專利名稱：放射藥物的穩(wěn)定劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及穩(wěn)定的放射藥物組合物，以及制備穩(wěn)定的放射藥物組合物用的非放射性藥盒。
背景技術(shù)：
由于輻射分解或氧化還原反應(yīng)，某些放射藥物會(huì)發(fā)生降解，并因此表現(xiàn)出不良的不穩(wěn)定性。制備放射藥物，尤其是Tc-99m放射藥物的非放射性藥盒可能表現(xiàn)出下述兩種不穩(wěn)定性(i)非放射性組合物隨時(shí)間的貯藏期限不穩(wěn)定性，(ii)形成后放射藥物的不穩(wěn)定性。
對(duì)于Tc-99m，第二種不穩(wěn)定性稱為重新配制后不穩(wěn)定性。US4451451公開(kāi)了用作锝非放射性藥盒，包括用于制備二膦酸99mTc-絡(luò)合物的藥盒的穩(wěn)定劑的對(duì)氨基苯甲酸(pABA)和類似物。
Tc-99m-六甲基亞丙基胺肟(下文中稱為99mTc-HMPAO)是用作局部腦血流顯像劑的市售放射藥物。99mTc-HMPAO在重新配制后穩(wěn)定性方面是特別不穩(wěn)定的。99mTc-HMPAO通常是用含有HMPAO和亞錫離子的冷凍干燥的非放射性藥盒制備的。亞錫離子的作用是將99mTc-過(guò)锝酸根(99mTcO4-)，即氧化態(tài)的Tc(VII)還原成Tc(V)氧化態(tài)的99mTc-HMPAO金屬絡(luò)合物。Tc-99m標(biāo)記一小時(shí)后，99mTc-HMPAO的放射化學(xué)純度(Rcp)僅為約80％，這樣其必須在99mTc標(biāo)記后30分鐘內(nèi)使用。
用Tc-99m放射標(biāo)記后，99mTc-HMPAO的Rcp由于3種不同放射性雜質(zhì)的增多而下降，這3種雜質(zhì)是源自99mTc-HMPAO的結(jié)構(gòu)未知的親水性次級(jí)99mTc絡(luò)合物，99mTc-過(guò)锝酸根(99mTcO4-)，和還原水解的锝[99mTc]。在這些雜質(zhì)當(dāng)中，次級(jí)絡(luò)合物和99mTc-過(guò)锝酸根都是99mTc-HMPAO的降解產(chǎn)物；然而，據(jù)報(bào)道降解機(jī)制是不同的(J.Nucl.Med.29，1568-1576，1988)。
據(jù)信該次級(jí)絡(luò)合物是當(dāng)親脂性99mTc-HMPAO絡(luò)合物暴露于從過(guò)锝酸根還原步驟剩余的過(guò)量未氧化的錫(II)(即亞錫)時(shí)產(chǎn)生的。另一方面，99mTc-過(guò)锝酸根雜質(zhì)是當(dāng)99mTc-HMPAO和次級(jí)絡(luò)合物被自由基氧化時(shí)產(chǎn)生的，這些自由基是由于放射作用，即溶劑的輻射分解而在溶液中產(chǎn)生的。
因此，為了抑制99mTc-過(guò)锝酸根和次級(jí)絡(luò)合物雜質(zhì)的產(chǎn)生，已有人公開(kāi)了加入穩(wěn)定劑。Nucl.Med.Biol.7，675-680(1989)；Eur.J.Nucl.Med.16，541(1990)；Eur.J.Nucl.Med.20，661-666(1993)和Eur.J.Nucl.Med.22，1163-1172(1995)都報(bào)道了試圖通過(guò)加入下述物質(zhì)來(lái)穩(wěn)定99mTc-HMPAO2，5-二羥苯甲酸、十羥基焦磷酸鈉、亞甲藍(lán)、氯化鈷等。特別是，在放射標(biāo)記后加入亞甲藍(lán)，能將重新配制后4小時(shí)的99mTc-HMPAO的Rcp提高至至少80％。類似地，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在放射標(biāo)記后加入氯化鈷，能將重新配制后6小時(shí)的99mTc-HMPAO的Rcp提高至至少80％。
據(jù)信亞甲藍(lán)和氯化鈷穩(wěn)定99mTc-HMPAO的機(jī)制基本上是相同的。都是在溶液中達(dá)到氧化還原平衡，并氧化過(guò)量錫(II)，由此穩(wěn)定了99mTc-HMPAO。然而，當(dāng)在Tc-99m放射標(biāo)記步驟之前還原性錫(II)與亞甲藍(lán)或氯化鈷在溶液中共存時(shí)，錫(II)還原劑被完全氧化，于是Tc-99m標(biāo)記變得不可能，因?yàn)椴辉儆羞€原劑來(lái)還原Tc(VII)99mTc-過(guò)锝酸根。也就是說(shuō)，當(dāng)使用亞甲基或氯化鈷作為99mTc-HMPAO的穩(wěn)定劑時(shí)，必須在Tc-99m放射標(biāo)記步驟之后加入，并且不能與配體(HMPAO)和99mTc-過(guò)锝酸鹽預(yù)混合。因此，采用這樣的穩(wěn)定劑的制備99mTc-HMPAO用的任何藥盒都必須由兩個(gè)小瓶構(gòu)成(下文中稱為2-瓶藥盒)。一個(gè)小瓶是裝有HMPAO配體和錫(II)還原劑以及其它賦形劑的冷凍干燥的小瓶。另一個(gè)小瓶是裝有穩(wěn)定劑(亞甲藍(lán)或氯化鈷)的小瓶。因此，迄今為止，現(xiàn)有技術(shù)中穩(wěn)定99mTc-HMPAO的最成功方法都需要使用2-瓶藥盒。
當(dāng)制備99mTc-HMPAO用的藥盒是2-瓶藥盒時(shí)，放射標(biāo)記操作比用于單瓶藥盒中的要復(fù)雜，并包括下述兩個(gè)步驟(1)將99mTc-過(guò)锝酸鹽溶液加到裝有HMPAO配體的小瓶中，并通過(guò)振搖將所得混合物混合；(2)將第二個(gè)小瓶中的穩(wěn)定劑溶液(例如亞甲藍(lán)或氯化鈷)加到在第一個(gè)小瓶?jī)?nèi)的步驟(1)所得重新配制的混合物中。
需要控制第一個(gè)步驟與第二個(gè)步驟之間的時(shí)間，以盡可能接近2分鐘。時(shí)間太短，99mTc-HMPAO絡(luò)合物的形成可能不完全，這樣在過(guò)锝酸原料完全還原之前，加入的穩(wěn)定劑可能通過(guò)氧化亞錫離子而對(duì)Rcp帶來(lái)不利影響。時(shí)間太長(zhǎng)，就耽擱了穩(wěn)定作用。在這樣的操作中，還需要注意加入的溶液的量。操作者還必須小心以確保在任何步驟沒(méi)有將小瓶不利地混淆。此外，由于多次操作，放射劑量影響操作者的危險(xiǎn)性增加。另外，當(dāng)把亞甲藍(lán)加到99mTc-HMPAO中時(shí)，產(chǎn)生了沉淀，這樣必需過(guò)濾步驟，因此使得操作變得更復(fù)雜。
所以需要既具有貯藏期限穩(wěn)定性也具有放射標(biāo)記后穩(wěn)定性的制備99mTc-HMPAO用的單瓶藥盒。本發(fā)明提供了能解決該問(wèn)題并使用簡(jiǎn)單的藥盒。
本發(fā)明本發(fā)明涉及放射藥物的穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑包含氨基取代的芳族羧酸或其鹽、酯或酰胺與二膦酸或其鹽的組合，條件是放射藥物不是二膦酸的金屬絡(luò)合物。
發(fā)明詳述在第一個(gè)方面，本發(fā)明提供了穩(wěn)定的放射藥物組合物，其中包含(i)放射藥物；(ii)氨基取代的芳族羧酸或其鹽、酯或酰胺；(iii)二膦酸或其鹽，條件是放射藥物不是二膦酸的金屬絡(luò)合物。
術(shù)語(yǔ)“氨基取代的芳族羧酸”是指其中芳族羧酸的芳環(huán)上的至少一個(gè)氫原子被至少一個(gè)氨基取代的化合物。芳基優(yōu)選是苯。優(yōu)選的氨基取代的芳族羧酸是2-氨基苯甲酸、3-氨基苯甲酸、4-氨基苯甲酸(pABA)、3，5-二氨基苯甲酸和4-氨基水楊酸。其中4-氨基苯甲酸(pABA)是特別優(yōu)選的。
合適的氨基取代的芳族羧酸的鹽是具有生物相容陽(yáng)離子的鹽。術(shù)語(yǔ)“生物相容陽(yáng)離子”是指與電離的帶負(fù)電荷的基團(tuán)(在這里是羧酸根)形成鹽的帶正電荷的抗衡離子，其中所述帶正電荷的抗衡離子也是無(wú)毒的，因此適于對(duì)哺乳動(dòng)物體、尤其是人體給藥。合適的生物相容陽(yáng)離子的實(shí)例包括堿金屬離子(例如鈉離子或鉀離子)；堿土金屬離子(例如鈣離子、鎂離子和鋇離子)；和銨離子。優(yōu)選的生物相容陽(yáng)離子是鈉離子。優(yōu)選的本發(fā)明鹽包括2-氨基苯甲酸鈉、3-氨基苯甲酸鈉、4-氨基苯甲酸鈉(NapABA)、3，5-二氨基苯甲酸鈉、4-氨基水楊酸鈉、2-氨基苯甲酸鉀、3-氨基苯甲酸鉀、4-氨基苯甲酸鉀、3，5-二氨基苯甲酸鉀和4-氨基水楊酸鉀。4-氨基苯甲酸鈉(NapABA)是特別優(yōu)選的。
合適的芳族羧酸酯包括甲酯、乙酯或丙酯。優(yōu)選的酯是2-氨基苯甲酸甲酯、3-氨基苯甲酸甲酯、4-氨基苯甲酸甲酯、3，5-二氨基苯甲酸甲酯、4-氨基水楊酸甲酯、2-氨基苯甲酸乙酯、3-氨基苯甲酸乙酯、4-氨基苯甲酸乙酯、3，5-二氨基苯甲酸乙酯、4-氨基水楊酸乙酯、2-氨基苯甲酸丙酯、3-氨基苯甲酸丙酯、4-氨基苯甲酸丙酯、3，5-二氨基苯甲酸丙酯和4-氨基水楊酸丙酯。
合適的氨基取代的芳族羧酸的酰胺是通過(guò)用氨或具有至少一個(gè)氨基的化合物將芳族羧酸的羧基衍生化而形成的酰胺，并包括諸如2-氨基苯甲酰胺、3-氨基苯甲酰胺和4-氨基苯甲酰胺。
合適的本發(fā)明二膦酸是1，1-或1，2-二膦酸，或胺的二膦酸衍生物例如乙二胺四膦酸(EDTMP)。1，1-二膦酸是優(yōu)選的，例如亞甲基二膦酸(MDP)、羥甲基二膦酸(HMDP)、羥乙基二膦酸(HEDP)。亞甲基二膦酸(MDP)和羥甲基二膦酸(HMDP)是特別優(yōu)選的。合適的二膦酸鹽是具有如上所定義的生物相容陽(yáng)離子的鹽。優(yōu)選的二膦酸鹽包括亞甲基二膦酸鈉、羥甲基二膦酸鈉、羥乙基二膦酸鈉、乙二胺四膦酸鈉、亞甲基二膦酸銨、羥甲基二膦酸銨、羥乙基二膦酸銨和乙二胺四膦酸銨。
本發(fā)明放射藥物的穩(wěn)定劑優(yōu)選為4-氨基苯甲酸鈉(NApABA)與亞甲基二膦酸(MDP)或羥甲基二膦酸(HMDP)的組合。
雖然不希望受縛于理論，但是據(jù)信本發(fā)明穩(wěn)定劑按下述方式起作用氨基取代的芳族羧酸或其鹽、酯或酰胺具有還原能力，能將溶液輻射分解所產(chǎn)生的氧化性自由基除去，因此就抑制了自由基對(duì)放射藥物造成氧化性破壞。另一方面，當(dāng)放射標(biāo)記后剩余過(guò)量錫(II)還原劑時(shí)，二膦酸或其鹽抑制過(guò)量亞錫離子還原降解放射藥物。本發(fā)明驚奇地發(fā)現(xiàn)，這樣的穩(wěn)定劑可在單一步驟放射藥物制備中存在而不會(huì)(i)阻止或妨礙放射藥物前體的亞錫還原，以及隨后對(duì)Rcp的不利影響；(ii)與放射金屬絡(luò)合以形成不良放射性雜質(zhì)(例如放射性核素的二膦酸絡(luò)合物)。
因此，加入到放射藥物中的二膦酸或其鹽的量取決于包含在藥物制劑或藥盒中的還原性錫(II)的量。能有效地穩(wěn)定放射藥物的二膦酸或其鹽的量為1-10摩爾/摩爾亞錫、優(yōu)選2-8摩爾/摩爾亞錫、最優(yōu)選4-6摩爾/摩爾亞錫。
本發(fā)明放射藥物的放射性核素是γ-射線或β-射線發(fā)射體，優(yōu)選Tc-99m、Re-186或Re-188，最優(yōu)選Tc-99m。γ-射線發(fā)射體主要用于放射診斷，β-射線發(fā)射體主要用于放射治療。
當(dāng)把本發(fā)明放射診斷性放射藥物給到人體內(nèi)時(shí)，所用的放射性水平為370-1,480MBq，優(yōu)選為370-1,110MBq。當(dāng)把本發(fā)明放射治療性放射藥物給到人體內(nèi)時(shí)，放射性水平為37-18,500MBq，優(yōu)選為370-7,400MBq。
放射藥物包含易于被還原劑(之所以存在是為了幫助放射性核素標(biāo)記)的還原作用或因輻射分解而降解的活性組分。通過(guò)使用本發(fā)明穩(wěn)定劑組合物來(lái)穩(wěn)定這樣的活性組分，能夠?qū)⒎派錁?biāo)記后的使用壽命比現(xiàn)有技術(shù)延長(zhǎng)至少兩倍。當(dāng)活性組分包括具有四配位二胺二肟供體的配體，尤其是d，l-六甲基亞丙基胺肟或HMPAO(exametazime)、4，9-二氮雜-3，3，10，10-四甲基十二烷-2，11-二酮二肟(PnAO)、和類似化合物時(shí)，本發(fā)明穩(wěn)定劑是特別有用的。
另一方面，本發(fā)明提供了制備上述穩(wěn)定的放射藥物組合物用的非放射性藥盒，其中包含(i)氨基取代的芳族羧酸或其鹽、酯或酰胺；(ii)二膦酸或其鹽，條件是放射藥物不是二膦酸的金屬絡(luò)合物。
因此，可將本發(fā)明放射藥物的穩(wěn)定劑與配體在放射標(biāo)記之前預(yù)混合，使得有可能配制出制備穩(wěn)定的放射藥物(不是二膦酸穩(wěn)定劑的放射性核素絡(luò)合物)用的單瓶非放射性藥盒。這簡(jiǎn)化了現(xiàn)有技術(shù)2-瓶藥盒的標(biāo)記操作，縮短了標(biāo)記時(shí)間，并減小了操作者暴露于有害放射的危險(xiǎn)性。本發(fā)明單瓶藥盒還具有延長(zhǎng)的放射性配制后穩(wěn)定性，對(duì)于藥盒的使用者例如臨床醫(yī)師，這又延長(zhǎng)了使用壽命。
本發(fā)明合適的非放射性藥盒包含0.01-10mg氨基取代的芳族羧酸或其鹽、酯或酰胺和0.01-1mg二膦酸或其鹽。當(dāng)藥盒包含亞錫時(shí)，有效地起穩(wěn)定作用的二膦酸或其鹽的量是1-10摩爾/摩爾亞錫。二膦酸或其鹽的比例優(yōu)選為2-8摩爾/摩爾亞錫、最優(yōu)選4-6摩爾/摩爾亞錫。
在第三個(gè)方面，本發(fā)明公開(kāi)了二膦酸或其鹽作為放射藥物的穩(wěn)定劑的應(yīng)用，條件是放射藥物不是二膦酸的金屬絡(luò)合物。合適的二膦酸鹽是具有如上所定義的生物相容陽(yáng)離子的那些。放射藥物優(yōu)選還在制劑中包含亞錫。放射藥物最優(yōu)選包含99mTc。用作穩(wěn)定劑的二膦酸或其鹽優(yōu)選為亞甲基二膦酸(MDP)、羥甲基二膦酸(HMDP)、羥乙基二膦酸(HEDP)、乙二胺四膦酸(EDTMP)、和它們的鹽。
在第四個(gè)方面，本發(fā)明公開(kāi)了二膦酸或其鹽作為制備放射藥物用的非放射性藥盒的穩(wěn)定劑的應(yīng)用，條件是放射藥物不是二膦酸的金屬絡(luò)合物。合適的二膦酸鹽是具有如上所定義的生物相容陽(yáng)離子的那些。非放射性藥盒優(yōu)選還在制劑中包含亞錫。非放射性藥盒最優(yōu)選用于制備99mTc放射藥物。用作穩(wěn)定劑的二膦酸或其鹽優(yōu)選為亞甲基二膦酸(MDP)、羥甲基二膦酸(HMDP)、羥乙基二膦酸(HEDP)、乙二胺四膦酸(EDTMP)、和它們的鹽。


附圖1比較了用組合物III、組合物III+乳糖和制備99mTc-HMPAO用的市售藥盒制得的99mTc-HMPAO的Rcp變化，其中所述組合物分別在重新配制前貯藏6個(gè)月。
用下述實(shí)施例更詳細(xì)地描述本發(fā)明實(shí)施例1是兩步法的比較實(shí)施例(包括現(xiàn)有技術(shù)穩(wěn)定劑例如氯化鈷)。加入3小時(shí)后99mTc-HMPAO的Rcp至少為80％視為有效的穩(wěn)定。然而，從表1中可清楚地看出，滿足該標(biāo)準(zhǔn)的唯一穩(wěn)定劑是氯化鈷。
實(shí)施例2表明了在一步法中，使用作為穩(wěn)定劑的兩種化合物的混合物可有效地將99mTc-HMPAO穩(wěn)定，并且該穩(wěn)定性顯著地超過(guò)了使用實(shí)施例1的兩步法所達(dá)到的穩(wěn)定性。
實(shí)施例3提供了在一步法中優(yōu)化MDP/NapABA和HMDP/NapABA組合的數(shù)據(jù)。Sn2+與MDP/HMDP的摩爾比保持恒定(1∶5)，而加入的量不同。
實(shí)施例4表明了制備99mTc放射藥物用的冷凍干燥的非放射性藥盒可用本發(fā)明組合物來(lái)制備。表明了乳糖(已知的冷凍干燥制劑的低溫防護(hù)賦形劑)可用于在延長(zhǎng)的貯藏期限內(nèi)保護(hù)亞錫水平。
實(shí)施例5表明了HMDP/NapABA組合也是99mTc-HMPAO的有效穩(wěn)定劑。
實(shí)施例6提供了與在黑暗中于4℃貯藏的時(shí)間呈函數(shù)關(guān)系的冷凍干燥藥盒的亞錫或錫(II)含量的數(shù)據(jù)，并表明組合物III+乳糖中的還原性錫(II)的量比組合物III中的高。此外，組合物III中還原性錫(II)的量隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)有下降的趨勢(shì)。因此，當(dāng)把冷凍干燥藥盒貯藏長(zhǎng)時(shí)間后，可在藥盒組合物中使用乳糖來(lái)將錫(II)還原劑的量保持在恒定水平。
實(shí)施例7比較了貯藏6個(gè)月后本發(fā)明冷凍干燥藥盒的Rcp與由市售藥盒制備的99mTc-HMPAO的Rcp。對(duì)于市售藥盒，Rcp隨著重新配制后時(shí)間的延長(zhǎng)而下降，但是對(duì)于組合物III和組合物III+乳糖，重新配制后6個(gè)小時(shí)的Rcp為至少80％。這表明雖然不含有乳糖的亞錫水平表現(xiàn)出輕度下降(實(shí)施例5)，但是這種下降不影響藥盒的性能。
實(shí)施例8表明含有穩(wěn)定劑組合物HMDP/NapABA的冷凍干燥藥盒具有有效的貯藏期限。
實(shí)施例9比較了使用本發(fā)明藥盒組合物III和組合物III+乳糖與市售99mTc-HMPAO藥盒制劑制備的99mTc-HMPAO在大鼠中的生物分布。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在靶器官中的攝取沒(méi)有顯著差異。這包括腦，其是使用現(xiàn)有市售99mTc-HMPAO劑的成象診斷應(yīng)用。這些結(jié)果表明，所加的未存在于市售藥盒中的化合物(MDP、NapABA和乳糖)沒(méi)有對(duì)99mTc放射藥物的生物性能帶來(lái)不利影響。
實(shí)施例10描述了適用于制備本發(fā)明制劑的冷凍干燥藥盒的不同冷凍干燥方法。
實(shí)施例11比較了實(shí)施例10的不同冷凍干燥藥盒的Rcp。
實(shí)施例1使用單一穩(wěn)定劑的99mTc-HMPAO的Rcp兩步法(比較實(shí)施例)使用制備99mTc-HMPAO用的市售藥盒(CERETECTM)制得的99mTc-HMPAO在重新配置后一小時(shí)的放射化學(xué)純度(Rcp)是80％，之后Rcp隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而降低。另一方面，對(duì)于用氯化鈷穩(wěn)定的99mTc-HMPAO，放射標(biāo)記后6小時(shí)的Rcp是80％。實(shí)驗(yàn)了下述已知的可藥用化合物和添加劑抗壞血酸、抗壞血酸鈉、2，5-二羥苯甲酸、2，5-二羥苯甲酸乙醇酰胺、亞甲基二膦酸(MDP)、琥珀酸、4-氨基苯甲酸(pABA)和4-氨基苯甲酸鈉(NapABA)。
向分別裝有0.5mg HMPAO和4.0μg Sn2+(亞錫)的10個(gè)小瓶中分別加入過(guò)锝酸鈉(在5ml鹽水中的1.48GBq)以進(jìn)行放射標(biāo)記。對(duì)于這10個(gè)重新配置的小瓶，放射標(biāo)記后2分鐘向其中的9個(gè)瓶中分別加入表1所示化合物。對(duì)余下的小瓶不加入任何物質(zhì)。在該加入后的1分鐘和3小時(shí)，從每個(gè)瓶中取出等分試樣，并通過(guò)聯(lián)合的三色譜系統(tǒng)(固定相/展開(kāi)劑硅膠/甲基乙基酮，硅膠/鹽水，濾紙/50％乙腈的水混合物)測(cè)定Rcp。結(jié)果如表1所示表1加入單一穩(wěn)定劑后99mTc-HMPAO的放射化學(xué)純度(Rcp)(％，n＝3)

注*n＝1
實(shí)施例2測(cè)定通過(guò)兩種化合物的組合來(lái)穩(wěn)定99mTc-HMPAO一步法所測(cè)定的組合是(i)抗壞血酸與羥甲基二膦酸(HMDP)；(ii)4-氨基苯甲酸鈉(NapABA)與亞甲基二膦酸(MDP)。
制備含有0.5mg HMPAO，4.0μg Sn2+、1.0μg HMDP和0.5μg抗壞血酸的組合物(組合物A)，和包含0.5mg HMPAO、5.4μg Sn2+、40.5μg MDP和0.5mg NapABA的組合物(組合物B)。向A和B中分別加入過(guò)锝酸鈉(1.48GBq，5ml)以進(jìn)行標(biāo)記。3小時(shí)后，分別取出等分試樣，并通過(guò)聯(lián)合的三色譜系統(tǒng)(固定相/展開(kāi)劑硅膠/甲基乙基酮，硅膠/鹽水，濾紙/50％乙腈的水混合物)測(cè)定Rcp。
對(duì)于組合物A，Tc-99m標(biāo)記后3小時(shí)99mTc-HMPAO的Rcp是約62％，對(duì)于組合物B是約80％。
實(shí)施例3優(yōu)化穩(wěn)定劑組成一步法如表2所示，制備6種不同的樣本組合物，并在黑暗中于4℃貯藏。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)(貯藏1、7、31和32天)將裝有每種制劑的一個(gè)小瓶取出來(lái)，并加入過(guò)锝酸鈉(1.48GBq，5ml)。加入過(guò)锝酸鹽6小時(shí)后，從每個(gè)小瓶中取出等分試樣，并通過(guò)聯(lián)合的三色譜系統(tǒng)(固定相/展開(kāi)劑硅膠/甲基乙基酮，硅膠/鹽水，濾紙/50％乙腈的水混合物)測(cè)定Rcp。結(jié)果如表2所示表2樣本組合物和放射標(biāo)記6小時(shí)后99mTc-HMPAO的Rcp(n＝1，*n＝3)

注*n＝3。
組合物II、III和V表現(xiàn)出，即使將樣本在黑暗中于4℃貯藏32天，重新配置后6小時(shí)的Rcp為至少80％。因而將表現(xiàn)出較高Rcp的組合物III和V用作隨后實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。
實(shí)施例4通過(guò)MDP和NapABA的組合穩(wěn)定99mTc-HMPAO使用冷凍干燥藥盒的一步法使用實(shí)施例3的組合物III、和通過(guò)將乳糖加到組合物III中制得的組合物(在下文中稱為組合物III+乳糖)來(lái)分別制備四批冷凍干燥藥盒。下面所示化合物的量相當(dāng)于制備約100個(gè)冷凍干燥藥盒小瓶的規(guī)模。
首先，將無(wú)水氯化亞錫(25.8mg)和MDP(122mg)溶解在0.1M鹽酸(1,000ml)中。所得溶液在下文中稱為溶液1。將d，l-HMPAO(100mg)和NapABA(100mg)溶解在溶液1(100ml)中，以獲得在下文中稱為溶液2的溶液。將溶液2分成兩份，每份50ml，用氫氧化鈉將其中一份的pH調(diào)節(jié)至8.5-9.0，然后通過(guò)量筒用水將總體積調(diào)節(jié)至100ml。在另一份50ml溶液中溶解300mg乳糖一水合物，用氫氧化鈉將所得溶液的pH調(diào)節(jié)至8.5-9.0，然后通過(guò)量筒用水將總體積調(diào)節(jié)至100ml。將所得的各1.0ml溶液置于每個(gè)小瓶中，在-50℃--78℃冷凍，然后冷凍干燥約24小時(shí)。冷凍干燥完全后，將小瓶密封，并將冷凍干燥藥盒在黑暗中于4℃貯藏。將相同操作重復(fù)4次以制備4批單獨(dú)的組合物III與組合物III+乳糖。批號(hào)ID-01-ID-04是組合物III，批號(hào)ID-05-ID-08是組合物III+乳糖。每批的制備條件和結(jié)果如表3所示。
表3每批的制備條件和結(jié)果

#“性質(zhì)”是指冷凍干燥期間的性狀良好＝冷凍干燥藥盒中的結(jié)塊保持良好；一般＝冷凍干燥藥盒中的結(jié)塊部分破碎，但是在冷凍干燥期間小瓶中的粉末沒(méi)有損失；不好＝冷凍干燥藥盒中的結(jié)塊完全破碎，并且在冷凍干燥期間某些粉末從小瓶中遺失在除ID-03(是組合物III)的所有批次中，至少生產(chǎn)了90瓶。在組合物III的4批當(dāng)中，只有ID-03的pH在冷凍前調(diào)節(jié)至8.5。此外，對(duì)于組合物III+乳糖，即使在冷凍前將pH調(diào)節(jié)至8.5(ID-07，ID-08)，也生產(chǎn)了至少90瓶。因此，對(duì)于不含乳糖的組合物III，當(dāng)生產(chǎn)了冷凍干燥藥盒時(shí)，需要將pH調(diào)節(jié)至9.0。
實(shí)施例5通過(guò)HMDP和NapABA的組合穩(wěn)定99mTc-HMPAO使用冷凍干燥藥盒的一步法使用實(shí)施例3的組合物V和通過(guò)將乳糖加到組合物V中制得的組合物(下文中稱為組合物V+乳糖)來(lái)分別制備一批冷凍干燥藥盒。以與實(shí)施例4非常相似的方式制備冷凍干燥藥盒，除了溶液1稍微不同在本實(shí)施例中，將無(wú)水氯化亞錫(25.8mg)和HMDP-2Na(132.0mg)溶解在0.1M鹽酸(1000mL)中。批號(hào)ID-09是組合物V，批號(hào)ID-10是組合物V+乳糖。每批的制備條件和結(jié)果如表4所示。
表4每批的制備條件和結(jié)果

#-定義同實(shí)施例4實(shí)施例6測(cè)定與貯藏時(shí)間有關(guān)的冷凍干燥藥盒中錫(II)的量將已經(jīng)在黑暗中于4℃貯藏1天、3個(gè)月和6個(gè)月的裝有組合物III(ID-01、02、03和04)、組合物III+乳糖(ID-05、06、07和08)、組合物V(ID-09)和組合物V+乳糖(ID-10)的小瓶溫?zé)嶂潦覝?。然后通過(guò)吸收度法測(cè)定錫(II)的量。所得結(jié)果如表5所示。
表5測(cè)定的還原性錫(II)的量(μg/瓶，n＝2)

注每個(gè)值是4批的平均值實(shí)施例7貯藏6個(gè)月后含有MDP和NapABA的冷凍干燥藥盒的放射化學(xué)純度分別使用4批在實(shí)施例4中制得的組合物III和組合物III+乳糖以測(cè)定其在黑暗中于4℃貯藏6個(gè)月后的放射化學(xué)純度。
將裝有冷凍干燥的組合物III(ID-01、02、03和04)和組合物III+乳糖(ID-05、06、07和08)的小瓶在黑暗中于4℃貯藏6個(gè)月。貯藏1天、1個(gè)月、3個(gè)月和6個(gè)月后，讓小瓶升至室溫，并進(jìn)行Tc99m標(biāo)記。向裝有每批組合物的各個(gè)小瓶中加入過(guò)锝酸鈉(1.48GBq，5ml)。2分鐘、1小時(shí)、3小時(shí)和6小時(shí)后，取出等分試樣，并通過(guò)聯(lián)合的三色譜系統(tǒng)(固定相/展開(kāi)劑硅膠/甲基乙基酮，硅膠/鹽水，濾紙/50％乙腈的水混合物)測(cè)定Rcp。6小時(shí)后獲得的結(jié)果如表6所示。當(dāng)貯藏6個(gè)月后將組合物III與組合物III+乳糖放射標(biāo)記時(shí)，同時(shí)將過(guò)锝酸鈉(1.48GBq/5ml)加到制備99mTc-HMPAO用的市售藥盒(含有0.5mg HMPAO和4.0μg Sn2+)中以用作對(duì)照。1分鐘、1小時(shí)、3小時(shí)和6小時(shí)后，取出等分試樣，并以相同方法測(cè)定Rcp。所得結(jié)果如附圖1所示。
表6用MDP和NapABA的組合重新配制6小時(shí)后與貯藏時(shí)間有關(guān)的99mTc-HMPAO的Rcp。

實(shí)施例8貯藏1個(gè)月后含有HMDP和NapABA的冷凍干燥藥盒的放射化學(xué)純度分別使用1批在實(shí)施例5中制得的組合物V和組合物V+乳糖以測(cè)定其在黑暗中于4℃貯藏1個(gè)月后的放射化學(xué)純度。以相同方式測(cè)定Rcp。所得結(jié)果如表7所示。
表6用HMDP和NapABA的組合重新配制6小時(shí)后與貯藏時(shí)間有關(guān)的99mTc-HMPAO的Rcp。

實(shí)施例9在大鼠中的生物分布向在實(shí)施例4中制備的分別裝有組合物III(ID-02)和組合物III+乳糖(ID-06)的小瓶中以1.48GBq/5ml的比例加入過(guò)锝酸鈉以進(jìn)行放射標(biāo)記。2小時(shí)后，將3.0-3.7MBq重新配制的溶液通過(guò)尾靜脈施用給已經(jīng)用硫噴妥鈉預(yù)先麻醉的雌性Sprague-Dawley大鼠(體重為140-170g)。給藥后一小時(shí)，將大鼠處死，并用NaI單道分析器測(cè)定各個(gè)器官中的放射性。單獨(dú)向制備99mTc-HMPAO用的市售藥盒中以1.48GBq/5ml的比例加入過(guò)锝酸鈉。以相同方式，在重新配制15分鐘后將3.0-3.7MBq該溶液施用給相同種類的大鼠，并測(cè)定放射性在各個(gè)器官中的生物分布。所得結(jié)果如表8所示表8給藥1小時(shí)后市售99mTc-HMPAO、組合物III(ID-02)與組合物III+乳糖(ID-06)在雌性大鼠中的生物分布(上行％ID/器官，下行％ID/g，n＝5)。

實(shí)施例10制備冷凍干燥藥盒的方法通過(guò)兩種方法制備冷凍干燥藥盒(實(shí)施例6的組合物V+乳糖)。第一種方法(ID-11)類似于實(shí)施例5的方法，但是改變?nèi)芤?，將d，l-HMPAO(250mg)、NapABA(250mg)和乳糖一水合物(1.5g)溶解在溶液1(250mL)中。將該溶液加到水(250mL)中，并調(diào)節(jié)至pH8.9。ID-11的制備條件和結(jié)果如表9所示。
第二種方法(ID-12)如下所示。
將乳糖一水合物(3.03g)、NapABA(505mg)、d，l-HMPAO(505mg)、HMDP(66.6mg)和無(wú)水氯化亞錫(13.1mg)以所述順序溶解在0.1M鹽酸(1000mL)中。然后將該溶液調(diào)節(jié)至pH9.4。ID-12的制備條件和結(jié)果如表9所示。
表9

#-定義同實(shí)施例4實(shí)施例11通過(guò)不同方法制得的冷凍干燥藥盒的RCP使用實(shí)施例10的冷凍干燥藥盒來(lái)測(cè)定RCP。按照與實(shí)施例7相同的方法測(cè)定RCP。所得結(jié)果如表10所示。
表10

權(quán)利要求
1.一種穩(wěn)定的放射藥物組合物，其中包含(i)放射藥物；(ii)氨基取代的芳族羧酸或其鹽、酯或酰胺；(iii)二膦酸或其鹽，條件是放射藥物不是二膦酸的金屬絡(luò)合物。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中所述氨基取代的芳族羧酸或其鹽、酯或酰胺選自2-氨基苯甲酸、3-氨基苯甲酸、4-氨基苯甲酸、3，5-二氨基苯甲酸、4-氨基水楊酸、及其鹽、酯和酰胺。
3.權(quán)利要求1和2的組合物，其中所述二膦酸或其鹽選自亞甲基二膦酸、羥甲基二膦酸、羥乙基二膦酸、乙二胺四膦酸、及其鹽。
4.權(quán)利要求1-3的組合物，其中所述氨基取代的芳族羧酸或其鹽、酯或酰胺是4-氨基苯甲酸鈉，且二膦酸是亞甲基二膦酸。
5.權(quán)利要求1-4的組合物，其中所述放射藥物包含γ-射線發(fā)射體或β-射線發(fā)射體。
6.權(quán)利要求5的組合物，其中所述放射藥物包含Tc-99m、Re-186或Re-188。
7.權(quán)利要求1-6的組合物，其中所述放射藥物包含放射性核素與配體的金屬絡(luò)合物。
8.權(quán)利要求7的組合物，其中所述配體是胺肟。
9.權(quán)利要求8的組合物，其中所述胺肟選自d，1-六甲基亞丙基胺肟和4，9-二氮雜-3，3，10，10-四甲基十二烷-2，11-二酮二肟。
10.用于制備權(quán)利要求1-9的穩(wěn)定的放射藥物組合物的非放射性藥盒，其中包含(i)氨基取代的芳族羧酸或其鹽、酯或酰胺；(ii)二膦酸或其鹽，條件是放射藥物不是二膦酸的金屬絡(luò)合物。
11.權(quán)利要求10的藥盒，其中包含0.01-10mg氨基取代的芳族羧酸或其鹽、酯或酰胺和0.01-1mg二膦酸或其鹽。
12.權(quán)利要求10或11的藥盒，其中還包含錫(II)還原劑，其中所述二膦酸或其鹽與錫(II)的摩爾比為1-10。
13.權(quán)利要求10-12的藥盒，其中還包含胺肟配體。
14.權(quán)利要求13的藥盒，其中所述胺肟選自d，1-六甲基亞丙基胺肟和4，9-二氮雜-3，3，10，10-四甲基十二烷-2，11-二酮二肟。
15.冷凍干燥的權(quán)利要求10-14的藥盒。
16.二膦酸或其鹽作為放射藥物穩(wěn)定劑的應(yīng)用，條件是放射藥物不是二膦酸的金屬絡(luò)合物。
17.二膦酸或其鹽作為制備放射藥物用的非放射性藥盒的穩(wěn)定劑的應(yīng)用，條件是放射藥物不是二膦酸的金屬絡(luò)合物。
18.權(quán)利要求16和17的應(yīng)用，其中所述放射藥物包含Tc-99m。
19.權(quán)利要求16-18的應(yīng)用，其中所述二膦酸選自亞甲基二膦酸、羥甲基二膦酸、羥乙基二膦酸、乙二胺四膦酸、及其鹽。
全文摘要
本發(fā)明提供了放射藥物的改善的穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑抑制通過(guò)兩種降解機(jī)制產(chǎn)生的雜質(zhì)，并表現(xiàn)出這樣的作用與常規(guī)穩(wěn)定劑相比，延長(zhǎng)了放射藥物的制備后貯存期限。所述改善的穩(wěn)定劑包含氨基取代的芳族羧酸或其鹽、酯或酰胺與二膦酸或其鹽的組合。
文檔編號(hào)A61P43/00GK1437486SQ01811501
公開(kāi)日2003年8月20日 申請(qǐng)日期2001年6月18日 優(yōu)先權(quán)日2000年6月22日
發(fā)明者A·E·斯托雷, G·布勞爾斯, K·哈瑙卡, Y·米諾薩科, K·霍馬, Y·施拉卡米 申請(qǐng)人:阿默沙姆公開(kāi)有限公司, 日本醫(yī)療－物理學(xué)株式會(huì)社