專利名稱：長效環(huán)孢素眼內釋藥體系的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種體內植入藥物制劑，特別涉及到一種以生物降解高分子材料作為藥物載體的長效環(huán)孢素眼內釋藥體系。
免疫排斥反應是導致同種異體器官和組織移植失敗的首要原因。目前，糖皮質激素是防治如角膜移植等組織移植排斥反應的主要手段，但長期應用糖皮質激素不僅可導致多種并發(fā)癥，而且往往不能有效地抑制高危角膜移植術后的排斥反應。
環(huán)孢素A(Circlosporin A，CsA，以下簡稱環(huán)孢素)是第三代免疫抑制劑，其特點是高效，無骨髓毒性，CsA是選擇性免疫抑制劑，主要抑制某些T淋巴細胞和B淋巴細胞的增殖。其全身或局部用藥對降低角膜移植術后的免疫排斥反應和治療某些自身免疫性眼病的療效已得到公認。但是，CsA全身用藥不僅價格昂貴，而且可能引起肝、腎臟毒性損害及高血壓等并發(fā)癥，使其應用受到限制(Palestine AG.，Am.J.Ophthalmo1.，1985，99∶210)。
體內植入藥物制劑是一種新型的藥物制劑，具有不受體液沖洗、稀釋的影響，用藥量極少，且能長時間在體內緩慢釋放藥物的特點；特別是對藥物吸收困難的部位，能達到很高的用藥效果。藥物緩釋系統(tǒng)的出現，正受到全世界的矚目。然而由于藥物載體的問題一直沒有解決，因此迄今為止，具有長期釋藥功能的環(huán)孢素體內植入制劑還不能問世。
眼內植入藥物制劑主要由藥物及藥物載體二種成分組成。藥物載體對藥物的釋放起保護和控制速度的作用，從而達到可以在眼內長期釋放的效果(Jani P.，J.Pharm.Pharmacol.，1990，41∶821)。藥物載體必須對藥物具有一定的通透性，同藥物不發(fā)生相互作用，此外，由于藥物制劑是長期植入眼內進行藥物釋放的，因此藥物制劑必須具有對機體很好的生物相容性，不對機體產生炎癥、刺激、致敏等作用。能滿足這樣的藥物載體材料又可分為生物惰性高分子及生物降解型高分子材料兩類。硅橡膠、聚氨酯等都是在醫(yī)學領域得到廣泛應用的生物惰性高分子材料，具有良好的生物相容性，已被應用于制備心臟瓣膜介入治療插管等，同時也已被用于長效避孕藥等緩釋藥物的藥物載體。然而用這類生物惰性材料作為藥物載體時，雖然可以維持藥物的長期緩釋效果，且不會對機體產生致炎、刺激和致敏等生物相容性的問題，但是由于隨著時日的增加，藥劑中含藥量的不斷減少，藥物釋放速度及釋放量也會不斷下降，因此藥物的釋放劑量隨時間在不斷減少，因此無法保證恒定的藥物劑量；此外由于這些材料的生物惰性，在體內還不會發(fā)生變化，因此在藥物釋放完后，還必須再從體內取出，以免作為異物留在體內會產生不良的影響。
另一類是生物降解型高分子藥物載體。生物降解型高分子藥物載體在藥物釋放的同時，由于體內的生理環(huán)境(體溫、體液、酶等)的作用，載體材料也被不斷降解，分子量變小，結構變得疏松，以至最終降解為小分子或單體，被機體吸收或代謝，因此用這樣的材料為藥物載體，當藥物釋放完后可以不用再手術取出。此外，由于材料隨著降解，結構變得疏松且使藥物更易從中釋放出來，因而有使藥物釋放量增加的趨勢。當由于含藥物的減少所引起的藥物釋放劑量的減少與由降解引起的藥物釋放量增加的量相一致時，就可以實現藥物的恒速釋放，這是用生物惰性高分子為藥物載體時所不可能實現的藥物釋放行為(王身國，化學通報1997，2∶45)。
近年來，已有用膠原為載體的環(huán)孢素釋放體系(Chen YF等，Am JOphthalmol，1990，15；109-132)，以脂質體為載體的環(huán)孢素釋放體系(PleyerU等，Curr Eye Res，1994，13∶177)等眼用藥物釋放體系研究報道，表明可以在一定程度上達到藥物持續(xù)釋放，減少給藥劑量和次數，提高藥物生物利用度，且降低毒性的效果。然而它們的持續(xù)釋藥時間都較短，或對視力有一定的影響(如膠原體)，或價格昂貴(如脂質體)，此外，由于易受淚液沖洗稀釋的影響而使藥物喪失，因此藥效短。
本發(fā)明的目的在于克服上述已有技術中持續(xù)時間較短、且藥效短的缺點而提供一種長效環(huán)孢素釋放體系。
本發(fā)明的環(huán)孢素釋放體系包括藥物和藥物載體，二者按重量比為0.1∶0.9～0.9∶0.1。所述的藥物載體為具有良好的生物相容性、具有一定的強度、硬度和彈性的合成生物降解高分子材料、天然生物降解高分子材料、或合成生物降解高分子材料同天然生物降解高分子材料的共混物為藥物載體。藥物釋放體系在藥物釋放完前可保持一定的強度、彈性和形狀，而在體內的生理條件下可以自然降解、從而被吸收或通過代謝而排出體外，因此既不會成為異物對機體產生刺激，也不會使機體產生異物反應，因此不需要再行二次手術將其取出。上述的合成生物降解高分子材料可為脂肪族聚酯類高分子，它們可以是聚L-乳酸(PLLA)、聚DL-乳酸(PDLLA)、共聚(L-乳酸/DL-乳酸)(PLLA-co-PDLLA)、聚乙醇酸(PGA)、共聚(乳酸/乙醇酸)(PLGA)、聚己內酯(PCL)、(乙醇酸/乳酸/己內酯)三元共聚物(PLGC)、聚己內酯/聚醚嵌段共聚物(PCE)、聚己內酯/聚醚/聚乳酸三元共聚物(PCEL)，以及其它聚羥基酸(PHA)。上述的天然生物降解高分子材料可為殼聚糖、明膠，或它們的共混物。
所述的藥物載體可以為膜狀、片狀、粒狀、塊狀、條狀。它由上述天然或合成的生物降解高分子的無紡織物，也可以是由上述的合成或天然生物降解高分子材料的海綿體。上述的藥物載體孔結構的大小和密度由控制溶液揮發(fā)速度的方法、或控制致孔劑量的方法、或通過控制織物密度的方法進行控制。
所述的環(huán)孢素釋放體系可以是無孔，或具有相互連通的孔結構，其孔徑大小為10納米-500微米。
本發(fā)明的環(huán)孢素釋放體系是長效環(huán)孢素釋放體系，釋藥周期為一周到一年；具有不受淚液沖洗、稀釋的影響，用藥量極少，且能長時間在眼內緩慢釋放藥物的特點；對于藥物吸收困難的部位，能達到很高的用藥效果?？捎糜谘劭祁A防和治療高危角膜移植后的排斥反應，同時也可用于慢性葡萄膜炎、白塞氏病等眼科自身免疫性疾病。
實施例1、共聚(乳酸/乙醇酸)(PLGA)(分子量11萬)5份，用二氯甲烷20份溶解后加入環(huán)孢素粉末5份，攪拌均勻后注入聚四氟乙烯模具，控制氣流速度，使二氯甲烷揮發(fā)。待完全干燥后，將此含有環(huán)孢素的共聚(乳酸/乙醇酸)藥物釋放體系從聚四氟乙烯模具上取下，在室溫真空烘箱內保持48小時以完全除盡溶劑，得到厚度為2毫米、呈10納米小孔結構的片狀藥劑，再用孔徑為2毫米的沖模沖成厚為2毫米、直徑為2毫米的環(huán)孢素制劑。將此環(huán)孢素制劑用環(huán)氧乙烷熏蒸24小時滅菌消毒、再放置1周后植入兔眼的前房。
術后的肉眼觀察和局部組織病理學檢查結果表明前房無炎癥反應；角膜、晶狀體透明度和虹膜反應正常未發(fā)現有角膜水腫、虹膜新生血管、萎縮或壞死的現象，且晶狀體保持透明；眼壓也正常，手術前后無變化。此外，從局部組織病理學檢查結果所表明的環(huán)孢素釋放體系所在部位的虹膜、角膜無明顯炎性細胞浸潤、無組織變性及壞死表現，以及環(huán)孢素釋放體系所在部位的房角與正常房角結構無明顯區(qū)別，證明環(huán)孢素釋放體系的眼內生物相容性良好。
此外，在環(huán)孢素釋放制劑植入后的8周內，房水中一直維持有一定濃度的環(huán)孢素，未受淚液沖洗、稀釋的影響，有效地防止了高危角膜移植排斥反應。而在血液中檢測不到有環(huán)孢素的存在，避免了環(huán)孢素對腎臟的毒性損害及引起高血壓等并發(fā)癥。此環(huán)孢素釋放制劑在植入的8周后完全消失，可以不用再取出。
實施例2、按實施例1的方法與步驟，但采用聚DL-乳酸(PDLLA)(分子量6萬)3份、二氯甲烷20份和環(huán)孢素7份、制孔劑15份制得直徑為2毫米的藥棒，在清除制孔劑后得到直徑為2毫米、孔結構為10微米的藥棒，在室溫真空烘箱內保持48小時以完全除盡溶劑后再截成2毫米長的環(huán)孢素釋放制劑。將此環(huán)孢素制劑用環(huán)氧乙烷熏蒸24小時滅菌消毒、再放置1周后同實施例1方法植入兔眼的前房。術后的肉眼觀察和局部組織病理學檢查結果表明環(huán)孢素釋放體系有良好的眼內生物相容性，植入后的14周內環(huán)孢素可在房水中維持一定濃度，而在血液中檢測不到有環(huán)孢素存在，14周后環(huán)孢素制劑完全消失，可以不用再取出。
實施例3、按實施例1的方法與步驟，但采用(按中國發(fā)明專利申請?zhí)?9105984.0方法制備的)(乙醇酸/乳酸/己內酯)三元共聚物(PGLC)(分子量8萬)3份、二氯甲烷18份和環(huán)孢素9份、制孔劑24份制得各邊長為10毫米的塊狀物，在清除制孔劑后得到直徑為2毫米、孔結構為100微米的藥棒，在室溫真空烘箱內保持48小時以完全除盡溶劑后再裁成2毫米見方的環(huán)孢素釋放制劑。將此環(huán)孢素制劑用環(huán)氧乙烷熏蒸24小時滅菌消毒、再放置1周后同實施例1方法植入兔眼的前房。
術后的肉眼觀察和局部組織病理學檢查結果表明環(huán)孢素釋放體系有良好的眼內生物相容性，植入后的10周內環(huán)孢素可在房水中維持一定濃度，而在血液中檢測不到有環(huán)孢素存在，10周后環(huán)孢素制劑完全消失，可以不用再取出。
實施例4、與實施例1相同方法與步驟，但采用(按中國發(fā)明專利ZL 92113100.3方法制備的)聚己內酯/聚醚嵌段共聚物(PCE)(分子量8萬)制備，得到孔結構大小為10納米的環(huán)孢素制劑，在用環(huán)氧乙烷熏蒸24小時滅菌消毒、再放置1周后植入兔眼的前房。
術后的肉眼觀察和局部組織病理學檢查結果表明環(huán)孢素釋放體系有良好的眼內生物相容性，植入后的一年內環(huán)孢素可在房水中維持一定濃度，而在血液中檢測不到有環(huán)孢素存在，一年后環(huán)孢素制劑完全消失，可以不用再取出。
實施例5、與實施例1相同方法與步驟，但采用(按中國發(fā)明專利申請?zhí)?8102212X方法制備的)聚己內酯/聚醚/聚乳酸三元共聚物(PCEL)(分子量9萬)制備，得到孔結構大小為50納米的環(huán)孢素制劑，在用環(huán)氧乙烷熏蒸24小時滅菌消毒、再放置1周后植入兔眼的前房。
術后的肉眼觀察和局部組織病理學檢查結果表明環(huán)孢素釋放體系有良好的眼內生物相容性，植入后的30周內環(huán)孢素可在房水中維持一定濃度，而在血液中檢測不到有環(huán)孢素存在，40周后環(huán)孢素制劑完全消失，可以不用再取出。
實施例6、與實施例2相同方法與步驟，按實施例4的方法與步驟，但采用聚L-乳酸(PLLA)(分子量6萬)(95％重量)與甲殼質(5％重量)的混合物制備，得到孔結構大小為15微米的環(huán)孢素制劑，在用環(huán)氧乙烷熏蒸24小時滅菌消毒、再放置1周后植入兔眼的前房。
術后的肉眼觀察和局部組織病理學檢查結果表明環(huán)孢素釋放體系有良好的眼內生物相容性，植入后的50周內環(huán)孢素可在房水中維持一定濃度，而在血液中檢測不到有環(huán)孢素存在，一年后環(huán)孢素制劑完全消失，可以不用再取出。
實施例7、同實施例6的方法與步驟，但采用聚DL-乳酸(PDLLA)(分子量6萬)(95％重量)與膠原(5％重量)的混合物制備，得到孔結構大小為10微米的環(huán)孢素制劑，在用環(huán)氧乙烷熏蒸24小時滅菌消毒、再放置1周后植入兔眼的前房。
術后的肉眼觀察和局部組織病理學檢查結果表明環(huán)孢素釋放體系有良好的眼內生物相容性，植入后的20周內環(huán)孢素可在房水中維持一定濃度，而在血液中檢測不到有環(huán)孢素存在，20周后環(huán)孢素制劑完全消失，可以不用再取出。
實施例8、同實施例1的方法與步驟，將環(huán)孢素藥片裁成厚為2毫米、寬為5毫米、長為30毫米的環(huán)孢素制劑。將此環(huán)孢素制劑用環(huán)氧乙烷熏蒸24小時滅菌消毒、再放置1周后植入兔的腎后部。
術后的肉眼觀察和局部組織病理學檢查結果表明無炎癥反應、水腫、新生血管、萎縮或壞死的現象，且血壓正常，手術前后無變化。證明環(huán)孢素釋放體系的體內生物相容性良好。血液檢測結果表明，在血液中無環(huán)孢素存在，因此可以避免環(huán)孢素對腎臟的毒性損害及引起高血壓等并發(fā)癥。此環(huán)孢素釋放制劑在植入的10周后完全消失，可以不用再取出。
對照例1以聚氨酯為載體、完全按實例3的制法、用量及步驟制備環(huán)孢素釋放體系。術后肉眼觀察和局部組織病理學檢查表明環(huán)孢素釋放體系有良好的眼內生物相容性，植入后的15周內可維持環(huán)孢素在房水為一定濃度，且在血液中檢測不到有環(huán)孢素存在；到六個月時房水中也檢測不到有環(huán)孢素存在。但術后一年制劑仍存在于前房之中，并且外型、大小和強度無變化，因此必須再手術取出。
對照例2高危角膜移植大鼠10只，術后1％環(huán)孢素滴眼液滴眼，每日4次。排斥反應時間只為10.6±1.90天。
權利要求
1.一種長效環(huán)孢素釋放體系，包括環(huán)孢素和藥物載體，二者的重量比為0.1∶0.9～0.9∶0.1，所述的藥物載體為合成生物降解高分子材料、天然生物降解高分子材料、或合成生物降解高分子材料同天然生物降解高分子材料的共混物。
2.按照權利要求1所述的長效環(huán)孢素釋放體系，其中，所述的合成生物降解高分子材料為脂肪族聚酯類高分子，所述的天然生物降解高分子材料為殼聚糖、和/或明膠。
3.按照權利要求2所述的長效環(huán)孢素釋放體系，其中，所述的脂肪族聚酯類高分子是聚羥基酸(PHA)。
4.按照權利要求2所述的長效環(huán)孢素釋放體系，其中，所述的脂肪族聚酯類高分子是聚L-乳酸、聚DL-乳酸、共聚(L-乳酸/DL-乳酸)、聚乙醇酸、共聚(乳酸/乙醇酸)、聚己內酯、(乙醇酸/乳酸/己內酯)三元共聚物、聚己內酯/聚醚嵌段共聚物、和/或聚己內酯/聚醚/聚乳酸三元共聚物。
5.按照權利要求1所述的長效環(huán)孢素釋放體系，其特征在于，所述的長效環(huán)孢素釋放體系具有相互連通的孔結構，其孔徑大小為10納米-500微米。
6.按照權利要求1所述的長效環(huán)孢素釋放體系，其特征在于，所述的藥物載體為膜狀、片狀、粒狀、塊狀、或條狀。
7.按照權利要求1所述的長效環(huán)孢素釋放體系，其特征在于，所述的載體為上述天然或合成的生物降解高分子的無紡織物，或者是由上述的合成或天然生物降解高分子材料制成的海綿體。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種長效環(huán)孢素釋放體系,包括環(huán)孢素和藥物載體,二者的重量比為0.1∶0.9—0.9∶0.1。藥物載體為合成生物降解高分子材料、天然生物降解高分子材料、或合成生物降解高分子材料同天然生物降解高分子材料的共混物。本發(fā)明的長效環(huán)孢素釋放體系釋藥周期為一周到一年,可用于眼科預防和治療高危角膜移植后的排斥反應,同時也可用于慢性葡萄膜炎、白塞氏病等眼科自身免疫性疾病。
文檔編號A61K38/13GK1340358SQ0012286
公開日2002年3月20日 申請日期2000年8月30日 優(yōu)先權日2000年8月30日
發(fā)明者王身國, 謝立信, 貝建中, 史偉云 申請人:中國科學院化學研究所, 山東省眼科研究所