:2的比例混合后，然后補(bǔ)加水至固液質(zhì)量比為1:15的比例，在溫度為75°C條件下進(jìn)行攪拌保溫螯合2h ;對(duì)螯合反應(yīng)后的粗品抽濾，濾液減壓濃縮至膏狀，加入95%的無水乙醇攪拌30min，靜置，過濾收集沉淀，獲得多肽螯合鈣。最后將所得多肽螯合鈣真空冷凍干燥即得成品多肽螯合鈣。
[0018](6)鑒定產(chǎn)物
將成品多肽螯合鈣用二硫腙試劑和雙縮脲試劑分別鑒定是否存在未螯合的游離的鈣離子和多肽。二硫腙能與游離的金屬離子形成了紅色絡(luò)合物，無色溶液呈紅色，有色溶液則呈原色與紅色的混合色。若溶液中沒有金屬離子，則加入二硫腙指示劑后顯示指示劑的顏色，不變色。在含多肽的溶液中加入5滴至8滴雙縮脲試劑，加熱至沸騰，則溶液變?yōu)樗{(lán)紫色。若溶液中沒有多肽，則溶液顏色不變。
[0019]將本發(fā)明所得的多肽螯合鈣產(chǎn)品加蒸餾水溶解；然后再加過量硫化鈉，靜置，出現(xiàn)大量白色沉淀，說明樣品中有鈣離子；過濾沉淀取濾液加入茚三酮試劑，在電爐上加熱沸騰，出現(xiàn)藍(lán)紫色，說明樣品中有多肽。由此可以證明本發(fā)明所得產(chǎn)物是多肽螯合鈣。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種多肽螯合鈣，其特征在于:該螯合鈣是以禽蛋加工下腳料蛋殼和蛋膜為原料，經(jīng)殼膜分離、蛋殼超微粉碎、蛋膜兩步水解、水解液經(jīng)離心、超濾得到分子量< 5000Da的多肽、納濾脫鹽，然后超微蛋殼粉與多肽螯合，最后用90 - 95%的乙醇沉淀多肽螯合鈣再進(jìn)行冷凍干燥制得。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽螯合鈣，其特征在于:所述的殼膜分離方法為:將來自禽蛋加工下腳料的蛋殼料用水?dāng)嚢枨逑矗コ砻骐s質(zhì)和殘留蛋液，然后瀝干水分，置于烘箱中干燥一定時(shí)間后再用粉碎機(jī)進(jìn)行粗粉碎，得到殼膜混合料；再將殼膜混合料于清水中攪拌使蛋殼和蛋膜在攪拌的作用下浮選分離，蛋膜漂浮在水的上層，蛋殼沉在下層，由此分選出蛋殼和蛋膜；將分選出蛋殼和蛋膜烘干后得干燥的蛋殼和蛋膜備用。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽螯合鈣，其特征在于:所述的蛋殼超微粉碎為:將蛋殼粉碎至粒徑< 75 μ m，得蛋殼超微粉。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽螯合鈣，其特征在于:所述的蛋膜兩步水解方法為:將烘干后的蛋膜用粉碎機(jī)粗粉碎，然后加入蒸餾水得混合液；混合液調(diào)節(jié)pH至6.5后加入木瓜蛋白酶，酶解得到酶解液，然后向酶解液中加入NaOH攪拌水解最后得膜水解液。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽螯合鈣，其特征在于:所述的水解液經(jīng)離心、超濾得到分子量< 5000Da的多肽以及納濾脫鹽的方法為:將膜水解液在室溫條件下離心分離，取上清液；用稀鹽酸調(diào)節(jié)上清液PH至7，然后采用截留分子量為5000Da的超濾膜進(jìn)行超濾，得到分子量< 5000Da的蛋膜多肽液，最后再對(duì)蛋膜多肽液進(jìn)行納濾，脫除其中的鈉離子，得納濾蛋膜多肽液。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽螯合鈣，其特征在于:所述的超微蛋殼粉與多肽液螯合方法為: 將蛋殼超微粉和納濾蛋膜多肽按照質(zhì)量比為1:1~1:3的比例混合后，然后補(bǔ)加水至固液質(zhì)量比為1:15的比例，攪拌保溫螯合；對(duì)螯合反應(yīng)后的粗品抽濾，濾液減壓濃縮至膏狀，加入95%的無水乙醇攪拌，靜置，過濾收集沉淀，獲得多肽螯合鈣，最后將所得多肽螯合鈣冷凍干燥后即得成品多肽螯合鈣。7.一種多肽螯合鈣的制備方法，其特征在于:該螯合鈣的制備方法包括以下步驟: (1)殼膜分離 將來自禽蛋加工下腳料的蛋殼料用水?dāng)嚢枨逑矗コ砻骐s質(zhì)和殘留蛋液，然后瀝干水分，置于70°C烘箱中40min干燥，再用粉碎機(jī)進(jìn)行粗粉碎，粒度< 5_，得到殼膜混合料；再將殼膜混合料于清水中攪拌30min使蛋殼和蛋膜在攪拌的作用下浮選分離，蛋膜漂浮在水的上層，蛋殼沉在下層，由此分選出蛋殼和蛋膜；由此分選出蛋殼和蛋膜；并將分選出蛋殼和蛋膜置于70°C烘箱中2h得到干燥的蛋殼和蛋膜備用； (2)蛋殼超微粉碎 將蛋殼超微粉碎至粒徑< 75 μ m，得蛋殼超微粉； (3)蛋膜水解 將蛋膜用粉碎機(jī)粗粉碎，粒度彡2_，然后按照固液比為1:5 (w:w)加入蒸餾水得混合液；調(diào)節(jié)混合液至pH為6.5后加入木瓜蛋白酶，使木瓜蛋白酶的濃度為10000U/g，45°C攪拌酶解4h得到酶解液，然后向酶解液中加入NaOH直至NaOH在酶解液中的質(zhì)量濃度為4%(w:w)，75°C攪拌水解6h最后得膜水解液； (4)離心、超濾、納濾脫鹽 將蛋膜水解液在室溫條件下以3000r/min的轉(zhuǎn)速離心分離20min，取上清液；用稀鹽酸調(diào)節(jié)上清液PH至7，然后采用截留分子量為5000Da的超濾膜進(jìn)行超濾，得到分子量(5000Da的蛋膜多肽液，最后再對(duì)蛋膜多肽液進(jìn)行納濾，脫除其中的鈉離子，得納濾蛋膜多肽液； (5)螯合 將蛋殼超微粉和納濾蛋膜多肽按照質(zhì)量比為1:1~1:3的比例混合后，然后補(bǔ)加水至固液質(zhì)量比為1:15的比例，在溫度為75°C條件下進(jìn)行攪拌保溫螯合2h ;對(duì)螯合反應(yīng)后的粗品抽濾，濾液減壓濃縮至膏狀，加入95%的無水乙醇攪拌30min，靜置過夜，過濾收集沉淀，獲得多肽螯合鈣； 最后將所得多肽螯合鈣真空冷凍干燥即得成品多肽螯合鈣。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種禽蛋殼膜多肽螯合鈣及其制備方法，該方法是以禽蛋加工下腳料蛋殼為原料，原料經(jīng)預(yù)處理、殼膜機(jī)械法分離、蛋殼超微粉碎以及蛋膜兩步水解為多肽、蛋膜水解液經(jīng)離心、超濾得到分子量≤5000Da的多肽、納濾脫鹽、超微蛋殼粉和多肽按照質(zhì)量比為1:1~1:3混合，控制一定的溫度和時(shí)間進(jìn)行螯合，最后用90%~95%的乙醇純化、冷凍干燥制得多肽螯合鈣。本發(fā)明同時(shí)用禽蛋加工下腳料蛋殼和蛋膜兩種天然物質(zhì)為原料，所得的多肽螯合鈣安全、天然，并且實(shí)現(xiàn)了對(duì)禽蛋加工下腳料蛋殼和蛋膜的資源化利用，減少資源浪費(fèi)。
【IPC分類】A23J1/08
【公開號(hào)】CN104920782
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510298229
【發(fā)明人】冉旭, 李靜, 徐陽, 孫強(qiáng), 曾里
【申請(qǐng)人】四川大學(xué)
【公開日】2015年9月23日
【申請(qǐng)日】2015年6月3日