專利名稱：苯并呋喃酮衍生物在制藥中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及苯并呋喃酮衍生物的用途，尤其涉及在制藥領(lǐng)域中的用途。
金佛草地上部分粉碎，用95％乙醇室溫浸提，得浸提物，分別用乙醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取上述浸提物，其中氯仿部分合并濃縮后，置硅膠柱上分離。用梯度洗脫，合并相同成分的洗脫液，濃縮，分別得白色斜方結(jié)晶(I)(britannilactone，mp.175～177℃，0.03％)和針狀結(jié)晶(II)(1-O-Acetylbritanniactone，mp.124～126℃，0.01％)。 由此我們研究了一系列化合物，該系列化合物均含有苯并呋喃酮結(jié)構(gòu)，且具有鎮(zhèn)痛活性。該類系列化合物的結(jié)構(gòu)通式如下 苯并呋喃酮衍生物結(jié)構(gòu)編號R1R2R31 CH3CH2CO CH3-CH3或＝CH22 CH3CH2CO H CH3或＝CH23 CH3CH2CO CH3COCH3或＝CH24 CH3CH2CO CH3CH2CO CH3或＝CH25 CH3CH2CO CH3CH2CH3或＝CH26 HCH3CH3或＝CH27 HH CH3或＝CH28 HCH3COCH3或＝CH29 HCH3CH2COCH3或＝CH210 HCH3CH2CH3或＝CH2
11 CH3CO CH3CH3或＝CH212 CH3CO H CH3或＝CH213 CH3CO CH3CO CH3或＝CH214 CH3CO CH3CH2CO CH3或＝CH215 CH3CO CH3CH2CH3或＝CH216 CH3CH3CH3或＝CH217 CH3H CH3或＝CH218 CH3CH3CO CH3或＝CH219 CH3CH3CH2CO CH3或＝CH220 CH3CH3CH2CH3或＝CH221 CH3CH2CH3CH3或＝CH222 CH3CH2H CH3或＝CH223 CH3CH2CH3CO CH3或＝CH224 CH3CH2CH3CH2CO CH3或＝CH225 CH3CH2R2＝CH3CH2CH3或＝CH2本發(fā)明的關(guān)鍵在于發(fā)明人通過長期大量關(guān)于苯并呋喃酮衍生物的鎮(zhèn)痛作用的實驗研究，至今未見記載或報道。本發(fā)明通過小鼠醋酸扭體實驗、熱板實驗、甩尾實驗及福爾馬林舔足實驗證明，苯并呋喃酮衍生物100mg/kg的劑量具有較強的鎮(zhèn)痛作用。苯并呋喃酮衍生物的鎮(zhèn)痛作用有以下特點①鎮(zhèn)痛作用起效快(0.5小時即有效應(yīng))，維持時間長(約3小時)；鎮(zhèn)痛期間，呈現(xiàn)雙峰，第一峰值出現(xiàn)于1小時，第二峰值出現(xiàn)于2.5小時。②鎮(zhèn)痛機制包括神經(jīng)性和炎性鎮(zhèn)痛兩種，10～50mg/kg劑量抑制炎性痛，高劑量(100mg/kg)時對炎性痛和神經(jīng)痛均可抑制。③鎮(zhèn)痛活性物質(zhì)對光不穩(wěn)定，自然光線下放置10天活性逐漸下降，20天活性全部消失。避光可保證鎮(zhèn)痛物質(zhì)長期(已觀察6個月)穩(wěn)定。
苯并呋喃酮衍生物的鎮(zhèn)痛藥理學(xué)實驗簡述如下苯并呋喃酮衍生物對各種動物疼痛模型的治療作用實驗(1)首先建立小鼠的醋酸扭體實驗?zāi)Ｐ?化學(xué)刺激所致的疼痛)。將雄性小鼠分組，每組10只，實驗前禁食12小時，飲水不限。實驗分阿司匹林組0.2g/kg、苯并呋喃酮衍生物治療組100mg/kg、太極通天液組(相當(dāng)于人用量的40倍)、對照組。以上各組均灌胃給藥，容積0.2ml/10g體重。于給藥后1小時，腹腔注射0.6％乙酸溶液0.2ml/只，以腹部內(nèi)陷、軀體扭歪、后肢伸直、臀部高起為扭體反應(yīng)陽性，觀察20分鐘內(nèi)扭體小鼠只數(shù)及扭體次數(shù)。以組間t檢驗比較各給藥組與對照組差異的顯著性。結(jié)果顯示，苯并呋喃酮衍生物灌胃給藥均有顯著的鎮(zhèn)痛作用，小鼠扭體次數(shù)顯著減少。(2)建立小鼠熱板法實驗(熱刺激所致的疼痛)。雌性小鼠，體重18-22g，實驗前禁食12小時，飲水不限。實驗開始前，將小鼠放到預(yù)先加熱到55±0.5℃的熱板測痛儀上，以小鼠舔后足為痛反應(yīng)指標(biāo)，挑選痛閾潛伏期在5-30s的小鼠用于實驗。取挑選出的小鼠，隨機分為空白對照組、苯并呋喃酮衍生物組和阿司匹林組，每組10只。苯并呋喃酮衍生物按100mg/kg給藥，阿司匹林組給藥0.2g/kg，空白對照組給予0.01％的吐溫-80溶液。以上各組均灌胃給藥，容積0.2ml/10g體重。以t檢驗比較各組給藥后不同時間痛閾值差異的顯著性。小鼠在實驗前先測定基礎(chǔ)痛閾值，灌胃給藥后分別于30min、60min、90min、120min、150min、180min，置小鼠于55±0.5℃的熱板上，測定熱痛反應(yīng)時間。將測定結(jié)果與自身的基礎(chǔ)痛閾值進(jìn)行比較。苯并呋喃酮衍生物顯著延長了熱板小鼠的痛閾值，而且出現(xiàn)了兩個峰值，一個位于1小時，另一個峰值位于2.5小時，阿司匹林無鎮(zhèn)痛作用。(3)建立小鼠甩尾法實驗。取小鼠，雌雄各半，體重18-22g。實驗前禁食12小時，自由飲水。實驗以48±0.5℃恒溫水浴為熱致痛源，將小鼠固定后，將尾尖至尾尖以上5cm的尾段放入熱水中，記錄小鼠尾部入水到甩出水面或劇烈擺動的反應(yīng)時間，挑選甩尾反應(yīng)時間在5-10秒以內(nèi)的小鼠用于試驗。取挑選出的小鼠，隨機分3組，每組10只，雌雄各半。苯并呋喃酮衍生物按100mg/kg給藥，阿司匹林組給藥0.2g/kg，空白對照組給予0.01％的吐溫-80溶液。以上各組均灌胃給藥，容積0.2ml/10g體重。苯并呋喃酮衍生物灌胃給藥后30min，60min，90min，120min，150min，180min，置鼠尾于48±0.5℃的水浴中，測定痛閾值。將測定結(jié)果與自身的基礎(chǔ)痛閾值進(jìn)行比較。以組間t檢驗比較各組給藥后不同時間痛閾值差異的顯著性。苯并呋喃酮衍生物顯著延長了小鼠的痛閾值，而且鎮(zhèn)痛作用出現(xiàn)了兩個峰值，一個位于1小時，另一個峰值位于2.5小時，阿司匹林無效。(4)福爾馬林舔足試驗。取小鼠，雌雄各半，體重25-30g，隨機分4組，每組10只。實驗前禁食12小時，飲水不限。苯并呋喃酮衍生物分成二個劑量組，100mg/kg組和200mg/kg組，阿司匹林組給藥0.2g/kg，空白對照組給予0.01％的吐溫-80溶液。以上各組均灌胃給藥，容積0.2ml/10g體重，小鼠給藥45分鐘之后，將5％的福爾馬林溶液10μL注射于動物的后足掌皮下，用記時器記錄動物0-5min和15-35min的時間內(nèi)，小鼠舔其后足注射部位的累積時間。結(jié)果顯示，苯并呋喃酮衍生物按100mg/kg、200mg/kg，阿司匹林按0.2g/kg給小鼠灌胃，給藥后45分鐘苯并呋喃酮衍生物100mg/kg抑制了第二時相的疼痛反應(yīng)；苯并呋喃酮衍生物給予200mg/kg后，第一時相和第二時相反應(yīng)均被抑制。阿司匹林僅抑制第二時相的疼痛反應(yīng)。(5)時效關(guān)系試驗。雄性小鼠，體重18-22g，隨機分為6組，每組10只。實驗前禁食12小時，飲水不限。各組小鼠按100mg/kg劑量灌胃給予苯并呋喃酮衍生物，給藥容積為0.2g/10g。各組小鼠給藥后0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0小時，腹腔注射0.6％乙酸0.2ml/只，觀察記錄20min內(nèi)的扭體次數(shù)。空白對照動物給予0.01％的吐溫80溶液。結(jié)果顯示，動物給予苯并呋喃酮衍生物后0.5小時即顯示出鎮(zhèn)痛效果，1小時時達(dá)到第一個峰值，隨后鎮(zhèn)痛效應(yīng)逐漸下降；第2.5小時后鎮(zhèn)痛作用又增強，達(dá)到第二個峰值，此時(2.5小時)的鎮(zhèn)痛作用甚至超過1小時的鎮(zhèn)痛效果。(6)量效關(guān)系實驗。采用小鼠扭體實驗法，我們觀察了苯并呋喃酮衍生物50，100，150和200mg/kg灌胃給藥后30分鐘時的鎮(zhèn)痛效果。結(jié)果表明，苯并呋喃酮衍生物50～200mg/kg均具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，并具有明顯的量效關(guān)系。(7)穩(wěn)定性實驗。包括冷藏樣品穩(wěn)定性和樣品室溫穩(wěn)定性實驗。冷藏穩(wěn)定性，即將苯并呋喃酮衍生物裝于磨口瓶中，儲藏于4℃冰箱中冷藏放置。室溫穩(wěn)定性，即將同一批制得的苯并呋喃酮衍生物分別分裝于無色磨口瓶和棕色磨口瓶中，于室溫下放置。以上樣品分別于0、3、5、10、15、30、40、50、60、90、120、150、180天取樣，按100mg/kg的給藥量配制溶液，進(jìn)行小鼠的醋酸扭體實驗。結(jié)果顯示，180天內(nèi)藥物的鎮(zhèn)痛活性不變。苯并呋喃酮衍生物在室溫下避光保存90天，藥物的鎮(zhèn)痛作用無變化；但是，室溫自然光線下放置20天后，藥物的鎮(zhèn)痛作用消失。
苯并呋喃酮衍生物對依賴性成癮反應(yīng)的實驗選雄性小鼠70只，體重18-20g，隨機分對照組、嗎啡組，苯并呋喃酮衍生物各組。嗎啡組鼠在3天內(nèi)皮下注射嗎啡9次，嗎啡劑量如下1、2、4、8、15、25、35、45、45mg/kg/次，苯并呋喃酮衍生物組小鼠灌胃給予苯并呋喃酮衍生物(3天內(nèi)9次)，劑量如下50、75、100、125、150、200、225、225mg/kg/次。對照組同法皮下注射生理鹽水。末次給藥后2小時，各組鼠腹腔注射丙烯嗎啡50mg/kg，記錄給丙烯嗎啡后10min內(nèi)小鼠跳躍反應(yīng)發(fā)生率與跳躍次數(shù)(小鼠跳躍可視為嗎啡或藥物成癮后戒斷癥狀)。結(jié)果表明；苯并呋喃酮衍生物無藥物依賴性無成癮反應(yīng)。
急性毒性試驗取小鼠20只，雌雄各半，體重18-20g。將苯并呋喃酮衍生物2500mg/kg當(dāng)日分成兩次灌胃給藥，然后正常飼養(yǎng)7天，無一死亡。解剖后觀察，未見內(nèi)臟器官有明顯病理變化。
臨床實例全部病例均系門診患者，采用病、證結(jié)合雙重診斷標(biāo)準(zhǔn)，頭痛參照國際頭痛協(xié)會(HS)于1988年制定的頭痛分類及診斷標(biāo)準(zhǔn)。(1)治療組30例，男9例，女21例，年齡17～60歲，病程1～10年。頭痛發(fā)作程度及頻率，重型5例，中型13例，輕型12例。經(jīng)顱多普勒超生檢查，雙側(cè)腦血管擴張7例，右側(cè)腦血管擴張4例，左側(cè)腦血管擴張5例，椎基底動脈供血不足6例，血管痙攣8例。(2)正天丸組30例，男11例，女19例，年齡17～60歲，病程1～10年。頭痛發(fā)作程度及頻率，重型4例，中型12例，輕型14例。經(jīng)顱多普勒超生檢查，雙側(cè)腦血管擴張7例，右側(cè)腦血管擴張5例，左側(cè)腦血管擴張4例，椎基底動脈供血不足5例，血管痙攣9例。兩組在病程、性別、年齡、病情輕重、經(jīng)顱多普勒等檢查，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，兩組具有良好的可比性。采用分組對照方法，將受試對象隨機分為治療組和對照組，每組30例，治療組口服歐亞旋覆花內(nèi)酯，每日3次，每次0.15克，對照組口服正天丸(南方制藥廠生產(chǎn)，批號980401)，每日3次，每次6克。兩組在治療前一周及治療期間禁止服用其他對血管舒縮功能有影響的藥物。7天為一療程，觀察1療程。頭痛強度按Bussone(1987)分5級0為無疼痛；1為輕度疼痛；2為中度疼痛；3為嚴(yán)重疼痛；4為劇烈疼痛。療效標(biāo)準(zhǔn)臨床痊愈，頭痛及伴隨癥狀消失；顯效，疼痛強度減輕2級，伴隨癥狀減輕、或發(fā)作次數(shù)、或疼痛持續(xù)時間減少2/3以上；有效，疼痛強度減輕1級，或發(fā)作間隔時間延長、或疼痛持續(xù)時間縮短不足2/3；無效，疼痛強度減輕不足1級，或疼痛持續(xù)時間縮短不足1/3，或疼痛加重，持續(xù)時間延長。結(jié)果見表1，兩組療效經(jīng)Ridit檢驗，u＝2.41，差異有顯著性意義(P＜0.05)表1.歐亞旋覆花內(nèi)酯與正天丸對頭痛的療效組別 例數(shù)痊愈 顯效 有效 無效 總有效率％沖劑 30 17(56.7) 9(30)3(10)1(3.3)96.7正天丸 30 9(30) 8(26.7) 9(30)4(13.3) 86.權(quán)利要求
1.下述通式為(I)化合物 其中R3表示CH3或＝CH2
2.按照權(quán)利要求1的化合物，其中R1、R2、R3分別表示編號 R1R2R31 CH3CH2COCH3-CH3或＝CH22 CH3CH2COHCH3或＝CH23 CH3CH2COCH3CO CH3或＝CH24 CH3CH2COCH3CH2CO CH3或＝CH25 CH3CH2COCH3CH2CH3或＝CH26 H CH3CH3或＝CH27 H HCH3或＝CH28 H CH3CO CH3或＝CH29 H CH3CH2CO CH3或＝CH210 H CH3CH2CH3或＝CH211 CH3COCH3CH3或＝CH212 CH3COHCH3或＝CH213 CH3COCH3CO CH3或＝CH214 CH3COCH3CH2CO CH3或＝CH215 CH3COCH3CH2CH3或＝CH216 CH3CH3CH3或＝CH217 CH3HCH3或＝CH218 CH3CH3CO CH3或＝CH219 CH3CH3CH2CO CH3或＝CH220 CH3CH3CH2CH3或＝CH221 CH3CH2CH3CH3或＝CH2編號 R1R2R322 CH3CH2H CH3或＝CH223 CH3CH2CH3COCH3或＝CH224 CH3CH2CH3CH2COCH3或＝CH225 CH3CH2R2＝CH3CH2CH3或＝CH2
3.權(quán)利要求1或2中任意一項的化合物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了苯并呋喃酮衍生物的新用途，即在制藥中的新應(yīng)用。實際上，本發(fā)明公開了苯并呋喃酮衍生物作為鎮(zhèn)痛劑的應(yīng)用。動物試驗表明，100～500mg/kg的劑量該化合物能抑制化學(xué)刺激與熱刺激所致的疼痛，進(jìn)一步的藥理學(xué)試驗證實可顯著抑制炎性疼痛，較高劑量范圍既能抑制炎性疼痛，又能抑制神經(jīng)性疼痛。臨床試用頭痛病人50例，有效率達(dá)99％。將母體化合物進(jìn)行修飾又獲得50個衍生物。對上述的50個化合物進(jìn)行了疼痛模型的藥理學(xué)試驗，均具有良好的鎮(zhèn)痛作用。
文檔編號A61P25/04GK1445221SQ0211798
公開日2003年10月1日 申請日期2002年5月28日 優(yōu)先權(quán)日2002年5月28日
發(fā)明者張嫡群, 任雷鳴, 付焱, 袁志芳, 王志云, 張?zhí)m桐 申請人:河北醫(yī)科大學(xué)