獲自當?shù)貋碓?，并通過以14,000g離心奶油而從其中分離純化的脂肪。最后，所有使用的礦物質均購自sigmaaldrich。術語：c-油糊=通過將酪蛋白蛋白質和脂肪混合在一起、同時將混合物的溫度保持在37℃而制成的油糊。w-油糊=通過將乳清蛋白質和脂肪混合在一起、同時將混合物的溫度保持在37℃而制成的油糊。cw-油糊=通過首先將酪蛋白和乳清蛋白質一起混合在混合物中、加入脂肪并在37℃下混合而制備的油糊。表5：實驗結果酪蛋白+脂肪+水淡黃色液體，味道不好，蛋白質沉淀，且口感不好(水樣)。酪蛋白+水+脂肪淡黃色液體，味道不好，蛋白質沉淀，且口感不好(水樣)。(酪蛋白+脂肪)以制備油糊。油糊+水淡黃色液體，味道平均，且口感不好(水樣)。觀察到低蛋白沉淀。假設口感不好(例如，多水)是由于缺乏乳清蛋白。表6：實驗結果酪蛋白+乳清+脂肪+水淡黃色-白色液體，味道不好，蛋白質沉淀，且口感不好。c-油糊+乳清+水淡黃色-白色液體，味道平均，低蛋白質沉淀，且口感不好w-油糊+乳清+水淡黃色-白色液體，味道平均，低蛋白質沉淀，且口感不好。cw-油糊+水淡黃色-白色液體，味道平均，且口感不好。零蛋白質沉淀。假設口感不好是因為不期望的酪蛋白膠束形成，ca的添加將允許膠束再次形成。表7：實驗結果cw-油糊+水+磷酸鈣(通過試驗和誤差計算出ca的最佳量)白色液體，口感正常。零蛋白質沉淀。味道平均為了改善味道，將不同濃度的不同糖加入上述混合物中。表8：糖2.4%3.0%3.6%4.2%4.8%葡萄糖良好太甜太甜太甜太甜半乳糖乏味優(yōu)異平均優(yōu)異太甜蔗糖不好不好不好不好不好麥芽糖乏味優(yōu)異優(yōu)異太甜太甜摻入牛乳中發(fā)現(xiàn)的所有其他離子，以重新產生自然界中發(fā)現(xiàn)的離子環(huán)境。參考文獻：r.rosmaninho,l.f.melo/journaloffoodengineering73(2006)379–387表9：試劑組成(mm)kh2po411.60檸檬酸鉀h2oa3.7檸檬酸鈉2h2o6.1k2so41.03k2co32.17kcl8.0cacl2.2h2o8.98最終結果是亮白色的液體，這可能是因為離子環(huán)境使乳中存在的固體保持在一起，并增加了溶液的總體折射率。味道是優(yōu)異的，但是它具有平均的口感(例如，在液體中觀察到一定量的堊白質)。如表9中所述的精確礦物組成可以提供優(yōu)異的口感。乳脂肪合成通過將存在于高油酸向日葵油三酸甘油酯中的大鏈脂肪酸中的短鏈脂肪酸酯交換來制備合成的乳脂肪。使用的四條短鏈是：40%c4：丁酸。發(fā)現(xiàn)于乳，特別是山羊、綿羊和水牛乳，黃油，帕爾馬奶酪，且作為厭氧發(fā)酵的產物(包括結腸中且作為身體氣味)。它具有令人不愉快的味道和刺激的味道，具有甜味的回味(類似于乙醚)。丁酸存在于人中，并且是人類嘔吐物的主要特征氣味。26%c6：己酸。一種無色油狀液體，具有脂肪樣、奶酪樣、蠟質和類似于山羊或其他農場動物的氣味。11%c8：辛酸。它是一種極少溶于水的油狀液體，具有輕微令人不愉快的酸敗樣氣味和味道。22%c10:癸酸。沒有太多可提及的風味，而且碳鏈越長，你開始得到越少風味。這是在椰子油中，所以它不是本身和其他的一樣多的乳脂肪風味。迭代包括月桂酸(c12)，因為它以牛乳中總脂肪酸含量的2.9％存在(beare-rogers,j.;dieffenbacher,a.;holm,j.v.(2001)."lexiconoflipidnutrition(iupactechnicalreport)".pureandappliedchemistry73(4):685–744.doi:10.1351/pac200173040685.)在以下指定量的四分之一中按照如yu等人,themodificationananalysisofvegetableoilforcheesemaking.j.am.oilchem.soc.,77:911(2000)中所述的以下程序：將與乳脂肪樣品中所見相同的比率[參見上文]和總共7.26mol的丁酸、己酸、辛酸和癸酸(sigmachemicalco.,st.louis,mo)、21.42g對甲苯磺酸(sigmachemicalco.)、2.305mol甘油(sigmachemicalco.)和458ml甲苯(fisherscientific)的混合物用dean-stark分水器回流6小時。當水不再滴入分水器中時，認為反應完成。將sctg用5％碳酸鈉溶液洗滌一次，并用水洗滌數(shù)次。然后，將sctg在85℃下在旋轉蒸發(fā)器中加熱以除去水和甲苯。來自商業(yè)和天然來源的sctg與hoso(trisun80,rbd;achumko,memphis,tn)以1:8.82的sctg/hoso比率進行酯交換，以產生具有與乳脂肪相同百分比的scfa的脂肪。來自商業(yè)來源的sctg還以1:7.19的sctg/hoso比率進行酯交換，以產生具有等于乳脂肪中的120％的水平的scfa的脂肪。以總油重量的0.5％使用甲醇鈉(aldrichchemicalcompany,st.louis,mo)作為催化劑。反應在65℃、氮氣下攪拌進行6小時。接下來，加入5％乙酸(fisherscientific)以中和催化劑，然后將油用蒸餾水洗滌幾次，并在旋轉蒸發(fā)儀上在90℃下干燥30分鐘。類似于smouse(smouse,t.h.,alaboratorycontinuousdeodorizer,inform8:1176–1181(1997).)描述的中試規(guī)模連續(xù)除臭劑用于將酯交換的油除臭。油流速為600ml/h，柱溫為180°c，壓力為0.5托，且蒸汽速率為12.6ml/h。品嘗每批除臭油以確保風味。將除臭的油儲存在4℃，直到用于制備奶酪。實施例5脂肪酸的調節(jié)將具有三種油酸的向日葵油三酸甘油酯與作為合成乳產品的混合物中的脂肪組合物的一部分的含有一種丁酸、一種己酸和一種辛酸的四種短鏈脂肪酸進行酯交換。預期這種脂肪的陣列或組合導致合成的乳脂肪，與天然乳制品乳相比，其提供其豐富的味道?？刂埔环N或多種三酸甘油酯的組成的能力可能增強或改變合成乳制品產品的風味特征。因此，長鏈和短鏈的矩陣(matrix)可以在風味特征中產生，包括但不限于與黃油味的、堅果味的、甜味的、酸味的、水果味的、花香味的、苦味的、木質味的、土味的、豆腥味的、辣味的、金屬味的、甜味的、霉味的、油味的和醋味的感官印象相關的多種芳族化合物。此外，相對于相應的乳制品，可以顯示出質地諸如乳脂度的增加，熔化特性或耐受性的提高以及拉伸能力的增加。實施例6.乳蛋白質的重組生產在重組酵母菌株(畢赤酵母)菌株中生產α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、α-s1-酪蛋白、α-s2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白。由于酵母中的糖基化酶與哺乳動物細胞不同，由酵母產生的蛋白質將是非葡萄糖基化的或具有非哺乳動物糖基化模式。產生的蛋白質可以用作本文所述的任何組合物中的組分。質粒構建質粒用于表達每種蛋白質。每種質粒包括以下組分：所表達的每種蛋白質的誘導型啟動子(例如，aox1啟動子)或組成型(gap啟動子或pgk啟動子)啟動子；編碼每種蛋白質的信號肽的序列，其源自天然牛蛋白質序列或來自酵母蛋白質序列(α交配因子或ost1)；編碼待表達的乳蛋白質的序列；所表達的每種蛋白質的酵母轉錄終止子序列(例如，aox1、aod或cyc1)；來自puc19的細菌復制起點，其使得能夠在大腸桿菌中復制；和可選擇標記物盒(例如，kanr或zeocinr)，其使得能夠在細菌和酵母中用抗生素進行選擇。用于產生不同蛋白質的不同質粒列于下表10中。表10.表達質粒(seqidno)1seqidno:159(合成的)然后將這些質粒整合到野生型巴斯德畢赤酵母中用于表達。通過sds-page、elisa和蛋白質印跡檢測蛋白質的產生。α-乳白蛋白菌株構建產生三種質粒，將牛α-乳白蛋白(bvlaa)的表達置于甲醇誘導的啟動子paox1的控制下，其具有天然laa信號肽(pjag-nat-laa)、全長α交配因子信號肽(pjag-amf-laa)或ost1信號肽(pjag-ost-laa)。在轉化前，通過用限制酶saci消化將20μg每種質粒線性化。然后通過乙醇沉淀濃縮消化的質粒，并重新懸浮于10μl蒸餾水中。如下制備感受態(tài)巴斯德畢赤酵母細胞：使巴斯德畢赤酵母的培養(yǎng)物在ypd培養(yǎng)基(10g/l酵母提取物、20g/l蛋白胨、20g/l葡萄糖)中生長至對數(shù)期(od600~1.0)。通過離心收集1.5ml等分試樣，然后重新懸浮于1ml的ypd+20mmhepes(ph8):1m乙酸鋰的1:1混合物中。加入10μl1m二硫蘇糖醇后，將細胞在振蕩器中以300rpm在30℃下培育15分鐘。通過離心沉淀細胞，并在1ml冰冷的1m山梨醇中洗滌三次。最終洗滌后，將細胞重新懸浮于50μl1m山梨醇中。將細胞與線性化質粒dna在冷卻的2mm電穿孔小槽中組合，并進行1.5kv脈沖(25μf，200ω)。將細胞轉移到具有200μl冷1:1ypd:1m山梨糖醇的培養(yǎng)管中，并使其在30℃(300rpm)下恢復2小時。最后，將細胞鋪板在含有博萊霉素的ypd瓊脂平板上，并在30℃下生長兩天。蛋白質表達從瓊脂平板挑取菌落，并在750μlbmd1%(0.2m磷酸鉀緩沖液、13.4g/l酵母氮源、0.4mg/ml生物素、1.1％葡萄糖)中在30℃、300rpm下生長。48小時后，使用900μl培養(yǎng)物來接種750μlbmm2(0.2m磷酸鉀緩沖液、13.4g/l酵母氮源、0.4mg/ml生物素、1％甲醇)。24小時后，150μlbmm10(bmm10:0.2m磷酸鉀緩沖液、13.4g/l酵母氮源、0.4mg/ml生物素、5％甲醇)，并在再一天后收獲樣品用于分析。分析在離心以除去細胞團的培養(yǎng)物的樣品中分析蛋白質表達。然后通過sds-page、elisa和蛋白質印跡來評估澄清的上清液。為了經(jīng)由sds-page顯現(xiàn)總蛋白，將無細胞上清液用sds-page樣品緩沖液處理，煮沸，并在10％聚丙烯酰胺凝膠上運行。凝膠用syproruby染料(lifetechnologies)染色。所得凝膠顯示使用ost1或天然乳白蛋白信號肽發(fā)生α-乳白蛋白的分泌(圖4)。為了經(jīng)由elisa測量蛋白質滴度，將25μl每種樣品置于半?yún)^(qū)域96孔微量滴定板中，并使其在4℃下結合過夜。除去樣品后，通過用溶解在tris緩沖鹽水(50mmtris,ph7.6,150mmnacl)中的1%(w/v)牛血清白蛋白(bsa)填充每個孔并在室溫下培育1小時來封閉結合表面。然后將樣品在1%bsa/tbs+0.1%(v/v)tween-20中稀釋的一抗中培育1.5小時。在tbs+tween中三次洗滌后，將樣品和與辣根過氧化物酶(hrp)綴合的二抗培育另外一小時。在tbs+tween中三次最終洗滌后，加入顯色底物(tmb單一溶液,lifetechnologies)，并測量650nm處的吸光度。所得數(shù)據(jù)顯示，使用天然α-乳白蛋白信號肽或ost1信號肽分泌α-乳白蛋白(圖5)。為了經(jīng)由蛋白質印跡分析樣品，將一個體積的樣品與等體積的sds-page樣品緩沖液組合并在10％聚丙烯酰胺凝膠上運行。將蛋白質轉移到硝酸纖維素膜上，其通過用1%bsa/tbs處理來封閉1小時。在用1%bsa/tbs+tween中稀釋的一抗培育1.5小時后，將印跡在tbs+tween中洗滌三次。然后將印跡和與辣根過氧化物酶(hrp)綴合的二抗培育另外一小時。在tbs+tween中三次最終洗滌后，加入顯色底物(1步ultratmb印跡溶液,thermofisher)。染色完成后，將印跡在蒸餾水中洗滌。β-乳球蛋白菌株構建組裝三個質粒，將牛β-乳球蛋白(bvlgb)的表達置于甲醇誘導的啟動子(plh37中的paox1)或兩種組成型啟動子之一(plh44中的pgap或plh45中的ppgk)的控制下。在轉化前，通過用限制酶saci消化將20μgplh37線性化。將相同量的plh44和plh45用酶apali線性化。然后通過乙醇沉淀濃縮消化的質粒，并重新懸浮于10μl蒸餾水中。如下制備感受態(tài)巴斯德畢赤酵母細胞：使巴斯德畢赤酵母的培養(yǎng)物在ypd培養(yǎng)基(10g/l酵母提取物、20g/l蛋白胨、20g/l葡萄糖)中生長至對數(shù)期(od600~1.0)。通過離心收集1.5ml等分試樣，然后重新懸浮于1ml的ypd+20mmhepes(ph8):1m乙酸鋰的1:1混合物中。加入10μl1m二硫蘇糖醇后，將細胞在振蕩器中以300rpm在30℃下培育15分鐘。通過離心沉淀細胞，并在1ml冰冷的1m山梨醇中洗滌三次。最終洗滌后，將細胞重新懸浮于50μl1m山梨醇中。將細胞與線性化質粒dna在冷卻的2mm電穿孔小槽中組合，并進行1.5kv脈沖(25μf，200ω)。將細胞轉移到具有200μl冷1:1ypd:1m山梨糖醇的培養(yǎng)管中，并使其在30℃(300rpm)下恢復2小時。最后，將細胞鋪板在含有博萊霉素的ypd瓊脂平板上，并在30℃下生長兩天。蛋白質表達為了評估用含有甲醇誘導型啟動子的質粒(plh37)轉化的克隆中的表達，將各克隆在750μlbmd1%(0.2m磷酸鉀緩沖液、13.4g/l酵母氮源、0.4mg/ml生物素、1.1％葡萄糖)中在30℃、300rpm下生長。48小時后，使用900μl培養(yǎng)物來接種750μlbmm2(0.2m磷酸鉀緩沖液、13.4g/l酵母氮源、0.4mg/ml生物素、1％甲醇)。24小時后，150μlbmm10(bmm10:0.2m磷酸鉀緩沖液、13.4g/l酵母氮源、0.4mg/ml生物素、5％甲醇)，并在再一天后收獲樣品用于分析。為了評估用支持組成型表達的質粒(plh44或plh45)轉化的克隆中的表達，將各克隆在pg培養(yǎng)基(20g/l蛋白胨、2％甘油)中在30℃下在300rpm搖動下生長過夜。將培養(yǎng)物在最小硫酸鹽培養(yǎng)基中1:10稀釋：葡萄糖20g/l氯化鈣(cacl2)1g/l磷酸鈉(na2po4)24g/l硫酸鉀(k2so4)18.2g/l硫酸鎂(mgso4-7h2o)14.9g/l硫酸銨(nh4)2so49g/ledta(乙二胺四乙酸)65.25mg/lfeso4-7h2o(硫酸鐵七水合物)12.18g/lznso4-7h2o(硫酸鋅七水合物)25.0125g/lcacl2-2h2o(氯化鈣二水合物)12.615g/lcuso4-5h2o(硫酸銅五水合物)2.175g/lnamoo4-2h2o(鉬酸鈉二水合物)2.088g/lcocl2-6h2o(氯化鈷六水合物)2.0445g/lmncl2-4h2o(氯化錳四水合物)1.392g/l生物素0.2175g/l48小時后，收集樣品用于分析。分析在離心以除去細胞團的培養(yǎng)物的樣品中分析蛋白質表達。然后通過elisa和蛋白質印跡來評估澄清的上清液。為了經(jīng)由elisa測量蛋白質滴度，將25μl每種樣品置于半?yún)^(qū)域96孔微量滴定板中，并使其在4℃下結合過夜。除去樣品后，通過用溶解在tris緩沖鹽水(50mmtris,ph7.6,150mmnacl)中的1%(w/v)牛血清白蛋白(bsa)填充每個孔并在室溫下培育1小時來封閉結合表面。然后將樣品在1%bsa/tbs+0.1%(v/v)tween-20中稀釋的一抗中培育1.5小時。在tbs+tween中三次洗滌后，將樣品和與辣根過氧化物酶(hrp)綴合的二抗培育另外一小時。在tbs+tween中三次最終洗滌后，加入顯色底物(tmb單一溶液,lifetechnologies)，并測量650nm處的吸光度。所得數(shù)據(jù)顯示β-乳球蛋白的分泌(圖6)。為了經(jīng)由蛋白質印跡分析樣品，將一個體積的樣品與等體積的sds-page樣品緩沖液組合并在10％聚丙烯酰胺凝膠上運行。將蛋白質轉移到硝酸纖維素膜上，其通過用1%bsa/tbs處理來封閉1小時。在用1%bsa/tbs+tween中稀釋的一抗培育1.5小時后，將印跡在tbs+tween中洗滌三次。然后將印跡和與辣根過氧化物酶(hrp)綴合的二抗培育另外一小時。在tbs+tween中三次最終洗滌后，加入顯色底物(1步ultratmb印跡溶液,thermofisher)。染色完成后，將印跡在蒸餾水中洗滌。所得蛋白質印跡顯示β-乳球蛋白從重組酵母分泌(圖7)。牛酪蛋白構建了雙重表達質粒，以支持一種質粒中α-s1-酪蛋白與β-酪蛋白的表達，以及另一種質粒中α-s2-酪蛋白與κ-酪蛋白的表達。選擇這些配對，因為流體乳中α-s1：α-s2：β：κ的摩爾比為約5.5：1.5：4.0：1.5；因此希望具有類似拷貝數(shù)的α-s1-酪蛋白和β-酪蛋白，以及類似拷貝數(shù)的α-s2-酪蛋白和κ-酪蛋白。將β-酪蛋白和α-s2-酪蛋白置于其各自質粒中的組成型pgap啟動子的控制下，而將α-s1-酪蛋白和κ-酪蛋白置于組成型ppgk啟動子的控制下。為了將蛋白質導入分泌途徑，表達具有其天然信號肽(plh46和plh47)或ost1信號肽(plh48和plh49)的蛋白質。此外，制備質粒，其中表達一種具有其天然信號肽的蛋白質，而表達另一種具有ost1信號肽的蛋白質：plh0050ost1-β，天然-α-s1plh0051天然-β,ost1-α-s1plh0054ost1-α-s2，天然-κplh0055天然-α-s2,ost1-κ。為了產生表達所有四種酪蛋白的菌株，首先用編碼β-酪蛋白和α-s1-酪蛋白的質粒轉化酵母細胞。在轉化前，用酶apali將20μg每種質粒線性化。然后通過乙醇沉淀濃縮消化的質粒，并重新懸浮于10μl蒸餾水中。如下制備感受態(tài)巴斯德畢赤酵母細胞：使巴斯德畢赤酵母的培養(yǎng)物在ypd培養(yǎng)基(10g/l酵母提取物、20g/l蛋白胨、20g/l葡萄糖)中生長至對數(shù)期(od600~1.0)。通過離心收集1.5ml等分試樣，然后重新懸浮于1ml的ypd+20mmhepes(ph8):1m乙酸鋰的1:1混合物中。加入10μl1m二硫蘇糖醇后，將細胞在振蕩器中以300rpm在30℃下培育15分鐘。通過離心沉淀細胞，并在1ml冰冷的1m山梨醇中洗滌三次。最終洗滌后，將細胞重新懸浮于50μl1m山梨醇中。將細胞與線性化質粒dna在冷卻的2mm電穿孔小槽中組合，并進行1.5kv脈沖(25μf，200ω)。將細胞轉移到具有200μl冷1:1ypd:1m山梨糖醇的培養(yǎng)管中，并使其在30℃(300rpm)下恢復2小時。最后，將細胞鋪板在含有博萊霉素的pg瓊脂(20g/l蛋白胨，2%(v/v)甘油，2％瓊脂)平板上，并在30℃下生長兩天。然后使來自β+αs1平板的六個克隆在培養(yǎng)物中生長，并使用上述程序使其能夠進行dna攝取。然后將它們用線性化的αs2+κ質粒轉化，并在含有g418的pg平板上在30℃下生長兩天。表達為了評估牛酪蛋白蛋白質的生產，將表達酪蛋白的5個克隆和野生型酵母陰性對照在pg培養(yǎng)基(20g/l蛋白胨、2％甘油)中在30℃下在300rpm搖動下生長過夜。所有五種酪蛋白表達克隆都表達具有相應的天然酪蛋白信號肽的α2和κ-酪蛋白?？寺lh115、116、117和118表達具有各自天然信號肽的β-酪蛋白和α-s1-酪蛋白；克隆slh122表達具有ost1信號肽的β-酪蛋白和α-s1-酪蛋白。將培養(yǎng)物在最小硫酸鹽培養(yǎng)基中1:10稀釋：葡萄糖20g/l氯化鈣(cacl2)1g/l磷酸鈉(na2po4)24g/l硫酸鉀(k2so4)18.2g/l硫酸鎂(mgso4-7h2o)14.9g/l硫酸銨(nh4)2so49g/ledta(乙二胺四乙酸)65.25mg/lfeso4-7h2o(硫酸鐵七水合物)12.18g/lznso4-7h2o(硫酸鋅七水合物)25.0125g/lcacl2-2h2o(氯化鈣二水合物)12.615g/lcuso4-5h2o(硫酸銅五水合物)2.175g/lnamoo4-2h2o(鉬酸鈉二水合物)2.088g/lcocl2-6h2o(氯化鈷六水合物)2.0445g/lmncl2-4h2o(氯化錳四水合物)1.392g/l生物素0.2175g/l48小時后，收集樣品用于分析。分析在離心以除去細胞團的培養(yǎng)物的樣品中分析蛋白質表達。然后通過elisa和蛋白質印跡來評估澄清的上清液。為了經(jīng)由elisa測量蛋白質滴度，將25μl每種樣品置于半?yún)^(qū)域96孔微量滴定板中，并使其在4℃下結合過夜。除去樣品后，通過用溶解在tris緩沖鹽水(50mmtris,ph7.6,150mmnacl)中的1%(w/v)牛血清白蛋白(bsa)填充每個孔并在室溫下培育1小時來封閉結合表面。然后將樣品在1%bsa/tbs+0.1%(v/v)tween-20中稀釋的一抗中培育1.5小時。在tbs+tween中三次洗滌后，將樣品和與辣根過氧化物酶(hrp)綴合的二抗培育另外一小時。在tbs+tween中三次最終洗滌后，加入顯色底物(tmb單一溶液,lifetechnologies)，并測量650nm處的吸光度。elisa數(shù)據(jù)顯示不同的酵母菌株可以將α-s1酪蛋白和β-酪蛋白分泌到培養(yǎng)基中(圖8)。為了經(jīng)由蛋白質印跡分析樣品，將一個體積的樣品與等體積的sds-page樣品緩沖液組合并在10％聚丙烯酰胺凝膠上運行。將蛋白質轉移到硝酸纖維素膜上，其通過用1%bsa/tbs處理來封閉1小時。在用1%bsa/tbs+tween中稀釋的一抗培育1.5小時后，將印跡在tbs+tween中洗滌三次。然后將印跡和與辣根過氧化物酶(hrp)綴合的二抗培育另外一小時。在tbs+tween中三次最終洗滌后，加入顯色底物(1步ultratmb印跡溶液,thermofisher)。染色完成后，將印跡在蒸餾水中洗滌。本實施例中的數(shù)據(jù)顯示，本文所述的不同表達載體可用于生成分泌不同乳蛋白的轉基因酵母菌株。實施例7.制備組合物的方法使用下述具體方法生成本文所述的示例性組合物。該方法的示意圖顯示于圖9中。為了制備奶制品，采用實驗室設備諸如混合器、攪拌板和超聲儀。對于大規(guī)模生產，應使用標準流體乳加工設備。如圖9所示，有三種主要組分用于該制備組合物的方法。這些步驟包括：a.蛋白質溶液的制備b.油混合物的制備c.乳固體的重構。在步驟a中，將粉末狀膠束酪蛋白和乳清蛋白混合并共混(步驟1)，隨后與去離子(di)水混合(步驟2)以獲得蛋白質溶液1。通常，這在該溶液中含有2.8％粉末狀膠束酪蛋白、0.7％粉末狀乳清蛋白和85.5％水。覆蓋混合容器以防止水分蒸發(fā)。該混合在足夠的時間段(約30分鐘)內由混合器、攪拌板或超聲儀進行。該混合時間確保所有蛋白質都分散在水中?；旌纤俣纫呀?jīng)被優(yōu)化為中等，其提供足夠的力來分散蛋白質并避免空氣在溶液中的捕獲。水含量可根據(jù)其他成分的用量進行調整。在步驟3中，cacl2、kh2po4和檸檬酸鈉在水中的分離溶液是用于制備與天然牛乳類似的礦物質特征的礦物質來源。在典型的情況下，cacl2溶液濃度為0.1g/ml，kh2po4為0.27g/ml，而檸檬酸鈉溶液為0.21g/ml檸檬酸鈉。用于制備kh2po4與檸檬酸鈉溶液的水通常是溫熱的，以確保kh2po4的完全溶解。在蛋白質溶液1的混合期間，緩慢加入0.015%cacl2(步驟4)。使用的cacl2溶液的體積根據(jù)所需的cacl2的重量百分數(shù)進行調整?；旌铣掷m(xù)約30分鐘，以使蛋白質與ca2+離子完全相互作用。隨后，將0.27%kh2po4和0.21％檸檬酸鈉分為5份，并將各部分以5至10分鐘的間隔時間緩慢加入混合溶液(步驟5)。將0.085%cacl2分為4份，并將各部分以4-10分鐘的間隔時間緩慢加入混合溶液(步驟6)?；旌铣掷m(xù)至少30分鐘，優(yōu)選1-2小時，以獲得蛋白質溶液2。在方法b中，低速混合足以實現(xiàn)不同油成分的均勻混合。以下用于制備油混合物1的每種組分的百分比基于總油混合物1重量。最初，將65％向日葵油、29％椰子油和2％三丁酸甘油酯混合在一起以形成油基料(步驟7)。將向日葵油和椰子油除臭以防止不想要的氣味。向日葵油、椰子油和三丁酸甘油酯的組合可以模仿與天然乳類似的脂肪酸特征。油基成分及其含量可根據(jù)不同需要進行調整(不同類型的產品)。通過在向日葵油中混合不同香氣組分來制備香氣混合物(步驟8)。用于模擬香氣的化合物含有、但不限于丁酸乙酯、δ-癸內酯、2-呋喃基甲基酮、2,3-戊二酮、γ-十一內酯、δ-十一內酯、乙偶姻、糠醇、糠醛、2-甲基糠醛和2-甲基吡嗪。其含量可以通過不同的應用和偏好進行調整。加入2.5％單酸甘油酯和二酸甘油酯、0.6％游離脂肪酸、0.5％磷脂和0.4％芳香混合物以混合制備油混合物1(步驟9)。在典型的情況下，游離脂肪酸含有0.15％丁酸和0.45％己酸。大豆卵磷脂用作磷脂來源。大豆卵磷脂容易獲得并且便宜。在向日葵油中以0.5mg/g的濃度制備β-胡蘿卜素溶液(步驟10)。將4％的油混合物1和0.06％的β-胡蘿卜素溶液混合在一起，以獲得油混合物2(步驟11)。調整β-胡蘿卜素的用量以實現(xiàn)所述乳的不同顏色水平。油混合物1的用量也可以根據(jù)不同的乳制品應用進行調整。在方法c中，將油混合物2緩慢加入蛋白質溶液2中并充分混合以制備產物混合物1(步驟12)?；旌峡梢酝ㄟ^混合器或超聲儀進行。在典型的情況下，將油混合物2和蛋白質溶液2在中等至高速度下混合以確保油均勻地分散在水溶液中。隨后，應用超聲處理以將油球分解成更小的尺寸，這導致其在溶液中的穩(wěn)定性的增加。在混合期間必需防止溶液中捕獲氣泡。使用至少20分鐘的混合時間將油混合物2攪拌到水溶液中并允許徹底分散。將4％麥芽糖溶液加入產物混合物1中，并連續(xù)混合另外30分鐘，以得到產物混合物2(步驟13)。根據(jù)不同的應用，甜度可以通過糖含量進行調整。糖的來源也可以根據(jù)要求進行調整?？赡苄枰硗獾膁i水以使最終總重量達到100％。在該過程中不包括強化均質化、巴氏消毒和滅菌。然而，對于放大培養(yǎng)生產，有必要應用這些步驟來在方法c中制備產品混合物。使用的設備混合器：ika-labortechnikrw16basic，速度水平(4-6)尖端超聲儀：qsonica型號cl-188，幅度70%水浴超聲波儀：bransonic型號1510r-mt。實施例8.示例制劑具有與全乳、奶油、高蛋白質乳、無脂乳和無糖乳類似的味道和質地特征的示例制劑組合物在下表11-15中提供。如本領域可以理解，通過對實施例7中所述的方法進行必要的修改來制備表11-15中列出的組合物。表11.組合物樣全乳。表12.組合物樣奶油表13.組合物樣富含蛋白質的乳。表14.組合物樣無脂乳表15.組合物樣無糖乳。實施例9.示例性組合物通過目前描述的方法制備的示例性組合物顯示在圖10中。圖10中的組合物具有與哺乳動物產生的乳類似的外觀(顏色)、粘度、起泡性、風味和營養(yǎng)價值。圖10中所示的組合物包含哺乳動物來源的蛋白質。序列表<110>pandya,ryangandhi,perumal<120>乳制品替代食物及制造方法<130>42233-0002wo1<150>62/040,393<151>2014-08-21<160>159<170>fastseqforwindowsversion4.0<210>1<211>190<212>prt<213>牛<220><221>變體<222>(0)...(0)<223>酪蛋白k<400>1metmetlysserphepheleuvalvalthrileleualaleuthrleu151015propheleuglyalaglngluglnasnglngluglnproileargcys202530glulysaspgluargphepheserasplysilealalystyrilepro354045ileglntyrvalleuserargtyrprosertyrglyleuasntyrtyr505560glnglnlysprovalalaleuileasnasnglnpheleuprotyrpro65707580tyrtyralalysproalaalavalargserproalaglnileleugln859095trpglnvalleuserasnthrvalproalalyssercysglnalagln100105110prothrthrmetalaarghisprohisprohisleuserphemetala115120125ileproprolyslysasnglnasplysthrgluileprothrileasn130135140thrilealaserglygluprothrserthrprothrileglualaval145150155160gluserthrvalalathrleuglualaserprogluvalilegluser165170175proprogluileasnthrvalglnvalthrserthralaval180185190<210>2<211>573<212>dna<213>牛<220><221>misc_feature<222>(0)...(0)<223>酪蛋白kcdna<400>2atgatgaagagttttttcctagttgtgactatcctagcattaaccctgccatttttgggt60gcccaagagcaaaaccaagaacaaccaatacgctgtgagaaagatgaaagattcttcagt120gacaaaatagccaaatatatcccaatccagtatgtgctgagtaggtatcctagttatgga180ctcaattactaccaacagaaaccagttgcactaattaataatcaatttctgccataccca240tattatgcaaagccagctgcagttaggtcacctgcccaaattcttcaatggcaagttttg300tcaaatactgtgcctgccaagtcctgccaagcccagccaaccaccatggcacgtcaccca360cacccacatttatcatttatggccattccaccaaagaaaaatcaggataaaacagaaatc420cctaccatcaataccattgctagtggtgagcctacaagtacacctaccatcgaagcagta480gagagcactgtagctactctagaagcttctccagaagttactgagagcccacctgagatc540aacacagtccaagttacttcaaccgcggtctaa573<210>3<211>192<212>prt<213>山羊<220><221>變體<222>(0)...(0)<223>酪蛋白k<400>3metmetlysserphepheleuvalvalthrileleualaleuthrleu151015propheleuglyalaglngluglnasnglngluglnproilecyscys202530glulysaspgluargphepheaspasplysilealalystyrilepro354045ileglntyrvalleuserargtyrprosertyrglyleuasntyrtyr505560glnglnargprovalalaleuileasnasnglnpheleuprotyrpro65707580tyrtyralalysprovalalavalargserproalaglnthrleugln859095trpglnvalleuproasnthrvalproalalyssercysglnaspgln100105110prothrthrleualaarghisprohisprohisleuserphemetala115120125ileproprolyslysaspglnasplysthrgluvalproalaileasn130135140thrilealaseralagluprothrvalhisserthrprothrthrglu145150155160alailevalasnthrvalaspasnproglualasersergluserile165170175alaseralasergluthrasnthralaglnvalthrserthrgluval180185190<210>4<211>579<212>dna<213>山羊<220><221>misc_feature<222>(0)...(0)<223>酪蛋白kcdna<400>4atgatgaagagttttttcctagttgtgactatcctggcattaaccctgccatttttgggt60gcccaggagcaaaaccaggaacagccgatatgctgtgagaaagatgaaagattcttcgat120gacaaaatagccaaatatatcccaattcagtatgtgctgagtaggtatcctagttatgga180ctcaattactatcaacagagaccagttgcactaattaataatcaatttctgccataccca240tattatgcaaagccagttgcagttaggtcacctgcccaaactcttcaatggcaagttttg300ccaaatactgtgcctgccaagtcctgccaagaccagccaactaccctggcacgtcaccca360cacccacatttatcatttatggccattccaccaaagaaagatcaggataaaacagaagtc420cctgccatcaataccattgctagtgctgagcctacagtacacagtacacctaccaccgaa480gcaatagtgaacactgtagataatccagaagcttcctcagaatcgattgcgagtgcatct540gagaccaacacagcccaagttacttcaaccgaggtctaa579<210>5<211>182<212>prt<213>家貓<220><221>變體<222>(0)...(0)<223>酪蛋白k<400>5metlysthrphepheleuvalvalasnileleualaleuthrleupro151015pheleuglyalaglnvalglnasnglngluglnprothrcysargglu202530asnaspgluargleuleuasnglnlysthralalystyrileproval354045histyrvalleuserasntyrprohistyrgluprosertyrtyrpro505560hislysproalavalprovalasnasnglntyrmetprotyrprotyr65707580tyralalysprovalalavalargprohisvalglnileproglntrp859095glnvalleuproasnthrtyrthrprothrvalvalarghisprohis100105110leuproalaserpheilealaileproprolyslysileglnasplys115120125thrglyasnprothrileasnthrilealathralagluleuthrleu130135140thrprothrthrgluproilevalasnthrvalvalthrthrgluala145150155160sersergluphethrilethrserthrprogluthrthrthrvalpro165170175valalaserthrmetval180<210>6<211>549<212>dna<213>家貓<220><221>misc_feature<222>(0)...(0)<223>酪蛋白kcdna<400>6atgaagacttttttcctagttgtgaatatccttgcattaaccttgccatttttgggtgca60caggtgcaaaaccaagaacaaccaacttgccgtgaaaatgatgaaagattgcttaatcag120aaaactgccaagtatatcccagttcattatgtactgagtaactatcctcactatgagccc180agttactacccgcataaaccagctgtaccagttaataatcaatatatgccctatccatat240tatgcaaaaccagttgcagttaggccacatgtccaaattcctcagtggcaagtcctgcca300aatacctacacacccactgtggtacgtcacccacacctacctgcgtcatttattgccatt360cccccaaagaaaattcaggataagacaggcaaccctaccatcaataccattgctactgct420gagcttacacttactcctaccactgaaccaatagtgaacactgtagtcactacagaagca480tcctcagaattcaccatcacaagcacacctgagactaccacagttccagtggcttcaacc540atggtctaa549<210>7<211>196<212>prt<213>智人<220><221>變體<222>(0)...(0)<223>酪蛋白k<400>7metargalaasnalaasnvalalaaspalaglnseralailemetlys151015serpheleuleuvalvalasnalaleualaleuthrleupropheleu202530alavalgluvalglnasnglnlysglnproalacyshisgluasnasp354045gluargprophetyrglnlysthralaprotyrvalpromettyrtyr505560valproasnsertyrprotyrtyrglythrasnleutyrglnargarg65707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