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      一種元寶楓翅果活菌酵素原液的制備方法與流程

      文檔序號:11081915閱讀:700來源:國知局
      本發(fā)明屬于酵素領域,具體涉及一種元寶楓翅果活菌酵素原液的制備方法。
      背景技術
      :元寶楓為槭樹科槭樹屬落葉喬木,因翅果酷似古代元寶而得名,其為單葉、對生,紙質、常五裂,在我國分布較廣。研究發(fā)現元寶楓葉中含有糖、氨基酸、蛋白質、黃酮、有機酸、單寧、萜烯等各類化學物質。其中,黃酮類、蛋白質、單寧、神經酸的應用價值較高,具有預防冠心病、心絞痛、血液循環(huán)障礙性疾病以及抗病毒、消炎利膽、消除人體自由基等功效。元寶楓翅果種子含油率較高,可以達到45-48%,而且元寶楓油中富含神經酸。神經酸又名鯊魚酸,化學名順-15-二十四碳烯酸,因最早發(fā)現于哺乳動物的神經組織,故命名為神經酸,是生物膜的重要組成成分,參與生物膜有關的多種特殊生理功能。元寶楓油脂脂肪酸組成中含有約5-6%的神經酸,含神經酸的植物在自然界分布較少,國際市場上神經酸主要來自于深海魚類,而與深海魚類相比,元寶楓是可持續(xù)利用的神經酸資源,神經酸已經成為各國科學家一致公認的世界上唯一能夠修復受損神經的神奇物質。依據目前的科研研究,神經酸具有以下三大功效:其一,神經酸是大腦神經纖維和神經細胞的核心天然成分:神經酸是大腦發(fā)育、維持功能的必須營養(yǎng)物質,對促進大腦發(fā)育、改善記憶力、提高腦神經活躍度,防止腦神經的衰老;其二,神經酸能完整透過血腦屏障,直接作用于神經纖維,讓受損、脫落的神經纖維保護鞘再生,修復受損的神經纖維,并溶解神經纖維中堵塞的壞死組織,提高傳導速度和保證信息傳導的完整性,恢復各種神經信息傳到的通道暢通;其三,促使修復后的神經再生,重新產生新的分支和側芽,并大量增殖分化,數量不斷增多,恢復病人在語言、記憶、感覺和肢體等方面的部分或全部功能。所以用元寶楓翅果制成的酵素原液具有很高的保健價值。酵素現在的定義由中國生物發(fā)酵協會酵素分會把經微生物發(fā)酵得到的具有初始生物活性的一類產品統稱為酵素。但由于許多制作者多關注加入不同水果,不注意發(fā)酵微生物和一些常見的功能性材料的使用,而且制成的產品的益生菌的活菌數亦不夠,酵素產品的開發(fā)和應用受到其副作用和功能性不強的影響。技術實現要素:為了克服現有技術的不足,本發(fā)明的目的在于提供一種元寶楓翅果活菌酵素原液的制備方法,解決了現有酵素生產過程中不能保證無病原菌的污染,發(fā)酵時間過長,以及無法最大限度地保留活性物質等問題。為達到上述目的,本發(fā)明是通過以下的技術方案來實現的。一種元寶楓翅果活菌酵素原液的制備方法,包括以下步驟:1)挑選材料:選擇成熟的、飽滿的元寶楓翅果作為發(fā)酵的主要原料;2)材料的處理:將撿練的元寶楓翅果先用純凈水洗兩遍,最后再用1-3%(w/w)NaCl溶液沖洗一遍,起低溫殺菌作用,翅果瀝干,裝入已經滅菌的發(fā)酵容器中,再加入蜂蜜和純凈水,其中各組分按重量比為元寶楓翅果:蜂蜜:純凈水=20~50:1~3:20~70,即得元寶楓翅果發(fā)酵原液待用;3)菌種培養(yǎng):將菌種活化擴培并制備成發(fā)酵菌液:菌種采用的是商業(yè)生產用食品目錄中可添加的食用益生菌菌種乳酸菌一類,即植物乳桿菌,嗜酸乳桿菌,干酪乳桿菌,鼠李糖乳桿菌:(1)分別取上述四種甘油管保存的菌種一環(huán)在平板上劃線,在培養(yǎng)箱中30℃培養(yǎng)24小時;(2)分別取MRS固體培養(yǎng)基平板上的純菌落一環(huán)接入裝有300ml種子培養(yǎng)液的500ml規(guī)格的三角瓶中,置于搖床,培養(yǎng)條件:轉速80rpm,溫度30℃,恒溫培養(yǎng)24小時,然后將植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌的菌液按體積比3-4:3-4:1-2:1-2的比例混合,即為發(fā)酵菌液備用;(3)上述種子培養(yǎng)液制備:蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母膏5.0g,檸檬酸氫二銨[(NH4)2HC6H5O7]2.0g,葡萄糖(C6H12O6·H2O)20.0g,吐溫801.0mL乙酸鈉(CH3COONa·3H2O)5.0g磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O)2.0g硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.58g硫酸錳(MnSO4·H2O)0.25g,加蒸餾水定容至1000mL,調節(jié)pH至6.2-6.4;(4)接種發(fā)酵:按發(fā)酵原液體積的1~5%將發(fā)酵菌液加入到發(fā)酵體系中,發(fā)酵溫度為25~35℃,發(fā)酵時間8~16d。(5)發(fā)酵液處理:發(fā)酵完成后的發(fā)酵液經粗過濾,過濾篩目數為20~32目;再細過濾,過濾篩目數為80~100目,濾液即為元寶楓翅果活菌酵素原液。有益效果:與現有技術相比,本發(fā)明的優(yōu)點在于:1)利用鹽溶液消毒殺菌、嚴格控制發(fā)酵溫度,接入益生菌種,有效的降低了酵素營養(yǎng)成分的損失,最大限度保留了酵素活性;2)接入了益生菌乳酸菌一類,優(yōu)勢菌株抑制了其他雜菌滋生,保證了產品的質量穩(wěn)定;3)發(fā)酵的總時間為8-16d,時間短避免不飽和脂肪酸的過多氧化,有利于保留元寶楓翅果本身含有的活性物質,以及本身的風味物質。具體實施方式下面結合實例對本發(fā)明作進一步的詳細說明。實施例1一種元寶楓翅果活菌酵素原液的制備方法,包括以下步驟:1)挑選材料:選擇成熟的、飽滿的元寶楓翅果作為發(fā)酵的主要原料;2)材料的處理:將撿練的元寶楓翅果稱量20份,先用純凈水洗兩遍,最后再用1%(w/w)NaCl溶液沖洗一遍,鹽溶液消毒殺菌,翅果瀝干,裝入已經滅菌的發(fā)酵容器中,再加入1份的蜂蜜和70份的純凈水,即得元寶楓翅果發(fā)酵原液待用;3)菌種培養(yǎng):將植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌分別活化擴培并制備成發(fā)酵菌液:(1)取甘油管保存菌種一環(huán)在平板上劃線,在培養(yǎng)箱中30℃培養(yǎng)24小時;(2)取MRS固體培養(yǎng)基平板菌落一環(huán)接入裝有300ml種子培養(yǎng)液的500ml規(guī)格的三角瓶中,置于搖床,培養(yǎng)條件:轉速80rpm,溫度30℃,恒溫培養(yǎng)24小時,然后將植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌的菌液按體積比3:3:2:2的比例混合,即為發(fā)酵菌液備用;(3)上述種子培養(yǎng)液制備:蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母膏5.0g,檸檬酸氫二銨[(NH4)2HC6H5O7]2.0g,葡萄糖(C6H12O6·H2O)20.0g,吐溫801.0mL乙酸鈉(CH3COONa·3H2O)5.0g磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O)2.0g硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.58g硫酸錳(MnSO4·H2O)0.25g,加蒸餾水定容至1000mL,調節(jié)pH至6.2-6.4;4)接種發(fā)酵:按發(fā)酵原液體積的2%比例將發(fā)酵菌液混合(其中植物乳桿菌:嗜酸乳桿菌:干酪乳桿菌:鼠李糖乳桿菌的比例(v/v)為3份:3份:2份:2份)加入到發(fā)酵體系中,發(fā)酵溫度為25℃,發(fā)酵時間16d;5)發(fā)酵液處理:發(fā)酵完成后的發(fā)酵液經粗過濾,過濾篩目數為20~32目;再細過濾,過濾篩目數為80~100目,濾液即為元寶楓翅果活菌酵素原液,pH值3.5,乳酸菌總菌數達3.6×108cfu/ml。實施例2一種元寶楓翅果活菌酵素原液的制備方法,包括以下步驟:1)挑選材料:選擇成熟的、飽滿的元寶楓翅果作為發(fā)酵的主要原料;2)材料的處理:將撿練的元寶楓翅果稱量50份,先用純凈水洗兩遍,最后再用2%(w/w)NaCl溶液沖洗一遍,鹽溶液消毒殺菌,翅果瀝干,裝入已經滅菌的發(fā)酵容器中,再加入2份的蜂蜜和60份的純凈水,即得元寶楓翅果發(fā)酵原液待用;3)菌種培養(yǎng):將植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌分別活化擴培并制備成發(fā)酵菌液:(1)取甘油管保存菌種一環(huán)在平板上劃線,在培養(yǎng)箱中30℃培養(yǎng)24小時;(2)取MRS固體培養(yǎng)基平板菌落一環(huán)接入裝有300ml種子培養(yǎng)液的500ml規(guī)格的三角瓶中,置于搖床,培養(yǎng)條件:轉速80rpm,溫度30℃,恒溫培養(yǎng)24小時,然后將植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌的菌液按體積比3:4:1:2的比例混合,即為發(fā)酵種子菌液備用;(3)種子培養(yǎng)液制備:蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母膏5.0g,檸檬酸氫二銨[(NH4)2HC6H5O7]2.0g,葡萄糖(C6H12O6·H2O)20.0g,吐溫801.0mL乙酸鈉(CH3COONa·3H2O)5.0g磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O)2.0g硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.58g硫酸錳(MnSO4·H2O)0.25g,加蒸餾水定容至1000mL,調節(jié)pH至6.2-6.4;4)接種發(fā)酵:按發(fā)酵原液體積的5%比例將發(fā)酵菌液混合(其中植物乳桿菌:嗜酸乳桿菌:干酪乳桿菌:鼠李糖乳桿菌的比例(v/v)為3份:4份:1份:2份)加入到發(fā)酵體系中,發(fā)酵溫度為30℃,發(fā)酵時間12d;5)發(fā)酵液處理:發(fā)酵完成后的發(fā)酵液經粗過濾,過濾篩目數為20~32目;再細過濾,過濾篩目數為80~100目,濾液即得到元寶楓翅果活菌酵素原液,pH值3.2,乳酸菌總菌數達7.2×108cfu/ml。實施例3一種元寶楓翅果活菌酵素原液的制備方法,包括以下步驟:1)挑選材料:選擇成熟的、飽滿的元寶楓翅果作為發(fā)酵的主要原料;2)材料的處理:將撿練的元寶楓翅果稱量40份,先用純凈水洗兩遍,最后再用3%(w/w)NaCl溶液沖洗一遍,鹽溶液消毒殺菌,翅果瀝干,裝入已經滅菌的發(fā)酵容器中,再加入3份的蜂蜜和20份的純凈水,即得元寶楓翅果發(fā)酵原液待用;3)菌種培養(yǎng):將植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌分別擴培并制備成發(fā)酵菌液:(1)取甘油管保存菌種一環(huán)在平板上劃線,在培養(yǎng)箱中30℃培養(yǎng)24小時;(2)取MRS固體培養(yǎng)基平板菌落一環(huán)接入裝有300ml種子培養(yǎng)液的500ml規(guī)格的三角瓶中,置于搖床,培養(yǎng)條件:轉速80rpm,溫度30℃,恒溫培養(yǎng)24小時,然后將植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌的菌液按體積比4:3:2:1的比例混合,即為發(fā)酵種子菌液備用;(3)種子培養(yǎng)液制備:蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母膏5.0g,檸檬酸氫二銨[(NH4)2HC6H5O7]2.0g,葡萄糖(C6H12O6·H2O)20.0g,吐溫801.0mL乙酸鈉(CH3COONa·3H2O)5.0g磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O)2.0g硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.58g硫酸錳(MnSO4·H2O)0.25g,加蒸餾水定容至1000mL,調節(jié)pH至6.2-6.4;4)接種發(fā)酵:按發(fā)酵原液體積的4%比例將發(fā)酵菌液混合(其中植物乳桿菌:嗜酸乳桿菌:干酪乳桿菌:鼠李糖乳桿菌的比例(v/v)為4份:3份:2份:1份)加入到發(fā)酵體系中,發(fā)酵溫度為35℃,發(fā)酵時間10d;5)發(fā)酵液處理:發(fā)酵完成后的發(fā)酵液經粗過濾,過濾篩目數為20~32目;再細過濾,過濾篩目數為80~100目,濾液即為元寶楓翅果活菌酵素原液,pH值3.4,乳酸菌總菌數達5.6×108cfu/ml。實施例4一種元寶楓翅果活菌酵素原液的制備方法,包括以下步驟:1)挑選材料:選擇成熟的、飽滿的元寶楓翅果作為發(fā)酵的主要原料;2)材料的處理:將撿練的元寶楓翅果稱量30份,先用純凈水洗兩遍,最后再用3%(w/w)NaCl溶液沖洗一遍,鹽溶液消毒殺菌,翅果瀝干,裝入已經滅菌的發(fā)酵容器中,再加入3份的蜂蜜和40份的純凈水,即得元寶楓翅果發(fā)酵原液待用;3)菌種培養(yǎng):將植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌分別擴培并制備成發(fā)酵菌液:(1)取甘油管保存菌種一環(huán)在平板上劃線,在培養(yǎng)箱中30℃培養(yǎng)24小時;(2)取MRS固體培養(yǎng)基平板菌落一環(huán)接入裝有300ml種子培養(yǎng)液的500ml規(guī)格的三角瓶中,置于搖床,培養(yǎng)條件:轉速80rpm,溫度30℃,恒溫培養(yǎng)24小時,然后將植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌的菌液按體積比3:4:2:1的比例混合,即為發(fā)酵種子菌液備用;(3)種子培養(yǎng)液制備:蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母膏5.0g,檸檬酸氫二銨[(NH4)2HC6H5O7]2.0g,葡萄糖(C6H12O6·H2O)20.0g,吐溫801.0mL乙酸鈉(CH3COONa·3H2O)5.0g磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O)2.0g硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.58g硫酸錳(MnSO4·H2O)0.25g,加蒸餾水定容至1000mL,調節(jié)pH至6.2-6.4;4)接種發(fā)酵:按發(fā)酵原液體積的1%比例將發(fā)酵菌液混合(其中植物乳桿菌:嗜酸乳桿菌:干酪乳桿菌:鼠李糖乳桿菌的比例(v/v)為3份:4份:2份:1份)加入到發(fā)酵體系中,發(fā)酵溫度為35℃,發(fā)酵時間8d;5)發(fā)酵液處理:發(fā)酵完成后的發(fā)酵液經粗過濾,過濾篩目數為20~32目;再細過濾,過濾篩目數為80~100目,濾液即為元寶楓翅果活菌酵素原液,pH值3.5,乳酸菌總菌數達2.6×108cfu/ml。為了體現本發(fā)明方法的有效性,另做一組按傳統方法不加菌種自然發(fā)酵的對比試驗,具體步驟如下:1)挑選材料:選擇成熟的、飽滿的元寶楓翅果作為發(fā)酵的主要原料:2)材料的處理:將撿練的元寶楓翅果稱量30份,先用純凈水洗兩遍,最后再用3%(w/w)NaCl溶液沖洗一遍,鹽溶液消毒殺菌,翅果瀝干,裝入已經滅菌的發(fā)酵容器中,再加入3份的蜂蜜和40份的純凈水,即得元寶楓翅果發(fā)酵體系發(fā)酵;5)發(fā)酵液處理:發(fā)酵完成后的發(fā)酵液經粗過濾,過濾篩目數為20~32目;再細過濾,過濾篩目數為80~100目,即得自然發(fā)酵濾液。下表是將本發(fā)明實施例與對比例的檢測結果:項目實施例1實施例2實施例3實施例4對比pH3.53.23.43.55.5乳酸菌總菌數(cfu/ml)3.6×1087.2×1085.6×1082.6×1081.2×103神經酸含量(%)0.0050.0090.0080.0050.001本發(fā)明按照上述實施例進行了說明,應當理解,上述實施例不以任何形式限定本發(fā)明,凡采用等同替換或等效變換方式所獲得的技術方案,均落在本發(fā)明的保護范圍之內。當前第1頁1 2 3 
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