專利名稱：：包含?；酋０费苌锛棒人岷?或其鹽的抗微生物閉鎖的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于預(yù)防感染和血凝固的沖洗和涂布導(dǎo)管的組合物和方法。用抗凝劑如肝素沖洗導(dǎo)管是標(biāo)準(zhǔn)步驟。然而，肝素不是抗微生物的，另外，若不仔細(xì)控制，其可能使抗凝過程進(jìn)行的程度太高，從而存在出血危險。美國專利4,096,241公開了用于治療和預(yù)防牙和牙齦感染，特別是牙周炎的藥物組合物，其包含作為活性成分的噻二嗪衍生物。美國專利4,107,305公開了通過給予有效量的甲雙二嗪組合物抵抗內(nèi)毒素血癥的方法。美國專利4,337,251公開了甲雙二嗪在人或動物中消除或降低術(shù)后粘連的用途。美國專利4,587,268公開了用于治療傷口的組合物，其含有可再吸收的含水凝膠，該含水凝膠中溶解或分散了一種或多種水溶性藥物，優(yōu)選是抗生素或羥甲基轉(zhuǎn)移抗微生物劑。美國專利4,587,284公開了制備吸水性增強的親水聚合物材料的方法，所述材料適用于傷口敷裹，在該方法中，用堿滲透含水有機水凝膠，所述水凝膠包含散布有親水丙烯酸或甲基丙烯酸衍生物聚合物的可膠凝化的多糖和/或蛋白質(zhì)或多肽，在用所述堿處理期間，將所述水凝膠的pH升高到至少為9。美國專利4,604,391公開了預(yù)防性地將雙甲二嗪化合物給予人或溫血動物以抵抗骨炎或骨髓炎，特別是在患有源于創(chuàng)傷的骨損傷的患者中。美國專利4,626,536公開了甲雙二嗪化合物在人或溫血動物中抵抗有毒蛋白質(zhì)或肽類，例如毒液、真菌毒素和細(xì)菌內(nèi)毒素中的用途。美國專利4,772,468公開了用于填充入骨腔的藥物組合物，其包含由粉末磷酸鈣和抗菌物質(zhì)，視需要與一種或多種粘合劑一起形成的含水糊劑。抗菌物質(zhì)優(yōu)選為?；橇_定，且磷酸鈣優(yōu)選為β-磷酸三鈣。美國專利4,797,282公開了可植入體內(nèi)的、用于控制、延遲釋放細(xì)胞抑制劑的藥物儲存劑(pharmaceuticaldepot)，其包含基于聚丙烯酸酯和/或聚甲基丙烯酸酯的含有細(xì)胞抑制劑和至少一種氨基酸的合成材料。美國專利4,853,225公開了用于抵抗感染的可植入的藥物儲存劑，其包含生理學(xué)可接受的賦形劑和至少一種延遲釋放的活性化合物，所述化合物是一種促旋酶抑制劑類型的化學(xué)治療劑。美國專利4,882,149公開了用于植入堿性組織(basetissue)的藥物儲存劑制劑，其包含除去了天然連接的脂肪和骨蛋白的天然骨鹽，因此所述骨是無菌和非變應(yīng)原的，在所述骨材料上和/或在所述骨材料中吸收了一種或多種生理活性物質(zhì)。該生理活性物質(zhì)有利地是輔助骨再生的抗生素或?；橇_定或氧氫噻二嗪或蛋白質(zhì)或多肽。美國專利4,905,700公開了用于傳輸超聲的聲耦合介質(zhì)。在人體的超聲造影中有用的該介質(zhì)包含水凝膠層，所述水凝膠含有超過90％的水，優(yōu)選含有超過95％的水。該水凝膠優(yōu)選包含瓊脂，其鏈與聚丙烯酰胺鏈交替。美國專利4,960,415公開了用于植入傷口中和傷口腔中的裝置，該裝置由含有藥物活性物質(zhì)的容器組成，該容器的壁至少部分由膜，優(yōu)選由半滲透膜組成，所述膜允許活性物質(zhì)進(jìn)入傷口區(qū)。更優(yōu)選地，該容器是透析管。為了排出傷口分泌物，含藥物活性物質(zhì)，特別是?；橇_定的容器方便地與引流管相連。優(yōu)選地，使用導(dǎo)入傷口的一端分裂成細(xì)絲的引流管。美國專利5,077,281公開了甲雙二嗪化合物作為血凝固抑制劑和作為無菌炎癥抑制劑的用途。根據(jù)該專利，甲雙二嗪具有突出的凝固抑制作用，它特別適用于要求透析的醫(yī)療癥狀，以及血管修復(fù)術(shù)。該專利還公開了這些化合物可以與其它抗凝劑如香豆素或肝素一起使用。美國專利5,167,961和5,417,975公開了制備高純度骨鹽的方法，其中通過與氨或伯胺一起加熱而降解有機物質(zhì)，其特征在于在低于60℃的溫度下，通過用流水洗滌而萃取溶解的降解產(chǎn)物，任選地重復(fù)這種與伯胺一起加熱和洗滌步驟，從而除去基本上所有的通過這些步驟可以除去的有機物質(zhì)，在溫度達(dá)700℃下在空氣中加熱如此處理的骨鹽。美國專利5,210,083公開了含有細(xì)菌有效濃度的?；橇_定和/或氧氫噻二嗪以及可以非胃腸給予的(parenterallyacceptable)多元醇的水溶液。據(jù)說該水溶液特別適于非胃腸給予。美國專利5,362,754公開了二甲胺四環(huán)素和EDTA(M-EDTA)混合物的藥物組合物，以及使用該組合物保持導(dǎo)管通道(catheterport)開放的方法。還提供了使用M-EDTA溶液抑制富含多糖的糖萼(如葡萄球菌的糖萼)形成的方法。M-EDTA溶液還可以用于預(yù)處理醫(yī)療裝置以防止感染性菌如表皮葡萄球菌(S.epidermis)和金黃色葡萄球菌(S.aureous)的粘附。該組合物破壞并防止富含多糖的糖萼形成。美國專利5,573,771公開了用于醫(yī)療的純化粒狀骨鹽產(chǎn)品，所述鹽粒子基本上沒有任何內(nèi)源性有機物且至少在其表面上具有可再吸收的、生理學(xué)相容的、天然或合成大分子材料。特別地，提供骨鹽，其用形成凝膠的蛋白質(zhì)或多糖如明膠浸漬，從而增強強度并提供包含骨鹽的產(chǎn)品，所述骨鹽處在膠原纖維和形成凝膠的蛋白質(zhì)的基質(zhì)中。這種產(chǎn)品用作重塑植入物或修復(fù)骨替代品。美國專利5,593,665公開了含有腫瘤壞死因子和牛磺羅定和/或氧氫噻二嗪的產(chǎn)品，它們作為復(fù)合制劑，同時、分別、順序使用以治療患有由腫瘤壞死因子介導(dǎo)的醫(yī)療癥狀的患者。美國專利5,603,921公開了用于控制與齦炎相關(guān)的細(xì)菌活性的含藥牙線。牙線中摻入抗微生物劑，作為牙線清除(flossing)動作的結(jié)果，所述抗微生物劑沉積在牙的牙間區(qū)?？刮⑸飫┑木徛芙獯_保了長期達(dá)到有效水平的藥物治療，從而降低細(xì)菌活性。美國專利5,688,516公開了組合物以及在沖洗和涂布醫(yī)療裝置中使用組合物的方法。該組合物包含螯合劑、抗凝劑或抗血栓形成劑與非糖肽抗微生物劑如四環(huán)素抗生素的選擇組合。還公開了使用這些組合物涂布醫(yī)療裝置和抑制導(dǎo)管感染的方法。特定的組合包括在藥學(xué)可接受的稀釋劑中的二甲胺四環(huán)素或其它非糖肽抗微生物劑與EDTA、EGTA、DTPA、TTH、肝素和/或蛭素。Myers等，J.Appl.Bacteriol4889-96(1980)報道了甲雙二嗪—雙(1，1-二氧代-全氫化-1，2，4-噻二嗪基)甲烷是抗微生物化合物，它是通過兩分子的?；撬崤c三分子的甲醛縮合而形成的。以前已提出甲雙二嗪在與細(xì)菌接觸時釋放甲醛。作者提出證據(jù)表明甲雙二嗪在水溶液中大部分水解，釋放出一分子的甲醛和兩單體分子1，1-二氧代-全氫化-1，2，4-噻二嗪及其甲醇胺衍生物。根據(jù)該文章的敘述，穩(wěn)定的平衡建立。作者得出結(jié)論，抗菌活性不完全歸因于游離甲醛的吸收，還歸因于與掩蔽的(或潛在的)甲醛的反應(yīng)，因為發(fā)現(xiàn)甲雙二嗪的活性大于甲醛。相比之下，發(fā)現(xiàn)單體僅僅是輕微活性的。Gorman等，J.Clin.Pharm.Ther.12393-399(1987)報道了三種抗微生物劑，?；橇_定、氯己定和聚乙烯吡咯烷酮碘對微生物的抗粘連活性。研究了兩種粘連體系人口上皮細(xì)胞的白色念珠菌口分離菌(isolate)和人尿上皮細(xì)胞(uroepithelialcell)的大腸桿菌尿分離菌。三種試劑各自顯示出顯著的抗粘連活性，其是濃度依賴性的。Root等，AntimicrobialAgentsandChemotherapy32(11)1627-1631(1998)報道了帶有血管內(nèi)導(dǎo)管的粒細(xì)胞減少患者有增加的表皮葡萄球菌(S.epidermis)感染危險。在導(dǎo)管沒有用于輸液時的間隔期間，通常用含有肝素的溶液保持導(dǎo)管腔的開放。作者證明肝素并不抑制從感染患者的導(dǎo)管中分離的表皮葡萄球菌(S.epidermis)的生長。20mg/ml的EDTA二鈉溶液被證明在24小時后對103CFU/ml葡萄球菌首次接種物具有殺菌作用，EDTA二鈉是一種在此濃度下有效抗凝血的螯合劑。還發(fā)現(xiàn)通常用于治療葡萄球菌屬感染的抗生素萬古霉素對在6.7μg/ml的劑量下對103CFU/ml首次接種物具有殺菌作用，6.7μg/ml是在治療范圍內(nèi)的濃度。從其低成本、作為抗凝劑的有效性和殺菌活性的角度考慮，作者推薦將EDTA作為肝素溶液的替代品進(jìn)行研究，用于粒細(xì)胞減少患者的靜脈內(nèi)導(dǎo)管的維護(hù)。Jones等，J.Appl.Bacteriol.71218-227(1991)檢驗了三種非抗生素，抗微生物劑—?；橇_定、醋酸氯己定和聚乙烯吡咯烷酮碘對臨床菌株大腸桿菌、腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)、表皮葡萄球菌(S.epidermidis)和C.albicans的表面親水性的影響。在所報道的干擾微生物-上皮細(xì)胞粘附的濃度下，發(fā)現(xiàn)這三種試劑均改變細(xì)胞表面親水性。然而，這些影響未顯示均一的關(guān)系。通常，牛磺羅定和聚乙烯吡咯烷酮碘治療降低所檢驗的菌株的親水性，而醋酸氯己定依賴于所治療的微生物菌落而作用。Traub等，Chemotherapy39322-330(1993)檢驗了?；橇_定對代表性數(shù)目的在肉湯中以及在牛和人血清以及新鮮的去纖維蛋白人血的存在下的多抗生素耐藥性細(xì)菌分離菌的殺菌活性。作者提出這種抗微生物物質(zhì)可以用于被E.faecium、金黃色葡萄球菌(S.aureus)的糖肽耐藥性菌株(GRMRSA)或產(chǎn)生廣譜β-內(nèi)酰胺酶的腸桿菌移植在體內(nèi)并生長或表面感染的患者的局部治療。Willatts等，Crit.CareMed.23(6)1033-1039(1995)報道了使用臨床、細(xì)菌學(xué)結(jié)果、內(nèi)毒素血癥的發(fā)展、器官衰竭的消除和28天死亡率作為終點，對接受大學(xué)教學(xué)醫(yī)院的強化治療單元的有膿毒癥綜合證的患者，?；橇_定沒有有效的治療效果。Darouiche等，Nutrition13(4)(suppl)26S-29S(1997)報道了與血管導(dǎo)管相關(guān)的感染的預(yù)防主要集中在抑制來源于皮膚或?qū)Ч芙宇^(catheterhub)的微生物對導(dǎo)管的粘附。他們描述了兩種可以非排他地使用的，用于成功地預(yù)防與血管導(dǎo)管相關(guān)的感染的兩種常用方法。第一種方法不用抗微生物劑且包括以下手段，如由熟練注入治療組來放置和維護(hù)血管導(dǎo)管，以及使用最大無菌屏障。第二種方法使用抗微生物劑且包括應(yīng)用局部消毒劑如氯己定，使用銀浸漬的皮下套囊(用作短期中心靜脈導(dǎo)管)，用抗微生物劑和抗凝劑的組合沖洗導(dǎo)管，以及用防腐劑(氯己定和磺胺嘧啶銀)或抗微生物劑(二甲胺四環(huán)素和利福平)涂布導(dǎo)管。在得克薩斯州的SanAntonio，在1997年11月2至5日進(jìn)行的美國腎病學(xué)會(AmericanSocietyofNephrology)的第30次年會上，Sodemann等的演講報道了有關(guān)慶大霉素/檸檬酸鈉混合物作為抗生素閉鎖(lock)技術(shù)用于補救和預(yù)防與導(dǎo)管相關(guān)的感染的四年試驗。他們得出結(jié)論，可以通過濃慶大霉素/檸檬酸鹽混合物的常規(guī)應(yīng)用避免感染，而且甚至內(nèi)腔污染的導(dǎo)管和補救也是可能的。盡管有上述對現(xiàn)有技術(shù)的貢獻(xiàn)，但仍需要有安全和有效的，在其疾病要求植入房前導(dǎo)管的患者中預(yù)防感染和血凝固的方法。具體地，本發(fā)明涉及在醫(yī)療修復(fù)裝置中或其附近，在所述裝置植入患者內(nèi)后，抑制或預(yù)防感染和血凝固的方法，所述方法包括給予該裝置藥物有效量的包含下列成分的組合物(A)至少一種?；酋０费苌?，和(B)至少一種選自生物學(xué)可接受的酸及其生物學(xué)可接受的鹽的化合物。更具體地說，本發(fā)明涉及在醫(yī)療修復(fù)裝置中或其附近，在所述裝置植入患者內(nèi)后，抑制或預(yù)防感染和血凝固的方法，所述方法包括給予該裝置藥物有效量的包含下列成分的組合物(A)至少一種分子式如下的抗微生物化合物其中R1是氫或烷基，且R2是氫、烷基或分子式如下的基團(tuán)以及(B)至少一種選自生物學(xué)可接受的酸及其生物學(xué)可接受的鹽的化合物。在另一實施方案中，本發(fā)明涉及用包含下列成分的組合物涂布的醫(yī)療修復(fù)裝置(A)至少一種分子式如下的抗微生物化合物其中R1是氫或烷基，且R2是氫、烷基或分子式如下的基團(tuán)以及(B)至少一種選自生物學(xué)可接受的酸及其生物學(xué)可接受的鹽的化合物，其中所包含的該組合物的量為用于預(yù)防或抑制感染和血凝固的藥物有效量。在另一實施方案中，本發(fā)明涉及通過包括將醫(yī)療修復(fù)裝置暴露于包含下列成分的組合物的方法而制備的醫(yī)療修復(fù)裝置(A)至少一種分子式如下的抗微生物化合物其中R1是氫或烷基，且R2是氫、烷基或分子式如下的基團(tuán)以及(B)至少一種選自生物學(xué)可接受的酸及其生物學(xué)可接受的鹽的化合物，其中所包含的該組合物的量為用于預(yù)防或抑制感染和血凝固的藥物有效量。在英國專利1,124,285中描述了分子式I的化合物的代表性實例的制備?；旧?，這些化合物是牛磺酰胺和甲醛的縮合產(chǎn)物，因此這些化合物在本文中被稱為“?；酋０费苌铩?。它們不僅對格蘭氏陽性菌和格蘭氏陰性菌呈現(xiàn)活性，而且對這些微生物產(chǎn)生的外毒素和內(nèi)毒素呈現(xiàn)活性。若R1和/或R2是烷基，則它們可以是直鏈或支鏈烷基，且優(yōu)選獨立地選自具有1至8個碳原子的那些烷基，即，甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基及其異構(gòu)體；更優(yōu)選地，若R1和/或R2是烷基，則它們獨立地選自具有1至6個碳原子的那些烷基，即，甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基及其異構(gòu)體；最優(yōu)選地，是具有1至4個碳原子的烷基，即，甲基、乙基、丙基、丁基及其異構(gòu)體。然而，最優(yōu)選R1是氫，且R2是氫或分子式II的基團(tuán)。在本發(fā)明中，在分子式I的化合物中，特別優(yōu)選的是?；橇_定(R1＝H；R2＝分子式II)和氧氫噻二嗪(R1＝R2＝H)。?；橇_定是雙-(1，1-二氧代-全氫化-1，2，4-噻二嗪-4-基)甲烷。在本發(fā)明的實踐中采用的抗微生物化合物是甲醛載體，即，含有甲醛的無毒衍生物。已證明?；橇_定的作用方式包括將羥甲基轉(zhuǎn)移到在以上毒素上或細(xì)菌細(xì)胞壁的胞壁質(zhì)上存在的羥基或氨基上。在溶液中，?；橇_定與氧氫噻二嗪和N-羥甲基氧氫噻二嗪平衡存在，?；橇_定占大多數(shù)。氧氫噻二嗪本身與羥甲基?；酋０菲胶獯嬖冢胶獯蟠蟮赜欣谘鯕溧缍?。當(dāng)以上羥甲基衍生物，羥甲基氧氫噻二嗪和羥甲基?；酋０放c毒素或細(xì)菌接觸時，羥甲基發(fā)生轉(zhuǎn)移。從而使羥甲基氧氫噻二嗪轉(zhuǎn)化為氧氫噻二嗪，而羥甲基?；酋０忿D(zhuǎn)化為?；撬幔；撬崾且环N在人體中極具耐受性的天然存在的氨基磺酸。因此應(yīng)當(dāng)理解，牛磺羅定和氧氫噻二嗪基本上以相同方式作用且產(chǎn)生相同的終產(chǎn)物。格蘭氏陰性菌引起的細(xì)菌感染通常伴有內(nèi)毒素血癥，也就是說，伴有患者對該生物釋放的內(nèi)毒素的反應(yīng)。內(nèi)毒素是O-菌體抗原的復(fù)合脂多糖成分，它松散地連接于格蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁。與細(xì)菌源無關(guān)，所有內(nèi)毒素均顯示類似的毒性—與發(fā)揮各式各樣的單獨作用的格蘭氏陽性菌相對照。在人中，當(dāng)溶解有大量格蘭氏陰性菌時，它可能產(chǎn)生內(nèi)毒素性休克綜合征。這種綜合征在約30％的有格蘭氏陰性敗血癥的患者中出現(xiàn)。已知內(nèi)毒素可以被?；酋０费苌餃缁?。毒性蛋白質(zhì)如外毒素可以類似地被滅活，且可以給予羥甲基轉(zhuǎn)移抗菌素，在不存在脂多糖毒素時抵抗毒性蛋白質(zhì)。可能涉及的毒素包括這種格蘭氏陰性菌如大腸桿菌和脆弱擬桿菌的外毒素。已知靜脈內(nèi)給予小鼠0.2ml溶于無菌的5％聚乙烯吡咯烷酮中的20％?；橇_定溶液可以非常顯著地降低腹膜內(nèi)給予大腸桿菌和B.fragilis兩種致病菌株的死亡率。其它毒性蛋白包括毒液如峰毒液(mellitin)和真菌毒素如鵝膏毒環(huán)肽和α-銀環(huán)蛇毒素，已證明它們被?；橇_定基本上去毒。?；橇_定的特殊優(yōu)勢是其極低的毒性；已證明其在小鼠中是非致畸的，其腹膜內(nèi)LD50在1.5g/kg的數(shù)量級。如上所述，這些化合物顯示羥甲基轉(zhuǎn)移活性，該活性導(dǎo)致在人體中天然發(fā)現(xiàn)且特別地?zé)o毒的?；撬岬漠a(chǎn)生。?；橇_定的另一優(yōu)勢是其在水溶液中的穩(wěn)定性，這使得該溶液可以被預(yù)包裝并相對長期地儲存。在本發(fā)明的實踐中采用的?；酋０费苌锿ǔＲ运芤旱男问酵ㄟ^注射到醫(yī)療修復(fù)裝置中而給予。這種溶液除了含有給定的?；酋０费苌?，還可以含有硫酸慶大霉素或硫酸軟骨素，還可以常規(guī)地含有增溶劑如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，以幫助使?；酋０费苌锉３衷谌芤褐?，且對溶液的等滲性起作用。在這種溶液中的牛磺酰胺衍生物的濃度可以為大于0，至約2％(重量)；約0.01至約1.5％(重量)濃度是優(yōu)選的；最優(yōu)為選約1％(重量)濃度。比這些濃度更高的濃度是有用的，但在此情況下，溶解性成為問題。若在溶液中摻入PVP，則為了達(dá)到水溶性低的?；酋０费苌?，特別是?；橇_定的相對高的濃度，通常采用4-7％(重量)的濃度。PVP的分子量不應(yīng)大于約30000且優(yōu)選小于10000，例如約200至約3500。BASF銷售的Kollidone④17是特別適宜的。這種PVP相當(dāng)快地被吸收且通過腎臟排泄。注射到醫(yī)療修復(fù)裝置中的牛磺酰胺衍生物溶液的量應(yīng)足以填充該醫(yī)療修復(fù)裝置。當(dāng)這種裝置是血液透析導(dǎo)管時，其內(nèi)部容積通常在約0.1ml至約10ml的范圍內(nèi)；當(dāng)然該數(shù)值將隨裝置的管的長度和直徑而變化，其特別地可以是各患者大小(size)的函數(shù)。在這種溶液中的?；酋０费苌锏臐舛葍?yōu)選在約0.4至約5％(重量)的范圍內(nèi)，最大取決于化合物的溶解度。特別優(yōu)選的是約0.4至約2.0％(重量)的?；橇_定溶液，即，約4至約20g/l的?；橇_定溶液。在數(shù)個專利，例如美國專利4,337,251中出現(xiàn)了描述?；橇_定貯備溶液的制備的實施例。向25升裝有攪拌器和強力回流裝置的玻璃容器中填充入15升無熱原的雙蒸水，并在攪拌下加熱到50℃。加入?；橇_定(400g)后，接著加入PVP(Kollidone17；1000g)。溶解后，冷卻溶液并用幾滴0.1N鹽酸將pH調(diào)到6.0。接著將溶液流經(jīng)吸附濾器，以除去微生物和致熱原，并在填充入100ml小瓶之前流經(jīng)滅菌Millipore濾器，小瓶最后經(jīng)高壓滅菌。視所需，可以用可非胃腸給予的多元醇代替一些或全部PVP。多元醇的這種用途已經(jīng)在美國專利5,210,083中公開，該文獻(xiàn)引入本文作參考。需指出的是，在更高的?；橇_定濃度下，可能發(fā)生結(jié)晶，而結(jié)晶可能導(dǎo)致溶液不可用。在細(xì)菌及其內(nèi)毒素和外毒素的情況下，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)如上所述，在羥甲基轉(zhuǎn)移之后，存在包括脫水的其它不可逆步驟。因此，在內(nèi)毒素是脂多糖的細(xì)菌內(nèi)毒素的情況下，發(fā)現(xiàn)發(fā)生不可逆交聯(lián)反應(yīng)，該反應(yīng)防止內(nèi)毒素發(fā)揮其致死作用。類似地，在外毒素是蛋白或多肽且不含在內(nèi)毒素中發(fā)現(xiàn)的脂多糖物質(zhì)種類的細(xì)菌外毒素的情況下，已發(fā)現(xiàn)去毒反應(yīng)不可逆。然而，在美國專利5,210,083中公開了在多種羥基或氨基化合物的情況下，通過上述機理進(jìn)行的羥甲基轉(zhuǎn)移是可逆的，因此可以建立平衡，該平衡并不顯著地干擾牛磺羅定的有效性。因此也可以將多元醇如糖和糖醇用以保持水溶液中相對高的牛磺羅定和/或氧氫噻二嗪濃度，而不顯著影響它們的抗菌和抗毒素活性。優(yōu)選的多元醇包括碳水化合物，例如己糖，如葡萄糖、果糖及它們的混合物；戊糖，如木糖；多糖，如葡聚糖或水解淀粉；甘油；以及糖醇，如山梨糖醇、甘露糖醇和木糖醇。最優(yōu)選是葡萄糖。多元醇的濃度通常在約3至約40％(重量)的范圍內(nèi)。在葡萄糖的情況下，該濃度優(yōu)選在約10至約30％(重量)的范圍內(nèi)，更優(yōu)選為約20％(重量)。若使用這種多元醇，溶液中牛磺羅定的濃度優(yōu)選在約0.5至約5％(重量)的范圍內(nèi)，更優(yōu)選在約2至約3％(重量)的范圍內(nèi)。氧氫噻二嗪的濃度優(yōu)選在約1至約7.5％(重量)的范圍內(nèi)，更優(yōu)選在約3至約5％(重量)的范圍內(nèi)。然而，最近的試驗表明，對于增加?；橇_定在水溶液中的溶解度來說，PVP或多元醇均不是必需的。實際上，這些試驗已證明，加入檸檬酸充分地增加牛磺羅定在水中的溶解度，且PVP在增加溶解度方面不是真正有效的。在這些試驗中，研究者用約2.6％(重量)的檸檬酸輔助溶解制備了一系列溶液，得到1.5、2.0、3.0、4.0％(重量)的?；橇_定溶液，而沒有使用PVP或多元醇。研究者認(rèn)為加入的檸檬酸容易地將牛磺羅定的溶解度升高到5％，而沒有使用PVP或多元醇。實際上，這些研究者發(fā)現(xiàn)加入PVP基本上對溶解度沒有影響。通過用氫氧化鈉將pH調(diào)節(jié)到5.2至5.3，將前述試驗溶液的pH調(diào)節(jié)到生物應(yīng)用可接受的pH范圍。該方法產(chǎn)生了檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖體系。另外，已知檸檬酸是抗氧化劑。通過用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH所形成的緩沖體系還對抗由于甲醛氧化成甲酸而引起的pH變化。因此檸檬酸和檸檬酸鈉的這種組合使用增加了?；橇_定在溶液中的穩(wěn)定性，并防止或顯著減慢沉淀出固體牛磺羅定以及在用PVP制備的?；橇_定溶液中經(jīng)常看到的反應(yīng)產(chǎn)物。長期穩(wěn)定性試驗證實了這一結(jié)果。由于格蘭氏陰性菌經(jīng)常存在，以及由于?；酋０费苌锏囊志钚缘陀谠S多常規(guī)抗生素的抑菌活性，所以可以有利地將在本發(fā)明的實踐中采用的組合物與廣譜抗生素物質(zhì)一起給予，更具體地說，所述廣譜抗生素物質(zhì)是對格蘭氏陽性和格蘭氏陰性病原體均有強的活性的物質(zhì)，其優(yōu)選地不導(dǎo)致或僅導(dǎo)致延遲的耐藥性，例如，β-內(nèi)酰胺抗生素，如青霉素、氨芐西林或頭孢菌素；四環(huán)素抗生素；大環(huán)內(nèi)酯抗生素，如紅霉素；多肽抗生素，如桿菌肽或新生霉素；或更優(yōu)選地，為氨基糖苷抗生素，如阿米卡星、布替羅星、阿司米星、鏈霉素、新霉素、林可霉素類(linkomycins)，如克林霉素、林可霉素、卡那霉素、雙去氧卡那霉素B(DKP)、利維霉素、奈替米星、核糖霉素、小諾米星、昔爾杜霉素及它們的差向異構(gòu)體、西索米星、山梨菌素、妥布霉素、萬古霉素、慶大霉素和利福霉素類如利福平和利福霉素；等等。在這些抗生素中，慶大霉素是優(yōu)選的。然而，由于抗生素產(chǎn)生耐藥菌株的傾向，除非在非常情況下，抗生素常被禁忌用于外科治療，優(yōu)選僅依賴于?；酋０费苌锏目咕饔?，因為這種衍生物不產(chǎn)生耐藥菌株。本發(fā)明的實踐中采用的組合物優(yōu)選還含有藥理學(xué)可接受的載體溶液，如水、林格溶液或鹽水。另外，本發(fā)明的組合物還可以含有可以有利地影響其物理和生化性質(zhì)的其它溶解的添加劑，例如氨基酸、糖、食鹽、脂肪和脂質(zhì)等。本發(fā)明的實踐中采用的抗微生物?；酋０费苌锱c生物學(xué)可接受的酸或其生物學(xué)可接受的鹽組合使用。優(yōu)選該酸是羧酸，更優(yōu)選是抗凝劑。美國專利5,077,281教導(dǎo)甲雙二嗪化合物本身顯示顯著的抑制凝固作用，其特別適宜單獨或與其它抗凝劑，如香豆素或肝素組合用于要求透析的醫(yī)療癥狀和血管修復(fù)。如該專利中所指出的，這與由W.L.Bruckner和R.W.Pfirrmann，VerlagUrbanundSchwarzenberg，Munich，1985出版的“Taurolin”的教導(dǎo)相反，其明確表述甲雙二嗪不影響血凝固且不顯示消炎作用。本發(fā)明的發(fā)明者相信，本發(fā)明的實踐中采用的?；酋０费苌锎_實顯示某種程度的抗凝活性，盡管與更著名的抗凝劑如肝素相比，其抗凝程度較低。因此，將?；酋０费苌锱c抗凝劑，優(yōu)選為生物學(xué)可接受的酸或其鹽組合使用是有益的。根據(jù)本發(fā)明，當(dāng)抗微生物?；酋０费苌锱c生物學(xué)可接受的酸或其生物學(xué)可接受的鹽組合以便為最終組合物產(chǎn)生不高于7，優(yōu)選在約3.5至約6.5的范圍內(nèi)，更優(yōu)選在約4.5至約6.5的范圍內(nèi)的pH時，實現(xiàn)有利的結(jié)果。這種酸的實例是乙酸、二氫乙酸、苯甲酸、檸檬酸、山梨酸、丙酸、草酸、富馬酸、馬來酸、鹽酸、蘋果酸、磷酸、硫酸、香草酸、酒石酸、抗壞血酸、硼酸、乳酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、乙二醇—雙-{β-氨基乙醚}-N，N，N′，N′-四乙酸和二亞乙基三胺五乙酸和對羥基苯甲酸的酯(對羥基苯甲酸酯)等，以及前述的生物學(xué)可接受的鹽，如磷酸銨、檸檬酸鉀、偏磷酸鉀、乙酸鈉、檸檬酸鈉、乳酸鈉和磷酸鈉等?？鼓康倪x自檸檬酸、磷酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、乙二醇-雙-{β-氨基乙醚}-N，N，N′，N′-四乙酸和二亞乙基三胺五乙酸的酸及其生物學(xué)可接受的鹽是優(yōu)選的。優(yōu)選本發(fā)明的實踐中采用的酸是有機酸，特別是具有至少一個羧基的有機酸，尤其是檸檬酸或EDTA。更優(yōu)選該酸是檸檬酸，且最優(yōu)選是其與檸檬酸鹽例如檸檬酸鈉組合使用，這是因為除了其降低pH和抗凝能力之外，還已知它在3％含量下是防腐劑。Mermel，L.A.等在1998年的抗微生物劑和化學(xué)治療的交叉學(xué)科會議(InterscienceConferenceonAntimicrobialAgentandChemotherapy)上作的題為“?；橇_定對萬古霉素中間體敏感性金黃色葡萄球菌(VISA)和耐二甲氧基苯青霉素金黃色葡萄球菌(MRSA)的活性(TaurolidineActivityAgainstVancomycin-IntermediateSusceptibilityStaphylococcusAureus(VISA)andMethicillin-ResistantStaphylococcusAureus(MRSA))”的演講中，公開了隨pH在pH7.0至pH5.0的范圍內(nèi)降低，?；橇_定活性增加。EDTA是在血液采集管中使用的已知抗凝劑。還已知它具有與鈣形成螯合物的能力。由于已知鈣在血液凝固中是起作用的一種因子，因此相信有可能在抗凝活性中至少部分EDTA功效是通過該種方式產(chǎn)生的。根據(jù)檸檬酸鈉產(chǎn)生不溶的檸檬酸鈣的能力，相信檸檬酸鈉也具有抗凝性質(zhì)。乙二醇—雙-{β-氨基乙醚}-N，N，N′，N′-四乙酸(EGTA)和二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)及它們的鹽是其它已知的螯合劑，它們可用來替代EDTA或檸檬酸/檸檬酸鹽，或與EDTA或檸檬酸/檸檬酸鹽一起使用。前述抗凝劑可以以游離酸的狀態(tài)單獨使用，但通常以用適宜的堿中和它們的一些或全部羧基的狀態(tài)使用或與類似的鹽組合使用。通常，使用形成在水溶液中可溶的鹽的陽離子，如堿金屬離子，例如鈉、鉀或鋰是合乎期望的。也可以使用檸檬酸鋅。通常優(yōu)選為鈉鹽或鉀鹽，特別是鈉鹽，且最優(yōu)選是EDTA的鈉鹽和二鈉鹽以及檸檬酸鈉。所用的酸和/或鹽的濃度是帶來期望抗凝作用，同時帶來或輔助帶來生物學(xué)應(yīng)用的適宜pH的有效濃度。通常，本發(fā)明的組合的抗微生物和抗凝組合物的pH在約3.0至約7的范圍內(nèi)，優(yōu)選為約3.5至約6.5，且最優(yōu)選為約4.5至約6.5。組合物通常在生理pH下。如果需要，可以通過加入酸或堿，如無機酸，例如鹽酸，或優(yōu)選加入不引起酸中毒的酸，例如乙酸、蘋果酸或乳酸而調(diào)節(jié)pH。也可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的其它調(diào)節(jié)pH的方法。若優(yōu)選地在本發(fā)明的實踐中采用檸檬酸三鈉和檸檬酸，則所用檸檬酸三鈉的濃度范圍通常在約5至約50g/l的范圍內(nèi)。接著加入足量的檸檬酸，使pH達(dá)到期望的水平。盡管本發(fā)明的方法主要涉及將抗微生物/抗凝組合物引入到已固定的導(dǎo)管內(nèi)，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，將體外人工表面與這些組合物接觸可以防止其植入后在這種表面上血塊的沉積并輔助消除細(xì)菌生長的位點。因此，可以用本發(fā)明的實踐中采用的組合物預(yù)處理醫(yī)療裝置，如血液透析導(dǎo)管的表面以防止由于血塊上存在對細(xì)菌生長有利的位點而引起的堵塞，從而防止可能隨之發(fā)生的感染。首先可以用組合物處理該裝置，接著在植入后，重復(fù)如上所述的周期性沖洗。盡管本發(fā)明的方法主要和優(yōu)選地涉及保持植入的血液透析導(dǎo)管的開放和無菌，但將該方法用于其它類似的裝置，如中心靜脈導(dǎo)管、外周靜脈間導(dǎo)管(peripheralintervenouscatheter)、動脈導(dǎo)管、Swan-Ganz導(dǎo)管、臍導(dǎo)管、經(jīng)皮非隧道式(nontunneled)硅酮導(dǎo)管、套囊(cuffed)隧道式中心靜脈導(dǎo)管以及皮下中心靜脈通道，也可以獲得有益效果。以下實施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明的各種特征和方面。盡管列出這些實施例向本領(lǐng)域的技術(shù)人員表明在本發(fā)明范圍內(nèi)如何操作，但是它們不起限制本發(fā)明范圍的作用。在屠宰場中從雌豬收集血液，直接從屠宰傷口收集入容器中，然后將該容器填充至30ml水平。蓋上容器并輕輕移動使血液與溶液混合。30分鐘后檢驗容器。僅含?；橇_定的容器中的血液凝塊，但含?；橇_定和ACD-A混合物的容器中的血液沒有凝塊。因此，得出結(jié)論，檸檬酸鈉和檸檬酸抗凝劑與牛磺羅定的組合使用提供了在全血中相當(dāng)大地增強的抗凝性質(zhì)。實施例2將美國專利申請08/485,498中描述的類型的可皮下植入鈦通道體系用于該實施例中。它與末端引入右心房的兩根12French硅化橡膠導(dǎo)管相連。通道的閥門由兩個特殊的針打開，使得血流為約300ml/min。經(jīng)患者同意后，由有經(jīng)驗的腎病學(xué)家將通道植入平均年齡為68±9的10名女性患者和6名男性患者。十六例患者中的九例是糖尿病患者。被研究的患者準(zhǔn)入標(biāo)準(zhǔn)是導(dǎo)致臂上沒有可以進(jìn)行血液透析的位點的血管衰竭(vesselexhaustion)。十六例中的八例患有嚴(yán)重的充血性心力衰竭，且所有患者具有高的共同發(fā)病率(comorbidity)。九例患者在植入后馬上開始血液透析，其它患者進(jìn)行長期血液透析并從導(dǎo)管轉(zhuǎn)換為通道系統(tǒng)(四例患者通過導(dǎo)絲鉤(guidewire)交換)。沒有發(fā)生周邊手術(shù)性并發(fā)癥。優(yōu)選的血管是右頸內(nèi)靜脈，但也用頸外靜脈和鎖骨下靜脈。迄今，該裝置總共已使用了11.0個患病年(patientyears)。通道用在所有計劃的IID期(IIDsessions)(n＝1200)。為了避免裝置的管腔內(nèi)污染，在治療期之間給予抗微生物閉鎖，并在下次治療之前除去。抗微生物閉鎖水溶液包括13.3g/l?；橇_定、6.7g/l檸檬酸三鈉和約3.3g/l檸檬酸。加入檸檬酸以將pH調(diào)節(jié)在4.75至5.25之間。依靠檸檬酸和檸檬酸鈉，防止了導(dǎo)管凝塊且不必應(yīng)用肝素。在研究期間，觀察到兩種細(xì)菌血癥(bacteriaemia)(金黃色葡萄球菌(S.aureous))的發(fā)作，且在沒有損失裝置的情況下成功地治療(0.5感染/1000天)。該研究的結(jié)果見表1。實施例3對比例在四個獨立的裝置，A、B、C、D中，其中兩個在美國，兩個在歐洲，除了所使用的閉鎖是濃度在2000至10000國際單位/ml范圍內(nèi)的肝素或肝素化的鹽水外，進(jìn)行類似于以上所述實施例2的研究。在美國的研究，A和B中，還存在苯甲醇作為標(biāo)準(zhǔn)防腐劑。這些對比研究的結(jié)果見表1。1沒有感染的平均間隔；2沒有凝塊的平均間隔。實施例4在更詳細(xì)地描述實施例2的試驗的本實施例中，使用實施例2所描述的可皮下植入的肽通道體系。在1998年6月開始的預(yù)期多中心中試中，將31個通道植入19例女性患者和12例男性患者(平均年齡66，最小30，最大81)中。除了接受新裝置外，研究的目的是避免由完全無毒的混合物(含作為抗感染物質(zhì)的?；橇_定和抑制凝固用的檸檬酸/檸檬酸鈉的無肝素閉鎖溶液)所支持的感染，該混合物具有抵抗任何微生物，甚至多藥耐藥的微生物的極佳功效。在10個參與中心中，自從研究開始就沒有通道損失(3847天的植入)。盡管有高的共同發(fā)病率，但僅兩例患者經(jīng)歷與血流相關(guān)的感染(金黃色葡萄球菌(S.aureus))?？偟挠^察到的感染為0.5/1000天。全身抗生素治療是成功的。事先存在的與導(dǎo)管相關(guān)的膿毒癥在5/31例患者中發(fā)生；在使用可皮下植入的肽通道系統(tǒng)的患者中沒有發(fā)生復(fù)發(fā)。住院短且恰好在植入后使用通道(access)，甚至在由導(dǎo)管轉(zhuǎn)換為通道的患者(12/31)中的接受也是高的。在6/31例患者中，通過導(dǎo)絲鉤的變換是可能的。通常的放置技術(shù)是由三個腎病學(xué)家使用的塞爾丁格技術(shù)(Seldinger)。優(yōu)選血管是右頸內(nèi)靜脈(18/31)，但可以使用所有其它的中心靜脈。與導(dǎo)管的不利相比，通道體系容允浸浴(bathing)且非常安全。與本發(fā)明的閉鎖溶液組合，感染的危險低且使得穿刺技術(shù)類似于移植。該裝置的壽命尚待確定?？紤]到在不背離本發(fā)明的實質(zhì)的前提下可以作出許多改變和修飾，因此應(yīng)參考所附權(quán)利要求來理解本發(fā)明的保護(hù)范圍。權(quán)利要求1.一種組合物，其包含(A)至少一種分子式如下的抗微生物化合物其中R1是氫或烷基，且R2是氫、烷基或分子式如下的基團(tuán)(B)足以將所述至少一種抗微生物化合物的溶解度提高到2至5％的范圍內(nèi)的量的檸檬酸；和(C)足以將溶液的pH提高到至少5.2至5.3的范圍內(nèi)的量的氫氧化鈉，從而形成檸檬酸和檸檬酸鈉緩沖體系。2.權(quán)利要求1的組合物，其中所述至少一種抗微生物物質(zhì)是?；橇_定。3.增加水溶液中?；橇_定溶解度的方法，所述方法包括加入檸檬酸。4.權(quán)利要求3的方法，其另外包括加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液的pH并產(chǎn)生檸檬酸和檸檬酸鈉緩沖體系的步驟。全文摘要本發(fā)明涉及在醫(yī)療修復(fù)裝置中或其附近，在所述裝置植入患者內(nèi)之后，抑制或預(yù)防感染和血凝固的方法，所述方法包括給予該裝置藥物有效量的包含下列成分的組合物(A)至少一種牛磺酰胺衍生物，和(B)至少一種選自生物學(xué)可接受的酸及其生物學(xué)可接受的鹽的化合物。文檔編號A61L33/04GK1448051SQ0210877公開日2003年10月15日申請日期2002年4月1日優(yōu)先權(quán)日2002年4月1日發(fā)明者克勞斯·索德曼申請人:百奧靈克公司