本發(fā)明涉及一種魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣的制備方法，屬于螯合鈣技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

多年來漁業(yè)的蓬勃發(fā)展不斷對其加工技術(shù)提出新的要求，但就目前來看，淡水魚加工技術(shù)相對還比較薄弱。淡水魚加工過程中去除可食部分，魚內(nèi)臟部位往往被視為廢棄物丟棄，或僅作為肥料、飼料，造成淡水魚資源的極大浪費。魚鰾含有的生物小分子膠原蛋白質(zhì)，是人體補充合成蛋白質(zhì)的原料。且易于吸收和利用。它是以水溶液的形式貯存于人體組織中，從而改善組織營養(yǎng)狀況和加速新陳代謝?，F(xiàn)已證明，富含膠原蛋白質(zhì)的食物可通過膠原蛋白的結(jié)合水，去影響某些特定組織生理機能，從而促進生長發(fā)育增強抗病能力，起到延緩衰老和抵御癌癥的效能。在中國的漢代即有藥書有記載“魚鰾”作為藥用的功效；到了唐朝已作為貢品之一，中醫(yī)理論認(rèn)為：“魚鰾”及具有滋補的功效；是女士養(yǎng)顏護膚美容保健佳品，醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，“魚鰾”中含有海量的維生素族群，和多種微量元素，其中維生素A含量超過其他魚類產(chǎn)品，對美容、補鈣都很有好處。

近年來，扇貝殼作為我國重要的海產(chǎn)經(jīng)濟貝類產(chǎn)量不斷增加，而占其總重 80 %以上的扇貝殼大多數(shù)作為固體廢棄物被丟棄在垃圾場或填海，已成為環(huán)境一大公害，迫切需要新技術(shù)手段來解決這一問題。另外，由于扇貝殼中碳酸鈣的含量高達(dá)95 %左右，以扇貝殼為原料制備生物鈣日益引起人們的重視。

鈣是人體內(nèi)重要的礦物元素，不僅參與骨骼、牙齒的構(gòu)成，還對維持滲透壓與酸堿平衡、心臟跳動、神經(jīng)沖動的傳導(dǎo)等生理活動有著非常重要的作用。但是傳統(tǒng)補鈣制劑如磷酸鈣、碳酸鈣、葡萄糖酸鈣、醋酸鈣、乳酸鈣等，溶解性差、吸收率低、副作用大。因此，對于易溶解吸收的補鈣制劑的研究顯得尤為重要。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題：針對傳統(tǒng)補鈣制劑溶解性差、吸收率低、副作用大的問題，本發(fā)明提供了一種魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣的制備方法，本發(fā)明以廢棄物扇貝殼為鈣源，經(jīng)清洗酸泡后去除表面雜質(zhì)，再用水飛法除去高密度雜質(zhì)，再用鹽酸溶解，制備可溶性鈣液，并用魚鰾中生物小分子膠原蛋白質(zhì)螯合可溶性鈣，制得魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣。本發(fā)明制備的魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣溶解性好，吸收率高，補鈣效果顯著，是既補充膠原蛋白又補充鈣的綜合補充制劑。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

（1）稱取600~800g新鮮扇貝殼，用去離子水洗滌扇貝殼3~5次，將洗凈后的新鮮扇貝殼浸泡在1~2L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%鹽酸中1~2h，隨后過濾，自然風(fēng)干后將其置于乳缽中，加入80~120mL去離子水，研磨20~30min，得糊狀物，再加入300~400mL去離子水，收集上部懸浮液，繼續(xù)研磨下沉粗粉20~30min，加入300~400mL去離子水，重復(fù)研磨和收集懸浮液3~5次，合并懸浮液，靜置2~3h后，過濾，將沉淀加入干燥箱中，在105~110℃下干燥至恒重，將干燥后的沉淀加入粉碎機中粉碎，過200目篩，得扇貝殼細(xì)粉；

（2）稱取50~100g上述扇貝殼細(xì)粉加入1~2L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%鹽酸中，在70~80℃下恒溫水浴下，以300~400r/min攪拌反應(yīng)1~2h，得鈣離子酸解液，隨后將酸解液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在50~55℃下蒸發(fā)至原酸解液體積的20~30%，冷卻至室溫，得鈣離子脫酸液；

（3）稱取30~50g黃魚鰾，從黃魚鰾一端剖開，除去黃魚鰾中血管和粘膜，并用去離子水洗滌黃魚鰾3~5次，將洗凈后的黃魚鰾瀝干后，從開口處灌入3~10mL上述鈣離子脫酸液，扎緊開口后置于蒸鍋中，在60~70℃下蒸煮1~2h，打開魚鰾并收集魚鰾內(nèi)混合液，再用去離子水洗滌魚鰾內(nèi)壁1~2次，合并洗滌液與混合液，得螯合反應(yīng)液；

（4）將上述螯合反應(yīng)液進行抽濾，濾液蒸發(fā)濃縮至原液體積的10~15%，得膏狀物，將膏狀物加入100~200mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%乙醇溶液中，以300~500r/min攪拌20~30min，靜置10~12h，隨后過濾，濾渣加入80~150mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%乙醇溶液中，以300~500r/min攪拌20~30min，靜置10~12h后離心分離，收集沉淀，將沉淀轉(zhuǎn)入干燥箱中，在110~120℃下干燥至恒重，得魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣。

本發(fā)明的應(yīng)用方法是：每天服用0.1~0.2g本發(fā)明制備的魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣，一個月后缺鈣病癥減少30~40%，本發(fā)明制備的魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣吸收率是傳統(tǒng)補鈣劑的3~4倍。

本發(fā)明的有益技術(shù)效果是：

（1）本發(fā)明制備的魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣溶解性好，吸收率高，補鈣效果顯著，是一種既補充膠原蛋白又補充鈣的綜合補充制劑；

（2）本發(fā)明制備的魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣將廢料變廢為寶，綠色環(huán)保。

具體實施方式

稱取600~800g新鮮扇貝殼，用去離子水洗滌扇貝殼3~5次，將洗凈后的新鮮扇貝殼浸泡在1~2L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%鹽酸中1~2h，隨后過濾，自然風(fēng)干后將其置于乳缽中，加入80~120mL去離子水，研磨20~30min，得糊狀物，再加入300~400mL去離子水，收集上部懸浮液，繼續(xù)研磨下沉粗粉20~30min，加入300~400mL去離子水，重復(fù)研磨和收集懸浮液3~5次，合并懸浮液，靜置2~3h后，過濾，將沉淀加入干燥箱中，在105~110℃下干燥至恒重，將干燥后的沉淀加入粉碎機中粉碎，過200目篩，得扇貝殼細(xì)粉；稱取50~100g上述扇貝殼細(xì)粉加入1~2L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%鹽酸中，在70~80℃下恒溫水浴下，以300~400r/min攪拌反應(yīng)1~2h，得鈣離子酸解液，隨后將酸解液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在50~55℃下蒸發(fā)至原酸解液體積的20~30%，冷卻至室溫，得鈣離子脫酸液；稱取30~50g黃魚鰾，從黃魚鰾一端剖開，除去黃魚鰾中血管和粘膜，并用去離子水洗滌黃魚鰾3~5次，將洗凈后的黃魚鰾瀝干后，從開口處灌入3~10mL上述鈣離子脫酸液，扎緊開口后置于蒸鍋中，在60~70℃下蒸煮1~2h，打開魚鰾并收集魚鰾內(nèi)混合液，再用去離子水洗滌魚鰾內(nèi)壁1~2次，合并洗滌液與混合液，得螯合反應(yīng)液；將上述螯合反應(yīng)液進行抽濾，濾液蒸發(fā)濃縮至原液體積的10~15%，得膏狀物，將膏狀物加入100~200mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%乙醇溶液中，以300~500r/min攪拌20~30min，靜置10~12h，隨后過濾，濾渣加入80~150mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%乙醇溶液中，以300~500r/min攪拌20~30min，靜置10~12h后離心分離，收集沉淀，將沉淀轉(zhuǎn)入干燥箱中，在110~120℃下干燥至恒重，得魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣。

實例1

稱取600g新鮮扇貝殼，用去離子水洗滌扇貝殼3次，將洗凈后的新鮮扇貝殼浸泡在1L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%鹽酸中1h，隨后過濾，自然風(fēng)干后將其置于乳缽中，加入80mL去離子水，研磨20min，得糊狀物，再加入300mL去離子水，收集上部懸浮液，繼續(xù)研磨下沉粗粉20min，加入300mL去離子水，重復(fù)研磨和收集懸浮液3次，合并懸浮液，靜置2h后，過濾，將沉淀加入干燥箱中，在105℃下干燥至恒重，將干燥后的沉淀加入粉碎機中粉碎，過200目篩，得扇貝殼細(xì)粉；稱取50g上述扇貝殼細(xì)粉加入1L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%鹽酸中，在70℃下恒溫水浴下，以300r/min攪拌反應(yīng)1h，得鈣離子酸解液，隨后將酸解液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在50℃下蒸發(fā)至原酸解液體積的20%，冷卻至室溫，得鈣離子脫酸液；稱取30g黃魚鰾，從黃魚鰾一端剖開，除去黃魚鰾中血管和粘膜，并用去離子水洗滌黃魚鰾3次，將洗凈后的黃魚鰾瀝干后，從開口處灌入3mL上述鈣離子脫酸液，扎緊開口后置于蒸鍋中，在60℃下蒸煮1h，打開魚鰾并收集魚鰾內(nèi)混合液，再用去離子水洗滌魚鰾內(nèi)壁1次，合并洗滌液與混合液，得螯合反應(yīng)液；將上述螯合反應(yīng)液進行抽濾，濾液蒸發(fā)濃縮至原液體積的10%，得膏狀物，將膏狀物加入100mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%乙醇溶液中，以300r/min攪拌20min，靜置10h，隨后過濾，濾渣加入80mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%乙醇溶液中，以300r/min攪拌20min，靜置10h后離心分離，收集沉淀，將沉淀轉(zhuǎn)入干燥箱中，在110℃下干燥至恒重，得魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣。

本發(fā)明的應(yīng)用方法是：每天服用0.1g本發(fā)明制備的魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣，一個月后缺鈣病癥減少30%，本發(fā)明制備的魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣吸收率是傳統(tǒng)補鈣劑的3倍。

實例2

稱取700g新鮮扇貝殼，用去離子水洗滌扇貝殼4次，將洗凈后的新鮮扇貝殼浸泡在1.5L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%鹽酸中1.5h，隨后過濾，自然風(fēng)干后將其置于乳缽中，加入100mL去離子水，研磨25min，得糊狀物，再加入350mL去離子水，收集上部懸浮液，繼續(xù)研磨下沉粗粉25min，加入350mL去離子水，重復(fù)研磨和收集懸浮液4次，合并懸浮液，靜置2.5h后，過濾，將沉淀加入干燥箱中，在108℃下干燥至恒重，將干燥后的沉淀加入粉碎機中粉碎，過200目篩，得扇貝殼細(xì)粉；稱取80g上述扇貝殼細(xì)粉加入1.5L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%鹽酸中，在75℃下恒溫水浴下，以350r/min攪拌反應(yīng)1.5h，得鈣離子酸解液，隨后將酸解液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在52℃下蒸發(fā)至原酸解液體積的25%，冷卻至室溫，得鈣離子脫酸液；稱取40g黃魚鰾，從黃魚鰾一端剖開，除去黃魚鰾中血管和粘膜，并用去離子水洗滌黃魚鰾4次，將洗凈后的黃魚鰾瀝干后，從開口處灌入5mL上述鈣離子脫酸液，扎緊開口后置于蒸鍋中，在65℃下蒸煮1~2h，打開魚鰾并收集魚鰾內(nèi)混合液，再用去離子水洗滌魚鰾內(nèi)壁1次，合并洗滌液與混合液，得螯合反應(yīng)液；將上述螯合反應(yīng)液進行抽濾，濾液蒸發(fā)濃縮至原液體積的12%，得膏狀物，將膏狀物加入150mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%乙醇溶液中，以400r/min攪拌25min，靜置11h，隨后過濾，濾渣加入120mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%乙醇溶液中，以400r/min攪拌25min，靜置11h后離心分離，收集沉淀，將沉淀轉(zhuǎn)入干燥箱中，在115℃下干燥至恒重，得魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣。

本發(fā)明的應(yīng)用方法是：每天服用0.15g本發(fā)明制備的魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣，一個月后缺鈣病癥減少35%，本發(fā)明制備的魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣吸收率是傳統(tǒng)補鈣劑的3.5倍。

實例3

稱取800g新鮮扇貝殼，用去離子水洗滌扇貝殼5次，將洗凈后的新鮮扇貝殼浸泡在2L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%鹽酸中2h，隨后過濾，自然風(fēng)干后將其置于乳缽中，加入120mL去離子水，研磨30min，得糊狀物，再加入400mL去離子水，收集上部懸浮液，繼續(xù)研磨下沉粗粉30min，加入400mL去離子水，重復(fù)研磨和收集懸浮液5次，合并懸浮液，靜置3h后，過濾，將沉淀加入干燥箱中，在110℃下干燥至恒重，將干燥后的沉淀加入粉碎機中粉碎，過200目篩，得扇貝殼細(xì)粉；稱取100g上述扇貝殼細(xì)粉加入2L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%鹽酸中，在80℃下恒溫水浴下，以400r/min攪拌反應(yīng)2h，得鈣離子酸解液，隨后將酸解液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在55℃下蒸發(fā)至原酸解液體積的30%，冷卻至室溫，得鈣離子脫酸液；稱取50g黃魚鰾，從黃魚鰾一端剖開，除去黃魚鰾中血管和粘膜，并用去離子水洗滌黃魚鰾5次，將洗凈后的黃魚鰾瀝干后，從開口處灌入10mL上述鈣離子脫酸液，扎緊開口后置于蒸鍋中，在70℃下蒸煮2h，打開魚鰾并收集魚鰾內(nèi)混合液，再用去離子水洗滌魚鰾內(nèi)壁2次，合并洗滌液與混合液，得螯合反應(yīng)液；將上述螯合反應(yīng)液進行抽濾，濾液蒸發(fā)濃縮至原液體積的15%，得膏狀物，將膏狀物加入200mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%乙醇溶液中，以500r/min攪拌30min，靜置12h，隨后過濾，濾渣加入150mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%乙醇溶液中，以500r/min攪拌30min，靜置12h后離心分離，收集沉淀，將沉淀轉(zhuǎn)入干燥箱中，在120℃下干燥至恒重，得魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣。

本發(fā)明的應(yīng)用方法是：每天服用0.2g本發(fā)明制備的魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣，一個月后缺鈣病癥減少40%，本發(fā)明制備的魚鰾膠原蛋白小肽螯合鈣吸收率是傳統(tǒng)補鈣劑的4倍。