復(fù)合物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物活性物質(zhì)或功能因子納米生物制品，以及功能性食品的生產(chǎn)工藝技術(shù)領(lǐng)域，具體是指一種利用蛋白質(zhì)納米包埋性質(zhì)制備水溶性輔酶QlO(C0Qw)的生產(chǎn)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]輔酶QlO (CoQ10)，化學(xué)名稱為2，3- 二甲基-5-甲基-6-癸異戊烯基苯醌，是一種脂溶性的苯醌類化合物，其結(jié)構(gòu)類似于維生素K。許多研究表明，CoQ1。具有抗氧化、抗衰老、提高免疫力、改善記憶等作用，可用于預(yù)防和治療心血管疾病和神經(jīng)退化疾病。還有研究表明，CoQ1。與心率失常、高血壓、AIDS、哮喘及其他呼吸道疾病、帕金森和亨廷頓氏舞蹈綜合癥、肺病、過敏等疾病密切相關(guān)。正常情況下，人體內(nèi)酪氨酸通過結(jié)合維生素B2、B6、B12等八種維生素和幾種微量元素經(jīng)過多級(jí)反應(yīng)，可自身合成CoQ1(]，但是這種生物合成能力會(huì)隨著年齡的增長和身體健康狀態(tài)下降而下降，膳食補(bǔ)充CoQ1。對(duì)這類特殊人群是十分必要的。然而CoQ1。的分子高疏水性阻礙了人體對(duì)其的吸收，導(dǎo)致口服CoQ1。的生物利用率極低，因此如何提高CoQ1。的水溶解性和生物效價(jià)是膳食補(bǔ)充CoQ:。首先要解決的問題。
[0003]目前應(yīng)用于克服CoQ1。疏水性的方法有固體分散、脂質(zhì)體包埋、乳液、PMMA納米顆粒、環(huán)糊精包埋、牛血清白蛋白水解肽復(fù)合物等，但是這些方法制備的CoQ1。仍然難以達(dá)到較高的水相分散性和生物效價(jià)，甚至所用的原料為非天然物質(zhì)，具有一定的安全隱患，不適用于食品體系中。因此研究一種簡易、安全、有效的提高CoQ1。水溶解性和穩(wěn)定性的方法亟待解決。
[0004]研究表明，許多食物源蛋白質(zhì)可與疏水性生物活性物質(zhì)相互作用形成納米復(fù)合物，從而提高這些活性物質(zhì)在水相中的溶解性和穩(wěn)定性，例如大豆蛋白/姜黃素納米復(fù)合物、β -乳球蛋白/姜黃素納米復(fù)合物、酪蛋白/ 二十二碳六烯酸(DHA)納米顆粒等。然而利用蛋白質(zhì)納米包埋性質(zhì)制備水溶性CoQ1。的研究還未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提出一種利用蛋白質(zhì)納米包埋性質(zhì)制備蛋白質(zhì)-CoQ1。復(fù)合物及其制備方法，旨在利用蛋白質(zhì)的納米包埋性質(zhì)及蛋白質(zhì)與CoQ1。的相互作用，快速、有效的形成納米復(fù)合物，進(jìn)而達(dá)到解決CoQ1。在食品及相關(guān)領(lǐng)域中應(yīng)用的溶解性差、易光降解和生物利用率低的難題。
[0006]—種蛋白質(zhì)-CoQ1。復(fù)合物的制備方法，包括如下步驟:
[0007]第一步按照固液比0.1?1.0:10千克/升將蛋白質(zhì)分散并溶解于去離子水中，攪拌2?4小時(shí)后，于4?8°C充分水化，調(diào)節(jié)pH至中性，最后離心去除不溶物，得蛋白分散液；
[0008]第二步將CoQ1。按照固液比I?20:1克/升分散于無水乙醇中，在30?40°C加熱、攪拌條件下充分溶解；
[0009]第三步于常溫?cái)嚢璧臈l件下，按體積分?jǐn)?shù)比為5?100:100將CoQ1。乙醇溶液逐滴加入第一步制得的蛋白分散液中，之后繼續(xù)攪拌3?6小時(shí)，離心，收集上清液；
[0010]第四步將上清液真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醇，收集濃縮液并用去離子水稀釋至濃縮前體積，最后干燥，即得到蛋白質(zhì)-CoQ1。復(fù)合物。
[0011]所述蛋白質(zhì)為酪蛋白酸鈉、大豆分離蛋白和乳清濃縮蛋白中的一種或兩種以上的混合物。
[0012]所述第一步的固液比為0.1?0.3:10千克/升。
[0013]所述第二步CoQ1。的質(zhì)量濃度為10?20克/升。
[0014]所述第三步的體積分?jǐn)?shù)比為25?67:100。
[0015]所述第四步的真空條件為40?45°C、0.08?0.1MPa0
[0016]所述第一步水化的時(shí)間為6?12小時(shí)。
[0017]該方法的關(guān)鍵是使CoQ1。高效分散并結(jié)合于酪蛋白、大豆蛋白、乳清蛋白等蛋白質(zhì)，進(jìn)而形成具有納米尺度大小的蛋白復(fù)合物。該方法除了采用無水乙醇溶解CoQ1。之外，不涉及任何非食品級(jí)化學(xué)添加劑，而在實(shí)際工業(yè)中可采用食用酒精代替無水乙醇，因此本方法具有安全可靠的優(yōu)點(diǎn)。制備得到的高荷載CoQ1。的蛋白質(zhì)制品，不僅可以作為功能因子應(yīng)用于保健食品或藥品的研發(fā)，還可以作為基料應(yīng)用于例如酸奶、蛋白飲料等食品加工中。
[0018]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下的優(yōu)點(diǎn)和有益效果:
[0019](I)本發(fā)明采用蛋白質(zhì)納米載體技術(shù)制備水溶性CoQ1。，酪蛋白酸鈉、大豆分離蛋白和乳清濃縮蛋白等都是食品體系中廣泛應(yīng)用的蛋白質(zhì)，均具有營養(yǎng)價(jià)值高、功能性質(zhì)好、安全無毒的優(yōu)點(diǎn)，因此制備的蛋白質(zhì)-CoQ1。復(fù)合物是安全的。
[0020](2)本發(fā)明利用蛋白質(zhì)的納米包埋性質(zhì)和乙醇水溶液的適度變性作用促進(jìn)蛋白質(zhì)與CoQ1。的結(jié)合，形成酪蛋白酸鈉、大豆分離蛋白或乳清濃縮蛋白-CoQ:。復(fù)合物，可以極大的提高CoQ1。的溶解性和穩(wěn)定性。
[0021](3)本發(fā)明涉及的生產(chǎn)工藝簡單、安全，是一種綠色的生產(chǎn)技術(shù)。
[0022](4)本發(fā)明生產(chǎn)的蛋白質(zhì)-CoQ1。復(fù)合物可作用功能因子用于功能食品或藥品的生產(chǎn)中。
【附圖說明】
[0023]圖1為酪蛋白酸鈉-CoQ1。復(fù)合物中顆粒的粒徑分布圖。
[0024]圖2為酪蛋白酸鈉-CoQ1。復(fù)合物中顆粒的原子力顯微鏡圖。
[0025]圖3為大豆分離蛋白-CoQ1。復(fù)合物中顆粒的粒徑分布圖。
[0026]圖4大豆分離蛋白-CoQ1。復(fù)合物中顆粒的原子力顯微鏡圖。
[0027]圖5為乳清濃縮蛋白-CoQ1。復(fù)合物中顆粒的粒徑分布圖。
[0028]圖6為乳清濃縮蛋白-CoQ1。復(fù)合物中顆粒的原子力顯微鏡圖。
【具體實(shí)施方式】
[0029]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步具體詳細(xì)描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此，對(duì)于未特別注明的工藝參數(shù)，可參照常規(guī)技術(shù)進(jìn)行。
[0030]實(shí)施例1
[0031]第一步按照千克:升(固液比)0.2:10將酪蛋白酸鈉分散并溶解于去離子水中，攪拌2小時(shí)后，放置于4°C冰箱中充分水化12小時(shí)，調(diào)節(jié)pH至中性，離心去除不溶物，得到酪蛋白酸鈉溶液。
[0032]第二步將CoQ1。按照克:升(固液比)20:1分散于無水乙醇中，在40°C加熱、磁力攪拌條件下充分溶解。
[0033]第三步于常溫在機(jī)械攪拌或磁力攪拌的條件下，按體積分?jǐn)?shù)比為25:100將CoQ10乙醇溶液逐滴加入酪蛋白酸鈉溶液中，之后繼續(xù)攪拌4小時(shí)，離心去除一些不溶物，去除沉淀和上浮物，收集上清液。
[0034]第四步將上清液收集于蒸餾瓶中，在40°C、0.0SMPa真空度條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醇，收集濃縮液并用去離子水稀釋至濃縮前體積，最后凍干，即可