l)，有很好的耐膽鹽能力。
[0066] 表2耐膽鹽能力檢測[(土s) X 107cfu/ml]
[0068] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763菌株的耐酸試驗(yàn)
[0069] 取HLX37母液按Iml接種菌種于不同pH值(pH梯度為1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0)的 IOmLMRS液體培養(yǎng)基，置于37 °C下分別培養(yǎng)0、2、4h，每一處理3個重復(fù)。各取Iml樣品菌液于 9ml生理鹽水中混勻，制備稀釋溶液，取0 . Iml稀釋液于MRS中涂布，于37 °C生化培養(yǎng)箱中倒 置培養(yǎng)48小時(每個稀釋度做3個平行)記錄平板上的菌落個數(shù)。結(jié)果見表3。說明該菌具有 很強(qiáng)的耐酸能力。
[0070] 表3耐酸能力檢測[(土s) X 107cfu/ml]
[0072] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763的黏附能力測定
[0073] 培養(yǎng)CGMCC NO. 11763(MRS液體培養(yǎng)基）、大腸桿菌DH5a(LB液體培養(yǎng)基)24h得發(fā)酵 液，分別置于3000r/min、4°C下離心10min，收集菌泥，分別用pH = 7.0的無菌磷酸鹽緩沖液 (PBS)洗滌菌泥2次（即在菌落中加入PBS，震蕩混合均勻后，置于3000r/min、4°C下離心 IOmin，收集菌體）。自凝集率（％ :用無菌的I3BS將菌泥CGMCC NO. 11763制成在波長600nm處 的吸光值為0.4 ±0.1 (A 0)的懸浮菌液及菌懸液，靜置24h后測定吸光值A(chǔ) 24,自凝集率 (%)公式為(A 0-A 24)/A 0。；他凝集率（％):將CGMCC如.11763和大腸桿菌0耶€[的懸菌 液調(diào)節(jié)成在波長600nm處的吸光值為0.6±0.1(A 0)的混合懸浮菌液。靜置24H后測定吸光 值A(chǔ) 24,他凝集率（％ )公式為(A 0 -A 24)/A 0。測定結(jié)果見表5,可知CGMCC NO. 11763的自 凝集率為95.71 %，有很強(qiáng)的黏附能力。
[0074]表4黏附能力表
[0076] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763的菌株生理特性
[0077] 所述植物乳桿菌(LactobaciIlus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中國微 生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，保藏號為CGMCC NO. 11763,保藏地 址為：中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編：100101。 [0078]該菌株特點(diǎn)如下:在顯微鏡下觀察，該菌株為短桿狀，革蘭氏染色呈陽性，無鞭毛， 不產(chǎn)芽孢;在固體培養(yǎng)基上，該菌菌落為白色，表面光滑，致密，形態(tài)為圓形，邊緣較整齊。
[0079] 理化特征為:過氧化氫酶(-)，明膠液化(-)，吲哚實(shí)驗(yàn)( + )，運(yùn)動性(-)，發(fā)酵產(chǎn)氣 (_)，亞硝酸鹽還原(_)，發(fā)酵產(chǎn)氣(_)，產(chǎn)硫化氫氣體(_)，pH4.0MRS培養(yǎng)基中生長(+ )。經(jīng)過 生理生化鑒定為為植物乳桿菌（Lactobaci Ilus plantarum)，命名為植物乳桿菌 (Lactobacillus plantarum)XH〇
[0080] 菌株能夠在57°c下生長良好，葡萄糖耐受能力為275g/L。
[0081] 本發(fā)明植物乳桿菌由采集人李建樹，從新疆維吾爾族老鄉(xiāng)家中酸奶中分離得到， 采集時間2015年6月2日。
[0082]本發(fā)明植物乳桿菌CGMCC NO. 11763經(jīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)能夠在pH為1.50的條件下存活，在 1 %膽鹽培養(yǎng)4小時后仍處于存活狀態(tài);植物乳桿菌CGMCC NO. 11763降解亞硝酸鹽速度快， 分解能力達(dá)到10.9mg/h/kg，該菌種在生產(chǎn)泡菜時，整個發(fā)酵過程中亞硝酸鹽濃度在4.8mg/ kg以下；CGMCCN0.11763在發(fā)酵60h小時后，對膽固醇降解率可達(dá)到64.76 % XGMCC NO. 11763黏附能力測定的自凝集率為95.71 %，菌株能夠在57°C下生長良好，葡萄糖耐受能 力為 275g/L。
[0083] 有益效果：
[0084] 本發(fā)明以蜂花粉為主要原料，將酶活力高、酶系豐富的天然植物源酶和含有蜂花 粉形成過程最原始、酶系最全的蜂王幼蟲和雄蜂蛹唾液和腸道酶系的蛹蟲腸道提取物科學(xué) 復(fù)配、并采用微波高溫瞬時膨化技術(shù)和益生菌發(fā)酵技術(shù)，將特種生物酶解、微波高溫瞬時低 溫膨化和益生菌發(fā)酵對蜂花粉進(jìn)行快速、有效和深度破壁，制得破壁蜂花粉，然后與一種或 多種功能性輔料科學(xué)復(fù)配，制得一種最大限度地保持蜂花粉天然風(fēng)味和營養(yǎng)成分，破壁率 高、效率高、成本低、功能性強(qiáng)的易消化蜂花粉。具體試驗(yàn)效果見實(shí)施例七至十二，具體組分 技術(shù)原理如下：
[0085] 1.本發(fā)明制備的破壁蜂花粉以蜂花粉為原料，首先采用超聲清洗對蜂花粉進(jìn)行殺 蟲滅卵、殺滅微生物、去除農(nóng)藥殘留和重金屬離子等，大大提高了易消化蜂花粉的食品安全 性;在含有絲膠肽的水溶液中浸泡，可最大限度地減少經(jīng)冷凍而造成的蜂花粉活性物質(zhì)的 損失，提高了蜂花粉有效成分的提取率，同時也為后續(xù)變溫益生菌發(fā)酵奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ);采 用微波高溫瞬時膨化可使經(jīng)冷凍的蜂花粉適度膨化，增強(qiáng)了蜂花粉內(nèi)、外壁及內(nèi)含物之間 和本身物質(zhì)結(jié)構(gòu)的分離、蓬松，促進(jìn)了網(wǎng)狀結(jié)果的形成，增強(qiáng)了內(nèi)外物質(zhì)交換的通透性，可 是后續(xù)酶分子、乳酸菌滲透至內(nèi)部而發(fā)揮作用，以達(dá)到蜂花粉有效成分的最大化積累;將高 壓脈沖電場、超聲、生物酶解等低溫提取技術(shù)有機(jī)結(jié)合，可最大限度地保留蜂花粉的功能性 物質(zhì)和有效成分;將含有多種酶活力高、酶系豐富的植物酶和蜂花粉形成的動物酶源科學(xué) 復(fù)配，可有效降解蜂花粉中各種大分子物質(zhì)，其豐富的酶系是市售復(fù)合酶無法比擬的，更符 合蜂花粉物質(zhì)形成和降解的"取之于自然，用之于自然"的原始天然法則；以功能性植物乳 桿菌粉為發(fā)酵劑，采用變溫發(fā)酵和分次接種方式在對蜂花粉進(jìn)行進(jìn)一步深度破壁的同時可 最大限度地獲取益生菌增殖和功能性代謝產(chǎn)物的最大積累。采用上述方法制備的破壁蜂花 粉破壁率可達(dá)98%以上。
[0086] 2.本發(fā)明制備的蛹蟲腸道提取物科學(xué)復(fù)配2-3日齡的蜂王幼蟲腸道和11-12日齡 的雄蜂蛹腸道為原料，在含有絲膠肽的水溶液中浸泡，可最大限度地減少經(jīng)冷凍而造成的 蛹蟲活性物質(zhì)的損失，提高了蛹蟲有效成分的提取率;采用用生物破乳劑破乳，可促進(jìn)蛹蟲 腸道中的脂肪等混溶性物質(zhì)與含有豐富腸道酶的水解液的分離，可獲取腸道酶的最大化提 取，相對于現(xiàn)有的直接離心分離或加入緩沖液、生化藥劑等分離方法，腸道酶提取率高、工 藝簡單，食品安全性高，對環(huán)境友好。同時，蛹蟲腸道提取物經(jīng)后續(xù)酶解，還含有蜂王幼蟲多 肽和雄蜂蛹多肽，為易消化蜂花粉增添了更多的功能性生物活性物質(zhì)。
[0087] 3.本發(fā)明的植物乳桿菌CGMCC NO. 11763經(jīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)能夠在pH為1.50的條件下存 活，在1 %膽鹽培養(yǎng)4小時后仍處于存活狀態(tài);植物乳桿菌CGMCC NO. 11763降解亞硝酸鹽速 度快，分解能力達(dá)到10.9mg/h/kg，該菌種在生產(chǎn)泡菜時，整個發(fā)酵過程中亞硝酸鹽濃度在 4.8mg/kg以下;CGMCC NO. 11763在發(fā)酵60h小時后，對膽固醇降解率可達(dá)到64.76% 〇CGMCC NO · 11763黏附能力測定的自凝集率為95 · 71 %。
[0088] 4.本發(fā)明在制備植物乳桿菌粉劑時采用的冷凍保護(hù)劑將含有抗凍蛋白較高的冬 黑麥、沙冬青和鯊魚皮膠原蛋白科學(xué)復(fù)配，經(jīng)高壓脈沖電場提取、超聲波輔助微波提取和生 物酶解而制得，全程低溫提取，抗凍蛋白提取率高，損失少，得到的保護(hù)劑抗凍多肽含量高、 種類全、功能性強(qiáng)、抗凍效果好，提高了植物乳桿菌粉劑中的活菌含量。
[0089] 5.本發(fā)明制備的植物提取物中不僅含有豐富的植物蛋白酶、淀粉酶、半纖維素酶、 酯酶、氧化還原酶等多種植物酶而且含有植物多糖和單糖、植物淀粉、植物蛋白、可溶性纖 維等營養(yǎng)物質(zhì)，不僅可為易消化蜂花粉提供全面、天然的植物酶，還可為植物乳桿菌提供全 面、豐富的營養(yǎng)物質(zhì);經(jīng)超聲清洗、微波輔助超聲提取和高壓脈沖電場提取、減壓濃縮等低 溫提取后，其效果更加顯著，并且有效提高了原料利用率、植物酶活性和產(chǎn)率;有效保證了 植物提取物的食品安全性。
[0090] 6.本發(fā)明制備的改性膳食纖維將超聲提取、高壓脈沖電場提取和生物酶解科學(xué)結(jié) 合，所得改性膳食纖維持水性、膨脹性、增稠性更強(qiáng)且不受酸、堿、鹽的影響，可溶性纖維素 含量高，更容易被乳酸菌利用，提高乳酸菌在人體腸道的生長及繁殖能力，增加益生菌菌群 的種類和數(shù)量，降低人體腸道PH值，改善人體腸道微生態(tài)環(huán)境;吸附能力強(qiáng)，經(jīng)改性后，纖維 素的比表面積增大，網(wǎng)格結(jié)構(gòu)豐富，吸附力增強(qiáng)，螯合、吸附膽固醇和膽汁酸類的有機(jī)分子 能力更強(qiáng)、抑制人體對他們的吸收;離子交換能力增強(qiáng)，對金屬元素，特別是重金屬元素吸 附效果更強(qiáng)，有效防止了人體重金屬中毒;調(diào)節(jié)和維持腸道菌群的定植時間，增強(qiáng)腸道的消 化和吸收能力，提高機(jī)體免疫力;有效促進(jìn)胃腸蠕動，減緩并消除胃脹、腹脹等不良反應(yīng);強(qiáng) 大的包埋作用可防止環(huán)境(氧氣、溫度、光照、水分活度等）因素對產(chǎn)品品質(zhì)的影響，穩(wěn)定了 易消化蜂花粉的生物活性，延長了易消化蜂花粉的保質(zhì)期。
[0091] 7.本發(fā)明將低聚糖和改性膳食纖維科學(xué)復(fù)配，給益生菌提供了全面、豐富的營養(yǎng) 物質(zhì)，不僅實(shí)現(xiàn)了益生菌的最大化增殖和功能性代謝產(chǎn)物的最大化積累，而且有效改善了 成品易消化蜂花粉的口感和穩(wěn)定性。
[0092] 8.本發(fā)明的制備方法制備方法工藝簡單，操作方便，對設(shè)備要求低，可工業(yè)化和規(guī) ?；a(chǎn)，將改性膳食纖維最后混合，發(fā)揮了其強(qiáng)大的包埋作用，使得產(chǎn)品的性狀更穩(wěn)定、 保質(zhì)期更長。
[0093]需要說明的是本發(fā)明易消化蜂花粉的技術(shù)效果是各組分技術(shù)特征和方法特征相 互協(xié)同、相互作用的結(jié)果，并非簡單的技術(shù)特征(組分功能）的疊加，各組分技術(shù)特征的有機(jī) 結(jié)合和協(xié)同產(chǎn)生的效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過各單一技術(shù)特征功能和效果的疊加，具有較好的先進(jìn)性和 實(shí)用性。
【具體實(shí)施方式】
[0094]下面通過具體的實(shí)施方案敘述本發(fā)明。除非特別說明，本發(fā)明中所用的技術(shù)手段 均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方法。另外，實(shí)施方案應(yīng)理解為說明性的，而非限制本發(fā)明的 范圍，本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍僅由權(quán)利要求書所限定。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本 發(fā)明實(shí)質(zhì)和范圍的前提下，對這些實(shí)施方案中的物料成分和用量進(jìn)行的各種改變或改動也 屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0095] 實(shí)施例一：
[0096] 原料制備
[0097] 1、植物提取物的制備
[0098]其制備方法為：
[0099]將大麥芽和小麥芽按質(zhì)量比9:2均勻混合，粉碎至粒度0.8mm，得粉碎麥芽;然后將 木瓜、菠蘿、無花果分別于超聲波清洗機(jī)中在功率200W、頻率30KHz條件下超聲清洗8min，瀝 干，室溫下破碎至粒度0.8mm，并按質(zhì)量比8: 2:1.5均勻混合，加入混合物質(zhì)量4倍的粉碎麥 芽得原料混合物，加入原料混合物質(zhì)量2倍的水，用檸檬酸調(diào)節(jié)pH值為3.5，在功率225W、頻 率2000Hz條件下進(jìn)行微波提取，其中，每次微波輻照總時間70s，進(jìn)行間隔式輻照:輻照10s， 間隔IOs，控制溫度30°C，如此輻照10次，同時在功率250W，頻率35KHz條件下進(jìn)行超聲波輔 助提取;保溫2h，然后，在功率300W、頻率2000Hz條件下進(jìn)行微波提取，其中，每次微波輻照 總時間100s，進(jìn)行間隔式輻照：輻照15s，間隔10s，控制溫度50°C，如此輻照10次，同時在功 率400W，頻率45KHz條件下進(jìn)行超聲波輔助提取，最后自然降溫至室溫，于電場強(qiáng)度30kV/ cm，脈沖時間500ys，脈沖頻率250Hz條件下進(jìn)行高壓脈沖電場提取18min;提取液過濾得第 一濾液，加濾渣4倍的水漂洗、過濾得第二濾液，將第一濾液和第二濾液按質(zhì)量比1:4均勻混 合，減壓濃縮至固形物含量為30 %，即得植物提取物；
[0100]上述超聲波清洗機(jī)中清洗液為〇. 4%的碳酸氫鈉溶液。
[0101] 2、蛹蟲腸道提取物的制備
[0102] 其制備方法包括如下步驟：
[0103] 將3日齡的蜂王幼蟲腸道和12日齡的雄蜂蛹腸道按質(zhì)量比4:2混合，加入混合物質(zhì) 量1.5倍的質(zhì)量百分比為10 %的絲膠肽溶液，攪拌均勻，置-20°C冷凍8min，破碎，研磨成勻 漿，添加其質(zhì)量0.04 %的生物破乳劑破乳30min，在22000g，4°C條件下離心25min，收集第一 次離心后的中層液體，然后在22000g，4°C條件下離心25min，收集第二次離心后的中層液 體，得到蛹蟲腸道提取物；
[0104] 上述絲膠肽溶液的pH值為6.5;
[0105] 上述生物破乳劑的質(zhì)量組成為:糖脂類:脂肽類:胞壁結(jié)合類=6:5:3;
[0106] 其中糖脂類生物破乳劑的質(zhì)量組成為：鼠李糖脂:烷基糖苷=4:1.5。
[0107] 3、改性膳食纖維的制備
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