一種抗氧化抗衰老sod納米硒肽組合物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物，每100克組合物中各組分含量為：SOD150?650萬活力單位、血紅蛋白肽35?70g、低聚糖15?50g、納米硒4?8mg、葡萄糖酸鋅5000?7200mg、葡萄糖酸錳1000?2200mg、葡萄糖酸銅600?1200mg。其制備方法是：先以豬血紅細(xì)胞為原料制備SOD和血紅蛋白肽，以低聚糖為介質(zhì)模板制備納米硒，再以血紅蛋白肽與納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳以及葡萄糖酸銅進(jìn)行螯合反應(yīng)，制備血紅蛋白肽螯合粉，然后將SOD、低聚糖與血紅蛋白肽螯合粉混合即得SOD納米硒肽組合物，根據(jù)需要可制成粉劑、片劑或膠囊劑等常規(guī)內(nèi)服制劑。本發(fā)明科學(xué)遣藥組方，從調(diào)、養(yǎng)、補(bǔ)三個方面來增強(qiáng)和提高機(jī)體SOD活性與含量，能顯著清除體內(nèi)自由基，降低丙二醛（MDA）含量，從而實現(xiàn)抗氧化、抗衰老、增強(qiáng)免疫力的功效。
【專利說明】
一種抗氧化抗衰老SOD納米砸肽組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種保健食品，尤其涉及一種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物及其 制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 人體因增齡、疾病、創(chuàng)傷、環(huán)境污染、不良生活方式以及化學(xué)藥物等因素會產(chǎn)生過 多的活性自由基，過多的自由基會引起膜損傷和交聯(lián)鍵的形成，使機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，核酸 代謝紊亂，生物酶破壞，激素被氧化，并導(dǎo)致膜功能損失，溶酶體內(nèi)衰老色素大量堆積，產(chǎn)生 大量脂質(zhì)過氧化物(LP0)和丙二醛(MDA)，使機(jī)體各臟器損傷和功能喪失，從而導(dǎo)致機(jī)體衰 老與多種疾病。大量的科學(xué)研究表明，自由基引起的一系列氧化和過氧化反應(yīng)是人類衰老 和患病的根源，人體的衰老及90%以上的疾病與自由基有關(guān)。
[0003] 超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，簡稱S0D)是一類含金屬的酶，按金屬輔 基成分的不同可分為三種類型，即含有銅鋅輔基的Cu，Zn-SOD，含有錳輔基的Mn-SOD，以及 含有鐵輔基的Fe-S0D，高等動物細(xì)胞內(nèi)只有兩種S0D，即Cu，Ζη-SOD和Μη-SOD。S0D是國際上 公認(rèn)的超氧陰離子氧自由基（〇廠·）的專一清除劑，其作用機(jī)理是S0D特異性地將機(jī)體產(chǎn)生 的超氧陰離子氧自由基（〇2~）歧化為過氧化氫(H2O2)和分子氧(〇2)，由此生成的過氧化氫 (H 202)再經(jīng)過氧化氫酶(CAT)或谷光甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的作用進(jìn)一步分解為無毒的 水(H2〇)。因此，S0D是構(gòu)成機(jī)體防御氧自由基損傷的第一道防線。S0D催化〇2_?歧化反應(yīng)式 如下：
國內(nèi)外大量的實驗和臨床研究都一一證實，無論青年還是老年正常人，其血液中S0D和 淋巴細(xì)胞中S0D的活性和含量均隨年齡的增長而呈現(xiàn)明顯的漸進(jìn)性降低趨勢，尤其是45歲 以后以及老年期人體紅細(xì)胞內(nèi)的S0D活性的下降更為顯著。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致S0D活 性或含量隨增齡而降低的主要因素有:第一，隨著年齡遞增，機(jī)體調(diào)節(jié)酶生成的內(nèi)分泌系統(tǒng) 功能也隨之減退，使抗氧化酶系統(tǒng)合成減少，S0D的合成減少;第二，隨著年齡的增長，人體 內(nèi)活性氧自由基生成增加，活性氧包括超氧陰離子自由基(〇2~）、羥自由基(·〇Η)、過氧化氫 (Η 202)、單線態(tài)氧(42)以及脂質(zhì)過氧化氫等，它們都是性質(zhì)極為活潑、破壞性很大的生物毒 性物質(zhì)，這些物質(zhì)的堆積給S0D造成毒害作用，使S0D性質(zhì)改變，結(jié)構(gòu)破壞，酶活性下降甚至 滅活，導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)無活性S0D增多;第三，在機(jī)體衰老過程中其它抗氧化劑和抗氧化酶類，如 過氧化氫酶(CAT)、谷光甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和維生素 C含量與抗氧化能力下降。這一 方面增加了SOD的消耗，另一方面也加快了SOD的失活，因而造成SOD活性的降低;第四，隨著 年齡的增長，與SOD密切相關(guān)的微量元素如Cu、Zn、Mn等在體內(nèi)的含量降低(過多喪失或攝入 不足），也是造成SOD活性和含量進(jìn)一步降低的重要原因。因為在機(jī)體Cu、Zn-S0D和Mn-SOD的 分子結(jié)構(gòu)中，Cu、Zn、Mn三種微量元素對維持SOD活性和正常結(jié)構(gòu)及分子構(gòu)象具有重要作用， 如果這些元素減少或丟失過多，將會影響SOD的合成，或使SOD活性下降甚至失活。
[0004] 因此，從衰老的自由基學(xué)說出發(fā)，通過補(bǔ)充外源性抗氧化酶類(如S0D、CAT、GSH-Px 等)和抗氧化劑(如維生素 C、維生素 E、輔酶Q、谷胱甘肽等）以及與抗氧化酶活性中心密切相 關(guān)的礦物元素(如〇!、211、111、56等），以增強(qiáng)和提高機(jī)體500活性與含量，無疑是實現(xiàn)清除自 由基對機(jī)體的氧化作用，延緩機(jī)體衰老進(jìn)程的重要途徑。
[0005] 目前市場上出現(xiàn)了一些含有S0D的藥物和保健食品，其中有不少已申報了發(fā)明專 利，如專利號ZL200610044379.1公開了一種S0D保健組合物，該專利是利用S0D與VC、VE、花 粉以及何首烏與黃精提取物混合復(fù)配，得到具有抗氧化、抗衰老、抗疲勞、增強(qiáng)免疫、降脂等 功能的保健組合物;專利號ZL200810112887.8公開了一種S0D復(fù)合膠囊及其制備方法，該專 利采用從蝌蚪中提取的S0D酶制劑，與白藜蘆醇、輔酶Q10、鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅 花提取物、苦蕎提取物混合后，分裝膠囊，產(chǎn)品具有抗氧化功能，但工藝流程繁瑣；專利號 ZL201010604957.9公開了一種抗衰老、降壓、降脂S0D藥物組合物及其制備方法，該專利主 要取人參粉、田七粉、紅花粉、銀杏粉與松樹皮提取物混合烘干滅菌后，加入S0D混勻，制成 膠囊制劑;專利號ZL201110197534.4公開了 S0D膠原蛋白肽美顏抗衰老劑，該專利選用天然 植物S0D與膠原蛋白多肽、透明質(zhì)酸、珍珠粉以及人參皂苷提取物的合理組配，具有活化細(xì) 胞機(jī)能，提高免疫力和美容抗衰老的功效;專利號ZL201110254795.5公開了一種S0D復(fù)合膠 囊及其制備方法，該專利選取S0D、人參提取物、珍珠粉、黨參提取物、紅花提取物、絞股藍(lán)提 取物、螺旋藻、松樹皮提取物與枸杞多糖組合，制成腸溶性膠囊，產(chǎn)品具有延緩衰老，增強(qiáng)機(jī) 體免疫力的效果；專利號ZL201210179382.X公開了一種治療化療、放療綜合癥口服生物藥 及其制備方法，該專利主要以重組人源超氧化物歧化酶(rhSOD)、甘露糖、海藻糖、金屬硫蛋 白、維生素 C和維生素 E為原料，通過分步溶解、過濾、冷凍干燥等步驟加工而成的粉狀口服 生物新藥，產(chǎn)品在治療癌癥病人放、化療綜合癥，保護(hù)白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞不受損失以及抗氧 化方面具有較好的功效。這些專利申請所涉及的產(chǎn)品配方各不相同，但制作工藝大同小異， 其中絕大多數(shù)是以S0D添加中草藥提取物的方式補(bǔ)充和調(diào)節(jié)人體的S0D活性，也有一些是通 過以S0D組合其他抗氧化劑(如維生素 C和維生素 E)協(xié)同作用的方式來清除體內(nèi)氧自由基， 沒有涉及到整合外源性S0D、酶活性中心元素、活性小肽與功能性低聚糖的功效，并通過科 學(xué)組方，協(xié)同增效來全面提高和增強(qiáng)機(jī)體的S0D活性。因此，現(xiàn)有技術(shù)方案在產(chǎn)品組方和療 效方面存在不足之處。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的就是為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種全面整合外源性S0D、酶活 性中心元素、活性小肽與功能性低聚糖的功效，使S0D在礦物元素、小分子肽和抗氧化低聚 糖的共同保護(hù)與促進(jìn)下吸收更好、功效更強(qiáng)的抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物，所述的組 合物含有S0D、血紅蛋白肽、低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，可以抗 氧化，抗衰老，增強(qiáng)人體免疫力。
[0007] 本發(fā)明的目的是通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的： 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物，其特征在于:所述組合物中含有S0D、血紅蛋 白肽、低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，每l〇〇g組合物中各個組分含 量為： S0D150-650萬活力單位， 血紅蛋白肽35-70g， 低聚糖15-50g， 納米硒4_8mg， 葡萄糖酸鋅5000-7200mg， 葡萄糖酸猛1000-2200 mg， 葡萄糖酸銅600-1200 mg。
[0008] 所述的SOD是豬血紅細(xì)胞提取物。
[0009] 所述的血紅蛋白肽是豬血紅蛋白酶解物，含有60%以上的活性小分子肽，所述活性 小分子肽的相對分子量為180-1000Da。
[0010] 所述的納米硒包括低聚糖納米微球模板和富集在其上的納米硒。
[0011] 所述的低聚糖為低聚果糖、異麥芽低聚糖、低聚半乳糖或低聚木糖中的任一種。
[0012] 本發(fā)明的另一個目的是提供一種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的制備方法， 其特征在于:所述組合物中含有S0D、血紅蛋白肽、低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸 錳、葡萄糖酸銅，每l〇〇g組合物中各個組分含量為:S0D150-650萬活力單位，血紅蛋白肽35-70g，低聚糖15-50g，納米硒4-8mg，葡萄糖酸鋅5000-7200mg，葡萄糖酸猛1000-2200 mg，葡 萄糖酸銅600-1200 mg，包括如下工藝步驟： (1) S0D和血紅蛋白粉的制備： A. 血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血，加入檸檬酸鈉做抗凝處理， 離心收集血紅細(xì)胞，然后加入血紅細(xì)胞體積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白 溶液； B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣： 即在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至5.2-5.5,然后升溫至60°C，保溫30-50min，快速降溫至45°C以下，以轉(zhuǎn)速>10000r/min進(jìn)行離心分離，分別收集上清液I和血渣 I;用氫氧化鈉調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.2~6.5，快速升溫至70°C，保溫10_20min后，快速降溫 至45°C以下，以轉(zhuǎn)速> 10000r/min進(jìn)行離心分離，分別收集上清液Π 和血渣Π ; C. 通過超濾濃縮獲取S0D酶液： 即將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至 原體積的1/10，得到藍(lán)綠色的S0D酶液； D. 通過冷凍干燥獲取S0D凍干粉： 即將S0D酶液進(jìn)行冷凍干燥，得S0D凍干粉，檢測S0D酶活力，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液： 將步驟B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，加入兩血渣重量3-5倍的去離子水溶解并攪 拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.0~6.5，按每公斤血渣加入蛋白酶3.0-6.0克，加熱至50-55°C，攪拌 下保溫酶解4-8h，將酶解液升溫至85 °C滅酶20分鐘，即得到血紅蛋白酶解液； F. 離心分離獲得上清液m:將血紅蛋白酶解液進(jìn)行高速離心，離心轉(zhuǎn)速>10000r/ min，收集上清液ΙΠ ，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液： 即將上清液m經(jīng)截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行超濾，收集透過液;將收集的 超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行納濾濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，收集濃縮液，得到血紅蛋白肽溶液； H. 噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉： 即將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 稱取亞硒酸鈉溶于去離子水中，攪拌下依次加入低聚糖和維生素 C，50°C攪拌反應(yīng)lh， 即制得納米硒溶液； (3) 螯合配制： 取步驟（1)所制備的血紅蛋白肽粉，加去離子水溶解攪拌均勻，配制成質(zhì)量濃度為10-20%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪拌反應(yīng)1小時，然后 依次加入葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳和葡萄糖酸銅，在60°C下繼續(xù)攪拌反應(yīng)1小時，得到血紅 蛋白肽螯合溶液;其中血紅蛋白肽粉、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳和葡萄糖酸銅的添加量均為 配比的重量； (4) 噴霧干燥： 即將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5 )混配得到SOD納米硒肽組合物： 即按配比稱取低聚糖和步驟（1)D中所制備的SOD凍干粉，加入到步驟(4)所制備的血紅 蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得SOD納米硒肽組合物。
[0013] 在制作方法的步驟(1 )A中所述檸檬酸鈉為食品級檸檬酸鈉，添加量為新鮮豬血重 量的0.5%。
[0014] 在制作方法的步驟(1)E中所述的蛋白酶為來源于米曲霉的弱酸性蛋白酶，酶活力 為390000-430000HU/g。
[0015] 在制作方法的步驟(2)所述的亞硒酸鈉的使用量為配比中硒的量換算成相應(yīng)的亞 硒酸鈉(硒含量為45.65%)的重量，低聚糖、亞硒酸鈉和維生素 C的混合質(zhì)量比為100:1:10。
[0016] 在制作方法的步驟(5)所述低聚糖的添加量為配比中低聚糖總量減去步驟(2)所 添加的低聚糖量之后的余量。
[0017] 本發(fā)明組合物可采用藥物制劑的常規(guī)方法制備成任何常規(guī)內(nèi)服制劑。例如，將本 發(fā)明組合物研磨成粉制成粉劑;加入制備不同劑型所需的各種常規(guī)輔料制備成片劑、膠囊 劑等。
[0018] 根據(jù)以上技術(shù)方案提出的這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物，具有以下優(yōu)點： (1)本發(fā)明基于衰老的自由基學(xué)說，科學(xué)遣藥組方，從調(diào)、養(yǎng)、補(bǔ)三個方面來增強(qiáng)和提高 機(jī)體S0D活性與含量，最終達(dá)到清除機(jī)體自由基，實現(xiàn)抗氧化、抗衰老、增強(qiáng)免疫力的效果。 一方面，通過補(bǔ)充吸收外源性抗氧化酶S0D，來提高機(jī)體內(nèi)S0D總體水平（8卩"補(bǔ)"）；另一方 面，又添加了與S0D及GSH-Px活性中心密切相關(guān)的礦物元素(金屬離子），通過激活機(jī)體本身 內(nèi)在(存量)抗氧化酶S0D活性，使其活性得到提升與增強(qiáng)，或使其不再下降失活（8卩"調(diào)"）； 再者，通過添加了功能性低聚糖和活性肽，從改善人體內(nèi)微生態(tài)環(huán)境，調(diào)節(jié)胃腸功能，促進(jìn) 營養(yǎng)吸收率，特別是硒、鋅、錳、銅等礦物離子的吸收以及增強(qiáng)機(jī)體免疫力方面，間接提升機(jī) 體的SOD和GSH-Px的抗氧化活性（8卩"養(yǎng)"）。
[0019] (2)本發(fā)明產(chǎn)品中各功效成份巧妙組合，有機(jī)結(jié)合，相互補(bǔ)充，協(xié)同增效。例如，將 活性小分子肽與礦物(金屬)離子Se、Zn、Mn、Cu結(jié)合在一起，形成穩(wěn)定的可溶性的蛋白肽復(fù) 合物，從而提高了這些礦物(金屬)離子的吸收利用率;再如，利用低聚糖對納米硒的均勻分 散和穩(wěn)定作用，以低聚糖為微球模板富集、穩(wěn)定納米硒，同時低聚糖還是一個緩沖載體，可 以逐步將硒釋放出來，起到持久補(bǔ)硒和抗氧化的作用，另外，低聚糖在產(chǎn)品中也發(fā)揮潤腸通 便排毒以及增甜矯味的功效;又如，利用Cu、Zn和Μη三種金屬離子是S0D酶活性中心元素， 對S0D有一定的保護(hù)和穩(wěn)定作用的特性，將Cu、Zn和Μη與S0D混配在一起，在一定程度上起到 保護(hù)S0D酶蛋白免遭胃酸破壞，穩(wěn)定和提高S0D酶活性的作用。
[0020] (3)本發(fā)明以豬血紅細(xì)胞為原料，采用聯(lián)產(chǎn)制取工藝，同步制備S0D和血紅蛋白肽 原料，工藝簡單，生產(chǎn)周期短，成本低，易于實施。
[0021] (4)本發(fā)明在制備S0D原料的過程中，采用等電點沉淀和熱變性方法分離去除雜蛋 白，用超濾技術(shù)濃縮和純化S0D，不添加任何化學(xué)試劑和有機(jī)溶劑，避免了外源有毒物質(zhì)的 引入，提尚了廣品的安全性。
[0022] (5)本發(fā)明產(chǎn)品中礦物元素或金屬離子的使用均按GB14880和GB2760的規(guī)定或中 國營養(yǎng)學(xué)會制定的DRIs值(每日參考攝入量)執(zhí)行，保證了絕對的安全性。
【具體實施方式】
[0023]下面結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但是本發(fā)明的實施方式并 不局限于此實施例表示的范圍。
[0024] 本發(fā)明涉及的這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物，其特征在于:所述組合物中 含有S0D、血紅蛋白肽、低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，每100g組合 物中各個組分含量為： S0D150-650萬活力單位， 血紅蛋白肽35-70g， 低聚糖15-50g， 納米硒4_8mg， 葡萄糖酸鋅5000-7200mg， 葡萄糖酸猛1000-2200 mg， 葡萄糖酸銅600-1200 mg。
[0025] 所述的SOD是豬血紅細(xì)胞提取物。
[0026] 所述的血紅蛋白肽是豬血紅蛋白酶解物，含有60%以上的活性小分子肽，所述活性 小分子肽的相對分子量為180-1000Da。
[0027] 所述的納米硒包括低聚糖納米微球模板和富集在其上的納米硒。
[0028] 所述的低聚糖為低聚果糖、異麥芽低聚糖、低聚半乳糖或低聚木糖中的任一種。 [0029]本發(fā)明的另一個目的是提供一種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的制備方法， 其特征在于:所述組合物中含有S0D、血紅蛋白肽、低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸 錳、葡萄糖酸銅，每lOOg組合物中各個組分含量為:S0D150-650萬活力單位，血紅蛋白肽35-70g，低聚糖15-50g，納米硒4-8mg，葡萄糖酸鋅5000-7200mg，葡萄糖酸猛1000-2200 mg，葡 萄糖酸銅600-1200 mg，包括如下工藝步驟： (1) SOD和血紅蛋白粉的制備： A. 血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血，加入檸檬酸鈉做抗凝處理， 離心收集血紅細(xì)胞，然后加入血紅細(xì)胞體積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白 溶液； B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣： 即在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至5.2-5.5,然后升溫至60°C，保溫30-50min，快速降溫至45°C以下，以轉(zhuǎn)速>10000r/min進(jìn)行離心分離，分別收集上清液I和血渣 I;用氫氧化鈉調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.2~6.5，快速升溫至70°C，保溫10_20min后，快速降溫 至45°C以下，以轉(zhuǎn)速> 10000r/min進(jìn)行離心分離，分別收集上清液Π 和血渣Π ; C. 通過超濾濃縮獲取SOD酶液： 即將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至 原體積的1/10，得到藍(lán)綠色的SOD酶液； D. 通過冷凍干燥獲取SOD凍干粉： 即將SOD酶液進(jìn)行冷凍干燥，得SOD凍干粉，檢測SOD酶活力，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液： 將步驟B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，加入兩血渣重量3-5倍的去離子水溶解并攪 拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.0~6.5，按每公斤血渣加入蛋白酶3.0-6.0克，加熱至50-55°C，攪拌 下保溫酶解4-8h，將酶解液升溫至85 °C滅酶20分鐘，即得到血紅蛋白酶解液； F. 離心分離獲得上清液ΙΠ :將血紅蛋白酶解液進(jìn)行高速離心，離心轉(zhuǎn)速>10000r/ min，收集上清液ΙΠ ，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液： 即將上清液m經(jīng)截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行超濾，收集透過液;將收集的 超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行納濾濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，收集濃縮液，得到血紅蛋白肽溶液； H. 噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉： 即將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 稱取亞硒酸鈉溶于去離子水中，攪拌下依次加入低聚糖和維生素 C，50°C攪拌反應(yīng)lh， 即制得納米硒溶液； (3) 螯合配制： 取步驟（1)所制備的血紅蛋白肽粉，加去離子水溶解攪拌均勻，配制成質(zhì)量濃度為10-20%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪拌反應(yīng)1小時，然后 依次加入葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳和葡萄糖酸銅，在60°C下繼續(xù)攪拌反應(yīng)1小時，得到血紅 蛋白肽螯合溶液;其中血紅蛋白肽粉、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳和葡萄糖酸銅的添加量均為 配比的重量； (4) 噴霧干燥： 即將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5 )混配得到SOD納米硒肽組合物： 即按配比稱取低聚糖和步驟（1)D中所制備的SOD凍干粉，加入到步驟(4)所制備的血紅 蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得SOD納米硒肽組合物。
[0030] 在制作方法的步驟(1)A中所述檸檬酸鈉為食品級檸檬酸鈉，添加量為新鮮豬血重 量的0.5%。
[0031] 在制作方法的步驟(1)E中所述的蛋白酶為來源于米曲霉的弱酸性蛋白酶，酶活力 為390000-430000HU/g。
[0032] 在制作方法的步驟(2)所述的亞硒酸鈉的使用量為配比中硒的量換算成相應(yīng)的亞 硒酸鈉(硒含量為45.65%)的重量，低聚糖、亞硒酸鈉和維生素 C的混合質(zhì)量比為100:1:10。
[0033] 在制作方法的步驟(5)所述低聚糖的添加量為配比中低聚糖總量減去步驟(2)所 添加的低聚糖量之后的余量。
[0034] 本發(fā)明組合物可采用藥物制劑的常規(guī)方法制備成任何常規(guī)內(nèi)服制劑。例如，將本 發(fā)明組合物研磨成粉制成粉劑;加入制備不同劑型所需的各種常規(guī)輔料制備成片劑、膠囊 劑等。
[0035] 下面結(jié)合本發(fā)明主要功效成分的性能，對本發(fā)明做進(jìn)一步說明： (1)S0D SOD是國際上公認(rèn)的超氧陰離子氧自由基（Of )的專一清除劑，是生物體內(nèi)的一種抗 氧化酶，它對平衡機(jī)體氧化與抗氧化系統(tǒng)，免除自由基損傷起著至關(guān)重要的作用。S0D對人 體的功效可歸之為"一清四抗"："一清"即有效清除機(jī)體內(nèi)的超氧陰離子氧自由基，保護(hù)人 體細(xì)胞免遭氧自由基的毒害；"四抗"即抗衰老、抗疾病、抗輻射和抗疲勞。S0D因清除機(jī)體內(nèi) 產(chǎn)生的過量的超氧陰離子自由基（〇廠·），保護(hù)DNA、蛋白質(zhì)和細(xì)胞膜免遭超氧陰離子（0 2 _·)的破壞作用，進(jìn)而延緩因自由基損害生命大分子而引起的衰老現(xiàn)象，如延緩皮膚衰老和 老年斑的形成;S0D可增強(qiáng)人體自身的免疫力，提高人體對自由基引發(fā)的一系列疾病的抵抗 力，如炎癥、腫瘤、白內(nèi)障、肺氣腫、腎臟病、心腦血管疾病等，治療由于免疫功能下降引發(fā)的 疾病;S0D可清除放、化療所誘發(fā)的大量自由基，從而減少放射對人體正常組織的損傷，減輕 癌癥等腫瘤患者放化療時的痛苦及副作用；S0D可消除疲勞，增強(qiáng)人體對劇烈運(yùn)動的適應(yīng) 力。
[0036] (2)硒 硒是生物體中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和磷脂氫谷胱甘肽過氧化物酶(PHG-Px) 的活性中心組成元素，在體內(nèi)通過谷胱甘肽過氧化物酶特異性地催化還原型谷胱甘肽與過 氧化物的氧化還原反應(yīng)，將有毒的氧自由基一一過氧化氫(H 2〇2)還原成無毒的水，以保護(hù)生 物膜免受損害。此外，硒還能與脂蛋白發(fā)生作用，含硒的蛋白質(zhì)具有很強(qiáng)的抗氧化活性，并 且硒還參與輔酶Q的合成，輔酶Q是氧化-還原反應(yīng)的載氫體，在單電子運(yùn)轉(zhuǎn)過程中通過醌 型-半醌型轉(zhuǎn)換，捕獲自由基中的未配對電子，從而起到清除自由基的作用。因此，硒與過氧 化氫酶(CAT)和谷光甘肽過氧化物酶(GSH-Px)共同構(gòu)成機(jī)體防御氧自由基損傷的第二道防 線。
[0037] 近年來研究發(fā)現(xiàn)，與無機(jī)硒及有機(jī)硒相比，納米硒具有高安全性、高生物活性的特 點，其體外清除自由基是有機(jī)硒的2.5倍，無機(jī)硒的5倍，是一類很好的抗氧化劑和自由基清 除劑。關(guān)于硒的日攝入量，我國科技工作者楊光圻教授和陳孝曙教授經(jīng)過多年的研究分析， 得出結(jié)論:人體對硒的生理需要量為40yg/日，界限中毒劑量為800yg/日，建議膳食硒補(bǔ)充 量為50-250yg/日，最高安全攝入量為400yg/日，此數(shù)據(jù)為FDA/WHO/IAEA三個國際組織所采 用。1998年中國營養(yǎng)學(xué)會已將人體必需的微量元素硒列為15種每日膳食營養(yǎng)素之一，并推 薦成年人每日膳食硒補(bǔ)充量為50微克。
[0038] (3)活性小肽 活性小肽是指相對分子量介于180~lOOODa之間的一類寡肽(一般包括二肽和三肽）。 小肽的功能主要體現(xiàn)在以下幾個方面：（1)促進(jìn)氨基酸吸收，提高蛋白質(zhì)合成速度。小肽不 僅能被小腸粘膜吸收利用，其合成蛋白質(zhì)的速度也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氨基酸。（2)提高礦物質(zhì)的吸收 利用率。在動物體(包括人體）內(nèi)，大多數(shù)的礦物元素吸收都要以蛋白質(zhì)特別是小肽為載體， 小肽能與多種礦物元素如鈣、鎂、鐵、鋅、銅、硒等結(jié)合形成可溶性的小肽絡(luò)合物或螯合物， 小肽可充當(dāng)許多礦物元素體內(nèi)運(yùn)輸?shù)妮d體，從而提高礦物元素的吸收利用。（3)提高機(jī)體免 疫力。小肽能夠通過誘導(dǎo)小腸絨毛刷狀緣膜酶活性上升和刺激消化酶分泌，抑制大腸桿菌 的繁殖，來提高機(jī)體的免疫力。
[0039] (4)低聚糖 低聚糖又名寡糖，是由2-10個糖基通過糖苷鍵連接而成的小聚合體。低聚糖能改善人 體內(nèi)微生態(tài)環(huán)境，有利于雙歧桿菌和其它有益菌的增殖，抑制腸內(nèi)沙門氏菌和腐敗菌的生 長，調(diào)節(jié)胃腸功能，長期食用可減緩衰老、通便、抑菌、防癌、抗癌、減輕肝臟負(fù)擔(dān)、提高營養(yǎng) 吸收率，特別是促進(jìn)鈣、鐵、鋅等礦物離子的吸收;低聚糖類似水溶性植物纖維，能改善血脂 代謝，降低血液中膽固醇和甘油三酯的含量。近年來，一些研究表明，某些低聚糖如低聚果 糖、異麥芽低聚糖、低聚半乳糖等不僅具有增強(qiáng)免疫和調(diào)節(jié)腸道菌群的功能，還具有增強(qiáng)機(jī) 體抗氧化的作用。低聚糖通過直接消除超氧負(fù)離子，或通過體內(nèi)代謝途徑，激活機(jī)體內(nèi)在的 S0D和GSH-Px，使其抗氧化活性提高，達(dá)到抗氧化作用。
[0040] (5)抗氧化酶活性中心金屬元素 銅:銅是人體必需的微量礦物元素。銅是機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)和酶的重要組成部分，許多重要 的酶需要微量銅的參與和活化。例如，銅是Cu，Zn-S0D酶分子的活性中心元素，研究證實，當(dāng) 用絡(luò)合劑將Cu，Zn-S0D中的Cu透析掉后，S0D就失去原來的生物活性，而當(dāng)重新加入Cu后， S0D的活性又恢復(fù)到原來的水平。另外，研究還發(fā)現(xiàn)，在一定濃度范圍內(nèi)，增加環(huán)境中游離的 銅離子濃度可顯著提高S0D活性。因此，Cu與S0D酶活性直接相關(guān)，起著傳遞電子的作用。
[0041] 成年人每天需要銅0.05~2毫克，孕、產(chǎn)婦和青、少年的需要量還要多些。中國營養(yǎng) 學(xué)會沒有制定每日膳食中銅的需要量，但制定了每日銅的"安全和適宜的攝入量"：半歲前 嬰兒每天需0.5~0.7毫克，半歲至1歲每天0.7~1.0毫克，1歲以上每天1.0~1.5毫克，4歲 以上每天1.5~2.0毫克，7歲以上每天2.0~2.5毫克，11歲以上至青年、成年，均為每天2.0 ~3.0毫克。這個攝入量與美國科學(xué)研究委員會制定的"估計每日飲食中安全充足的銅攝取 量"相當(dāng)。
[0042]鋅:鋅是人體必需的微量兀素之一，在人體生長發(fā)育、生殖遺傳、免疫、內(nèi)分泌等重 要生理過程中起著極其重要的作用。鋅是Cu，Zn-S0D酶分子的活性中心元素，研究表明，鋅 的作用一是調(diào)節(jié)咪唑基與Cu的相互作用，二是穩(wěn)定活性中心的結(jié)構(gòu)，鋅包埋于S0D酶的疏 水基團(tuán)中參與維持和穩(wěn)定酶的結(jié)構(gòu)，若除去酶分子中Zn而保留原有環(huán)境中Cu，S0D仍有相 當(dāng)尚的活性。
[0043] 錳:錳是人體必需的微量元素之一，在維持人體健康方面發(fā)揮重要作用： (1) 促進(jìn)骨骼的生長發(fā)育。錳參與活化硫酸軟骨素合成的酶系統(tǒng)，促進(jìn)骨質(zhì)的合成； (2) 維持正常的糖代謝和脂肪代謝； (3) 錳在維持正常腦功能中必不可缺，與智力發(fā)展、思維、情感、行為均有關(guān)系，錳對阿 爾茨海默癥(老年癡呆)具有療效； (4) 錳有抗衰老、抗氧化的作用。錳是Mn-SOD活性中心的組成元素，S0D必須在錳離子的 催化下才能發(fā)揮作用。
[0044] 此外，錳還能刺激免疫細(xì)胞增殖，增強(qiáng)人體的免疫力。成年人通常錳攝入量為每天 2~5mg，吸收率為5%~10%，如果少于這個量，就有可能出現(xiàn)錳缺乏癥狀。 鐵:鐵是血紅蛋白的組成成份，參與氧的運(yùn)輸和存儲。鐵元素在人體內(nèi)參與造血，并形 成血紅蛋白、肌紅蛋白，參與氧的攜帶和運(yùn)輸?shù)恼麄€過程。鐵結(jié)合多種酶分解氧化物，解毒 抑制細(xì)菌，釋放能量。鐵是Fe-SOD的活性中心元素，對S0D活性的影響至關(guān)重要。值得一提的 是，血紅素鐵(也稱有機(jī)卟啉鐵)在腸道可以不受食物其他因素的影響進(jìn)入腸黏膜，較其他 植物性鐵或動物性非血紅素型鐵吸收率高，是無機(jī)鐵的三倍。本發(fā)明中添加的血紅蛋白肽 富含血紅素鐵，是優(yōu)良的補(bǔ)鐵劑。
[0045] 以下給出本發(fā)明的實施例，并結(jié)合實施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。
[0046] 以制備1000g S0D納米硒肽組合物粉劑為例： 實施例1: 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的制備方法，其特征在于:所述組合物中含有 S0D、血紅蛋白肽、低聚果糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，組合物中各個 組分含量為:S0D2000萬活力單位，血紅蛋白肽500g低聚果糖400g，納米硒70mg，葡萄糖酸鋅 50g，葡萄糖酸錳12g、葡萄糖酸銅7g。
[0047] 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的具體制備工藝步驟如下： (1) S0D和血紅蛋白粉的制備： A. 血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血100L，加入新鮮豬血重量0.5% 的檸檬酸鈉做抗凝，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，收集血紅細(xì)胞46L，然后加入血紅 細(xì)胞體積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白溶液92L; B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣:在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至 5.5，然后升溫至60°C，保溫40min，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分 離，得到上清液I61L和血渣122公斤；調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.3，快速升溫至70°C，保溫20min 后，快速降溫至45°C以下，經(jīng)用管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得到上清液Π 45L和血渣 Π 4.2公斤； C. 通過超濾濃縮獲取S0D酶液:將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行 超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至原體積的1/10,得到藍(lán)綠色的S0D酶液4.5L; D. 通過冷凍干燥獲取S0D干凍粉:將S0D酶液進(jìn)行冷凍干燥，得S0D凍干粉4.8g，檢測酶 活力為4260U/mg，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液:將步驟（1 )B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，共計 26.2公斤，加入血渣重量3倍的去離子水溶解并攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.3，按每公斤血渣加 入弱酸性蛋白水解酶4.0克，加熱至55°C，攪拌下保溫酶解8h，將酶解液升溫至85°C滅酶 20min，即得到血紅蛋白酶解液93L; F. 離心分離獲得上清液III:血紅蛋白酶解液經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得 到上清液II187.6L，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液:將上清液I Π 經(jīng)截留分子量為5000Da的超濾 膜裝置進(jìn)行超濾，收集透過液，將收集的超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行 納濾濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，停止?jié)饪s，得到血紅蛋白肽溶液56L; Η.噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉：即將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉10.6 公斤，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 按照配比稱取亞硒酸鈉153mg(即硒含量70mg)，溶于1500mL去離子水中，攪拌下依次加 入低聚果糖15.3g和維生素 C1.53g，50°C攪拌反應(yīng)lh，即制得納米硒溶液，備用； (3) 螯合配制： 按照配比稱取步驟（1)H所制備的血紅蛋白肽粉500g，加去離子水3L溶解攪拌均勻，配 制成質(zhì)量濃度為14.3%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪 拌反應(yīng)1小時，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸鋅50g、葡萄糖酸錳12g和葡萄糖酸銅7g， 不斷攪拌下60°C下保溫反應(yīng)1小時，得到血紅蛋白肽螯合溶液； (4) 噴霧干燥：即將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5) 混配得到SOD納米硒肽組合物:按照配比稱取低聚果糖385g(配方中低聚果糖總量 減去步驟(2)已使用量的余量)和步驟(1)D所制備的SOD凍干粉2000萬活力單位，加入到步 驟(4)所制備的血紅蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得1000g SOD納米硒肽組合物。
[0048] 將上述所得的S0D納米硒肽組合物經(jīng)研磨過100目篩，再經(jīng)輻照滅菌，按照需要量 包裝，可制成粉劑。
[0049 ]服用方法與用量:溫水沖服，成年人每日服用3次，每次0.5g。
[0050] 實施例2: 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的制備方法，其特征在于:所述組合物中含有 S0D、血紅蛋白肽、異麥芽低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，組合物中 各個組分含量為：S0D4000萬活力單位，血紅蛋白肽680g，異麥芽低聚糖200g，納米硒60mg， 葡萄糖酸鋅60g，葡萄糖酸錳15g、葡萄糖酸銅9g。
[0051 ] 這種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物的具體制備工藝步驟如下： (1) S0D和血紅蛋白粉的制備： A. 血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血200L，加入新鮮豬血重量0.5% 的檸檬酸鈉做抗凝，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心收集血紅細(xì)胞89L，然后加入血紅細(xì)胞體 積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白溶液178L; B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣：在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至 5.2，然后升溫至60°C，保溫50min，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分 離，得到上清液1115L和血渣148公斤；調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.3，快速升溫至70 °C，保溫 20min后，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得到上清液II85L和血 渣Π 6.8公斤； C. 通過超濾濃縮獲取SOD酶液:將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行 超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至原體積的1/10,得到藍(lán)綠色的SOD酶液8.2L; D. 通過冷凍干燥獲取SOD凍干粉:將SOD酶液進(jìn)行冷凍干燥，得SOD凍干粉10.3g，檢測酶 單位活力為3890U/mg，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液:收集步驟（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共計 54.8公斤，加入血渣重量4倍的去離子水溶解并攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.2，按每公斤血渣加 入蛋白水解酶5.0克，加熱至55°C，攪拌下保溫酶解6h，將酶解液升溫至85°C滅酶20min，即 得到血紅蛋白酶解液239L; F. 離心分離獲得上清液III:血紅蛋白酶解液經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得 到上清液III228L，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液:將上清液I Π 經(jīng)截留分子量為5〇〇〇Da的超濾 膜裝置進(jìn)行超濾，收集透過液，將收集的超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行 納濾濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，停止?jié)饪s，得到血紅蛋白肽溶液125L; Η.噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉:將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉19.6公 斤，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 按照配比稱取亞硒酸鈉131mg(即硒含量60mg)，溶于1500mL去離子水中，攪拌下依次加 入異麥芽低聚糖13.1g和維生素 C1.31g，50°C攪拌反應(yīng)lh，即制得納米硒溶液，備用； (3) 螯合配制： 按照配比稱取步驟（1)H所制備的血紅蛋白肽粉680g，加去離子水5L溶解攪拌均勻，配 制成質(zhì)量濃度為12.0%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪 拌反應(yīng)1小時，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸鋅60g、葡萄糖酸錳15g和葡萄糖酸銅9g， 不斷攪拌下60°C下保溫反應(yīng)1小時，得到血紅蛋白肽螯合溶液； (4) 噴霧干燥:將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5) 混配得到SOD納米硒肽組合物:按照配比稱取異麥芽低聚糖186.9g(配方中異麥芽 低聚糖總量減去步驟(2)已使用量的余量)和步驟（1)D所制備的SOD凍干粉4000萬活力單 位，加入到步驟(4)所制備的血紅蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得1000gS0D納米硒肽組合 物。
[0052] 將上述所得的S0D納米硒肽組合物經(jīng)研磨過100目篩，再經(jīng)輻照滅菌，按照需要量 包裝，可制成粉劑。
[0053 ]服用方法與用量:溫水沖服，成年人每日服用3次，每次0.5g。
[0054] 實施例3: 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的制備方法，其特征在于:所述組合物中含有 S0D、血紅蛋白肽、異麥芽低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，組合物中 各個組分含量為：S0D6000萬活力單位，血紅蛋白肽380g，低聚木糖480g，納米硒50mg，葡萄 糖酸鋅71g，葡萄糖酸錳20g、葡萄糖酸銅1 lg。
[0055] 這種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物的具體制備工藝步驟如下： (1) S0D和血紅蛋白粉的制備： A.血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血300L，加入新鮮豬血重量0.5% 的檸檬酸鈉做抗凝，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心收集血紅細(xì)胞130L，然后加入血紅細(xì)胞 體積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白溶液260L; B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣：在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至 5.2，然后升溫至60°C，保溫50min，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分 離，得到上清液1175L和血渣162公斤；調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.3，快速升溫至70 °C，保溫 20min后，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得到上清液Π 127L和 血渣Π 11.4公斤； C. 通過超濾濃縮獲取SOD酶液:將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行 超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至原體積的1/10,得到藍(lán)綠色的SOD酶液12.5L; D. 通過冷凍干燥獲得SOD凍干粉:將SOD酶液進(jìn)行冷凍干燥，得SOD凍干粉14.6g，檢測酶 活力為4130U/mg，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液:收集步驟（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共計 73.4公斤，加入血渣重量5倍的去離子水溶解并攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.2，按每公斤血渣加 入弱酸性蛋白水解酶6克，加熱至55°C，攪拌下保溫酶解4h，將酶解液升溫至85°C滅酶 20min，即得到血紅蛋白酶解液382L; F. 離心分離獲得上清液III:血紅蛋白酶解液經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得 到上清液III355L，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液:將上清液經(jīng)截留分子量為5000Da的超濾膜裝 置進(jìn)行超濾，收集透過液，將收集的超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行納濾 濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，停止?jié)饪s，得到血紅蛋白肽溶液185L; Η.噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉:將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉32.7公 斤，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 按照配比稱取亞硒酸鈉109mg(即硒含量50mg)，溶于1000mL去離子水中，攪拌下依次加 入低聚木糖llg和維生素 Cl.lg，50°C攪拌反應(yīng)lh，即制得納米硒溶液，備用； (3) 螯合配制： 按照配比稱取步驟（1)H所制備的血紅蛋白肽粉380g，加去離子水3L溶解攪拌均勻，配 制成質(zhì)量濃度為11.2%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪 拌反應(yīng)1小時，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸鋅71g、葡萄糖酸錳20g和葡萄糖酸銅llg， 不斷攪拌下60°C下保溫反應(yīng)1小時，得到血紅蛋白肽螯合溶液； (4) 噴霧干燥:將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5) 混配得到SOD納米硒肽組合物:按照配比稱取低聚木糖469g(配方中低聚木糖總量 減去步驟(2)已使用量的余量)和步驟（1)D所制備的SOD凍干粉SOD 6000萬活力單位，加入 到步驟(4)所制備的血紅蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得1000g SOD納米硒肽組合物。 [0056] 將上述所得的S0D納米硒肽組合物經(jīng)研磨過100目篩，再經(jīng)輻照滅菌，按照需要量 包裝，可制成粉劑。
[0057]服用方法與用量:溫水沖服，成年人每日服用3次，每次0.5g。
[0058] 以制備1000g S0D納米硒肽組合物含片為例： 實施例4: 這種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物的制備方法，其特征在于:所述組合物中含有 SOD、血紅蛋白肽、低聚果糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，組合物中各個 組分含量為:S0D2000萬活力單位，血紅蛋白肽550g低聚果糖350g，納米硒80mg，葡萄糖酸鋅 70g，葡萄糖酸錳21g、葡萄糖酸銅1 lg。
[0059] 這種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物的具體制備工藝步驟如下： (1) SOD和血紅蛋白粉的制備： A. 血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血100L，加入新鮮豬血重量0.5% 的檸檬酸鈉做抗凝，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，收集血紅細(xì)胞42L，然后加入血紅 細(xì)胞體積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白溶液84L; B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣:在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至 5.5，然后升溫至60°C，保溫40min，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分 離，得到上清液I66L和血渣120公斤；調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.2，快速升溫至70°C，保溫20min 后，快速降溫至45°C以下，經(jīng)用管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得到上清液Π 47L和血渣 Π 5.8公斤； C. 通過超濾濃縮獲取SOD酶液:將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行 超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至原體積的1/10,得到藍(lán)綠色的SOD酶液4.8L; D. 通過冷凍干燥獲取SOD干凍粉:將SOD酶液進(jìn)行冷凍干燥，得SOD凍干粉5.5g，檢測酶 活力為4306U/mg，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液:將步驟（1 )B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，共計 25.8公斤，加入血渣重量3倍的去離子水溶解并攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.5，按每公斤血渣加 入弱酸性蛋白水解酶4.0克，加熱至55°C，攪拌下保溫酶解8h，將酶解液升溫至85°C滅酶 20min，即得到血紅蛋白酶解液87L; F. 離心分離獲得上清液III:血紅蛋白酶解液經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得 到上清液II180L，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液:將上清液Π I：經(jīng)截留分子量為5000Da的超濾 膜裝置進(jìn)行超濾，收集透過液，將收集的超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行 納濾濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，停止?jié)饪s，得到血紅蛋白肽溶液47L; Η.噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉：即將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉9.1 公斤，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 按照配比稱取亞硒酸鈉175mg(即硒含量80mg)，溶于2000mL去離子水中，攪拌下依次加 入低聚果糖17.5g和維生素 C1.75g，50°C攪拌反應(yīng)lh，即制得納米硒溶液，備用； (3) 螯合配制： 按照配比稱取步驟（1)H所制備的血紅蛋白肽粉550g，加去離子水4L溶解攪拌均勻，配 制成質(zhì)量濃度為12.1%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪 拌反應(yīng)1小時，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸鋅70g、葡萄糖酸錳21g和葡萄糖酸銅llg， 不斷攪拌下60°C下保溫反應(yīng)1小時，得到血紅蛋白肽螯合溶液； (4) 噴霧干燥：即將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5) 混配得到SOD納米硒肽組合物:按照配比稱取低聚果糖332.5g(配方中低聚果糖總 量減去步驟(2)已使用量的余量)和步驟（1)D所制備的SOD凍干粉2000萬活力單位，加入到 步驟(4)所制備的血紅蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得1000g SOD納米硒肽組合物。
[0060] 采用常規(guī)的壓片工藝，將上述所得的S0D納米硒肽組合物進(jìn)行壓片成型，制成片 劑，平均每片500mg。
[0061] 服用方法與用量:含服，成年人每日服用3次，每次1片。
[0062] 實施例5: 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的制備方法，其特征在于:所述組合物中含有 S0D、血紅蛋白肽、異麥芽低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，組合物中 各個組分含量為：S0D4000萬活力單位，血紅蛋白肽600g，低聚半乳糖300g，納米硒60mg，葡 萄糖酸鋅65g，葡萄糖酸錳18g、葡萄糖酸銅10g。
[0063] 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的具體制備工藝步驟如下： (1) S0D和血紅蛋白粉的制備： A. 血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血200L，加入新鮮豬血重量0.5% 的檸檬酸鈉做抗凝，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心收集血紅細(xì)胞92L，然后加入血紅細(xì)胞體 積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白溶液184L; B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣：在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至 5.2，然后升溫至60°C，保溫50min，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分 離，得到上清液1111L和血渣147公斤；調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.2，快速升溫至70 °C，保溫 20min后，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得到上清液II87L和血 渣Π 7.5公斤； C. 通過超濾濃縮獲取S0D酶液:將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行 超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至原體積的1/10,得到藍(lán)綠色的S0D酶液9L; D. 通過冷凍干燥獲取S0D凍干粉:將S0D酶液進(jìn)行冷凍干燥，得S0D凍干粉12.4g，檢測酶 單位活力為3620U/mg，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液:收集步驟（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共計 54.5公斤，加入血渣重量4倍的去離子水溶解并攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.2，按每公斤血渣加 入蛋白水解酶5.0克，加熱至55°C，攪拌下保溫酶解6h，將酶解液升溫至85°C滅酶20min，即 得到血紅蛋白酶解液257L; F. 離心分離獲得上清液III:血紅蛋白酶解液經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得 到上清液m246L，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液:將上清液111經(jīng)截留分子量為5000Da的超濾 膜裝置進(jìn)行超濾，收集透過液，將收集的超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行 納濾濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，停止?jié)饪s，得到血紅蛋白肽溶液120L; Η.噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉:將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉21.2公 斤，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 按照配比稱取亞硒酸鈉131mg(即硒含量60mg)，溶于1500mL去離子水中，攪拌下依次加 入低聚半乳糖13.1g和維生素 C1.31g，50°C攪拌反應(yīng)lh，即制得納米硒溶液，備用； (3) 螯合配制： 按照配比稱取步驟（1)H所制備的血紅蛋白肽粉600g，加去離子水4L溶解攪拌均勻，配 制成質(zhì)量濃度為13.0%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪 拌反應(yīng)1小時，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸鋅65g、葡萄糖酸錳18g和葡萄糖酸銅10g， 不斷攪拌下60°C下保溫反應(yīng)1小時，得到血紅蛋白肽螯合溶液； (4) 噴霧干燥:將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5) 混配得到SOD納米硒肽組合物:按照配比稱取低聚半乳糖286.9g(配方中低聚半乳 糖總量減去步驟(2)已使用量的余量)和步驟（1)D所制備的SOD凍干粉4000萬活力單位，加 入到步驟(4)所制備的血紅蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得lOOOgSOD納米硒肽組合物； 采用常規(guī)的壓片工藝，將上述所得的SOD納米硒肽組合物進(jìn)行壓片成型，制成片劑，平 均每片500mg。
[0064] 服用方法與用量:含服，成年人每日服用3次，每次1片。
[0065] 實施例6: 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的制備方法，其特征在于:所述組合物中含有 S0D、血紅蛋白肽、異麥芽低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，組合物中 各個組分含量為：S0D6000萬活力單位，血紅蛋白肽400g，低聚木糖500g，納米硒50mg，葡萄 糖酸鋅50g，葡萄糖酸錳10g、葡萄糖酸銅8g。
[0066] 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的具體制備工藝步驟如下： (1) S0D和血紅蛋白粉的制備： A. 血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血300L，加入新鮮豬血重量0.5% 的檸檬酸鈉做抗凝，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心收集血紅細(xì)胞125L，然后加入血紅細(xì)胞 體積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白溶液250L; B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣：在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至 5.2，然后升溫至60°C，保溫50min，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分 離，得到上清液1179L和血渣160公斤；調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.2，快速升溫至70 °C，保溫 20min后，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得到上清液Π 121L和 血渣Π 13公斤； C. 通過超濾濃縮獲取S0D酶液:將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行 超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至原體積的1/10,得到藍(lán)綠色的S0D酶液12L; D. 通過冷凍干燥獲得S0D凍干粉:將S0D酶液進(jìn)行冷凍干燥，得S0D凍干粉20.2g，檢測酶 活力為3806U/mg，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液:收集步驟（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共計 73公斤，加入血渣重量5倍的去離子水溶解并攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.2，按每公斤血渣加入 弱酸性蛋白水解酶5.5克，加熱至53°C，攪拌下保溫酶解5h，將酶解液升溫至85°C滅酶 20min，即得到血紅蛋白酶解液364L; F. 離心分離獲得上清液III:血紅蛋白酶解液經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得 到上清液II1340L，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液:將上清液經(jīng)截留分子量為5000Da的超濾膜裝 置進(jìn)行超濾，收集透過液，將收集的超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行納濾 濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，停止?jié)饪s，得到血紅蛋白肽溶液200L; Η.噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉:將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉34.5公 斤，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 按照配比稱取亞硒酸鈉109mg(即硒含量50mg)，溶于lOOOmL去離子水中，攪拌下依次加 入低聚木糖llg和維生素 Cl.lg，50°C攪拌反應(yīng)lh，即制得納米硒溶液，備用； (3) 螯合配制： 按照配比稱取步驟（1)H所制備的血紅蛋白肽粉400g，加去離子水3L溶解攪拌均勻，配 制成質(zhì)量濃度為11.8%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪 拌反應(yīng)1小時，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸鋅50g、葡萄糖酸錳10g和葡萄糖酸銅8g， 不斷攪拌下60°C下保溫反應(yīng)1小時，得到血紅蛋白肽螯合溶液； (4) 噴霧干燥:將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5) 混配得到SOD納米硒肽組合物:按照配比稱取低聚木糖489g(配方中低聚木糖總量 減去步驟(2)已使用量的余量)和步驟（1)D所制備的SOD凍干粉SOD 6000萬活力單位，加入 到步驟(4)所制備的血紅蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得1000g SOD納米硒肽組合物。 [0067]采用常規(guī)的壓片工藝，將上述所得的S0D納米硒肽組合物進(jìn)行壓片成型，制成片 劑，平均每片500mg。
[0068]服用方法與用量:含服，成年人每日服用3次，每次1片。
[0069] 以制備1000g S0D納米硒肽組合物膠囊為例： 實施例7: 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的制備方法，其特征在于:所述組合物中含有 S0D、血紅蛋白肽、低聚果糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，組合物中各個 組分含量為:S0D2000萬活力單位，血紅蛋白肽700g異麥芽低聚糖200g，納米硒40mg，葡萄糖 酸鋅60g，葡萄糖酸錳18g、葡萄糖酸銅10g。
[0070] 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的具體制備工藝步驟如下： (1) S0D和血紅蛋白粉的制備： A. 血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血100L，加入新鮮豬血重量0.5% 的檸檬酸鈉做抗凝，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，收集血紅細(xì)胞43L，然后加入血紅 細(xì)胞體積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白溶液96L; B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣:在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至 5.3，然后升溫至60°C，保溫40min，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分 離，得到上清液165L和血渣121.8公斤；調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.2，快速升溫至70 °C，保溫 20min后，快速降溫至45°C以下，經(jīng)用管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得到上清液Π 48L和 血渣Π 4公斤； C. 通過超濾濃縮獲取S0D酶液:將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行 超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至原體積的1/10,得到藍(lán)綠色的S0D酶液4L; D. 通過冷凍干燥獲取S0D干凍粉:將S0D酶液進(jìn)行冷凍干燥，得S0D凍干粉6.2g，檢測酶 活力為3660U/mg，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液:將步驟（1 )B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，共計 25.8公斤，加入血渣重量3倍的去離子水溶解并攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.2，按每公斤血渣加 入弱酸性蛋白水解酶5.0克，加熱至55°C，攪拌下保溫酶解6h，將酶解液升溫至85°C滅酶 20min，即得到血紅蛋白酶解液82L; F. 離心分離獲得上清液III:血紅蛋白酶解液經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得 到上清液III78L，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液:將上清液Η I：經(jīng)截留分子量為5000Da的超濾 膜裝置進(jìn)行超濾，收集透過液，將收集的超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行 納濾濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，停止?jié)饪s，得到血紅蛋白肽溶液51L; Η.噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉：即將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉9.2 公斤，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 按照配比稱取亞硒酸鈉88mg(即硒含量40mg)，溶于lOOOmL去離子水中，攪拌下依次加 入異麥芽低聚糖8.8g和維生素 CO. 88g，50°C攪拌反應(yīng)lh，即制得納米硒溶液，備用； (3) 螯合配制： 按照配比稱取步驟（1)H所制備的血紅蛋白肽粉700g，加去離子水4L溶解攪拌均勻，配 制成質(zhì)量濃度為14.9%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪 拌反應(yīng)1小時，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸鋅60g、葡萄糖酸錳18g和葡萄糖酸銅10g， 不斷攪拌下60°C下保溫反應(yīng)1小時，得到血紅蛋白肽螯合溶液； (4) 噴霧干燥：即將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5) 混配得到SOD納米硒肽組合物:按照配比稱取異麥芽低聚糖191g(配方中異麥芽低 聚糖總量減去步驟(2)已使用量的余量)和步驟（1)D所制備的SOD凍干粉2000萬活力單位， 加入到步驟(4)所制備的血紅蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得1000g SOD納米硒肽組合物。
[0071] 采用常規(guī)的膠囊填充工藝，將上述所得的S0D納米硒肽組合物進(jìn)行膠囊填充，制成 膠囊制劑，平均每粒500mg。
[0072] 服用方法與用量：口服，成年人每日服用3次，每次1粒。
[0073] 實施例8: 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的制備方法，其特征在于:所述組合物中含有 S0D、血紅蛋白肽、異麥芽低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，組合物中 各個組分含量為：S0D4000萬活力單位，血紅蛋白肽480g，低聚木糖400g，納米硒50mg，葡萄 糖酸鋅70g，葡萄糖酸錳20g、葡萄糖酸銅1 lg。
[0074] 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的具體制備工藝步驟如下： (1) S0D和血紅蛋白粉的制備： A. 血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血200L，加入新鮮豬血重量0.5% 的檸檬酸鈉做抗凝，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心收集血紅細(xì)胞94L，然后加入血紅細(xì)胞體 積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白溶液188L; B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣：在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至 5.2，然后升溫至60°C，保溫50min，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分 離，得到上清液1120L和血渣147公斤；調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.2，快速升溫至70 °C，保溫 20min后，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得到上清液II92L和血 渣Π 6.5公斤； C. 通過超濾濃縮獲取SOD酶液:將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行 超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至原體積的1/10,得到藍(lán)綠色的SOD酶液9L; D. 通過冷凍干燥獲取SOD凍干粉:將SOD酶液進(jìn)行冷凍干燥，得SOD凍干粉11.9g，檢測酶 單位活力為4050U/mg，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液:收集步驟（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共計 53.5公斤，加入血渣重量4倍的去離子水溶解并攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.2，按每公斤血渣加 入蛋白水解酶4.0克，加熱至55°C，攪拌下保溫酶解8h，將酶解液升溫至85°C滅酶20min，即 得到血紅蛋白酶解液239L; F. 離心分離獲得上清液III:血紅蛋白酶解液經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得 到上清液III233L，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液:將上清液i |、〖經(jīng)截留分子量為5000Da的超濾 膜裝置進(jìn)行超濾，收集透過液，將收集的超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行 納濾濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，停止?jié)饪s，得到血紅蛋白肽溶液120L; Η.噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉:將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉18.9公 斤，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 按照配比稱取亞硒酸鈉109mg(即硒含量50mg)，溶于1000mL去離子水中，攪拌下依次加 入低聚木糖llg和維生素 Cl.lg，50°C攪拌反應(yīng)lh，即制得納米硒溶液，備用； (3) 螯合配制： 按照配比稱取步驟（1)H所制備的血紅蛋白肽粉480g，加去離子水3L溶解攪拌均勻，配 制成質(zhì)量濃度為13.8%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪 拌反應(yīng)1小時，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸鋅70g、葡萄糖酸錳20g和葡萄糖酸銅llg， 不斷攪拌下60°C下保溫反應(yīng)1小時，得到血紅蛋白肽螯合溶液； (4) 噴霧干燥:將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5) 混配得到SOD納米硒肽組合物:按照配比稱取低聚木糖389g(配方中低聚木糖總量 減去步驟(2)已使用量的余量)和步驟(1)D所制備的SOD凍干粉4000萬活力單位，加入到步 驟(4)所制備的血紅蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得1000gS0D納米硒肽組合物。
[0075]采用常規(guī)的膠囊填充工藝，將上述所得的S0D納米硒肽組合物進(jìn)行膠囊填充，制成 膠囊制劑，平均每粒500mg。
[0076] 服用方法與用量：口服，成年人每日服用3次，每次1粒。
[0077] 實施例9: 這種抗氧化抗衰老S0D納米硒肽組合物的制備方法，其特征在于:所述組合物中含有 S0D、血紅蛋白肽、異麥芽低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，組合物中 各個組分含量為：S0D6000萬活力單位，血紅蛋白肽400g，低聚果糖500g，納米硒60mg，葡萄 糖酸鋅62g，葡萄糖酸錳15g、葡萄糖酸銅9g。
[0078] 這種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物的具體制備工藝步驟如下： (1) S0D和血紅蛋白粉的制備： A.血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血300L，加入新鮮豬血重量0.5% 的檸檬酸鈉做抗凝，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心收集血紅細(xì)胞138L，然后加入血紅細(xì)胞 體積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白溶液276L; B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣：在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至 5.2，然后升溫至60°C，保溫50min，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分 離，得到上清液1180L和血渣160公斤；調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.5，快速升溫至70 °C，保溫 20min后，快速降溫至45°C以下，經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得到上清液Π 132L和 血渣Π 11公斤； C. 通過超濾濃縮獲取SOD酶液:將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行 超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至原體積的1/10,得到藍(lán)綠色的SOD酶液13L; D. 通過冷凍干燥獲得SOD凍干粉:將SOD酶液進(jìn)行冷凍干燥，得SOD凍干粉16. lg，檢測酶 活力為4080U/mg，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液:收集步驟（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共計 71公斤，加入血渣重量4倍的去離子水溶解并攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.2，按每公斤血渣加入 弱酸性蛋白水解酶5克，加熱至55°C，攪拌下保溫酶解6h，將酶解液升溫至85°C滅酶20min， 即得到血紅蛋白酶解液405L; F. 離心分離獲得上清液III:血紅蛋白酶解液經(jīng)管式離心機(jī)16300r/mim離心分離，得 到上清液II1370L，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液:將上清液經(jīng)截留分子量為5000Da的超濾膜裝 置進(jìn)行超濾，收集透過液，將收集的超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行納濾 濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，停止?jié)饪s，得到血紅蛋白肽溶液172L; Η.噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉:將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉29.6公 斤，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 按照配比稱取亞硒酸鈉131mg(即硒含量60mg)，溶于1500mL去離子水中，攪拌下依次加 入低聚果糖13.1g和維生素 C1.3g，50°C攪拌反應(yīng)lh，即制得納米硒溶液，備用； (3) 螯合配制： 按照配比稱取步驟（1)H所制備的血紅蛋白肽粉400g，加去離子水3L溶解攪拌均勻，配 制成質(zhì)量濃度為11.8%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪 拌反應(yīng)1小時，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸鋅62g、葡萄糖酸錳15g和葡萄糖酸銅9g， 不斷攪拌下60°C下保溫反應(yīng)1小時，得到血紅蛋白肽螯合溶液； (4) 噴霧干燥:將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5) 混配得到SOD納米硒肽組合物:按照配比稱取低聚果糖486.9g(配方中低聚果糖總 量減去步驟(2)已使用量的余量)和步驟（1)D所制備的SOD凍干粉SOD 6000萬活力單位，加 入到步驟(4)所制備的血紅蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得1000g SOD納米硒肽組合物。
[0079] 采用常規(guī)的膠囊填充工藝，將上述所得的S0D納米硒肽組合物進(jìn)行膠囊填充，制成 膠囊制劑，平均每粒500mg。
[0080] 服用方法與用量：口服，成年人每日服用3次，每次1粒。
[0081] 對上述實施例1、2、3得到的成品進(jìn)行寡肽含量、肽分子量大小以及功效檢測： 寡肽含量及肽分子量大小檢測:寡肽含量檢測采用日立L-8800型氨基酸自動分析儀， 肽的分子大小采用高效凝膠過濾色譜(HPLC)法測定，以已知分子量蛋白質(zhì)做參照，結(jié)果如 表1:
從表1中可以看出，產(chǎn)品中分子量小于2000Da的寡肽占蛋白肽總量的比例在90%以上， 其中相對分子量在180-1 OOODa的小分子肽組分占蛋白肽總量的比例在65%以上。
[0082]產(chǎn)品抗氧化抗衰老的功效檢測： 小鼠口服本發(fā)明SOD納米硒肽組合物對體內(nèi)抗氧化指標(biāo)影響的試驗： 以實施例1、2、3所得的SOD納米硒肽組合物為試驗樣品A、B、C。
[0083]選用雌性昆明小鼠55只，體重18-22克，隨機(jī)分為正常對照組、衰老模型組、A試劑 組、B試劑組和C試劑組，每組11只。小鼠每天皮下注射D-半乳糖1次，劑量120mg/kg.bw，連續(xù) 8周，造成小鼠衰老模型。注射D-半乳糖2周后開始給予受試藥物，試劑組每日灌胃200mg/ kg. bw試驗樣品，正常對照組每日灌胃給予等重量蒸餾水，衰老模型組每日注射D-半乳糖 120mg/kg.bw，直至實驗結(jié)束后，采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒并按照試劑盒 說明書介紹的方法進(jìn)行相關(guān)生化指標(biāo)的檢測。
[0084] 結(jié)果如表2、表3、表4:
從表2中可以看出，各試劑組小鼠血清總S0D酶活力水平明顯高于正常對照組和模型對 照組，即本發(fā)明S0D納米硒肽組合物能顯著提高造模小鼠血清總S0D酶活力(P<0.05SP< 0.0!.)〇
從表3中可以看出，試劑組小鼠血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力明顯高于正常 對照組和模型對照組，即本發(fā)明SOD納米硒肽組合物能顯著提高造模小鼠血清GSH-Px活力 (P<0.05)〇
[0085]
從表4中可以看出，試劑組小鼠血清丙二醛(MDA)含量與模型對照組比較有明顯差異， 即本發(fā)明S0D納米硒肽組合物能顯著降低小鼠血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05)。
[0086] 人體口服本發(fā)明SOD納米硒肽組合物對降低體內(nèi)丙二醛(MDA)含量的試驗： 丙二醛(MDA)是氧自由基(Of)攻擊細(xì)胞質(zhì)膜，生成脂質(zhì)過氧化物并進(jìn)一步分解的最終 代謝產(chǎn)物，丙二醛(MDA)具有很強(qiáng)的生物毒性，是人體衰老的主要指標(biāo)，MDA的含量與氧自由 基(〇2 ·)濃度呈正相關(guān)的關(guān)系。
[0087] 試驗方案：以年齡在40歲以上的88人為臨床試驗對象，試驗組1、試驗組2、試驗組3 和對照組各22人。其中試驗組1服用實施例1得到的S0D納米硒肽組合物，試驗組2服用實施 例2得到的S0D納米硒肽組合物，試驗組3服用實施例3得到的S0D納米硒肽組合物，對照組不 服用任何產(chǎn)品。
[0088] 服用方法和劑量:餐后1小時溫水送服，服用0.5g。
[0089]檢測方法:采用日本LP0 Kit氧化值速測液進(jìn)行快速檢測，取人體口服S0D納米硒 肽組合物前的尿液lml滴入裝有測試劑的安瓶中，5min后觀察尿液反應(yīng)液的顏色，同樣方法 取人體服用S0D納米硒肽組合物2h后的尿液lml滴入裝有測試劑的安瓶中，5min后觀察尿液 反應(yīng)液的顏色，比較口服組合物前、后尿液反應(yīng)液顏色的差異。尿液反應(yīng)液的顏色越深越 紅，說明丙二醛含量越多，機(jī)體內(nèi)的自由基含量亦越高。
[0090] 評判標(biāo)準(zhǔn):根據(jù)顯效、有效和無效三個標(biāo)準(zhǔn)來評判。顯效為口服S0D納米硒肽組合 物后尿液反應(yīng)液的顏色比服用前的顏色明顯變淡，二者有肉眼可區(qū)分的顯著差異，例如服 用前為紅色或深紅色，服用后為白色或淺白色;有效為服用后的顏色比服用前的顏色稍許 變淺變淡，二者有肉眼可辨別的差異;無效為服用前、后尿液反應(yīng)液的顏色基本上無差異或 者無肉眼可辨別的差異或者服用后的顏色比服用前的顏色變得更深。
[0091]試驗結(jié)果:所有臨床試驗對象在服用S0D納米硒肽組合物之前的尿液反應(yīng)液顏色 均呈現(xiàn)出紅色至深紅色，表明體內(nèi)丙二醛(MDA)含量高，自由基含量多。服用S0D納米硒肽組 合物2小時之后，絕大多數(shù)試驗對象的尿液反應(yīng)液顏色變成淺白色，表明體內(nèi)自由基已大量 地被清除，體內(nèi)丙二醛(MDA)含量減少，比如臨床試驗對象陳先生在服用之前尿液反應(yīng)液的 顏色為深紅色，服用2小時后尿液反應(yīng)液為淺白色，試驗對象王先生在服用之前尿液反應(yīng)液 的顏色為粉紅色，服用2小時后尿液反應(yīng)液呈白色，試驗對象郭先生在服用之前尿液反應(yīng)液 的顏色為紅色，服用2小時后尿液反應(yīng)液為淡紅色。本次臨床試驗總有效率達(dá)到90%以上， 結(jié)果見表5:
通過人體臨床試驗可知，本發(fā)明S0D納米硒肽組合物具有良好的體內(nèi)清除自由基、抗氧 化、抗衰老的功效。
【主權(quán)項】
1. 一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物，其特征在于：所述組合物中含有SOD、血紅 蛋白肽、低聚糖、納米硒、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅，每l〇〇g組合物中各個組分 含量為： S0D150-650萬活力單位， 血紅蛋白肽35-70g， 低聚糖15-50g， 納米硒4_8mg， 葡萄糖酸鋅5000-7200mg， 葡萄糖酸猛l〇〇〇_2200mg， 葡萄糖酸銅600_1200mg。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物，其特征在于:所述的 SOD是豬血紅細(xì)胞提取物。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物，其特征在于:所述的 血紅蛋白肽是豬血紅蛋白酶解物，含有60%以上的活性小分子肽，所述活性小分子肽的相對 分子量為180-1000Da。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物，其特征在于:所述的 低聚糖為低聚果糖、異麥芽低聚糖、低聚半乳糖或低聚木糖中的任一種。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物，其特征在于:所述的 納米硒包括低聚糖納米微球模板和富集在其上的納米硒。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物，其特征在于:所述的 低聚糖為低聚果糖、異麥芽低聚糖、低聚半乳糖或低聚木糖中的任一種。7. -種權(quán)利要求1-6任一項所述的抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物的制備方法，其特 征在于:主要包括有以下工藝步驟： (1) SOD和血紅蛋白粉的制備： A. 血紅蛋白溶液的制備:采集經(jīng)過檢驗合格的新鮮豬血，加入檸檬酸鈉做抗凝處理， 離心收集血紅細(xì)胞，然后加入血紅細(xì)胞體積1倍的去離子水，不斷攪拌溶血lh，得血紅蛋白 溶液； B. 通過熱變性反應(yīng)收集上清液、血渣： 即在攪拌下用檸檬酸調(diào)節(jié)血紅蛋白溶液PH值至5.2-5.5,然后升溫至60°C，保溫30-50min，快速降溫至45°C以下，以轉(zhuǎn)速>10000r/min進(jìn)行離心分離，分別收集上清液I和血渣 I;用氫氧化鈉調(diào)節(jié)上清液I pH值至6.2~6.5，快速升溫至70°C，保溫10_20min后，快速降溫 至45°C以下，以轉(zhuǎn)速> 10000r/min進(jìn)行離心分離，分別收集上清液Π 和血渣Π ; C. 通過超濾濃縮獲取SOD酶液： 即將上清液Π 用截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行超濾濃縮，脫除鹽分，濃縮至 原體積的1/10，得到藍(lán)綠色的SOD酶液； D. 通過冷凍干燥獲取SOD凍干粉： 即將SOD酶液進(jìn)行冷凍干燥，得SOD凍干粉，檢測SOD酶活力，備用； E. 通過酶解制得血紅蛋白酶解液： 將步驟B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，加入兩血渣重量3-5倍的去離子水溶解并攪 拌均勻，調(diào)節(jié)pH值至6.0~6.5，按每公斤血渣加入蛋白水解酶3.0-6.0克，加熱至50-55 °C， 攪拌下保溫酶解4_8h，將酶解液升溫至85 °C滅酶20分鐘，即得到血紅蛋白酶解液； F. 離心分離獲得上清液m: 將血紅蛋白酶解液進(jìn)行高速離心，離心轉(zhuǎn)速> 10000r/min，收集上清液ΙΠ ，去除沉淀； G. 通過納濾濃縮獲得血紅蛋白肽溶液： 即將上清液m經(jīng)截留分子量為5000Da的超濾膜裝置進(jìn)行超濾，收集透過液;將收集的 超濾透過液，用截留分子量為200Da的納濾膜進(jìn)行納濾濃縮，當(dāng)濃縮液固形物含量達(dá)到15-20%時，收集濃縮液，得到血紅蛋白肽溶液； H. 噴霧干燥獲得血紅蛋白肽粉： 即將血紅蛋白肽溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽粉，備用； (2) 納米硒溶液的制備： 稱取亞硒酸鈉溶于去離子水中，攪拌下依次加入低聚糖和維生素 C，50°C攪拌反應(yīng)lh， 即制得納米硒溶液； (3) 螯合配制： 取步驟（1)所制備的血紅蛋白肽粉，加去離子水溶解攪拌均勻，配制成質(zhì)量濃度為10-20%的血紅蛋白肽溶液，加入步驟(2)所制備的納米硒溶液，在50 °C下攪拌反應(yīng)1小時，然后 依次加入葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳和葡萄糖酸銅，在60°C下繼續(xù)攪拌反應(yīng)1小時，得到血紅 蛋白肽螯合溶液;其中血紅蛋白肽、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸錳和葡萄糖酸銅的添加量均為配 比的重量； (4) 噴霧干燥： 即將血紅蛋白肽螯合溶液噴霧干燥，得血紅蛋白肽螯合粉，備用； (5) 混配得到SOD納米硒肽組合物： 即按配比稱取低聚糖和步驟（1)D中所制備的SOD凍干粉，加入到步驟(4)所制備的血紅 蛋白肽螯合粉中，混合均勻，即得SOD納米硒肽組合物。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物的制備方法，其特征在 于:步驟(1 )A中所述檸檬酸鈉為食品級檸檬酸鈉，添加量為新鮮豬血重量的0.5%。9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物的制備方法，其特征在 于：步驟（1)E中所述的蛋白酶為來源于米曲霉的弱酸性蛋白酶，酶活力為390000-430000HU/g〇10. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物的制備方法，其特征 在于：步驟（2)所述亞硒酸鈉的使用量為配比中硒的量換算成相應(yīng)的亞硒酸鈉（硒含量為 45.65%)的重量，低聚糖、亞硒酸鈉和維生素 C的混合質(zhì)量比為100:1:10。11. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物的制備方法，其特征 在于:步驟(5)所述低聚糖的添加量為配比中低聚糖總量減去步驟(2)所添加的低聚糖量之 后的余量。12. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗氧化抗衰老SOD納米硒肽組合物的應(yīng)用，其特征在于： 該組合物可制成藥劑學(xué)上的常規(guī)內(nèi)服制劑:如粉劑、片劑或膠囊劑。
【文檔編號】A23L33/10GK105996009SQ201610484776
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年6月29日
【發(fā)明人】陳石良
【申請人】陳石良