專利名稱：作為5－h(huán)t的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
1-氨基-烷基環(huán)己烷的新用途。
現(xiàn)有技術(shù)現(xiàn)有技術(shù)的代表是我們在2000年3月7日的在先專利USP6,034,134和我們的公開申請WO 99/01416、PCT/EP98/04026和Parsons等人，Neuropharmacology(神經(jīng)藥理學(xué))38，85-108(1999)，其中公開了本發(fā)明使用的活性化合物，并公開它是NMDA受體拮抗劑和抗驚厥藥。
本發(fā)明本發(fā)明涉及選自下式化合物的1-氨基-烷基環(huán)己烷化合物和它們的對映體、光學(xué)異構(gòu)體、水合物和藥學(xué)上可接受的鹽以及它們的藥物組合物的新用途， 其中，R*為-(CH2)n-(CR6R7)m-NR8R9；其中，n+m＝0、1或2；其中，R1至R7獨立地選自氫和低級烷基(1-6C)；和其中，R8和R9各自代表氫和低級烷基(1-6C)或一起代表低級亞烷基-(CH2)x-，其中x為2-5，包括2和5；以及這些化合物和組合物作為5HT3和神經(jīng)元煙堿性受體拮抗劑以及神經(jīng)保護劑用于治療活動物以減輕對其具有反應(yīng)性的病癥的制備和用途。
這些化合物的代表如下MRZ 2/5791-氨基-1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己烷，HCl6011-氨基-1-丙基-3，3，5，5-四甲基環(huán)己烷，HCl6071-氨基-1，3，3，5(反式)-四甲基環(huán)己烷(軸向氨基)，HCl6151-氨基-1，3，5，5-四甲基-3-乙基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，HCl6161-氨基-1，3，5-三甲基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，HCl6171-氨基-1，3-二甲基-3-丙基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，HCl6181-氨基-1，3(反式)，5(反式)-三甲基-3(順式)丙基環(huán)己烷，HCl6201-氨基-1，3-二甲基-3-乙基環(huán)己烷，HCl6211-氨基-1，3，3-三甲基環(huán)己烷，HCl6251-氨基-1，3(反式)-二甲基環(huán)己烷，HCl6271-氨基-1-甲基-3(反式)丙基環(huán)己烷，HCl6291-氨基-1-甲基-3(反式)乙基環(huán)己烷，HCl6321-氨基-1，3，3-三甲基-5(順式)乙基環(huán)己烷，HCl6331-氨基-1，3，3-三甲基-5(反式)乙基環(huán)己烷，HCl640N-甲基-1-氨基-1，3，3，5.5-五甲基環(huán)己烷，HCl6411-氨基-1-甲基環(huán)己烷，HCl642N，N-二甲基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己烷，HCl.H2O705N-(1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己基)吡咯烷，HCl6801-氨基-1，3(反式)，5(反式)-三甲基環(huán)己烷，HCl6811-氨基-1，3(順式)，5(順式)-三甲基環(huán)己烷，HCl.H2O，6821-氨基-(1R，5S)反式-5-乙基-1，3，3-三甲基環(huán)己烷，HCl6831-氨基-(1S，5S)順式-5-乙基-1，3，3-三甲基環(huán)己烷，HCl.H2O，
1-氨基-1，5，5-三甲基-3(順式)-異丙基-環(huán)己烷HCl，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(反式)-異丙基-環(huán)己烷HCl，1-氨基-1-甲基-3(順式)-乙基-環(huán)己烷HCl，1-氨基-1-甲基-3(順式)-甲基-環(huán)己烷HCl，1-氨基-5，5-二乙基-1，3，3-三甲基-環(huán)己烷HCl，和還有，1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3，3-二乙基環(huán)己烷，1-氨基-1-乙基-3，3，5，5-四甲基環(huán)己烷，N-乙基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己烷，N-(1，3，5-三甲基環(huán)己基)吡咯烷或哌啶，N-[1，3(反式)，5(反式)-三甲基環(huán)己基]吡咯烷或哌啶，N-[1，3(順式)，5(順式)-三甲基環(huán)己基]吡咯烷或哌啶，N-(1，3，3，5-四甲基環(huán)己基)吡咯烷或哌啶，N-(1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己基)吡咯烷或哌啶，N-(1，3，5，5-四甲基-3-乙基環(huán)己基)吡咯烷或哌啶，N-(1，5，5-三甲基-3，3-二乙基環(huán)己基)吡咯烷或哌啶，N-(1，3，3-三甲基-順式-5-乙基環(huán)己基)吡咯烷或哌啶，N-[(1S，5S)順式-5-乙基-1，3，3-三甲基環(huán)己基]吡咯烷或哌啶，N-(1，3，3-三甲基-反式-5-乙基環(huán)己基)吡咯烷或哌啶，N-[(1R，5S)反式-5-乙基-1，3，3-三甲基環(huán)己基]吡咯烷或哌啶，N-(1-乙基-3，3，5，5-四甲基環(huán)己基)吡咯烷或哌啶，和N-(1-丙基-3，3，5，5-四甲基環(huán)己基)吡咯烷或哌啶，和它們的光學(xué)異構(gòu)體、對映體，以及前述任何化合物的鹽酸鹽、氫溴酸鹽、鹽酸鹽水合物或其它藥學(xué)上可接受的鹽。
特別令人感興趣的是其中至少R1、R4、和R5為低級烷基的上式的化合物，和其中R1至R5為甲基的化合物，其中x為4或5的化合物，特別是化合物N-(1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己基)吡咯烷，及其光學(xué)異構(gòu)體、對映體、水合物和藥學(xué)上可接受的鹽。
在我們2000年3月7日的USP 6,034,134中，我們公開了上式的化合物，它們的藥物組合物和它們作為NMDA-受體拮抗劑和抗驚厥藥的用途。已發(fā)現(xiàn)上式的化合物和它們的光學(xué)異構(gòu)體、對映體、水合物和藥學(xué)上可接受的鹽，除了其NMDA拮抗劑和抗驚厥藥性能以外，還相當(dāng)不可預(yù)測地具有高度的5HT3和神經(jīng)元煙堿性受體拮抗性，使得它們可用于治療其中重要性在于阻斷這些受體的疾病或病癥。
發(fā)明概述因此我們認(rèn)為本發(fā)明包括的內(nèi)容可以特別概述為以下文字一種用于抑制病癥的進展和減輕這種病癥的活動物治療方法，所述病癥是通過5HT3或神經(jīng)元煙堿性受體拮抗劑而減輕的，所述方法包括步驟給所述的活動物施用一定量的選自下式化合物的1-氨基烷基環(huán)己烷化合物 其中，R*為-(CH2)n-(CR6R7)m-NR8R9；其中，n+m＝0、1或2；其中，R1至R7獨立地選自氫和低級烷基(1-6C)；其中，R8和R9獨立地選自氫和低級烷基(1-6C)或一起代表低級亞烷基-(CH2)x-，其中x為2-5，包括2和5；和它們的光學(xué)異構(gòu)體、對映體、水合物和藥學(xué)上可接受的鹽，所述化合物有效地用于所述的目的；這樣一種方法其中至少R1、R4和R5為低級烷基；這樣一種方法其中R1至R5為甲基；
這樣一種方法其中R1為乙基；這樣一種方法其中R2為乙基；這樣一種方法其中R3為乙基；這樣一種方法其中R4為乙基；這樣一種方法其中R5為乙基；這樣一種方法其中R5為丙基；這樣一種方法其中R6或R7為甲基；這樣一種方法其中R6或R7為乙基；這樣一種方法其中X為4或5；這樣一種方法其中，所治療或抑制的病癥選自嘔吐、焦慮癥、精神分裂癥、藥物和酒精濫用癥、抑郁癥、認(rèn)知障礙、阿爾茨海默氏病、小腦震顫、帕金森氏病、圖雷特綜合征、疼痛和食欲障礙；這樣一種方法其中，所述化合物選自1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己烷，1-氨基-1-丙基-3，3，5，5-四甲基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3，5(反式)-四甲基環(huán)己烷(軸向氨基)，1-氨基-1，3，5，5-四甲基-3-乙基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，1-氨基-1，3，5-三甲基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，1-氨基-1，3-二甲基-3-丙基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，1-氨基-1，3(反式)，5(反式)-三甲基-3(順式)-丙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3-二甲基-3-乙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基環(huán)己烷，1-氨基-1，3(反式)-二甲基環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)丙基環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)乙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(順式)乙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(反式)乙基環(huán)己烷，N-甲基-1-氨基-1，3，3，5.5-五甲基環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基環(huán)己烷，
N，N-二甲基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(順式)-異丙基-環(huán)己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(反式)-異丙基-環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(順式)-乙基-環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(順式)-甲基-環(huán)己烷，1-氨基-5，5-二乙基-1，3，3-三甲基-環(huán)己烷，和N-(1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己基)吡咯烷，和前述任何化合物的光學(xué)異構(gòu)體、對映體、水合物和藥學(xué)上可接受的鹽；和這樣一種方法其中，所述化合物的給藥形式為包含所述化合物與一種或多種藥學(xué)上可接受的稀釋劑、賦形劑或載體組合的其藥物組合物。
此外，選自下式化合物的1-氨基烷基環(huán)己烷 其中，R*為-(CH2)n-(CR6R7)m-NR8R9；其中，n+m＝0、1或2；其中，R1至R7獨立地選自氫和低級烷基(1-6C)；其中，R8和R9獨立地選自氫和低級烷基或一起代表低級亞烷基-(CH2)x-，其中x為2-5，包括2和5，和它們的光學(xué)異構(gòu)體、對映體、水合物和藥學(xué)上可接受的鹽，在制備用于治療活動物以減輕通過5HT3受體拮抗劑而減輕的病癥的藥物中的用途，這樣一種用途，其中至少R1、R4和R5為低極烷基；這樣一種用途，其中R1至R5為甲基；這樣一種用途，其中x為4或5；這樣一種用途，其中，所述化合物選自1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己烷，1-氨基-1-丙基-3，3，5，5-四甲基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3，5(反式)-四甲基環(huán)己烷(軸向氨基)，1-氨基-1，3，5，5-四甲基-3-乙基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，1-氨基-1，3，5-三甲基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，1-氨基-1，3-二甲基-3-丙基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，1-氨基-1，3(反式)，5(反式)-三甲基-3(順式)丙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3-二甲基-3-乙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基環(huán)己烷，1-氨基-1，3(反式)-二甲基環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)丙基環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)乙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(順式)乙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(反式)乙基環(huán)己烷，N-甲基-1-氨基-1，3，3，5.5-五甲基環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基環(huán)己烷，N，N-二甲基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(順式)-異丙基-環(huán)己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(反式)-異丙基-環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(順式)-乙基-環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(順式)-甲基-環(huán)己烷，1-氨基-5，5-二乙基-1，3，3-三甲基-環(huán)己烷，和N-(1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己基)吡咯烷，和前述任何化合物的光學(xué)異構(gòu)體、對映體、水合物和藥學(xué)上可接受的鹽；以及最后這樣一種用途，其中，所治療的病癥選自嘔吐、焦慮癥、精神分裂癥、藥物和酒精濫用癥、抑郁癥、認(rèn)知障礙、阿爾茨海默氏病、小腦震顫、帕金森氏病、圖雷特綜合征、疼痛、和食欲障礙。
發(fā)明詳述背景和藥理學(xué)5-HT3受體拮抗劑5-HT3受體是陽離子通透性配體門控離子向性受體。在人體中，5-HT3受體在胃腸粘膜中的腸嗜鉻細(xì)胞上表現(xiàn)出最高的密度，它受傳入迷走神經(jīng)和腦干最后區(qū)支配，所述區(qū)域形成化學(xué)受體觸發(fā)區(qū)。
由于5-HT3受體不僅在最后區(qū)具有高密度，而且在邊緣系統(tǒng)的海馬和杏仁核區(qū)也具有高密度，因此已提示5-HT3選擇性拮抗劑可能具有向精神作用(Greenshaw&Silverstone，1997)。
實際上，早期動物研究表明5-HT3受體拮抗劑除了它們已知的止吐用途以外，還可能在多種領(lǐng)域具有臨床用途。這些范圍包括焦慮癥、精神分裂癥、藥物和酒精濫用癥、抑郁癥、認(rèn)知障礙、阿爾茨海默氏病、小腦震顫、帕金森氏病治療相關(guān)的精神病、疼痛(偏頭痛和過敏性腸綜合征)和食欲障礙。
神經(jīng)元煙堿性受體目前已知煙堿性受體的九種α亞基(α1-α9)和四種β(β1-β4)亞基。α4β2受體可能在CNS中最為普遍，特別是在海馬和紋狀體中。它們形成具有緩慢、不完全脫敏電流的非選擇性陽離子通道(II型)。同聚性α7受體是突觸前和突觸后的受體，發(fā)現(xiàn)存在于海馬、運動皮層和邊緣系統(tǒng)以及外周自主神經(jīng)系統(tǒng)中。這些受體的特征是它們的高Ca2+通透性和快速、強烈的脫敏反應(yīng)(1A型)。
煙堿性受體的變化涉及許多疾病。這些疾病包括阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、圖雷特氏綜合征、精神分裂癥、藥物濫用、和疼痛。
基于觀察到煙堿性激動劑煙堿本身似乎具有有益作用，目前的藥物研制瞄準(zhǔn)選擇性煙堿性激動劑的發(fā)現(xiàn)。
另一方面，不清楚煙堿性激動劑在如圖雷特氏綜合征和精神分裂癥中的作用是否是由于神經(jīng)元煙堿性受體的活化或失活/脫敏所導(dǎo)致的。
激動劑對神經(jīng)元煙堿性受體的作用主要取決于接觸時間?？焖倏赡婷撁粼趲缀撩雰?nèi)發(fā)生，衰減發(fā)生在數(shù)秒內(nèi)，含α4β2和α7的受體的不可逆失活在數(shù)小時內(nèi)發(fā)生，而它們的上調(diào)發(fā)生在數(shù)天內(nèi)。
換句話說，煙堿性“激動劑”的作用可能實際上是神經(jīng)元煙堿性受體部分激動、失活和/或脫敏導(dǎo)致的。反過來，中等濃度的神經(jīng)元煙堿性受體通道阻滯劑在上述適應(yīng)癥中可產(chǎn)生與煙堿性激動劑所報道的相同的作用。
氨基-烷基環(huán)己烷為5-HT3和神經(jīng)元煙堿性受體拮抗劑我們推測描述為非競爭性NMDA受體拮抗劑和抗驚厥藥的新氨基-烷基環(huán)己烷生物(USP 6,034,134)，是否還可能用作5HT3和神經(jīng)元煙堿性拮抗劑。這些性能將允許在所有重要性在于阻滯5HT3或煙堿性受體的疾病或病癥中使用氨基-烷基環(huán)己烷。我們的發(fā)現(xiàn)是肯定的。
方法合成已在2000年3月7日的USP 6,034,134中公開了本發(fā)明所用的新氨基-烷基環(huán)己烷的合成。
可選擇的方法還可以根據(jù)以下的代表性實施例，通過相應(yīng)的1-游離氨基-烷基環(huán)己烷和所選擇的α、ω-二鹵代烷基化合物，如1，3-二溴丙烷，1，4-二溴丁烷或1，5-二溴戊烷反應(yīng)而制備1-環(huán)氨基化合物
N-(1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己基)吡咯烷鹽酸鹽將1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己胺鹽酸鹽(12g，58.3mmol)、碳酸鉀(48.4g，350mmol)和1，4-二溴丁烷(7.32ml，61.3mmol)在乙腈(250ml)中回?zé)?0小時。冷卻至室溫后，將混合物過濾并用乙醚(600ml)洗滌沉淀。真空下通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮濾液，并在減壓(11mm/Hg)下分餾殘留物。收集129℃下餾分得到無色油(8.95g)。將此油溶于乙醚(120ml)并加入在乙醚(30ml)中的2.7M HCl溶液。濾去所得的沉淀，用乙醚(3*30ml)洗滌，并用NaOH真空干燥得到m.p.158℃的N-(1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己基)吡咯烷鹽酸鹽水合物(12.9g，68％)。PMR光譜(DMSO-d6，TMS)d0.97(6H，s，3，5-CH3)；1.11(6H，s，3，5-CH3)；0.8-1.4(2H，環(huán)己烷4-CH2)1.41(3H，s，1-CH3)；1.69(4H，m，環(huán)己烷2，6-CH2)；1.84(4H，m，吡咯烷3，4-CH2)；3.20(4H，m，吡咯烷2，5-CH2)；10.9ppm(1H，br s，NH+)。
元素分析(C15H29n*HCl*H2O)實測值(％)C 65.0；H 11.7；N 5.0計算值(％)C 64.8；H 11.6；N 5.0。
電生理學(xué)從大鼠胚胎(E20-E21)中獲得海馬，然后將其轉(zhuǎn)移到在冰上的無Ca2+和Mg2+的Hank’s緩沖鹽溶液(Gibco)。在0.05％DNA酶/0.3％卵類粘蛋白(Sigma)中將細(xì)胞機械解離，然后與0.66％胰蛋白酶/0.1％DNA酶(Sigma)進行8分鐘的預(yù)溫育。隨后將解離的細(xì)胞在18G下離心10分鐘，重懸于極限必需培養(yǎng)基(Gibco)中，并以150,000細(xì)胞cm-2密度平板接種到預(yù)涂布聚-DL-鳥氨酸(Sigma)/層粘連蛋白(Gibco)的塑料皮氏培養(yǎng)皿(Falcon)。用補充5％胎牛血清和5％馬血清(Gibco)的NaHCO3/HEPES緩沖的極限必需培養(yǎng)基(Gibco)給細(xì)胞提供營養(yǎng)，并在37℃、5％CO2和95％濕度下培養(yǎng)。體外培養(yǎng)大約5天以后，用胞嘧啶-β-D-阿拉伯呋喃糖苷(ARAC，5μM Sigma)抑制進一步的神經(jīng)膠質(zhì)有絲分裂，然后全部更換培養(yǎng)基。
體外培養(yǎng)15-21天后，室溫(20-22℃)下，在EPC-7放大器(List)的幫助下，在全細(xì)胞模式下用磨光玻璃電極(2-3MΩ)由這些神經(jīng)元進行膜片鉗記錄。使用帶有用Zeiss DMZ(Augsburg，Munich)水平拉出器拉出的具有100μM開口直徑的θ玻璃(Clark TGC 200-10)的改良快速應(yīng)用系統(tǒng)(SF-77B Fast Step，Warner Instruments)應(yīng)用試驗物質(zhì)。胞內(nèi)溶液的內(nèi)容物含量一般如下(mM)CsCl(95)、TEAC1(20)、EGTA(10)、HEPES(10)、MgCl2(1)、CaCl2(0.2)、葡萄糖(10)、Tris-ATP(5)、Di-Tris-磷酸肌酸酐(20)、肌酸磷酸激酶(50U)；用CsOH或HCl將pH調(diào)到7.3。胞外溶液具有以下基本組成(mM)NaCl(140)、KCl(3)、CaCl2(0.2)、葡萄糖(10)、HEPES(10)、蔗糖(4.5)、河豚毒素(TTX 3*10-4)。
從歐洲細(xì)胞培養(yǎng)物收藏中心(ECACC，Salisbury，UK)購得N1E-115細(xì)胞，并將其貯存在-80℃直至以后使用。將這些細(xì)胞以100,000細(xì)胞Gm-2的密度平板接種到塑料皮氏培養(yǎng)皿(Falcon)，并用補充15％胎牛血清(Gibco)的用NaHCO3/HEPES緩沖的極限必需培養(yǎng)基(MEM)給細(xì)胞提供營養(yǎng)，并在37℃、5％CO2和95％濕度下培養(yǎng)。每天全部更換培養(yǎng)基。每三天一次，在用胰蛋白酶-EDTA(1％，在PBS中)處理，重懸于MEM，并在1000轉(zhuǎn)速下離心4分鐘之后，將細(xì)胞再接種到新鮮的皮氏培養(yǎng)皿。
接種后2-3天，在室溫(20-22℃)下，用EPC-7擴大器(List)，在全細(xì)胞模式下用磨光玻璃電極(2-3MΩ)由提升的細(xì)胞(liftedcells)進行膜片鉗記錄。如對于海馬細(xì)胞一樣應(yīng)用試驗物質(zhì)。胞內(nèi)溶液的內(nèi)容物含量如下(mM)CsCl(130)、HEPES(10)、EGTA(10)、MgCl2(2)、CaCl2(2)、K-ATP(2)、Tris-GTP(0.2)、D-葡萄糖(10)；用CsOH或HCl將pH調(diào)節(jié)到7.3。胞外溶液具有以下基本組成(mM)NaCl(124)、KCl(2.8)、HEPES(10)，用NaOH或HCl調(diào)至pH 7.3。
只接受穩(wěn)定細(xì)胞的結(jié)果納入最后的分析，即在除去受試拮抗劑之后表現(xiàn)出至少75％恢復(fù)對激動劑(5-羥色胺或Ach)的反應(yīng)。盡管如此，由于某些細(xì)胞的衰減(10分鐘內(nèi)＜＝10％)，藥物作用的恢復(fù)不總是100％。當(dāng)存在時，它總是通過將各種濃度下的拮抗％基于對照和恢復(fù)基礎(chǔ)上并假設(shè)這種衰減為線性時間過程而得到補償?shù)?。在至?個細(xì)胞上使用3-6種濃度進行穩(wěn)定狀態(tài)阻滯的情況下對所有的拮抗劑進行評價。取決于拮抗劑的濃度，在2-5次激動劑應(yīng)用內(nèi)實現(xiàn)平衡阻滯。
結(jié)果表1顯示所選擇的用于本研究的氨基-烷基環(huán)己烷的一般結(jié)構(gòu)。
氨基-烷基環(huán)己烷的基本結(jié)構(gòu)
表1括號內(nèi)的代替代表外消旋混合物中的可選擇物，例如CH3(C3H7)意指CH3或C3H7。
*****附圖的簡要說明

圖1A和圖1B顯示在N1E-115培養(yǎng)細(xì)胞中由MRZ 2/633導(dǎo)致的5HT3受體的濃度依賴性阻滯。在多種濃度的MRZ 2/633(1-10μM)持續(xù)存在下每30秒應(yīng)用5-羥色胺(10μM)2秒。
A如條柱所示，應(yīng)用單一N1E-115細(xì)胞5-羥色胺的原始數(shù)據(jù)。左圖和右圖分別表示對照和恢復(fù)反應(yīng)。中間的三幅圖分別表示在MRZ2/633 1、3和10μM連續(xù)存在下的平衡反應(yīng)。
B將峰值和穩(wěn)定狀態(tài)(坪值)5-羥色胺電流反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化至對照水平，并繪制平均值(±SEM)對MRZ 2/633濃度(n＝8)圖。根據(jù)4參數(shù)對數(shù)方程(GraFit，Erithacus Software)進行IC50s的估算和曲線擬合。
圖2A和圖2B顯示煙堿通過誘導(dǎo)受體脫敏而用作海馬神經(jīng)元中神經(jīng)元煙堿性(Ia型＝α7)受體的功能性拮抗劑。在多種濃度(-)煙堿(1-10μM)持續(xù)存在下每30秒應(yīng)用Ach(1mM)2秒。
A如條柱所示，應(yīng)用單一海馬神經(jīng)元-Ach的原始數(shù)據(jù)。左圖和右圖分別表示對照和恢復(fù)反應(yīng)。中間的三幅圖分別表示在(-)煙堿1、3和10μM連續(xù)存在下的平衡反應(yīng)。
B將峰值A(chǔ)ch電流反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化至對照水平，并繪制平均值(±SEM)對(-)煙堿濃度(n＝12/濃度)圖。根據(jù)4參數(shù)對數(shù)方程(GraFit，Erithacus Software)進行IC50s的估算和曲線擬合。
圖3A和圖3B表示在海馬神經(jīng)元中由MRZ 2/616導(dǎo)致的神經(jīng)元煙堿性(Ia型＝α7)受體的濃度依賴性阻滯。在多種濃度的MRZ2/616(1-100μM)連續(xù)存在下每30秒應(yīng)用Ach(1mM)2秒。
A如條柱所示，應(yīng)用單一海馬神經(jīng)元-Ach的原始數(shù)據(jù)。左圖和右圖分別表示對照和恢復(fù)反應(yīng)。中間的三幅圖分別表示在MRZ 2/616 10、30和100μM連續(xù)存在下的平衡反應(yīng)。
B將峰值A(chǔ)ch電流反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化至對照水平，并繪制平均值(±SEM)對MRZ 2/616濃度(n＝11/濃度)圖。根據(jù)4參數(shù)對數(shù)方程(GraFit，Erithacus Software)進行IC50s的估算和曲線擬合。
圖4A和圖4B表示在海馬神經(jīng)元中由MRZ 2/705導(dǎo)致的神經(jīng)元煙堿性(Ia型＝α7)受體的濃度依賴性阻滯。在多種濃度的MRZ2/705(0.3-30μM)連續(xù)存在下每30秒應(yīng)用Ach(1mM)2秒。
A如條柱所示，應(yīng)用單一海馬神經(jīng)元-Ach的原始數(shù)據(jù)。左圖和右圖分別表示對照和恢復(fù)反應(yīng)。中間的三幅圖分別表示在MRZ 2/7050.3、1.0和3.0μM連續(xù)存在下的平衡反應(yīng)。
B將峰值A(chǔ)ch電流反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化至對照水平，并繪制平均值(±SEM)對MRZ 2/705濃度(n＝9/濃度)圖。根據(jù)4參數(shù)對數(shù)方程(GraFit，Erithacus Software)進行IC50s的估算和曲線擬合。
*******氨基-烷基環(huán)己烷對5-HT3受體的作用全部10種受試的氨基-烷基環(huán)己烷在N1E-115細(xì)胞中拮抗5-羥色胺誘導(dǎo)的內(nèi)向電流，具有類似于以前報道的NMDA誘導(dǎo)的內(nèi)向電流的效力(圖1，還參見Parsons等人，1999)。當(dāng)對在HEK-293細(xì)胞中永久性表達(dá)的5-HT3受體進行測試時，對相同的化合物觀察到類似的作用。因此，受試的氨基-烷基環(huán)己烷對5-HT3受體的作用類似于以前報道的多種抗抑郁劑的作用(Fan，1994)，即它們通過誘導(dǎo)脫敏而拮抗反應(yīng)。
表2關(guān)于氨基-烷基環(huán)己烷對NMDA和5-HT3受體的效力的總結(jié)。從Parsons等人，1999獲得關(guān)于置換大鼠皮層膜中的[3H]MK-801結(jié)合和培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元中NMDA誘導(dǎo)的內(nèi)向電流(在-70mV)的拮抗作用的數(shù)據(jù)?？?-HT3受體的效力評價為對抗N1E-115細(xì)胞對應(yīng)用2秒5-羥色胺(10μM)的“穩(wěn)態(tài)”反應(yīng)的IC50s(μM)。
氨基-烷基環(huán)己烷對神經(jīng)元煙堿性受體的作用將Ach(1mM)濃度-箝應(yīng)用于培養(yǎng)的海馬細(xì)胞導(dǎo)致快速、顯著的內(nèi)向電流，所述電流快速脫敏至低得多的坪值水平。煙堿導(dǎo)致神經(jīng)元對Ach反應(yīng)的濃度依賴性阻滯，且在吸煙者的CNS中達(dá)到的濃度導(dǎo)致實質(zhì)上的拮抗作用(圖2，IC50＝1.17μM)。
接下來我們還評價了多種氨基-烷基環(huán)己烷作為α7神經(jīng)元煙堿性拮抗劑的效力。在位置R1至R4具有低級烷基取代的簡單氨基-烷基環(huán)己烷(見表1)是有效的α7神經(jīng)元煙堿性拮抗劑，且某些氨基-烷基環(huán)己烷如MRZ 2/616所例示，實際上在這方面比先前關(guān)于NMDA受體報道的有效得多(參見圖3和Parsons等人，1999)。
N-吡咯烷衍生物MRZ 2/705作為α7神經(jīng)元煙堿性拮抗劑的效力比作為NMDA受體拮抗劑的效力大16倍(表3和圖4)。
表3氨基-烷基環(huán)己烷對NMDA和α7神經(jīng)元煙堿性受體的效力的總結(jié)。從Parsons等人，1999獲得關(guān)于置換大鼠皮層膜中的[3H]MK-801結(jié)合和所培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元中NMDA誘導(dǎo)的內(nèi)向電流(在-70mV，PC NMDA)的拮抗作用的數(shù)據(jù)。對抗α7神經(jīng)元煙堿性受體(PC ACh)的效力評價為對抗培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元對應(yīng)用2秒ACh(1mM)的峰值反應(yīng)的IC50s(μM)。
結(jié)論現(xiàn)有數(shù)據(jù)表明，氨基-烷基環(huán)己烷為5-HT3受體拮抗劑。這些作用在類似于或者甚至低于如由Parsons等人，1999報道的用于NMDA受體非競爭性拮抗作用所需的濃度下可以看到。因此這些化合物對NMDA和5-HT3受體的聯(lián)合拮抗作用導(dǎo)致正協(xié)同作用，通過增加目標(biāo)作用-認(rèn)知提高和抗抑郁作用，同時通過如降低中邊緣(meso-limbic)多巴胺機能亢進而進一步減少可能的NMDA受體拮抗的副作用，從而導(dǎo)致其在阿爾茨海默氏病中的治療安全性和有效性。而且，5-HT3拮抗作用本身用于治療認(rèn)知缺陷、抑郁、酒精濫用、焦慮、偏頭痛、過敏性腸綜合征和嘔吐。
現(xiàn)有數(shù)據(jù)還表明某些氨基烷基環(huán)己烷作為α7神經(jīng)元煙堿性受體拮抗劑實際上比其NMDA和/或5-HT3受體作用更為有效?？赡苓@些試劑中的許多還是α4β2受體的拮抗劑，如Buisson等人(1998)關(guān)于試劑如美金剛胺和金剛烷胺所報道。我們提出其他人報道的關(guān)于神經(jīng)元煙堿激動劑在多種疾病的動物模型中的積極作用實際上是由于α7受體脫敏和α4/β2受體失活/下調(diào)或由例如部分拮抗作用導(dǎo)致的其它形式的功能性拮抗作用。因此，中等濃度的神經(jīng)元煙堿性受體拮抗劑用于對與煙堿傳遞障礙相關(guān)的疾病，如阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、精神分裂癥、圖雷特氏綜合征、藥物濫用和疼痛進行神經(jīng)保護或治療。
藥物組合物本發(fā)明的活性成分可以與一種或多種常規(guī)助劑、載體或稀釋劑一起置于藥物組合物及其單位劑量的形式內(nèi)，且可以作為以下劑型使用固體，如包衣或未包衣的片劑或填充的膠囊，或液體如溶液、懸浮液、乳液、酏劑或填充酏劑的膠囊，這些劑型都用于口服；用于直腸給藥的栓劑或膠囊劑型或用于腸胃外(包括靜脈內(nèi)或皮下)應(yīng)用的無菌注射液劑型。因此這些藥物組合物及其單位劑型可以包含常規(guī)或特定比例的常規(guī)或新的成分，含或不含另外的活性化合物或成分，且這些劑型可以包含與期望使用的日劑量范圍相當(dāng)?shù)娜魏芜m宜有效量的活性成分。因此，每片包含二十(20)至一百(100)毫克活性成分，或更寬范圍，每片十(10)至二百五十(250)毫克的片劑是單位劑型的代表。
治療方法由于它們高度的活性和低毒性，且表現(xiàn)出非常有利的治療指數(shù)，本發(fā)明的活性成分可以對需要給藥的受試者，如活動物(包括人)身體進行給藥，用于治療、緩解或改善、減輕或消除對其易感的癥狀或病癥，或本申請其它地方所述的癥狀或病癥的代表，所述給藥優(yōu)選與一種或多種藥學(xué)可接受的賦形劑、載體或稀釋劑并行、同時或一起給藥，具體并優(yōu)選以其藥物組合物的形式，通過口服、直腸或腸胃外(包括靜脈內(nèi)或皮下)或某些情況下甚至局部途徑以有效量用藥。劑量范圍可以是每天1-1000毫克，優(yōu)選每天10-500毫克，特別是每天50-500毫克，這通常取決于確切的給藥模式、給藥的劑型、給藥針對的適應(yīng)癥、涉及的受試者和涉及的受試者的體重，以及主管的醫(yī)師或獸醫(yī)的偏好和經(jīng)驗。
代表性藥物組合物的實施例在常用溶劑、輔劑和載體的輔助下，可以將反應(yīng)產(chǎn)物加工成片劑、包衣片、膠囊、滴液、栓劑、注射劑和輸入制劑等等，并可以通過口服、直腸、腸胃外和其它途徑進行治療應(yīng)用。代表性的藥物組合物如下。
(a)可以通過常規(guī)制片技術(shù)制備包含活性成分的適于口服的片劑。
(b)關(guān)于栓劑，可以采用任何常規(guī)的栓劑基質(zhì)通過常規(guī)操作將活性成分引入其中，所述基質(zhì)如在正常的室溫下為固體但在體溫或大約體溫熔化的聚乙二醇。
(c)關(guān)于腸胃外(包括靜脈內(nèi)和皮下)無菌溶液，同時使用常規(guī)量的活性成分和常規(guī)成分，例如氯化鈉和雙蒸水適量，依據(jù)常規(guī)方法，如過濾、無菌填充至安瓿或IV滴瓶和高溫滅菌以達(dá)到無菌。
其它適宜的藥物組合物對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是非常顯而易見的。
僅以例示的方式給出以下的實施例，不將其理解為限定。
實施例1片劑配方包含10毫克活性成分的片劑的適宜配方如下Mg.
活性成分 10乳糖 63微晶纖維素 21滑石 4硬脂酸鎂 1膠態(tài)二氧化硅 1實施例2片劑配方包含100毫克活性成分的片劑的另一種適宜配方如下Mg.
活性成分 100馬鈴薯淀粉 20聚乙烯吡咯烷酮 10薄膜包衣和著色膜包衣材料的組成乳糖 100微晶纖維素 80明膠 10聚乙烯吡咯烷酮，交聯(lián)的 10滑石 10硬脂酸鎂 2膠態(tài)二氧化硅 3色素 5
實施例3膠囊配方包含50毫克活性成分的膠囊的適宜配方如下Mg.
活性成分 50玉米淀粉 20二代磷酸鈣 50滑石 2膠態(tài)二氧化硅 2填充在凝膠膠囊中。
實施例4注射液包含1％活性成分的可注射溶液的適宜配方如下活性成分mg 12氯化鈉 mg 8無菌水 至制備1ml實施例5液體口服配方在1毫升混合物中含有2毫克活性成分的1升液體混合物的適宜配方如下G.
活性成分2蔗糖250葡萄糖 300山梨醇 150橙味香料10日落黃.
純凈水加入至制備總共1000ml
實施例6液體口服配方在1毫升混合物中含20毫克活性成分的1升液體混合物的另一種適宜的配方如下G.
活性成分 20黃芪膠 7甘油 50蔗糖 400羥苯甲酸甲酯 0.5對羥基苯甲酸丙酯 0.05紅醋栗香料 10可溶性紅色顏料 0.02純凈水加入至制備總共1000ml實施例7液體口服配方在1毫升混合物中含2毫克活性成分的1升液體混合物的另一種適宜的配方如下G.
活性成分2蔗糖400苦橙皮酊20甜橙皮酊15純凈水加入至制備總共1000ml
實施例8氣霧劑配方180g氣霧劑溶液包含G.
活性成分 10油酸 5乙醇 81純凈水9四氟乙烷 75將15ml溶液裝入鋁氣霧劑罐中，加蓋定量閥，用3.0bar吹洗(purge)。
實施例9TDS配方100g溶液包含G.
活性成分 10.0乙醇 57.5丙二醇7.5二甲亞砜 5.0羥乙基纖維素 0.4純凈水19.6將1.8ml溶液置于被粘性襯片覆蓋的羊毛上。通過保護性襯墊封閉該體系，該襯墊在使用前除去。
實施例10納米顆粒(nanoparticle)配方10g聚丁基氰基丙烯酸酯納米顆粒包含G.
活性成分 1.0泊洛沙姆 0.1丁基氰基丙烯酸酯 8.75甘露醇 0.1氯化鈉 0.05通過在作為聚合反應(yīng)介質(zhì)的水/0.1 N HCl/乙醇混合物中乳化聚合而制備聚丁基氰基丙烯酸酯。最后將懸浮液中的納米顆粒在真空下凍干。
因此，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物可用于治療活的動物體尤其是人的疾病，在5HT3和煙堿性受體適應(yīng)癥中用于治療癥狀和神經(jīng)保護目的。
如前述，使用本發(fā)明的化合物治療活的動物以抑制所選擇的疾病的進展和減輕該疾病的方法可通過任何通常接受的藥學(xué)途徑，使用有效緩解欲減輕的具體疾病的所選擇劑量來進行。
本發(fā)明的化合物在制備治療活的動物以抑制所選擇的疾病或病癥，特別是易感于用5HT3或煙堿性受體拮抗劑治療的疾病或病癥的進展或緩解所述疾病的藥物中的應(yīng)用，是以常規(guī)方式實施的，包括將有效量的本發(fā)明的化合物與藥學(xué)上可接受的稀釋劑、賦形劑或載體混合的步驟，而治療方法、藥物組合物和本發(fā)明化合物在制備藥物中的用途與前述和關(guān)于相同的1-氨基化合物的我們的在先USP 6,034,134的內(nèi)容一致，且代表性的酸加成鹽、對映體、異構(gòu)體和水合物及它們的制備方法類似地公開在關(guān)于1-氨基-烷基環(huán)己烷化合物的我們的在先USP和公開的WO申請中。
通過將活性成分與適宜的藥學(xué)上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體混合而制備的代表性的藥物組合物包括片劑、膠囊、用于注射的溶液、液體口服配方、氣霧劑配方、TDS配方和納米顆粒配方，從而生產(chǎn)用于口服、注射或皮膚應(yīng)用的藥物，這些藥物組合物也與前述和在關(guān)于這些1-氨基-烷基環(huán)己烷的美國專利6,034,134中所給出的藥物組合物實施例相一致。
*****應(yīng)該理解本發(fā)明不限于具體的操作細(xì)節(jié)或具體的組合物、方法、步驟或所示和所述的實施方案，明顯的修改和等同對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，因此本發(fā)明僅由根據(jù)所附的權(quán)利要求合法得出的完整保護范圍所限定。
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權(quán)利要求
1.一種治療活動物以抑制病癥進展或減輕病癥的方法，所述病癥通過5HT3或神經(jīng)元煙堿性受體拮抗劑而減輕，所述方法包括以下步驟給所述的活動物施用有效量的下式的1-氨基烷基環(huán)己烷化合物 其中R*為-(CH2)n-(CR6R7)m-NR8R9；n+m＝0、1或2；R1至R7獨立地選自氫和C1-6烷基；R8和R9獨立地選自氫和C1-6烷基或一起代表C2-5-亞烷基；或它們的光學(xué)異構(gòu)體、對映體、水合物或藥學(xué)上可接受的鹽。
2.權(quán)利要求1的方法，其中至少R1、R4和R5為C1-6烷基。
3.權(quán)利要求2的方法，其中R1至R5為甲基。
4.權(quán)利要求1的方法，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7之一為乙基。
5.權(quán)利要求1的方法，其中R5為丙基。
6.權(quán)利要求1-3之任一項的方法，其中R6或R7為甲基。
7.權(quán)利要求2-6之任一項的方法，其中R8和R9一起代表C4或C5亞烷基。
8.權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物選自1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己烷，1-氨基-1-丙基-3，3，5，5-四甲基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3，5(反式)-四甲基環(huán)己烷(軸向氨基)，1-氨基-1，3，5，5-四甲基-3-乙基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，1-氨基-1，3，5-三甲基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，1-氨基-1，3-二甲基-3-丙基環(huán)己烷(非對映體的混合物)，1-氨基-1，3(反式)，5(反式)-三甲基-3(順式)-丙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3-二甲基-3-乙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基環(huán)己烷，1-氨基-1，3(反式)-二甲基環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)丙基環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)乙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(順式)乙基環(huán)己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(反式)乙基環(huán)己烷，N-甲基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基環(huán)己烷，N，N-二甲基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(順式)-異丙基-環(huán)己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(反式)-異丙基-環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(順式)-乙基-環(huán)己烷，1-氨基-1-甲基-3(順式)-甲基-環(huán)己烷，1-氨基-5，5-二乙基-1，3，3-三甲基-環(huán)己烷，和N-(1，3，3，5，5-五甲基環(huán)己基)吡咯烷，和前述任何化合物的光學(xué)異構(gòu)體、對映體、水合物和藥學(xué)上可接受的鹽。
9.權(quán)利要求1-8之任一項的方法，其中所述減輕或抑制的病癥選自嘔吐、焦慮癥、精神分裂癥、藥物和酒精濫用癥、抑郁癥、認(rèn)知障礙、阿爾茨海默氏病、小腦震顫、帕金森氏病、圖雷特氏綜合征、疼痛和食欲障礙。
10.權(quán)利要求1-9之任一項的方法，其中所述化合物的給藥形式為包含該化合物與一種或多種藥學(xué)上可接受的稀釋劑、賦形劑或載體組合的藥物組合物。
11.權(quán)利要求1-8之任一項中定義的1-氨基烷基環(huán)己烷，包括其光學(xué)異構(gòu)體、對映體、水合物和藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療活的動物以抑制病癥進展或減輕病癥的藥物中的用途，所述病癥通過5HT3或神經(jīng)元煙堿性受體拮抗劑而減輕。
12.權(quán)利要求1-8之任一項中定義的1-氨基烷基環(huán)己烷，包括其光學(xué)異構(gòu)體、對映體、水合物和藥學(xué)上可接受的鹽用于治療通過5HT3或神經(jīng)元煙堿性受體拮抗劑而減輕的病癥。
13.權(quán)利要求11或12所要求的用途，其中所述減輕或抑制的病癥選自嘔吐、焦慮癥、精神分裂癥、藥物和酒精濫用癥、抑郁癥、認(rèn)知障礙、阿爾茨海默氏病、小腦震顫、帕金森氏病、圖雷特氏綜合征、疼痛和食欲障礙。
全文摘要
某些1－氨基烷基環(huán)己烷是具有全身活性的5HT
文檔編號A61P25/28GK1620419SQ01811413
公開日2005年5月25日 申請日期2001年6月19日 優(yōu)先權(quán)日2000年6月20日
發(fā)明者C·G·R·帕森斯, W·丹尼茲, M·戈爾德, I·卡爾文施, V·考斯, A·杰金森斯 申請人:莫茨藥物股份兩合公司