專利名稱：鼻內(nèi)降鈣素制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及包含降鈣素作為活性成分以及特定濃度的檸檬酸或其鹽作為穩(wěn)定劑和吸收促進(jìn)劑的鼻內(nèi)藥物組合物。
由于它們的尺寸以及化學(xué)組成，降鈣素原先是通過皮下或者肌肉注射給藥的。其他的給藥途徑在技術(shù)上有困難，這是因為降鈣素的組織吸收性較差，而且易于被體液分解。盡管有這些障礙，已有人研制出可通過鼻腔途徑給藥的制劑(第5,759,565號美國專利)。鼻內(nèi)制劑被設(shè)計成儲存在多劑量容器中，在長時間內(nèi)是穩(wěn)定的，而且可對抗細(xì)菌污染。發(fā)現(xiàn)該制劑中的防腐劑--潔爾滅可促進(jìn)鮭降鈣素的吸收。然而，有報道稱潔爾滅會使給藥包含防腐劑的減充血劑鼻內(nèi)噴霧劑的健康自愿者中的藥物性鼻炎(rhintis medicamentosa)惡化(P.Graf等人，Clin.Exp.Allergy25395-400；1995)。其對于鼻粘膜也有副作用(H.Hallen等人，Clin.Exp.Allergy 25401-405；1995)。Berg等人(Laryngoscope 1041153-1158；1994)公開了暴露于體外的呼吸粘膜組織會發(fā)生嚴(yán)重的形態(tài)改變。在活體外的青蛙腭測試中還表明，潔爾滅還可導(dǎo)致粘液纖毛轉(zhuǎn)運速度顯著減慢(P.C.Braga等人，J.Pharm.Pharmacol.44938-940；1992)。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明提供一種包含降鈣素或其酸加成鹽以及濃度為約10-50mM的檸檬酸和/或其鹽的液體藥物組合物，所述組合物的劑型適合于鼻內(nèi)給藥。
本發(fā)明還提供一種包含約2,200MRC單位的鮭降鈣素、約10mM的檸檬酸、約0.2％的苯乙醇、約0.5％的芐醇、以及約0.1％的Tween 80的液體藥物組合物。
本發(fā)明還提供一種包含約2,200MRC單位的鮭降鈣素、約20mM的檸檬酸、約0.2％的苯乙醇、約0.5％的芐醇、以及約0.1％的Tween 80的液體藥物組合物。
本發(fā)明還提供一種向需要降鈣素治療的患者給藥降鈣素的方法，該方法包括通過鼻腔途徑向所述患者給藥包含降鈣素或其酸加成鹽以及濃度為約10-50mM的檸檬酸和/或其鹽的液體藥物組合物。
本發(fā)明還提供一種提高降鈣素液體藥物組合物之穩(wěn)定性的方法，其包括在所述組合物中添加濃度為約10-50mM的檸檬酸或其鹽。
本發(fā)明還提供一種在鼻內(nèi)給藥降鈣素液體藥物組合物后提高患者中血漿降鈣素的生物利用度或濃度的方法，該方法包括在所述給藥前向所述組合物中添加濃度為約10-50mM的檸檬酸或其鹽。
還令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，使用濃度升高的檸檬酸或其鹽產(chǎn)生與包含降鈣素的組合物的鼻內(nèi)吸收特性有關(guān)的有益優(yōu)點，并由此在鼻內(nèi)給藥后增強(qiáng)降鈣素的生物利用度水平。另外還發(fā)現(xiàn)，使用濃度為約10-50mM的檸檬酸或其鹽增加了包含降鈣素的組合物的穩(wěn)定性，同時更高濃度的檸檬酸或其鹽不具有相同的穩(wěn)定作用。
本發(fā)明中所用的降鈣素可為游離形式，或者是藥物學(xué)上可接受的鹽或復(fù)合物的形式，如藥物學(xué)上可接受的酸加成鹽形式。此等鹽及復(fù)合物是已知的，而且具有與游離形式相同程度的活性及耐受性。適合用于本發(fā)明中的酸加成鹽包括例如鹽酸鹽和醋酸鹽。
上述組合物可根據(jù)本發(fā)明以滴劑或者噴霧劑的形式給藥于鼻粘膜。但是，如以下所述，本發(fā)明的組合物優(yōu)選以噴霧劑的形式給藥，例如微細(xì)液滴的形式。
本發(fā)明的組合物當(dāng)然還可包括其他的成分，特別是屬于藥物學(xué)上可接受的常規(guī)表面活性劑的成分。在此，根據(jù)本發(fā)明的另一個方面發(fā)現(xiàn)，使用通常與鼻內(nèi)給藥降鈣素、特別是鮭降鈣素有關(guān)的表面活性劑可增加經(jīng)由鼻粘膜的吸收，并由此提高所得的生物利用率。
優(yōu)選地，本發(fā)明的液體藥物降鈣素組合物包含藥物學(xué)上可接受的并適合給藥于鼻粘膜的液體稀釋劑或者載體，最優(yōu)選為鹽水。
本發(fā)明的組合物可進(jìn)行配制，以便可通過鼻腔途徑給藥。為此目的，組合物還可包含例如最小量的任意的其他成分或者所希望的賦形劑，例如其他的防腐劑或者例如纖毛刺激劑如咖啡因。
對于鼻內(nèi)給藥，通常優(yōu)選柔和的酸pH值。本發(fā)明的組合物的pH優(yōu)選為約3-5，更優(yōu)選為約3.5-3.9，并最優(yōu)選為3.7。pH的調(diào)節(jié)可通過添加合適的酸如鹽酸來實現(xiàn)。
本發(fā)明的組合物還應(yīng)具有合適的等張性和粘度。優(yōu)選地，其滲透壓為約260-380mOsm/L。鼻腔噴霧劑所希望的粘度優(yōu)選低于0.98cP。
根據(jù)本發(fā)明的組合物還可包含常規(guī)的表面活性劑，優(yōu)選非離子表面活性劑。
當(dāng)使用表面活性劑時，其在本發(fā)明組合物中的量可根據(jù)所選的具體表面活性劑、具體的給藥模式(劑如滴或噴霧劑)以及所希望的作用而變化。通常情況下，該表面活性劑的量為約0.1mg/ml-10mg/ml，優(yōu)選為約0.5mg/ml-5mg/ml，并最優(yōu)選為約1mg/ml。
根據(jù)本發(fā)明的方法給藥的降鈣素的量以及本發(fā)明組合物中的活性成分的量當(dāng)然取決于所選擇的具體降鈣素、待治療的病癥、所希望的給藥頻率以及所希望的作用。
如以下實施例所述，發(fā)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)，在鼻內(nèi)給藥后以血漿濃度測定的降鈣素、特別是鮭降鈣素的生物利用度令人驚奇地高。
對于根據(jù)本發(fā)明的鼻內(nèi)給藥，治療將因此適當(dāng)?shù)匕ńo藥約50-400MRC單位、更優(yōu)選約100-200MRC單位的劑量，給藥頻率為約每日一次至每周三次。上述劑量通常是一次性給藥，即、治療將包括給藥單個鼻內(nèi)劑量，該劑量包含約40-400MRC單位、更優(yōu)選約100-200MRC單位的降鈣素。或者，該劑量可在一天中以一定的時間間隔分為2-4次給藥，每次給藥的劑量則包含約10-200、優(yōu)選25-100MRC單位。
每次鼻內(nèi)給藥的總組合物量適當(dāng)?shù)匕s0.05-0.15ml，通常為約0.1ml。因此，根據(jù)本發(fā)明所用的組合物每ml適當(dāng)?shù)匕s150-8000、優(yōu)選500-4000、更優(yōu)選約500-3000、還更優(yōu)選約1000-2500、并最優(yōu)選2200MRC單位的降鈣素。
為進(jìn)行鼻內(nèi)給藥，本發(fā)明的組合物優(yōu)選放入帶有能夠?qū)⑺慕M合物施放至鼻粘膜的裝置的容器內(nèi)，例如放入鼻腔施放器裝置。合適的施放器在本領(lǐng)域中是已知的，而且包括那些適合于將液體組合物以液滴或者噴霧的形式給藥至鼻粘膜者。因為降鈣素的給藥劑量應(yīng)盡可能地精確控制，所以通常優(yōu)選使用噴霧施放器，用該類型的施放器時易于精確調(diào)節(jié)給藥量。合適的給藥裝置包括例如霧化器，如泵-霧化器和氣溶膠分配器。對于后者，施放器將包含根據(jù)本發(fā)明的組合物以及適合用于鼻內(nèi)施放器中的推進(jìn)劑介質(zhì)。霧化裝置可裝配有合適的噴霧調(diào)整器(adaptor)，以向鼻粘膜轉(zhuǎn)運所包含的組合物。此等裝置在本領(lǐng)域中是已知的。
容器(如鼻內(nèi)施放器)可包含對于單個鼻內(nèi)給藥劑量或者在數(shù)天或數(shù)周的時間內(nèi)提供多個劑量而言足夠的組合物。所輸送的單個劑量優(yōu)選如以上定義的。
本發(fā)明組合物的穩(wěn)定性可通過常規(guī)方法來測定。如以下所述，用標(biāo)準(zhǔn)的分析測試測定，本發(fā)明組合物的降鈣素含量在50℃下于15天后降低的量少于50％。實驗設(shè)計-鼻內(nèi)給藥降鈣素的方法以及血漿濃度的測量組合使用氯胺酮和賽拉嗪麻醉重量為225-250g的雌性Wistar大鼠，然后在頸總動脈中插入導(dǎo)管。該導(dǎo)管上固定三通閥，由該閥可對血液進(jìn)行取樣，并可用包含肝素的生理鹽水替換血液。將微量移液管的尖部插入大鼠鼻腔中8mm，由此向大鼠鼻內(nèi)給藥經(jīng)過配制的鮭降鈣素(sCT)(5μg/25μl)。對于單劑量研究，給藥5μg的sCT。在多劑量研究中，在0、30、60和90分鐘時分四次給藥sCT，每次的給藥體積為25μl，而總劑量為20μg。
在單劑量研究中，在給藥前以及給藥后5、15、30、60和120分鐘時收集血樣。在多劑量研究中，在給藥前以及首次給藥后的30、60、90、120和150分鐘時收集血樣。在任何其他給藥之前總是進(jìn)行血樣的收集。
將每個血樣(0.5ml)收集在1ml經(jīng)肝素化的注射器中，然后轉(zhuǎn)移至冷凍的1.5ml聚丙烯管中，該聚丙烯管包含10μl的肝素(500U/ml)。在約3000rpm、2-8℃下離心該管20分鐘，然后將血漿上清液轉(zhuǎn)移至在-20℃下儲存的微離心管中。用競爭性放射免疫分析法測量血漿中的sCT濃度。使等分的血漿樣品和標(biāo)準(zhǔn)物在室溫下與鼠抗sCT抗體一起保溫4小時。隨后，添加125I-sCT，并在2-8℃下保溫過夜。下一天，用正常的兔抗血清和山羊抗兔抗體進(jìn)行沉淀，由此分離結(jié)合抗體的125I-sCT。與所得沉淀相關(guān)的放射活性用γ計數(shù)器測量。sCT在血漿中的濃度與沉淀物的放射活性量成反比。
通過檢查測定Cmax值，并由血漿sCT濃度v時間所作的圖中的曲線下面積計算生物利用度的值(相對于靜脈注射)。
權(quán)利要求
1.一種包含降鈣素或其酸加成鹽以及濃度為約10-50mM的檸檬酸和/或其鹽的液體藥物組合物，所述組合物的劑型適合于鼻內(nèi)給藥。
2.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其進(jìn)一步包含藥物學(xué)上可接受的水性液體鼻內(nèi)載體。
3.如權(quán)利要求2所述的液體藥物組合物，其中所述載體包括鹽水。
4.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其中所述組合物為鼻內(nèi)噴霧劑的形式。
5.如權(quán)利要求4所述的液體藥物組合物，其具有低于0.98cP的粘度。
6.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其中所述降鈣素選自于以下組中鮭降鈣素、人降鈣素、豬降鈣素和1，7-Asu-鰻降鈣素。
7.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其中所述降鈣素是鮭降鈣素。
8.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其中所述降鈣素或鹽的含量為約100-8000MRC單位/ml。
9.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其中所述降鈣素或鹽的含量為約500-4000MRC單位/ml。
10.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其中所述降鈣素或鹽的含量為約500-3000MRC單位/ml。
11.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其中所述降鈣素或鹽的含量為約1000-2500MRC單位/ml。
12.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其pH為約3-5。
13.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其pH為約3.5-3.9。
14.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其pH為約3.7。
15.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其滲透壓為約250-350mOsm/L。
16.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其還包含至少0.1重量％的Tween 80。
17.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其還包含至少一種選自于以下組中的防腐劑芐醇、苯乙醇、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯。
18.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其包含約2,200MRC單位的鮭降鈣素、約10mM的檸檬酸、約0.2％的苯乙醇、約0.5％的芐醇、以及約0.1％的Tween 80。
19.如權(quán)利要求1所述的液體藥物組合物，其包含約2,200MRC單位的鮭降鈣素、約20mM的檸檬酸、約0.2％的苯乙醇、約0.5％的芐醇、以及約0.1％的Tween 80。
20.一種向需要降鈣素治療的患者給藥降鈣素的方法，該方法包括通過鼻腔途徑向所述患者給藥如權(quán)利要求1所述的組合物。
21.如權(quán)利要求20所述的方法，其中降鈣素的給藥量為約200-600MRC單位。
22.一種提高降鈣素液體藥物組合物之穩(wěn)定性的方法，其包括在所述組合物中添加濃度為約10-50mM的檸檬酸或其鹽。
23.一種在鼻內(nèi)給藥降鈣素液體藥物組合物后提高患者中血漿降鈣素的生物利用度或濃度的方法，其包括在所述給藥前向所述組合物中添加濃度為約10-50mM的檸檬酸或其鹽。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種包含降鈣素或其酸加成鹽以及濃度為約10－50mM的檸檬酸和/或其鹽的液體藥物組合物，所述組合物的劑型適合于鼻內(nèi)給藥。
文檔編號A61K38/23GK1422160SQ01807605
公開日2003年6月4日 申請日期2001年1月31日 優(yōu)先權(quán)日2000年2月4日
發(fā)明者威廉·斯特恩 申請人:尤尼金實驗室公司