專利名稱：雷諾嗪緩釋制劑的制作方法
背景技術(shù)：
本申請是待批美國專利申請No.09/321,522(申請日1999年5月27日)的部分繼續(xù)申請，后者要求了1998年9月10日提交的美國臨時專利申請No.6/099804的優(yōu)先權(quán)。
1.發(fā)明的領(lǐng)域本發(fā)明涉及用口服給藥的雷諾嗪緩釋口服制劑維持人的雷諾嗪血漿水平于治療水平的方法。
2.現(xiàn)有技術(shù)的描述美國專利No.4,567,264(其說明書引入此處作為參考)公開了雷諾嗪((±)-N-(2，6-二甲基苯基)-4-[2-羥基-3-(2-甲氧基苯氧基)-丙基]-1-哌嗪乙酰胺)，其藥學(xué)上可接受的鹽，及其在治療心血管疾病(包括心律失常、變異型和運動誘發(fā)性心絞痛及心肌梗塞)上的應(yīng)用。
美國專利No.5,506,229(其說明書引入此處作為參考)公開了雷諾嗪及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯用于治療經(jīng)受物理或化學(xué)損傷的組織(包括心麻痹、缺氧或?qū)π呐K、骨骼肌或腦組織的再灌注損傷)和用于移植，公開了常規(guī)口服和非胃腸道制劑，包括控釋制劑。特別是，美國專利No.5,506,229的實施例7D公開了一種膠囊形式的控釋制劑，包含被覆控釋聚合物的微球形雷諾嗪和微晶型纖維素。
雷諾嗪及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯目前較佳的給藥途徑是口服。典型的口服劑型是壓制片劑、充填粉末混合物或顆粒的明膠硬膠囊，或充填溶液或懸浮液的明膠軟膠囊。美國專利No.5,472,707(其說明書引入此處作為參考)公開了用超濃縮液狀雷諾嗪作為硬明膠膠囊或軟凝膠的填充溶液的高劑量口服劑型。
如本申請實施例3所述，雷諾嗪對于心絞痛患者的最初試驗是失敗的。該試驗使用立即釋放的雷諾嗪制劑，劑量水平為120mg，每天三次?；谠撛囼?，不能確定雷諾嗪是否能以對心絞痛有效的量和方式對人投藥。
常規(guī)口服劑型的一個問題是它們并不能理想地適用于雷諾嗪及其藥學(xué)上可接受的鹽，因為雷諾嗪在胃中出現(xiàn)的低pH下溶解度相當(dāng)高。此外，雷諾嗪的血漿半衰期相當(dāng)短。雷諾嗪在酸中的高溶解性導(dǎo)致藥物快速吸收和清除，引起雷諾嗪血漿濃度不希望有的大波動，作用維持時間短，從而為了適當(dāng)?shù)闹委熌康亩枰l繁的口服給藥。
因此，需要尋求一種口服劑型雷諾嗪每天一次或兩次的給藥方法，這種方法可提供治療人心絞痛的雷諾嗪有效治療血漿濃度。
發(fā)明概述第一方面，本發(fā)明是雷諾嗪緩釋制劑，制劑的大部分由活性雷諾嗪組成。
另一方面，本發(fā)明是通過每天一次或兩次給患者服用雷諾嗪緩釋制劑治療罹患心絞痛或其它冠狀血管疾病的病人的方法。
另一方面，本發(fā)明是處方給予雷諾嗪治療疾病狀態(tài)哺乳動物的一種方法，包括每天一次或兩次給予本發(fā)明的雷諾嗪緩釋制劑，其方式能維持血漿雷諾嗪接近最小有效水平而無峰波動。
本發(fā)明的另一方面是每天僅一次或兩次給予含雷諾嗪劑型以維持人血漿中有用的雷諾嗪水平的方法。
本發(fā)明包括治療罹患選自心律失常、變異型和運動誘發(fā)性心絞痛及心肌梗塞等心血管疾病的病人的方法，該方法包括給病人服用包括至少50重量％雷諾嗪的緩釋藥物劑型，每劑不多于兩片，使病人血漿雷諾嗪水平至少為850ng堿/ml維持至少24小時，其中劑量是以選自24小時一次、兩次和三次的頻率給藥的。
本發(fā)明進一步包括治療例罹患選自心律失常、變異型和運動誘發(fā)性心絞痛及心肌梗塞等心血管疾病的病人的方法，該方法包括給病人服用包括至少約70-80重量％雷諾嗪的緩釋藥物劑型，每劑不多于兩片，使病人血漿雷諾嗪水平為約850-4000ng堿/ml維持至少24小時，其中劑量是以選自24小時一次和兩次的頻率給藥的。


圖1是如實施例9所報告的每天兩次用安慰劑或各種劑量雷諾嗪緩釋制劑治療的病人癥狀限制性運動時間圖。
圖2是如實施例9所報告的每天兩次給予安慰劑或各種劑量雷諾嗪緩釋制劑的病人心絞痛發(fā)生的運動時間圖。
圖3是如實施例9所報告的每天兩次給予安慰劑或各種劑量雷諾嗪緩釋制劑的1mm ST段壓低病人的運動時間圖。
發(fā)明詳述“雷諾嗪”是化合物(±)-N-(2，6-二甲基苯基)-4-[2-羥基-3-(2-甲氧基苯氧基)-丙基]-1-哌嗪乙酰胺，或其對映異構(gòu)體(R)-(+)-N-(2，6-二甲基苯基)-4-[2-羥基-3-(2-甲氧基苯氧基)-丙基]-1-哌嗪乙酰胺和(S)-(-)-N-(2，6-二甲基苯基)-4-[2-羥基-3-(2-甲氧基苯氧基)-丙基]-1-哌嗪乙酰胺，及其藥學(xué)上可接受的鹽，及其混合物。除非另外說明，說明書和實施例中所用的雷諾嗪血漿濃度指雷諾嗪游離堿。
“可任選的”和“可任選地”指接著描述的事件或情況可出現(xiàn)或可不出現(xiàn)，并且描述包括事件或情況出現(xiàn)和不出現(xiàn)的例子。例如，“可任選的藥物賦形劑”指如此描述的制劑可包括或可不包括藥物賦形劑(除了那些特別指明存在的之外)，及如此描述的制劑包括存在可任選的賦形劑的情況和不存在可任選的賦形劑的情況。
“治療”指哺乳動物(特別是人)的疾病的治療，包括(i)預(yù)防受試者出現(xiàn)疾病，該受試者易感染該疾病但尚未診斷為患有該疾??；(ii)抑制疾病，即阻止其發(fā)展；或(iii)緩解疾病，即使疾病消退。
“速釋”(“IR”)指在體外迅速溶解、擬在胃或胃腸道上部完全溶出和吸收的制劑或劑量單位。這樣的制劑在給藥30分鐘內(nèi)常規(guī)地釋放至少90％活性成分。
“緩釋”(“SR”)指在胃或胃腸道歷時約6小時或更長時間緩慢、持續(xù)溶出和吸收的本發(fā)明的制劑或劑量單位。優(yōu)選的緩釋制劑是顯示雷諾嗪血漿濃度適合于如下所述以每劑二片或更少、每天不多于兩次給藥的那些制劑。
雷諾嗪血漿濃度是通過分析接受同樣劑量方案的少至5人多至10人的雷諾嗪濃度來確定的平均濃度。重要的是雷諾嗪濃度是平均值，因為體重、代謝或疾病狀態(tài)(可使一個人代謝雷諾嗪比平均值快或慢)的差異可產(chǎn)生個體雷諾嗪濃度的差異。從采得的加肝素的血測定血漿雷諾嗪濃度。
本申請中所用的其它術(shù)語的定義如下ANOVA＝方差分析ATP＝三磷酸腺苷ECG＝心電圖ETT＝運動平板試驗PDH＝丙酮酸脫氫酶Cmax＝最高濃度Ctrough＝IR制劑給藥后8小時和實施例2的SR制劑A-C給藥后12小時的殘余濃度tid＝每天三次bid＝每天兩次Cx＝時間x時的濃度Tmax＝到達最高濃度的時間AUCx＝x小時或時間間隔后的曲線下面積除非另外說明，所給的百分比是重量百分比。本發(fā)明涉及雷諾嗪緩釋劑型及提供雷諾嗪血漿治療水平的本發(fā)明雷諾嗪緩釋劑型的給藥方法。
本發(fā)明的雷諾嗪緩釋劑型較佳為壓制片劑的形式，該壓制片劑包含雷諾嗪和部分中和的pH依賴性粘合劑的緊密混合物，所述pH依賴性粘合劑控制雷諾嗪在跨胃(典型地約為2)和腸(典型地約為5.5)的pH范圍的水性介質(zhì)中的溶出速率。
為了提供雷諾嗪緩釋作用，選擇一種或一種以上pH依賴性粘合劑以控制雷諾嗪制劑的溶出特性，從而當(dāng)制劑通過胃和胃腸道時緩慢和持續(xù)地釋放雷諾嗪。雷諾嗪緩釋制劑中pH依賴性粘合劑的溶出控制容量特別重要，因為如果雷諾嗪釋放太快(“劑量團”)的話，包含足夠雷諾嗪可每天給藥兩次的緩釋制劑可能引起難以對付的副作用。
因此，用于本發(fā)明的pH依賴性粘合劑是當(dāng)其停留在胃(其中pH低于約4.5)中時抑制藥物從片劑中快速釋放、當(dāng)其在胃腸道下部(其中pH一般大于約4.5)時促進治療量雷諾嗪從劑型中釋放的物質(zhì)。藥學(xué)領(lǐng)域稱作“腸溶”粘合劑和包衣劑的很多物質(zhì)具有理想的pH溶解性能。這些物質(zhì)包括如下化合物的苯二甲酸衍生物，如乙烯基聚合物和共聚物、羥基烷基纖維素、烷基纖維素、乙酸纖維素、乙酸羥基烷基纖維素、纖維素醚、乙酸烷基纖維素，及其部分酯，以及低級烷基丙烯酸和低級烷基丙烯酸酯的聚合物和共聚物，及其部分酯。
可與雷諾嗪合用以形成緩釋制劑的優(yōu)選的pH依賴性粘合劑材料為甲基丙烯酸共聚物。甲基丙烯酸共聚物是甲基丙烯酸與中性丙烯酸或甲基丙烯酸酯(如丙烯酸乙酯或甲基丙烯酸甲酯)的共聚物。最優(yōu)選的共聚物是甲基丙烯酸共聚物，C型，USP(甲基丙烯酸和丙烯酸乙酯的共聚物，其甲基丙烯酸單位為46.0％-50.6％)。這樣的共聚物可購自Rhm Pharma，商品名為EudragitL100-55(為粉末)或L30D-55(為30％水分散體)。在雷諾嗪緩釋劑型中其它可單用或合用的pH依賴性粘合劑材料包括苯二甲酸羥丙基纖維素、苯二甲酸羥丙基甲基纖維素、乙酸-苯二甲酸纖維素、苯二甲酸聚乙酸乙烯酯、苯二甲酸聚乙烯吡咯烷酮等。本發(fā)明的雷諾嗪劑型中存在一種或一種以上pH依賴性粘合劑，其量為約1-20wt％，較佳為約5-12wt％，最佳為約10wt％。
雷諾嗪口服緩釋劑型中可用一種或一種以上非pH依賴性粘合劑。應(yīng)注意的是，pH依賴性粘合劑和增粘劑(例如羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、中性聚(甲基)丙烯酸酯等)本身并不提供特定pH依賴性粘合劑提供的所需要的溶出控制。本發(fā)明制劑中非pH依賴性粘合劑的存在量為約1-10wt％，較佳為約1-3wt％，最佳為約2.0wt％。
如表1所示，雷諾嗪在pH約6.5以上的水溶液中相當(dāng)難溶，而在約pH 6以下溶解度驚人地增加。
表1


增加制劑中pH依賴性粘合劑的含量則降低雷諾嗪在pH低于4.5(典型胃中的pH)時從制劑中的釋放速率。由粘合劑形成的腸溶包衣在pH4.5以上(這時雷諾嗪的溶解度低)時溶解少，相對釋放速率增加。pH依賴性粘合劑的適當(dāng)選擇使pH4.5以上時雷諾嗪從制劑釋放速率較快，而在低pH下較大地影響釋放速率。粘合劑的部分中和促進粘合劑轉(zhuǎn)化為包圍各雷諾嗪顆粒的乳膠樣膜。因此，選擇pH依賴性粘合劑的類型和數(shù)量及部分中和成分的量以嚴(yán)密控制雷諾嗪從制劑的溶出速率。
本發(fā)明的劑型應(yīng)具有足夠量的pH依賴性粘合劑以產(chǎn)生控制雷諾嗪的釋放速率的緩釋制劑，使其在低pH(低于約4.5)時溶出速率顯著降低。在采用甲基丙烯酸共聚物，C型，USP(EudragitL100-55)的情況下，合適的pH依賴性粘合劑的量為5％-15％。該pH依賴性粘合劑典型地具有約1-20％被中和的甲基丙烯酸羧基。但是，較佳為中和程度從約3％至6％。
緩釋制劑還可包含與雷諾嗪和pH依賴性粘合劑緊密摻合的藥物賦形劑。藥學(xué)上可接受的賦形劑可包括例如非pH依賴性粘合劑或成膜劑，如羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、中性聚(甲基)丙烯酸酯(如Rhm Pharma以EudragitNE商品名銷售的甲基丙烯酸甲酯/丙烯酸乙酯共聚物)、淀粉、明膠、蔗糖、羧甲基纖維素，等等。其它有用的藥物賦形劑包括稀釋劑，如乳糖、甘露糖醇、干淀粉、微晶纖維素等；及著色劑和矯味劑?？扇芜x地有潤滑劑(如滑石和硬脂酸鎂)和其它壓片助劑存在。
本發(fā)明的雷諾嗪緩釋制劑具有雷諾嗪，其含量為約50-95重量％或更高，更佳為約70-90重量％，最佳為約70-80重量％；pH依賴性粘合劑，其含量為5-40％，較佳為5-25％，更佳為5-15％；劑型的余量包含非pH依賴性粘合劑、填充劑及其它任選的賦形劑。
本發(fā)明的特別好的雷諾嗪緩釋制劑基本上由以下物質(zhì)組成

本發(fā)明的雷諾嗪緩釋制劑制備如下將雷諾嗪和pH依賴性粘合劑和其它任選的賦形劑緊密摻合(干摻合)。然后在強堿水溶液的存在下(噴灑到摻合的粉末上)，將干摻合的混合物制粒。顆粒干燥，過篩，與任選的潤滑劑(如滑石粉或硬脂酸鎂)混合，壓成片劑。優(yōu)選的強堿水溶液是堿金屬氫氧化物如氫氧化鈉或氫氧化鉀(較佳為氫氧化鈉)在水(可任選地含≤25％與水混溶的溶劑，如低級醇)中的溶液。
為了識別、遮味目的和易于吞咽，可將所得的含雷諾嗪片劑用任選的成膜劑包衣。成膜劑的量典型地為片重的2％-4％。合適的成膜劑是本領(lǐng)域公知的，包括羥丙基甲基纖維素、陽離子甲基丙烯酸酯共聚物(甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯/甲基丙烯酸甲基丁酯共聚物-EudragitE-Rhm Pharma)，等等。這些成膜劑可任選地包含著色劑、增塑劑和其它添加成分。
壓制的片劑以具有足以容許8Kp壓制的硬度為宜。片劑的大小主要取決于片劑中雷諾嗪的量。片劑包含300-1100mg雷諾嗪游離堿。較佳地，片劑包含400-600mg、650-850mg和900-1100mg雷諾嗪。
為了影響溶出速率，控制含雷諾嗪粉末濕混合的時間。粉末總的混合時間即粉末與氫氧化鈉溶液接觸的時間以1-10分鐘為宜，較佳為2-5分鐘。制粒后，將顆粒從制粒機中取出，在流化床中于約60℃干燥。
令人驚訝的是，發(fā)現(xiàn)當(dāng)所用的雷諾嗪是游離堿而不是藥學(xué)上更常用的雷諾嗪二氫氯化物或其他鹽或酯時，這些方法制備的雷諾嗪緩釋制劑在給藥后長達12小時或更長時間內(nèi)產(chǎn)生較低雷諾嗪血漿峰水平，然而是有效的雷諾嗪血漿濃度。雷諾嗪游離堿的使用提供了至少一個優(yōu)點雷諾嗪在片劑中的比例可提高，因為雷諾嗪游離堿的分子量僅僅是雷諾嗪二氫氯化物的85％。這樣，達到釋出有效量的雷諾嗪而限制了劑量單位的物理體積。
本發(fā)明的雷諾嗪緩釋制劑的另一個優(yōu)點是這些制劑是用基本上只涉及以水作為溶劑并且利用標(biāo)準(zhǔn)藥劑工藝技術(shù)和設(shè)備的方法制備的。
本發(fā)明的雷諾嗪緩釋制劑可用于治療心血管疾病，包括心律失常、變異型和運動誘發(fā)性心絞痛及心肌梗塞等；用于治療經(jīng)受物理或化學(xué)損傷的組織，包括心麻痹、缺氧或?qū)π呐K、骨骼肌或腦組織的再灌注損傷；以及治療外周血管疾病，如間歇性跛行。最優(yōu)選的是，緩釋制劑用作哺乳動物抗心絞痛藥，最優(yōu)選的是用作人的抗心絞痛藥。
為了將雷諾嗪血漿水平維持在治療閾值之上和最大耐受水平之下，即對于人來說約550-7500ng堿/ml，在24小時期間服用一次、兩次或三次本發(fā)明的雷諾嗪緩釋口服制劑。這相當(dāng)于雷諾嗪·2HCl的量為約644ng/ml至約8782ng/ml。此外，口服攝取雷諾嗪口服劑型的時間應(yīng)加以控制，以確保雷諾嗪血漿濃度不超過約7500ng堿/ml，較佳為不超過約5000ng堿/ml，最佳為不超過約3800ng堿/ml。有時，限制雷諾嗪血漿峰濃度至不高于約ng堿/ml可能是有益的。同時，雷諾嗪血漿谷濃度較佳不應(yīng)降至約1000ng堿/ml以下，有時不應(yīng)降至1700ng堿/ml以下。
為了達到優(yōu)選的血漿雷諾嗪濃度約1000-3800ng堿/ml，本說明書描述的雷諾嗪口服劑型以每天給藥一次或兩次為宜。如果每天給藥兩次，較佳為約12小時給予口服雷諾嗪劑型一次。
除了將本發(fā)明的緩釋劑型以控制雷諾嗪血漿水平的方式配制和給藥之外，使雷諾嗪血漿峰濃度和谷濃度之差限制到最小也是重要的。在開始攝取劑型后約30分鐘至8小時或更長時間，典型地達到雷諾嗪血漿峰水平，而在約攝取下一次劑型時達到雷諾嗪血漿谷水平。本發(fā)明的緩釋劑型以使雷諾嗪峰水平不大于谷水平8倍的方式給藥為宜，較佳為不大于谷水平4倍，最佳為不大于谷水平2倍。
本發(fā)明的雷諾嗪緩釋制劑提供了可每天最多給藥兩次而使雷諾嗪血漿濃度波動最小的治療優(yōu)勢。制劑可單獨給藥，或(至少開始時)如果需要快速達到治療有效的雷諾嗪血漿濃度時，與速釋制劑合用，或通過可溶性IV制劑和口服劑型給藥。
下面的實施例是本發(fā)明的代表，但不能認為是對本發(fā)明范圍的限制。
實施例這些實施例詳述了雷諾嗪各劑型的制造方法，同時通過實驗評價了雷諾嗪給藥方案的有效性及藥物有效性。在全部實施例中，作說明如下(1)口服速釋劑型以二氫氯化物膠囊劑或片劑給藥，表述為二氫氯化物。(2)口服速釋劑型以雷諾嗪堿片劑給藥，表述為堿。(3)當(dāng)速釋制劑和緩釋制劑在同一研究里作對照時，劑量表述為堿與二氫氯化物共存。二氫氯化物與堿的轉(zhuǎn)換因子為0.854(例400mg二氫氯化物×0.854＝342mg當(dāng)量的游離堿)。(4)所有的血漿水平以及藥物動力學(xué)參數(shù)表述為游離堿的水平。
實施例2本實施例描述了一種制作雷諾嗪緩釋制劑的方法。
一種緩釋制劑，稱作緩釋制劑A，包含pH依賴性和非pH依賴性粘合劑，制作過程為將雷諾嗪(2500g)、甲基丙烯酸共聚物C型(EudragitL100-55-Rhm Pharma)(1000g)、微晶纖維素(Avicel)(100g)(710g)和聚乙烯吡咯烷酮粉末在Fielder PMA65混合制粒機中混合均勻。用40g NaOH水溶液將混合物制粒，將甲基丙烯酸甲酯/丙烯酸乙酯共聚物(EudragitNE30D-Rhm Pharma)(1667g)的30％水分散體加入濕粒中。所得的顆粒于Aeromatic Strea-5流體干燥床上干燥，過篩，再與交聯(lián)羥甲基纖維素鈉(100g)以及硬脂酸鎂(50g)混勻。將混合物用Manesty B壓片機壓制成684mg片劑，每片含342mg雷諾嗪游離堿，此劑型稱為緩釋制劑A。
緩釋制劑B的制備方法，除了EudragitL100-55用量減至500g及EudragitNE 30D用丙烯酸甲酯/丙烯酸乙酯共聚物(EudragitNE40D-Rhm Pharma)(2500g)的40％水分散體代替之外，其他與緩釋制劑A的制備方法相同。所得的制劑每片含雷諾嗪游離堿342mg。
關(guān)于緩釋制劑C，將雷諾嗪游離堿(342mg)與微晶纖維素和聚乙烯吡咯烷酮K25相混合，以水制粒，干燥，并與交聯(lián)羥甲基纖維素鈉和硬脂酸鎂相混合，混合物壓制成片劑并以腸溶材料包衣。
緩釋制劑D，只包含pH依賴性粘合劑，制備方法為將雷諾嗪(7500g)、EudragitL100-55(1000g)、羥丙基甲基纖維素(MethocelE5-source)(200g)及微晶纖維素(Avicel)(1060g)混合均勻?；旌戏勰┯?0g NaOH在水(1900-2500克)中的溶液制粒。將顆粒干燥、過篩，并與硬脂酸鎂(200g)混合，壓片，例如制成重667mg每片含500mg雷諾嗪游離堿的片劑。將片劑在24時Accelacota圓筒狀包衣鍋里用OPADRY薄膜包衣溶液噴涂包衣，增重2-4％。OPADRY薄膜包衣溶液可購自COLORCON，West Point，PA，有不同顏色。
制備緩釋制劑D的逐步過程如下a)將雷諾嗪、微晶纖維素、甲基丙烯酸酯聚合物(C型)以及羥丙基甲基纖維素用合適的攪拌器攪勻。
b)將氫氧化鈉溶解于凈水中。
c)使用適當(dāng)?shù)闹屏Ｑb置，在恒定的攪拌下向混合物中緩慢地加入氫氧化鈉溶液，根據(jù)需要可多加一部分水。
d)繼續(xù)攪拌達到更均勻的混合。根據(jù)需要可多加一部分水。
e)用流體干燥床干燥顆粒。
f)用合適的篩子將顆粒過篩。
g)在過篩后的顆粒中加入硬脂酸鎂，混勻。
h)如果需要的話，將顆粒原料通過chilsonator。
i)將顆粒用適當(dāng)尺寸的模具壓制成片劑。
j)將OPADRY粉末分散在水中，用適當(dāng)尺寸的包衣裝置以2-4重量％的標(biāo)準(zhǔn)水平包衣。
k)用巴西棕櫚蠟以0.002-0.003重量％的標(biāo)準(zhǔn)水平進行拋光。
實施例3本實施例概述了發(fā)表于Circulation 90726-734(1994)的一項研究，該研究證明了雷諾嗪作為實施例1的速釋制劑應(yīng)用時沒有抗心絞痛作用及抗局部缺血作用。
有穩(wěn)定型心絞痛的患者參與了此項研究。在醫(yī)療監(jiān)控下，患者在此前使用的任何抗心絞痛藥物都停止使用。三百十九例病人接受單盲的安慰劑治療直到18天，其中318例由于中等程度的心絞痛而終止運動，有心肌缺血的癥狀(≥1-mm的ST段降低)，然后隨機分入四個研究組之一進行給藥雷諾嗪·2HCl 30mg tid(n＝81)；雷諾嗪·2HCl 60mg tid(n＝81)；雷諾嗪·2HCl 120mg tid(n＝78)；和安慰劑tid(n＝79)。30、60和120mg劑量tid，給藥1小時后雷諾嗪游離堿的平均血漿峰濃度分別為94、219和510ng/ml，給藥8小時后平均血漿谷濃度分別為18、37和90ng/ml。
經(jīng)過4周的雙盲階段，重復(fù)進行給予所研究藥物后1小時(峰濃度測試)和8小時(谷濃度測試)的癥狀限制性運動試驗，全部運動持續(xù)時間的基線(±SEM)安慰劑組為5.9±0.2分鐘，30、60和120mg雷諾嗪組分別為6.4±0.3、5.9±0.3和6.6±0.2分鐘(P＝NS)。經(jīng)過4周的雙盲治療，與基線值對照結(jié)果，在所研究藥物給藥1小時(峰效應(yīng))后，安慰劑組運動總持續(xù)時間(±SEM)延長了0.45±0.2分鐘，而雷諾嗪30、60和120mg組分別延長了0.3±0.2、0.6±0.2和0.5±0.2分鐘(安慰劑相對雷諾嗪，P＝NS)。在四組里，(運動)到1-mm ST段壓低的時間四組是相似的，經(jīng)過4周的治療，各組在給藥1小時后以相似的幅度顯著地增加，心絞痛起始的時間變化相近似。給藥8小時后(谷效應(yīng))，對于運動總持續(xù)時間或其他運動變量，在安慰劑組和雷諾嗪組之間未觀測到差異。與基線值相比，在安慰劑組和雷諾嗪組之間，每周的心絞痛發(fā)作次數(shù)以及Holter監(jiān)視器監(jiān)測下每48小時的心肌缺血發(fā)病次數(shù)和持續(xù)時間以相似的幅度顯著地減少。
以上結(jié)果顯示以雷諾嗪·2HCl30、60和120mg tid治療并不比安慰劑優(yōu)越。本研究同樣顯示在心絞痛患者的日常生活中，雷諾嗪的相似劑量對心肌缺血或運動性能或心絞痛的發(fā)作沒有有益的效果。
實施例4在本實施例中，從大量心絞痛患者身上評價了雷諾嗪在高血漿水平下的安全性和抗局部缺血效應(yīng)，同時測定了采用每天兩次和三次給藥方案在穩(wěn)態(tài)劑量下各種效應(yīng)的持續(xù)時間。此實施例中，使用常規(guī)抗心絞痛藥物有效的慢性穩(wěn)定型心絞痛患者用三種雷諾嗪·2HCl給藥方案進行治療實施例1的速釋制劑267mg tid，400mg bid和400mg tid。在血漿峰水平和谷水平分別測定運動試驗各項參數(shù)以及雷諾嗪游離堿的濃度。
方法本研究涉及在預(yù)先確診的接受已知抗心絞痛治療有效，具有穩(wěn)定型運動時間的患者身上進行的長期拉丁方設(shè)計，用四種治療(安慰劑，雷諾嗪·2HCl 400mg bid，雷諾嗪·2HCl 267mg tid，和雷諾嗪·2HCl 400mg tid)、四個治療順序和5個雙盲治療階段進行雙盲、安慰劑對照的隨機治療。
具有慢性穩(wěn)定型心絞痛的患者，病程至少3個月，使用常規(guī)抗心絞痛治療有效者入選。另外，患者必須有運動誘發(fā)心肌局部缺血的心電圖(ECG)驗證，即在運動應(yīng)激試驗中，ST段水平或下斜壓低≥1mm，持續(xù)3次連續(xù)心搏，ECG圖型不干擾ST段改變的解釋。后一標(biāo)準(zhǔn)特別排除了左心室肥大、預(yù)激綜合癥或起搏器節(jié)律的患者。其它排除的標(biāo)準(zhǔn)包括不穩(wěn)定型心絞痛或過去3個月內(nèi)發(fā)生心肌梗塞，如紐約心臟協(xié)會定義為III或IV級的心力衰竭，顯著的瓣膜或先天性心臟病而未矯正者，需要地高辛或長效硝酸鹽治療者，不穩(wěn)定性糖尿病，或其它會混淆以下評估的嚴(yán)重病癥。
在治療階段，實施這些雷諾嗪·2HCl速釋制劑給藥方案(267mg tid，400mgbid，400mg tid)和給予安慰劑?；颊哂?00a.m.、400p.m.、800p.m.和1200a.m.服用一粒含267mg或400mg雷諾嗪·2HCl或安慰劑的膠囊。所有膠囊外觀相同。患者隨機分入4個序列之一，每個序列分入25％患者。每種治療持續(xù)一周，第5個一周重復(fù)一種治療。
用Sheffield改良的Bruce方案，使接受通?？剐慕g痛藥物的患者進行篩選性運動平板試驗(ETT-1)。如果運動至發(fā)生心絞痛的時間≥3但≤13分鐘，撤去一種抗心絞痛藥，開始服用單盲安慰劑。1-2周后，患者回來作另一次ETT(ETT-2)。如果與ETT-1相比發(fā)生心絞痛的時間減少1分鐘，患者被認為完成了第一次甄別性ETT。如果發(fā)生心絞痛時間的減少不≥1分鐘，可撤去第二種抗心絞痛藥并重復(fù)上述順序。如果需要的話，可照此撤去第3種抗心絞痛藥以甄別患者。長效硝酸鹽總是第一個撤去；不接受長效硝酸鹽的患者可按任意順序撤去β-阻斷劑和鈣拮抗劑。患者通過第一次甄別性ETT(ETT-2)后，進行第二次甄別性ETT(ETT-3)，這次發(fā)生心絞痛的時間必須在ETT-2時觀察到的時間的±15％以內(nèi)。另外，每次甄別性ETT都必須具有心肌缺血的ETT體征(持續(xù)3次連續(xù)心搏中ST段水平或下斜壓低≥1mm)。符合這些標(biāo)準(zhǔn)的患者用于本研究。
每個1周的周期過后，病人在早晨回到運動實驗室，吃過少量的早餐后至少1小時，做一次ETT，將此定為谷ETT。每一位患者在一天的同一個時間做谷ETT。做完谷ETT之后，病人從本周所用的發(fā)藥包內(nèi)接受下一盲法規(guī)定的藥物。給藥后1小時，再做另一個ETT，將此定為峰ETT。谷濃度(大約服藥后8小時)和峰濃度(服藥后1小時)時抽取血樣。在整個研究過程中，嚴(yán)格地監(jiān)控其它各種標(biāo)準(zhǔn)實驗室檢測項目。
監(jiān)測對象的血壓(袖帶式血壓計)和心率，在每一次ETT之前、在進行ETT時、在測試的每一階段的最后一分鐘、在心絞痛開始時、在達到最大運動量的時候、以及在恢復(fù)期間(每分鐘一次共四分鐘，接著每五分鐘一次直到測得值回到基線)。同樣地，在患者站上踏板快開始測試之前、在運動的每個階段結(jié)束時、在達到最大耐受運動負荷時、以及運動的終點，須作連續(xù)的心率監(jiān)測和標(biāo)準(zhǔn)的12導(dǎo)聯(lián)心電圖記錄。
所有患者在實施安慰劑和雷諾嗪的各種不同劑量方案(ranolazine-placebo)期間在峰濃度和谷濃度時有用的三個運動變量的平均平板運動時間概括于下表2中。
表2全部患者峰、谷運動試驗

在雷諾嗪血漿峰濃度時，所有的ETT心肌缺血參數(shù)比安慰劑延長，到1mmST段壓低發(fā)生的時間尤為顯著。在對所有患者分析中，對3種雷諾嗪給藥方案及綜合給藥方案來說，(運動)到心絞痛開始的時間比安慰劑延長0.32-0.39分鐘(p≤0.01)；到1mm ST段壓低的時間比安慰劑延長0.28-0.41分鐘(p≤0.02)。而全程運動持續(xù)時間對綜合給藥方案來說明顯延長了，并且觀察到每種給藥方案有變化方向和幅度相似的趨向。在每一方案分析中，對綜合的雷諾嗪給藥方案而言，3個ETT參數(shù)均提高了(p≤0.01)。所有的雷諾嗪個體給藥方案都使到1mm ST段壓低所需時間明顯延長，而到心絞痛發(fā)生的時間及運動持續(xù)時間的相似變化方向和比例的傾向無顯著意義。一般來說，每一方案分析的結(jié)果只有效應(yīng)的幅度似乎比單一治療的效果略大一些。
在血漿谷濃度時，雷諾嗪對ETT參數(shù)的影響減小。對全體患者分析和每一方案分析的結(jié)果比較一致，顯示了運動時間延長的趨勢。但是只有所有病人分析中所有雷諾嗪給藥方案綜合起來1mm ST段壓低的時間達到統(tǒng)計學(xué)意義。
考慮到在雷諾嗪單一治療中觀測到的運動參數(shù)有顯著提高，分析了雷諾嗪在接受各種合用藥物的患者中的效果。這些給藥分析是在雷諾嗪峰濃度、改善運動時間效果最顯著時進行的。由于長效的硝酸鹽在單盲甑別階段最先撤去，因此沒有患者接受雙盲的長效硝酸鹽制劑治療。在峰濃度呈現(xiàn)效果的患者中，34％(107/312)的患者在雙盲階段接受β-受體阻斷劑治療而24％(75/312)接受的是鈣拮抗劑。
不管患者是否服用β-受體阻斷劑，在雷諾嗪峰濃度時運動參數(shù)均改善(ranolazine—placebo)。與107例服用β-受體阻斷劑的患者相比，這種改善的幅度在205例沒有服用β-受體阻斷劑的患者中稍為大一些。但是這些服用與沒服用β-受體阻斷劑患者之間的差異對于任何一個運動學(xué)參數(shù)來說都沒有統(tǒng)計意義。接受β-受體阻斷劑的患者中，3種雷諾嗪的給藥方案均顯著改善運動參數(shù)，而在聯(lián)合的雷諾嗪給藥方案中也一樣。在少量服用β-受體阻斷劑的患者身上觀察到類似的傾向，對服用和沒服用鈣拮抗劑患者的運動數(shù)據(jù)分析也可以得到相似的發(fā)現(xiàn)。
下表3將所有患者根據(jù)性別和給藥方案列出以雷諾嗪堿的形式表示的雷諾嗪血漿峰、谷濃度。
表3雷諾嗪給藥后平均(±標(biāo)準(zhǔn)差)血漿濃度

雷諾嗪游離堿的平均血漿峰濃度為1346-2128ng/ml，400mg tid時雷諾嗪血漿濃度為最高。雷諾嗪平均血漿谷濃度為235-514ng/ml。其中女性的雷諾嗪平均血漿峰濃度比男性高一些，而在谷濃度上性別差異不明顯。
在雷諾嗪血漿峰濃度時，雷諾嗪各給藥方案和安慰劑的雙產(chǎn)物(doubleproduct)之間沒有統(tǒng)計差異。同樣地，在雷諾嗪谷血藥濃度時，3種雷諾嗪給藥方案和安慰劑的耐受或最大運動的雙產(chǎn)物各方案分析沒有統(tǒng)計學(xué)差異。
此研究的結(jié)果表明雷諾嗪對患慢性穩(wěn)定型心絞痛病人來說是一個有效的抗絞痛和抗心肌缺血化合物。與安慰劑相比，在峰血藥濃度時，三種雷諾嗪的給藥方案使心絞痛開始時間和運動持續(xù)時間以及1mm ST段壓低的時間平均延長了大約0.33分鐘。在此研究里，不僅在同時應(yīng)用其它抗心絞痛治療(如β-受體阻斷劑和鈣拮抗劑)的患者各種運動參數(shù)有改善，而且在只接受雷諾嗪單一治療的亞群中也一樣。而且后者的治療效應(yīng)似乎在幅度上略大些，這也表明了對慢性穩(wěn)定型心絞痛患者來說，應(yīng)用雷諾嗪單一治療可能是有效的。
血液動力學(xué)研究顯示，雷諾嗪在血漿峰濃度時對運動參數(shù)的改善與血壓和心率沒有關(guān)系。雷諾嗪的這種非血液動力學(xué)作用機制，與目前臨床應(yīng)用的其它抗心絞痛藥物不同。
值得一提的是，我們記載的雷諾嗪速釋制劑的抗心絞痛作用和抗心肌缺血作用的研究在用藥期間沒有貫穿整個過程。雖然呈現(xiàn)缺血型ST段壓低的時間顯著延長，其它ETT參數(shù)也呈現(xiàn)相似的變化趨勢，但是在雷諾嗪血漿谷濃度時這種效應(yīng)就極其微弱。雷諾嗪游離堿平均血漿峰濃度為1346-2128ng/ml，而平均血漿谷濃度為235-514ng/ml。顯然，有臨床意義的抗心絞痛作用和抗心肌缺血作用與在雷諾嗪血漿峰濃度時觀測到的較高平均血藥濃度有關(guān)，而與谷濃度時觀察到的的平均血藥濃度無關(guān)。
基于此實驗的結(jié)果，對ETT中檢測的抗心肌局部缺血作用而言，雷諾嗪游離堿的血漿閾濃度值可能位于550ng/ml左右，也就是說，可能在整個給藥期間雷諾嗪的血漿濃度必須維持在此閾值以上以保證在此期間運動時的抗心絞痛活性和抗心肌缺血活性。
雷諾嗪在本研究達到的血藥濃度上都有很好的耐受性，在雷諾嗪各給藥方案與安慰劑之間，不良事件的發(fā)生率沒有差異，在心電圖間期以及復(fù)合形態(tài)方面也沒有與藥物有關(guān)的變化。另外，在血糖濃度、血脂含量和肝功能測試時沒發(fā)現(xiàn)有診斷學(xué)意義上的變化，說明雷諾嗪的代謝作用沒有影響到全身糖調(diào)節(jié)或脂代謝。
雷諾嗪可改善慢性穩(wěn)定型心絞痛患者的運動參數(shù)而不明顯影響心率和血壓?？赡苓@種抗心絞痛及抗缺血效應(yīng)必須在雷諾嗪的血藥濃度達到約550ng/ml的閾值才會呈現(xiàn)。雷諾嗪在很寬的血漿濃度范圍內(nèi)均能很好地耐受。已經(jīng)許可以更大劑量的緩釋制劑對控制局部缺血的這一新的代謝概念作進一步研究。
實施例5I.速釋制劑和緩釋制劑的體外比較將根據(jù)實施例1制備的速釋制劑和根據(jù)實施例2A-2C制備的緩釋制劑放于USP Apparatus 2溶出測試儀中進行測試，用900ml 0.1 M鹽酸作為溶出液模擬在胃中的溶出。
表4

表中結(jié)果顯示當(dāng)上述速釋制劑完全溶出時，時間不超過0.5小時(速釋制劑指標(biāo))；緩釋制劑A、B和C能在低pH環(huán)境下延長溶出時間，這是作為緩釋制劑所需要的。
II.速釋制劑和緩釋制劑A、B、C的體內(nèi)比較將單劑量的根據(jù)實施例1制備的速釋制劑和根據(jù)實施例2制備的緩釋制劑A和B給十一個健康志愿者服下，并于給藥后0、20、40、60、90和120分鐘測定雷諾嗪游離堿的血漿濃度，而后每小時測一次共六小時，再每兩小時測一次共八小時，二十四小時再測一次(緩釋制劑)。結(jié)果列于下表5中
表5

顯然，從表5來看，本發(fā)明的緩釋制劑A、B和C的溶出特性使其適合于一天給藥兩次。
表6

表6中報告的藥物動力學(xué)結(jié)果顯示，雷諾嗪從緩釋制劑中緩慢釋放出來，因而雷諾嗪的吸收受溶出速率的限制?？捎^測到各劑量水平時的藥物血漿濃度時間曲線延長，達峰時間為給藥后4-6小時。在整個500-2000mg劑量范圍內(nèi)，雖然第2組內(nèi)均衡性存在少許偏差，但是平均Cmax和AUC0～30hr以近似與劑量成比例的方式提高。
這些結(jié)果表明了可用此種緩釋制劑每天兩次的給藥方案在人體內(nèi)達到雷諾嗪有效血漿濃度。
本研究中，雷諾嗪緩釋制劑的劑量逐漸增大，在給藥前、給藥期間以及給藥后每隔一定時間抽取血樣做雷諾嗪含量分析，整個過程中，血壓、心率、心電圖和各種癥狀都處于監(jiān)測之下。每過一個階段，在進入本研究的下一階段之前，對數(shù)據(jù)概要進行評估。
八個受試者，全部為18到40歲之間的健康男性，并且全部完成了本研究，對藥物動力學(xué)和安全性分析是有價值的。受試者每人給予不同類型的雷諾嗪游離堿緩釋片劑，包括500mg和750mg的片劑或者必要時安慰劑配對(2×750mg加上1×500mg)，使單位口服劑量為1500和2000mg。
在每個階段前4天每天服藥兩次，每次1個劑量，于第5天服用單劑量。第5天時每位志愿者經(jīng)歷一次全面的藥物動力學(xué)檢查，包括仰臥和直立血壓、心率、心電圖數(shù)據(jù)、不良事件、臨床化學(xué)和血液學(xué)分析、尿液分析。
用48小時、72小時和96小時的血藥濃度和對數(shù)轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)通過方差分析以及測試時間系數(shù)是否與0有顯著性差異(定為p＜0.05)對每個劑量水平作穩(wěn)態(tài)測試。用雙側(cè)t檢驗進行這些測試，從ANOVA模型評估可變性。再用混合效應(yīng)ANOVA模型及未轉(zhuǎn)換與轉(zhuǎn)換的對數(shù)數(shù)據(jù)比較48小時、72小時和96小時的平均血藥濃度，作穩(wěn)態(tài)分析。通過測定可變的混合效應(yīng)方差分析模型的雙側(cè)t檢驗，將第1天的給藥前治療平均值和第5天的數(shù)據(jù)作交叉比較，作為藥動學(xué)參數(shù)。計算90％、95％可信限作治療比較，對多重比較未做任何調(diào)整。
雷諾嗪游離堿第五天藥物動力學(xué)參數(shù)的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差列于下表8中，圖中示出了平均血漿數(shù)據(jù)。雷諾嗪游離堿的穩(wěn)態(tài)血漿濃度出現(xiàn)于第4天。在服藥期間，血藥水平緩慢上升，在給藥后1到6小時的時間最大值tmax時達到最高水平，其后慢慢減退，超過計量間隔時，血藥濃度產(chǎn)生輕微的波動。用此緩釋制劑作多劑量給藥時，雷諾嗪(+)R和(-)S構(gòu)型的對映體之間藥物動力學(xué)參數(shù)沒有差異。
表8消旋的(RS)、(+)R和(-)S雷諾嗪緩釋制劑第5天藥物動力學(xué)參數(shù)

在雷諾嗪1500mg(8例中的3例)和2000mg(8例中的2例)，通常在給藥2-6小時后，某些受試者測直立血壓時呈現(xiàn)太多癥狀以至于不能完成BP測量。記錄了第5天具有統(tǒng)計學(xué)意義的直立收縮壓降低，1500mg(-9.8mm Hg；給藥后4小時)以及2000mg(-8.4mmHg；給藥后6小時)。雖然雷諾嗪和安慰劑不良事件的方式相似，但使用雷諾嗪時頭痛、頭暈、鼻塞較為常見。
背景雷諾嗪(Ran)是一種脂肪酸氧化的部分抑制劑(pFOX抑制劑)，能促使產(chǎn)生ATP的來源從脂肪酸氧化轉(zhuǎn)換到糖類氧化。雷諾嗪可在不抑制心臟活動的前提下減少需氧量，并保持糖酵解通路和丙酮酸氧化通路的偶合，從而使乳酸鹽的積聚減至最少。在三個對穩(wěn)定型心絞痛的早期安慰劑對照試驗里，口服雷諾嗪(速釋制劑)≥240mg，其在單獨使用或與其他抗心絞痛藥物合用時，運動時間延長而不改變休息和運動時的心率或降低休息或運動時的血壓。在此三個早期的試驗里，只有在雷諾嗪的血漿峰濃度水平附近(服藥1-3小時后)，才具有統(tǒng)計學(xué)意義的對運動時間的延長。本研究評估了(雷諾嗪)緩釋制劑每天兩次給藥是否能保持血漿濃度水平于治療效應(yīng)的范圍。
方法在一個雙盲法、四期拉丁方交叉設(shè)計方案中，將撤去其它抗心絞痛藥物而有可重復(fù)的運動時間受心絞痛限制以及≥1mm ST段壓低的患者隨機分成雷諾嗪(500mg bid、1000mg bid和1500mg bid)及配對安慰劑(Pbo)組。于谷濃度(給藥后12小時)和峰濃度(給藥后4小時)按修改的Bruce方案作運動試驗。結(jié)果美國、捷克共和國、波蘭和加拿大的49個醫(yī)療中心里隨機抽取的191例病人，有168例完成了全部四期雙盲治療，7例完成了四期中的三期。對這175例患者的基本療效分析概括于下表9及圖1-3。
表9

結(jié)果與安慰劑相比，雷諾嗪可以提高運動持續(xù)時間，其峰濃度和谷濃度列于下表10中。與安慰劑相比，雷諾嗪對休息時與運動時的血壓或心率沒有臨床學(xué)意義上的作用。
MARISA研究結(jié)果各劑量雷諾嗪血漿濃度平均值(±SD)

從表10可以看到，雷諾嗪的血藥濃度水平約在850ng/mL或更大，直至至少4000ng堿/ml時可得到有益的療效。
權(quán)利要求
1.罹患選自心律失常、變異型和運動誘發(fā)性心絞痛及心肌梗塞的心血管疾病病人的治療方法，其特征在于給病人服用包括至少50重量％雷諾嗪的緩釋藥物劑型，每劑不多于兩片，使病人血漿雷諾嗪水平至少為850ng堿/ml維持至少24小時，其中劑量是以選自24小時一次、兩次和三次的頻率給藥的。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中雷諾嗪最大血漿水平約為4000ng堿/ml。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中藥物劑型以選自24小時一次和兩次的頻率對病人投藥。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中藥物劑型以24小時兩次對病人投藥，每次劑量由2片組成。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中藥物劑型包括約50-90wt％雷諾嗪。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中藥物劑型包括約70-80wt％雷諾嗪。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中24小時時間內(nèi)病人血漿雷諾嗪峰/谷水平之比小于4∶1。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中24小時時間內(nèi)病人血漿雷諾嗪峰/谷水平之比小于3∶1。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中24小時時間內(nèi)病人血漿雷諾嗪峰/谷水平之比小于2∶1。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其中劑量包括500-1500mg雷諾嗪。
全文摘要
本發(fā)明提供一種雷諾嗪緩釋制劑，包含雷諾嗪和部分中和的pH依賴性粘合劑的緊密混合物，以形成在低于pH4.5的水性介質(zhì)中不溶解而高于pH4.5的水性介質(zhì)中溶解的膜。該制劑適合于每天兩次給予雷諾嗪，在控制雷諾嗪的溶出速率和維持人血漿雷諾嗪水平于850－4000ng堿/ml上是有用的。
文檔編號A61P9/10GK1443069SQ01806185
公開日2003年9月17日 申請日期2001年3月7日 優(yōu)先權(quán)日2000年3月8日
發(fā)明者安德魯·A·沃爾夫 申請人:Cv治療公司